প্রসাধনী শিল্পে বহুমুখী রঞ্জক হিসাবে ফুলের নির্যাস পার্ট 2

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

প্রথাগত চিকিৎসা ব্যবস্থায় অনেক প্রাকৃতিক পণ্য ব্যবহার করা হয় ব্যথা এবং প্রদাহ থেকে উপসর্গের উপশমের চিকিৎসার জন্য, [৬১] অতএব, লিপোক্সিজেনেস এবং প্রোটিনেস কার্যকলাপের বাধার উপর বিশ্লেষণ করা নির্যাসের প্রভাব তদন্ত করা হয়েছে। বিশ্লেষিত ঘনত্বের পরিসরে (100-500 ug/mL), CTE জলের নির্যাস প্রোটিনেজ (চিত্র 4) (500 ug/mL এর ঘনত্বের জন্য 57 শতাংশে) প্রতিরোধ করার শক্তিশালী ক্ষমতা দেখিয়েছে। এই ক্রিয়াকলাপটিকে সুপরিচিত প্রোটিনেস ইনহিবিটর ডিক্লোফেনাকের সাথে তুলনা করা হয়েছিল, যা একটি নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল (সর্বোচ্চ ঘনত্বে প্রায় 89 শতাংশ বাধা পরীক্ষিত)। যাইহোক, GGE এবং KTE নির্যাস (সর্বোচ্চ ঘনত্বের জন্য যথাক্রমে প্রায় 56 শতাংশ এবং 53 শতাংশ) জন্য অনুরূপ ফলাফল পাওয়া গেছে। পিআরই এবং পিজিই নির্যাসের জন্য নিম্ন প্রোটিনেস বাধা পরিলক্ষিত হয়েছিল। lipoxygenase বাধা দেওয়ার ক্ষমতা পরিমাপের আরও একটি পরীক্ষায়, KTE এবং CTE থেকে জলীয় নির্যাসগুলি সর্বোচ্চ মান দেখায় (যথাক্রমে প্রায় 67 শতাংশ এবং 64 শতাংশ নিরোধক, 500 ug/mL এর ঘনত্বের জন্য)। ডিক্লোফেনাক একটি নিয়ন্ত্রণ হিসাবেও ব্যবহৃত হয়েছিল। GGE, PGE, এবং PRE নির্যাসগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চ মানগুলিও বৈশিষ্ট্যযুক্ত (যথাক্রমে 60 শতাংশ, 57 শতাংশ, এবং 54 শতাংশ)৷ এটিও উল্লেখ করা হয়েছে যে LOX এবং প্রোটিনেজ এনজাইমগুলিকে বাধা দেওয়ার ক্ষমতা নির্যাসের ঘনত্বের উপর নির্ভর করে (চিত্র 5)৷

পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি ইঙ্গিত করেছে যে অনেকগুলি পলিফেনলিক যৌগগুলি অনেকগুলি উদ্ভিদের নির্যাসের প্রদাহ-বিরোধী কার্যকলাপে উল্লেখযোগ্যভাবে অবদান রাখে [62]। গবেষণায় প্রদাহজনক প্রক্রিয়ায় ROS-এর সম্পৃক্ততা দেখানো হয়েছে, এবং গ্যালিক এবং কুইনিক অ্যাসিডের মতো ফেনোলিক যৌগগুলি লিপোক্সিজেনেস কার্যকলাপের কার্যকলাপকে বাধা দিয়ে অ্যারাকিডোনিক অ্যাসিড বিপাককে বাধা দিতে পারে, অথবা তারা অ্যারাকিডোনিক অ্যাসিডের সময় উত্পাদিত প্রতিক্রিয়াশীল ফ্রি র্যাডিকেলগুলি স্ক্যাভেঞ্জিং হিসাবে কাজ করতে পারে। [63]। BenSaad et al দ্বারা প্রাপ্ত ফলাফল. ইঙ্গিত করে যে এলাজিক অ্যাসিড, গ্যালিক অ্যাসিড, এবং পি. গ্রানাটাম থেকে বিচ্ছিন্ন punicalagin A&B লিপোপলিস্যাকারাইড (LPS)-প্ররোচিত নাইট্রিক অক্সাইড(NO), প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2(PGE2), এবং ইন্টারলেউকিন 6 (IL-6) উৎপাদনে বাধা দেয়। RAW 267.4 ম্যাক্রোফেজ। এই যৌগগুলি একমাত্র এজেন্ট হিসাবে কাজ করে বা একটি সিনারজিস্টিক প্রভাব রয়েছে কিনা তা এখনও একটি প্রশ্ন [64] রয়ে গেছে। যেহেতু অনেক ফ্ল্যাভোনয়েড প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য দেখায়, তাদের অন্তর্নিহিত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট আচরণের কারণে, তারা বিভিন্ন প্রদাহজনিত ব্যাধিতে জড়িত।ফ্ল্যাভোনয়েড নিষ্কাশন পদ্ধতি পিডিএফ,বিশেষ করে, quercetin হল সবচেয়ে আকর্ষণীয় অণু কারণ এটি নির্দিষ্ট জৈবিক পথের সাথে হস্তক্ষেপ করে। অধিকন্তু, অধ্যয়নগুলি পরামর্শ দেয় যে এটি বিভিন্ন প্রক্রিয়ার মাধ্যমে বিভিন্ন মডেলের সাথে জড়িত প্রদাহজনক প্রক্রিয়াকে হ্রাস করতে পারে [65]। বিশেষ করে, এএমপি-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস এবং হিস্টোন/প্রোটিন ডিসিটাইলেজ (AMPK/SIRT1) পথের ফলে আরও আকর্ষণীয় প্রদাহ ব্যবস্থাপনা হয়। এইভাবে, AMPK অ্যাক্টিভেটর ম্যাক্রোফেজ প্রদাহ কমাতে পারে। Quercetin এবং অন্যান্য flavonoids, AMPK এবং SIRT1 এর সক্রিয়কারী হিসাবে, এই পথের সাথে হস্তক্ষেপ করে প্রদাহ কমাতে পারে [66]। এটাও দেখানো হয়েছে যে কোয়েরসেটিন এবং কোয়েরসেটিন মনোগ্লুকোসাইডগুলি উচ্চতর LOX প্রতিরোধ ক্ষমতা প্রয়োগ করে [67]নায়ার এট আল। কেটিই এক্সট্র্যাক্টের প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্যগুলিকে quercetin moiety যেমন manghaslin Qu 3-[2G] rhamnosylrutinoside, Qu 3-O-dirhamnoside, এবং rutin সহ ফ্ল্যাভোনলগুলির উপস্থিতি মূল্যায়ন করে দেখিয়েছে৷ এই অণুগুলি COX-2 কার্যকলাপের শক্তিশালী বাধা এবং আংশিক ROS দমন দেখিয়েছে। সাধারণভাবে, CTE-তে উপস্থিত পলিফেনলগুলি RAW 264.7 ম্যাক্রোফেজ কোষগুলিতে এলপিএস-প্ররোচিত প্রদাহে অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি বৈশিষ্ট্য দেখায়[68]।

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

2.5.সাইটোটক্সিসিটি মূল্যায়ন

নতুন কসমেটিক কাঁচামাল তৈরিতে, সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে একটি হল তাদের ব্যবহারের নিরাপত্তা। প্রসাধনীতে ব্যবহারের জন্য নিবেদিত পদার্থগুলি অবশ্যই অ-বিষাক্ত হতে হবে, বিশেষ করে কেরাটিনোসাইট এবং ফাইব্রোব্লাস্টের মতো ত্বকের কোষগুলির সাথে সম্পর্কিত। HaCaT এবং BJ কোষে বিশ্লেষিত নির্যাসের বিষাক্ততা নির্ধারণ করতে দুই ধরনের পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছে।ফ্ল্যাভোনয়েডপ্রথম গবেষণা, নিরপেক্ষ লাল আপটেক অ্যাস ব্যবহার করে, বিশ্লেষণ করা নির্যাসগুলির সাথে চিকিত্সা করা কোষগুলির কার্যকারিতা মূল্যায়ন করতে আমাদের সক্ষম করে। এই রঞ্জক জীবন্ত কোষের লাইসোসোমে প্রবেশ করে এবং মৃত কোষের সাইটোপ্লাজমে মুক্তি পায়। এটি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল (চিত্র 6) যে CTE নির্যাসটির HaCaT এবং BJ কোষ উভয়ের বিস্তার বাড়ানোর সর্বোচ্চ ক্ষমতা রয়েছে। নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে, এই নির্যাসটি যথাক্রমে 250 μL/mL （HaCaT এবং B】） এবং 500 μL/mL（BJ কোষ） এর ঘনত্বে পরীক্ষিত প্যারামিটারের তুলনায় প্রায় 20 শতাংশ এবং 40 শতাংশ বেশি মান অর্জন করেছে। 100 এবং 250 μL/mL ঘনত্বে GGE নির্যাস এবং 500 μL/mL ঘনত্বে KTE নির্যাস BJ কোষগুলিতে সামান্য বিষাক্ত প্রভাব দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল। অন্যান্য নির্যাসগুলি এই কোষগুলির কার্যক্ষমতার উপর ইতিবাচক প্রভাব ফেলেছিল। 100 μL/mL ঘনত্বে PRE এবং PGE নির্যাসগুলি নিয়ন্ত্রণ থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল না, এবং তারা 250 এবং 500 μL/ ঘনত্বের নিয়ন্ত্রণের তুলনায় প্রায় 10-15 শতাংশ BJ কোষের বিস্তার বাড়িয়েছে mL কেরাটিনোসাইটের ক্ষেত্রে, কোষের কার্যক্ষমতার কোন হ্রাস লক্ষ্য করা যায়নি। PGE, PRE, এবং CTE নির্যাসগুলির জন্য, ক্রমবর্ধমান ঘনত্বের সাথে বিস্তারের বৃদ্ধি লক্ষ্য করা গেছে, যখন KTE এবং GGE নির্যাসের ক্রমবর্ধমান ঘনত্বের সাথে কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস প্রদর্শিত হয়েছে।

পরীক্ষিত নির্যাসের সাইটোটক্সিসিটি নির্ধারণের জন্য দ্বিতীয় পরীক্ষাটি ছিল রেজাজুরিন পরীক্ষা (আলামার ব্লু)। এটি দেখানো হয়েছে (চিত্র 7) যে কোষগুলির কার্যকারিতা নির্ভর করে নির্যাসের ঘনত্বের উপর যার সাহায্যে কোষগুলিকে ইনকিউব করা হয়েছিল। ফাইব্রোব্লাস্টের ক্ষেত্রে, PRE, PGE এবং CTE নির্যাসগুলি তাদের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে উচ্চতর কোষের বিস্তার ঘটায়। সর্বোচ্চ বিশ্লেষণকৃত ঘনত্ব （500 μL/mL）, নিয়ন্ত্রণের তুলনায় প্রায় 20 শতাংশ উচ্চ বিস্তার পরিলক্ষিত হয়েছে।হেস্পেরিডিন ব্যবহার করেকেটিই এবং জিজিই নির্যাসের ক্ষেত্রে, নির্যাসের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস লক্ষ্য করা গেছে। এই নির্যাসগুলি 250 এবং 500 μL/mL এর ঘনত্বে BJ-তে সামান্য বিষাক্ত প্রভাব দেখিয়েছে। কেরাটিনোসাইটের ক্ষেত্রে, ত্বকের কোষগুলিতে বিশ্লেষণ করা নির্যাসের অনুরূপ প্রভাব পরিলক্ষিত হয়েছিল, তবে তাদের প্রসারিত করার ক্ষমতা ফাইব্রোব্লাস্টের ক্ষেত্রে ততটা শক্তিশালী ছিল না। বিশ্লেষিত ঘনত্বের সমগ্র পরিসরে CTE নির্যাসের জন্য কেরাটিনোসাইট বিস্তার বাড়ানোর সর্বোচ্চ ক্ষমতা পরিলক্ষিত হয়েছে। অনুরূপ মানগুলি PRE নির্যাসের জন্য 250 μL/mL এর ঘনত্বে এবং PGE নির্যাসের জন্য 500 μL/mL এর ঘনত্বে প্রাপ্ত হয়েছিল। KTE নির্যাস GGE নির্যাস তুলনায় HaCa কোষে একটি উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চ বিষাক্ত প্রভাব দেখিয়েছে.

বিশ্লেষিত নির্যাসগুলি এর আগে ত্বকের কোষে তাদের বিষাক্ততার জন্য ব্যাপকভাবে পরীক্ষা করা হয়নি। নির্যাস বা তাদের প্রধান সক্রিয় উপাদান, বিশেষ করে ক্যান্সার কোষের দিকে মাত্র কয়েকটি সাইটোটক্সিসিটি গবেষণা রয়েছে। পূর্ববর্তী গবেষণার লেখকরা ইঙ্গিত করেছেন যে এই নির্যাসগুলি সাধারণত ত্বকের কোষগুলিতে বিষাক্ত প্রভাব ফেলে না এবং কোষের বিস্তার বাড়ানোর ক্ষমতা প্রায়শই পলিফেনল, অ্যান্থোসায়ানিন এবং ফ্ল্যাভোনয়েডের উচ্চ উপাদানের জন্য দায়ী করা হয় [45,69-73 ]। কিছু লেখক এও ইঙ্গিত করেছেন যে নির্যাসের মধ্যে থাকা পৃথক উপাদানগুলি ত্বকের কোষগুলিতে একটি বিষাক্ত প্রভাব প্রদর্শন করতে পারে, যদিও সম্পূর্ণরূপে নির্যাস তা করে না। আলী হিজাযী প্রমুখ। [৬৯] দেখিয়েছেন যে পুনিকা গ্রানাটাম থেকে নিষ্কাশিত অ্যালকালয়েডগুলি স্বাভাবিক থেকে বিষাক্ত এবং ক্যান্সার কোষের লাইনের জন্য, যখন পুরো নির্যাসটি কম বিষাক্ত। নাসিরি এট আল-এর অধ্যয়ন। [৭০] ইঙ্গিত দেয় যে পুনিকা গ্রানাটাম ফুলের নির্যাস ত্বকের কোষের বিস্তার বাড়ানোর ক্ষমতার কারণে ক্ষত নিরাময় প্রক্রিয়াকে ত্বরান্বিত করতে কার্যকর হতে পারে। আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণায় [৪৫], এটি দেখানো হয়েছিল যে বিশ্লেষণকৃত উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত জল-ইথানোলিক নির্যাসগুলি বিজে কোষের বিস্তার বাড়ানোর উচ্চ ক্ষমতা দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল, এবং কেটিই এবং জিজিই নির্যাসগুলি এই কোষগুলিতে কম বিষাক্ত প্রভাব দেখিয়েছিল। .হারানো সাম্রাজ্য cistancheHaCaT কোষে জল-ইথানলের নির্যাসগুলির প্রভাব খাঁটি জলীয় নির্যাসের মতোই ছিল, তবে ইথানলের সাথে প্রাপ্ত নির্যাসের ক্ষেত্রে, জলীয় নির্যাসের তুলনায় কিছুটা বেশি অনুকূল বিস্তারের বৈশিষ্ট্য পরিলক্ষিত হয়েছিল। বিশ্লেষিত নির্যাস উভয় প্রকারের গঠনের মধ্যে পার্থক্য তাদের বিষাক্ততার পার্থক্য সৃষ্টি করতে পারে। যেমন দেখানো হয়েছে, জলের নির্যাসগুলি জল-ইথানলের নির্যাসের মতো জৈব সক্রিয় উপাদানে সমৃদ্ধ নয়। সবচেয়ে বড় পার্থক্য রুটিন এবং আইসোকারসিট্রিনের সামগ্রীতে পরিলক্ষিত হয়।

Cistanche বিরোধী বার্ধক্য করতে পারেন

2.6.সূর্য সুরক্ষা ফ্যাক্টর নির্ধারণ

ত্বকে অতিবেগুনী বিকিরণের প্রতিকূল প্রভাবগুলি এক্সপোজারের পরে এবং এমনকি কয়েক বছর পরেও প্রকাশ পেতে পারে। সৌর বিকিরণের একটি ইমিউনোসপ্রেসিভ প্রভাব রয়েছে যা ত্বকের বার্ধক্য প্রক্রিয়াকে ত্বরান্বিত করে যার সাথে যুক্ত সমস্ত পরিণতি, যার মধ্যে বর্ধিত কার্সিনোজেনেসিস রয়েছে[74]। বর্তমানে পরিলক্ষিত প্রবণতাগুলি শুধুমাত্র ব্যবহারে অত্যন্ত উচ্চ স্তরের সুরক্ষা দ্বারা চিহ্নিত পণ্যগুলি বিকাশের ক্রমবর্ধমান প্রয়োজনীয়তার ইঙ্গিত দেয় তবে বহু কার্যকারিতাও এই অর্থে যে পণ্যগুলি এখন পর্যন্ত ব্যবহার করার চেয়ে একটি বিস্তৃত ক্রিয়াকলাপের সাথে ত্বকের অ্যান্টি-রেডিয়েশন সুরক্ষা বৈশিষ্ট্যযুক্ত করবে৷ কিছু উদ্ভিদ পদার্থ এই দিকটিতে একটি অমূল্য ভূমিকা পালন করে, যা শুধুমাত্র সূর্য সুরক্ষা প্রদান করতে সক্ষম নয় বরং ত্বকে সৌর বিকিরণের ইতিমধ্যে বিদ্যমান নেতিবাচক প্রভাবগুলিকে নিরপেক্ষ করতেও সক্ষম [75-77]। পরিচালিত গবেষণায় দেখা গেছে যে বিশ্লেষণকৃত উদ্ভিদের নির্যাস PRE, PGE, KTE, CTE, এবং GGE উচ্চ এসপিএফ সহগ দ্বারা চিহ্নিত করা হয়।

10 এবং 50 mg/mL এর ঘনত্বে উপরে উল্লিখিত উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত জলের নির্যাসগুলির জন্য সহগগুলির (SPF) বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। প্রতিটি তদন্তকৃত উদ্ভিদের জন্য নির্যাসের উচ্চতর ঘনত্বের ফলে SPF এর একটি উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর মান পাওয়া যায়।মাইক্রোনাইজড বিশুদ্ধ ফ্ল্যাভোনয়েড ভগ্নাংশ 1000 মিলিগ্রাম ব্যবহার করেনির্যাসের মধ্যে তুলনা দেখায় যে KTE নির্যাসের জন্য SPF-এর সর্বোচ্চ মান পরিলক্ষিত হয়েছে, যা উভয় তদন্তকৃত ঘনত্বের জন্য ধারণ করে। আরেকটি আকর্ষণীয় পর্যবেক্ষণ হল যে এমনকি তদন্ত করা ঘনত্বের কম ক্ষেত্রেও KTE নির্যাস এখনও উচ্চ SPF প্রদর্শন করেছে, যখন অন্যান্য নির্যাসের মান লক্ষণীয়ভাবে হ্রাস পেয়েছে। এটি পরিষ্কার হয় যখন আমরা বিশ্লেষণ করি যে KTE-এর ফলাফল অন্যান্য নির্যাসের তুলনায় কত বেশি ছিল। 50 mg/mL এর ঘনত্বের জন্য, SPF 1.2 এর ফ্যাক্টর দ্বারা বেশি ছিল (যখন PGE, CTE এর সাথে তুলনা করা হয়) প্রায় 1.9 এর ফ্যাক্টর (যখন PRE, GE এর সাথে তুলনা করা হয়)। 10 mg/mL এর ঘনত্বের জন্য একই গণনা 1.4 (PGE এর সাথে তুলনা করা হলে) পরিসরের ফ্যাক্টরগুলিকে 2-3 (CTE, GGE-এর সাথে তুলনা করলে), এমনকি 10 এর মতো ফ্যাক্টর পর্যন্ত দেয় PRE. KTE নির্যাসের উপর ফোকাস করার সময়, কেউ লক্ষ্য করতে পারে যে ফ্যাক্টর 5 দ্বারা নির্যাসের ঘনত্ব হ্রাস (50 mg/mL এর মান থেকে 10 mL/mL এর মান) ফলস্বরূপ SPF মান ফ্যাক্টর 3.4 দ্বারা হ্রাস পায়। , যার মানে হল যে SPF ঘনত্বের চেয়ে ধীরে ধীরে হ্রাস পায়। উপরোক্ত দেখায় যে KTE নির্যাস কম ঘনত্বে প্রয়োগ করলেও দক্ষ হতে পারে (চিত্র 8)।

2.7. ট্রান্সপিডার্মাল ওয়াটার লস (TEWL) এবং ত্বকের হাইড্রেশন পরিমাপ

উদ্ভিদের কাঁচামালের জৈবিক এবং ফার্মাকোলজিকাল কার্যকলাপের বিস্তৃত পরিসরের কারণে, নির্যাসের মধ্যে থাকা উদ্ভিদ পদার্থগুলি ত্বকের অবস্থার উপর উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলে। বিশেষ করে, আমরা এখানে আমাদের ত্বকের অবস্থার উপর সেকেন্ডারি বিপাকের প্রভাব সম্পর্কে কথা বলছি [78,79]।

গবেষণার পরবর্তী পর্যায়ে, হাইড্রেশন এবং TEWL বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ত্বকে পরীক্ষিত নির্যাসের প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছিল। 10mg/mL নির্যাস ঘনত্বের জন্য 60 এবং 360 মিনিটের দুই-সময়ের ব্যবধানে পরিমাপ করা হয়েছিল। TEWL পরিমাপের জন্য, PGE নির্যাসের জন্য সর্বাধিক শতাংশ হ্রাস দেখানো হয়েছে, যেখানে 13.9-এর নিয়ন্ত্রণ মান 8.71-এ নেমে এসেছে, যার ফলে শতাংশ 37 শতাংশ কমেছে। সেই দৃষ্টিকোণ থেকে KTE নির্যাস বিশ্লেষণ করাও মূল্যবান, কারণ এটিই সর্বোচ্চ SPF মান প্রদর্শন করে। KTE এক্সট্র্যাক্টের জন্য, TEWL নিয়ন্ত্রণ মান 10.22 এর মান কমে গেছে, যার মানে 26 শতাংশ হ্রাস (চিত্র 9A)।

যাইহোক, দ্বিতীয় যন্ত্রের পরিমাপের ক্ষেত্রে, এটি দেখানো হয়েছে যে বিশ্লেষণ করা নির্যাসগুলি 60 এবং 360 মিনিটের পরে নিয়ন্ত্রণের নমুনার সাথে ময়শ্চারাইজেশন বৃদ্ধি করে।

বিশ্লেষণের ফলস্বরূপ, এটি পাওয়া গেছে যে বিশ্লেষিত PRE, PGE, KTE, CTE, এবং GGE নির্যাস ত্বকের হাইড্রেশন বাড়ায় (চিত্র 9B)। প্রস্তুতিতে নির্যাসের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে ময়শ্চারাইজিং বৈশিষ্ট্যের বৃদ্ধি লক্ষ্য করা গেছে। PRE এবং PGE নির্যাসের জন্য সবচেয়ে শক্তিশালী ময়শ্চারাইজিং বৈশিষ্ট্যগুলি পরিলক্ষিত হয়েছে যা 60 মিনিটের পরে 32 শতাংশ এবং 29 শতাংশ এবং 360 মিনিটের পরে 21 শতাংশ এবং 22 শতাংশের সমান। ত্বকের হাইড্রেশনের সর্বনিম্ন স্তর, যদিও, KTE নির্যাসের জন্য 60 মিনিটের পরে 18 শতাংশের সমান এবং 360 মিনিটের পরে 3 শতাংশের কাছাকাছি পাওয়া গেছে।

2.8। অ্যাপ্লিকেশন বিশ্লেষণ

2.8.1। নির্যাসের রঙের পরামিতি নির্ধারণ

তাদের প্রাকৃতিক রঙের কারণে, উদ্ভিদের ফুলের সক্রিয় উপাদানগুলি প্রসাধনী এবং খাবারের মতো অনেক বাণিজ্যিক পণ্যে প্রাকৃতিক রং হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। প্রাপ্ত নির্যাসগুলির জন্য রঙ বিশ্লেষণ করা হয়েছিল (সারণী 5)।

PRE, KTE, এবং CTE নির্যাস প্রাকৃতিক প্রসাধনী রঙ্গক হিসাবে সর্বোচ্চ সম্ভাবনা খুঁজে পাওয়া গেছে. যাইহোক, CTE-এর জন্য সর্বোচ্চ ক্রোমা মান (C*) পরিলক্ষিত হয়েছিল। এইচ ডিগ্রি প্যারামিটারের মানের উপর ভিত্তি করে, এটি পাওয়া গেছে যে এটি এই নির্যাসের হলুদ রঙ যা খালি চোখে দেখা যায় এবং দেখা যায়। KTE এবং PRE নির্যাসের ক্ষেত্রে, কম C* মান (2.8) থাকা সত্ত্বেও, এই নির্যাসগুলির রঙ খালি চোখে স্পষ্টভাবে দেখা যায় এবং PRE-এর জন্য লাল-বেগুনি এবং KTE নির্যাসের জন্য নীল-বেগুনি হিসাবে নির্দিষ্ট করা হয়েছিল। PGE এবং GGE এর জলের নির্যাসগুলি লালচে এবং সামান্য কমলা রঙের ছিল এবং প্রাপ্ত ক্রোমা মানগুলি 1.3 স্তরে ছিল। এই রঙের জন্য, এই মানগুলি খালি চোখে উল্লেখযোগ্যভাবে বোঝা যায় নি।

2.8.2। নির্যাসের উপর ভিত্তি করে প্রসাধনী রঙের পরামিতি নির্ধারণ

সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, বিশেষ করে খাদ্য এবং প্রসাধনী শিল্পে প্রাকৃতিক উত্সের নতুন রঞ্জকগুলি বিকাশের একটি শক্তিশালী প্রয়োজন হয়েছে। কৃত্রিমভাবে প্রাপ্ত রঞ্জকগুলির তুলনায়, তারা মানব স্বাস্থ্য এবং পরিবেশের উপর কম নেতিবাচক প্রভাব ফেলতে পারে [80]। প্রাপ্ত নির্যাস একটি মডেল micellar মেক আপ রিমুভার তরল গঠনে ব্যবহার করা হয়েছিল. প্রতিটি সূত্রে, তারা 1 শতাংশের ঘনত্বে ব্যবহার করা হয়েছিল। মডেল প্রসাধনীর রঙের পরামিতিগুলির ফলাফলগুলি সারণি 6 এ উপস্থাপন করা হয়েছে।

এটি দেখা গেছে যে PRE, PGE, CTE এবং GGE থেকে 1 শতাংশ জলের নির্যাস যোগ করা মেক-আপ রিমুভারের রঙকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করেছে। প্রতিটি নমুনা রঙে খালি চোখে স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান ছিল। PRE নির্যাস কসমেটিকটির রঙ কমলাতে পরিবর্তন করেছে, এবং PGE, CTE, এবং GGE নির্যাস এটিকে হলুদে পরিবর্তন করেছে।

সম্ভাব্য রঞ্জক হিসাবে বিশ্লেষণ করা নির্যাস ব্যবহার করার সম্ভাবনা △মেক-আপ রিমুভারের নির্যাস/বেস মেক-আপ রিমুভারের সাথে তুলনামূলকভাবে উচ্চ মান দ্বারা নিশ্চিত করা হয়, যা নির্যাস যুক্ত করার সাথে মডেল প্রসাধনীর রঙে উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন নির্দেশ করে। বেস নমুনায় (নিষ্কাশন যোগ না করে)। সাহিত্যের তথ্য [৭৩] দেখায় যে যদি AE মান 5-এর বেশি হয়, রঙটি নগ্ন ইভ দ্বারা অনুভূত হয় এবং একটি রঙের প্রভাব হিসাবে অনুভূত হয়। PRE, KTE, এবং CTE নির্যাস ধারণকারী মেক-আপ রিমুভারের জন্য, যথাক্রমে 8.83,9.17 এবং 8.14 এর AE মান প্রাপ্ত হয়েছিল। PGE এবং GGE এর নির্যাস সহ পণ্যের ক্ষেত্রে, প্রস্তুতির রঙের উপর নির্যাসের কোন উল্লেখযোগ্য প্রভাব পরিলক্ষিত হয়নি। AE এর মান 2 এর পরিসরে।{12}}.82. এর মানে হল যে রঙের পার্থক্য শুধুমাত্র একজন অভিজ্ঞ পর্যবেক্ষকের কাছে স্পষ্ট [80,81]।

3. উপকরণ এবং পদ্ধতি

3.1। উদ্ভিদ উপাদান এবং নিষ্কাশন পদ্ধতি

গবেষণায় ব্যবহৃত উদ্ভিদ উপাদান ছিল P. rheas L., P.granatum L., C.ternatea L., C.tinctorius L. এবং G.globosa L. এর শুকনো ফুল, যা স্থানীয় ভেষজ দোকান থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। . নিষ্কাশন প্রক্রিয়া একটি অতিস্বনক স্নান (ডিজিটাল Mgtrasonic ক্লিনার, বার্লিন, জার্মানি), যা ইয়াং এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল। [82]। 10 গ্রাম শুকনো ফুল এবং 100 গ্রাম জল পরীক্ষা করা গাছের জলের নির্যাস তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রক্রিয়াটি ঘরের তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রাপ্ত নির্যাসগুলি তারপর হোয়াটম্যান নং 1 ফিল্টার পেপারের মাধ্যমে তিনবার সংগ্রহ এবং ফিল্টার করা হয়েছিল। পরিস্রাবণের পরে, নির্যাসগুলি 40 ডিগ্রিতে কম চাপে বাষ্পীভূত হয়েছিল। শুকনো নির্যাস থেকে 100 mg/mL ঘনত্বে একটি স্টক দ্রবণ প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং পরবর্তী বিশ্লেষণ না হওয়া পর্যন্ত 4 ডিগ্রিতে অন্ধকারে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। নিম্নলিখিত সংক্ষিপ্ত রূপগুলি ব্যবহার করা হয়: PRE-Papaver rheas extract, PGE-Punica granatum extract, GGE-Gomphrena globosa extract, CTE-Carthamus tinctorius extract, KTE-Clitoria ternatea extract.

3.2। HPLC-UV-ESI-MS দ্বারা বায়োঅ্যাকটিভ যৌগ নির্ধারণ

প্রাপ্ত নির্যাসগুলি HPLC(DionexUltiMate 300{{20}} RS Thermo Fisher Scientific, Sunnyvale, CA, USA) ব্যবহার করে তাদের প্রধান জৈব সক্রিয় যৌগগুলি নির্ধারণ করতে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। একটি ভর স্পেকট্রোমিটার (4000 QTRAP, AB Sciex, Concord, ON, Canada), একটি ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন উত্স (ESI) এবং একটি ট্রিপল কোয়াড্রুপোল-আয়ন ট্র্যাপ ভর দিয়ে সজ্জিত বিশ্লেষক ক্রোমাটোগ্রাফিক বিচ্ছেদ একটি গ্রেডিয়েন্ট রিভার্স-ফেজ সিস্টেমের সাথে অর্জন করা হয়েছিল। অধিকন্তু, 100×4.6 মিমি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম Kinetex 3.5 μm XB-C18 100 আইসো-বুটাইল সাইড চেইন সহ এবং টিএমএস এন্ড-ক্যাপিং স্টেশনারি ফেজ সহ একটি অনুরূপ কম্পোজিশন গার্ড কলামের সাথে ব্যবহৃত ফেনোমেনেক্স থেকে কেনা হয়েছিল এবং 30 ডিগ্রিতে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল . দ্রাবক A হিসাবে 0.1 শতাংশ (o/v) জলীয় ফর্মিক অ্যাসিড এবং দ্রাবক B হিসাবে মিথানল সমন্বিত একটি বাইনারি দ্রাবক সিস্টেম 19.1 মিনিটের রান টাইমে গ্রেডিয়েন্ট মোডের অধীনে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রযোজ্য ইলুশন শর্তগুলি নিম্নরূপ ছিল:0৷{19}}.0 মিনিট 25-100 শতাংশ B,15৷{23}}.0 মিনিট 100 শতাংশ B,17৷{27}}.1 মিনিট 100-25 শতাংশ বি,17। নেতিবাচক আয়ন মোডের অধীনে ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়ন ভর স্পেকট্রোমিটার (ESI-MS) দ্বারা ইলুয়েন্ট নিরীক্ষণ করা হয়েছিল এবং m/z 20 থেকে 1000 Da পর্যন্ত স্ক্যান করা হয়েছিল। পরিমাপ বিশ্লেষণের জন্য, ট্রিপল কোয়াড্রপোল এমএস ডিটেক্টর একাধিক প্রতিক্রিয়া পর্যবেক্ষণ (এমআরএম) স্ক্যান মোডে কাজ করছিল। সর্বোত্তম ভর বিশ্লেষক শর্ত এবং পৃথক যৌগগুলির জন্য পণ্য আয়ন নির্বাচন পরীক্ষামূলকভাবে নির্ধারিত হয়েছিল। এই উদ্দেশ্যে, মোবাইল ফেজ কম্পোজিশনে তদন্তকৃত যৌগগুলির (1 ng/mL) স্ট্যান্ডার্ড সমাধানগুলি একটি ইনফিউশন পাম্প ব্যবহার করে চালু করা হয়েছিল যা ধ্রুবক নমুনা বিতরণে কাজ করে। সঠিক অগ্রদূত আয়ন নির্বাচন করা হয়েছে তা নিশ্চিত করার পর, ডিক্লাস্টারিং পটেনশিয়াল (DP), প্রবেশের সম্ভাবনা (EP), সংঘর্ষের সেল প্রস্থান সম্ভাবনা (CXP), এবং সংঘর্ষের শক্তি (CE) প্রতিটি MRM ট্রানজিশনের জন্য অপ্টিমাইজ করা হয়েছে (টেবিল S1)। দুটি এমআরএম ট্রানজিশন পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল, একটি পরিমাপের জন্য এবং একটি নিশ্চিতকরণের জন্য। MS পরামিতিগুলি নিম্নরূপ সেট করা হয়েছিল: 600 C-এর কৈশিক তাপমাত্রা, 35 psi-এ কার্টেন গ্যাস, 60 psi-এ নেবুলাইজার গ্যাস এবং 50 psi-এ শুকানোর গ্যাস। বায়োঅ্যাকটিভ যৌগ নির্ণয়ের জন্য নেতিবাচক আয়নকরণ মোড সোর্স ভোল্টেজ -4500 V প্রয়োগ করা হয়েছিল। নাইট্রোজেন পর্দা এবং সংঘর্ষের গ্যাস হিসাবে ব্যবহৃত হত। বিশ্লেষক 1.5.1 সফ্টওয়্যার দিয়ে ডেটা বিশ্লেষণ প্রক্রিয়া করা হয়েছিল। নির্বাচিত যৌগগুলির সনাক্তকরণটি আণবিক ভর এবং প্রতিটি পৃথক যৌগের আয়ন এন্ট্রির খণ্ড দ্বারা সম্পন্ন হয়েছিল এবং MS2 খণ্ডন দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। নয়টি যৌগের পরিচয় তাদের রাসায়নিক সূত্র, ডিপ্রোটোনেটেড আণবিক আয়ন এবং প্রতিটি পৃথক শিখরের জন্য বৈশিষ্ট্যযুক্ত খণ্ড আয়ন সহ নির্ধারিত হয়েছিল। বিশ্লেষণাত্মক মানের সবচেয়ে তীব্র এমআরএম ট্রানজিশনের শিখর এলাকা ব্যবহার করে উৎপন্ন ক্রমাঙ্কন বক্ররেখার উপর ভিত্তি করে ছয়টি যৌগ পরিমাপ করা হয়েছিল। পরিমাপযুক্ত যৌগগুলির জন্য ডিটেক্টর প্রতিক্রিয়ার রৈখিকতা 0.01 ug/mL থেকে 2ug/mL পর্যন্ত আটটি ঘনত্বের স্তরে ক্রমাঙ্কন মানগুলির ইনজেকশন দ্বারা প্রদর্শিত হয়েছিল। ক্রমাঙ্কন বক্ররেখাগুলি 0.99-এর বেশি পারস্পরিক সম্পর্কের সহগ (R) সহ রৈখিক ছিল৷ নমুনাগুলি সিএমএস ডিটেক্টরের রৈখিক পরিসরে না পড়লে, নমুনাগুলি পাতলা করা হয়েছিল।

কুইনিক অ্যাসিড, গ্যালিক অ্যাসিড, ক্যাফেইক অ্যাসিড, ক্যাফেওয়েলকুইনিক অ্যাসিড (CQA, দুটি আইসোমার:3- এবং 5-CQA), এবং কোয়ার্সেটিনের বিশ্লেষণাত্মক মান সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, MO, USA থেকে কেনা হয়েছিল ) ব্যবহৃত সমস্ত মান বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের (2 এর চেয়ে বৃহত্তর বা 99 শতাংশ বিশুদ্ধতার সমান)।

স্ট্যান্ডার্ড স্টক সলিউশন 10 মিলি এলসি-এমএস গ্রেড মিথানলে প্রতিটি স্ট্যান্ডার্ডের 20 মিলিগ্রাম সঠিকভাবে ওজন করে এবং দ্রবীভূত করে 2 মিলিগ্রাম/মিলি ঘনত্ব দেওয়ার জন্য প্রস্তুত করা হয়েছিল। 2 এর সিরিয়াল পাতলা। .1 ug/mL, 0.05 ug/mL, 0.02 ug/mL, এবং 0.01 ug/mL তারপর LC-MS গ্রেড মিথানল দ্রবণ ব্যবহার করে তৈরি করা হয়েছিল৷ পরিমাণ নির্ধারণের সীমা (LOQ) 0.01 ug/ml হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল।

এলসি-এমএস/এমএস অ্যাস তিন প্রতিলিপিতে সম্পাদিত হয়েছিল। প্রাপ্ত ডেটা মানে ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি হিসাবে উপস্থাপন করা হয়েছিল।

3.3। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য নির্ধারণ

3.3.1.ABTS · প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাসে

প্রথমত, ABTS দ্রবণটি 19.5 mg ABTS এবং 3.3 mg পটাসিয়াম পারসালফেটকে 7mL ফসফেট বাফার (pH=7.4) এর সাথে মিশিয়ে তৈরি করা হয়েছিল এবং 16 ঘন্টার জন্য অন্ধকারে দ্রবীভূত করা হয়েছিল। তারপরে, দ্রবণটি প্রায় 1 মাত্রায় শোষণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল।{9}}। শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 入=734 nm এ পরিমাপ করা হয়েছিল। এরপর, 20 মিলি KTE, PGE, PRE, CTE, এবং GGE নির্যাস (10,100,250,500 ug/mL) 980 মিলি মিশ্রিত ABTSe ​​প্লাস দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং তারপর অন্ধকারে 10 মিনিটের জন্য সেঁকানো হয়েছিল। পরবর্তী ধাপে, একটি UV/VIS স্পেকট্রোফোটোমিটার Aquamate Helion (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, Waltham, MA, USA) ব্যবহার করে প্রস্তুত নমুনার শোষণ 入=734 nm-এ পরিমাপ করা হয়েছিল। পাতিত জল একটি ফাঁকা হিসাবে ব্যবহার করা হয়. ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং সমীকরণ (1) থেকে গণনা করা হয়েছিল:

যেখানে: নমুনার শোষণ হিসাবে; এসি - নিয়ন্ত্রণ নমুনার শোষণ। প্রতিটি নিষ্কাশিত নমুনার জন্য পরিমাপ তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল। পদ্ধতিটি গাওয়েল-বেবেন এট আল দ্বারা বর্ণিত হয়েছিল। [৮৩]।

3.3.2.DPPH র‌্যাডিক্যাল স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাসে

ব্র্যান্ড-উইলিয়ামস এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি ব্যবহার করে মুক্ত র্যাডিকেলগুলিকে অপসারণের জন্য নির্যাসের ক্ষমতা সম্পন্ন করা হয়েছিল। [৮৪]। এটি 1,1-ডিফেনাইল-2-পিক্রিলহাইড্রাজিল （DPPH） র্যাডিকেলের ব্যবহারের উপর ভিত্তি করে। প্রথমে, 100ug/mL ঘনত্বে নির্যাসের 33 μL জলীয় দ্রবণকে DPPH（4 mM） এর 167 μL মিথানল দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং একটি 96-কূপ প্লেটে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল, তারপর ঝাঁকি দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল। পরে, নমুনাগুলির শোষণ 517 এনএম তরঙ্গদৈর্ঘ্যে পরিমাপ করা হয়েছিল। একটি UV-VIS ফিল্টার ম্যাক্স入=5 স্পেকট্রোফোটোমিটার（থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ-তে 30 মিনিটের জন্য প্রতি 5 মিনিটে পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রতিটি নির্যাসের জন্য তিনটি স্বাধীন প্রতিলিপি করা হয়েছিল। একটি ডিপিপিএইচ দ্রবণ সহ জল একটি নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা সমীকরণ (2) ব্যবহার করে ডিপিপিএইচ বাধার শতাংশ হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল:

যেখানে: নমুনার শোষণ হিসাবে; এসি - নিয়ন্ত্রণ নমুনার শোষণ। প্রতিটি নিষ্কাশিত নমুনার জন্য পরিমাপ তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল।

3.3.3.প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির অন্তঃকোষীয় স্তর সনাক্তকরণ (ROS)

HaCaT এবং BJ কোষে প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির অন্তঃকোষীয় উৎপাদন উৎপন্ন করার জন্য বিশ্লেষণকৃত নির্যাসের ক্ষমতা নির্ধারণ করতে, একটি ফ্লুরোজেনিক এইচ, ডিসিএফডিএ রঞ্জক ব্যবহার করা হয়েছিল। এই যৌগটির প্যাসিভ ডিফিউশনের মাধ্যমে কোষে প্রবেশ করার ক্ষমতা রয়েছে, যেখানে এটি অ-ফ্লুরোসেন্ট যৌগে অন্তঃকোষীয় এস্টেরেসের দ্বারা বিচ্ছিন্ন হয়ে যায়। প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি কোষে উপস্থিত থাকলে, এই যৌগটি অত্যন্ত ফ্লুরোসেন্ট ডিসিএফ-এ রূপান্তরিত হয়। HaCaTs এবং BJ-এ ROS-এর অন্তঃকোষীয় স্তর নির্ধারণের জন্য, কোষগুলিকে 96-ওয়েল প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল। তারপরে, কোষগুলি 24 ঘন্টার জন্য একটি ইনকিউবেটরে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। DMEM মাধ্যমটি সরানো হয়েছিল এবং 10 μM H2DCFDA（Sigma Aldrich, St.Louis, MO, USA） দিয়ে সিরাম-মুক্ত DMEM মাধ্যমে দ্রবীভূত করা হয়েছিল। HaCaT এবং BJ কোষগুলিকে 45 মিনিটের জন্য H, DCFDA-তে ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং তারপর 100, 250, এবং 500 ug/mL এর ঘনত্বে নির্যাস দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। 1 মিমি হাইড্রোজেন পারক্সাইড (H2O2) দিয়ে চিকিত্সা করা কোষগুলিকে ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। নিয়ন্ত্রণের নমুনাগুলি পরীক্ষিত নির্যাসগুলির সাথে চিকিত্সা করা হয়নি এমন কোষ ছিল। ফিল্টারম্যাক্স এফ5 মাইক্রোপ্লেট রিডার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক) ব্যবহার করে প্রতি 90 মিনিটে ডিসিএফ ফ্লুরোসেন্স পরিমাপ করা হয়েছিল সর্বোচ্চ 485 এনএম এবং নির্গমন স্পেকট্রা 530 এনএম [85]।

3.4। ম্যাট্রিক্স মেটালোপেপ্টিডেসেস ইনহিবিশনের মূল্যায়ন

3.4.1.এন্টি-ইলাস্টেস কার্যকলাপ নির্ধারণ

ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেস, নিউট্রোফিল ইলাস্টেস (NE), একটি ফ্লুরোমেট্রিক কিট (Abcam, ab118971) বাধা দেওয়ার সম্ভাবনা নির্ধারণের জন্য প্রয়োগ করা হয়েছিল। পরীক্ষাটি কিটের সাথে সংযুক্ত নির্দেশাবলী অনুসারে এবং নিজিওল-লুকাসজেউস্কা এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে করা হয়েছিল। [86]। বিশ্লেষণগুলি একটি পরিষ্কার সমতল নীচে সহ একটি আদর্শ 96-ওয়েল প্লেটে সঞ্চালিত হয়েছিল৷ বিশ্লেষণের জন্য, 100 এবং 250 ug/mL ঘনত্বে উদ্ভিদের নির্যাস ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রাথমিকভাবে, NE এনজাইম সমাধান, একটি NE সাবস্ট্রেট এবং একটি ইনহিবিটর কন্ট্রোল (SPCK) নির্দেশাবলী অনুসারে প্রস্তুত করা হয়েছিল। মিশ্রিত NE সমাধানটি সমস্ত কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং তারপরে, পরীক্ষার নমুনা, ইনহিবিটর নিয়ন্ত্রণ এবং এনজাইম নিয়ন্ত্রণ (অ্যাসে বাফার) পরবর্তী কূপে যোগ করা হয়েছিল। এর পরে, নমুনাগুলি মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 5 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়েছিল। ইতিমধ্যে, অ্যাসে বাফার এবং NE সাবস্ট্রেট মিশ্রিত করে একটি প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রস্তুত করা হয়েছিল। মিশ্রণটি প্রতিটি কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করা হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার ব্যবহার করে উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য 入=400 nm এবং নির্গমন 入=505 nm-এ ফ্লুরোসেন্স অবিলম্বে পরিমাপ করা হয়েছিল নমুনা সমীকরণ (3) থেকে গণনা করা হয়েছিল:

চূড়ান্ত ফলাফল ছিল তিনটি স্বাধীন পরিমাপের পাটিগণিত গড়।

3.4.2। অ্যান্টি-কোলাজেনেস কার্যকলাপ নির্ধারণ

কোলাজেনেস কার্যকলাপকে বাধা দেওয়ার জন্য প্রাপ্ত নির্যাসগুলির ক্ষমতা মূল্যায়ন করতে, একটি ফ্লুরো-মেট্রিক কিট (Abcam, Cambridge, UK, ab211108) প্রয়োগ করা হয়েছিল। পরীক্ষাটি কিটের সাথে সংযুক্ত নির্দেশাবলী অনুসারে এবং নিজিওল-লুকাসজেউস্কা এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে করা হয়েছিল। [86]। বিশ্লেষণগুলি একটি পরিষ্কার সমতল নীচে সহ একটি আদর্শ 96-ওয়েল প্লেটে সম্পাদিত হয়েছিল৷ বিশ্লেষণের জন্য, 100 এবং 250 ug/mL ঘনত্বে উদ্ভিদের নির্যাস ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রথমত, কোলাজেনেস (COL) একটি কোলাজেনেস বিশ্লেষণ বাফার (CAB) দ্রবীভূত হয়েছিল। তারপরে, বিশ্লেষিত নমুনাগুলি COL এবং CAB-তে যুক্ত করা হয়েছিল। কোলাজেনেজ ইনহিবিটর(1,10-ফেনানথ্রোলিন(80 মিমি) কোলাজেনেস এবং সিএবি বাফারের সাথে মিশ্রিত করে ইনহিবিটর নিয়ন্ত্রণের নমুনাগুলি প্রস্তুত করা হয়েছিল। এনজাইম নিয়ন্ত্রণ কূপগুলি সিএবি-এর সাথে মিশ্রিত COL মিশ্রিত করে তৈরি করা হয়েছিল। CAB বাফারটি ব্যাকগ্রাউন্ড কন্ট্রোল হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। তারপরে, নমুনাগুলি 15 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করা হয়েছিল। CAB-এর সাথে কোলাজেনেস সাবস্ট্রেট মিশ্রিত করে একটি প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ তৈরি করা হয়েছিল। এইভাবে প্রস্তুত করা প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি সমস্ত বিশ্লেষণকৃত নমুনায় যোগ করা হয়েছিল এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করা হয়েছিল। পরে, প্রতিপ্রভা পরিমাপ করা হয়েছিল উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য 490 nm এবং 520 nm নির্গমন। পরিমাপটি গতিগত মোডে 60 মিনিটের জন্য 37 C এ সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রাপ্ত নির্যাসগুলির COL কার্যকলাপকে বাধা দেওয়ার ক্ষমতা সমীকরণ (4) দ্বারা গণনা করা হয়েছিল:

3.5। বিরোধী প্রদাহজনক বৈশিষ্ট্য নির্ধারণ

3.5.1। প্রোটিন ডিনাচুরেশনের বাধা

PRE, PGE, KTE, CTE, এবং GGEextracts-এর প্রোটিনেজ ইনহিবিটরি কার্যকলাপ সাকাত এট আলের পদ্ধতি অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। সংক্ষেপে, প্রতিক্রিয়া দ্রবণ (2 mL) 2{{10}} mM Tris-HCl বাফার (pH7.4) এবং 1 mL পরীক্ষার নমুনায় 1 শতাংশ ট্রিপসিন (0) নিয়ে গঠিত }.02 mL নির্যাস 0.980 mL জল)। দ্রবণটি ইনকিউবেট করা হয়েছিল (5 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি), এবং তারপরে 0.8 শতাংশ (w/v) কেসিনের 1 মিলি যোগ করা হয়েছিল এবং মিশ্রণটি আরও 20 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। ইনকিউবেশন শেষে, বিক্রিয়াটি সম্পূর্ণ করার জন্য 70 শতাংশ পারক্লোরিক অ্যাসিডের 2 এমএল যোগ করা হয়েছিল। মিশ্রণটি সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, এবং সুপারনাট্যান্টের শোষণকে ফাঁকা হিসাবে বাফারের বিপরীতে 210 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। ফসফেট বাফার সমাধান নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রোটিন বিকৃতকরণের শতকরা হার নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল:

যেখানে A1= কন্ট্রোল নমুনার শোষণ, এবং A2= পরীক্ষার নমুনার শোষণ।

3.5.2। Lipoxygenase কার্যকলাপ বাধা

লাইপোক্সিজেনেস ক্রিয়াকলাপকে বাধা দেওয়ার জন্য প্রাপ্ত নির্যাসের ক্ষমতা সর্বেশ্বরন এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারিত হয়েছিল। 【89】। প্রথমে, বিভিন্ন ঘনত্বে উদ্ভিদের 10 μL নির্যাস（100, 250, এবং 500 ug/mL） একটি 96-কূপ প্লেটে 160 μL 100 mM PBS এবং 20 μL সয়াবিন লিপোক্সিজেনেস সলিউশন（6 (16) মিশ্রিত করা হয়েছিল এমএল)। নমুনাগুলি 10 মিনিটের জন্য 25 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল এবং এই সময়ের পরে প্রতিক্রিয়া শুরু করতে 10 μL সোডিয়াম লিনোলিক অ্যাসিড যোগ করা হয়েছিল। তারপরে, ফিল্টারম্যাক্স F5 মাইক্রোপ্লেট রিডার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে প্রতি মিনিটে 3 মিনিটের সময়কালে নমুনার শোষণ 234 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। ডাইক্লোফেনাক একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। সমীকরণ (6) থেকে lipoxygenase কার্যকলাপ প্রতিরোধের শতাংশ গণনা করা হয়েছিল:

যেখানে: পরীক্ষিত নমুনার শোষণ যেমন, Ac হল নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণের শোষণ।

চূড়ান্ত ফলাফল ছিল তিনটি স্বাধীন পরিমাপের পাটিগণিত গড়।

3.6। সাইটোটক্সিসিটি বিশ্লেষণ

3.6.1। সেল সংস্কৃতি

এই গবেষণায়, দুটি ত্বকের কোষ লাইন ব্যবহার করা হয়েছিল: সাধারণ মানুষের কেরাটিনোসাইট (HaCaT) এবং ফাইব্রোব্লাস্ট (BJ)। HaCaTগুলি CLSCell Lines Service (CLS Cell Lines Service GmbH, Eppelheim, Germany) এবং BJs থেকে আমেরিকান টাইপ কালচার কালেকশন ( মানসাস, ভিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র)। Dulbecco's Modification of Eagles Medium (DMEM, Biological Industries, Cromwell, CO, USA)তে সোডিয়াম পাইরুভেট, L-গ্লুটামিন এবং উচ্চ গ্লুকোজ সামগ্রী (4.5g/L) সহ কোষ জন্মানো হয়েছিল। মাধ্যমটিকে 10 শতাংশ ভ্রূণের বোভাইন সিরাম (Gibco, Waltham, MA, USA) এবং 1 শতাংশ অ্যান্টিবায়োটিক (100 U/mL পেনিসিলিন এবং 1000 ug/mL স্ট্রেপ্টোমাইসিন, Gibco) দিয়ে মাইক্রোবায়াল দূষণ প্রতিরোধে সমৃদ্ধ করা হয়েছিল। 95 শতাংশ বায়ু এবং 5 শতাংশ কার্বন ডাই অক্সাইডের আর্দ্র বায়ুমণ্ডলে 37 ডিগ্রিতে একটি ইনকিউবেটরে কোষগুলি জন্মেছিল।

3.6.2.আলমার ব্লু অ্যাস

কালচারড সেল (HaCaT এবং BJ) কাঙ্খিত সঙ্গমে পৌঁছে যাওয়ার পরে, DMEM মাধ্যমটি কালচার ফ্লাস্কে উচ্চাকাঙ্খিত হয়েছিল। নীচে-সংযুক্ত কোষগুলি জীবাণুমুক্ত ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন দিয়ে দুবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। কোষের স্তরটি ট্রিপসিন দিয়ে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং তারপরে কোষগুলিকে একটি তাজা ডিএমইএম মাধ্যমে স্থাপন করা হয়েছিল। কোষগুলিকে 96-ওয়েল ফ্ল্যাট-বটম প্লেটে (VWR, Radnor, PE, USA) প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল এবং প্লেটের নীচে সংযুক্ত করার পরে, কোষগুলিকে নির্যাস (100, 250, এবং 500 ug/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল৷ কোষগুলি 24 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছিল।

সাইটোটক্সিসিটি পরীক্ষাটি আলামার ব্লু অ্যাস (সিগমা, আর7017, লাইফ টেকনোলজিস, ব্লেইসউইক, নেদারল্যান্ডস) দিয়ে করা হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, 60 ইউএম ঘনত্বে একটি রেজাজুরিন দ্রবণ কূপগুলিতে যোগ করা হয়েছিল, তারপর প্লেটগুলি 2 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রিতে একটি ইনকিউবেটরে স্থাপন করা হয়েছিল। এই সময়ের পরে, ফ্লুরোসেন্স পরিমাপ করা হয়েছে（入=570nm）। প্রতিটি নির্যাস ঘনত্ব তিনটি প্রতিলিপিতে সঞ্চালিত হয়েছিল।

3.6.3। নিরপেক্ষ রেড আপটেক অ্যাস

PRE, PGE, KTE, CTE, এবং GGE-এর সাইটোটক্সিসিটি নির্ধারণ করতে নিরপেক্ষ রেড আপটেক অ্যাসে দ্বিতীয় পরীক্ষা। প্রথমত,96-পূর্ববর্তী বিভাগে বর্ণিত ফ্ল্যাট-বটম প্লেটগুলি প্রস্তুত করা হয়েছিল। 24 ঘন্টা নির্যাসের সাথে কোষের সংস্পর্শে আসার পরে, সেগুলিকে উচ্চাকাঙ্খিত করা হয়েছিল এবং নিরপেক্ষ লাল রঞ্জক (40 ug/mL) দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল এবং 2 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। এই সময়ের পরে, কোষগুলি ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়। পরবর্তী ধাপে, কূপগুলিতে রঙিন বাফার (150 μL) যোগ করা হয়েছিল। তারপরে, 540 এনএম-এ অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) পরিমাপ করে নিরপেক্ষ লাল dve-এর গ্রহণ নির্ধারণ করা হয়েছিল। প্রতিটি নির্যাস ঘনত্ব তিনটি প্রতিলিপিতে সঞ্চালিত হয়েছিল।

3.7। সূর্য সুরক্ষা ফ্যাক্টর নির্ধারণ (ইন ভিট্রো)

সূর্য সুরক্ষা ফ্যাক্টর (SPF) 10 ug/mL এবং 50 ug/mL ঘনত্বে নির্যাসের জলীয় দ্রবণের শোষণ পরিমাপ করে, তরঙ্গদৈর্ঘ্য 290 থেকে 320 nm পর্যন্ত 5-nm ব্যবধানে পরিমাপ করে। প্রাপ্ত ফলাফল থেকে, SPF গণনা করা হয়েছিল মনসুর সমীকরণ [90] থেকে: যেখানে∶ EE（λ）—erythemal প্রভাব স্পেকট্রাম, I（入）—সৌর তীব্রতা বর্ণালী, ABS（入）—সানস্ক্রিন পণ্যের শোষণ, CF— সংশোধন ফ্যাক্টর (=10）, E（N）×I（λ）) - Sayre দ্বারা নির্ধারিত মান ব্যবহার করা হয়েছিল [91]।

3.8। ট্রান্সপিডার্মাল ওয়াটার লস (TEWL) এবং ত্বকের হাইড্রেশন পরিমাপ

একটি MPA অ্যাডাপ্টারের সাথে সংযুক্ত একটি TEWAmeter TM 300 প্রোব এবং কর্নিওমিটার CM 825 প্রোব ব্যবহার করে TEWL এবং ত্বকের হাইড্রেশন পরিমাপ করা হয়েছিল (সাহস প্লাস খাজাকা ইলেক্ট্রনিক, কোলন, জার্মানি)৷ পাঁচজন স্বেচ্ছাসেবক গবেষণায় অংশগ্রহণ করেছিলেন৷ তাদের সামনে চামড়া, ছয়টি এলাকা (আকারে 2 × 2 সেমি) চিহ্নিত করা হয়েছিল। পরীক্ষিত উদ্ভিদের নির্যাসের 0.2 মিলি পরিমাণ পাঁচটি জায়গায় প্রয়োগ করা হয়েছিল, ষষ্ঠ স্থানটি ছিল নিয়ন্ত্রণ (কোন নমুনা দিয়ে চিকিত্সা করা হয়নি)। 60 এবং 360 মিনিটের পরে , হাইড্রেশন স্তর এবং TEWL পরিমাপ নেওয়া হয়েছিল। চূড়ান্ত ফলাফল ছিল পাটিগণিত গড় (প্রতিটি স্বেচ্ছাসেবকের কাছ থেকে) পাঁচটি স্বতন্ত্র পরিমাপ (ত্বকের হাইড্রেশন) এবং 20টি পরিমাপ (TEWL)।

3.9.মডেল প্রসাধনী (মেক-আপ রিমুভার) এর নির্যাস ধারণ করা

একটি মডেল কসমেটিক (মেক আপ রিমুভার) প্রস্তুত করা হয়েছিল। ব্যবহৃত সমস্ত উপাদান EcoCert এবং COSMOS প্রয়োজনীয়তার সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল। সূত্রটি সারণি 7 এ দেখানো হয়েছে।

একটি সমজাতীয় তরল প্রাপ্ত না হওয়া পর্যন্ত ঘরের তাপমাত্রায় উপাদানগুলি (আইটেম 1 থেকে আইটেম 6) মিশ্রিত করে পণ্যটি তৈরি করা হয়েছিল। শেষ ধাপে, ফর্মুলেশনের pH সমন্বয় করা হয়েছিল। মেক-আপ রিমুভার অংশে বিভক্ত ছিল। নির্যাসের স্টক সলিউশনের 1 শতাংশের পরিমাণ প্রতিটি অংশে যোগ করা হয়েছিল এবং পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করা হয়েছিল।

3.10. নির্যাস ধারণ করা নির্যাস এবং প্রসাধনী (মেক-আপ রিমুভার) এর রঙের প্যারামিটার নির্ধারণ

নির্যাস সহ নির্যাস এবং প্রসাধনীগুলির নমুনাগুলি তাদের প্রস্তুতির 48 ঘন্টা পরে ঘরের তাপমাত্রায় পরীক্ষা করা হয়েছিল। একটি ক্রোমা মিটার CR-400(Konica Minolta, Sensing Inc., Tokyo, Japan) রঙের পরামিতিগুলি (CIELAB স্থানাঙ্ক) মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল৷ CIELAB সিস্টেমটি 1978 সালে আলোকসজ্জা সম্পর্কিত আন্তর্জাতিক কমিশন দ্বারা সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল। এটি তিনটি রঙের বৈশিষ্ট্যের উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে: L*, a*,b, যেখানে L* হল মুনসেল সিস্টেমের মানের সাথে সমানুপাতিক একটি উজ্জ্বলতা পরিবর্তনশীল এবং a* এবং b* হল ক্রোম্যাটিক স্থানাঙ্ক। a* এবং b* স্থানাঙ্কগুলি যথাক্রমে লাল/সবুজ এবং হলুদ/নীল অক্ষের অবস্থান নির্দেশ করে ( প্লাস a=লাল, -a=সবুজ; প্লাস b=হলুদ, - b =নীল)।

প্রাপ্ত ডেটার উপর ভিত্তি করে: L*, a*, এবং b*, নিম্নলিখিত রঙের পরামিতিগুলি গণনা করা হয়েছিল: ক্রোমা (C*) এবং hue (h)। নিম্নলিখিত সমীকরণ ব্যবহার করা হয়েছিল:

4। উপসংহার

প্রাপ্ত ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, এটি উপসংহারে পৌঁছানো যেতে পারে যে পরীক্ষিত উদ্ভিদের নির্যাসগুলি বেশ কয়েকটি ইতিবাচক বৈশিষ্ট্য দেখায়, যার জন্য তারা তাদের নিরাপদ এবং জৈব সক্রিয় উপাদান হিসাবে প্রসাধনী উত্পাদনে ব্যবহার করা যেতে পারে। এটি দেখানো হয়েছে যে এই উদ্ভিদগুলি পলিফেনলের একটি সমৃদ্ধ উত্স, যা তাদের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য দেয়। পিআরই মুক্ত র‌্যাডিকেলগুলিকে অপসারণ করার সর্বোত্তম ক্ষমতা দেখিয়েছে, যা সম্ভবত অন্যান্য উদ্ভিদের তুলনায় এটিতে সর্বাধিক পলিফেনল রয়েছে বলে। PGE এবং PRE কোষে ROS উৎপাদন কমানোর সর্বোত্তম ক্ষমতা দেখিয়েছে। তাছাড়া গাছপালা কোনো সাইটোটক্সিক কার্যকলাপ দেখায় না। সমস্ত পরীক্ষিত নির্যাস ইলাস্টেস এবং কোলাজেনেস এনজাইমের উপর একটি প্রতিরোধক প্রভাব দেখিয়েছে, যার মধ্যে পি. গ্রানাটাম এবং জিজিই সবচেয়ে বেশি প্রতিরোধক প্রভাব রয়েছে। এটি ইঙ্গিত দিতে পারে যে এই গাছগুলি প্রসাধনীগুলিতে এমন পদার্থ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে যা বার্ধক্য প্রক্রিয়াকে ধীর করে দেয়। অধিকন্তু, প্রাপ্ত ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে এই গাছগুলিতে প্রদাহ বিরোধী বৈশিষ্ট্য রয়েছে। এই ক্ষেত্রে, CTE এবং KTE সেরা হতে দেখা গেছে. KTE এবং PGE কম ঘনত্বেও UV বিকিরণের বিরুদ্ধে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব দেখিয়েছে। উচ্চ ঘনত্বে, সমস্ত গাছপালা একটি UV প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব ছিল। তদ্ব্যতীত, গাছগুলি ত্বকের হাইড্রেশনের উপর ইতিবাচক প্রভাব ফেলেছিল এবং ট্রান্সপিডার্মাল জলের ক্ষতি কমায়। প্রসাধনী পণ্যগুলিতে PRE, KTE, এবং CTE নির্যাসগুলি কার্যকর রঙ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। উপরে উল্লিখিত নির্যাস ধারণকারী মেক-আপ অপসারণের জন্য মডেল তরল সময়ের সাথে সাথে একটি তীব্র এবং স্থিতিশীল রঙ দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল। PGE এবং GGE নির্যাস সহ প্রসাধনীগুলির রঙ শুধুমাত্র অভিজ্ঞ পর্যবেক্ষকদের দ্বারা লক্ষ্য করা যেতে পারে এবং তারা নির্যাস যোগ না করে ফাঁকা প্রসাধনী নমুনা থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা নয়। সমস্ত প্রাপ্ত ফলাফল বিবেচনা করে, এই সিদ্ধান্তে পৌঁছানো যেতে পারে যে Papaver rheas, Clitoria ternatea এবং Carthamus tinctorias সফলভাবে প্রসাধনী উৎপাদনে হলুদ, কমলা, নীল এবং বেগুনি রঞ্জকের উত্স হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে যা ব্যবহার করা নিরাপদ হবে, এবং, আরও কি, ত্বকে ইতিবাচক প্রভাব ফেলবে।

এই নিবন্ধটি অণু 2022, 27, 922 থেকে নেওয়া হয়েছে। https://doi.org/10.3390/molecules27030922 https://www.mdpi.com/journal/molecules