জিনসেনোসাইড Rh23 এর বিচ্ছিন্নতা এবং পরিমাপ, প্যানাক্স জিনসেং এর পাতা থেকে একটি নতুন অ্যান্টি-মেলানোজেনিক যৌগ

বিমূর্ত:

একটি নতুন জিনসেনোসাইড, যার নাম ginsenoside Rh23 (1), এবং 20-O- -D-glucopyranosyl-3 ,6 , 12 ,20 ,25-পেন্টাহাইড্রোক্সিডামমার-23-ene (2) হাইড্রোপনিক প্যানাক্স জিনসেং এর পাতা থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল। যৌগগুলিকে বিভিন্ন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং তাদের গঠনগুলি স্পেকট্রোস্কোপিক পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে নির্ধারিত হয়েছিল, যার মধ্যে উচ্চ-রেজোলিউশন কোয়াড্রপোল/ফ্লাইট ভর স্পেকট্রোমেট্রির সময় (HR-QTOF/MS), নিউক্লিয়ার ম্যাগনেটিক রেজোন্যান্স (NMR) স্পেকট্রোস্কোপি এবং ইনফ্রারেড (IR) স্পেকট্রোস্কোপি অন্তর্ভুক্ত ছিল। . মেলানোজেনিক বিরোধী কার্যকলাপ নির্ধারণ করতে, মেলান-এ চিহ্নিত যৌগগুলির সাথে চিকিত্সা করা কোষে মেলানিনের উপাদানের পরিবর্তন পরীক্ষা করা হয়েছিল।

অতিরিক্তভাবে, আমরা ভিভো মডেলের জেব্রাফিশে পিগমেন্টেশনে জিনসেনোসাইড আরএইচ 23 এর মেলানিন প্রতিরোধক প্রভাবগুলি তদন্ত করেছি। যৌগ 1 মেলান-এ কোষে 37।{4}} শতাংশ মেলানোজেনেসিস প্রতিরোধ করে 80 µM এ এবং জেব্রাফিশ মডেলে শরীরের পিগমেন্টেশনে বাধাও উপস্থাপন করে। যদিও যৌগ 2 যৌগ 1 এর তুলনায় সামান্য কম বাধামূলক কার্যকলাপ দেখিয়েছে, এটি মেলান-এ কোষ এবং জেব্রাফিশ মডেলের মেলানোজেনেসিস উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে হাইড্রোপনিক পি. জিনসেং থেকে বিচ্ছিন্ন যৌগগুলি ইন ভিট্রো এবং ভিভো সিস্টেমের মাধ্যমে নতুন ত্বক-সাদা যৌগ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। অধিকন্তু, এই গবেষণাটি পরিমাণগত বিশ্লেষণের জন্য MS-ভিত্তিক যৌগ 1 এর উপযোগিতা প্রদর্শন করেছে। Ginsenoside Rh23 (1) হাইড্রোপনিক P. ginseng এর পাতায় 0.31 mg/g মাত্রায় পাওয়া গেছে।

মেলানিনের জন্য, আমরা দেখেছি যে সিস্টানচে টাইরোসিনেজের কার্যকলাপকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে, যা ত্বকের মেলানিনের জৈব সংশ্লেষণে প্রধান হার-সীমিত এনজাইম এবং তামা এবং প্রোটিনের একটি জটিল। এটি হাইড্রোক্সিলেট টাইরোসিন, শরীরের মেলানিন উৎপাদনের প্রধান কাঁচামাল, এল-ডোপা তৈরি করতে পারে এবং তারপর ডোপাকে ডোপাকুইননে অক্সিডাইজ করতে পারে। Dopaquinone বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলির একটি সিরিজের মধ্য দিয়ে যায়, পুনর্বিন্যাস করে এবং পলিমারাইজ করে এবং অবশেষে প্রোটিনের সাথে মিলিত হয়ে মেলানিন রঙ্গকগুলির একটি সিরিজ তৈরি করে যা ব্রাউনিং ঘটায়। মেলানিন মানবদেহের ত্বকের রঙ নির্ধারণে সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ উপাদান। অত্যধিক সংশ্লেষণের ফলে রঙ্গকযুক্ত ত্বকের রোগ যেমন ফ্রেকলস, ক্লোসমা, বয়সের দাগ এবং মেলানোমা তৈরি হতে পারে। তাই, টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের প্রতিবন্ধকতার উপর গবেষণার মাধ্যমে, ত্বকের রঙ্গকতা প্রতিরোধের কার্যকর উপাদানগুলিকে স্ক্রিন করা যেতে পারে, যাতে দেখা যায় যে Cistanche deserticola-এর মোট গ্লাইকোসাইডগুলি ত্বকের রঙ্গকতাকে বাধা দেয় এবং সৌন্দর্যকে ঝকঝকে করে।

cistanche ডোজ পণ্য ক্লিক করুন

কীওয়ার্ড:

ginsenoside Rh23; প্যানাক্স জিনসেং; NMR; UPLC-QTOF/MS; জেব্রাফিশ; পরিমাণগত বিশ্লেষণ.

1। পরিচিতি

Panax ginseng CA Meyer এশিয়ান দেশগুলির একটি খুব বিখ্যাত ঐতিহ্যগত ঔষধি ভেষজ। প্যানাক্স একটি "প্যানাসিয়া" থেকে উদ্ভূত হয়, যার অর্থ সমস্ত রোগের নিরাময়। P. ginseng একটি বহুবর্ষজীবী ভেষজ উদ্ভিদ যা Araliaceae পরিবারের অন্তর্গত [1]। পি জিনসেং-এর চার থেকে ছয় বছর বয়সী শিকড় প্রধানত থেরাপিউটিক উদ্দেশ্যে ব্যবহৃত হয়। জুন মাসে ফুল ফোটে এবং পাতাগুলি একটি তালু আকৃতি ধারণ করে। পি জিনসেং মূলত কোরিয়া, চীন এবং জাপান সহ পূর্ব এশিয়ায় চাষ করা হয়েছে [২]। আজ অবধি, জিনসেং শিকড়, পাতা এবং বেরির রাসায়নিক উপাদান সম্পর্কে অনেক গবেষণা রিপোর্ট করা হয়েছে; 100 টিরও বেশি ধরণের জিনসেনোসাইড বিচ্ছিন্ন করা হয়েছে। পি জিনসেং-এর বিভিন্ন জৈব-অ্যাকটিভিটি রিপোর্ট করা হয়েছে, যেমন ইমিউনোমোডুলেটরি ক্রিয়াকলাপ বৃদ্ধি, পুষ্টির শক্তিশালীকরণ, লিভার ফাংশনের উন্নতি, অ্যান্টি-ডায়াবেটিস, অ্যান্টি-ক্যান্সার, অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোটিক, এবং অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট কার্যকলাপ [3-10]।

বর্তমানে, উচ্চ মানের সুস্বাস্থ্য-সম্পর্কিত কৃষি পণ্যের প্রতি আগ্রহ ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পাচ্ছে, যা জিনসেং-এর হাইড্রোপনিক চাষের দিকে পরিচালিত করছে। হাইড্রোপনিক চাষের সুবিধা রয়েছে একটি সহজ চাষ প্রক্রিয়া এবং মাটি চাষের তুলনায় একটি ছোট বৃদ্ধির সময়কাল। হাইড্রোপনিক জিনসেং এমন একটি সিস্টেমে মাত্র 2-4 মাস প্রয়োজন যা তাপমাত্রা নিয়ন্ত্রণ করে, কীটনাশকমুক্ত, আর্দ্র, হালকা, জৈব উপাদান রয়েছে ইত্যাদি। [১১]। মাটি-চাষের জিনসেং এর পাতা ঔষধি উদ্দেশ্যে এবং কার্যকরী সবজির জন্য ব্যবহার করা হয় না, যখন হাইড্রোপনিক জিনসেং এর পাতা ব্যবহার করা যেতে পারে।

In a previous study, the contents and composition of ginsenosides in different parts, such as leaves, roots, and fruits of ginseng, were investigated after a short-term hydroponic system [12]. The total ginsenoside content of the ginseng leaves was found to be significantly higher at 15.30%, while the content of the ginseng roots was at 1.27%. Additionally, the contents of the major ginsenosides components produced in the ginseng leave cultured in the hydroponic system were observed in the order of Rg1 > Rd > Re > Rc > Rb2 > Rg2 >Rb1 > Rh1 > Rf [১১]। উপসংহারে, হাইড্রোপনিক অবস্থার ফলে জিনসেনোসাইডের পরিমাণ বেশি ছিল, এবং পাতায় মোট জিনসেনোসাইড উপাদান শিকড়ের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, পরামর্শ দেয় যে জিনসেং পাতাগুলি কার্যকরী শাকসবজি এবং ঔষধি ভেষজগুলির একটি ভাল উৎস হতে পারে।

বেশ কিছু পরিচিত ঝকঝকে যৌগ, যেমন আরবুটিন এবং কোজিক অ্যাসিড, মেলানোজেনেসিস [১৩] কমাতে তাদের কার্যকারিতার জন্য তদন্ত করা হয়েছে। দুর্ভাগ্যবশত, কোজিক অ্যাসিডের কার্সিনোজেনিক সম্ভাবনা এবং আরবুটিনের নিরাপত্তা এবং পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া উভয়ের কারণে নিরাপদ এবং আরও কার্যকর ত্বক-সাদা করার এজেন্টগুলি খুঁজে বের করা প্রয়োজন [14]। এইভাবে, প্রসাধনী শিল্পে [15,16] নতুন প্রাকৃতিক পণ্যগুলির বিকাশের জন্য প্রচুর মনোযোগ ক্রমাগত তদন্ত করা হয়েছে। বেশ কিছু গবেষণায় মাটিতে জন্মানো পি জিনসেং থেকে মেলানিন সংশ্লেষণের বাধার কথা জানানো হয়েছে [১৭-২০]।

যাইহোক, এই গবেষণাগুলি সুপরিচিত যৌগগুলির সাথে রিপোর্ট করা হয়েছিল, যেমন সিনামিক অ্যাসিড এবং ফেনোলিক যৌগগুলি, এবং হাইড্রোপনিক পি জিনসেং (এইচপিজিএল) এর পাতাগুলি থেকে সাদা করার কার্যকলাপের রিপোর্ট করা হয়নি। আমাদের চলমান কাজ এইচপিজিএল থেকে ছোট জিনসেনোসাইডগুলিকে বিচ্ছিন্ন করার দিকে পরিচালিত করেছে। সাধারণত, গৌণ বা ট্রেস পরিমাণে জিনসেনোসাইডগুলি HPLC দিয়ে সনাক্ত করা যায় না। অন্যথায়, বিশ্লেষণাত্মক সময়টি খুব দীর্ঘ, যা জিনসেং মশলা [21,22] এ জিনসেনোসাইডের যোগ্যতা অর্জনের জন্য সুবিধাজনক নয়। অভিনব যৌগগুলির দ্রুত পরিমাপ করার জন্য, একটি দ্রুত এবং সংবেদনশীল পদ্ধতি, যা পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে অভিনব যৌগের ট্রেস পরিমাণ সনাক্ত করতে পারে, প্রতিষ্ঠা করা উচিত। বর্তমান সমীক্ষায়, একটি সংবেদনশীল আল্ট্রাহাই পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি এবং কোয়াড্রপোল/টাইম অফ ফ্লাইট মাস স্পেকট্রোমেট্রি (UPLC-QTOF-MS) পদ্ধতির সাথে নতুন যৌগ পরিমাপ করার জন্য প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল।

উপরোক্ত বর্ণনার উপর ভিত্তি করে, এই কাজে, বিচ্ছিন্নতা, এবং একটি নতুন যৌগের সনাক্তকরণ, যার মধ্যে ভৌত বৈশিষ্ট্য এবং পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছে, বর্ণালীবীক্ষণিক পদ্ধতি দ্বারা প্রকাশ করা হয়েছিল, এবং তাদের অ্যান্টি-মেলানোজেনিক কার্যকলাপগুলি ভিট্রো এবং ভিভো সিস্টেমের মাধ্যমে তদন্ত করা হয়েছিল।

2. ফলাফল এবং আলোচনা

হাইড্রোপনিক প্যানাক্স জিনসেং (এইচপিজিএল) এর পাতাগুলিকে জলীয় MeOH দিয়ে বের করা হয়েছিল এবং যথাক্রমে ইথাইল অ্যাসিটেট (EtOAc), n-বুটানল (n-BuOH) এবং H2O ভগ্নাংশে বিভক্ত করা হয়েছিল। n-BuOH ভগ্নাংশের বারবার SiO2 এবং ODS কলাম ক্রোমাটোগ্রাফিগুলি একটি নতুন জিনসেনোসাইড (1) প্রদান করে এবং একটি বিরল জিনসেনোসাইড (2) HPGL এর EtOAc ভগ্নাংশ থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল।

যৌগ 1, সাদা পাউডার (মিথানল), 10 শতাংশ H2SO4 স্প্রে করে এবং গরম করে TLC-তে বেগুনি রঙ দেখায়। নেতিবাচক QTOF/MS-এ আণবিক সূত্রটি কোয়াসি-মলিকুলার আয়ন পিক m/z 713.44723 [M প্লাস COOH]− থেকে C37H64O10 হতে নির্ধারিত হয়েছিল। IR বর্ণালী একটি হাইড্রক্সিল গ্রুপ (3377 cm−1 ) এবং একটি ডাবল বন্ড (1647 cm−1) উপস্থিতির পরামর্শ দিয়েছে। 1H-NMR বর্ণালী (সারণী 1 এবং পরিপূরক উপাদান) দুটি ওলেফিন মিথিন প্রোটন সংকেত (δH 6.02, 5.64), তিনটি অক্সিজেনযুক্ত মিথিন প্রোটন সংকেত (δH 4.38, 4.03, 3.49), একটি মেথক্সি প্রোটন সংকেত এবং আটδH (38) সংকেত দেখিয়েছে। একক মিথাইল প্রোটন সংকেত (δH 1.94, 1.55, 1.43, 1.33, 1.31, 1.14, 1.04, 0.92), নির্দেশ করে যৌগ 1-এর একটি টেট্রাসাইক্লিক ট্রাইটারপিন মোয়েটি রয়েছে যার মধ্যে একটি ট্রান্স কনফর্মেশন এবং তিনটি হাইড্রোক্সিল রয়েছে।

উপরন্তু, δH 1.94 (H-28) এ একটি মিথাইল প্রোটন সংকেতের রাসায়নিক স্থানান্তর থেকে যৌগ 1 একটি প্রোটোপ্যানাক্স্যাট্রিওল (PPT)-টাইপ বলে নিশ্চিত করা হয়েছে। প্রোটোপ্যানাক্সাডিওল (PPD)-তে H-28-এর রাসায়নিক পরিবর্তন সাধারণত ca δH 1.30 [২৩] এ পরিলক্ষিত হয়। তদ্ব্যতীত, একটি হেমিয়াসিটাল প্রোটন সংকেত (δH 5.15), এবং δH 4.45–3.95-এ বেশ কয়েকটি অক্সিজেনযুক্ত মিথিন এবং মিথিলিন প্রোটন সংকেত একটি চিনির মোয়ায়েটির সংকেত হিসাবে পরিলক্ষিত হয়েছিল। অ্যানোমার প্রোটন সিগন্যাল (J=7.6 Hz) এর কাপলিং ধ্রুবক থেকে, চিনির আধিক্যের হেমিয়াসিটাল প্রোটন এবং H-2 উভয়ই একটি অক্ষীয় বিন্যাসে ছিল। উপরে উল্লিখিত তথ্যের সংমিশ্রণটি যৌগ 1কে প্রোটোপ্যানাক্স্যাট্রিওল অ্যামিনোগ্লাইকোসাইড বলে উপসংহারে পৌঁছেছে। 13C-NMR স্পেকট্রাম ট্রাইটারপেন, মেথক্সি এবং হেক্সোজ মোয়েটিসের কারণে 37টি কার্বন সংকেত প্রদর্শন করেছে। দুটি ওলেফিন মিথিন কার্বন (δC 138.5 (C-24), 126.8 (C-23)), একটি অক্সিজেনযুক্ত কোয়াটারনারি কার্বন (δC 74.9 (C-25)), তিনটি অক্সিজেনযুক্ত মিথিন কার্বন (δC 78.5 (C-3), 7{{90}}.3 (C-12), 67.7 (C-6)), একটি মেথক্সি কার্বন (δC 50.2 ( 25-OCH3)), এবং আটটি মিথাইল কার্বন (δC 31.9 (C-28), 26.3 (C-27), 26.1 (C-26), 23.0 (C{{ 57}}), 17.6 (C-18), 17.4 (C-19), 17.3 (C-30), 16.4 (C-29)) সংকেতগুলির জন্য পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল aglycon moiety. যৌগ 1-এর NMR ডেটা যৌগ 2-এর মতই ছিল, অক্সিজেনযুক্ত চতুর্মুখী কার্বনের রাসায়নিক স্থানান্তর ব্যতীত, অর্থাৎ C-25। উপরন্তু, কার্বন সংকেত হেমিয়াসিটাল (δC 98.3, (C-10 )), চারটি অক্সিজেনযুক্ত মিথিন (δC 78.9 (C-30), 78.2 (C{{82) থেকে চিনিটিকে -গ্লুকোপাইরানোজ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল }} ), 75.2 (C-20), 71.6 (C-40 )), এবং একটি অক্সিজেনযুক্ত মিথিলিন (δC 63.0 (C-60 ))। গ্রেডিয়েন্ট হেটেরোনিউক্লিয়ার মাল্টিপল বন্ড কোরিলেশন (gHMBC) বর্ণালীতে, অ্যানোমেরিক প্রোটন সিগন্যাল (δH 5.15 (H-10)) এবং এগ্লাইকনের অক্সিজেনযুক্ত চতুর্মুখী কার্বন সংকেত (δC 83.0 (C) এর মধ্যে একটি দীর্ঘ-সীমার পারস্পরিক সম্পর্ক পরিলক্ষিত হয়েছে। -20), ইঙ্গিত করে যে -গ্লুকোপাইরানোজ সি{100}} (চিত্র 1) এর হাইড্রক্সিলের সাথে যুক্ত ছিল।

উপরন্তু, মেথক্সি প্রোটন সিগন্যাল (δH 3.18 (25-OCH3)) এবং অক্সিজেনযুক্ত কোয়াটারনারি কার্বন সিগন্যাল (δc 74.9 (C-25)) এর মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক নির্দেশ করে যে মেথক্সি C{{ এর সাথে যুক্ত ছিল 7}} (চিত্র 1)। উপরের তথ্যের উপর ভিত্তি করে, 1-এর রাসায়নিক গঠন নির্ধারণ করা হয়েছিল 20-O- -D-গ্লুকোপাইরানোসিল-3 ,6 ,12 ,20 -টেট্রাহাইড্রক্সি-25- methoxydammar-23-ene, এবং ginsenoside Rh23 নামে নামকরণ করা হয়েছে। যৌগ 2 চিহ্নিত করা হয়েছিল 20-O- -D-গ্লুকোপাইরানোসিল-3 ,6 ,12 ,20 ,25- পেন্টাহাইড্রোক্সিডামার-23-এনএমআরের তুলনা থেকে সাহিত্যে রিপোর্ট করা MS ডেটা [23,24] (চিত্র 1)। যৌগ 1 এবং 2, প্রথমবারের জন্য, HPGL থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল।

জিনসেনোসাইড Rh23 এর বিশুদ্ধতা UPLC বিশ্লেষণের দ্বারা সনাক্ত করা শিখর অঞ্চলগুলির স্বাভাবিককরণের দ্বারা 99 শতাংশের বেশি হওয়ার জন্য নির্ধারিত হয়েছিল। যেহেতু UPLC-OTOF/MS জিনসেনোসাইড Rh23 সনাক্তকরণের জন্য একটি উপযুক্ত হাতিয়ার হিসাবে প্রমাণিত হয়েছে, তাই HPGL নির্যাসের উপাদানগুলির বিচ্ছেদ UPLC-OTOF/MS দ্বারা নেতিবাচক-আয়ন মোডে সঞ্চালিত হয়েছিল। চিত্র 2 জিনসেনোসাইড Rh23 এর একটি সাধারণ মোট আয়ন ক্রোমাটোগ্রাম (TIC) দেখায় এবং ভর সনাক্তকরণ সহ নির্যাস।

বিভিন্ন ঘনত্বের স্তরে জিনসেনোসাইড Rh23 এর জন্য একটি রৈখিক ক্রমাঙ্কন বক্ররেখা প্রাপ্ত হয়েছিল। ক্রমাঙ্কন প্লটগুলির বৈশিষ্ট্যগুলি সারণী 2-এ সংক্ষিপ্ত করা হয়েছে। সারণিতে দেখা যায়, জিনসেনোসাইড Rh23 চমৎকার পারস্পরিক সম্পর্ক সহগ দেখায়। ডিটেক্টর গণনা (আপেক্ষিক শিখর এলাকা) রৈখিকভাবে 0 পরিসরের উপর নমুনা ঘনত্বের উপর নির্ভরশীল ছিল। জিনসেনোসাইড Rh23 এর LODs ছিল 0৷{18}}02 পিপিএম৷ GPLC-QTOF/MS দ্বারা নেগেটিভ-আয়ন মোডে জিনসেনোসাইড Rh23-এর LOQগুলি 0.005 পিপিএম হিসাবে নির্ধারিত হয়েছিল। বৈধতা পদ্ধতি (সারণী 2) ব্যবহার করে প্রাপ্ত এইচপিজিএল-এ জিনসেনোসাইড Rh23 এর পরিমাণ ছিল 0.319 মিগ্রা/জি।

মেলানোজেনিক বিরোধী কার্যকলাপ নির্ধারণের জন্য, মেলান-এ শুদ্ধ এবং চিহ্নিত যৌগ দিয়ে চিকিত্সা করা কোষে মেলানিনের উপাদানের পরিবর্তন অধ্যয়ন করা হয়েছিল। মেলান-একটি কোষকে 72 ঘন্টা ধরে যৌগিক 1 এবং 2 এর সাথে 0 থেকে 80 µM পর্যন্ত ঘনত্বে চিকিত্সা করা হয়েছিল, এবং কোষের কার্যকারিতা একটি CCK-8 কোষের কার্যকারিতা অ্যাসে কিটের মাধ্যমে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। মেলান-একটি কোষের জন্য 80 µM ঘনত্বে যৌগ 1 এবং 2 এর কোষের কার্যক্ষমতা যথাক্রমে 98.1 শতাংশ এবং 97.8 শতাংশের বেশি ছিল (ডেটা দেখানো হয়নি)। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যৌগ 1 এবং 2 এর একটি অ-সাইটোটক্সিক প্রকৃতি রয়েছে। যৌগগুলির মেলানোজেনিক বিরোধী কার্যকলাপের প্রভাব চিত্র 3-এ দেখানো হয়েছে। 20, 40, এবং 80 µM যৌগ 1-এর মেলানিন সংশ্লেষণের বাধা ছিল 8.4 শতাংশ, 15.6 শতাংশ, এবং 37.0 শতাংশ নিয়ন্ত্রণের তুলনায়। যৌগ 2 যৌগ 1 এর তুলনায় কিছুটা কম প্রতিরোধমূলক কার্যকলাপ দেখিয়েছে যথাক্রমে 7.6 শতাংশ, 12.8 শতাংশ, এবং 17.8 শতাংশ 20, 40 এবং 80 μM এ। উভয় যৌগই ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে মেলানিন সংশ্লেষণকে বাধা দেয়।

উল্লেখযোগ্যভাবে, যৌগ 1 সর্বোচ্চ মেলানিন নিরোধক কার্যকলাপ দেখায়, 37৷{2}} শতাংশে 80 μM ঘনত্ব৷ প্রতিবেদনে বলা হয়েছে, 0-1000 µg/mL রেডিক্স জিনসেং এর নির্যাস মেলানিনের কোন উল্লেখযোগ্য বাধা প্রদর্শন করেনি [19], এবং সিনামিক অ্যাসিড, একটি সাদা করার এজেন্ট প্রধানত পি. জিনসেং পাওয়া যায়, 675µM এ মেলানিন সংশ্লেষণের 29 শতাংশ বাধা দেখায়। [২০]। রেডিক্স জিনসেং এবং সিনামিক অ্যাসিডের নির্যাসের সাথে তুলনা করে, যৌগ 1 শক্তিশালী মেলানিন সংশ্লেষণ প্রতিরোধমূলক কার্যকলাপ দেখায়, এবং এমনকি 1।{12}}ক্যুমারিক অ্যাসিডের তুলনায় আট গুণ কম ঘনত্বে মেলানিন সংশ্লেষণের 1 গুণ বেশি বাধামূলক কার্যকলাপ দেখায় [ 17,20]।

জেব্রাফিশ একটি অত্যন্ত সুবিধাজনক মেরুদণ্ডী মডেল জীব কারণ এর অনুরূপ অঙ্গ সিস্টেম এবং মানুষের জিন ক্রম [25]। তদ্ব্যতীত, জেব্রাফিশ ভ্রূণের ব্যবহার ক্রমবর্ধমান মনোযোগ পাচ্ছে কারণ এগুলি প্রাণীর পরীক্ষার জন্য প্রতিস্থাপন পদ্ধতি হিসাবে বিবেচিত হয় [26]। জেব্রাফিশের পৃষ্ঠে মেলানিন রঙ্গক রয়েছে, যা জটিল পরীক্ষামূলক পদ্ধতি ছাড়াই পিগমেন্টেশন প্রক্রিয়াটিকে সহজ পর্যবেক্ষণের অনুমতি দেয় [২৭]।

সুতরাং, আমরা জেব্রাফিশের পিগমেন্টেশনে যৌগ 1 এর মেলানিন-নিরোধক প্রভাবগুলি তদন্ত করেছি। আমরা PTU (N-phenylthiourea; একটি সালফারযুক্ত টাইরোসিনেজ ইনহিবিটর) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (চিত্র 4B) হিসাবে ব্যবহার করেছি, যা জেব্রাফিশ গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয় [28,29]। চিত্র 4C, D, 40, এবং 80 µM যৌগিক 1 এর সাথে চিকিত্সা জেব্রাফিশের শরীরের পিগমেন্টেশনের উল্লেখযোগ্য বাধা তৈরি করেছে, যা নিয়ন্ত্রণ যানের তুলনায় মোট মেলানিনের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে (চিত্র 4A)।

এই গবেষণায়, আমরা হাইড্রোপনিক পি. জিনসেং পাতা থেকে উপন্যাস জিনসেনোসাইড Rh23 (1) বিচ্ছিন্ন করেছি। এইভাবে জিনসেং প্রজাতি থেকে 100 টিরও বেশি জিনসেনোসাইড রিপোর্ট করা হয়েছে। যাইহোক, 25-হাইড্রোক্সিলেটেডগিনসেনোসাইড খুব কমই প্রকৃতিতে দেখা যায়, জিনসেং উদ্ভিদ সহ। উপরন্তু, সাদা করার কার্যকলাপ রিপোর্ট করা হয়নি. মেলান-এ কোষে কোষের সাইটোটক্সিসিটি ছাড়াই জিনসেনোসাইড Rh23-এর নিরোধক কার্যকলাপ 80 unconcentration এ 37 শতাংশ দেখায়, যেখানে ginsenoside Rh23 (ডেটা দেখানো হয়নি) দ্বারা ইন ভিট্রো মাশরুম টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের কোন বাধা পরিলক্ষিত হয়নি। সম্প্রতি, জিনসেং শিকড় এবং পাতা থেকে নির্যাস বা বিশুদ্ধ জিনসেনোসাইডগুলি ব্যাপকভাবে অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য (30,31) ধারণ করে দেখা গেছে, যখন জিনসেং-এর জল বা জৈব নির্যাস ডিপিপিএইচ, সুপারঅক্সাইড অ্যানিয়ন এবং হাইড্রক্সিল র‌্যাডিকাল (32) এর প্রতি স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছে। অতএব, হাইড্রোপনিক P. ginseng-এর পাতা থেকে বিচ্ছিন্ন আমাদের উপন্যাস জিনসেনোসাইড Rh23 এর অ্যান্টি-অক্সিডেটিভ বৈশিষ্ট্য দ্বারা টাইরোসিনেসকে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত হতে পারে। যাইহোক, এর মেলানোজেনেসিস ভূমিকা এখনও তদন্ত করা হয়নি। অতএব, আরও গবেষণায়, মেলানিন সংশ্লেষণের নিয়ন্ত্রণের উপর জিনসেনোসাইড Rh23 অ্যাকশনের সুনির্দিষ্ট প্রক্রিয়া নির্ধারণ করা প্রয়োজন।

3. পরীক্ষামূলক

3.1। সাধারণ

Kieselgel 60 এবং LiChroprep RP-18 রেজিন কলাম ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল (Merck, Darmstadt, Germany)। Kieselgel 60 F254 (Merck) এবং RP-18 F254S (Merck) TLC পরীক্ষার জন্য কঠিন পর্যায় হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। টিএলসি প্লেটে দাগ সনাক্তকরণ একটি UV বাতির (স্পেকট্রোলিন, মডেল ENF-240 C/F, স্পেকট্রনিক্স কর্পোরেশন, নিউ ইয়র্ক, NY, USA) পর্যবেক্ষণের মাধ্যমে বা উন্নত 10 শতাংশ জলীয় H2SO4 স্প্রে করে সঞ্চালিত হয়েছিল প্লেট গরম করার পরে। একটি JASCO P{10}} ডিজিটাল পোলারিমিটার (টোকিও, জাপান) ব্যবহার করে অপটিক্যাল ঘূর্ণন পরিমাপ করা হয়েছিল। গলনাঙ্কগুলি একটি মাইক্রোস্কোপের সাহায্যে ফিশার-জনস মেল্টিং পয়েন্ট যন্ত্রপাতি (ফিশার বৈজ্ঞানিক সংস্থা, পিটসবার্গ, পিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) ব্যবহার করে প্রাপ্ত করা হয়েছিল। অতিবেগুনি বর্ণালী একটি শিমাদজু মডেল UV-1601 স্পেকট্রোফোটোমিটারে পরিমাপ করা হয়েছিল (শিমাদজু কর্পোরেশন, কিয়োটো, জাপান)। আইআর স্পেকট্রা একটি পারকিন এলমার স্পেকট্রাম ওয়ান এফটি-আইআর স্পেকট্রোমিটার (বাকিংহামশায়ার, ইউকে) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। NMR স্পেকট্রা একটি Varian Inova AS 400 স্পেকট্রোমিটারে রেকর্ড করা হয়েছিল (400 MHz, Varian, Palo Alto, CA, USA)। UPLC-QTOF/MS বিশ্লেষণ একটি Waters Xevo G2-S সিরিজ (Waters Corp., Milford, MA, USA) ব্যবহার করে করা হয়েছিল যা নেতিবাচক আয়ন মোডে কাজ করে৷

3.2। উদ্ভিদ সামগ্রী

হাইড্রোপনিক প্যানাক্স জিনসেং গ্রামীণ উন্নয়ন প্রশাসন, কোরিয়া প্রজাতন্ত্রের দ্বারা বিকশিত "জিনসেং জিএপি স্ট্যান্ডার্ড চাষ নির্দেশিকা" [11,33] এর প্রোটোকল অনুসারে চুংবুক প্রদেশের ইউমসেং-এ অবস্থিত ভেষজ ফসল গবেষণা বিভাগের গ্রিনহাউসে জন্মানো হয়েছিল। 0.8 থেকে 1 গ্রাম ওজনের এক বছর বয়সী জিনসেং চারা শিকড় ভেষজ ফসল গবেষণা বিভাগ, ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হর্টিকালচারাল অ্যান্ড হারবাল সায়েন্স (এনআইএইচএইচএস), পল্লী উন্নয়ন প্রশাসন (আরডিএ) থেকে ক্রয় করা হয়েছিল এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল ব্যবহারের আগে কম তাপমাত্রায় (1-2 ◦C) চেম্বার। জিনসেং চারাগাছের শিকড়গুলিকে পুষ্টিকর স্নানে প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল এবং হাইড্রোপনিক পদ্ধতিতে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। তিন মাস সংস্কৃতির পরে, হাইড্রোপনিক জিনসেংগুলি ফসল কাটার জন্য বের করা হয়েছিল। সংগ্রহ করা হাইড্রোপনিক জিনসেং গাছগুলিকে জল দিয়ে ধুলো পরিষ্কার করে পাতা এবং শিকড়গুলিতে সাজানো হয়েছিল, যেগুলিকে 72 ঘন্টার জন্য ফ্রিজ ড্রায়ারে শুকানো হয়েছিল (FD8512, ইলশিন বায়োবেস কোং, ইয়াংজু, কোরিয়া)। একটি ভাউচার নমুনা (NIHHS14-03) হার্বাল ক্রপ রিসার্চ, NIHHS, RDA, Eumseong, রিপাবলিক অফ কোরিয়ার হার্বেরিয়ামে জমা করা হয়েছিল৷

3.3। নিষ্কাশন এবং বিচ্ছিন্নতা

হাইড্রোপনিক P. ginseng (HPGL, 6 kg) এর শুকনো এবং গুঁড়া পাতাগুলি 80 শতাংশ MeOH (30 L × 3) দিয়ে 24 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় বের করা হয়েছিল। নির্যাসগুলিকে ফিল্টার পেপারের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং 45 ◦C তাপমাত্রায় কম চাপে বাষ্পীভূত করা হয়েছিল যাতে 1.4 কেজি নির্যাস পাওয়া যায়। নির্যাসটি H2O (3L) এ ঢেলে দেওয়া হয়েছিল এবং EtOAc (3 L × 3) এবং n-BuOH (2.6 L × 3) দিয়ে বের করা হয়েছিল। EtOAc (75 গ্রাম), n-BuOH (470 গ্রাম), এবং H2O (855 গ্রাম) ভগ্নাংশ প্রাপ্ত করার জন্য প্রতিটি স্তর কম চাপের অধীনে কেন্দ্রীভূত হয়েছিল।

n-BuOH ভগ্নাংশ (HPGLB, 130 g) সিলিকা জেল কলামে (φ 13 × 17 সেমি) প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং CHCl3–MeOH–H2O (8:3:1, 9{{42}) দিয়ে ইলুট করা হয়েছিল } L → 6:4:1, 110 L) 20 ভগ্নাংশের জন্য (HPGLB1 থেকে HPGLB20)। HPGLB3 এবং HPGLB4 ভগ্নাংশগুলিকে একত্রিত করা হয়েছিল (18.9 g, Ve/Vt=0৷{99}}5–0.12), এবং আরও ভগ্নাংশ সিলিকা জেল কলামের উপরে (φ 8 × 15 সেমি, CHCl3–MeOH–H2O=12:3:1, 14 L) 14 ভগ্নাংশ (HPGLB3-1 থেকে HPGLB3-14) দিতে। HPGLB3-4 এবং HPGLB3-5 ভগ্নাংশগুলিকে একত্রিত করা হয়েছিল (1.27 g, Ve/Vt {{40}}.09–0.16), এবং আরও ভগ্নাংশ ওডিএস কলামে (φ 4 × 7 সেমি, MeOH–H2O=2:1, 2.6 L) নয়টি ভগ্নাংশের জন্য (HPGLB3-4-1 থেকে HPGLB3-4-9)। ভগ্নাংশ HPGLB3-4-3 (119.4 mg, Ve/Vt=0.14–0.26) ওডিএস কলামে আরও ভগ্নাংশ করা হয়েছিল (φ 2.5 × 7 সেমি, MeOH–H2O=1:1, 1 L) যৌগ 1 (HPGLB3-4-3-7, 10.5 mg, Ve/Vt=0.42–0.55, TLC Rf সহ নয়টি ভগ্নাংশ (HPGLB3-4-3-1 থেকে HPGLB3-4-3-9) পেতে=0.40 (RP-18 F254S, MeOH–H2O=2:1), Rf=0.50 (Kieselgel 60 F254, CHCl3–MeOH–H2O {{90} }:3:1))। HPGLB5 থেকে HPGLB7 ভগ্নাংশগুলিকে একত্রিত করা হয়েছিল (24.0 g, Ve/Vt=0.12–0.22), এবং আরও ভগ্নাংশ সিলিকা জেল কলামে (φ 7 × 12 সেমি, CHCl3–MeOH–H2O=10: 3:1, 10 L → 6:4:1, 9 L) 16 ভগ্নাংশের জন্য (HPGLB5-1 থেকে HPGLB5-16)। ভগ্নাংশ HPGLB5-6 (323.1 mg, Ve/Vt=0.28–0.31) ওডিএস কলামে আরও ভগ্নাংশ করা হয়েছিল (φ 3 × 14 সেমি, MeOH–H2O=3:2, 1.2 L → 3:1, 1.5 L) যৌগ 2 (HPGLB5-6-5, 10.1 mg, Ve/Vt=0 সহ দশটি ভগ্নাংশ (HPGLB5-6-1 থেকে HPGLB5-6-10) দিতে .21–0.23, TLC Rf=0.50 (RP-18 F254S, MeOH–H2O=2:1), Rf=0.45 (Kieselgel 60 F254, CHCl3– MeOH–H2O=7:3:1))।

3.4। স্পেকট্রোস্কোপিক ডেটা

যৌগ 1. সাদা পাউডার, mp: 138–140 ◦C; [ ] 25 D প্লাস 17.4◦ (c=0.39, MeOH); IR (CaF2 উইন্ডো): 3377, 2932, 1382 cm−1; ঋণাত্মক QTOF/MS m/z 713.44723 [M প্লাস COOH]− (C37H64O10, 668.4499 এর জন্য ক্যালসিডি); 1H- এবং 13C-NMR ডেটা, সারণী 1 দেখুন।

যৌগ 2. সাদা পাউডার, mp: 133–136 ◦C; [ ] 25 D প্লাস 20.2◦ (c=0.50, MeOH); IR (CaF2 উইন্ডো): 3359, 2929, 1384 cm−1; ঋণাত্মক QTOF/MS m/z 699.48311 [M plus COOH]− (C36H62O10, 654.4323 এর জন্য calcd);1H- এবং 13C-NMR ডেটা, সারণী 1 দেখুন।

3.5। UPLC-QTOF/MS ব্যবহার করে নভেল যৌগ 1 এর পরিমাণগত বিশ্লেষণ

যৌগ 1 এর একটি স্ট্যান্ডার্ড স্টক দ্রবণ প্রস্তুত করা হয়েছিল 1.{2}} মিলিগ্রাম প্রতিটি 1 মিলি মিথানলে দ্রবীভূত করে 1৷{5}} মিগ্রা/মিলি এবং 4 ◦C তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল৷ স্ট্যান্ডার্ড স্টক সলিউশন (1) যথাক্রমে 0।{10}2–0.8 µg/mL রেঞ্জ সহ ক্রমাঙ্কন সমাধান পেতে মিথানল দিয়ে পাতলা করা হয়েছিল। এক গ্রাম HPGL নির্যাস সঠিকভাবে ওজন করা হয়েছিল এবং মিথানলের নির্দিষ্ট ভলিউমে (10 মিলি) দ্রবীভূত হয়েছিল, একটি 0.20 মিমি ফিল্টার পেপারের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং 4 ◦C তাপমাত্রায় ফ্রিজে রাখা হয়েছিল . UPLC একটি ACQUITY BEH C18 কলাম (2.1 × 100 mm, 1.7 µm) সহ একটি Waters ACQUITY H-Class UPLC (Waters Corp., Milford, MA, USA) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। ভ্রাম্যমাণ পর্যায়গুলি 0.1 শতাংশ ফরমিক অ্যাসিড (v/v) সহ জল (A) এবং 0.1 শতাংশ ফর্মিক অ্যাসিড (v/v) সহ অ্যাসিটোনিট্রিল (B) নিয়ে গঠিত। ইলুশন গ্রেডিয়েন্ট নিম্নরূপ ছিল: 0-4 মিনিট, B 10-30 শতাংশ; 4-15 মিনিট, B 30-60 শতাংশ; 15-16 মিনিট, B 60-100 শতাংশ; 16-19 মিনিট, B 100-10 শতাংশ। প্রবাহের হার ছিল 0.45 মিলি/মিনিট, এবং প্রতিটি রানের জন্য ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল 2 μL।

এরপরে, এইচআর-এমএস বিশ্লেষণটি নেগেটিভ আয়ন মোডে অপারেটিং ওয়াটারস জেভো জি2-এস কিউটিওএফ এমএস (ওয়াটার্স কর্পোরেশন, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে করা হয়েছিল। ভর স্পেকট্রোমিটারগুলি পর্যায়ক্রমে উচ্চ- এবং নিম্ন-শক্তির স্ক্যানগুলি সম্পাদন করে যা MSE অধিগ্রহণ মোড নামে পরিচিত। অভ্যন্তরীণ রেফারেন্স হিসাবে লিউসিন এনকেফালিন, m/z 554.262 (ESI neg. মোড) ধারণকারী একটি স্বয়ংক্রিয় ক্রমাঙ্কন বিতরণ ব্যবস্থা ব্যবহার করে সঠিক ভর পরিমাপ প্রাপ্ত করা হয়েছিল। সর্বোত্তম অপারেটিং পরামিতিগুলি সারণি 3 এ দেখানো হিসাবে সেট করা হয়েছিল।

3.6। সেল সংস্কৃতি

মেলান-একটি মেলানোসাইট হল একটি উচ্চ-রঞ্জক, অমর, একটি সাধারণ মুরিন মেলানোসাইট সেল লাইন যা C57BL/6 ইঁদুর থেকে প্রাপ্ত। এই গবেষণায় ব্যবহৃত মেলান-এ কোষগুলি ডাঃ ডরোথি বেনেট (সেন্ট জর্জ হাসপাতাল, লন্ডন, ইউকে) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। 95 শতাংশ বায়ুর বায়ুমণ্ডলে কোষগুলি 37 ◦C তাপমাত্রায়, RPMI 1640 মিডিয়ামে 10 শতাংশ CO2 10 শতাংশ তাপ-নিষ্ক্রিয় ভ্রূণের বোভাইন সিরাম, 1 শতাংশ পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন এবং 200 এনএম পিএমএ সহ চূড়ান্ত ঘনত্বের জন্য পরিপূরক। CCK-8 সেল কাউন্টিং কিট-8 (Dojindo Lab., Kumamoto, Japan) দ্বারা কোষের কার্যক্ষমতা নির্ধারণ করা হয়েছিল৷

3.7। মেলানিন অ্যাস

মেলান-এ কোষগুলিকে 72 ঘন্টার জন্য যৌগ দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, এবং তারপর কোষগুলি 30 মিনিটের জন্য 60 ◦C তাপমাত্রায় 1 N NaOH এ দ্রবীভূত হয়েছিল। তারপরে, স্পেকট্রোফোটোমিটার ব্যবহার করে লাইসেটগুলি 450 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। কোষ লাইসেটের প্রোটিন সামগ্রীতে ডেটা স্বাভাবিক করা হয়েছিল। সেল লাইসেটগুলি পরবর্তীতে বিসিএ প্রোটিন অ্যাস কিট (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক।, রকফোর্ড, আইএল, ইউএসএ) ব্যবহার করে প্রোটিন ঘনত্ব নির্ধারণের জন্য প্রক্রিয়া করা হয়েছিল।

3.8। পিতামাতার মাছের উৎপত্তি এবং রক্ষণাবেক্ষণ

প্রাপ্তবয়স্ক জেব্রাফিশগুলি একজন বাণিজ্যিক ডিলারের কাছ থেকে প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং 10-15টি মাছকে 5 লিটার অ্যাক্রিলিক ট্যাঙ্কে নিম্নলিখিত শর্তগুলির সাথে রাখা হয়েছিল: 28.5 ◦C, 14/10 ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্রের সাথে। জেব্রাফিশগুলিকে দিনে তিনবার খাওয়ানো হত, সপ্তাহে ছয় দিন, টেট্রামিন ফ্লেক ফুডের সাথে লাইভ ব্রাইন চিংড়ির (আর্টেমিয়া স্যালিনা) পরিপূরক। ভ্রূণগুলি প্রাকৃতিক স্পনিং থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল যা সকালে আলো জ্বালিয়ে প্ররোচিত হয়েছিল। ভ্রূণ সংগ্রহ 30 মিনিটের মধ্যে সম্পন্ন হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষামূলক প্রোটোকল এবং পদ্ধতিগুলি চুংনাম ন্যাশনাল ইউনিভার্সিটির (CNU-00866) ​​অ্যানিমাল এথিক্স কমিটির অনুমোদিত নির্দেশিকা এবং প্রবিধান অনুযায়ী অনুমোদিত এবং পরিচালিত হয়েছিল৷

3.9। যৌগিক চিকিত্সা এবং ফেনোটাইপ-ভিত্তিক মূল্যায়ন

সিঙ্ক্রোনাইজড ভ্রূণগুলিকে পিপেট দ্বারা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং সজ্জিত করা হয়েছিল ({2}}কূপ প্লেটে 7-9 ভ্রূণ প্রতি কূপে 1 মিলি ভ্রূণ মাধ্যম রয়েছে)। পরীক্ষার যৌগগুলি 0.1 শতাংশ DMSO-তে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং তারপর 9 থেকে 72 ঘন্টা পোস্ট-ফার্টিলাইজেশন (এইচপিএফ) (এক্সপোজারের 63 ঘন্টা) মধ্যে ভ্রূণ মাধ্যমে যোগ করা হয়েছিল। জেব্রাফিশের পিগমেন্টেশনের প্রভাব স্টেরিওমাইক্রোস্কোপের অধীনে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। মাঝে মাঝে আলোড়ন, সেইসাথে মাধ্যমের প্রতিস্থাপন, যৌগগুলির সমান বন্টন নিশ্চিত করার জন্য প্রতিদিন সঞ্চালিত হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষায়, 0.2 মিমি 1-ফিনাইল-2-থিওরিয়া (পিটিইউ) উন্নয়ন প্রক্রিয়ায় হস্তক্ষেপ না করে স্বচ্ছ জেব্রাফিশ তৈরি করতে ব্যবহার করা হয়েছিল [৩৩] এবং এটি একটি আদর্শ ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল। শরীরের পিগমেন্টেশনের ফিনোটাইপ-ভিত্তিক মূল্যায়নগুলি ফোরসেপ দ্বারা বিকৃত করা হয়েছিল, ট্রাইকেইন মিথেনেসালফোনেট দ্রবণে (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ), 35 মিমি ডিশে 3 শতাংশ মিথাইলসেলুলোসে মাউন্ট করা হয়েছিল (এসপিএল লাইফসায়েন্স, কোরিয়া), এবং স্টেরিওমাইক্রোস্কোপ MZ16 (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany) এর অধীনে ছবি তোলা।

4। উপসংহার

এই গবেষণায়, জিনসেনোসাইড Rh23 (1) হাইড্রো ফোনিক প্যানাক্স জিনসেং পাতা থেকে 20-O- -ডি-গ্লুকোপাইরানোসিল-3 ,6 ,12 ,20 ,25- এর সাথে আলাদা করা হয়েছিল pentahydroxydammar{10}}ene (2) আমরা সাধারণত হাইড্রোপনিক P. ginseng থেকে যৌগের হাইপো পিগমেন্টারি প্রভাব প্রাপ্ত করার আমাদের প্রচেষ্টায় সফল হয়েছি। Ginsenoside Rh23 এবং 20-O- -D-glucopyranosyl-3 ,6 ,12 ,20 ,25-পেন্টাহাইড্রোক্সিডামমার23-এনে সাইটোটক্সিক প্রভাব ছাড়াই মেলানিন জৈবসংশ্লেষণে বাধা ক্রিয়াকলাপ রয়েছে মেলান-একটি কোষে। অতিরিক্তভাবে, জিনসেনোসাইড Rh23 একটি বিকল্প প্রাণীর মডেল হিসাবে জেব্রাফিশের ডিপিগমেন্টেশনকে উন্নত করেছে। শরীরে মেলানিন কন্টেন্ট এবং পিগমেন্টেশন কমে যাওয়ার ফলে সাদা করার ক্রিয়াকলাপ হতে পারে এবং নন-সাইটোটক্সিক প্রভাব হল আরও অনুকূল কারণ কারণ কসমেটিক পণ্যগুলিতে সাদা করার এজেন্টগুলির জন্য নিরাপত্তা একটি প্রাথমিক বিবেচনা।

সুতরাং, আমাদের বর্তমান ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, এটি গুরুত্বপূর্ণ যে উপন্যাস হাইড্রো ফোনিক পি. জিনসেং যৌগগুলি একটি সম্ভাব্য কার্যকর ত্বক-আলোক এজেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। আরও অধ্যয়নগুলি মেলানিন সংশ্লেষণের নিয়ন্ত্রণের উপর জিনসেনোসাইড Rh23 ক্রিয়াকলাপের সুনির্দিষ্ট প্রক্রিয়া এবং জিনসেনোসাইড Rh23 এবং মেলানোজেনেসিসের কাঠামোগত বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে সম্পর্ককে ব্যাখ্যা করবে, এটি প্রসাধনী শিল্পের জন্য একটি সম্ভাব্য ঝকঝকে এজেন্ট কিনা তা নিশ্চিত করতে। হাইব্রিড Q-TOF ভর স্পেকট্রোমেট্রির সুবিধার মধ্যে শুধুমাত্র গুণমান শনাক্ত করার ক্ষমতা এবং সংবেদনশীলতা নয়, সঠিক পরিমাপও অন্তর্ভুক্ত, যা কাঠামোগত ব্যাখ্যাকে সহজ করে তোলে। এটি গৌণ বা অভিনব যৌগগুলির গুণগত এবং পরিমাণগত নির্ধারণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে, যা জিনসেং মশলাগুলির মান নিয়ন্ত্রণ উন্নত করতে সহায়তা করে।

সম্পূরক উপকরণ:

1H-NMR এবং 13C-NMR স্পেকট্রা 1 পরিপূরক উপকরণগুলিতে পাওয়া যায়।

স্বীকৃতি:

এই কাজটি "কৃষি বিজ্ঞান ও প্রযুক্তি উন্নয়নের জন্য সমবায় গবেষণা প্রোগ্রাম" (PJ01136203), গ্রামীণ উন্নয়ন প্রশাসন, কোরিয়া প্রজাতন্ত্রের সহায়তায় পরিচালিত হয়েছিল। জেব্রাফিশ সুবিধা ভাগ করে নেওয়ার জন্য আমরা চিওল-হি কিম (চুংনাম জাতীয় বিশ্ববিদ্যালয়) কে ধন্যবাদ জানাই।

লেখকের অবদান:

ডিওয়াইএল এবং এন.-আইবি পরীক্ষাগুলি কল্পনা করেছিল এবং ডিজাইন করেছিল; H.-GK এবং Y.-GL যৌগগুলিকে বিচ্ছিন্ন করেছে; DYL কাঠামো ব্যাখ্যা করেছে; I.-BJ উদ্ভিদ উপকরণ প্রস্তুতি অবদান; JHK জৈবিক পরীক্ষা চালিয়েছে এবং পাণ্ডুলিপি তৈরিতে সাহায্য করেছে; JWL এবং B.-RC নমুনাগুলির NMR এবং UPLC-QTOF/MS সঞ্চালন করেছে; G.-SK পাণ্ডুলিপি সংশোধনে সহায়তা করেছিলেন; এবং ডিওয়াইএল কাগজ লিখেছিল এবং গবেষণা প্রকল্প পরিচালনা করেছিল। সব লেখক পড়া এবং চূড়ান্ত পাণ্ডুলিপি অনুমোদিত।

স্বার্থের সংঘাত:

লেখক স্বার্থের কোন দ্বন্দ্ব ঘোষণা করেন না। গবেষণার নকশায় প্রতিষ্ঠাতা স্পনসরদের কোনো ভূমিকা ছিল না; তথ্য সংগ্রহ, বিশ্লেষণ, বা ব্যাখ্যা; পাণ্ডুলিপি লেখা; অথবা ফলাফল প্রকাশের সিদ্ধান্ত।

তথ্যসূত্র

1. বেন, EW; মাইকেল, ডব্লিউ. বিশ্বের ঔষধি গাছ। Shinilbooks মধ্যে; Timber Press Inc.: Portland, OR, USA, 2007.

2. পার্ক, জেডি; রি, ডিকে; লি, প্যানাক্স জিনসেং সিএ মেয়ার থেকে ওয়াইএইচ জৈবিক ক্রিয়াকলাপ এবং স্যাপোনিনের রসায়ন। ফাইটোকেমিস্ট্রি 2005, 4, 159-175। [ক্রসরেফ]

3. Kwon, SJ; চুং, ডিকে পর্বত গাউন জিনসেং, পাহাড়ে চাষ করা জিনসেং এবং প্যানাক্স জিনসেং-এর রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বৃদ্ধিকারী প্রভাব। জে ওরিয়েন্ট। নিউরোসাইকিয়াট্রি 2004, 15, 89-101।

4. গিলিস, সিএন প্যানাক্স জিনসেং ফার্মাকোলজি: একটি নাইট্রিক অক্সাইড লিঙ্ক? বায়োকেম। ফার্মাকোল। 1997, 54, 1-8। [ক্রসরেফ]

5. কাং, কেএস; ইয়ামাবে, এন.; কিম, এইচওয়াই; ইয়োকোজাওয়া, টি. ইঁদুরের লিপোপলিস্যাকারাইড-প্ররোচিত লিভারের আঘাতের উপর সূর্যের জিনসেং মিথানল নির্যাসের প্রভাব। ফাইটোমেডিসিন 2007, 14, 840-845। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

6. জিয়াং, এস.; রেন, ডি.; লি, জে.; ইউয়ান, জি.; লি, এইচ.; জু, জি.; হান, এক্স।; ডু, পি.; An, L. টাইপ 2 ডায়াবেটিস মেলিটাস সহ ইঁদুরের হাইপারগ্লাইসেমিয়া এবং ইনসুলিন প্রতিরোধের উপর যৌগ K-এর প্রভাব। ফিওথেরাপিয়া 2014, 95, 58-64। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

7. কিম, এইচএস; লি, ইএইচ; কো, এসআর; চোই, কেজে; পার্ক, জেএইচ; প্রোস্টেট ক্যান্সার কোষের বিস্তারের উপর জিনসেনোসাইড Rg3 এবং Rh2 এর ইম, ডিএস প্রভাব। খিলান। ফার্ম। Res. 2004, 27, 429-435। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

8. Nocerino, E.; আমাতো, এম.; ইজো, এএ জিনসেং-এর অ্যাফ্রোডিসিয়াক এবং অ্যাডাপটোজেনিক বৈশিষ্ট্য। ফিটোথেরাপিয়া 2000, 71, S1–S5। [ক্রসরেফ]

9. Keum, YS; পার্ক, কেকে; লি, জেএম; চুন, কেএস; পার্ক, জেএইচ; লি, এসকে; Kwon, HJ; সুর, ওয়াইজে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং তাপ-প্রক্রিয়াজাত জিনসেং-এর মিথানল নির্যাসের অ্যান্টি-টিউমার প্রচারমূলক কার্যক্রম। ক্যান্সার লেট। 2000, 150, 41-48। [ক্রসরেফ]

10. কিম, জিএস; লি, এসই; Noh, HJ; Kwon, H.; লি, SW; কিম, এসওয়াই; কিম, ওয়াইবি প্যানাক্স জিনসেং এর বৃদ্ধি এবং জিনসেনোসাইড বিষয়বস্তুর উপর প্রাকৃতিক বায়োঅ্যাকটিভ পণ্যের প্রভাব একটি অ্যারোপোনিক পদ্ধতিতে সংস্কৃত। J. Ginseng Res. 2012, 36, 430-441। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

11. চোই, এসওয়াই; চো, সিডব্লিউ; লি, ওয়াইএম; কিম, এসএস; লি, এসএইচ; কিম, কেটি হাইড্রোপনিকভাবে চাষ করা জিনসেং পাতা, ফল এবং শিকড়গুলিতে জিনসেনোসাইড এবং ফেনোলিক উপাদান সামগ্রীর তুলনা। J. Ginseng Res. 2012, 36, 425-429। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

12. মাতসুদা, এইচ.; নাকামুরা, এস.; কুবো, এম. প্রাকৃতিক উৎস থেকে কিউটিকল ওষুধের অধ্যয়ন। ২. মেলানিন জৈবসংশ্লেষণের উপর প্রুনাস উদ্ভিদের প্রতিরোধমূলক প্রভাব। বায়োল ফার্ম। ষাঁড়. 1994, 17, 1417-1420। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

13. ডানকান, সিএল; ফোস্টার, সোডিয়াম নাইট্রাইট, সোডিয়াম ক্লোরাইড, এবং সোডিয়াম নাইট্রেটের অঙ্কুরোদগম এবং অ্যানেরোবিক স্পোরের বৃদ্ধির উপর ইএম প্রভাব। আবেদন মাইক্রোবায়োল। 1968, 16, 406-411। [পাবমেড]

14. শিমিজু, কে.; ইয়াসুতাকে, এস.; কন্ডো, আর. ক্লোরোফোরা থেকে টাইরোসিনেজ ইনহিবিটরি অ্যাক্টিভিটি সহ একটি নতুন স্টিলবেন। কেম। ফার্ম। ষাঁড়. 2003, 51, 318-319। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

15. পার্ক, এসএইচ; কিম, ডিএস; কিম, ডব্লিউজি; Ryoo, IJ; লি, ডিএইচ; হু, সিএইচ; ইউন, SW; ইও, আইডি; পার্ক, কেসি টেরিন: একটি নতুন মেলানোজেনেসিস ইনহিবিটার এবং এর প্রক্রিয়া। সেল। মোল। জীবন 2004, 61, 2878-2885। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

16. কং, YH; জো, ইও; চো, সিডব্লিউ; পুত্র, DW; পার্ক, এসজে; রো, জেএইচ; Choi, SY ত্বকে মেলানিন জৈব সংশ্লেষণে দারুচিনি অ্যাসিডের প্রতিরোধমূলক প্রভাব। বায়োল ফার্ম। ষাঁড়. 2008, 31, 946-948। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

17. হোয়াং, ইওয়াই; চোই, এসওয়াই প্যানাক্স জিনসেং সিএ মেয়ারের বিভিন্ন অংশে ফেনোলিক যৌগগুলির পরিমাণগত বিশ্লেষণ এবং মেলানিন জৈব সংশ্লেষণে এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব। কোরিয়ান জে মেড। ফসল বিজ্ঞান. 2006, 14, 148-152।

18. ইম, এসজে; কিম, কেএন; ইউন, ওয়াইজি; লি, জেসি; মুন, ওয়াইজে; কিম, জেএইচ; উ, মেলানোজেনেসিসে রেডিক্স জিনসেং এবং রেডিক্স ট্রাইকোসান্থিসের ডব্লিউএইচ প্রভাব। বায়োল ফার্ম। ষাঁড়. 2003, 26, 849-853। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

19. হোয়াং, ইওয়াই; কং, ওয়াইএইচ; লি, ওয়াইসি; কিম, ওয়াইসি; ইও, কেএম; Jo, YO সাদা এবং লাল জিনসেং এর মধ্যে ফেনোলিক যৌগের বিষয়বস্তুর তুলনা এবং মেলানিন জৈব সংশ্লেষণে তাদের বাধা প্রভাব। J. Ginseng Res. 2006, 30, 82-87।

20. ঝাং, ওয়াইসি; পাই, জেডএফ; লিউ, সিএম; গান, FR; লিউ, জেডকিউ; লিউ, এইচপিএলসি-ইএসআই-এমএস/এমএস দ্বারা উচ্চ-তাপমাত্রায় বাষ্পযুক্ত প্যানাক্স জিনসেং-এ নিম্ন-পোলার জিনসেনোসাইডের এসওয়াই বিশ্লেষণ। কেম। Res. থুতনি. ইউনিভ. 2012, 28, 31-36।

21. Xie, YY; লুও, ডি.; চেং, ওয়াইজে; মা, জেএফ; ওয়াং, ওয়াইএম; লিয়াং, কিউএল; লুও, GA স্টিমিং-প্ররোচিত রাসায়নিক রূপান্তর এবং HPLC-ESI-MS/MSn ভিত্তিক মাল্টিকম্পোনেন্ট কোয়ান্টিফিকেশন ফিঙ্গারপ্রিন্ট ব্যবহার করে Panax ginseng থেকে প্রাপ্ত লাল জিনসেং-এর সামগ্রিক গুণমান মূল্যায়ন। জে এগ্রিক। খাদ্য রসায়ন। 2012, 60, 8213–8224। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

22. লিউ, জিওয়াই; লি, XW; ওয়াং, এনবি; Zhou, HY; ওয়েই, ডব্লিউ; গুই, আমার; ইয়াং, বি.; জিন, ওয়াইআর প্যানাক্স জিনসেং সিএ মেয়ারের পাতা থেকে তিনটি নতুন ড্যামারেন-টাইপ ট্রাইটারপেন স্যাপোনিন। জে. এশিয়ান ন্যাট। পণ্য Res. 2010, 12, 865–873। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

23. জিং, প্র.; লিয়াং, টি.; শেন, জি.; ওয়াং, এক্স।; জিন, ওয়াই.; লিয়াং, এক্স। প্যানাক্স নোটোজিনসেং-এ স্যাপোনিনগুলির বিশ্লেষণের জন্য ভর স্পেকট্রোমেট্রি সনাক্তকরণ সহ ব্যাপক HILIC x RPLC। বিশ্লেষক 2012, 137, 2239–2249। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

24. প্রেম, ডিআর; পিচলার, এফবি; ডড, এ.; কপ, বিআর; গ্রীনউড, উচ্চ-থ্রুপুট স্ক্রিনের জন্য ডিআর প্রযুক্তি: জেব্রাফিশ ব্যবহার করে বর্তমান এবং ভবিষ্যত। কার মতামত বায়োটেকনোল। 2004, 15, 564-571। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

25. Uwe, S.; স্টেফান, এস.; পোবার্ট, জি.; পেট্রা, জি.; হেনার, এইচ.; সেপান্ড, আর.; অ্যাক্সেল, এস.; ইনগ্রিড, এস.; কার্স্টেন, ডব্লিউ.; Hilda, W.; ইত্যাদি পশু পরীক্ষা-নিরীক্ষার বিকল্প হিসাবে জেব্রাফিশ ভ্রূণ - প্রাণী কল্যাণ প্রবিধানে সুরক্ষিত জীবন পর্যায়ের সূত্রপাতের সংজ্ঞার একটি ভাষ্য। রিপ্রোড টক্সিকল। 2012, 33, 128-132।

26. চিও, টিওয়াই; কিম, জেএইচ; কো, ডিএইচ; কিম, সিএইচ; হোয়াং, জেএস; আহন, এস.; কিম, এসওয়াই; কিম, সিডি; লি, জেএইচ; মেলানোজেনিক নিয়ন্ত্রক যৌগগুলির ফেনোটাইপ-ভিত্তিক স্ক্রীনিংয়ের জন্য একটি নতুন মডেল হিসাবে ইউ, টিজে জেব্রাফিশ। পিগমেন্ট সেল রেস 2007, 20, 120-127। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

27. এলসালিনি, ওএ; Rohr, KB Phenylthiourea জেব্রাফিশের বিকাশে থাইরয়েড ফাংশন ব্যাহত করে। দেব। জিন ইভোল। 2003, 212, 593-598। [পাবমেড]

28. লি, ডিওয়াই; চা, বিজে; লি, ওয়াইএস; কিম, জিএস; Noh, HJ; কিম, এসওয়াই; কাং, এইচসি; কিম, জেএইচ; Baek, NI মেলানোজেনেসিস প্রতিরোধক হিসাবে প্যানাক্স জিনসেং এর পাতা থেকে বিচ্ছিন্ন ছোটখাট জিনসেনোসাইডের সম্ভাবনা। int. জে মোল। বিজ্ঞান 2015, 16, 1677-1690। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

29. লি, জে.; হুয়াং, এম.; তেওহ, এইচ.; মানুষ, RY Panax quinquefolium saponins কম ঘনত্বের লাইপোপ্রোটিনকে অক্সিডেশন থেকে রক্ষা করে। জীবন বিজ্ঞান. 1999, 64, 53-62। [ক্রসরেফ]

30. লি, টিএসসি; মাজ্জা, জি.; কটরেল, এসি; আমেরিকান জিনসেং এর শিকড় এবং পাতায় গাও, এল জিনসেনোসাইডস। জে এগ্রিক। খাদ্য রসায়ন। 1996, 44, 717-720। [ক্রসরেফ]

31. জং, সিএইচ; সিওগ, এইচএম; চোই, আইডব্লিউ; পার্ক, মেগাওয়াট; চো, বন্য জিনসেং পাতা থেকে বিভিন্ন দ্রাবক নির্যাসের HY অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য। LWT 2006, 39, 266–274। [ক্রসরেফ]

32. জাতীয় ফসল বিজ্ঞান ইনস্টিটিউট। জিনসেং জিএপি স্ট্যান্ডার্ড চাষ নির্দেশিকা; জাতীয় ফসল বিজ্ঞান ইনস্টিটিউট, গ্রামীণ উন্নয়ন প্রশাসন: সুওন, কোরিয়া, 2009।

33. কার্লসন, জে.; ভন হফস্টেন, জে.; ওলসন, PE স্বচ্ছ জেব্রাফিশ তৈরি করা: ভ্রূণের বিকাশের সময় জিনের অভিব্যক্তি সনাক্তকরণকে উন্নত করার জন্য একটি পরিমার্জিত পদ্ধতি। Mar. বায়োটেকনোল 2001, 3, 522-527। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

নমুনা উপলব্ধতা:

যৌগ 1 এবং 2 এর নমুনা লেখকদের কাছ থেকে পাওয়া যায়।

ডাই ইয়ং লি 1 আইডি, হায়ং-জিউন কিম 2, ইয়েং-জিউন লি 2, জিন হি কিম 3, জে ওয়ান লি 1 আইডি, বো-রাম চোই 1, ইন-বে জ্যাং 1, জিউম-সুগ কিম 1 এবং নাম-ইন Baek 2,*

1 হার্বাল ক্রপ রিসার্চ বিভাগ, ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হর্টিকালচারাল অ্যান্ড ভেষজ বিজ্ঞান, RDA, Eumseong 27709, Korea; dylee0809@gmail.com (DYL); jaewon3@gmail.com (JWL); bmcbr@korea.kr (B.-RC); ikanet@korea.kr (I.-BJ); kimgs0725@korea.kr (G.-SK)

2 ওরিয়েন্টাল মেডিসিন বায়োটেকনোলজি বিভাগ, কিউং হি ইউনিভার্সিটি, ইয়ংগিন 17104, কোরিয়া; zwang05@naver.com (H.-GK); lyg629@nate.com (Y.-GL)

3 College of Herbal Bio-industry, Daegu Haany University, Gyeongsan 38610, Korea; gonogo1@nate.com

গৃহীত: 28 নভেম্বর 2017; গৃহীত: 26 জানুয়ারী 2018; প্রকাশিত: 29 জানুয়ারী 2018

For more information:1950477648nn@gmail.com