লেপ্টোস্পাইরোসিস কিডনি রোগে মাইক্রো যাচ্ছে Ⅱ

4. লেপ্টোস্পাইরা এসপিপি-তে অনাক্রম্যতা প্রতিক্রিয়া হোস্ট।

লেপ্টোস্পাইরার প্রধান পথ হল রক্ত, টিস্যু, প্রস্রাব বা দূষিত পানির মাধ্যমে শ্লেষ্মা ঝিল্লি বা খোলা ত্বকে সরাসরি অনুপ্রবেশ, যা পুরো সিস্টেমিক সঞ্চালন জুড়ে ছড়িয়ে পড়ে এবং বিভিন্ন অঙ্গে ছড়িয়ে পড়ে, যেমনযকৃত, ফুসফুস, এবং প্রক্সিমাল টিউবিউলকিডনিতে নেফ্রন, যেখানে এটি সংখ্যাবৃদ্ধি করতে পারে এবং এক মাসের জন্য বেঁচে থাকতে পারে [51]। সংক্রমণের প্রাথমিক পর্যায়ে,সহজাত ইমিউন প্রতিক্রিয়ালেপ্টোস্পাইরোসিসে প্রতিরক্ষার প্রথম লাইন হিসাবে একটি মৌলিক ভূমিকা পালন করে, এর প্রতিক্রিয়াকে প্রভাবিত করেপ্যাটার্ন স্বীকৃতি রিসেপ্টর, ম্যাক্রোফেজ ফ্যাগোসাইটোসিস, বহির্মুখী আবেশননিউট্রোফিল জমে, এবংপরিপূরক সিস্টেমের হস্তক্ষেপ [52].

দ্যইমিউন প্রতিক্রিয়ামানুষের মধ্যে একটি অপরিহার্য ভূমিকা পালন করেক্লিনিকাল লক্ষণগুলির বিকাশ, যেমন কিছু প্যাথোজেনিক স্ট্রেনের ভাইরাসজনিত কারণগুলি। বেশিরভাগ মানুষের লেপ্টোস্পাইরোসিস লক্ষণবিহীন বা হালকা, এবং মাত্র 10% ক্ষেত্রে মাল্টিঅর্গান ব্যর্থতা এবং মৃত্যুর হার বৃদ্ধির সাথে গুরুতর আকার ধারণ করেসাইটোকাইন ঝড়এবং একটি ইমিউনো-প্যারালাইসিস অবস্থা। প্যাথোজেনিক প্রজাতি ব্যাকটেরেমিয়া পর্যায়ে একটি হাস্যকর প্রতিক্রিয়া উদ্দীপিত করে, যদিও পরবর্তী আচরণইমিউন প্রতিক্রিয়াঅস্পষ্ট লেপ্টোস্পাইরোসিসের একাধিক ক্লিনিকাল প্রকাশ সহ রোগীদের গবেষণায়, ক্লিনিকাল ছবির তীব্রতা বিভিন্ন সিরাম সাইটোকাইনের স্তরের সাথে যুক্ত করা হয়েছে, যেমন TNF-, IL-10, এবং IL-6 [53], কিন্তু এই উপসংহারটি বিতর্কিত রয়ে গেছে [54]। এই অবস্থাগুলি সাধারণভাবে রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা এবং সংক্রমণের সময় ঘটে যাওয়া জৈবিক ঘটনাগুলি বোঝার আগ্রহ বাড়িয়েছে।

CISTANCHE কাজ করতে কতক্ষণ সময় নেয়?

4.1। লেপ্টোস্পাইরা এবং পরিপূরক সিস্টেম

এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্সের বিরুদ্ধে লেপ্টোস্পাইরাল প্রোটিজেসের প্রোটিওলাইটিক কার্যকলাপ সংক্রমণকে সংবহন প্রবাহে প্রবেশ করতে দেয়। সংবহনতন্ত্রের পরিপূরক ব্যবস্থা হল প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পিরার সহজাত ইমিউন প্রতিক্রিয়ার অন্যতম প্রধান প্রক্রিয়া। যাইহোক, লেপ্টোস্পিরা পরিপূরক সিস্টেমের আক্রমণ থেকে রক্ষা পাওয়ার কৌশল তৈরি করেছে প্রোটিনকে অণুর পরিপূরক এবং প্রোটিস তৈরি করে, যেমন থার্মোলাইসিন, একটি থার্মোস্টেবল নিউট্রাল মেটালোপ্রোটিনেজ এনজাইম যা C3 প্রোটিন চেইনকে প্রভাবিত করে। প্যাথোজেনিক স্ট্রেন বাইন্ড ফ্যাক্টর H (FH), কমপ্লিমেন্ট ফ্যাক্টর H-সম্পর্কিত প্রোটিন 1 (FHR-1), ফ্যাক্টর-H-এর মতো প্রোটিন 1 (FHL-1), এবং C4b বাইন্ডিং প্রোটিন (C4BP), সমস্ত যার মধ্যে পরিপূরক সিস্টেম [55] বাধা দেওয়ার জন্য দায়ী। হোস্ট পরিপূরক নিয়ন্ত্রক, হোস্ট প্রোটিজ এবং ব্যাকটেরিয়া প্রোটিজের হস্তক্ষেপের মাধ্যমে প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পাইরা [55,56] এর পরিপূরক এড়ানোর জন্য তিনটি প্রধান কৌশল রয়েছে। পরিপূরক নিয়ন্ত্রকদের জন্য, লেপ্টোস্পিরা ফ্যাক্টর H (FH; বিকল্প পরিপূরক পথের একটি নিয়ন্ত্রক) এবং C4 বাইন্ডিং প্রোটিন (C4BP; ক্লাসিক্যাল এবং লেকটিন পরিপূরক পথের একটি নিয়ন্ত্রক) ব্যবহার করে C3 কনভার্টেসের ক্ষয়কে ত্বরান্বিত করতে এবং ফ্যাক্টর I-এর জন্য কোফ্যাক্টর হিসাবে কাজ করে। C3b এবং C4b [57,58] এর বিভাজনের জন্য। লেপ্টোস্পাইরাল প্রোটিন (LcpA), একসাথে ভিট্রোনেক্টিন (Vn; একটি টার্মিনাল পাথওয়ে রেগুলেটর) C9 কে আবদ্ধ করে এবং এর পলিমারাইজেশনকে বাধা দেয় [59], এইভাবে সম্ভাব্যভাবে মেমব্রেন-অ্যাক্টিভেটিং কমপ্লেক্স (MAC) গঠন [60] ব্লক করে। অতিরিক্তভাবে, প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পিরা বেশ কিছু হোস্ট প্রোটিজকে আবদ্ধ করে, যেমন ইউরোকিনেস-টাইপ প্লাজমিনোজেন অ্যাক্টিভেটর (ইউপিএ), যা সক্রিয় প্লাজমিন [৬১] (একটি সেরিন প্রোটেস) লেপ্টোস্পিরা পৃষ্ঠে C3b, C4b এবং C5 হজমের জন্য প্ররোচিত করে [62]। তদুপরি, মেটালোপ্রোটিজ এবং থার্মোলাইসিন, অন্তঃসত্ত্বা লেপ্টোস্পাইরা প্রোটিজ, বেশ কয়েকটি পরিপূরক প্রোটিন (C2, C3, C4, এবং ফ্যাক্টর B) ছিঁড়ে এবং নিষ্ক্রিয় করতে পারে [60]। হোস্ট এবং প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পিরা থেকে পরিপূরক নিয়ন্ত্রকগুলির সংমিশ্রণ হোস্টের লক্ষ্য অঙ্গগুলিতে ব্যাকটেরিয়া উপনিবেশকে সহজতর করে [63]।

4.2। লেপ্টোস্পাইরা এবং নিউট্রোফিল

সংক্রমণের সময়, লেপ্টোস্পাইরার প্যাথোজেনিক প্রজাতি নিউট্রোফিলের শক্তিশালী সক্রিয়তা এবং প্রদাহজনিত প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করে। নিউট্রোফিলগুলি অণুজীব নিয়ন্ত্রণের জন্য গুরুত্বপূর্ণ, তবে তারা হোস্টের টিস্যুর ক্ষতিতেও অবদান রাখে। এটা প্রমাণিত হয়েছে যে রক্ত ​​সঞ্চালনে কম নিউট্রোফিল কার্যকলাপের কারণে এক্সট্রা সেলুলার নিউট্রোফিল জমা হওয়ার মাত্রা লেপ্টোস্পাইরামিয়া বৃদ্ধি করে, যা ইঙ্গিত করে যে নিউট্রোফিল নিয়োগের ইন্ট্রাভাসকুলার গঠন প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পাইরার প্রাথমিক বিস্তার রোধে গুরুত্বপূর্ণ হতে পারে [64]।

4.3। লেপ্টোস্পিরা এবং ম্যাক্রোফেজ

লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের প্রাথমিক পর্যায়ে, ম্যাক্রোফেজগুলি স্পিরোচেট নির্মূলে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। একটি দক্ষ সাইটোকাইন প্রতিক্রিয়া সহ এই প্রভাবক প্রক্রিয়াটি ফ্যাগোসাইটিক নিয়ন্ত্রণ এবং সংক্রমণের বিস্তারের সাথে সম্পর্কিত, যদিও লেপ্টোস্পিরা এসপিপি। Fas/FasL-caspase-8/-3 পথের মাধ্যমে ম্যাক্রোফেজগুলিতে অ্যাপোপটোসিস প্ররোচিত করতে এবং সংক্রামিতদের মধ্যে মাইটোকন্ড্রিয়াল ফ্যাক্টর-ইনডিউসিং অ্যাপোপটোসিস এবং এন্ডোনিউক্লিজ মুক্তির কারণে হোস্টে তাদের বেঁচে থাকা এবং বিস্তারকে সহজতর করতে দেখানো হয়েছে। ম্যাক্রোফেজ [65]। এপিজেনেটিক প্রক্রিয়া যেমন RNA দ্বারা পোস্ট-ট্রান্সক্রিপশনাল রেগুলেশন নির্ধারণের জন্য লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমিত ম্যাক্রোফেজের মাইক্রো-ট্রান্সক্রিপ্টোমে সাম্প্রতিক গবেষণা পরিচালিত হয়েছে। লেপ্টোস্পাইরা দ্বারা সংক্রামিত ম্যাক্রোফেজগুলি দেখিয়েছে যে মাইক্রোআরএনএ (miRNAs) স্পিরোচেটের সংক্রমণের দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়, এটি প্রমাণ করে যে এই নিয়ন্ত্রণটি লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের এই ইমিউন সিস্টেম কোষগুলির প্রতিক্রিয়াতে অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ [66]। মানুষের ম্যাক্রোফেজে, প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির মধ্যস্থতা এবং লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের দ্বারা উত্পন্ন লাইসোসোমাল ক্যাথেপসিন বি দ্বারা প্রদাহের সক্রিয়করণে NLRP3 এবং IL-18 এর বিশিষ্ট মাত্রা রয়েছে, যা IL-1 উৎপাদনের পক্ষে এবং উচ্চ মাত্রার দিকে নিয়ে যায় ফ্যাগোসাইটোসিসের সম্ভাবনা এবং কিছু সাইটোকাইনের দ্রুত মডেলিং লেপ্টোস্পাইরোসিস প্রতিরোধের সাথে সম্পর্কযুক্ত [67]।

4.4। লেপ্টোস্পিরার হাস্যকর প্রতিক্রিয়া

লেপ্টোস্পাইরার বিরুদ্ধে নির্দিষ্ট হাস্যকর প্রতিক্রিয়া লক্ষণ শুরু হওয়ার তৃতীয় দিনে IgM এবং IgG অ্যান্টিবডি তৈরির দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। উপরন্তু, IgA উৎপাদন প্রথম দিন থেকে নবম-পরবর্তী মাস পর্যন্ত রিপোর্ট করা হয়েছে; প্রকৃতপক্ষে, লেপ্টোস্পাইরোসিসের প্রাথমিক নির্ণয়ের ক্ষেত্রে আইজিএম বৃদ্ধি একটি বিকল্প পরিমাপ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছে [৬৮]। লেপ্টোস্পাইরোসিসে মানুষের মধ্যে হাস্যকর প্রতিক্রিয়ার প্রভাব প্রাকৃতিক সংক্রমণের পরে সেরোলজিক্যাল রোগ নির্ণয় করতে দেয় [৬৯]। লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণে হাস্যকর প্রতিক্রিয়ার সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ দিক হতে পারে প্রতিরক্ষামূলক অ্যান্টিবডি গঠন। লেপ্টোস্পাইরোসিসের জন্য বর্তমানে উপলব্ধ ভ্যাকসিনগুলি সম্পূর্ণ কোষের প্রস্তুতির সমন্বয়ে গঠিত এবং এর সীমাবদ্ধতা রয়েছে, যেমন কম কার্যকারিতা, একাধিক পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া, কম ইমিউন মেমরি তৈরি এবং সেরোভার পার্থক্যগুলির জন্য ক্রস-সুরক্ষার অভাব। এইভাবে, রোগ নিয়ন্ত্রণের জন্য নতুন ভ্যাকসিনের বিকাশ প্রয়োজন, এবং বর্তমানে জেনেটিক ইমিউনাইজেশন [70] থেকে ভ্যাকসিন তৈরির জন্য গবেষণা পরিচালিত হচ্ছে। লেপ্টোস্পাইরার ওএমপিগুলিকে বি লিম্ফোসাইটের জন্য আরও ভাল ইমিউনোজেনিসিটি সহ একটি অ্যান্টিজেন হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছে, যার মধ্যে গঠনমূলক এপিটোপ OmpL187- 98, OmpL1173-191, OmpL1297-320, LipL4130-48, LipL4130-48 {9}}, এবং LipL41263-282 [71]। এই এপিটোপগুলি সর্বজনীন ভ্যাকসিনের বিকাশের জন্য প্রতিশ্রুতিবদ্ধ প্রার্থী।

4.5। লেপ্টোস্পিরার অভিযোজিত ইমিউন প্রতিক্রিয়া: টি-সেল এবং সাইটোকাইনস

লেপ্টোস্পাইরার প্যাথোজেনিক প্রজাতি টি এবং বি লিম্ফোসাইট দ্বারা মধ্যস্থতা করে একটি ইমিউন প্রতিক্রিয়া প্ররোচিত করে, যার সাথে সাইটোকাইনের অভিব্যক্তি হয় যা মাধ্যাকর্ষণ চার্টের সাথে যুক্ত হতে পারে। লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের সময় টি কোষের সক্রিয়তা প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া শুরু করে, প্রধানত সাইটোকাইন উৎপাদনের মাধ্যমে। সংক্রমণের প্রাথমিক নির্মূলের ক্ষেত্রে এটি অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ, কিন্তু প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির অনিয়ন্ত্রিত উত্পাদনের ফলে সাইটোকাইনের অতিরিক্ত উত্পাদনও হতে পারে যার পরে ইমিউনো-প্যারালাইসিস হয়, যা সেপসিস এবং মাল্টিঅর্গান ব্যর্থতার কারণ হতে পারে। টি লিম্ফোসাইটগুলি IL-1, IL-6, IL-12, ইন্টারফেরন (IFN)- এবং TNF- তৈরি করে, যা সংক্রমণের জায়গায় লিউকোসাইট নিয়োগের জন্য কেমো-আকর্ষণকারী হিসাবে কাজ করে। মজার বিষয় হল, প্রাক্তন ভিভোতে, পেরিফেরাল ব্লাড মনোনিউক্লিয়ার সেল (PBMCs) এর সংস্কৃতিতে নিরপেক্ষ δ T কোষগুলি IL-17 এবং IFN [৭২] উভয়ই উৎপাদনের সাথে লেপ্টোস্পাইরার অ্যান্টিজেন দ্বারা উদ্দীপিত হয়। অধিকন্তু, যেখানে লেপ্টোস্পাইরোসিস-সংক্রমিত বন্য ধরণের ইঁদুরগুলি অসংক্রমিত ইঁদুরের তুলনায় IL-4, IL-10, এবং IL-13 সহ প্রচুর পরিমাণে সাইটোকাইনের উচ্চ মাত্রা প্রদর্শন করে, লেপ্টোস্পাইরা-প্ররোচিত মুরিন ক্রনিক। নেফ্রাইটিস (ড্যাফ1-/- ইঁদুর) মসৃণ পেশী অ্যাক্টিন, IL-10, IL-13-এর উচ্চতর অভিব্যক্তি দেখায়, কিন্তু IL-12 এবং IL-এর কোনও পার্থক্য নেই{{21} } স্তর [73]। যেমন, Daf1 এবং IL-17 CKD অগ্রগতিতে একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রতিরক্ষামূলক ভূমিকা পালন করতে পারে যেমন লেপ্টোস্পাইরা-প্ররোচিত মুরিন CKD-এর সাথে রেনাল ফাইব্রোসিস [72,73] এর মধ্যে লিঙ্ক। যাইহোক, রোগের অগ্রগতিতে নির্বাচিত সাইটোকাইন প্রতিক্রিয়ার অনুমান এখনও অবধি মানুষের লেপ্টোস্পাইরোসিসে অনিশ্চিত। গুরুতর লেপ্টোস্পাইরোসিস এবং পালমোনারি জড়িত রোগীদের ক্ষেত্রে, হালকা লেপ্টোস্পাইরোসিস রোগীদের তুলনায় IL-6, CXCL8, এবং IL-10 এর উচ্চ মাত্রা পাওয়া গেছে [53]। লেপ্টোস্পাইরোসিস রোগীদের মধ্যে সাইটোকাইনের এই উচ্চ ঘনত্ব গুরুতর লেপ্টোস্পাইরোসিসের বিকাশে তাদের মূল ভূমিকা তুলে ধরে।

গুরুতর সংক্রমণের রোগীদের ক্ষেত্রে, CD4+ টি লিম্ফোসাইট এবং প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি প্রোফাইল এবং IL-2 এবং IFN--এর প্রযোজক পাওয়া যায় যখন CD4+ CD25 উচ্চ উৎপাদনকারী IL-10 প্রায় অনুপস্থিত। টি লিম্ফোসাইট-মিডিয়াটেড ইমিউন রেসপন্সের নিয়ন্ত্রণ লেপ্টোস্পাইরার প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া দ্বারা উত্পন্ন টিস্যুর ক্ষতি প্রতিরোধ করতে দেখা যায় না। গুরুতর লেপ্টোস্পাইরোসিসে আক্রান্ত মানুষের CD4+ টি লিম্ফোসাইটগুলিতে, TNF- এবং অন্যান্য প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির উত্পাদন রোগের হালকা ফর্মের তুলনায় বেশি, যা নির্দেশ করে যে এই সাইটোকাইনগুলি চিহ্নিতকারী হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। সংক্রমণের ইমিউনোলজিকাল পর্যায়ে তীব্রতা [74]। IL-10 এর উৎপাদন লেপ্টোস্পাইরোসিসে মানুষের মৃত্যুর ঝুঁকির সাথে যুক্ত হয়েছে; যাইহোক, উদ্ভাসিত এবং উপসর্গহীন মানুষের উপর পরিচালিত একটি সমীক্ষা এই সাইটোকাইনের উত্পাদনকে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া এবং বেঁচে থাকার নিয়ন্ত্রণের সাথে যুক্ত করে [74]। লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের সময়, প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারী এবং কিছু লিউকোসাইট কোষের ক্রিয়া, যেমন টি লিম্ফোসাইট, প্রতিরোধী ব্যক্তিদের মধ্যে দ্রুত নিয়ন্ত্রিত হয়, তার বিপরীতে লেপ্টোস্পাইরোসিসের গুরুতর আকারে আক্রান্ত ব্যক্তিদের মধ্যে যা ঘটে [75]।

সংক্ষেপে বলতে গেলে, লেপ্টোস্পাইরোসিস রোগীদের ক্লিনিকাল আচরণের কারণে লেপ্টোস্পাইরা সংক্রমণের প্রতিরোধ ক্ষমতা সম্পূর্ণরূপে বোঝা যায় না, যারা ব্যাকটেরিয়াল জিনোমের বিভিন্ন ভাইরাসজনিত কারণের সাথে যোগাযোগ করে, যা লেপ্টোস্পাইরাকে একটি কঠিন প্যাথোজেনিক ক্ষমতা দেয়।

5. ক্লিনিকাল প্রকাশ

লেপ্টোস্পাইরোসিসের ক্লিনিকাল প্রকাশগুলি বৈচিত্র্যময়, হালকা, অ-নির্দিষ্ট উপসর্গ, যেমন ফ্লু-এর মতো উপসর্গ (জ্বর, মায়ালজিয়া এবং মাথাব্যথা) থেকে শুরু করে শেষ পর্যায়ের অঙ্গের আঘাতের সাথে গুরুতর লক্ষণ পর্যন্ত (যেমন, AKI, তীব্র হেপাটিক ব্যর্থতা) , এবং ব্লিডিং ডায়াথেসিস, ওয়েইলস সিনড্রোম নামেও পরিচিত), পালমোনারি হেমোরেজ থেকে তীব্র হিমোপটাইসিস, অ্যাসেপটিক মেনিনগোয়েনসেফালাইটিস থেকে তীব্র বিভ্রান্তি এবং তীব্র বা সাবএকিউট মায়োকার্ডাইটিস থেকে তীব্র হৃদযন্ত্রের ব্যর্থতা [7]। তদনুসারে, সন্দেহজনক লেপ্টোস্পাইরোসিস সংক্রমণের তিনটি সূচকের মধ্যে রয়েছে (i)তীব্র জ্বরজনিত অসুস্থতা, (ii) জন্ডিস, এবং (iii)তীব্র কিডনি আঘাত[১২]। লেপ্টোস্পাইরোসিসের একটি গুরুতর রূপের পূর্বাভাসকারী হল শুরুতে গুরুতর মায়ালজিয়া, গুরুতর রক্তপাতের প্রবণতা এবং চিহ্নিত জন্ডিস। মজার ব্যাপার হল, উভয়েরই উপস্থিতি প্রাক-বিদ্যমানদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ(ছোট কিডনির আকার) বা বর্ধিত, অ্যানুরিয়া সহ ঘনবসতিপূর্ণ কিডনি সবচেয়ে খারাপ ফলাফলের সাথে সম্পর্কিত [১২]। সুতরাং, লেপ্টোস্পাইরোসিস-সম্পর্কিত কিডনি রোগের রোগীদের অবিলম্বে চিকিত্সা করা উচিত।

6. রোগ নির্ণয়

6.1। ক্লিনিকাল নির্ণয়ের

লেপ্টোস্পাইরোসিস রোগ নির্ণয় করা হয় এক্সপোজারের ইতিহাস, ঝুঁকির কারণ এবং ক্লিনিকাল প্রকাশের উপর ভিত্তি করে। সন্দেহের একটি উচ্চ সূচক পরবর্তী অঙ্গের ক্ষতিকে এড়াতে পারে। যাইহোক, লেপ্টোস্পাইরোসিসের উপসর্গগুলি প্রায়ই তীব্র জ্বর সিনড্রোমের অন্যান্য কারণগুলির জন্য ভুল হয়, যেমন ডেঙ্গু সংক্রমণ, ম্যালেরিয়া, হেপাটাইটিস এবং সক্রিয় অটোইমিউন রোগ। লেপ্টোস্পাইরোসিসের প্যাথগনোমোনিক লক্ষণগুলির অভাবের অর্থ হল যে রোগ নির্ণয়টি অস্থায়ীভাবে একটি স্থানীয় অঞ্চলের রোগীদের জ্বর এবং মায়ালজিয়ার মূল্যায়নের উপর ভিত্তি করে। এই কারণে, লেপ্টোস্পাইরোসিস পরীক্ষাগার নির্ণয় অপরিহার্য।

6.2। ল্যাবরেটরি রোগ নির্ণয়

লেপ্টোস্পাইরোসিস পরীক্ষাগারে নির্ণয় করা কঠিন, বিশেষ করে তীব্র পর্যায়ে। এটি সরাসরি শারীরিক তরল বা টিস্যুতে স্পিরোচেট বা তাদের উপাদান সনাক্ত করে, সংস্কৃতিতে লেপ্টোস্পায়ারকে বিচ্ছিন্ন করে, বা বিভিন্ন ক্লিনিকাল পর্যায় জুড়ে নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি সনাক্ত করে সঞ্চালিত হতে পারে। ম্যালেরিয়া, ডেঙ্গু জ্বর, রিকেটসিয়া, ইনফ্লুয়েঞ্জা, হেপাটাইটিস এবং হলুদ জ্বরের মতো অসুস্থতা থেকে লেপ্টোস্পাইরোসিসকে আলাদা করা কঠিন কারণ এর অস্পষ্ট ক্লিনিকাল চেহারা। ফলস্বরূপ, রোগ নির্ণয় নিশ্চিত করতে ল্যাব পরীক্ষা প্রয়োজন। লেপ্টোস্পায়ারের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডির সনাক্তকরণ, লেপ্টোস্পায়ার নিজেরাই বা তাদের ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড এই পরীক্ষার (ডিএনএ) ভিত্তি। বর্তমান পরীক্ষাগার নির্ণয়ের মধ্যে রয়েছে সরাসরি শনাক্তকরণ (নমুনায় লেপ্টোস্পাইরা স্পিরোচেট বা ডিএনএ সনাক্তকরণ বা নমুনা থেকে জীবের বিচ্ছিন্নতা) এবং পরোক্ষ সনাক্তকরণ (লেপ্টোস্পাইরাল সংক্রমণ সনাক্তকরণের জন্য সেরোলজিক্যাল ডায়াগনসিস বা সেরোলজি, যা বিভিন্ন রোগের বিরুদ্ধে নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণের উপর ভিত্তি করে। লেপ্টোস্পাইরাল অ্যান্টিজেন) (সারণী 1)।

6.2.1। সরাসরি মাইক্রোস্কোপিক পরীক্ষা, সংস্কৃতি এবং অ্যান্টিজেন সনাক্তকরণ

প্রচলিত ডার্কফিল্ড মাইক্রোস্কোপ (DFM) এর অধীনে লেপ্টোস্পায়ারগুলি পাতলা, উজ্জ্বল, সক্রিয়ভাবে গতিশীল সর্পিল যা বৈশিষ্ট্যগতভাবে দ্রুত স্পিনিং (টুইচিং মোটিলিটি) এবং আনুমানিক 10টি লেপ্টোস্পায়ার/mL প্রতি ক্ষেত্র প্রতি একটি কোষ সনাক্ত করার জন্য প্রয়োজনীয়। সংক্রমণের সময়কালের এক সপ্তাহ বেশি হলে, প্রায় 10% ডিএফএমের ফলন (100 থেকে 90% পর্যন্ত) মারা যায়। সংবেদনশীলতা বাড়ানোর জন্য, বেশ কয়েকটি বিশেষ স্টেনিং পদ্ধতি; ওয়ার্থিন- স্টারি সিলভার স্টেনিং [76] এবং ইমিউনোস্টেইনিং (ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি, ইমিউনোফ্লোরেসেন্স, ইমিউনোম্যাগনেটিক অ্যান্টিজেন ক্যাপচার, এবং ইমিউনোপেরক্সিডেস স্টেনিং [77]) যার জন্য সেরোভার নির্দিষ্ট প্রাথমিক অ্যান্টিবডি প্রয়োজন (বিচ্ছিন্নতা বা সংমিশ্রণে)।

সারণী 1. লেপ্টোস্পাইরোসিস নির্ণয়ের জন্য পরীক্ষাগার পরীক্ষা।

LAMP, লুপ-মিডিয়াটেড আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশন; পিসিআর, পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া; NGS, পরবর্তী প্রজন্মের সিকোয়েন্স; IHA, পরোক্ষ হেমাগ্লুটিনেশন; ELISA, এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস; আইজিএম, ইমিউনোগ্লোবুলিন এম; MAT, ম্যাক্রোস্কোপিক অ্যাগ্লুটিনেশন পরীক্ষা; MCAT, মাইক্রোক্যাপসুল অ্যাগ্লুটিনেশন পরীক্ষা; ডিএনএ, ডিঅক্সিরাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড; DFM, অন্ধকার-ক্ষেত্র মাইক্রোস্কোপি

সমান্তরালভাবে, রক্ত, প্রস্রাব, সেরিব্রোস্পাইনাল ফ্লুইড এবং বায়োপসি টিস্যু থেকে লেপ্টোস্পাইরা কালচার করা সম্ভব অসুস্থতার লক্ষণ (লেপ্টোস্পাইরোসিস স্টেজ) শুরু হওয়ার প্রথম কয়েক দিন থেকে 10 দিনের মধ্যে। যেহেতু তারা ধীর গতিতে বর্ধনশীল (6-8 ঘন্টা দ্বিগুণ সময়), দ্রুত এবং দূষণের প্রবণ, সংস্কৃতির নমুনাগুলিকে নেতিবাচক হিসাবে বাতিল করার আগে কমপক্ষে 3-4 মাস ধরে রাখতে হবে) মাত্র 23% সংবেদনশীলতা সহ তবে এটি প্রয়োজনীয় ড্রাগ সংবেদনশীলতা পরীক্ষার জন্য [6]। যেমন, EMJH (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris) মিডিয়া (ওলিক অ্যালবুমিন কমপ্লেক্স) বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (ভগ্নাংশ V), টুইন 80, অ্যামোনিয়াম ক্লোরাইড থায়ামিন, মনোপটাসিয়াম ফসফেট, ডিসোডিয়াম ফসফেট এবং বিভিন্ন পুষ্টি উপাদান নিয়ে গঠিত। সাধারণত ব্যবহৃত হয়, যখন আরও বিশেষায়িত T80/40/LH মিডিয়া (পলিসোরবেট 40, ল্যাকটালবুমিন হাইড্রোলাইসেট, সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ, এবং খরগোশের সিরাম), কিছু সেরোভারের জন্য প্রয়োজন হয় [79]। দ্রুতগতির প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পায়ারের বৃহৎ এবং বৈচিত্র্যময় পরিসরের প্রাথমিক বিচ্ছিন্নতার জন্য, হর্নসবি-আল্ট-ন্যালি (HAN), একটি ভাল মাধ্যম বলে মনে হয় [80]।

ইমিউনোপেরক্সিডেস, ইমিউনোফ্লোরোসেন্স, বা একটি ইমিউনোম্যাগনেটিক অ্যান্টিজেন-ক্যাপচার সিস্টেম দ্বারা লেপ্টোস্পাইরাল অ্যান্টিজেন সনাক্তকরণ কম ব্যাকটেরিয়া বোঝা সহ নমুনাগুলির জন্য তৈরি করা হয়েছে বা অন্ধকার-ক্ষেত্র মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করা যায় না তবে প্রাথমিক অ্যান্টিবডির সীমাবদ্ধতার কারণে নিয়মিতভাবে সঞ্চালিত হয় না [77]। বিপরীতে, নতুন ডিএনএ পরিবর্ধনের সাথে নিউক্লিক অ্যাসিড স্বীকৃতি; পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন (পিসিআর) (অর্থাৎ, নেস্টেড-পিসিআর, পরিমাণগত পিসিআর [কিউপিসিআর]), লুপ-মিডিয়াটেড আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশন (এলএএমপি), এবং পরবর্তী প্রজন্মের সিকোয়েন্সিং (এনজিএস) প্রাথমিক এবং সঠিক পরীক্ষাগার নির্ণয়ের জন্য মূল্যবান, বিশেষ করে জৈবিক মিডিয়া ইনোকুলেশন এবং ডিএনএ হাইব্রিডাইজেশন (ডিএনএ প্রোব) ব্যবহার করে লেপ্টোস্পিরা বিচ্ছিন্নতা [81,82]। বিভিন্ন ধরনের লেপ্টোস্পাইরাল টার্গেট (যেমন 16S রাইবোসোমাল আরএনএ) বা ডিএনএ রোগ নির্ণয়ের জন্য প্রশস্ত করা যেতে পারে [৮৩] এবং রিয়েল-টাইম পিসিআর (আরটি-পিসিআর) স্ট্যান্ডার্ড পিসিআর [৮৪] থেকে বেশি সংবেদনশীল এবং নির্দিষ্ট। কারণ কিছু আরটি-পিসিআর প্রাইমার একটি অ-নির্দিষ্ট সাইটে আবদ্ধ হতে পারে, যা মিথ্যা ইতিবাচক ফলাফলের দিকে পরিচালিত করে, সর্বাধিক সাম্প্রতিক রিয়েল-টাইম মাল্টিপ্লেক্স পিসিআর অ্যাসে দুটি সেট প্রাইমার ব্যবহার করে তৈরি করা হয়েছে [85]। নেস্টেড পিসিআর প্রাইমারের অতিরিক্ত সেট সহ আরও নির্দিষ্ট এবং সংবেদনশীল ডিএনএ সাইটগুলি সনাক্ত করতে সহায়তা করে [86,87]। যাইহোক, লেপ্টোস্পাইরোসিস নির্ণয়ের বর্তমান প্রবণতা হল সেরোলজিক্যাল এবং আণবিক উভয় কৌশলের ব্যবহার, যেমন পিসিআর এবং এলিসা (গোল্ড স্ট্যান্ডার্ড সেরোলজিক্যাল ম্যাট থেকে সহজ), সম্পদ-সীমিত দেশগুলির জন্য [৮৮,৮৯]। উপরন্তু, একটি 16S rRNA জিন (rrs) সনাক্ত করার জন্য LAMP কৌশল [90], প্রস্রাবের প্যাথোজেনিক লেপ্টোস্পায়ার সনাক্ত করার জন্য একটি সাশ্রয়ী, দ্রুত এবং উচ্চ-ফলন। বর্তমানে, এনজিএস হল শরীরের তরল (রক্ত ও প্রস্রাব) [৯১] এর মূল জিনোম বিশ্লেষণের সবচেয়ে সুনির্দিষ্টভাবে ভিত্তিক সংস্কৃতি-স্বাধীন পদ্ধতি এবং লেপ্টোস্পাইরোসিস পরীক্ষার ভবিষ্যত দিক হবে লেপ্টোস্পাইয়ারের আণবিক শ্রেণীবিভাগের দিকে অগ্রসর হওয়া, যা সীমাবদ্ধতা অতিক্রম করে। ক্লিনিকাল নমুনা থেকে লেপ্টোস্পায়ারের সংস্কৃতি বিচ্ছিন্নকরণ। তাই, লেপ্টোস্পাইরোসিসের ক্লিনিকাল নির্ণয়ের ক্ষেত্রে পিসিআর-এর মান বিশেষভাবে ভালো এবং বেশ কিছু আধুনিক কৌশল উদ্ভূত হচ্ছে।

6.2.2। অ্যান্টি-লেপ্টোস্পিরা অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ

বেশ কিছু সেরোলজিক্যাল রোগ নির্ণয় ব্যবহার করা হয়; উদাহরণস্বরূপ, জেনাস-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি পরীক্ষা (পরোক্ষ হেমাগ্লুটিনেশন [IHA], এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস [ELISA], লেপ্টো ড্রাই ডট [ল্যাটেক্স অ্যাগ্লুটিনেশন], মাইক্রোক্যাপসুল অ্যাগ্লুটিনেশন [MCAT]), এবং সেরোভার-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি পরীক্ষা (মাইক্রোক্যাপসুল অ্যাগলুটিনেশন [এমসিএটি]) MAT]) [92,93]। যেমন, রোগ নির্ণয়ের জন্য MAT মানদণ্ড হল (i) পেয়ারড সেরার চারগুণ টাইটার বৃদ্ধি (বর্তমান সংক্রমণের সেরোকনভার্সন) বা (ii) একটি একক উচ্চ টাইটার (1:400 বা 1:800 এর চেয়ে বড় বা সমান, মহামারীতে বেশি এলাকা) (সেরোপসিটিভিটি) (অ্যান্টিবডিগুলি সংক্রমণের পরে কিছু সময়ের জন্য বা অন্যান্য রোগের সাথে ক্রস-প্রতিক্রিয়া চলতে পারে)। অতিরিক্তভাবে, MAT-এর জন্য এই অঞ্চলের সমস্ত লেপ্টোস্পিরা সেরোভারের একটি লাইভ প্যানেল প্রয়োজন, যেখানে স্থানীয়ভাবে প্রমিত সেরোভারগুলির একটি প্যানেল [93,94] বিশ্ব প্রাণী স্বাস্থ্য সংস্থার (15টি সেরোগ্রুপের 19টি অ্যান্টিজেন প্রতিনিধি) অনুসরণ করে [95]। যেহেতু সংক্রমণের 5-7 দিনের মধ্যে অ্যান্টিবডি সনাক্ত করা যায়, তাই সংক্রমণের প্রথম কয়েক দিনে MAT পরীক্ষা নেতিবাচক (টাইটার <1:50) হতে পারে। লেপ্টোস্পাইরোসিস নির্ণয় প্রস্রাবের নমুনা দ্বারা সঞ্চালিত হতে পারে [৯৬] সেরোলজি এবং আণবিক সনাক্তকরণ (16S rRNA), বিশেষ করে সাম্প্রতিক সংক্রমণের রোগীদের ক্ষেত্রে (MAT 1:800 এর চেয়ে বড় বা সমান বা ELISA IgM- পজিটিভ বা উভয়) [97] .

সীমিত সংস্থান সহ, প্রাসঙ্গিক ক্লিনিকাল ইতিহাস এবং সাতটি দিকের স্কোরিং সহ সম্পর্কিত পরীক্ষাগার পরীক্ষার উপর ভিত্তি করে একটি ক্লিনিকাল ভবিষ্যদ্বাণী স্কোর [98] নিম্নরূপ: হাইপোটেনশন (3), জন্ডিস (2), পেশী ব্যথা (2), AKI (1.5) , কম হিমোগ্লোবিন (3), হাইপোনাট্রেমিয়া সহ হাইপোক্যালেমিয়া (3), এবং নিউট্রোফিলিয়া (1) প্রস্তাবিত (একটি কাটঅফ সংক্ষিপ্ত স্কোর 4 রিসিভার অপারেটিং চরিত্রগত বক্ররেখার অধীনে ক্ষেত্র রয়েছে {{10}}.78 ( লেপ্টোস্পাইরোসিস নির্ণয়ের জন্য 95% CI 0.68–0.89) [77])। এই থাই-লেপ্টো-অন-ভর্তি সম্ভাব্যতা স্কোর রোগের গুরুতর ক্লিনিকাল সন্দেহের সাথে উপস্থিত রোগীদের মধ্যে লেপ্টোস্পাইরোসিসের প্রাথমিক অনুমানমূলক নির্ণয়ের জন্য একটি ডায়গনিস্টিক টুল হতে পারে।