জিনসেনোসাইড এফ১-এর ঝকঝকে কার্যকারিতা মেলানিন ট্রান্সফার ইনহিবিশন অফ ককালচারড হিউম্যান মেলানোসাইটসেকেরাটিনোসাইট এবং ত্রিমাত্রিক মানব ত্বকের সমতুল্য

জিনসেনোসাইড হল জিনসেং এর প্রধান সক্রিয় উপাদান। স্কিন ফিজিওলজিতে, জিনসেনোসাইড রঙ্গক নিয়ন্ত্রণকে প্রভাবিত করে এবং অ্যান্টিজিং কার্যকলাপ প্রদর্শন করে। সাম্প্রতিক প্রতিবেদন অনুসারে, জিনসেনোসাইড আরজি 1 মানুষের মেলানোসাইটগুলিতে মেলানোজেনেসিস এবং টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ বাড়ায় [1]। বিপরীতে, জিনসেনোসাইড F1 (GF1) (sFig. 1), Rg1 এর হাইড্রোলাইসিস দ্বারা উত্পাদিত একটি বিপাক, দৃশ্যমান পিগমেন্টেশনকে বাধা দেয় বলে জানা গেছে। হান এট আল-এর একটি ক্লিনিকাল গবেষণা মানব এপিডার্মাল জিডি টি কোষ থেকে ইন্টারলিউকিন 13 উত্পাদনের কারণে কৃত্রিমভাবে ট্যান করা মানুষের ত্বকে GF1 এর ত্বক-সাদা করার প্রভাব প্রদর্শন করেছে [2]। কিম এট আল দেখিয়েছেন যে GF1 মেলানোসাইট-স্টিমুলেটিং হরমোন (এমএসএইচ)-উত্তেজক B16F10 মুরিন মেলানোমা কোষগুলিতে অন্তঃকোষীয় মেলানিন সামগ্রী এবং টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশনের উপর কোনও প্রভাব ছাড়াই ডেনড্রাইট প্রত্যাহারের মাধ্যমে মেলানিন নিঃসরণ হ্রাস করে [৩]। যাইহোক, আজ অবধি, ইন ভিট্রো পরীক্ষামূলক পদ্ধতিতে মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইট সমন্বিত মানব এপিডার্মাল পরিবেশে GF1 এর ঝকঝকে প্রভাবের উপর কোন সরাসরি ফলাফল পাওয়া যায়নি।

ইন্টারপোলেশন, একই সময়ে আমরা দেখতে পেলাম যে Cistanche deserticola এ টাইরোসিনেজও রয়েছে এবং টাইরোসিনেজ-ডোপা রেট অক্সিডেশন পদ্ধতি সিস্তানচে ডেসার্টিকোলায় ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড নির্যাসের উপর টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের নিয়ন্ত্রণ গবেষণা চালিয়েছে, ফলাফলগুলি দেখায় যে: মোট ফেনাইলেথানয়েড Cistanche deserticola এর গ্লাইকোসাইডস নির্যাস টাইরোসিনেজের কার্যকলাপকে উল্লেখযোগ্যভাবে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত করতে পারে। Cistanche deserticola এর phenylethanoid glycoside কার্যকরভাবে সূর্যালোকে অতিবেগুনী বিকিরণ শোষণ করতে পারে। ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের আণবিক গঠনে একাধিক সংযোজিত সিস্টেম রয়েছে। অতিবেগুনী স্ক্যান করার পরে, এটি পাওয়া যায় যে এটির 280nm এবং 380nm এর মধ্যে শক্তিশালী শোষণ রয়েছে এবং সর্বাধিক শোষণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য 281nm এবং 333nm। , ইঙ্গিত করে যে Cistanche deserticola এর phenylethanoid glycoside অতিবেগুনী রশ্মির উপর একটি ভাল শোষণ প্রভাব ফেলে, এবং ত্বকে অতিবেগুনী বিকিরণের ক্ষতিকে আরও ভালভাবে প্রতিরোধ ও উপশম করতে পারে।

জিং ভেষজ cistanche নির্যাস পাউডার পণ্য ক্লিক করুন

চিত্র 1. মেলানিন বিষয়বস্তুর উপর GF1 এর প্রভাব এবং মানুষের মেলানোসাইটে টাইরোসিনেজ প্রকাশ। GF1 (10 mM, 50 mM, 100 mM) 24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টার জন্য MNT-1 কোষ দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। (A) মেলানিনের বিষয়বস্তু তারপর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। (বি) টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশন স্তরটি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এছাড়াও, GF1 (10, 50, 100 uM) কে 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টার জন্য a-MSH (500 nM)-উত্তেজক MNT-1 কোষে চিকিত্সা করা হয়েছিল। (সি) মেলানিনের বিষয়বস্তু তারপর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। (ডি) টাইরোসিনেস এক্সপ্রেশন স্তর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। আমরা 48 ঘন্টার জন্য A-MSH উদ্দীপনার উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে GF1 (50 mM এবং 100 mM) দিয়ে প্রাথমিক স্বাভাবিক মানব এপিডার্মাল মেলানোসাইটস (NHEM) চিকিত্সা করেছি। (ই) মেলানিনের বিষয়বস্তু তারপর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। (এফ) টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশন স্তর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। MNT-1 কোষগুলিকে GF1 (50 mM এবং 100 mM) দিয়ে 100 mM বা 500 mM L-tyrosine ধারণকারী একটি সংস্কৃতি মাধ্যমে 48 ঘন্টার জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল। (জি) তারপরে, মেলানিনের বিষয়বস্তু বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। GADPH, গ্লিসারালডিহাইড 3-ফসফেট ডিহাইড্রোজেনেস; GF1, ginsenoside F1.

এখানে, আমরা MNT-1/HaCaT কোকালচার কোষ এবং ত্রি-মাত্রিক (3-D) মানুষের ত্বকের সমতুল্য GF1-এর অ্যান্টি-মেলানোজেনিক প্রভাবগুলি তদন্ত করেছি। এছাড়াও, আমরা GF1 চিকিত্সার পরে মেলানোসাইটগুলিতে ডেনড্রাইট গঠন এবং কেরাটিনোসাইটগুলিতে মেলানোসোম স্থানান্তরের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছি। সম্মিলিতভাবে, আমাদের অনুসন্ধানগুলি প্রথমবারের মতো দেখায় যে GF1 মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইটের সাথে সহাবস্থানে থাকা মানব এপিডার্মিসে সাদা করার প্রভাব দেখিয়েছে।

এই গবেষণার জন্য, MNT-1 কোষগুলিকে 20 শতাংশ ফেটাল বোভাইন সিরাম (FBS), 1 শতাংশ জেন্টামাইসিন এবং 20 মিমি হাইড্রোক্সিইথাইল পাইপারাজিনেথানেসালফোনিক অ্যাসিড (HEPES) ধারণ করে ন্যূনতম প্রয়োজনীয় মিডিয়া (MEM) তে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। 10 শতাংশ FBS, 1 শতাংশ জেন্টামাইসিন এবং 20 মিমি HEPES ধারণকারী ডালবেকোর পরিবর্তিত ঈগলের মাঝারি (DMEM) মধ্যে HaCaT কোষগুলিকে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। সাধারণ মানব এপিডার্মাল মেলানোসাইট (NHEM) (লোনজা, বাসেল, সুইজারল্যান্ড) থেকে কেনা হয়েছিল এবং মেলানোসাইট বৃদ্ধির মাধ্যম-4 (MGM-4) ​​মিডিয়াতে সংস্কৃত করা হয়েছিল। 5 শতাংশ CO2 বায়ুমণ্ডলের অধীনে কোষগুলি 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করা হয়েছিল।

মেলানিনের বিষয়বস্তু পরিমাপ করার জন্য, কোষগুলি (2 105) একটি 6-কূপ প্লেটে 24 ঘন্টার জন্য সংষ্কৃত হয়েছিল। কোষগুলিকে GF1 এর নির্দেশিত ঘনত্ব দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। তারপরে, কোষগুলিকে ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন (পিবিএস) দিয়ে দুবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং তারপরে ট্রিপসিন/ইডিটিএ দিয়ে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। 2 ঘন্টার জন্য 80 C তাপমাত্রায় 1 N NaOH এর 200 মিলি ইনকিউবটিং দ্বারা কোষগুলিকে লাইজ করা হয়েছিল। সেল লাইসেটগুলিকে একটি 96-ওয়েল প্লেটে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল, এবং শোষণকে 405 nm এ পরিমাপ করা হয়েছিল৷

ওয়েস্টার্ন ব্লটিং সঞ্চালনের জন্য, কোষগুলিকে ঠান্ডা পিবিএস দিয়ে দুবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং তারপরে বরফ-ঠান্ডা পরিবর্তিত রেডিওইমিউনোপ্রেসিপিটেশন অ্যাস (RIPA) বাফারে (50 মিমি ট্রিস-এইচসিএল, পিএইচ 7.4, 1 শতাংশ ননিডেট পি-40 , 0.5 শতাংশ সোডিয়াম ডিঅক্সিকোলেট, 150 মিমি NaCl) প্রোটেজ ইনহিবিটর এবং ফসফেটেজ ইনহিবিটর ককটেল সেট (ক্যালবিওকেম, সান দিয়েগো, সিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র)। প্রোটিনগুলিকে সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট-পলিঅ্যাক্রিলামাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (SDS-PAGE) দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল এবং নাইট্রোসেলুলোজ ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল। ঝিল্লিগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য 4 সেন্টিগ্রেডে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল, তারপর 0.1 শতাংশ টুইন-20 সহ ট্রিস-বাফারযুক্ত স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল, ঘরের তাপমাত্রায় 1 ঘন্টার জন্য পারক্সিডেস-কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডির সংস্পর্শে এসেছিল, ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং তারপরে দৃশ্যমান করা হয়েছিল। একটি ওডিসি ইমেজিং সিস্টেম ব্যবহার করে।

মেলানোসোম স্থানান্তর বিশ্লেষণ করার জন্য, MNT{{0}}/HaCaT কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য 1 থেকে 10 অনুপাতে একটি 12-ওয়েল প্লেটে সংষ্কৃত করা হয়েছিল এবং তারপরে, GF1 নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। কোষগুলি ঠান্ডা পিবিএস দিয়ে দুবার ধুয়ে 10 মিনিটের জন্য 3.5 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে স্থির করা হয়েছিল। কোষগুলিকে 0.1 শতাংশ ট্রাইটন এক্স-100 দিয়ে 10 মিনিটের জন্য এবং তারপর 0.5 শতাংশ বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (বিএসএ) দিয়ে 1 ঘন্টার জন্য ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিন 1 (1:200, লাল) এবং সাইটোকেরাটিন-18 (1:200, সবুজ) এর বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডিগুলি মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইট সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল।

মেলানোডার্ম স্কিন টিস্যু মডেল (টিএম) হল একটি কার্যকর পুনর্গঠিত {{0}}ডি মানুষের ত্বকের সমতুল্য যা স্বাভাবিক মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইট (ম্যাটেক কর্পোরেশন, অ্যাশল্যান্ড, এমএ) ধারণ করে। আমরা MelanoDerm TM (MEL-300-A) ব্যবহার করেছি যা এশিয়ান দাতাদের থেকে প্রাপ্ত। প্রস্তুতকারকের সুপারিশ অনুসারে সেগুলি নতুন রক্ষণাবেক্ষণের মাধ্যমে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল-113৷ মেলানোডার্ম টিএম-এ GF1 প্রয়োগ করা হয়েছিল 0, 4, 6, 8, 11, 13 এবং 15 তারিখে। GF1 চিকিত্সার আগে, কোনো অবশিষ্ট যৌগ অপসারণের জন্য টিস্যুগুলিকে 1 মিলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। হিস্টোলজিকাল বিশ্লেষণের জন্য 18 দিনে টিস্যুগুলি স্থির করা হয়েছিল। হিস্টোলজিকাল মূল্যায়ন একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের অধীনে সঞ্চালিত হয়েছিল (Bx-41; অলিম্পাস, টোকিও, জাপান), এবং ফটোমাইক্রোগ্রাফগুলি একটি ডিজিটাল ক্যামেরা (DP72; অলিম্পাস) ব্যবহার করে নেওয়া হয়েছিল। মেলানোডার্ম দাগের জন্য 4 শতাংশ বাফারযুক্ত ফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল। নমুনাগুলি প্যারাফিন মোমে এম্বেড করা হয়েছিল, 3 মিমি পুরুত্বে কাটা হয়েছিল এবং হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন এবং ফন্টানা এবং মেসন স্টেনিং দ্রবণ ব্যবহার করে দাগ দেওয়া হয়েছিল। সমস্ত ডেটা SD (স্ট্যান্ডার্ড ডেভিয়েশন) মান হিসাবে প্রকাশ করা হয় এবং ছাত্র টি-পরীক্ষা পরিসংখ্যানগত তুলনার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। একটি p-মান <0.05 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল (ব্যক্তিগত p-মানগুলি চিত্রের কিংবদন্তিতে দেওয়া হয়েছে)।

মানব মেলানোসাইটের উপর GF1-এর প্রভাব প্রতিষ্ঠা করার জন্য, আমরা 24, 48, এবং 72 ঘন্টার জন্য GF1 দিয়ে অত্যন্ত পিগমেন্টেড হিউম্যান মেলানোমা সেল (MNT-1) চিকিত্সা করেছি, তারপরে অন্তঃকোষীয় মেলানিন সামগ্রীর বিশ্লেষণ এবং টাইরোসিনেজ প্রোটিনের প্রকাশ। . যেমন চিত্র 1A-তে দেখানো হয়েছে, GF1 10e100 মিমি ঘনত্বের সীমার মধ্যে মেলানিন সামগ্রীতে কোনও বাধা প্রভাব ফেলেনি। এছাড়াও, MNT-1 কোষে GF1 দ্বারা টাইরোসিনেস এক্সপ্রেশন হ্রাস পায়নি (চিত্র 1B, sFig. 2A)। 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টার জন্য GF1 সহ a-MSH-উদ্দীপিত MNT-1 কোষের চিকিত্সার ফলে মেলানিন উপাদান (চিত্র 1C) বা টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশন (চিত্র 1D, sFig। 2B) দমন করা হয়নি। মানব মেলানোসাইটের উপর GF1 এর প্রভাব আরও নিশ্চিত করার জন্য, আমরা 48 ঘন্টার জন্য A-MSH উদ্দীপনার উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে GF1 দিয়ে প্রাথমিক NHEM-এর চিকিৎসা করেছি। MNT-1 কোষের সাথে প্রাপ্ত ডেটার মতো, GF1 মেলানিন সামগ্রী (চিত্র 1E) বা টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশন (চিত্র 1F, sFig. 2C) NHEM-এ প্রভাবিত করেনি। অবশেষে, আমরা মূল্যায়ন করেছি যে সংস্কৃতি মাধ্যমের এল-টাইরোসিন স্তর GF1 কার্যকলাপকে প্রভাবিত করে কারণ এল-টাইরোসিন হল মেলানিন সংশ্লেষণের জন্য টাইরোসিনেজের স্তর। তদনুসারে, MNT-1 কোষগুলিকে 100 মিমি বা 500 মিমি এল-টাইরোসিন ধারণকারী সংস্কৃতি মাধ্যমে 48 ঘন্টার জন্য GF1 দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। চিত্র 1G-তে দেখানো হয়েছে, L-টাইরোসিনের ঘনত্ব নির্বিশেষে GF1 MNT-1 কোষে মেলানিন উপাদানকে বাধা দেয়নি।

চিত্র 2. MNT-1/HaCaTcocultured কোষে ডেনড্রাইট গঠন এবং মেলানোসোম স্থানান্তরের উপর GF1 এর প্রভাব এবং একটি 3-D মানুষের ত্বকের সমতুল্য। Cocultured MNT-1/HaCaTcellsকে 100 mM GF1 দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল a-MSH (500 nM) উদ্দীপনার উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে 48 ঘন্টার জন্য। (ক) স্থিরকরণের পরে, আমরা অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপি (স্কেল বার; 50 মিমি) ব্যবহার করে মেলানোসাইটগুলিতে ডেনড্রাইট গঠন পর্যবেক্ষণ করেছি। (খ) ইমিউনোস্টেইনিংয়ের জন্য, আমরা মেলানোসোমগুলিকে টিআরপি-1 অ্যান্টিবডি (লাল রঙ) এবং কেরাটিনোসাইটগুলি সাইটোকেরাটিন-18 (সবুজ রঙ) দিয়ে দাগ দিয়েছি। সাদা তীরগুলি MNT-1 কোষ থেকে HaCaT-এ স্থানান্তরিত মেলানোসোম নির্দেশ করে (স্কেল বার; 20 মিমি)। মানুষের ত্বকের সমতুল্য (মেলানোডার্ম; n ¼ 3) 1 শতাংশ কোজিক অ্যাসিড একটি রেফারেন্স সাদা করার যৌগ এবং GF1 (10 এবং 50 ug/ml) দিয়ে 18 দিনের জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল। (সি) চিকিত্সার পরে, ত্বকের সমতুল্য ছবি তোলা হয়েছিল। (ডি) প্রতিটি পরীক্ষার নমুনার জন্য 6 এল মান (যান-চিকিত্সা নিয়ন্ত্রণের তুলনায় হালকাতার ডিগ্রি) গণনা করা হয়েছিল। (E) হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) টিস্যু বিভাগের দাগ। (F) ফন্টানা-ম্যাসন (F&M) টিস্যু বিভাগের দাগ। স্লাইডগুলি একটি ফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল এবং স্টেনিংয়ের জন্য প্যারাফিন মোম এম্বেড করা হয়েছিল (স্কেল বার; 50 মিমি)। কালো তীরগুলি বেসাল স্তরের মেলানোসাইট থেকে উপরের স্তরের কেরাটিনোসাইটগুলিতে স্থানান্তরিত মেলানোসোম নির্দেশ করে। নীল তীরগুলি মেলানোসাইটগুলিকে বর্ধিত ডেনড্রাইট গঠনের নির্দেশ করে। (*p <0.05, **p <0.01, *p <0.001)। CON, নিয়ন্ত্রণ; GF1, ginsenoside F1; কেএ, কোজিক অ্যাসিড।

GF1 মনো-সংস্কৃতি মানব মেলানোসাইটগুলিতে একটি অ্যান্টি-মেলানোজেনিক প্রভাব প্রয়োগ করে না এমন অনুসন্ধানের পরে, আমরা আরও বিশ্লেষণ করেছি যে GF1 একটি পরীক্ষামূলক পদ্ধতিতে মেলানোসাইটগুলিতে মেলানিন সংশ্লেষণকে প্রভাবিত করে কিনা যেখানে কোষ-কোষ যোগাযোগের সম্ভাবনা রয়েছে। UV-B বিকিরণের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে MNT-1 এবং HaCaT (একটি অমর মানব স্বাভাবিক কেরাটিনোসাইট সেল লাইন) কোষগুলিকে 100 mM GF1 দিয়ে সংস্কৃত করা হয়েছিল। 48 ঘন্টা (sFig. 3A) বা 72 h (sFig. 3B) পরে, আমরা বিচ্ছিন্ন MNT-1 এবং cocultured কোষ থেকে মেলানিনের বিষয়বস্তু মূল্যায়ন করেছি। আমাদের ডেটা দেখিয়েছে যে GF1 বিচ্ছিন্ন MNT-1 এবং cocultured কোষ গোষ্ঠী উভয় ক্ষেত্রেই মেলানিন সংশ্লেষণকে বাধা দেয় না।

মেলানিন সংশ্লেষণ ছাড়াও, আমরা মেলানোসাইট থেকে কেরাটিনোসাইটগুলিতে মেলানোসোম স্থানান্তরের উপর GF1 এর প্রতিরোধমূলক কার্যকারিতার উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছি। বিশেষত, ক-কালচারড MNT-1/HaCaT কোষগুলি A-MSH উদ্দীপনার উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে 100 mM GF1 দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (চিত্র 2A), এর পরে মেলানোসাইটগুলিতে ডেনড্রাইট গঠনের পরীক্ষা করা হয়েছিল, যা মেলানোসোম স্থানান্তরের জন্য প্রয়োজনীয়। . মজার বিষয় হল, এএমএসএইচ-প্ররোচিত প্রসারিত ডেনড্রাইটগুলি GF1 চিকিত্সার পরে প্রত্যাহার করা হয়েছিল। তারপর, আমরা MNT1 কোষের জন্য TRP-1-পজিটিভ মেলানোসোম (লাল) এবং কোকালচারে HaCaT কোষের জন্য সাইটোকেরাটিন-18 (সবুজ) দাগ দিয়েছি। চিত্র 2B-তে দেখানো হয়েছে, MNT{13}} কোষে TRP-1-ধনাত্মক মেলানোসোমগুলি A-MSH উদ্দীপনার পরে HaCaT কোষে স্থানান্তরিত হয়েছিল, যা GF1 দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে বাধাপ্রাপ্ত হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে GF1 মেলানোসোম স্থানান্তরকে দমন করে, যার ফলে মেলানোসাইটের ডেনড্রাইট প্রত্যাহার হয়।

এই তদন্তকে আরও শারীরবৃত্তীয় ব্যবস্থায় প্রসারিত করার জন্য, আমরা একটি 3-D মানুষের ত্বকের সমতুল্য GF1 এর সাদা করার ক্ষমতা পরীক্ষা করেছি, যা মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইট সমন্বিত একটি এপিডার্মাল স্তর। চিত্র 2C-এ, GF1-চিকিত্সা করা টিস্যু নিয়ন্ত্রণ টিস্যুর চেয়ে হালকা দেখায়, এবং L মান (একটি হালকা/অন্ধকার সূচক) GF1 চিকিত্সার (চিত্র 2D) উপর পরিবর্তিত হয়েছিল। উপরন্তু, টিস্যু বিভাগে হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিনের দাগ পড়ায় কোন টিস্যু পতন বা বিষাক্ততা প্রকাশ পায় না (চিত্র 2ই)। ফন্টানা এবং মেসন স্টেনিং পরীক্ষায় দেখা গেছে যে GF1 বেসাল স্তরে মেলানোসাইটের ডেনড্রাইট গঠনে বাধা দেয় এবং একই সাথে বেসাল স্তরের মেলানোসাইট থেকে পার্থক্যযুক্ত উপরের স্তরের কেরাটিনোসাইটগুলিতে মেলানোসোম স্থানান্তরকে দমন করে (চিত্র 2F)। এই ফলাফলগুলি সম্মিলিতভাবে মেলানোসোম স্থানান্তরে GF1 এর প্রতিরোধমূলক কার্যকারিতাকে সমর্থন করে, যা মানুষের ত্বকের টিস্যু মডেলে সাদা করার প্রচারের দিকে পরিচালিত করে।

বর্তমান গবেষণায়, GF1 মেলানিন সংশ্লেষণ এবং টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশনকে বাধা দেয়নি; বরং, GF1 MNT-1 কোষে অন্তঃকোষীয় মেলানিনের বিষয়বস্তু এবং টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশনকে কিছুটা বাড়িয়েছে এবং কোকালচারড কোষে (চিত্র 1A এবং 1B এবং sFig. 3A)। যাইহোক, একই সাথে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে GF1 মেলানোসাইটের হ্রাসকৃত ডেনড্রাইট গঠনের মাধ্যমে মেলানোসোম স্থানান্তরকে বাধা দেয়। আমরা সন্দেহ করি যে GF1 দ্বারা বর্ধিত অন্তঃকোষীয় মেলানিন বিষয়বস্তু মেলানোসোম সঞ্চয়নের কারণে হতে পারে কারণ মেলানোসোম স্থানান্তর অবরোধ এবং টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশনের আনয়ন। দৃশ্যমান ত্বকের পিগমেন্টেশন মেলানোসাইটের বর্ধিত ডেনড্রাইটের বিভিন্ন এলাকা থেকে আশেপাশের কেরাটিনোসাইট [৪] পর্যন্ত মেলানোসোমের বিচ্ছুরণের পরিমাণ দ্বারা নির্ধারিত হয়। বেশ কিছু যৌগ, যেমন সেন্টোরিডিন এবং মেথিলোফিওপোগোনানোন বি, সাদা করার কার্যকারিতা দেখিয়েছে, যা মেলানোজেনিক এনজাইম এক্সপ্রেশন বা মেলানিন সংশ্লেষণকে প্রভাবিত না করেই মেলানোসাইট ডেনড্রাইট প্রত্যাহার করে। অতএব, মেলানোসাইট থেকে কেরাটিনোসাইটগুলিতে মেলানোসোম স্থানান্তরের অবরোধকে একটি সাদা করার প্রভাব প্ররোচিত করার জন্য একটি কার্যকর পদ্ধতি হিসাবে বিবেচনা করা হয়, যদিও মেলানিন জৈব সংশ্লেষণকে বাধা দেওয়া হয় না। অতএব, আমরা বিবেচনা করেছি যে GF1 দ্বারা বর্ধিত মেলানিন সামগ্রীগুলি GF1 এর সাদা করার কার্যকারিতার উপর খুব কম প্রভাব ফেলে। এছাড়াও, জমে থাকা মেলানোসোমগুলি ত্বকের হোমিওস্টেসিসের জন্য অটোফ্যাজি দ্বারা ক্ষয়প্রাপ্ত হবে, যদিও মেলানোসোমের ভাগ্য অস্পষ্ট [6]।

আমরা প্রথমবারের মতো প্রদর্শন করেছি যে GF1 A-MSHinduced ডেনড্রাইট গঠনকে দমন করে, যার ফলে মানব কোষের সংস্কৃতিতে কেরাটিনোসাইটে মেলানোসোম স্থানান্তর বাধা দেয়। এছাড়াও, GF1 বেসাল স্তরের মেলানোসাইট থেকে উপরের স্তরের কেরাটিনোসাইটগুলিতে মেলানিন স্থানান্তরকে ব্যাহত করে, মানুষের ত্বকের সমতুল্য সাদা করার প্রভাব ফেলে। সাম্প্রতিক কোকালচার পরীক্ষাগুলি ইঙ্গিত দেয় যে মেলানোসাইটগুলি ডেনড্রাইটিক মরফোলজি পরিবর্তনের মাধ্যমে কেরাটিনোসাইটগুলিতে রঙ্গক সরবরাহ করে, যেমন অন্তঃকোষীয় সাইটোস্কেলটনে বি-টিউবুলিন মাইক্রোফিলামেন্টের বিশৃঙ্খলা [7,8]। চক্রীয় অ্যাডেনোসিন মনোফসফেট, একটি মেলানোজেনেসিস প্রবর্তক, র্যাকের আপগ্র্যুলেশন এবং রো অ্যাক্টিভিটি [9,10] হ্রাসের মাধ্যমে ডেনড্রাইট গঠনের মধ্যস্থতা করে। অতএব, আমাদের গ্রুপের ভবিষ্যতের অধ্যয়নগুলি GF1 এর লক্ষ্য প্রোটিনগুলির একটি ব্যাপক মূল্যায়নের উপর ফোকাস করবে, যেমন সাইক্লিক অ্যাডেনোসিন মনোফসফেট সিগন্যালিং পাথওয়েতে জড়িত অণুগুলি।

সমষ্টিগতভাবে, আমাদের ফলাফলগুলি প্রাথমিক প্রমাণ প্রদান করে যে GF1 একটি প্রসাধনী উপাদান হিসাবে পিগমেন্টারি রোগের চিকিত্সার জন্য এবং কালো ত্বকের রঙকে হালকা করার জন্য একটি কার্যকর ঝকঝকে বিকারক হিসাবে বিকাশের সম্ভাবনা রয়েছে।

স্বার্থের সংঘাত

সমস্ত অবদানকারী লেখক স্বার্থের কোন দ্বন্দ্ব ঘোষণা করেন না।

স্বীকৃতি

এই গবেষণাটি Amorepacific R&D সেন্টার দ্বারা সমর্থিত এবং অর্থায়ন করা হয়েছিল।

তথ্যসূত্র

[১] লিন এম, ঝাং বিএক্স, ঝাং সি, শেন এন, ঝাং ওয়াইওয়াই, ওয়াং এএক্স, টু সিএক্স। জিনসেনোসাইডস Rb1 এবং Rg1 PKA/CREB/MITF সিগন্যালিং এর মাধ্যমে মানুষের এপিডার্মাল মেলানোসাইটের মেলানোজেনেসিসকে উদ্দীপিত করে। ইভিড ভিত্তিক। পরিপূরক। অল্টারনেট মেড 2014;2014: 892073

[২] হ্যান জে, লি ই, কিম ই, ইয়েওম এমএইচ, কোওন ও, ইউন টিএইচ, লি টিআর, কিম কে। জিনসেনোসাইড এফ১-এর ত্বক সাদা করার প্রভাবে এপিডার্মাল জিডি টি-কোষ থেকে প্রাপ্ত ইন্টারলিউকিন 13-এর ভূমিকা। এক্সপের ডার্মাটোল 2014;23:860e2.

[৩] কিম জেএইচ, বেক ইজে, লি ইজে, ইয়েওম এমএইচ, পার্ক জেএস, লি কেডব্লিউ, কাং এনজে। জিনসেনোসাইড F1 ডেনড্রাইট প্রত্যাহার প্ররোচিত করে এবং Rho সংকেত সক্রিয় করে B16F10 মেলানোমা কোষে হাইপারপিগমেন্টেশন কমায়। এক্সপ ডার্মাটোল 2015;24:150e2।

[৪] আন্দো এইচ, নিকি ওয়াই, ইতো এম, আকিয়ামা কে, মাতসুই এমএস, ইয়ারোশ ডিবি, ইচিহাশি এমজে। মেলানোসোমগুলি প্যাকেজিং, মুক্তি, গ্রহণ এবং বিচ্ছুরণের প্রক্রিয়ার মাধ্যমে মেলানোসাইট থেকে কেরাটিনোসাইটগুলিতে স্থানান্তরিত হয়। ইনভেস্ট ডার্মাটোল 2012;132:1222e9।

[৫] Ebanks JP, Wickett RR, Boissy RE. ত্বকের পিগমেন্টেশন নিয়ন্ত্রণের প্রক্রিয়া: বর্ণের রঙের উত্থান এবং পতন। Int J Mol Sci 2009;10:4066e87.

[৬] কাটসুয়ামা ওয়াই, তাইরা এন, ইয়োশিওকা এম, ওকানো ওয়াই, মাসাকি এইচ। থিওফাইলাইন দিয়ে চিকিত্সা করা মেলানোসাইটের মেলানোসোম পরিবহনের ব্যাঘাত অটোফ্যাজি দ্বারা তাদের অবক্ষয় ঘটায়। বায়োকেম বায়োফিস রেস কমুন 2017; 485: 126e30।

[৭] Ni J, Wang N, Gao L, Li L, Zheng S, Liu Y, Ozukum M, Nikiforova A, Zhao G, Song Z. NMDA রিসেপ্টর-নির্ভর সিগন্যালিং পাথওয়ের প্রভাব কোষের আকারবিদ্যা এবং মেলানোসোম স্থানান্তরের উপর মেলানোসাইট J Dermatol Sci 2016;84:296e304.

[৮] Scott G. Rac এবং rho: মেলানোসাইট ডেনড্রাইট গঠনের পিছনে গল্প। পিগমেন্ট সেল রেস 2002;15:322e30

[৯] Scott G, Leopardi S. CAMP সিগন্যালিং পাথওয়ের B16F10 কোষে Rac এবং Rho-তে বিরোধী প্রভাব রয়েছে: মেলানোসাইটিক কোষে ডেনড্রাইট গঠনের প্রভাব। পিগমেন্ট সেল রেস 2003;16:139e48।

[১০] মা এইচজে, মা এইচওয়াই, ইয়াং ওয়াই, লি পিসি, জি এসএক্স, জিয়া সিওয়াই, চেন আর এ-মেলানোসাইট স্টিমুলেটিং হরমোন (এমএসএইচ) এবং প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন ই২ (পিজিই২) মেলানোসোম ট্রান্সফার চালায় ফিলোপোডিয়া ডেলিভারি প্রচার করে এবং স্ফেরয়েড গ্রানুলগুলি বের করে দেয়: পারমাণবিক বল মাইক্রোস্কোপি পর্যবেক্ষণ থেকে প্রমাণ। J Dermatol Sci 2014;76: 222e30।

চ্যাং-সিওক লি 1,3, গিবেগ নাম 1, ইল-হং বে 1, জুনসেং পার্ক 1,2,*

1 Amorepacific CO R&D সেন্টার, Yongin-si, প্রজাতন্ত্র কোরিয়া

2 প্রকৌশল রসায়ন বিভাগ, চুংবুক জাতীয় বিশ্ববিদ্যালয়, চেওংজু-সি, চুংবুক, কোরিয়া প্রজাতন্ত্র

3 ডিপার্টমেন্ট অফ বিউটি অ্যান্ড কসমেটিক সায়েন্স, কলেজ অফ হেলথ সায়েন্স, ইউলজি ইউনিভার্সিটি, সিওংনাম-সি, কোরিয়া প্রজাতন্ত্র

For more information:1950477648nn@gmail.com