ইউরিক অ্যাসিড হ্রাসকারী প্রভাব এবং অ্যাক্টিওসাইড এবং ইচিনাকোসাইডের প্রক্রিয়াটি সিসঞ্চে টিউবুলোসা থেকে নিষ্কাশিত

বিমূর্ত:অ্যাক্টিওসাইড (এএস) এবং ইচিনাকোসাইড (ইচ) এর থেকে বের করা ইউরিক অ্যাসিড হ্রাসকারী প্রভাব এবং প্রক্রিয়াগুলি অন্বেষণ করার লক্ষ্যসিসঞ্চে টিউবুলোসা.

পদ্ধতিহাইপারুরিসেমিয়া (এইচইউএ) ইঁদুরের মডেলটি পটাসিয়াম অক্সোনেট (1.5 গ্রাম · কেজি -1 · ডি -1) ব্যবহার করে প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল অ্যাডেনিন (100 মিলিগ্রাম · কেজি {5}}} · ডি -1) এর সাথে মিলিত। এইচইউএ মডেল ইঁদুরগুলি এলোমেলোভাবে একটি মডেল কন্ট্রোল গ্রুপে বিভক্ত ছিল, একটি অ্যালোপুরিনল গ্রুপ (30 মিলিগ্রাম · কেজি -1 · ডি -1), নিম্ন এবং উচ্চ হিসাবে (50, 100 মিলিগ্রাম · কেজি {{-1 · · {{{}})) মিলিগ্রাম · কেজি -1 · ডি -1) ডোজ গ্রুপ। একটি সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ আগে প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল। চার সপ্তাহের প্রশাসনের পরে, রক্তের বায়োকেমিস্ট্রি বিশ্লেষক সু ইউরিয়া, সিআরইএ, অ্যাডেনোসিন ডায়ামিনেজ (এডিএ) এবং ইউরিক অ্যাসিড (ইউইউএ) প্রস্রাবে সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। এনজাইম লিঙ্কযুক্ত ইমিউনোসোর্বেন্ট অ্যাস সিরামের জ্যান্থাইন অক্সিডেস (এক্সওডি) স্তরগুলি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। কিডনি টিস্যু সংগ্রহ করা হয়েছিল, এবং কিডনি সহগ ওজন এবং গণনা করা হয়েছিল। হেমোটোক্সিলিন ইওসিন (এইচই) স্টেইনিং রেনাল প্যাথলজিকাল পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (আইএইচসি) এবং রিয়েল টাইম পিসিআর ইউরেট ট্রান্সপোর্টার 1 (ইউআরএটি 1), গ্লুকোজ ট্রান্সপোর্টার 9 (জিএলইউটি 9), জৈব অ্যানিয়ন ট্রান্সপোর্টার 1 (ওএটি 1), এবং জৈব অ্যানিয়ন ট্রান্সপোর্টার 3 (ওএটি 3) রেনাল টিস্যুতে প্রোটিন এবং এমআরএনএ এক্সপ্রেশন স্তরগুলি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ফলাফল হিসাবে এবং ইচ এইচইউএ মডেল ইঁদুরগুলিতে রেনাল ফাংশন উন্নত করতে পারে, রক্তের ইউরিক অ্যাসিডের মাত্রা হ্রাস করতে পারে, ইউরিক অ্যাসিডের নির্গমনকে প্রচার করতে পারে, এডিএ এবং এক্সওডের সিরাম স্তরকে হ্রাস করে এবং রেনাল টিস্যুতে প্রোটিন এবং এমআরএনএ এক্সপ্রেশনকে ওএটি 1 এবং এমআরএনএ এক্সপ্রেশনকে প্রোটিন এবং জিএলইউটি 9 এর প্রোটিন এবং এমআরএনএ এক্সপ্রেশনকে আপগ্রেট করে।

উপসংহার ফিনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস এএস এবং ইচ সিসঞ্চে টিউবুলোসা থেকে ইচ হুয়া মডেল ইঁদুরগুলিতে রেনাল ফাংশন উন্নত করে, এডিএ এবং এক্সওডি স্তর হ্রাস করে এবং ইউআরএটি 1, জিএলইউটি 9, ওএটি 1 এবং ওএটি 3 এর অভিব্যক্তি নিয়ন্ত্রণ করে ইউরিক অ্যাসিড হ্রাসকারী প্রভাবগুলি ব্যবহার করতে পারে।

মূল শব্দ: সিসঞ্চে টিউবুলোসা; acteoside; ইচিনাকোসাইড; হাইপারুরিসেমিয়া; ইউরিক অ্যাসিড হ্রাস; প্রক্রিয়া

 

 

 

16% অ্যাক্টিওসাইড সহ সিসঞ্চে টিউবুলোসা এক্সট্রাক্ট

এখনই আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন

 

 

 

হাইপারুরিসেমিয়া (এইচইউএ) হ'ল একটি বিপাকীয় রোগ যা মানব দেহে বিশৃঙ্খলাযুক্ত পিউরিন বিপাক দ্বারা সৃষ্ট, যার ফলে রক্তের ইউরিক অ্যাসিডের মাত্রা উন্নত হয় [1]। এটি সাধারণত সনাক্ত করা হয় যখন রক্তের ইউরিক অ্যাসিডের মাত্রা 7 এর বেশি। 0 মিলিগ্রাম · dl⁻ (416। হাইপারুরিসেমিয়ার বিকাশ মূলত উচ্চ-পিউরাইন ডায়েট, দীর্ঘস্থায়ী অ্যালকোহল গ্রহণ, ওষুধের ব্যবহার এবং হাইপোথাইরয়েডিজমের মতো কারণগুলির সাথে সম্পর্কিত। এটি কেবল কার্ডিওভাসকুলার রোগ, ডায়াবেটিস এবং হাইপারটেনশন [3-4] এর ঝুঁকি বাড়ায় না তবে রোগীদের স্বাস্থ্যের উপরও উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাব ফেলে।

বর্তমানে, হাইপারুরিসেমিয়ার জন্য ক্লিনিকাল চিকিত্সার মধ্যে মূলত ড্রাগগুলি অন্তর্ভুক্ত থাকে যা ইউরিক অ্যাসিড উত্পাদনকে বাধা দেয় এবং ইউরিক অ্যাসিডের নির্গমনকে প্রচার করে। যাইহোক, এই চিকিত্সাগুলির প্রতিবন্ধী লিভার বা কিডনি ফাংশন [5-6] রোগীদের জন্য নির্দিষ্ট সীমাবদ্ধতা রয়েছে। অতএব, হাইপারুরিসেমিয়া প্রতিরোধ ও চিকিত্সার জন্য কম পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া সহ কার্যকর ওষুধগুলি অন্বেষণ করা অত্যন্ত তাত্পর্যপূর্ণ।

সিসঞ্চে টিউবুলোসা (শেঙ্ক) আর। উইট, সাধারণত কিডনি-টোনাইফাইং b ষধি হিসাবে traditional তিহ্যবাহী চীনা ওষুধে ব্যবহৃত হয়, পুরুষত্বহীনতা, বন্ধ্যাত্ব, সারাংশ এবং রক্তের ঘাটতি, নীচের পিঠে এবং হাঁটুতে দুর্বলতা, পেশী দুর্বলতা এবং অন্ত্রের শুষ্কতার কারণে কোষ্ঠকাঠিন্যের মতো অবস্থার চিকিত্সার জন্য নিযুক্ত করা হয় []]। অধ্যয়নগুলি যে দেখিয়েছেসিসঞ্চে টিউবুলোসানিউরোপ্রোটেক্টিভ [8], অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি [9], হাড়ের বিপাক-নিয়ন্ত্রক [10], এবং ক্যান্সার রোগীদের কেমোথেরাপিতে কার্যকারিতা-বর্ধনকারী প্রভাব [11] এর অধিকারী [11]। এর বিভিন্ন সক্রিয় উপাদানগুলির মধ্যে, ফিনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি সর্বাধিক প্রচুর পরিমাণে।

অ্যাক্টিওসাইড (এএস) এবং ইচিনাকোসাইড (ইচ), দুটি ফিনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড উচ্চ সামগ্রী সহসিসঞ্চে টিউবুলোসা, শক্তিশালী জৈবিক ক্রিয়াকলাপ প্রদর্শন করুন এবং উন্নয়ন এবং প্রয়োগের জন্য উল্লেখযোগ্য সম্ভাবনা রাখে। ফলস্বরূপ, আমাদের গবেষণা গোষ্ঠীটি আরও অধ্যয়নের জন্য এএস এবং ইচ নির্বাচন করেছে। নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজির পূর্বাভাস এবং ইঁদুরের প্রাক-অভিজ্ঞতার মাধ্যমে আমরা আবিষ্কার করেছি যে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড এক্সট্রাক্টগুলি থেকেসিসঞ্চে টিউবুলোসাএকটি নির্দিষ্ট ইউরিক অ্যাসিড-হ্রাস প্রভাব থাকতে পারে। যাইহোক, এই প্রভাবগুলির পথ এবং প্রক্রিয়াগুলি অস্পষ্ট থেকে যায়।

সুতরাং, ইউরিক অ্যাসিড উত্পাদনের প্রক্রিয়া এবং গবেষণার ফোকাস হিসাবে এর প্রাথমিক নির্গমন পথগুলি ব্যবহার করে আমরা ফিনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড এক্সট্রাক্টস এবং ইচ-এর ইউরিক অ্যাসিড-হ্রাস প্রভাবগুলি অনুসন্ধান করেছি। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য এমন পথ এবং প্রক্রিয়াগুলি ব্যাখ্যা করা যার মাধ্যমে এবং ইচ তাদের ইউরিক অ্যাসিড-হ্রাস প্রভাবগুলি ব্যবহার করে।

1 উপকরণ

1.1 পরীক্ষামূলক প্রাণী

সত্তর পুরুষ এসপিএফ-গ্রেড স্প্রেগ-ডাওলি (এসডি) ইঁদুর, 150-180 গ্রাম ওজনের, জিনজিয়াং মেডিকেল বিশ্ববিদ্যালয়ের পরীক্ষামূলক প্রাণী কেন্দ্র থেকে কেনা হয়েছিল। প্রাণী উত্পাদন লাইসেন্স নম্বর: এসসিএক্সকে (জিন) 2023-0001} এই পরীক্ষাটি জিনজিয়াং স্বায়ত্তশাসিত অঞ্চল ইউগুর মেডিসিন রিসার্চ ইনস্টিটিউটের অ্যানিম্যাল এথিক্স কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল, প্রাণীর নীতিশাস্ত্র অনুমোদনের নম্বর সহ: আইএসিইউসি- (জেডহুন) -2024-009}

1.2 ড্রাগ এবং রিএজেন্টস

ফেনাইলথানয়েড গ্লাইকোসাইড এক্সট্রাক্টস (যেমন এবং ইচ)থেকেসিসঞ্চে টিউবুলোসা (purity >98%, উচ্চ-পারফরম্যান্স তরল ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা যাচাই করা) ইউগুর ফর্মুলেশন বিজ্ঞানের মূল পরীক্ষাগার, জিনজিয়াং স্বায়ত্তশাসিত অঞ্চল ইউওয়িগুর মেডিসিন গবেষণা ইনস্টিটিউট দ্বারা প্রস্তুত করা, শুদ্ধ এবং প্রস্তুত করা হয়েছিল। ব্যাচের সংখ্যা: 20220617 (এএস) এবং 20220526 (ECH)।

অ্যালোপুরিনল ট্যাবলেট, ব্যাচের নম্বর: 62208726, জিয়াংসু ওয়ানবাং বায়োকেমিক্যাল ফার্মাসিউটিক্যাল গ্রুপ কোং, লিমিটেড দ্বারা উত্পাদিত।

পটাসিয়াম অক্সোনেটএবংঅ্যাডেনিন, ব্যাচের সংখ্যা: আই 2130050 এবং সি 2202255, সাংহাই আলাদিন বায়োকেমিক্যাল টেকনোলজি কোং, লিমিটেডের কাছ থেকে কেনা

সিআরইএ (ক্রিয়েটিনাইন), ইউএ (ইউরিক অ্যাসিড), ইউরিয়া এবং এডিএ (অ্যাডেনোসিন ডায়ামিনেজ) অ্যাস কিটস, ব্যাচের সংখ্যা: 141123010, 141223004, 141323008, এবং 043624005, শেনজেন মাইন্ডরে বায়ো-মেডিকেল ইলেকট্রনিক্স কোং, লিমিটেডের কাছ থেকে কেনা

Xod (xanthine অক্সিডেস) ক্রিয়াকলাপ অ্যাস কিট, ব্যাচের নম্বর: Y10001219, সাংহাই ম্যাকলিন বায়োকেমিক্যাল টেকনোলজি কোং, লিমিটেড থেকে কেনা

অ্যান্টিবডিগুলি (ইউআরএটি 1, গ্লুট 9, ওএটি 1, ওএটি 3), ব্যাচের সংখ্যা: 3i5723 0, 92F0296/4, 0F33081/2I44618, অ্যাফিনিটি বায়োসিয়েন্স থেকে কেনা।

এইচআরপি-লেবেলযুক্ত ছাগল অ্যান্টি-খরগোশ আইজিজি, ব্যাচের নম্বর: 245440113, জেডএসজিবি-বায়ো থেকে কেনা।

হেমাটোক্সিলিন স্টেনিং সলিউশন, ব্যাচের নম্বর: 24135741 এইচ, বেইজিং লানজিক টেকনোলজি কোং, লিমিটেড থেকে কেনা

ড্যাব ক্রোমোজেনিক রিএজেন্ট কিট, ব্যাচের নম্বর: 240010512, জেডএসজিবি-বায়ো থেকে কেনা।

ডিপিসি (ডায়েথাইল পাইরোকার্বোনেট), ক্যাটালগ নম্বর: ডি 60029-500 এমএল, অ্যাম্রেসকো (ইউএসএ) থেকে কেনা।

এম 5 হিক্লিয়ার ডিএল 2000 ডিএনএ মার্কার, ক্যাটালগ নম্বর: এমএফ 025, বেইজিং জিনোমিক্স বায়োটেকনোলজি কোং, লিমিটেড থেকে কেনা

ট্রিজল ™ রিএজেন্ট, ক্যাটালগ নম্বর: 15596026, থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক (ইউএসএ) থেকে কেনা।

5x অল-ইন-ওয়ান আরটি মাস্টারমিক্সএবংইভগ্রিন এক্সপ্রেস 2 × কিউপিসিআর মাস্টারমিক্স-লো রক্স, ক্যাটালগ নম্বর: জি 492 এবং জি 891, উভয়ই ফলিত বায়োলজিকাল মেটেরিয়ালস ইনক। (এবিএম) থেকে কিনেছেন।

2 পদ্ধতি

2.1 মডেল স্থাপনা এবং গোষ্ঠীকরণ

সত্তর পুরুষ স্প্রেগ-ডাওলি (এসডি) ইঁদুরগুলি প্রশংসিত এবং দুটি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল: একটি সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ (1 0 ইঁদুর) এবং একটি মডেল নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ (60 ইঁদুর)। সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গ্রুপটি গ্যাভেজের মাধ্যমে 0.5% সেমিসি-এনএ পরিচালিত হয়েছিল। মডেল কন্ট্রোল গ্রুপটি পটাসিয়াম অক্সোনেট (1.5 গ্রাম · কেজি) পরিচালনা করা হয়েছিল অ্যাডেনিন (100 মিলিগ্রাম · কেজি) এর সাথে মিলিত হয়েছিল 10 মিলি · কেজি ⁻ এর একটি ডোজ, প্রতিদিন একবারে 14 দিনের জন্য। জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষক দ্বারা পরিমাপ করা হিসাবে ইউরিয়া, সিআরইএ এবং এসইউএ স্তরগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেলে মডেলটিকে সফলভাবে প্রতিষ্ঠিত হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল।

হাইপারুরিসেমিয়া মডেল ইঁদুরগুলি এসইউএ, ইউরিয়া এবং সিআরইএ স্তরের উপর ভিত্তি করে নিম্নলিখিত গ্রুপগুলিতে আরও বিভক্ত করা হয়েছিল: মডেল নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ, অ্যালোপুরিনল গ্রুপ (3 {12}} মিলিগ্রাম · কেজি), কম-ডোজ হিসাবে গ্রুপ হিসাবে (50 মিলিগ্রাম · কেজি), উচ্চ-ডোজ), উচ্চ-ডোজ), 100 এমজি · · · কেজি), উচ্চ-ডোজ) ECH গ্রুপ (100 মিলিগ্রাম · কেজি), প্রতিটি গ্রুপে 10 ইঁদুর সহ। স্থিতিশীল হাইপারুরিসেমিয়া বজায় রাখার জন্য, সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠী ব্যতীত সমস্ত গোষ্ঠীকে সকালে গ্যাভেজের মাধ্যমে অ্যাডেনিন (100 মিলিগ্রাম · কেজি) এর সাথে মিলিত পটাসিয়াম অক্সোনেট (500 মিলিগ্রাম · কেজি) পরিচালনা করা হয়েছিল, তারপরে বিকেলে প্রতিটি চিকিত্সা গ্রুপে সম্পর্কিত ওষুধের প্রশাসনের পরে। সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গ্রুপটি সকালে 0.5% সিএমসি-এনএ দ্রবণ পেয়েছিল এবং বিকেলে 10 মিলি · কেজি ⁻ এর একটি ডোজে জল পান করে, প্রতিদিন একবারে 14 দিনের জন্য। এরপরে, মডেলিং এজেন্টদের প্রশাসন বন্ধ করে দেওয়া হয়েছিল, এবং সংশ্লিষ্ট ওষুধগুলি অতিরিক্ত 14 দিনের জন্য প্রতিদিন নিয়মিত পরিচালিত হত।

 

2.2 নমুনা সংগ্রহ

চূড়ান্ত ডোজ পরে, ইঁদুরগুলি রাতারাতি উপবাস করা হয়েছিল (জল সীমাবদ্ধ ছিল না)। প্রতিটি গ্রুপের প্রস্রাব ইউরিক অ্যাসিড পরীক্ষার জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল। রোজার পরে শরীরের ওজন পরিমাপ করা হয়েছিল এবং অ্যানেশেসিয়ার অধীনে রক্তের নমুনাগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল। সিরাম সেন্ট্রিফিউগেশন দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল এবং ভবিষ্যতের ব্যবহারের জন্য সংরক্ষণ করা হয়েছিল। কিডনি টিস্যু সংগ্রহ এবং ওজন করা হয়েছিল। একটি কিডনি 4% প্যারাফর্মডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল, অন্যটি আরও বিশ্লেষণের জন্য তরল নাইট্রোজেনে স্ন্যাপ-হিমায়িত ছিল।

 

2.3 ইঁদুর প্রস্রাবে ইউরিক অ্যাসিড পরিমাপ

প্রতিটি গ্রুপের প্রস্রাবের নমুনাগুলি সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল (3, 000 r · Min⁻, 10 মিনিট, সেন্ট্রিফিউজ ব্যাসার্ধ 14 সেমি), এবং সুপারেনট্যান্ট সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রস্রাবের নমুনাগুলি স্যালাইন দিয়ে 1: 9 মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং বায়োকেমিক্যাল বিশ্লেষক ব্যবহার করে ইউরিক অ্যাসিড সামগ্রীর জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

২.৪ এডিএ, ইউরিয়া, সিআরইএ এবং এসইউএর পরিমাপ ইঁদুর সিরামে

প্রতিটি গ্রুপের রক্তের নমুনাগুলি সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল (3, 000 r · Min⁻, 10 মিনিট, সেন্ট্রিফিউজ ব্যাসার্ধ 14 সেমি), এবং সিরাম সংগ্রহ করা হয়েছিল। সিরামের এডিএ, ইউরিয়া, সিআরইএ এবং এসইউএ স্তরগুলি বায়োকেমিক্যাল বিশ্লেষক ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।

 

2.5 ইঁদুর সিরামে এক্সওডের পরিমাপ

ইঁদুর সিরামের এক্সওডি স্তরের পরিবর্তনগুলি নির্মাতার নির্দেশাবলী অনুসারে এনজাইমেটিক অ্যাস ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। 290 এনএম এ প্রাথমিক শোষণ (এ₁) এবং চূড়ান্ত শোষণ (এ₂) রেকর্ড করা হয়েছিল, এবং ΔA (ΔA=A₂ - a₁) গণনা করা হয়েছিল। ΔA সূত্রে প্রতিস্থাপিত হয়েছিল:
Xod (nmol⁻ · min⁻ · ml⁻)=[ΔA × প্রতিক্রিয়া সিস্টেম মোট ভলিউম ÷ (মোলার বিলুপ্তি সহগের ইউরিক অ্যাসিড × অপটিক্যাল পাথ দৈর্ঘ্য) × 10⁹] ÷ সময় ÷ সময় ÷ {2}} × δA,
সিরামের মিলিলিটারে প্রতি মিনিটে ইউরিক অ্যাসিড অনুঘটকিত পরিমাণ গণনা করতে।

 

2.6 কিডনি সহগ পরিমাপ

কিডনি টিস্যু সংগ্রহ করা হয়েছিল, স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং অতিরিক্ত জল সরানো হয়েছিল। অঙ্গ ওজনটি সঠিকভাবে পরিমাপ করা হয়েছিল, এবং কিডনি সহগটি নিম্নলিখিত হিসাবে গণনা করা হয়েছিল:
কিডনি সহগ=কিডনি ওজন (মিলিগ্রাম) / শরীরের ওজন (জি)।

 

2.7 কিডনি টিস্যুগুলির হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পর্যবেক্ষণ তিনি দাগ দিয়ে

4% প্যারাফর্মডিহাইড দ্রবণে স্থির কিডনি টিস্যুগুলি গ্রেড ইথানল ঘনত্বের সাথে ডিহাইড্রেটেড করা হয়েছিল, জাইলিন দিয়ে সাফ করা হয়েছিল, প্যারাফিনে এমবেড করা এবং বিভাগযুক্ত 4- μm স্লাইসে। বিভাগগুলি জাইলিন দিয়ে ডিপারফিনাইজ করা হয়েছিল, গ্রেড ইথানল দিয়ে হাইড্রেটেড, হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (এইচই) দিয়ে দাগযুক্ত এবং নিরপেক্ষ মাড়ির সাহায্যে সিল করা হয়েছিল। কিডনি টিস্যুতে মরফোলজিকাল পরিবর্তনগুলি একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের অধীনে পরিলক্ষিত হয়েছিল এবং চিত্রগুলি 400 × ম্যাগনিফিকেশনে ধরা হয়েছিল।

 

আইএইচসি দ্বারা কিডনি টিস্যুতে ইউআরএটি 1, গ্লুট 9, ওএটি 1 এবং ওএটি 3 প্রোটিন এক্সপ্রেশন 2.8 সনাক্তকরণ

4% প্যারাফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির কিডনি টিস্যুগুলি গ্রেড ইথানল ঘনত্বের সাথে ডিহাইড্রেটেড করা হয়েছিল, জাইলিন দিয়ে সাফ করা, প্যারাফিনে এম্বেড থাকা এবং বিভাগযুক্ত। অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধার এবং ছাগলের সিরাম ব্লকিং করা হয়েছিল। প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি (ইউআরএটি 1, জিএলইউটি 9, ওএটি 1, ওএটি 3) 1: 200 টি মিশ্রণে যুক্ত করা হয়েছিল এবং রাতারাতি 4 ডিগ্রীতে সজ্জিত করা হয়েছিল। পরের দিন, বিভাগগুলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল, এয়ার-শুকনো এবং বায়োটিন-লেবেলযুক্ত ছাগল অ্যান্টি-খরগোশ আইজিজি দিয়ে 30 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি দিয়ে সজ্জিত করা হয়েছিল। বিভাগগুলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য ড্যাব ক্রোমোজেনিক রিএজেন্টের সাথে সজ্জিত করা হয়েছিল, তারপরে পিবিএস ধুয়ে ফেলা, 3 মিনিটের জন্য হেমাটোক্সিলিন স্টেইনিং, হাইড্রোক্লোরিক অ্যাসিড ইথানল দ্রবণ, লিথিয়াম কার্বনেট ব্লুওয়িং, গ্রেডিয়েন্ট ইথানল দিয়ে ডিহাইড্রেশন, জিলিন দিয়ে পরিষ্কার করা, এবং নিরপেক্ষ মুভি দিয়ে সিলিং দিয়ে।

প্রতিটি ইঁদুরের জন্য, কিডনি বিভাগগুলির দুটি এলোমেলো 4 0 0 × ক্ষেত্রগুলি নির্বাচন করা হয়েছিল। ইতিবাচক স্টেইনিং (ব্রাউন-হলুদ) বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, এবং প্রতিটি ক্ষেত্রের সংহত অপটিক্যাল ঘনত্ব (আইওডি) পরিসংখ্যান বিশ্লেষণের জন্য চিত্র-প্রো প্লাস 6.0 ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।