Carboxypeptidase E শর্তসাপেক্ষ নকআউট ইঁদুর প্রদর্শনী শিক্ষা এবং স্মৃতির ঘাটতি এবং নিউরোডিজেনারেশন পার্ট 1

Carboxypeptidase E (CPE) হল একটি বহুমুখী প্রোটিন যা বিভিন্ন সিস্টেমে অনেক ননএনজাইমেটিক ফাংশন সহ। CPE নক-আউট ইঁদুর ব্যবহার করে পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে CPE এর স্ট্রেসের বিরুদ্ধে নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব রয়েছে এবং এটি শেখার এবং স্মৃতিতে জড়িত।

স্ট্রেস প্রতিরোধ এবং স্মৃতি দুটি অবিচ্ছেদ্য দিক। কাজ হোক, পড়াশোনা হোক বা জীবন, আমরা সব ধরনের চাপের মুখোমুখি হব। কখনও কখনও, এই চাপগুলি আমাদের হতাশা, উদ্বিগ্ন, ক্লান্ত এবং এমনকি আমাদের স্মৃতিশক্তিকে প্রভাবিত করতে পারে। এই ক্ষেত্রে, আমাদের মানসিক চাপ প্রতিরোধ এবং স্মৃতিশক্তি উন্নত করার কিছু উপায় খুঁজে বের করতে হবে।

প্রথমত, স্ট্রেস সহনশীলতা উন্নত করা ব্যায়ামের মাধ্যমে অর্জন করা যেতে পারে। গবেষণা দেখায় যে ব্যায়াম মানুষকে উদ্বেগ এবং বিষণ্নতা কমাতে সাহায্য করতে পারে। এছাড়াও, উপযুক্ত ব্যায়াম বিপাককে উন্নীত করতে পারে, ঘুমের উন্নতি করতে পারে এবং শারীরিক সুস্থতা বাড়াতে পারে। এই সব আমাদের মানসিক চাপ সহনশীলতা এবং স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে সাহায্য করে।

দ্বিতীয়ত, মানসিক কাউন্সেলিংও স্ট্রেস প্রতিরোধ ক্ষমতা উন্নত করার একটি কার্যকর উপায়। আপনি যখন অসুবিধা এবং প্রতিবন্ধকতার সম্মুখীন হন, তখন আপনার অভ্যন্তরীণ খারাপ আবেগগুলিকে মুক্ত করতে এবং আপনার মানসিক বোঝা কমানোর জন্য পরিবার বা বন্ধুদের সাথে দ্রুত যোগাযোগ করুন, যাতে আপনি চাপ এবং চ্যালেঞ্জগুলি আরও ভালভাবে মোকাবেলা করতে পারেন।

এছাড়াও, ভাল ঘুমের অভ্যাস স্মৃতিশক্তি এবং স্ট্রেস প্রতিরোধের উন্নতির জন্যও অপরিহার্য। খারাপ ঘুম শারীরিক ক্লান্তি, বিষণ্ণতা এবং স্মৃতিশক্তি হ্রাস হতে পারে। অতএব, আমাদের অবশ্যই ভাল ঘুমের অভ্যাস গড়ে তুলতে হবে, প্রতি রাতে পর্যাপ্ত ঘুমের সময় নিশ্চিত করতে হবে এবং ঘুমের মান নিশ্চিত করতে হবে।

অবশেষে, একটি ইতিবাচক মনোভাবও গুরুত্বপূর্ণ। আপনাকে অবশ্যই একটি ভাল মনোভাব বজায় রাখতে হবে, আপনার দক্ষতা শিখতে এবং উন্নত করতে হবে, সক্রিয়ভাবে চ্যালেঞ্জগুলির মোকাবেলা করতে হবে, অসুবিধার মুখোমুখি হওয়ার সময় একটি আশাবাদী মনোভাব বজায় রাখতে হবে এবং বিশ্বাস করতে হবে যে আপনি চাপ কাটিয়ে উঠতে পারবেন এবং সাফল্য অর্জন করতে পারবেন।

সংক্ষেপে, চাপ প্রতিরোধ এবং স্মৃতি দুটি ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত দিক। ব্যায়াম, মনস্তাত্ত্বিক পরামর্শ, ভাল ঘুমের অভ্যাস এবং একটি ইতিবাচক মনোভাবের মাধ্যমে, আমরা কার্যকরভাবে চাপ এবং স্মৃতিশক্তি সহ্য করার ক্ষমতা উন্নত করতে পারি এবং জীবন ও কর্মক্ষেত্রে বিভিন্ন চ্যালেঞ্জ মোকাবেলা করতে পারি। এটা দেখা যায় যে আমাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে হবে, এবং Cistanche deserticola উল্লেখযোগ্যভাবে স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে কারণ Cistanche deserticola হল একটি ঐতিহ্যবাহী চীনা ঔষধি উপাদান যার অনেকগুলি অনন্য প্রভাব রয়েছে, যার মধ্যে একটি হল স্মৃতিশক্তি উন্নত করা। কিমা করা মাংসের কার্যকারিতা অ্যাসিড, পলিস্যাকারাইড, ফ্ল্যাভোনয়েড ইত্যাদি সহ বিভিন্ন সক্রিয় উপাদান থেকে আসে৷ এই উপাদানগুলি বিভিন্ন উপায়ে মস্তিষ্কের স্বাস্থ্যকে উন্নীত করতে পারে৷

মেমরি বাড়ানোর ১০টি উপায় জেনে নিন ক্লিক করুন

যাইহোক, নিউরনে CPE এর কার্যকারিতা এখনও অনেকাংশে অজানা। এখানে আমরা শর্তসাপেক্ষে CPE inneurons নকআউট করার জন্য একটি Camk2a-Cre সিস্টেম ব্যবহার করেছি। ওয়াইল্ড-টাইপ, CPEflox/−, ​​এবং CPEflox/flox ইঁদুরগুলিকে 3 সপ্তাহ বয়সে জিনোটাইপ করার জন্য দুধ ছাড়ানো, কান-ট্যাগ করা এবং লেজ-ক্লিপ করা হয়েছিল, এবং তারা 8-এ উন্মুক্ত মাঠ, অবজেক্ট রিকগনিশন, ওয়াই-মেজ এবং ভয় কন্ডিশনিং পরীক্ষা করেছিল। সপ্তাহ বয়সী

CPEflox/flox ইঁদুরের স্বাভাবিক শরীরের ওজন এবং গ্লুকোজ বিপাক ছিল। আচরণগত পরীক্ষাগুলি দেখিয়েছে যে সিপিইফ্লক্স/ফ্লক্স ইঁদুরগুলি বন্য-প্রকার এবং সিপিইফ্লক্স/- ইঁদুরের তুলনায় শেখার এবং স্মৃতিশক্তি দুর্বল করেছে। আশ্চর্যজনকভাবে, সিপিইফ্লক্স/ফ্লক্স ইঁদুরের সাবকুলাম (সাব) অঞ্চলটি সম্পূর্ণরূপে ক্ষয়প্রাপ্ত হয়েছিল, সিপিই সম্পূর্ণ নকআউট ইঁদুরের বিপরীতে, যা CA3 অঞ্চলের নিউরোডিজেনারেশন প্রদর্শন করে। উপরন্তু, ডাবলকোর্টিন ইমিউনোস্টেইনিং পরামর্শ দিয়েছে যে হিপ্পোক্যাম্পাসের ডেন্টেট গাইরাসে নিউরোজেনেসিস উল্লেখযোগ্যভাবে সিপিইফ্লক্স/ফ্লক্স ইঁদুরে হ্রাস পেয়েছে।

মজার বিষয় হল, হিপ্পোক্যাম্পাসে TrkBphosphorylation সিপিইফ্লক্স/ফ্লক্স ইঁদুরে নিয়ন্ত্রিত হয়েছিল, কিন্তু মস্তিষ্ক থেকে প্রাপ্ত নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর মাত্রা ছিল না। হিপ্পোক্যাম্পাস এবং ডোরসাল মিডিয়াল প্রিফ্রন্টাল কর্টেক্স উভয়ের মধ্যে, আমরা CPEflox/flox ইঁদুরে হ্রাস MAP2 এবং GFAP অভিব্যক্তি লক্ষ্য করেছি। একত্রে, এই গবেষণার ফলাফলগুলি দেখায় যে নির্দিষ্ট নিউরোনাল সিপিই নকআউট কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের কর্মহীনতার দিকে পরিচালিত করে, যার মধ্যে শেখার এবং স্মৃতিশক্তির ঘাটতি, হিপ্পোক্যাম্পাল সাব ডিজেনারেশন এবং প্রতিবন্ধী নিউরোজেনেসিস রয়েছে।

ভূমিকা

কার্বক্সিপেপ্টিডেস ই (সিপিই), যা নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর নামেও পরিচিত- 1, এটি অন্তঃস্রাব এবং স্নায়ুতন্ত্রের অনেক প্রয়োজনীয় ননএনজাইমেটিক ফাংশন সহ বহুমুখী প্রোটিন [১]। সিপিই পরিপক্ক সিক্রেটরি ভেসিকেলে সমৃদ্ধ হয় এবং পেপটাইড হরমোন এবং নিউরোপেপটাইডের জৈব সংশ্লেষণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [২]। এছাড়াও সিপিই প্রোইনসুলিন, প্রোয়েনকেফালিন, প্রো-অপিওমেলানোকোর্টিন এবং প্রো-ব্রেন-ডিরাইভড নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর (প্রো-বিডিএনএফ) সহ অনেক প্রোটিনের বাছাইকারী রিসেপ্টর হিসাবে কাজ করে [৩]।

"ফ্যাট" নামে একটি প্রাকৃতিকভাবে ঘটতে থাকা স্থূলতার ফিনোটাইপ মাউস মিউটেশনকে সিপিই জিনে ম্যাপ করা হয়েছে [৪]। পরবর্তী একটি গবেষণায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে সিপিইফ্যাট/ফ্যাট এবং সিপিই-নকআউট (কেও) ইঁদুর বন্ধ্যাত্ব এবং প্রাপ্তবয়স্ক স্থূলতা সহ অনুরূপ ফেনোটাইপগুলি দেখায় [৫]। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে মানুষের সিপিই জিনের মিউটেশন রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে নাল মিউটেশন, মিউটেশন যা ছেঁটে প্রোটিন তৈরি করে এবং যাদের মূল অনুঘটক অবশিষ্টাংশগুলি বাদ দেওয়া হয় [6]।

গুরুতর মিউটেশন সহ হোমোজাইগাস ব্যক্তিরা অসুস্থভাবে স্থূল এবং হাইপোগোনাডিজম আছে। এছাড়াও, টাইপ 2 ডায়াবেটিস রোগীদের মধ্যে সিপিই মিসেন্স পলিমারফিজম পাওয়া গেছে। মিউটেশন CPE এনজাইমের কার্যকলাপকে পরিবর্তন করে, এবং রোগীরা টাইপ 2 ডায়াবেটিসের প্রাথমিক সূত্রপাত দেখায় [7]। তদ্ব্যতীত, সিপিই ভেসিকুলার ট্রান্সপোর্টে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, যেমন ইনহিপোক্যাম্পাল নিউরন এবং সিন্যাপ্স দেখানো হয়েছে [8]।

পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে উচ্চ মাত্রার CPE হিপ্পোক্যাম্পাসে প্রকাশ করা হয় এবং স্ট্রেস-প্ররোচিত পিরামিডাল নিউরন ডেথ এবং জ্ঞানীয় দুর্বলতা [9, 10] থেকে রক্ষা করার জন্য এর এনজাইম্যাটিক কার্যকলাপের উপর নির্ভর করে একটি নিউরোট্রফিক ভূমিকা রয়েছে। মস্তিষ্কের অঞ্চল [১১]।

প্রিফ্রন্টাল কর্টেক্স (পিএফসি) হল স্ট্রেসের প্রধান নিউরোপ্যাথলজিকাল লক্ষ্য, যা অসংখ্য কর্টিকাল এবং সাবকর্টিক্যাল অঞ্চলের সাথে সংযুক্ত এবং জ্ঞানীয় ফাংশনে অবদান রাখে[12, 13]। ডোরসাল মিডিয়াল পিএফসি (dmPFC) এর মধ্যে রয়েছে রোস্ট্রাল্যান্টেরিয়র সিঙ্গুলেট কর্টেক্স এবং প্রিলিম্বিক কর্টেক্স, যা ব্যথা, আবেগ এবং জ্ঞানের মড্যুলেশনের সাথে জড়িত অঞ্চল। এটি দেখানো হয়েছে যে dmPFC এর কার্যকরী নিষ্ক্রিয়তা নেতিবাচক আবেগকে প্ররোচিত করে এবং জ্ঞানীয়তা হ্রাস করে [14]। dmPFC নিউরনের কার্যকলাপ অতীতের পছন্দ এবং ফলাফল সম্পর্কে তথ্য প্রদান করে এবং dmPFC অপসারণ orinactivation কিউ নির্দেশিকাকে বাধা দেয় [15]।

এছাড়াও, মানসিক চাপ নিউরাল নেটওয়ার্কের দুর্বলতা, জ্ঞানীয় কর্মহীনতা, হিপোক্যাম্পাল অবক্ষয় এবং নিউরোজেনেসিস হ্রাসের দিকে পরিচালিত করে [10]। dmPFC এবং হিপ্পোক্যাম্পাসের থেপিরামিডাল নিউরনগুলি অ্যাট্রোফাইন্ডার স্ট্রেস দেখায় এবং মনোসামাজিক এবং সংযম চাপ প্রায় 3-4 সপ্তাহের মধ্যে অ্যাট্রোফি তৈরি করে [11, 16]। তাপগত পরিবর্তন মস্তিষ্কের অঞ্চল অনুযায়ী পরিবর্তিত হয়। দীর্ঘস্থায়ী স্ট্রেস ডেনড্রাইটিক প্রত্যাহার করে এবং dmPFC এবং হিপ্পোক্যাম্পাস [17] এর প্রিলিম্বিক এলাকায় মেরুদণ্ডের ঘনত্ব হ্রাস করে।

হিপ্পোক্যাম্পাল এপিকাল ডেনড্রাইট কমপ্লেক্সিটিতে স্ট্রেস-প্ররোচিত হ্রাস প্রতিবন্ধী হিপোক্যাম্পাল ফাংশনগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, যেমন শেখার এবং স্মৃতিশক্তি [18]। এছাড়াও, CA3 অঞ্চলে নিউরোনাল ইনজুরি এবং অ্যাপোপটোসিস স্থানিক মেমরির ঘাটতির দিকে পরিচালিত করে [19]। আচরণগতভাবে, এটি পাওয়া গেছে যে স্ট্রেস বিভিন্ন হিপ্পোক্যাম্পাস-নির্ভর ফাংশনকে দুর্বল করে, যেমন মেমরি [20]।

সিপিই বিভিন্ন ধরণের চাপের অধীনে সংশোধিত হয় এবং নিউরন রক্ষায় গুরুত্বপূর্ণ। হিপ্পোক্যাম্পাস এবং কর্টেক্সের নিউরনগুলি ইস্কেমিক স্ট্রেসের পরে সিপিই এক্সপ্রেশনকে আপগ্রেগুলেট করে, যা নিউরোনাল বেঁচে থাকার সাথে সম্পর্কিত [২১]।

উপরন্তু, CPEknockout (KO) ইঁদুর 3 সপ্তাহ বয়সে দুধ ছাড়ানোর পর একটি স্ট্রেস প্যারাডাইম প্রাপ্ত হওয়ার পরে তারা CA3 অঞ্চলের অবক্ষয় এবং ডেন্টেট গাইরাস (DG) [1, 22]-এ হ্রাসপ্রাপ্ত নিউরোজেনেসিস প্রদর্শন করে।

এই গবেষণায়, আমরা নিউরন CPE মুছে ফেলার জন্য একটি সাধারণ নিউরন-নির্দিষ্ট Camk2aCre সিস্টেম ব্যবহার করেছি। আমরা মস্তিষ্কের নিউরনে CPE-এর লস-অফ-ফাংশন ফিনোটাইপ অধ্যয়ন করার জন্য একটি CPE শর্তসাপেক্ষKO (cKO) মাউস মডেল তৈরি করেছি। আমরা CPE-cKO ইঁদুরের 3 সপ্তাহ বয়সে স্ট্রেস প্যারাডাইম (দুগ্ধ ছাড়ানো, কান-ট্যাগ করা এবং লেজ-ক্লিপড) এর প্রভাব মূল্যায়ন করেছি। জ্ঞানীয় কর্মক্ষমতা মূল্যায়ন করার জন্য আমরা 8-10 সপ্তাহ বয়সে অবজেক্ট রিকগনিশন, Y গোলকধাঁধা এবং ভয় কন্ডিশনিং পরীক্ষা ব্যবহার করেছি। উপরন্তু, আমরা হিপ্পোক্যাম্পাসে নিউরোনস্যান্ড অ্যাস্ট্রোসাইটের ফিনোটাইপগুলির পাশাপাশি নিউরোজেনেসিস বিশ্লেষণ করেছি।

পদ্ধতি

প্রাণী

Camk2a-Cre ইঁদুর এবং CPEflox/flox ইঁদুর সায়াজেনবায়োসায়েন্স (সুঝো, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীকে প্রাকৃতিক আলো/অন্ধকার চক্রের সাথে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রার (22 ডিগ্রি ± 2 ডিগ্রি) নীচে রাখা হয়েছিল এবং পরিষ্কার জল এবং স্ট্যান্ডার্ড ইঁদুর চৌ-এ বিনামূল্যে প্রবেশের অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। Camk2a-Cre এবং CPEflox/floxmice কে CPE-cKO ইঁদুর হিসাবে উল্লেখ করা হয়। 3 সপ্তাহ বয়সে, ইঁদুরের দুধ ছাড়ানো হয়, কানে ট্যাগ করা হয় এবং জিনোটাইপিংয়ের জন্য লেজ কাটা হয়, যা একটি মানসিক এবং শারীরিক চাপের দৃষ্টান্ত সৃষ্টি করে। আমরা Camk2a-Cre উল্লেখ করি; CPEflox/flox ইঁদুর হিসেবে CPEcKO, Camk2a-Cre; CPEflox/- ইঁদুর হিটেরোজাইগাস (HE), এবং CPE−/- ইঁদুর অ্যাসওয়াইল্ড টাইপ (WT)। প্রাণীদের জন্য সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি চীনের মিনজু বিশ্ববিদ্যালয়ের পরীক্ষামূলক প্রাণী নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (PCR)

জিনোটাইপ সনাক্ত করার জন্য পিসিআর-এর জন্য ডিএনএ বিচ্ছিন্ন করার জন্য ক্লিপ করা লেজগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রাইমারের ক্রমগুলি নিম্নরূপ:

শরীরের ওজন

WT, CPEflox/−, ​​এবং CPEflox/flox মাউস (1-20 সপ্তাহ বয়স; n=10 প্রতিটি জিনোটাইপের জন্য) প্রতি সপ্তাহে ওজন করা হয়েছিল, যা ওজন পরিবর্তনগুলি নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রতিটি মাউসের ওজন প্রতিটি গ্রুপের জন্য গড় করা হয়েছিল।

প্লাজমা গ্লুকোজ

12 ঘন্টা উপবাস করার পরে রক্তের গ্লুকোজ মনিটরিং সিস্টেম (ইউওয়েল, চীন) দ্বারা ইঁদুরের লেজ থেকে শিরাস্থ রক্ত ​​সংগ্রহ এবং সনাক্ত করা হয়েছিল। ফাস্টিং প্লাজমা গ্লুকোজের জন্য 0 মিনিটে পুচ্ছ শিরা থেকে রক্তের নমুনা নেওয়া হয়েছিল। এরপরে, প্রতিটি মাউসকে intraperitoneally a1 g/kg গ্লুকোজ দ্রবণ দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। তারপরে, আমরা রক্তের গ্লুকোজের মাত্রা পরিমাপের জন্য 15,30, 60, 90 এবং 120 মিনিটের জন্য প্লাজমা গ্লুকোজ নির্ধারণ করেছি।

আচরণগত পরীক্ষা

WT, CPEflox/−, ​​এবং CPEflox/flox ইঁদুরের আচরণ মূল্যায়ন করার জন্য, 8–10-সপ্তাহ বয়সী প্রাণী খোলা মাঠ, বস্তু শনাক্তকরণ, Y গোলকধাঁধা, এবং ভয় কন্ডিশনিং পরীক্ষা করেছে।

খোলা মাঠ

অনুসন্ধানমূলক আচরণ একটি ওপেন-ফিল্ড যন্ত্রপাতি (50 × 50 × 40 সেমি) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রতিটি প্রাণীকে যন্ত্রপাতির এক কোণে স্থাপন করা হয়েছিল এবং 7 মিনিটের জন্য পরিমাপ করা হয়েছিল। একটি ভিডিও-ইমেজিং সিস্টেম (তাইমেং, চেংদু, চীন) সহ শেষ 5 মিনিটের জন্য ভ্রমণ করা দূরত্ব রেকর্ড করা হয়েছিল।

বস্তুর স্বীকৃতি

অবজেক্ট রিকগনিশন পরীক্ষাটি ইঁদুরের শেখার এবং স্মৃতি পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রশিক্ষণের দিনে, দুটি অভিন্ন বস্তুকে যন্ত্রের তির্যক (50 × 50 × 40 সেমি) উপর স্থাপন করা হয়েছিল। প্রাণীদের 7 মিনিটের জন্য অবাধে অন্বেষণ করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। পরীক্ষার পদ্ধতির জন্য, প্রশিক্ষণের দিনের মতো একই তির্যকটিতে একটি অবজেক্টকে একটি নোভেলবজেক্ট দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল। প্রাণীদের 7 মিনিটের জন্য অবাধে অন্বেষণ করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। অভিনব বস্তুর চারপাশে 2-3 সেন্টিমিটারে অনুসন্ধানের সময়টি শেষ 5 মিনিটের জন্য রেকর্ড করা হয়েছিল।

Y গোলকধাঁধা

অনুসন্ধানমূলক কার্যকলাপ এবং কাজের স্মৃতি একটি Y-mazeapparatus ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল (বাহুর দৈর্ঘ্য: 30 সেমি, বাহুর প্রস্থ: 6 সেমি, প্রাচীরের উচ্চতা: 15 সেমি)। প্রতিটি প্রাণীকে কেন্দ্রীয় এলাকায় স্থাপন করা হয়েছিল। একটি ভিডিও-ইমেজিং সিস্টেম (তাইমেং, চেংদু, চীন) সহ অস্ত্রের মধ্যে প্রবেশের সংখ্যা এবং পরিবর্তন 7 মিনিটের জন্য রেকর্ড করা হয়েছিল। ফলাফলটি সঠিক পরিবর্তন নম্বর/মোট বাহু এন্ট্রি নম্বর হিসাবে গণনা করা হয়েছিল।

ভয় কন্ডিশনার

ভয় কন্ডিশনিং দুটি চেম্বার নিয়ে গঠিত, এবং ফ্রিজ মনিটরবক্স (23 × 23 × 30 সেমি) একটি বড় সাউন্ডপ্রুফ ঘরে (30 × 30 × 37 সেমি) স্থাপন করা হয়েছিল। ফ্রিজ মনিটর বাক্সে পায়ের শক দেওয়ার জন্য একটি ধাতব গ্রিড রয়েছে এবং প্রাণীদের উল্লম্ব এবং অনুভূমিক নড়াচড়া রেকর্ড করা হয়েছিল। প্রথম দিন ছিল কন্ডিশন্ড রিফ্লেক্স ট্রেনিং। পদ্ধতিটি নিম্নরূপ ছিল: 60 সেকেন্ডের জন্য নিষ্ক্রিয়তা এবং তারপরে 12 বার উদ্দীপনা।

উদ্দীপনার বিষয়বস্তুতে 30 s (75 dB) এর শর্তযুক্ত উদ্দীপনা অন্তর্ভুক্ত ছিল, তারপরে একটি ট্রেস ব্যবধান (30 s), এবং 2 s ফুট শক (30 mA) এবং 15 s নিষ্ক্রিয়তার সাথে শেষ হয়েছিল। ছয় ঘন্টা পরে, স্বল্পমেয়াদী মেমরি পরীক্ষা করা হয়, এবং উদ্দীপনার সংখ্যা কমে 6 করা হয়। উদ্দীপনা প্রক্রিয়া চলাকালীন, প্রতিটি পরীক্ষায় শর্তযুক্ত উদ্দীপনা থাকে যার পরে একটি ট্রেস ব্যবধান (30 সেকেন্ড) থাকে এবং পায়ের শক ছাড়াই শেষ হয়।

পরের দিন এক দিনের ব্যবধানে দীর্ঘমেয়াদী স্মৃতি পরীক্ষা করা হয়েছিল। দীর্ঘমেয়াদী মেমরির গুণমান পরিমাপের জন্য পদ্ধতিটি স্বল্প-মেয়াদী মেমরির মতোই ছিল।

For more information:1950477648nn@gmail.com