অ্যারিল হাইড্রোকার্বন রিসেপ্টর ইনহিবিশন ইঁদুরের অ্যাওর্টিক রিংগুলিতে ইন্ডোক্সিল সালফেট-মধ্যস্থ এন্ডোথেলিয়াল ডিসফাংশন পুনরুদ্ধার করে Ⅱ

3. আলোচনা

AhR অ্যাক্টিভেশন দ্বারা প্ররোচিত CYP1A1 এবং ROS উত্পাদন বৃদ্ধি এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর ভাসোডিলেটেশন [24,25] এর দুর্বলতায় একটি অবিচ্ছেদ্য ভূমিকা পালন করে। বর্তমান সমীক্ষার ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে CH223191 এর সাথে AhR-এর অবরোধ IS-মধ্যস্থতামূলক প্রক্সিডেটিভ CYP1A1 জিনের প্রকাশ এবংROS উত্পাদনমহাধমনীতে এবং সংরক্ষিত eNOS এক্সপ্রেশন এবং AC-এর এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর ভাসোডিলেটর প্রতিক্রিয়া। আইএস এক্সপোজারের পরে এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর ভাসোডাইলেটেশনের দুর্বলতা এর আগে ক্লিনিকাল সেটিংয়ে দেখা গেছেCKD রোগী, উপরন্তু, CKD রোগীদের মধ্যে AST-120 উন্নত এফএমডি [8] এবং শেষ পর্যায়ের মাইক্রোভাসকুলেচারে উন্নত এন্ডোথেলিয়াল প্রতিক্রিয়ার সাথে সঞ্চালনে আইএসের মাত্রা কমানোমূত্রাশয় - সম্বন্ধীয় ব্যাধিiontophoresis ব্যবহার করে রোগীদের [26]. একইভাবে, পশু মডেলের মধ্যেCKD, AST-120 দিয়ে চিকিত্সা মহাধমনী রিংগুলিতে এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর শিথিলতা পুনরুদ্ধার করে [১১]। একসাথে, এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে আইএস মাইক্রোভাসকুলার এবং নালী জাহাজগুলিতে এন্ডোথেলিয়াল-নির্ভর ফাংশনের প্রতিবন্ধকতার সাথে জড়িত। এই অধ্যয়নের একটি সম্ভাব্য সীমাবদ্ধতা হল যে অ্যালবুমিনের মতো প্লাজমা প্রোটিনের অনুপস্থিতিতে পরীক্ষা করা হয়েছিল, তাই এই তীব্র অধ্যয়নের জন্য ব্যবহৃত ফ্রি আইএসের ঘনত্ব পরিলক্ষিত হওয়ার চেয়ে বেশি হতে পারে।CKD রোগীতবে বর্তমান অধ্যয়নের উদ্দেশ্য ছিল আইএস-প্ররোচিত ভাস্কুলার ফাংশনের প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করা

কিডনির সংক্রমণের জন্য 25% ইচিনাকোসাইড এবং 9% অ্যাকটিওসাইড সহ প্রাকৃতিক জৈব সিস্টানচে নির্যাস পান

ভাস্কুলার এন্ডোথেলিয়ামজাহাজ নিয়ন্ত্রণ করেনাইট্রিক অক্সাইড (NO) সহ বিভিন্ন কারণের মাধ্যমে নালী এবং প্রতিরোধের ধমনীতে টোন ইউরেমিয়া [8,10,11,26-28] দ্বারা প্রভাবিত প্রধান প্রক্রিয়া বলে মনে করা হয়। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে এন্ডোথেলিয়াল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস (eNOS) হ্রাস পেয়েছে এবং IS-উদ্দীপিত এন্ডোথেলিয়াল কোষে কোন উৎপাদন নেই NADPH অক্সিডেস অ্যাক্টিভেশনের মাধ্যমে ROS বৃদ্ধির সাথে সাথে অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট সিস্টেমের [8,10,14,15] প্রতিরোধের সাথে যুক্ত। উপরন্তু,CKDAST-120 দিয়ে চিকিত্সা করা ইঁদুররা NO এবং eNOS এক্সপ্রেশনে একটি পুনরুদ্ধার এবং নিম্ন সিরাম IS স্তরের রিপোর্ট করেছে [29]। উপরন্তু, AhR-এর জেনেটিক মুছে ফেলার ফলে বন্য ধরনের ইঁদুরের তুলনায় পালস ওয়েভ বেগ কমে যায়, যা বর্ধিত জাহাজের স্থিতিস্থাপকতা নির্দেশ করে, যা NO সামগ্রী এবং eNOS কার্যকলাপ [30] বৃদ্ধির সাথে থাকে। এই পূর্ববর্তী অধ্যয়নের ফলাফলগুলি এখানে পর্যবেক্ষণ করা ফলাফলগুলির সাথে একমত, যেখানে IS উদ্দীপনার পরে এন্ডোথেলিয়াল NOX4, নাইট্রোটাইরোসিন এবং সুপারঅক্সাইড এক্সপ্রেশনের বৃদ্ধি এবং eNOS-এ একটি সহগামী হ্রাস পরিলক্ষিত হয়েছিল। অধিকন্তু এন্ডোথেলিয়ামের এই পরিবর্তনগুলি CH223191 এর উপস্থিতিতে প্রতিরোধ করা হয়েছিল। পূর্ববর্তী গবেষণায় NO দাতা সোডিয়াম নাইট্রোপ্রসাইড ব্যবহার করে আইএসের উপস্থিতিতে মহাধমনীতে এন্ডোথেলিয়াম-স্বাধীন শিথিলতা পরীক্ষা করা হয়েছে; যাইহোক, নিয়ন্ত্রণ অবস্থার সাথে তুলনা করার সময় 1 মিমি আইএসের সাথে চার দিন ইনকিউবেশনের পরেও প্রতিক্রিয়ার কোনও পরিবর্তন লক্ষ্য করা যায়নি [১১], তাই বর্তমান গবেষণায় এই শিথিলকরণটি তদন্ত করা হয়নি।

AhR এর সক্রিয়করণ এবং এর নিম্নধারার পথ এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর ভাস্কুলার কর্মহীনতা, উচ্চ রক্তচাপ, এবং কার্ডিয়াক হাইপারট্রফিতে ভূমিকা পালন করে বলে জানা গেছে CYP1A1 অভিব্যক্তি প্ররোচিত করে এবং ভাস্কুলেচার এবং হার্টে ROS বৃদ্ধি করে [24,25]। CYP1A1 নক-আউট ইঁদুরের গবেষণায় জানা গেছে যে AhR অ্যাক্টিভেশন এই টিস্যুতে সুপারঅক্সাইড উত্পাদন বৃদ্ধিতে বাধা দেয় এবং এন্ডোথেলিয়াল শিথিলতা পুনরুদ্ধার করে [25]। অধিকন্তু, AhR নকআউট ইঁদুর, বা -Napthoflavone ( -NF) এর সাথে রিসেপ্টরের ফার্মাকোলজিকাল বাধা, এছাড়াও AhR-এর আংশিক অ্যাগোনিস্ট, ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথিতে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস পেয়েছে [৩১]। এই পর্যবেক্ষণগুলির সাথে সামঞ্জস্য রেখে, মানুষের নাভির শিরার এন্ডোথেলিয়াল কোষগুলির (HUVECs) AhR সক্রিয়করণের গবেষণা একইভাবে NO এর সহসায় হ্রাসের সাথে IS-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের একটি উচ্চতা প্রদর্শন করেছে এবং CYP1A1 এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি করেছে, যা AhR দ্বারা বাধা বা প্রতিরোধ করা হয়েছিল। জৈব অ্যানিয়ন ট্রান্সপোর্টার প্রোবেনসিড [8,15] এর বাধা দ্বারা কোষে প্রবেশ করা থেকে।

বর্ধিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রো- এবং অ্যান্টি-অক্সিডেটিভ অবস্থার মধ্যে ভারসাম্যহীনতার কারণে হতে পারে। ARE-এর AhR প্ররোচিত Nrf2-প্রেরিত সক্রিয়করণ পরীক্ষা করে, আমরা অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট এনজাইমের অভিব্যক্তিতে কোনো পরিবর্তন পাইনি। পূর্বে, বোলাতি এট আল। দেখিয়েছে যে বর্ধিত IS HK2 কোষে Nrf2 জিনের অভিব্যক্তিকে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত করে, উপরন্তু উন্নত সিরাম IS সহ CKD-এর একটি ইঁদুরের মডেলে, হ্রাসকৃত Nrf2 এবং NQO1 প্রোটিন অভিব্যক্তি AST-এর সাথে চিকিত্সার পরে হ্রাস করা হয়েছিল-120 [৩২]। আমাদের ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে জিনোমিক পাথওয়ের দ্বিতীয় পর্বটি এখনও সক্রিয় নাও হতে পারে তীব্র 4 ঘন্টা এক্সপোজার বিবেচনা করে

এই গবেষণায় আইএস ব্যবহার করা হয়েছে। IS-প্ররোচিত AhR অ্যাক্টিভেশনের দীর্ঘ সময়ের কোর্স ব্যবহার করে এই অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট প্রক্রিয়াগুলির ভবিষ্যতের মূল্যায়ন নিশ্চিত করা হয়।

ইন্ডোল-3 অ্যাসিটিক অ্যাসিড (IAA) হল আরেকটি AhR অ্যাগোনিস্ট এবং PBUT, যা ক্রমান্বয়ে বৃদ্ধি পায়CKD রোগীদের প্রচলনএবং মৃত্যুহার এবং প্রধান প্রতিকূল কার্ডিওভাসকুলার ইভেন্টের পূর্বাভাস, এই অণুর সিরাম স্তরগুলি প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভের মার্কারগুলির সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল [33]। এছাড়াও, HUVEC-এর IAA উদ্দীপনার ফলে CYP1A1 এবং সাইক্লো-অক্সজেনেস-2 (COX-2) জিনের প্রকাশ বৃদ্ধি পায় এবং COX-2 প্রোটিন ও ROS উৎপাদন বৃদ্ধি পায়। CH223191 এর উপস্থিতিতে, প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের এই পরিবর্তনগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস বা বিলুপ্ত করা হয়েছিল [33]।

আইএস-প্ররোচিত প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াগুলি অ্যাডে সায়ন অণু প্রদাহজনক সাইটোকাইন এবং কেমোকাইন [11,15,34] প্রকাশের ফলে পরিচিত যা ভাস্কুলার ডিসফাংশনের প্যাথোজেনেসিসে অবদান রাখে। CH223191 HUVECs [15]-এ IS-প্ররোচিত মনোসাইট কেমো-আকর্ষণকারী প্রোটিন-1 (MCP-1) ​​প্রকাশকে বাধা দেওয়ার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে, এইভাবে ভাস্কুলার প্রদাহ কমায়। এছাড়াও, siAhR- স্থানান্তরিত HUVECs IS-বর্ধিত ভাস্কুলার প্রদাহ (TNF দ্বারা মধ্যস্থতা), লিউকোসাইট আনুগত্য, এবং ই-সিলেক্টিন জিন এক্সপ্রেশন [34] দমন করে। অধিকন্তু, IS এক্সপোজার (1 মিমি) স্বাস্থ্যকর প্রাণীদের থেকে চার দিন পর্যন্ত বিচ্ছিন্ন করা মহাধমনী রিং, শুধুমাত্র এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর শিথিলতাই কমিয়ে দেয় না, বরং CD31 দাগ কমায় এবং ভাস্কুলার কোষের আনুগত্যের অণু বৃদ্ধি করে-1 (VCAM{{18) }}) এবং অন্তঃকোষীয় আনুগত্য অণু-1 (ICAM-1) মহাধমনীতে অভিব্যক্তি [11]। একই টোকেন অনুসারে, দশ সপ্তাহে CKD ইঁদুর থেকে সংগ্রহ করা মহাধমনীতে এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর শিথিলতা হ্রাস পেয়েছে, এটি আইএস-এর সাথে ইনকিউবেট করার সময় আরও হ্রাস পেয়েছে। এই পরিবর্তনগুলির সাথে CD31 স্টেনিং হ্রাস এবং ICAM-1 এবং VCAM-1 স্টেনিং বৃদ্ধি পেয়েছে৷ তাছাড়া AST-120 দিয়ে CKD প্রাণীদের চিকিত্সা উন্নত এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর শিথিলকরণ এবং নিয়ন্ত্রণ স্তরের দিকে আনুগত্য মার্কার অভিব্যক্তি হ্রাস করে [11]। VCAM-1 অভিব্যক্তিতে AhR বাধা সহ এবং ছাড়া IS-এর স্বল্পমেয়াদী প্রভাব পরীক্ষা করা আমাদের ফলাফলগুলি উপরে বর্ণিত পূর্ববর্তী ফলাফলগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। মজার বিষয় হল IS উদ্দীপনার পরে 4 ঘন্টায় TNF জিনের অভিব্যক্তি বাড়তে দেখা গেছে, একটি অনুসন্ধান যা আমরা পূর্বে মানব মহাধমনী এন্ডোথেলিয়াল কোষ, THP-1 কোষ, ইঁদুর কার্ডিয়াক মায়োসাইট এবং ফাইব্রোব্লাস্ট এবং ইঁদুরের রেনালগুলিতে 18 ঘণ্টায় প্রদর্শন করেছি। মেসেঞ্জিয়াল কোষ [৩৫-৩৭]। অন্যরা একইভাবে মনোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজ সেল লাইনগুলিতে TNF এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি করেছে [38,39]। ম্যাক্রোফেজে, এটি AhR, নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর κB (প্রদাহের একটি কেন্দ্রীয় মধ্যস্থতাকারী), এবং সাইটোকাইন সংকেত 2 [39] এর মধ্যে ক্রস টক জড়িত বলে মনে করা হয়। যাইহোক, ভাস্কুলেচারে IS-প্ররোচিত TNF জিনের অভিব্যক্তিতে CH223191-এর প্রত্যক্ষ প্রতিরোধমূলক প্রভাব, আমাদের জানার জন্য, পূর্বে রিপোর্ট করা হয়নি এবং এটি আইএস-প্ররোচিত ভাস্কুলার প্রদাহের ভবিষ্যতের তদন্তের জন্য একটি নতুন প্রক্রিয়া হতে পারে।

AhR সর্বব্যাপী প্রকাশ করা হয় [40], পরামর্শ দেয় যে এর বাধা CKD এর সাথে যুক্ত অনেক টিস্যুতে প্রতিকূল প্রভাব কমাতে ভূমিকা পালন করতে পারে। আমরা পূর্বে দেখিয়েছি যে আইএস কার্ডিয়াক প্ররোচিত করে এবংরেনাল কোলাজেনকার্ডিয়াক ফাইব্রোব্লাস্ট এবং রেনাল মেসাঞ্জিয়াল কোষে সংশ্লেষণের পাশাপাশি কার্ডিয়াক মায়োসাইটগুলিতে মায়োসাইট হাইপারট্রফি এবং টিএইচপি-1 কোষে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া [৩৫]। অধিকন্তু, CKD এবং মায়োকার্ডিয়াল ইনফার্কশনের মডেলগুলিতে যেখানে সিরাম IS এবং কার্ডিয়াক এবং রেনাল ফাইব্রোসিস বৃদ্ধি পায়, AST-120 চিকিত্সা এই প্রভাবগুলি হ্রাস করতে দেখানো হয়েছিল [41-43]। Ichii et al. (2014) আট সপ্তাহ ধরে দীর্ঘস্থায়ী IS প্রশাসনের প্রদর্শনের ফলে প্রগতিশীল কিডনি এবং ভাস্কুলার রোগ দেখা দেয়, ফাইব্রোসিস, টিউবুলার অ্যাট্রোফি, ইউরিনারি অ্যালবুমিন/ক্রিয়েটিনিন অনুপাত, সেইসাথে পডোসাইট ইনজুরি সহ CYP1A1 এক্সপ্রেশনে বৃদ্ধির দ্বারা পরিলক্ষিত হয়, অ্যাক্টিভেশনের নির্দেশক। ]। ডায়াবেটিক কিডনিতে, AhR ফাইব্রোসিস, প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, ট্রাইক্রোম স্টেনিং-এর ক্রমবর্ধমান প্রকাশ, -মসৃণ পেশী অ্যাক্টিন, ফাইব্রোনেক্টিন, সিরাম প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2 (PGE2), সিরাম উন্নত গ্লাইকেশন শেষ পণ্য, COX{{ ভূমিকা পালন করে বলে মনে করা হয়। 12}}, F4/80 ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ, NOX কার্যকলাপ, এবং অক্সিডেটিভ ক্ষতির চিহ্নিতকারী 8-হাইড্রোক্সিডিঅক্সিগুয়ানোসিন। ডায়াবেটিক AhR নকআউট ইঁদুর এবং AhR বিরোধী -NF [31] এর সাথে চিকিত্সা করা ডায়াবেটিক বন্য টাইপ ইঁদুরগুলিতে এই মার্কারগুলির বর্ধিত প্রকাশ রোধ করা হয়েছিল। উপরন্তু, লি এট আল দ্বারা ভিট্রো স্টাডিজ. (2016) দেখিয়েছে যে N-ε-carboxymethyl-lysine (CML) সহ ইঁদুর এবং মাউসের মেসাঞ্জিয়াল কোষ এবং মানুষের কিডনির টিউবুলার কোষগুলির উদ্দীপনা, একটি প্রধান উন্নত গ্লাইকা tion শেষ পণ্য, AhR এর বর্ধিত প্রকাশ, কোলাজেন IV, সংযোগকারী টিস্যু বৃদ্ধির ফ্যাক্টর ,ফাইব্রোনেক্টিন, এবং PGE2, এই অভিব্যক্তিটি shRNA-AhR দ্বারা স্থানান্তরিত কোষগুলিতে বা ফার্মাকোলজিক্যালভাবে -NF [31] এর সাথে চিকিত্সা করা প্রতিরোধ করা হয়েছিল।

এটা স্পষ্ট যে AhR কার্ডিওভাসকুলার প্যাথলজিতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করেমূত্রাশয় - সম্বন্ধীয় ব্যাধিCKD এর সেটিংয়ে, থেরাপিউটিক হস্তক্ষেপের জন্য একটি নতুন সম্ভাবনা প্রদান করে। EPPIC ট্রায়ালের ফলাফলের সাথে AST-120 [২৩] এর সাথে একটি নিরপেক্ষ ফলাফল রিপোর্ট করে, CKD-তে PBUT-এর ক্ষতিকর প্রভাবগুলি প্রশমিত করার জন্য অন্যান্য কৌশলগুলি প্রয়োজন৷ AhR নিষেধাজ্ঞার সুবিধার ইঙ্গিত করে তথ্যের প্রাচুর্যের পরিপ্রেক্ষিতে, ভিভো, ইন ভিট্রো, বা এক্স ভিভো, জেনেটিক বা ফার্মাকোলজিক্যাল যাই হোক না কেন, CKD-এর একটি ক্লিনিক্যালি প্রাসঙ্গিক মডেলে CH223191 পরীক্ষা করার নীতিগত অধ্যয়নের একটি ভিভো প্রমাণ যা কার্যকারিতা দেখায় পরবর্তী পর্যায়ে ড্রাগ এই শ্রেণীর অগ্রগতি.

উপসংহারে, বর্তমান অধ্যয়নটি দেখায় যে এন্ডোথেলিয়াল-নির্ভর ভাসোডিলেটেশনের IS-মধ্যস্থতা প্রতিবন্ধকতা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে যুক্ত, যার সাথে CYP1A1 এক্সপ্রেশনের বৃদ্ধি জড়িত। CH223191-এর সাথে AhR-এর নিষেধাজ্ঞার মাধ্যমে এই প্রভাবগুলির বিপরীতমুখীতা CKD জনসংখ্যার মধ্যে এন্ডোথেলিয়াল ফাংশন বজায় রাখতে থেরাপিউটিক ইউটিলিটি প্রদান করতে পারে। সম্ভাব্যভাবে, AhR বিরোধীদের CKD রোগীদের মান-অব-যত্ন চিকিত্সা ছাড়াও একটি সহায়ক থেরাপি হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে এবং এই জনসংখ্যার মধ্যে CVD ঝুঁকির অগ্রগতি হ্রাস করতে পারে।

4. উপকরণ এবং পদ্ধতি

4.1। ভাস্কুলার প্রতিক্রিয়া

AhR প্রতিপক্ষের অনুপস্থিতি এবং উপস্থিতিতে IS এর প্রভাব সম্পর্কে, CH223191 এর জন্য মূল্যায়ন করা হয়েছিলএন্ডোথেলিয়াল ফাংশন. সংক্ষেপে, 10–14 সপ্তাহ বয়সী পুরুষ স্প্রাগ-ডাউলি ইঁদুরকে লেথবার্ব (ট্রয় ল্যাবরেটরিজ, অস্ট্রেলিয়া) দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত থোরাসিক অ্যাওর্টা সংগ্রহ করা হয়েছিল [36]। মহাধমনী পরিষ্কার করা হয়েছিল এবং চারটি 5 মিমি রিংগুলিতে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং টেনশন সামঞ্জস্য করার জন্য একটি মাইক্রোমিটারের সাথে সংযুক্ত 2টি অনুভূমিক স্টেইনলেস স্টিলের সমর্থনগুলির মধ্যে সাবধানে স্থাপন করা হয়েছিল। টিস্যুগুলি ক্রেবস-হেনসেলিট বাফার (119 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 1.17 mM MgSO4.7H2O, 25 mM NaHCO3, 1.18 mM KH2PO4, 11 mMede}, 11 mMedse-d.0}-এ অক্সিজেনযুক্ত টিস্যু স্নানের মধ্যে নিমজ্জিত ছিল। , 2.0 mM CaCl2) [11], এবং এলোমেলোভাবে নিম্নলিখিত শর্তে বরাদ্দ করা হয়েছে: (1) নিয়ন্ত্রণ; (2) IS (300 µM); (3) IS + CH223191 (1 µM); (4) IS + CH223191 (10 µM)। টিস্যুগুলি 2 গ্রাম বেসলাইন টেনশনের অধীনে স্থিতিশীল করা হয়েছিল এবং প্রতি 5 মিনিটে ক্রেবস বাফার দিয়ে 5 বার ধোয়া হয়েছিল। কার্যকারিতা এবং সংকোচনশীল প্রতিক্রিয়াগুলি (80 mmol/L) দিয়ে মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং বাফার সহ 3 × 5 মিনিট ওয়াশআউট সময়ের আগে সর্বাধিক সংকোচনে পৌঁছানোর অনুমতি দেওয়া হয়েছিল।

ক্রেবস-হেনসেলিট বাফারে স্থাপিত টিস্যুগুলি 2 ঘন্টার জন্য যানবাহন (0.1% শর্ত 1 এবং 2 এর জন্য DMSO) বা AhR প্রতিপক্ষ CH223191 (যথাক্রমে 3 এবং 4 এর জন্য 1 বা 10 µM) দিয়ে প্রিঙ্কুব করা হয়েছিল IS এর সাথে একটি 1 ঘন্টা ইনকিউবেশন (300 µM, শর্ত 2–4, নিয়ন্ত্রণের অবস্থা 120 μL পাতিত জল পেয়েছে)। অর্টিক রিংগুলি তখন ফেনাইলেফ্রাইন (PE, 30 µM) দিয়ে প্রিকন কঠোর করা হয়েছিল, যেখানে এন্ডোথেলিয়াম-নির্ভর ভাস্কুলার ফাংশন সর্বাধিক সংকোচন অর্জনের পরে এসিটাইলকোলিন (ACh; 1 nM–30 µM) এর ডোজ-প্রতিক্রিয়া শিথিলকরণ বক্ররেখা দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। উত্তেজনার পরিবর্তনটি আইসোমেট রিক ট্রান্সডুসার (FT03C, গ্রাস ইন্সট্রুমেন্টস, কুইন্সি, এমএ, ইউএসএ), পরিবর্ধিত (ইউনিকর ইন্সট্রুমেন্টস, বক্স হিল, ভিক, অস্ট্রেলিয়া) এর মাধ্যমে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং ডেটা অধিগ্রহণ হার্ডওয়্যার (পাওয়ারল্যাব 4sp, ADInstruments, ক্যাসল হিল) ব্যবহার করে রেকর্ড করা হয়েছিল , NSW, Australia) এবং চার্ট সফ্টওয়্যার (ADInstruments v5.6)। এসিএইচ এর প্রতিটি ডোজ সহ ফলে শিথিলতা প্রতিটি অবস্থার জন্য ফেনাইলেফ্রিনের সাথে প্রাপ্ত সর্বাধিক সংকোচনের শতাংশ হ্রাস হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। সেন্ট ভিনসেন্ট হাসপাতালের প্রাণী নীতিশাস্ত্র কমিটি, AEC 006/17 দ্বারা পশু পরীক্ষাগুলি অনুমোদিত হয়েছিল।

4.2। জিন এক্সপ্রেশন স্টাডিজ

উপরে বর্ণিত হিসাবে পৃথক প্রাণী থেকে থোরাসিক অর্টিক রিংগুলিকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং 37 ◦C তাপমাত্রায় 5% CO2-তে অ্যান্টিবায়োটিক (1%) এর পরিপূরক Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। উপরে বর্ণিত অবস্থা 1-4 এর অধীনে, মহাধমনী রিংগুলি 2 ঘন্টার জন্য CH223191 দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং তারপরে 4 ঘন্টার জন্য IS যুক্ত করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে ট্রিজল নিষ্কাশন পদ্ধতি ব্যবহার করে আরএনএ বের করা হয়েছিল, তারপরে DNase চিকিত্সা এবং বিপরীত প্রতিলিপি দ্বারা। একটি QuantStudio 7- ব্যবহার করে ইঁদুর CYP1A1, Nrf2, NQO1, GSTA1/2, TNF, এবং VCAM-1 (প্রাইমার সিকোয়েন্সের জন্য পরিপূরক সারণী S1 দেখুন) এর জন্য SYBR সবুজ এবং ক্রম-নির্দিষ্ট প্রাইমার ব্যবহার করে PCR সম্পাদিত হয়েছিল ফ্লেক্স রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম)। CYP1A1 mRNA অভিব্যক্তিতে আপেক্ষিক পরিবর্তনের বিশ্লেষণ হাউস-কিপিং জিন 18S ব্যবহার করে তুলনামূলক ∆∆Ct পদ্ধতি ব্যবহার করে পরিচালিত হয়েছিল।

4.3। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি

ভাস্কুলার রিঅ্যাকটিভিটি পরীক্ষা-নিরীক্ষার উপসংহারে, মহাধমনী রিংগুলিকে রাতারাতি 10% নিরপেক্ষ বাফারযুক্ত ফরমালিনের মধ্যে ঠিক করা হয়, একটি স্বয়ংক্রিয় টিস্যু প্রসেসরে প্রক্রিয়াজাত করা হয় এবং পরের দিন ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রির জন্য প্যারাফিন-এম্বেড করা হয়। প্রতিটি পরীক্ষা থেকে এলভি টিস্যু বিভাগ (4 µm) RECA-1 (BioRad #MCA970GA, 1/200 dilution), eNOS (BD Biosciences #610296, 1/200 dilution), NOX4 (Abcam #133303, /150 dilution), এবং nitrotyrosine (Merck #06-284, 1/100 dilution), এবং ডি অ্যামিনোবেনজিমাইডের সাথে সনাক্ত করা হয়েছে যেমন পূর্বে বর্ণিত হয়েছে [45]। দাগযুক্ত স্লাইডগুলি স্ক্যানস্কোপ কনসোল সফ্টওয়্যার (v8, Aperio Technologies, Vista, CA, USA) সহ Aperio Scanscope স্ক্যানার ব্যবহার করে ডিজিটালভাবে স্ক্যান করা হয়েছিল এবং ইমেজস্কোপ সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে মোট লুমেন পরিধির শতাংশ হিসাবে ইতিবাচক লুমিনাল স্টেনিংয়ের জন্য পরিমাপ করা হয়েছিল (v 11.1.2.760 টেকনোলজিস )

4.4। প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির মূল্যায়ন

প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি(আরওএস) ফাংশন জাতীয় গবেষণা থেকে প্রাপ্ত মহাধমনী টিস্যুতে সনাক্ত করা হয়েছিল। টিস্যু বিভাগগুলি 37 ◦C [46] এ 30 মিনিটের জন্য ডাইহাইড্রোইথিডিয়াম (DHE, 2 µM) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। একটি কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ (Nikon A1R, Nikon Instruments Inc., Melville NY, USA) ×20 ম্যাগনিফিকেশনে 610 nm এর নির্গমন বর্ণালী সহ লাল-ফ্লুরোসেন্ট স্টেনিং কল্পনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইমেজজে (এনআইএইচ, বেথেসদা, এমডি, ইউএসএ) ব্যবহার করে ডিএইচই স্টেনিংয়ের শতাংশ এলাকা নির্ধারণ করা হয়েছিল।

4.5। পরিসংখ্যানগত পদ্ধতি

এন্ডোথেলিয়াল ফাংশনের উপর প্রভাবগুলি প্রতিটি AC ডোজে শতাংশ শিথিলকরণের প্রভাব নির্ধারণের জন্য টুকির পোস্ট-হক তুলনার সাথে একটি দ্বি-মুখী পুনরাবৃত্ত পরিমাপের বিশ্লেষণ (ANOVA) দ্বারা তুলনা করা হয়েছিল। AC-এর জন্য সর্বাধিক শিথিলকরণ (Rmax) এবং pEC50 মানগুলি অ-রৈখিক রিগ্রেশন দ্বারা প্রাপ্ত হয়েছিল এবং টুকি পোস্ট-হক তুলনা সহ একটি একমুখী পুনরাবৃত্তি ব্যবস্থা ANOVA দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। এটি ACH এর জন্য সর্বাধিক শিথিলকরণ (Rmax) এবং pEC50 মানের পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। একইভাবে, জিনের প্রকাশ, এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল এবং ডিএইচই স্টেনিংকে টুকির পোস্ট-হক তুলনার সাথে একমুখী আনোভা দ্বারা তুলনা করা হয়েছিল।

সম্পূরক উপকরণ:নিম্নলিখিত সমর্থনকারী তথ্য এখানে ডাউনলোড করা যেতে পারে: https://www.mdpi.com/article/10.3390/toxins14020100/s1, চিত্র S1: বিচ্ছিন্ন ইঁদুর মহাধমনী রিংগুলিতে ভাস্কুলার প্রতিক্রিয়ার উপর একা CH223191 এর প্রভাব; চিত্র S2: Nrf2 এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট জিন এক্সপ্রেশনের উপর IS এবং AhR বাধার প্রভাব টেবিল S1: রিয়েল টাইম পিসিআর দ্বারা জিনের পরিমাণ নির্ধারণের জন্য ব্যবহৃত প্রাইমারগুলির নিউক্লিওটাইড ক্রম।

লেখকের অবদান:ধারণা, ARK; পদ্ধতি, CN এবং ARK; বৈধতা, CN, AJE, এবং ARK; আনুষ্ঠানিক বিশ্লেষণ, CN এবং ARK; তদন্ত, সিএন; সম্পদ, ARK এবং DJK; ডেটা কিউরেশন, CN এবং ARK; লেখা-মূল খসড়া প্রস্তুতি, CN; লেখা-পর্যালোচনা এবং সম্পাদনা, CN, AJE, DJK এবং ARK; ভিজ্যুয়ালাইজেশন, CN এবং ARK; তত্ত্বাবধান, AJE এবং ARK; প্রকল্প প্রশাসন, AJE এবং DJK; তহবিল অধিগ্রহণ, DJK সমস্ত লেখক পাণ্ডুলিপির প্রকাশিত সংস্করণ পড়েছেন এবং সম্মত হয়েছেন।

তথ্যসূত্র

1. সাভিরা, এফ.; Ademi, Z.; ওয়াং, বিএইচ; কোম্পা, এআর; ওয়েন, এজে; লিউ, ডি.; Zomer, E. কিডনির প্রতিরোধযোগ্য উৎপাদনশীলতা বোঝাঅস্ট্রেলিয়ায় রোগ।জে. এ.এম. সমাজ নেফ্রোল।2021, 32, 938–949. [ক্রসরেফ] 

2. এলশাহাত, এস.; ককওয়েল, পি.; ম্যাক্সওয়েল, এপি; গ্রিফিন, এম.; ও'ব্রায়েন, টি.; O'Neill, C. বিকাশের উপর দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগের প্রভাবস্বাস্থ্য অর্থনীতির দৃষ্টিকোণ থেকে দেশ: একটি পদ্ধতিগত স্কোপিং পর্যালোচনা।প্লাস ওয়ান2020, 15, e0230512. [ক্রসরেফ] 

3. মঞ্জুনাথ, জি.; Tighiouart, H.; ইব্রাহিম, এইচ.; ম্যাকলিওড, বি.; সালেম, ডিএন; গ্রিফিথ, জেএল; কোরশ, জে.; লেভি, এএস; সারনাক, এমজে লেভেল অফকমিউনিটিতে এথেরোস্ক্লেরোটিক কার্ডিওভাসকুলার ফলাফলের জন্য একটি ঝুঁকির কারণ হিসাবে কিডনির কার্যকারিতা।জে. এ.এম. কল. কার্ডিওল।2003, 41, 47–55. [ক্রসরেফ] 

4. ব্যারেটো, এফসি; ব্যারেটো, ডিভি; লিয়াবেউফ, এস.; Meert, N.; Glorieux, G.; টেমার, এম.; Choukroun, G.; ভ্যানহোল্ডার, আর.; ম্যাসি, জেডএ; ইউরোপীয়ইউরেমিক টক্সিন ওয়ার্ক গ্রুপ। সিরাম ইন্ডোক্সিল সালফেট দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগে ভাস্কুলার রোগ এবং মৃত্যুর সাথে যুক্তরোগীদেরক্লিন। জে. এ.এম. সমাজ নেফ্রোল।2009, 4, 1551–1558. [ক্রসরেফ] [পাবমেড] 

5. ইমাজু, এম.; ফুকুদা, এইচ.; কানজাকি, এইচ.; আমাকি, এম.; হাসগাওয়া, টি.; তাকাহামা, এইচ.; হিটসুমোটো, টি.; Tsukamoto, O.; মরিতা, টি.; ইটো, এস.;ইত্যাদি প্লাজমা ইন্ডোক্সিল সালফেটের মাত্রা হালকা ক্রনিক হার্ট ফেইলিউর রোগীদের কার্ডিওভাসকুলার ইভেন্টের পূর্বাভাস দেয়।বিজ্ঞান খ্যাতি.2020, 10, 16528. [ক্রসরেফ]

6. ডি লুলো, এল.; হাউস, এ.; গোরিনি, এ.; সান্তোবনি, এ.; রুশো, ডি.; রনকো, সি. ক্রনিক কিডনি রোগ এবং কার্ডিওভাসকুলার জটিলতা।হার্ট ফেইল। রেভ2015, 20, 259–272. [ক্রসরেফ] [পাবমেড] 

7. জার্দে-চিচে, এন.; ডু, এল.; সেরিনি, সি.; ডিগনেট-জর্জ, এফ.; ব্রুনেট, পি. ডায়ালাইসিস রোগীদের মধ্যে ভাস্কুলার অক্ষমতা-প্রোটিন-বাউন্ডইউরেমিক টক্সিন এবং এন্ডোথেলিয়াল কর্মহীনতা।সেমিন। ডায়াল করুন।2011, 24, 327–337. [ক্রসরেফ] 

8. ইউ, এম; কিম, ওয়াইজে; কাং, দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগে আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে ডিএইচ ইন্ডোক্সিল সালফেট-প্ররোচিত এন্ডোথেলিয়াল কর্মহীনতাঅক্সিডেটিভ স্ট্রেস আনয়ন.ক্লিন। জে. এ.এম. সমাজ নেফ্রোল।2011, 6, 30–39. [ক্রসরেফ] [পাবমেড] 

9. Ooi, QL; টো, এফকে; দেবা, আর.; উপনাম, এমএ; কাওয়াসাকি, আর.; ওং, টিওয়াই; মোহাম্মদ, এন.; কলভিল, ডি.; হাচিনসন, এ.; সেভিজ, জে. দ্যদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগে মাইক্রোভাস্কুলচার।ক্লিন। জে. এ.এম. সমাজ নেফ্রোল।2011, 6, 1872–1878. [ক্রসরেফ] [পাবমেড] 

10. চু, এস.; মাও, এক্স.; গুও, এইচ.; ওয়াং, এল.; লি, জেড.; ঝাং, ওয়াই.; ওয়াং, ওয়াই.; ওয়াং, এইচ.; ঝাং, এক্স।; পেং, ডব্লিউ. ইন্ডোক্সিল সালফেট সম্ভাবনাময়প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির জন্য পারস্পরিক ভূমিকার মাধ্যমে এন্ডোথেলিয়াল ডিসফাংশন এবং 5/6 নেফ্রেক্টোমাইজড ইঁদুরে RhoA/ROCK সিগন্যালিং।ফ্রি রেডিক। Res.2017, 51, 237–252. [ক্রসরেফ] 

সাপোর্টিভ সার্ভিস অফ ওয়েসিস্তানচে- চীনের বৃহত্তম সিস্টানচে রপ্তানিকারক:

ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/টেল:+86 15292862950

আরও নির্দিষ্ট বিবরণের জন্য কেনাকাটা করুন:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

কিডনির সংক্রমণের জন্য 25% ইচিনাকোসাইড এবং 9% অ্যাকটিওসাইড সহ প্রাকৃতিক জৈব সিস্টানচে নির্যাস পান