কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভ অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইড দিয়ে চিকিত্সা করা কিডনিতে টিস্যু প্রক্রিয়াকরণ থেকে উদ্ভূত ভ্যাকুওলেশন হিসাবে উপস্থিত হওয়া আর্টিফ্যাক্টগুলিকে প্রতিরোধ করে Ⅰ

বিমূর্ত: অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইড(ASO) থেরাপিগুলিকে একটি নতুন চিকিত্সা পদ্ধতি হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছেজটিল রোগ. ভিতরেকিডনি ASO দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, বেসোফিলিক দানা ছাড়াও ভ্যাকুওলগুলি প্রায়শই প্রক্সিমাল টিউবুলে পরিলক্ষিত হয়। কিছু প্রতিবেদনে বর্ণনা করা হয়েছে যে এই ভ্যাকুওলগুলি সম্ভবত একটি গৌণ ঘটনা হতে পারে যার ফলেASOs নিষ্কাশনটিস্যু প্রক্রিয়াকরণের সময়। এই গবেষণায়, আমরা কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভ বা 4% প্যারাফর্মালডিহাইড ফসফেট বাফার (PFA) এর সাথে 10% নিরপেক্ষ-বাফারযুক্ত ফর্মালডিহাইড দ্রবণ (NBF) এর সাথে ফিক্সেশনের পরে রেনাল মরফোলজির তুলনা করেছি। মহিলা স্প্রাগ-ডাউলি ইঁদুর, 1 বা 2 সপ্তাহের জন্য 50 মিলিগ্রাম/কেজি লকড নিউক্লিক অ্যাসিড সহ অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইডস (এলএনএ-এএসও) সহ চারবার শিরায় চিকিত্সা করা হয়েছিল, পরীক্ষা করা হয়েছিল। মাইক্রোস্কোপিকভাবে, প্রক্সিমাল টিউবুলে ভ্যাকুওল এবং বেসোফিলিক গ্রানুলগুলি NBF এর সাথে স্থির কিডনিতে পরিলক্ষিত হয়েছিল। বেসোফিলিক গ্রানুলগুলি ASO-এর সঞ্চয়নের নির্দেশক। তদুপরি, কিছু শূন্যস্থানে ক্ষীণ বেসোফিলিক দানাও রয়েছে, যা পরামর্শ দেয় যে ভ্যাকুওলগুলি ASO-এর সঞ্চয়ের সাথে প্রাসঙ্গিক ছিল। যদিও প্রক্সিমাল টিউবুলে মাঝারি ভ্যাকুয়ালেশন পরিলক্ষিত হয়েছিল, তবে বেশিরভাগ ভ্যাকুয়ালেটেড এপিথেলিয়া কিডনির আঘাতের অণুর জন্য নেতিবাচক ছিল-1 ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিংয়ে। কার্নোভস্কির ফিক্সেশনের সাপেক্ষে নমুনাগুলিতে প্রক্সিমাল টিউবুলে ভ্যাকুওলগুলি পরিলক্ষিত হয়নি, যদিও বেসোফিলিক গ্রানুলগুলি পরিলক্ষিত হয়েছিল। পিএফএ ফিক্সেশনের সাপেক্ষে নমুনাগুলিতে, প্রক্সিমাল টিউবুলে ভ্যাকুওল এবং বেসোফিলিক গ্রানুলগুলি পরিলক্ষিত হয়েছিল, এনবিএফ ফিক্সেশনের সাপেক্ষে নমুনাগুলির অনুরূপ। সামগ্রিকভাবে, আমাদের অনুসন্ধানগুলি প্রচলিত এনবিএফ ফিক্সেশন ব্যবহার করার সময় টিস্যু প্রক্রিয়াকরণের সময় নিদর্শনগুলির কারণে শূন্যতার অত্যধিক মূল্যায়নের সম্ভাবনা প্রদর্শন করেছে। কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভকে সত্যিকারের নেফ্রোটক্সিসিটি থেকে কৃত্রিম ভ্যাকুওলগুলিকে আলাদা করার জন্য একটি দরকারী বিকল্প হিসাবে বিবেচনা করা হয়। (DOI: 10.1293/tox।{11}}; J Toxicol Pathol 2021; 34: 367–371)

কীওয়ার্ড:অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইড, আর্টিফ্যাক্ট,কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভ, ভ্যাকুয়ালেশন, বেসোফিলিক গ্রানুল, কিডনি

সিস্টানচে সাপ্লিমেন্ট কিডনি ফাংশন সাপোর্ট সাপ্লিমেন্ট PhGs75% Ech 30% অ্যাক্ট 12%

সম্প্রতি, অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইড (এএসও) থেরাপিগুলি জটিল রোগের চিকিত্সার জন্য নতুন পদ্ধতি হিসাবে প্রতিষ্ঠিত হয়েছে 1, 2. ASO হল সংক্ষিপ্ত, কৃত্রিম, একক-স্ট্র্যান্ডেড অলিগোডিঅক্সিনিউক্লিওটাইড যা রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিডের সাথে আবদ্ধ হয় এবং জিনের অভিব্যক্তিকে দমন করে।

বিষাক্ততাগতভাবে, ASO-প্ররোচিত বিষাক্ততাগুলিকে সংকরকরণ-নির্ভর বিষাক্ততায় শ্রেণীবদ্ধ করা হয়, যা ASO ক্রম সম্পর্কিত, এবং সংকরকরণ-স্বাধীন বিষাক্ততা, যা রাসায়নিক পরিবর্তনের সাথে সম্পর্কিত। হাইব্রিডাইজেশন-স্বাধীন বিষাক্ততা তিনটি প্রধান প্রক্রিয়া দ্বারা প্ররোচিত হয়: 1) ASO সঞ্চয়ন, 2) প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাব, এবং 3) অ্যাপটামেরিক বাইন্ডিং প্রভাব4। ASO-এর জমে প্রাথমিকভাবে লিভার এবং কিডনিতে পরিলক্ষিত হয় এবং অত্যধিক জমা এই অঙ্গগুলির কর্মহীনতার দিকে পরিচালিত করে। প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাবটি ইঁদুর এবং বানরের টোল-সদৃশ রিসেপ্টরের সাথে আবদ্ধ হওয়ার মাধ্যমে বা বানর6-এ ASO-এর দ্বারা ফ্যাক্টর H-এর বাধার মাধ্যমে বিকল্প পরিপূরক পথের সক্রিয়করণের মাধ্যমে সহজাত ইমিউন সিস্টেমের উদ্দীপনা দ্বারা প্ররোচিত হয়। অ্যাপটামেরিক বাইন্ডিং ইফেক্ট প্লেটলেট অ্যাক্টিভেশন এবং অ্যাগ্রিগেশন/থ্রম্বোসাইটোপেনিয়াকে প্লেটলেট-নির্দিষ্ট রিসেপ্টর7কে আবদ্ধ করতে প্ররোচিত করে। তদুপরি, হেপাটোসাইটের অন্তঃকোষীয় প্রোটিনের সাথে অ্যাপটামেরিক আবদ্ধতাকে হেপাটোটক্সিসিটি 8-10 এর অন্যতম কারণ হিসাবে বিবেচনা করা হয়। এই বিষাক্ততা সনাক্ত করার জন্য, গবেষকরা বেশ কিছু নন-ক্লিনিকাল অ্যাসেস তৈরি করেছেন; এর মধ্যে, হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরীক্ষা হল ASO জমা শনাক্ত করার জন্য সবচেয়ে সংবেদনশীল পরীক্ষাগুলির মধ্যে একটি।

হিস্টোপ্যাথোলজিক্যালভাবে, এএসও-এর জমে সাধারণত লিভারের কুফফার কোষের সাইটোপ্লাজমে বা কিডনির প্রক্সিমাল টিউবুলে বেসোফিলিক দানা হিসাবে পরিলক্ষিত হয়। বেসোফিলিক দানাগুলির বিশিষ্ট সঞ্চয়ন একটি বর্ধিত ঘটনা বা অবক্ষয়জনিত পরিবর্তনের তীব্রতার সাথে সম্পর্কযুক্ত, যা সাধারণত কিডনির প্রক্সিমাল টিউবুলার এপিথেলিয়ামের শূন্যতা বা অবক্ষয়/নেক্রোসিস হিসাবে পরিলক্ষিত হয়। শুধুমাত্র বেসোফিলিক দানাকে বিষাক্তভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে মনে করা হয় না; অতএব, এএসও-সম্পর্কিত বিষাক্ততার মূল্যায়নের জন্য অবক্ষয়জনিত পরিবর্তনগুলি থেকে বেসোফিলিক গ্রানুল সঞ্চয়ের পার্থক্য গুরুত্বপূর্ণ।

ভ্যাকুওল, যা প্রায়শই ASO দিয়ে চিকিত্সা করা সাইনোমলগাস বানরের কিডনির প্রক্সিমাল টিউবুলে পরিলক্ষিত হয়, এতে বেসোফিলিক উপাদান থাকে এবং কোষের মধ্যে বেসোফিলিক গ্রানুলস 11, 12 হিসাবে একই সাধারণ বিতরণ প্রদর্শন করে। কয়েকটি প্রতিবেদনে পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে ফিক্সেশন প্রক্রিয়া প্রভাবিত করতে পারে। ফ্যাগোলাইসোসোমাল কম্পার্টমেন্টের মধ্যে ASO জমা হওয়ার উপস্থিতি 5, 11। অতিরিক্তভাবে, হেনরি এট আল। এবং এঙ্গেলহার্ট বর্ণনা করেছেন যে প্রক্সিমাল টিউবুলে ভ্যাকুওলগুলি প্রক্রিয়াকরণের সময় ASO-এর নিষ্কাশনের ফলে একটি গৌণ ঘটনা হতে পারে কারণ প্যারাফর্মালডিহাইড/গ্লুটারাল্ড হাইড পারফিউশন-ফিক্সড কিডনি 5, 11. টিউমোনোসিলে ভ্যাকুওলগুলি চিকিত্সার সময় অনুপস্থিত থাকে। মিপোমারসেনের সাথে ফিক্সেশন প্রক্রিয়ার সময় উপস্থিত হওয়ার অনুমান করা হয়েছিল13।

এইভাবে, যদিও কিছু ক্ষেত্রে ASO চিকিত্সার কারণে শূন্যতা একটি নিদর্শন হতে পারে, এই অনুমানটি স্পষ্টভাবে প্রমাণিত হয়নি, এবং কোন রিপোর্টে বিষাক্ত মূল্যায়নের জন্য উপযুক্ত স্থির পদ্ধতি চিহ্নিত করা হয়নি। তদনুসারে, এই গবেষণায়, আমরা কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভ বা 4% প্যারাফর্মালডিহাইড ফসফেট বাফার (PFA) এর সাথে 10% নিরপেক্ষ-বাফারযুক্ত ফর্মালডিহাইড দ্রবণ (NBF) এর সাথে ফিক্সেশনের পরে রেনাল মরফোলজির তুলনা করেছি। অতিরিক্তভাবে, আমরা কার্নোভস্কির ফিক্সেটিভের ইউটিলিটি প্রদর্শন করেছি একটি বিকল্প ফিক্সেটিভ হিসাবে আর্টিফ্যাক্ট থেকে উদ্ভূত ভ্যাকুয়ালেশন প্রতিরোধ করার জন্য।

চার্লস রিভার ল্যাবরেটরিজ জাপান ইনকর্পোরেটেড (কানাগাওয়া, জাপান) থেকে চার সপ্তাহ বয়সী মহিলা স্প্রাগ-ডাওলি ইঁদুরগুলি কেনা হয়েছিল এবং পরীক্ষাগারের অবস্থার সাথে খাপ খাইয়ে নেওয়া হয়েছিল। প্রাণীগুলিকে নিয়ন্ত্রিত অবস্থায় রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল (12-ঘণ্টার আলো/অন্ধকার চক্র, 23 ± 2 ডিগ্রি তাপমাত্রা, 50 ± 25% আপেক্ষিক আর্দ্রতা) এবং একটি আদর্শ বাণিজ্যিক খাদ্যে বিনামূল্যে প্রবেশের অনুমতি দেওয়া হয়েছিল (স্বয়ংক্রিয়ভাবে CR-LPF; ওরিয়েন্টাল ইস্ট কোং, লিমিটেড, টোকিও, জাপান) এবং ট্যাপ ওয়াটার। নিম্নলিখিত চারটি দলে বিশটি প্রাণী বরাদ্দ করা হয়েছিল (প্রত্যেকটিতে পাঁচটি প্রাণী সহ): 1-সপ্তাহের স্যালাইন-ট্রিটেড গ্রুপ (কন্ট্রোল- 1W), 2-সপ্তাহ স্যালাইন-ট্রিটেড গ্রুপ (নিয়ন্ত্রণ{ {14}}W), অ্যান্টিসেন্স অলিগোনিউক্লিওটাইড (LNA-ASO)-চিকিত্সা করা গ্রুপ (ASO-1W), এবং 2- সপ্তাহের LNA ASO-চিকিত্সাযুক্ত গ্রুপে 1-সপ্তাহ লক করা নিউক্লিক অ্যাসিড (ASO-2W)। 50 মিলিগ্রাম/কেজি এলএনএ-এএসও প্রশাসনের সূচনার সময় প্রাণীদের বয়স ছিল 5 সপ্তাহ। LNA-ASO নিম্নলিখিত নিয়ম অনুসারে মোট চারবার শিরায় দেওয়া হয়েছিল: ASO-2W গ্রুপে দিন 1, 4, 8, এবং 11; এবং দিন 1, 2, 3, এবং 4 ASO-1W গ্রুপে। কন্ট্রোল-1ডব্লিউ এবং এএসও-1ডব্লিউ গ্রুপের পশু 7 তম দিনে বলি দেওয়া হয়েছিল। 14. প্রতিটি টার্মিনাল নেক্রোপসিতে, ক্লিনিকাল প্যাথলজির জন্য রক্তের নমুনাগুলি আইসোফ্লুরেন দিয়ে গভীর অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে পেটের ভেনা কাভা থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। রক্তের নমুনা নেওয়ার পরে, সমস্ত ইঁদুরকে অবিলম্বে পেটের মহাধমনী কেটে শ্বাস-প্রশ্বাসের মাধ্যমে euthanized করা হয়েছিল। শরীরের বাহ্যিক পৃষ্ঠ, বক্ষ এবং পেটের গহ্বর এবং ভিসেরা ম্যাক্রোস্কোপিকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল, এবং বাম কিডনি অপসারণ করা হয়েছিল এবং মাইক্রোস্কোপিক পরীক্ষার জন্য প্রসেস করা হয়েছিল। সমস্ত পদ্ধতিগুলি মিত্সুবিশি তানাবে ফার্মা কর্পোরেশনের পরীক্ষামূলক প্রাণী এবং প্রাণীর পরীক্ষা-নিরীক্ষার খাওয়ানো এবং সংরক্ষণের নিয়ম অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল।

রক্তের নমুনা 4 ডিগ্রীতে সেন্ট্রিফিউগেশন করে সিরামের নমুনা পাওয়া গেছে। রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN) এবং ক্রিয়েটিনিন (CRE) মাত্রা নির্ণয় করতে একটি TBA-2000FR যন্ত্র (Canon Medical Systems Corporation, Tochigi, Japan) ব্যবহার করে সিরাম জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণ করা হয়েছিল

নিম্নরূপ তিনটি ফিক্সেটিভ সমাধান ব্যবহার করে কিডনি স্থির করা হয়েছিল: কিডনিকে তিনটি অংশে আড়াআড়িভাবে বিভক্ত করার পর, রেনাল পেলভিস সহ মাঝখানের অংশটি 5 দিনের জন্য 10% NBF এ স্থির করা হয়েছিল; কর্নোভস্কির ফিক্সেটিভ (মুটো পিওর কেমিক্যালস কোং লিমিটেড, টোকিও, জাপান) এ ক্র্যানিয়াল অংশটি স্থির করা হয়েছিল; এবং কাউডাল অংশটি 4% পিএফএ-তে 17 ঘন্টার জন্য 4 ডিগ্রিতে স্থির করা হয়েছিল এবং তারপর 24 ঘন্টার জন্য 10% NBF-এ স্থাপন করা হয়েছিল। প্রতিটি নির্দিষ্ট নমুনা ডিহাইড্রেটেড এবং প্যারাফিনে এমবেড করা হয়েছিল। টিস্যু বিভাগগুলি হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (এইচএন্ডই) দাগের জন্য প্রস্তুত করা হয়েছিল। কিডনির আঘাতের অণুকে লক্ষ্য করে অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং করা হয়েছিল-1 (KIM-1; R&D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA; 1:300 dilution) এবং লাইসোসোমাল-সম্পর্কিত মেমব্রেন প্রোটিন 2 (LAMP{{ 13}}; Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA; 1:1000 dilution) অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধারের পরে (সাইটরেট বাফার, pH 6.0, 10 মিনিটের জন্য উত্তপ্ত বা 20 মিনিটের জন্য চাপে)। হিস্টোফাইন সিম্পল স্টেইন র্যাট ম্যাক্স পিও (নিচিরেই বায়োসায়েন্সেস ইনক।, টোকিও, জাপান) সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

Wecistanche এর সহায়ক পরিষেবা:

ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/টেল:+86 15292862950

আরও নির্দিষ্ট বিবরণের জন্য কেনাকাটা করুন:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop