বিমূর্ত

Cistanche deserticolaমরুভূমি জিনসেং নামেও পরিচিত, একটি সুপরিচিত খাদ্য-ওষুধ সমজাতীয় ভেষজ উপাদান যা ঐতিহ্যগত পূর্ব-এশীয় টনিক ফর্মুলেশনে ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা হয়। ইচিনাকোসাইড দ্বারা উপস্থাপিত ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি ফার্মাকোলজিক্যালভাবে সক্রিয় যৌগ হিসাবে কাজ করে, যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, প্রদাহ বিরোধী এবং নিউরোপ্রোটেক্টিভ জৈব-ফাংশন প্রয়োগ করে। তবুও, কম জলীয় দ্রবণীয়তা এবং গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাকীয় অবক্ষয় থেকে উদ্ভূত দুর্বল মৌখিক জৈব উপলভ্যতা কাঁচা ব্যবহারের ব্যবহারিক কার্যকারিতাকে মারাত্মকভাবে সীমাবদ্ধ করে।Cistanche deserticolaপাউডার মাইক্রোবিয়াল প্রোবায়োটিক গাঁজন উদ্ভিদের কোষ-প্রাচীর কাঠামো ভাঙতে, ম্যাক্রোমোলিকুলার সাবস্ট্রেটকে রূপান্তরিত করতে, লক্ষ্যবস্তু ফাইটোকেমিক্যাল সমৃদ্ধ করতে এবং পাউডার ফিজিকোকেমিক্যাল বৈশিষ্ট্য যেমন পোরোসিটি এবং পৃষ্ঠের বৈশিষ্ট্যগুলিকে সংশোধন করার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিবদ্ধ জৈব রূপান্তর কৌশল উপস্থাপন করে। এই গবেষণায়, আমরা উপযুক্ত গাঁজন স্ট্রেন এবং অপ্টিমাইজড নিমজ্জিত গাঁজন পরামিতি স্ক্রীন করেছিCistanche deserticolaপাউডার, প্রাথমিক মূল্যায়ন সূচক হিসাবে echinacoside ঘনত্ব গ্রহণ. তদ্ব্যতীত, গাঁজানো ভেষজ পাউডার পণ্যগুলির দ্রবীভূত আচরণকে চিহ্নিত করার জন্য ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত পরীক্ষা করা হয়েছিল। পরীক্ষামূলক ফলাফল তা প্রমাণ করেছেল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামফার্মেন্টেড ম্যাট্রিক্সে ইচিনাকোসাইড সামগ্রী উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করতে সক্ষম ছিল। গাঁজন করা পাউডার নমুনা থেকে ইচিনাকোসাইডের দ্রবীভূতকরণের হার এবং ক্রমবর্ধমান দ্রবীভূত পরিমাণ উভয়ই অপরিবর্তিত কাঁচামালের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর ছিল। মূল জৈব-সক্রিয় উপাদানগুলির দিকনির্দেশক সমৃদ্ধকরণ এবং দ্রবীভূত কার্যকারিতার উন্নতির জন্য একটি স্থিতিশীল এবং মাপযোগ্য গাঁজন কার্যপ্রবাহ সফলভাবে প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল।Cistanche deserticolaপাউডার এই অধ্যয়নটি প্রয়োগের মান সম্প্রসারণের জন্য সমালোচনামূলক প্রযুক্তিগত সহায়তা প্রদান করেCistanche deserticolaআধুনিক কার্যকরী খাদ্য এবং খাদ্যতালিকাগত পরিপূরক বাজারে।

কীওয়ার্ড: Cistanche deserticola; echinacoside;ল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারাম; মাইক্রোবিয়াল গাঁজন; প্রক্রিয়া অপ্টিমাইজেশান; জৈব উপলভ্যতা; ইন-ভিট্রো দ্রবীভূতকরণ; ভেষজ গুঁড়া

1. ভূমিকা

প্রাকৃতিক উদ্ভিদ-উত্পাদিত নিউট্রাসিউটিক্যালসের জন্য বিশ্বব্যাপী ক্রমবর্ধমান ভোক্তাদের চাহিদা ঐতিহ্যবাহী চীনা ওষুধ ব্যবস্থা থেকে উদ্ভূত খাদ্য-ওষুধের সমজাতীয় ভেষজ কাঁচামালের উপর গবেষণা চালিয়ে যাচ্ছে।Cistanche deserticola, উত্তর-পশ্চিম চীনের মরুভূমি অঞ্চলে বেড়ে ওঠা একটি বাধ্যতামূলক হলোপ্যারাসাইটিক উদ্ভিদ, কিডনি-ইয়াংকে টোনিফাই করা এবং সার-রক্ত পূরণ করা সহ এর টনিক প্রভাবের জন্য শাস্ত্রীয় ভেষজ সাহিত্যে নথিভুক্ত করা হয়েছে। সমসাময়িক ফার্মাকোলজিকাল তদন্তগুলি এর প্রধান গৌণ বিপাক বিশেষত ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস (পিএইচজি) এর একাধিক স্বাস্থ্য-প্রচারকারী জৈব ক্রিয়াকলাপকে বৈধ করেছে। Echinacoside এবং acteoside (verbascoside), দুটি প্রধান PhG যৌগ থেকে বিচ্ছিন্নCistanche deserticola, সেলুলার এবং প্রাণী পরীক্ষামূলক মডেলগুলিতে ভাল-নথিভুক্ত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, প্রদাহ বিরোধী, নিউরো-প্রতিরক্ষামূলক এবং প্রজনন-নিয়ন্ত্রক প্রভাব রয়েছে।

যদিও ইচিনাকোসাইড পরীক্ষাগার পরীক্ষায় চমৎকার ফার্মাকোলজিকাল সম্ভাব্যতা প্রদর্শন করে, এর মৌখিক প্রয়োগ বিশিষ্ট জৈব উপলভ্যতার প্রতিবন্ধকতার সম্মুখীন হয়। বিদ্যমান ফার্মাকোকিনেটিক ডেটা ইঙ্গিত দেয় যে ইচিনাকোসাইড কম জলীয় দ্রবণীয়তায় ভুগছে এবং এটি গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল pH এবং অন্ত্রের মাইক্রোবিয়াল বিপাকীয় রূপান্তরের অধীনে হাইড্রোলাইটিক পচনের জন্য ঝুঁকিপূর্ণ। ইচিনাকোসাইডের রিপোর্ট করা মৌখিক জৈব উপলভ্যতার মান ইঁদুরের মডেলগুলিতে 1.3% এর নিচে রয়ে গেছে, যা মৌখিকভাবে পরিচালিত কাঁচা-এর ইন-ভিভো ফার্মাকোলজিক্যাল শক্তিকে উল্লেখযোগ্যভাবে দুর্বল করে দেয়Cistanche deserticolaউপকরণ অতএব, কার্যকর উপাদান সামগ্রীর পাশাপাশি দ্রবীভূত সম্পত্তি বাড়ানোর জন্য সম্ভাব্য প্রক্রিয়াকরণ প্রযুক্তির বিকাশ শিল্প উন্নয়নের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ চ্যালেঞ্জ হয়ে দাঁড়ায়।Cistanche deserticola‑ভিত্তিক কার্যকরী সম্পূরক।

হার্বাল পাউডার মাইক্রোনাইজেশন চীনা ভেষজ কাঁচামালের জন্য একটি প্রচলিত শারীরিক পরিবর্তন কৌশল। কণার মাত্রা হ্রাস করে এবং নির্দিষ্ট পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফলকে বড় করে, পালভারাইজেশন চিকিত্সা এমবেডেড জৈব-সক্রিয় উপাদানগুলির দ্রবীভূত করার দক্ষতা সীমিত পরিমাণে উন্নত করতে পারে। যাইহোক, শুধুমাত্র দৈহিক গ্রাইন্ডিং অনমনীয় উদ্ভিদ কোষ-প্রাচীর সম্পূর্ণভাবে ভেঙ্গে ফেলতে পারে না বা কোষ প্রাচীরের ম্যাট্রিসে আটকে থাকা আবদ্ধ ফাইটোকেমিক্যাল পদার্থের দিকনির্দেশক বায়োট্রান্সফরমেশন করতে পারে না।

মাইক্রোবিয়াল গাঁজন, বিশেষ করে ল্যাকটিক-অ্যাসিড-ব্যাকটেরিয়া-সহায়ক বায়োপ্রসেসিং, সাম্প্রতিক বছরগুলিতে আধুনিক ভেষজ প্রক্রিয়াকরণ গবেষণায় ব্যাপক মনোযোগ আকর্ষণ করে। প্রোবায়োটিক গাঁজন সেলুলেজ, হেমিসেলুলেজ এবং পেকটিনেজ সহ জটিল বহিরাগত এনজাইম ককটেল নিঃসরণ করতে পারে, যা উদ্ভিদ কোষ-প্রাচীরের পলিমারিক উপাদানগুলিকে আংশিকভাবে ক্ষয় করে। এই ধরনের জৈবিক অবক্ষয় মূলত কোষ-প্রাচীর নেটওয়ার্কের মধ্যে আবদ্ধ ফাইটোকেমিক্যাল রিলিজ করে। এদিকে, অণুজীব বিপাকীয় ক্রিয়াকলাপগুলি ম্যাক্রোমোলিকুলার পূর্বসূরকে রূপান্তরিত করতে পারে, পাউডার পৃষ্ঠের রূপবিদ্যা, ছিদ্রতা এবং কণা-পৃষ্ঠের ভৌত রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যগুলিকে সংশোধন করতে পারে, এই সমস্তগুলি ভেষজ কার্যকরী উপাদানগুলির দ্রবীভূতকরণ এবং প্রকাশের ধরণগুলিকে আরও প্রভাবিত করে৷ অসংখ্য প্রকাশিত গবেষণাপত্র প্রমাণ করেছে যে ল্যাকটিক-অ্যাসিড-ব্যাকটেরিয়া গাঁজন বিভিন্ন ভেষজ স্তরের মোট ফেনোলিক, ফ্ল্যাভোনয়েড বা গ্লাইকোসাইড সামগ্রী বাড়াতে পারে, যৌগিক দ্রবণীয়তা কমিয়ে দিতে পারে এবং এমনকি উদ্ভিদের ম্যাট্রিক্সে পুষ্টি-বিরোধী উপাদান বা হালকা বিষাক্ত উপাদান কমাতে পারে।

জন্যCistanche deserticolaউপাদান, বেশিরভাগ বিদ্যমান অধ্যয়ন এখনও নিষ্কাশন-প্রক্রিয়া অপ্টিমাইজেশান, উপাদান সনাক্তকরণ, বা অপরিশোধিত নির্যাসের জৈবিক-ক্রিয়াকলাপ মূল্যায়নের উপর ফোকাস করে। নির্দেশমূলক মাইক্রোবিয়াল গাঁজন উপর পদ্ধতিগত অন্বেষণCistanche deserticolaপাউডার এখনও অপর্যাপ্ত। এটা অস্পষ্ট রয়ে গেছে কিভাবে মূল গাঁজন পরামিতিগুলি স্বাক্ষর মার্কার যৌগ ইচিনাকোসাইডের সমৃদ্ধি দক্ষতাকে প্রভাবিত করে এবং গাঁজনীয় পরিবর্তন তার ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত কর্মক্ষমতা উন্নত করতে পারে যা সম্ভাব্য মৌখিক জৈব উপলভ্যতার সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কযুক্ত।

ইচিনাকোসাইডকে আমাদের বর্তমান কাজের মূল লক্ষ্য মার্কার যৌগ হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল, এই কারণে যে এটি সর্বাধিক প্রতিনিধিত্বকারী ফিনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড উপাদানগুলির একাধিক স্বাস্থ্য সুবিধার জন্য দায়ী।Cistanche deserticola. এই গবেষণাপত্রে তিনটি প্রধান গবেষণার উদ্দেশ্য সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল: প্রথমত, উচ্চ-দক্ষ মাইক্রোবিয়াল স্ট্রেন স্ক্রীন করা যা ইচিনাকোসাইড সমৃদ্ধ করতে সক্ষমCistanche deserticolaপাউডার ম্যাট্রিক্স; দ্বিতীয়ত, ক্রিটিক্যাল টেকনোলজিকাল ভেরিয়েবল (ইনোকুলেশন ভলিউম, কঠিন-তরল অনুপাত, গাঁজন সময়কাল, নির্দিষ্ট ইনকিউবেশন তাপমাত্রা 37 ডিগ্রির অধীনে) পদ্ধতিগতভাবে অপ্টিমাইজ করা এবং স্থিতিশীল, পুনরাবৃত্তিযোগ্য নিমজ্জিত ফার্মেন্টেশন সিস্টেম তৈরি করা; তৃতীয়, গাঁজন চিকিত্সার পরে লক্ষ্য উপাদানের ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত প্রোফাইলগুলি মূল্যায়ন করা, যাতে পরোক্ষভাবে গাঁজন প্রযুক্তির সম্ভাব্যতা যাচাই করা যায় যাতে গাঁজন করা মৌখিক জৈব উপলভ্যতা প্রচার করা যায়।Cistanche deserticolaপাউডার এই প্রকল্পের পরীক্ষামূলক আউটপুটগুলি থেকে উৎপাদিত উচ্চ-কার্যকারিতা বাণিজ্যিক পাউডার-ফর্ম খাদ্যতালিকা-সম্পূরক পণ্যগুলির বিকাশের জন্য উদ্ভাবনী প্রযুক্তিগত রুট এবং মৌলিক পরীক্ষাগার প্রমাণ সরবরাহ করবে বলে আশা করা হচ্ছেCistanche deserticola.
 

2. উপকরণ এবং পদ্ধতি

2.1 কাঁচা উদ্ভিদ উপাদান, মাইক্রোবিয়াল স্ট্রেন এবং রাসায়নিক বিকারক

এর শুকনো ভেষজ টুকরাCistanche deserticolaশানডং হংজি চাইনিজ হারবাল পিসেস কোং লিমিটেড, ব্যাচ নম্বর C397233281 থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। গাঁজন পরীক্ষা-নিরীক্ষার আগে ভেষজ স্লাইসগুলিকে আরও সূক্ষ্ম পাউডারে পরিণত করা হয়েছিল। পরীক্ষার স্ট্রেনল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামপূর্বে জিনান বিশ্ববিদ্যালয়ের কলেজ অফ বায়োলজিক্যাল সায়েন্স অ্যান্ড টেকনোলজির গবেষণাগারে বিচ্ছিন্ন এবং সংরক্ষিত ছিল। De-Man-Rogosa-Sharpe (MRS) ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতির মাধ্যম AoBoxing Biotechnology Co., Ltd., Beijing, China থেকে কেনা হয়েছিল৷ ইচিনাকোসাইড রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড (এইচপিএলসি বিশুদ্ধতা 98% এর চেয়ে বেশি বা সমান) ইউয়ানি বায়ো-টেকনোলজি কোং, লিমিটেড, সাংহাই, চীন থেকে নেওয়া হয়েছিল। ক্রোমাটোগ্রাফিক-গ্রেড অ্যাসিটোনিট্রাইল, বিশ্লেষণাত্মক-গ্রেড ফসফরিক অ্যাসিড এবং অন্যান্য অজৈব রাসায়নিক এজেন্টগুলি সিনোফার্ম কেমিক্যাল রিএজেন্ট গ্রুপ কোং লিমিটেড দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। সমস্ত সমাধান প্রস্তুতির ক্রিয়াকলাপের জন্য পরীক্ষাগার জল-বিশুদ্ধকরণ যন্ত্র দ্বারা উত্পাদিত অতি-বিশুদ্ধ জল গ্রহণ করা হয়েছিল।

2.2 ব্যাকটেরিয়া সক্রিয়করণ এবং এর প্রস্তুতিল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামসাসপেনশন

সংরক্ষিত একক ব্যাকটেরিয়া উপনিবেশল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামকঠিন এমআরএস আগর প্লেট থেকে বাছাই করা হয়েছিল এবং জীবাণুমুক্ত তরল এমআরএস মিডিয়ামে টিকা দেওয়া হয়েছিল। তরল ব্যাকটেরিয়া সংস্কৃতি 37 ডিগ্রির নিচে থার্মোস্ট্যাটিক কাঁপানো ইনকিউবেটরে 24 ঘন্টার জন্য কাঁপানো গতি 160 r/মিনিটের মধ্যে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। চাষের পর, ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন কোষের ঘনত্ব প্রায় \\(10^{8}\\) CFU/mL (প্রতি মিলিলিটারে উপনিবেশ গঠনকারী ইউনিট) পৌঁছেছে। প্রস্তুতকৃত ব্যাকটেরিয়াল সাসপেনশনটি পরবর্তী গাঁজন ইনোকুলেশন কাজের জন্য অস্থায়ীভাবে 4 ডিগ্রি রেফ্রিজারেটর অবস্থায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

2.3 এর জন্য নিমজ্জিত গাঁজন ব্যবস্থা স্থাপনCistanche deserticolaপাউডার

80 গ্রামCistanche deserticolaপাউডার কাঁচামাল ওজন করে এক-লিটার এরলেনমেয়ার ফ্লাস্কে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল, ভর-থেকে-ভলিউম অনুপাত 1: 5 (g/mL) অনুসরণ করে বিশুদ্ধ জলের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। মিশ্র স্লারিটি 25 মিনিটের জন্য 121 ডিগ্রিতে উচ্চ-চাপের বাষ্প অবস্থায় নির্বীজন করা হয়েছিল। অটোক্লেভ নির্বীজন করার পরে, গাঁজন সাবস্ট্রেটগুলিকে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় ঠান্ডা করা হয়েছিল. 6 মিলি পূর্ব-প্রস্তুতল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন পরীক্ষামূলক গাঁজন গ্রুপে যোগ করা হয়েছিল; ফাঁকা কন্ট্রোল গ্রুপ ব্যাকটেরিয়া ইনোকুলামের পরিবর্তে জীবাণুমুক্ত ডিওনাইজড জলের সমপরিমাণ পরিমাণ পেয়েছে। গাঁজন ইনকিউবেশন স্থিতিশীল 37 ডিগ্রী পরিবেশের অধীনে এগিয়ে যায়। গাঁজন অগ্রগতি জুড়ে নমুনা অ্যালিকোটগুলি 3 দিন, 4 দিন, 5 তম দিন এবং 6 তম দিনে সংগ্রহ করা হয়েছিল। সংগ্রহ করা গাঁজন তরল নমুনাগুলিকে 10 মিনিটের জন্য 12 000 r/min এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, এবং সুপারনাট্যান্ট ভগ্নাংশগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং পরবর্তীতে ইচিনাকোসাইড ঘনত্বের HPLC পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

2.4 উচ্চ-কর্মক্ষমতা তরল-ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) ইচিনাকোসাইডের পরিমাণ নির্ধারণ

Agilent 1260 হাই-পারফরম্যান্স লিকুইড-ক্রোমাটোগ্রাফি সিস্টেম (Agilent Technologies, Waldbronn, Germany) YMC-Pack ODS-A ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম দিয়ে সজ্জিত (5 μm কণার আকার, কলামের মাত্রা 4.6 mmsis এর জন্য 4.6 মিমিলিটার × 10 মিমিঅ্যাণ্ট ব্যবহার করা হয়েছিল) echinacoside. মোবাইল-ফেজ সিস্টেমে দ্রাবক A: 0.2% জলীয় ফসফরিক-অ্যাসিড দ্রবণ; দ্রাবক বি: ক্রোমাটোগ্রাফিক-গ্রেড অ্যাসিটোনিট্রাইল। মোবাইল-ফেজ গ্রেডিয়েন্ট ইলুশন পদ্ধতিটি নীচে সেট করা হয়েছিল: 0 মিনিট-15 মিনিট: 95% মোবাইল-ফেজ A বজায় রাখুন; 15 মিনিট-28 মিনিট: 95 % A থেকে 85 % A তে রৈখিক গ্রেডিয়েন্ট স্থানান্তর; 28 মিনিট‑45 মিনিট: 85% A থেকে 80% A-তে রৈখিক গ্রেডিয়েন্ট স্থানান্তর; 45 মিনিট‑45.01 মিনিট: 80 % A থেকে 77 % A তে রৈখিক গ্রেডিয়েন্ট স্থানান্তর; 45.01 মিনিট‑55 মিনিট: 77 % A থেকে 95 % A তে রৈখিক গ্রেডিয়েন্ট স্থানান্তর।

মোবাইল-ফেজ প্রবাহ বেগ 1.0 মিলি/মিনিট এ নিয়ন্ত্রিত হয়েছিল; কলাম ওভেনের তাপমাত্রা 30 ডিগ্রিতে স্থিতিশীল ছিল; সনাক্তকরণ অতিবেগুনী তরঙ্গদৈর্ঘ্য 280 এনএম এ স্থির করা হয়েছিল; প্রতিটি রানের জন্য নমুনা ইনজেকশন ভলিউম ছিল 30 μL। ফার্মেন্টেশন সুপারন্যাট্যান্ট নমুনায় ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব গণনা করার জন্য বাহ্যিক-মান ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা পদ্ধতি প্রয়োগ করা হয়েছিল।

2.5 গাঁজন পরামিতিগুলির একক-ফ্যাক্টর পরীক্ষামূলক অপ্টিমাইজেশন

একক-ফ্যাক্টর ভেরিয়েবল-অল্টারনেশন পরীক্ষামূলক নকশা বাস্তবায়িত হয়েছিল, প্রাথমিক প্রতিক্রিয়া নির্দেশক হিসাবে নির্বাচিত ফার্মেন্টেশন সুপারনাট্যান্ট থেকে পরিমাপ করা ইচিনাকোসাইড সামগ্রী সহ। সমস্ত গাঁজন ইনকিউবেশন 37 ডিগ্রিতে ধ্রুবক তাপমাত্রার অবস্থা রাখে।

ইনোকুলেশন-ভলিউম গ্রেডিয়েন্ট পরীক্ষা: কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL), গাঁজন ইনকিউবেশন সময়কাল 4 দিনে স্থির করা হয়েছিল। ইনোকুলেশন ভলিউম গ্রেডিয়েন্ট সেট করা হয়েছিল: 1 mL, 3 mL, 5 mL, 7 mL, 9 mL প্রস্তুত \\(10^{8}\\) CFU/mL ব্যাকটেরিয়া সাসপেনশন, লক্ষ্য যৌগ জমার উপর ইনোকুলেশন-ভলিউমের প্রভাব মূল্যায়ন করতে।

কঠিন-তরল অনুপাত গ্রেডিয়েন্ট পরীক্ষা: ইনোকুলেশন ভলিউম 3 এমএল হিসাবে স্থির করা হয়েছিল, গাঁজন সময়কাল 4 দিন হিসাবে স্থির করা হয়েছিল। সলিড-তরল অনুপাতের গ্রেডিয়েন্টগুলি অন্তর্ভুক্ত 1 : 3, 1 : 5, 1 : 8, 1 : 10, 1 : 12 (g/mL), সাবস্ট্রেট-জল অনুপাতের প্রভাবগুলি তদন্ত করার জন্য৷

ফার্মেন্টেশন-টাইম গ্রেডিয়েন্ট টেস্ট: ইনোকুলেশন ভলিউম 3 mL হিসাবে স্থির, সর্বোত্তম কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL) পূর্ববর্তী পরীক্ষাগুলি থেকে গৃহীত হয়েছিল। ইনকিউবেশন টাইম এক্সটেনশনের পাশাপাশি ইচিনাকোসাইডের গতিশীল সঞ্চয়ের প্রবণতা অন্বেষণের জন্য গাঁজন সময় গ্রেডিয়েন্ট 2 d, 3 d, 4 d, 5 d, 6 d কভার করে।

প্রতিটি ফার্মেন্টেশন ট্রায়াল শেষ করার পরে, নমুনাগুলিকে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, সুপারনাট্যান্ট তরল সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ইচিনাকোসাইড ঘনত্বের HPLC পরিমাণগত পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রতিটি পরীক্ষামূলক চিকিত্সা জৈবিক ট্রিপলিকেটে সম্পাদিত হয়েছিল।

2.6 ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত মূল্যায়ন

স্ক্রীন করা সর্বোত্তম গাঁজন প্রযুক্তিগত পরামিতি, fermented অধীনেCistanche deserticolaপাউডার নমুনা প্রস্তুত করা হয়েছিল। আনফার্মেন্টেড কাঁচা ভেষজ পাউডার নেতিবাচক-নিয়ন্ত্রণ নমুনা হিসাবে পরিবেশন করা হয়। গাঁজানো পণ্য এবং আসল কাঁচা গুঁড়া উপাদানের মধ্যে দ্রবীভূতকরণের হার এবং ইচিনাকোসাইডের ক্রমবর্ধমান দ্রবীভূত ডিগ্রি তুলনা করার জন্য ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত পরীক্ষা করা হয়েছিল। মার্কার যৌগের গতিশীল প্রকাশ আচরণ রেকর্ড করার জন্য দ্রবীভূত মাঝারি স্যাম্পলিং সময় পয়েন্টগুলি সাজানো হয়েছিল। দ্রবীভূতকরণ হার এবং ক্রমবর্ধমান দ্রবীভূত শতাংশ গণনা করার জন্য, প্রতিটি সময়-বিন্দুতে দ্রবীভূত মাধ্যমে ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব নির্ধারণের জন্য এইচপিএলসি বিশ্লেষণ গৃহীত হয়েছিল।

2.7 পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ

পরীক্ষামূলক ডেটাসেটগুলি SPSS 22.0 পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল। বিভিন্ন পরীক্ষামূলক গোষ্ঠীর মধ্যে তাৎপর্য তুলনা করার জন্য বৈচিত্র্যের একমুখী বিশ্লেষণ (ANOVA) পরিচালিত হয়েছিল।P < 0.05 was defined as statistically significant difference, and P < 0.01 represented extremely significant difference condition. Origin 2018 software was used for plotting experimental trend graphs. All numerical data were presented as mean value ± standard deviation.

3. ফলাফল

3.1 পরীক্ষামূলক গ্রুপ এবং ফাঁকা নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের মধ্যে প্রাথমিক গাঁজন তুলনা

প্রাথমিক নিমজ্জিত গাঁজন পরীক্ষার ফলাফল প্রমাণ করেছে যে পরীক্ষামূলক গ্রুপল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামস্যাম্পলিং টাইম-পয়েন্ট জুড়ে অ-ইনোকুলেটেড ফাঁকা-নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চ ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব অর্জন করেছে। ব্যাকটেরিয়া-গাঁজানো নমুনার ইচিনাকোসাইড সামগ্রী ইনকিউবেশনের দ্বিতীয় দিন থেকে শুরু হওয়া ফাঁকা নিয়ন্ত্রণ বনাম বিশিষ্ট পরিসংখ্যানগত পার্থক্যে পৌঁছেছে (P < 0.05). The blank control group only exhibited slight spontaneous fluctuation of echinacoside concentration, without obvious enrichment phenomenon, which verified that metabolic activity of inoculated ল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামভিতরে ইচিনাকোসাইডের দিকনির্দেশক সমৃদ্ধিতে অবদান রাখেCistanche deserticolaপাউডার গাঁজন ম্যাট্রিক্স।

3.2 ইচিনাকোসাইড জমে ইনোকুলেশন ভলিউমের প্রভাব

ইনোকুলেশন-ভলিউম একক-ফ্যাক্টর পরীক্ষার মধ্যে, ইচিনাকোসাইডের ঘনত্ব দ্রুত বৃদ্ধি পায় যখন ইনোকুলেশনের পরিমাণ 1 mL থেকে 3 mL পর্যন্ত বৃদ্ধি পায়, 3 mL ইনোকুলেশন ডোজের অধীনে \\(43.64\\pm0.15\\) mg/mL-এর সর্বোচ্চ মান পৌঁছায়। যখন ইনোকুলেশন ভলিউম 3 mL-এর উপরে বাড়তে থাকে, তখন সনাক্ত করা ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব ধীরে ধীরে অবতরণের প্রবণতা প্রদর্শন করে। অত্যধিক উচ্চ ইনোকুলেশন ডোজ গাঁজন পদ্ধতির মধ্যে সীমিত পুষ্টি সংস্থানগুলির জন্য তীব্র প্রতিযোগিতার কারণ হবে, বিপাকীয় ভারসাম্যকে ব্যাহত করবে এবং লক্ষ্য-উপাদান সমৃদ্ধকরণ দক্ষতাকে বাধা দেবে। অতএব, 3 মিলি ইনোকুলেশন ভলিউম (ব্যাকটেরিয়ার ঘনত্ব প্রায় \\(10^{8}\\) CFU প্রতি গ্রাম সাবস্ট্রেট ম্যাট্রিক্স) পরবর্তী পরীক্ষাগুলির জন্য সর্বোত্তম ইনোকুলেশন-ভলিউম প্যারামিটার হিসাবে নির্বাচিত হয়েছিল।

3.3 ইচিনাকোসাইড জমে কঠিন-তরল অনুপাতের প্রভাব

সলিড-তরল অনুপাত একক-ফ্যাক্টর পরীক্ষা নির্দেশ করে যে ইচিনাকোসাইড সামগ্রী সর্বোচ্চ মান \\(40.42\\pm0.15\\) mg/mL এর কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL) এ পৌঁছেছে। যদি কঠিন-তরল অনুপাত খুব বেশি হয় (অপ্রতুল তরল মাধ্যম), সাবস্ট্রেট স্লারি অত্যধিক উচ্চ সান্দ্রতা প্রদর্শন করে, যা ভর স্থানান্তর, ব্যাকটেরিয়া বিস্তার এবং পদার্থ-রূপান্তর প্রতিক্রিয়াকে বাধা দেয়। যখন তরল অনুপাত অত্যধিক বড় হয়ে যায় (নিম্ন কঠিন-তরল অনুপাত), সাবস্ট্রেটের পুষ্টির ঘনত্ব অত্যধিকভাবে পাতলা হয়ে যায়, যা ইচিনাকোসাইডের চূড়ান্ত সমৃদ্ধি স্তরকেও হ্রাস করে। তাই কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL) সবচেয়ে উপযুক্ত সাবস্ট্রেট-জল অনুপাত শর্ত হিসাবে নিশ্চিত করা হয়েছিল।

3.4 ইচিনাকোসাইড জমে গাঁজন ইনকিউবেশন সময়ের প্রভাব

উপরে-নির্ধারিত ইনোকুলেশন-ভলিউম এবং কঠিন-তরল-অনুপাতের পরামিতিগুলির উপর ভিত্তি করে, গাঁজন সময়ের উপর ইচিনাকোসাইড ঘনত্বের গতিশীল পরিবর্তন পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। ইচিনাকোসাইড কন্টেন্ট ক্রমাগত আরোহণ করেছে এবং গাঁজন ইনকিউবেশনের 5 তম দিনে সর্বাধিক মান \\(43.33\\pm0.20\\) mg/mL অর্জন করেছে। 6-দিনের ইনকিউবেশন টাইম পয়েন্টে পৌঁছানোর পরে, পরিমাপযোগ্য ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব মাঝারিভাবে হ্রাস পেয়েছে, যা দীর্ঘায়িত মাইক্রোবিয়াল বিপাকীয় ক্রিয়া দ্বারা সৃষ্ট গ্লাইকোসাইড যৌগগুলির আংশিক অবক্ষয়ের জন্য দায়ী করা হয়েছিল। ফলস্বরূপ, সর্বোত্তম গাঁজন ইনকিউবেশন সময়কাল 37 ডিগ্রি তাপমাত্রার অধীনে 5 দিন হিসাবে নির্ধারিত হয়েছিল।

সমস্ত একক-ফ্যাক্টর অপ্টিমাইজেশান আউটপুট সংশ্লেষণ করে, এর জন্য ব্যাপক সর্বোত্তম নিমজ্জিত গাঁজন প্রযুক্তিগত অবস্থাCistanche deserticolaপাউডার সংক্ষিপ্ত করা হয়েছিল: ইনোকুলেশন ভলিউম 3 mL (প্রায় \\(10^{8}\\) CFU/g সাবস্ট্রেট), কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL), 37 ডিগ্রিতে ধ্রুবক ইনকিউবেশন তাপমাত্রা, 5 দিনের গাঁজন সময়কাল।

3.5 ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত পরীক্ষামূলক মূল্যায়ন

উপরে উল্লিখিত সর্বোত্তম গাঁজন কর্মপ্রবাহের অধীনে, গাঁজন করাCistanche deserticolaপাউডার নমুনা ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত মূল্যায়নের জন্য উত্পাদিত হয়েছিল। অপরিশোধিত কাঁচা ভেষজ পাউডারের সাথে তুলনা করে, গাঁজনযুক্ত পাউডার নমুনা স্পষ্টভাবে উচ্চতর দ্রবীভূত হার এবং মার্কার যৌগ ইচিনাকোসাইডের জন্য উচ্চতর ক্রমবর্ধমান দ্রবীভূত পরিমাণ প্রদর্শন করে। এই পর্যবেক্ষণটি পরামর্শ দিয়েছে যে প্রোবায়োটিক গাঁজন চিকিত্সা ভেষজ পাউডার ম্যাট্রিক্সের ভৌত রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যগুলিকে পরিবর্তিত করেছে, এবং মূল জৈব-সক্রিয় উপাদান ইচিনাকোসাইডের উন্নত দ্রবীভূত-রিলিজ কর্মক্ষমতা, মৌখিক জৈব উপলভ্যতা বাড়ানোর জন্য এর সম্ভাব্যতা বোঝায়।

4. আলোচনা

বর্তমান কাজে,ল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামভিতরে ইচিনাকোসাইডের দিকনির্দেশক সমৃদ্ধকরণের জন্য একটি কার্যকর গাঁজন স্ট্রেন হিসাবে যাচাই করা হয়েছিলCistanche deserticolaপাউডার সাবস্ট্রেট। পূর্ববর্তী প্রকাশিত সাহিত্য অনুসারে, ল্যাকটিক-অ্যাসিড-ব্যাকটেরিয়া গাঁজন একাধিক হাইড্রোলাইটিক এনজাইম নিঃসরণ করতে পারে যাতে সেলুলোজ এবং পেকটিন-এর মতো দৃঢ় উদ্ভিদ কোষ-প্রাচীরের কাঠামোগত পলিমারগুলি হ্রাস পায়, যা কোষ-প্রাচীর নেটওয়ার্কগুলির মধ্যে আটকে থাকা ফাইটোকেমিক্যাল উপাদানগুলিকে ছেড়ে দেয়। অন্যদিকে, অণুজীব বিপাকীয় রূপান্তর পূর্ববর্তী পদার্থকে লক্ষ্য ফিনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড পণ্যে রূপান্তর করতে পারে, যৌথভাবে গাঁজানো সুপারনাট্যান্টপিএমসিতে উচ্চতর ইচিনাকোসাইড ঘনত্বে অবদান রাখে।

ইনোকুলেশন ডোজ, কঠিন-তরল সাবস্ট্রেট-জল অনুপাত এবং গাঁজন ইনকিউবেশন সময় সবই ইচিনাকোসাইডের চূড়ান্ত সমৃদ্ধকরণ দক্ষতার উপর বিশিষ্ট প্রভাব ফেলে। খুব কম ইনোকুলেশন ভলিউম অপর্যাপ্ত কার্যকর-ব্যাকটেরিয়া জনসংখ্যার দিকে পরিচালিত করে, যার ফলে অপর্যাপ্ত জৈব রূপান্তর ক্ষমতা। অত্যধিক উচ্চ ইনোকুলেশন পরিমাণ গাঁজন পদ্ধতির মধ্যে মারাত্মক আন্তঃ-প্রজাতির পুষ্টি প্রতিযোগিতার সূত্রপাত করে, এবং ব্যাপক বিপাক-দ্বারা-উৎপাদন জমে ইচিনাকোসাইড গ্লাইকোসাইড অণুর আংশিক পচনকে ত্বরান্বিত করতে পারে। সলিড-তরল অনুপাত সরাসরি সিস্টেমের সান্দ্রতা, ভর-স্থানান্তর দক্ষতা এবং পুষ্টি-ঘনত্বের অবস্থা নিয়ন্ত্রণ করে। ওভার-লং ফার্মেন্টেশন ইনকিউবেশন লক্ষ্য গ্লাইকোসাইড যৌগের গৌণ অবক্ষয় ঘটাবে, যা আমাদের সময়-গ্রেডিয়েন্ট পরীক্ষায় পাঁচ দিনের ইনকিউবেশনের পরে ইচিনাকোসাইড ঘনত্ব হ্রাসকে ব্যাখ্যা করে। অতএব, স্থিতিশীল উচ্চ-ইচিনাকোসাইড ফার্মেন্টেড অর্জনের জন্য এই তিনটি মূল প্রক্রিয়া পরামিতির উপর সুনির্দিষ্ট নিয়ন্ত্রণ অপরিহার্য।Cistanche deserticolaগুঁড়া পণ্য।

আমাদের ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত পরীক্ষার ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে গাঁজনযুক্ত পাউডারটি আসল আনফার্মেন্টেড কাঁচা পাউডারের বিপরীতে ইচিনাকোসাইডের উচ্চতর দ্রবীভূত-রিলিজ আচরণ প্রদর্শন করে। এই ধরনের উন্নতি একাধিক কারণে হতে পারে: মাইক্রোবিয়াল এনজাইম দ্বারা প্ররোচিত কোষ-প্রাচীরের আংশিক অবক্ষয় পাউডার মাইক্রো-মরফোলজি পরিবর্তন করে, কণার পৃষ্ঠের ছিদ্রতা এবং নির্দিষ্ট পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফল বৃদ্ধি করে এবং উপাদান দ্রবীভূত করার জন্য শারীরিক বাধা হ্রাস করে। এদিকে, মাইক্রোবিয়াল বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলি পাউডার পৃষ্ঠের রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যগুলিকে পরিবর্তন করতে পারে, যা ফিনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড অণুর জলীয়-ফেজ দ্রবীভূতকরণকে আরও উৎসাহিত করে। এটা জোর দেওয়া উচিত যে ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত পরীক্ষা শুধুমাত্র জৈব উপলভ্যতা বৃদ্ধির জন্য পরোক্ষ প্রমাণ প্রদান করে। আসল ইন-ভিভো মৌখিক জৈব উপলভ্যতার জন্য এখনও আরও পশুর ফার্মাকোকিনেটিক পরীক্ষা বা কঠিন বৈধতার জন্য মানুষের হস্তক্ষেপ গবেষণা প্রয়োজন।

আমাদের বর্তমান তদন্তের জন্য বেশ কিছু সীমাবদ্ধতা রয়েছে। এই প্রকল্পটি প্রতিক্রিয়া-সারফেস মাল্টি-ফ্যাক্টর ইন্টারঅ্যাকশন বিশ্লেষণের পরিবর্তে একক-ফ্যাক্টর অপ্টিমাইজেশান গ্রহণ করেছে এবং বিভিন্ন গাঁজন ভেরিয়েবলের মধ্যে ইন্টারেক্টিভ প্রভাবগুলি পরিমাণগতভাবে মূল্যায়ন করা হয়নি। এছাড়াও, আমরা প্রধানত মার্কার যৌগ ইচিনাকোসাইডের পরিমাণগত পরিবর্তনের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছি; পুরো ফার্মেন্টেড-পাউডার মেটাবলিক-প্রোফাইল শিফটের জন্য ব্যাপক বিপাকীয় প্রোফাইলিং এই গবেষণায় সঞ্চালিত হয়নি। আরও গবেষণা LC-MS লক্ষ্যবিহীন মেটাবোলোমিক্স প্রযুক্তি গ্রহণ করতে পারে যাতে পদ্ধতিগতভাবে সম্পূর্ণ-স্কেল মেটাবোলাইট পরিবর্তনের পরে প্রকাশ করা যায়ল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামএর গাঁজনCistanche deserticolaপাউডার উপরন্তু, ফলো-আপ কাজের জন্য পশুর ফার্মাকোকিনেটিক পরীক্ষা-নিরীক্ষা চালাতে হবে যাতে গাঁজনযুক্ত প্রকৃত মৌখিক জৈব উপলভ্যতার পরামিতিগুলি গণনা করা যায়।Cistanche deserticolaপাউডার, এবং ফার্মাকোলজিক্যাল-ইফেক্ট যাচাইকরণ পরীক্ষা পরিচালনা করে যেমন অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ক্লান্তি বা নিউরো-প্রতিরক্ষামূলক কার্যকলাপ মূল্যায়ন।

শিল্প-অ্যাপ্লিকেশনের দৃষ্টিকোণ থেকে, এই অপ্টিমাইজড নিমজ্জিত গাঁজন প্রক্রিয়া আপগ্রেড করার জন্য একটি সম্ভাব্য প্রযুক্তিগত পথ প্রদান করেCistanche deserticola‑সম্পর্কিত কার্যকরী-খাদ্য কাঁচামাল পণ্য। বাণিজ্যিক উত্পাদনের জন্য, পরবর্তী প্রযুক্তিগত অন্বেষণের জন্য গাঁজন কার্যপ্রবাহের স্কেলিং-আপ যাচাইকরণের উপর ফোকাস করা দরকার, উপযুক্ত-পরবর্তী শুকানোর প্রযুক্তি (ভ্যাকুয়াম ফ্রিজ-শুকানো বা স্প্রে-শুকানো) অন্বেষণ করা, গাঁজন করা সমাপ্ত পাউডার পণ্যগুলির স্টোরেজ স্থিতিশীলতা মূল্যায়ন করা, যাতে বড় শিল্প-উৎপাদন সমর্থন করা যায়।

5. উপসংহার

স্ট্রেন-স্ক্রিনিং পরীক্ষা এটি প্রমাণ করেছেল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামকার্যকরভাবে ভিতরে কী জৈব-সক্রিয় মার্কার ইচিনাকোসাইডের দিকনির্দেশক সমৃদ্ধি প্রচার করতে পারেCistanche deserticolaপাউডার গাঁজন ম্যাট্রিক্স।

একক-ফ্যাক্টর ভেরিয়েবল-অল্টারনেশন অপ্টিমাইজেশন পরীক্ষার মাধ্যমে, স্থিতিশীল নিমজ্জিত গাঁজন পরামিতি নির্ধারণ করা হয়েছিলCistanche deserticolaপাউডার: ইনোকুলেশন ভলিউম 3 mL (ব্যাকটেরিয়াল ঘনত্ব \\(10^{8}\\) CFU/g সাবস্ট্রেট), কঠিন-তরল অনুপাত 1 : 5 (g/mL), ইনকিউবেশন তাপমাত্রা 37 ডিগ্রি, গাঁজন সময় 5 দিন। এই অপ্টিমাইজ করা অবস্থার অধীনে, ইচিনাকোসাইড সামগ্রী উল্লেখযোগ্য উচ্চতা অর্জন করেছে (P < 0.01).

ইন-ভিট্রো দ্রবীভূত মূল্যায়ন নির্দেশ করে যে ফার্মেন্টেড পাউডারের নমুনা দ্রুত দ্রবীভূত হওয়ার হার এবং উচ্চতর ক্রমবর্ধমান দ্রবীভূত ডিগ্রী ইচিনাকোসাইডের অপরিবর্তিত কাঁচামালের তুলনায়, যা মৌখিক জৈব উপলভ্যতা উন্নত করার প্রতিশ্রুতিশীল সম্ভাবনা দেখায়।Cistanche deserticolaজৈব-সক্রিয় উপাদান।

এই গবেষণার জন্য একটি স্থিতিশীল প্রোবায়োটিক গাঁজন প্রযুক্তি প্রতিষ্ঠা করেCistanche deserticolaপাউডার, কাঁচা-এর কম-জৈব-উপলভ্যতার বাধা অতিক্রম করার জন্য নতুন প্রযুক্তিগত সমাধান প্রদান করেCistanche deserticolaভেষজ পাউডার, এবং উচ্চ-মূল্যের কার্যকরী-খাদ্য এবং খাদ্যতালিকা-সম্পূরক পণ্যগুলির বিকাশের জন্য পরীক্ষাগার-স্কেল পরীক্ষামূলক ভিত্তি সরবরাহ করেCistanche deserticola.

স্বীকৃতি

এই গবেষণা কাজটি শানডং প্রাদেশিক প্রযুক্তি উদ্ভাবন নির্দেশিকা প্রকল্প (গ্রান্ট নং YDZX2024111) দ্বারা আর্থিকভাবে সমর্থিত ছিল; শানডং প্রদেশের মূল গবেষণা ও উন্নয়ন কর্মসূচি (অনুদান নম্বর. 2023TSGC041, 2023TSGC053)।

স্বার্থের দ্বন্দ্ব

লেখক স্বার্থের কোন দ্বন্দ্ব ঘোষণা করেন না।

তথ্যসূত্র

[১] চীনা ফার্মাকোপিয়া কমিশন। গণপ্রজাতন্ত্রী চীনের ফার্মাকোপিয়া (ভলিউম I)[এম]। বেইজিং: চায়না মেডিকেল সায়েন্স প্রেস; 2020

[২] ওয়াং ওয়াই। ইঁদুরের স্পার্মাটোজেনিক কর্মহীনতার জন্য ইচিনাকোসাইডের কার্যকারিতা এবং প্রক্রিয়া গবেষণা [ডি]। ইয়ানজি: ইয়ানবিয়ান বিশ্ববিদ্যালয়; 2020

[৩] গুলিনুর মুটেলিফু, এট আল। ইচিনাকোসাইড[জে]-এর অ্যান্টি-এজিং মেকানিজম গবেষণা। চিনা জার্নাল অফ ইমার্জেন্সি ইন ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন, 2020, 20(3):140-143।

[৪] ঝাং এন, চেন জেড, হুই সি, এট আল। ইঁদুরে এমপিটিপি-প্ররোচিত নিউরো-ক্ষতির বিরুদ্ধে ইচিনাকোসাইডের নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব [জে]। নিউরোসাইকিয়াট্রিক ডিজিজ অ্যান্ড ট্রিটমেন্ট, 2021, 17:1779-1792।

[৫] চেন এইচ, ওয়াং ওয়াং। PI3K-Akt-eNOS সিগন্যালিং পাথওয়ে [J] এর মাধ্যমে মেরুদন্ডে আঘাতপ্রাপ্ত ইঁদুরের জন্য ইচিনাকোসাইডের নিউরো-প্রতিরক্ষামূলক প্রক্রিয়া। চাইনিজ জার্নাল অফ মডার্ন অ্যাপ্লাইড ফার্মেসি, 2021, 28(10): 1721-1725।

[৬] লি জি, ওয়ান বি, হান এল, এট আল। ইচিনাকোসাইড এলপিএস-প্ররোচিত অন্ত্রের এপিথেলিয়াম প্রদাহ এবং ইঁদুরের মডেলে কোষ অ্যাপোপটোসিসকে উপশম করেছে [জে]। বায়োমেডিসিন এবং ফার্মাকোথেরাপি, 2021,140:111622।

[৭] লি ডব্লিউ, ঝু জে, ঝাং ওয়াই, এট আল। ইচিনাকোসাইড mTOR/STAT3 পাথওয়ে [J] বাধা দেওয়ার মাধ্যমে লিভার ক্যান্সার কোষে টিউমার বিরোধী কার্যকলাপ প্রয়োগ করে। ইন্টারন্যাশনাল জার্নাল অফ মলিকুলার সায়েন্সেস, 2021, 22(1): 304।

[৮] ওয়াং ওয়াই, ওয়াং এফ, মা এল সি। এলসি-এমএস/এমএস[জে] এর উপর ভিত্তি করে মাইক্রোবিয়াল গাঁজন করার আগে এবং পরে ঐতিহ্যবাহী ভেষজ ওষুধের রাসায়নিক উপাদান বিশ্লেষণ। অণু, 2022,28(1)।

[৯] Cao G, Xu J, et al. দ্বারা ভেষজ গাঁজন সময় মাইক্রোবিয়াল সম্প্রদায় উত্তরাধিকার এবং ক্ষারক পদার্থ রূপান্তরল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারাম[জে]। ফলিত মাইক্রোবায়োলজিতে চিঠিপত্র, 2020,70(4):318‑325।

[১০] Okamoto T, Sugimoto M, Noda S, et al. ইন্টারলেউকিন-8 রিলিজ ইনহিবিটর তৈরি হয়আর্টেমিসিয়া প্রিন্সেপসসঙ্গে fermented pampanini নির্যাসল্যাকটোব্যাসিলাস প্লান্টারামSN13T[জে]। মাইক্রোবায়োলজিতে ফ্রন্টিয়ার্স, 2020।