লুপাস নেফ্রাইটিসে ক্যাসপেস-1/গ্যাসডার্মিন ডি ইনডিউসড-পাইরোপ্টোসিস ইনহিবিশনের মাধ্যমে কম্বিনেশন থেরাপির অভিনব প্রভাব

আরও তথ্যের জন্য:ali.ma@wecistanche.com

হেং কাও, জুনিউ লিয়াং, জিং লিউ, ইয়ে হি, ইনি কে, ইডুও সান, সং জিয়াং এবং জিন লিন

বিমূর্ত

উদ্দেশ্য: মাইকোফেনোলেট মোফেটিল, ট্যাক্রোলিমাস এবং স্টেরয়েডের সাথে সমন্বয় থেরাপি সম্পূর্ণ মওকুফ অর্জনে কার্যকরলুপাস নেফ্রাইটিস(এলএন)। কম্বিনেশন থেরাপি মোনোথেরাপির তুলনায় অনন্যভাবে ডাউনরেগুলেটেড ক্যাসপেস-1, যা গ্যাসডার্মিন ডি (GSDMD) কে ক্লিভ করতে পারে এবং সম্প্রতি চিহ্নিত করা হয়েছেpyroptosisজল্লাদ তাই, আমরা তদন্ত করেছি যে কম্বিনেশন থেরাপি ক্যাসপেস-1/GSDMD-মধ্যস্থতাকে দমন করতে সক্ষম করেছে কিনাpyroptosisLN তে (লুপাস নেফ্রাইটিস).

নেফ্রাইটিসের জন্য cistanche deserticola ma ক্লিক করুন

পদ্ধতি: জিএসডিএমডির প্রকাশ এবং সক্রিয়করণ এলএন (লুপাস নেফ্রাইটিস) ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং এবং ইমিউনোব্লটিং ব্যবহার করে। এমআরএলপিআর ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন প্রাথমিক পডোসাইটগুলি এলপিএস প্লাস এটিপি দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং মনোথেরাপি বা সংমিশ্রণ থেরাপির সাথে প্রিট্রিট করা হয়েছিল। ক্যাসপেসের বাধা-1/GSDMD-প্ররোচিতpyroptosisকম্বিনেশন থেরাপির মাধ্যমে MRLlpr ইঁদুর এবং মানুষের নমুনাগুলিতে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। আমাকে একটি FAM ক্যাসপেস-1 কিট এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল। মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্কpyroptosisপেরিফেরাল রক্তে এবং সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাস ডিজিজ অ্যাক্টিভিটি ইনডেক্স (SLEDAL) বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ফলাফল: LN থেকে কিডনি টিস্যুর নমুনা (লুপাস নেফ্রাইটিস) রোগী এবং ইঁদুরগুলি GSDMD-এর প্রকাশের মাত্রা এবং বিভাজন ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি করেছে। সংস্কৃতিযুক্ত পডোসাইটগুলিতে, সংমিশ্রণ চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে NLRP3 এবং ক্যাসপেসের সক্রিয়করণকে দমন করে-1 এবং GSDMD N-টার্মিনাল স্তরগুলি হ্রাস করে। কম্বিনেশন থেরাপি ক্যাসপেস-1/GSDMD-মধ্যস্থতা প্রতিরোধের মাধ্যমে রোগের অগ্রগতিকে দমন করেpyroptosisমানুষ এবং MRL/LPR ইঁদুর উভয় ক্ষেত্রেই। পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI পজিটিভ সেল নম্বরগুলি SLE-DAl-এর সাথে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল। এলএন (লুপাস নেফ্রাইটিস) সম্পূর্ণ মওকুফ এবং আংশিক মওকুফ সহ রোগীদের বেসলাইনের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে ক্যাসপেস-1/PI পজিটিভ সেল নম্বর কমে গেছে। Ac-FLTD-CMK, একটি GSDMD- থেকে প্রাপ্ত ইনহিবিটর, LN এর বিকাশকে বাধা দেয় (লুপাস নেফ্রাইটিস).

উপসংহার: কম্বিনেশন থেরাপি সাপ্রেসড ক্যাসপেস-1/GSDMD-মিডিয়াটেডpyroptosisভিট্রো এবং ভিভোতে এবং রোগের অগ্রগতি হ্রাস করে।

কীওয়ার্ড:লুপাস নেফ্রাইটিস, pyroptosis, ক্যাসপেস-1, গ্যাসডার্মিন ডি, থেরাপি

জন্য চিকিত্সা থেরাপিpyroptosis

ভূমিকা

লুপাস নেফ্রাইটিস(LN) হল কিডনির প্রদাহ যা অটোইমিউন ডিজিজ সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাস(SLE) এর ফলে উদ্ভূত হয়।LN (লুপাস নেফ্রাইটিস) SLE তে ভুগছেন এমন রোগীদের মধ্যে একটি প্রধান প্রকাশ। প্রায় 60 শতাংশ রোগী এই অবস্থার বিকাশ করে, প্রায় 20 শতাংশ শেষ পর্যায়ে কিডনি রোগে (ESRD) (1) অগ্রসর হয়। মাইকোফেনোলেট মোফেটিল (এমএমএফ), ক্যালসিনুরিন ইনহিবিটরস (সিএনআই) এবং স্টেরয়েডের সাথে সমন্বয় থেরাপি পরিপূরক প্রভাব তৈরি করে এবং বিষাক্ততাও কমিয়ে দেয় (2)। এই থেরাপিটি এলএন এর প্রাথমিক চিকিত্সা হিসাবে সুপারিশ করা হয় (লুপাস নেফ্রাইটিস) এবং ইন্ট্রাভেনাস সাইক্লোফসফামাইড (IVCY) এবং স্টেরয়েড (3-5) এর তুলনায় আরও ভাল কার্যকারিতা এবং আরও সম্পূর্ণ মওকুফ তৈরি করে।

সংমিশ্রণ থেরাপির আণবিক এবং সেলুলার প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করার জন্য, এলএন-এর একটি মুরিন মডেলে ব্যাপক ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণ নিযুক্ত করা হয়েছিল। (লুপাস নেফ্রাইটিস). এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরকে একাই দেওয়া হয়েছিল এমএমএফ, ট্যাক্রোলিমাস, বা প্রেডনিসোন মনোথেরাপি বা ট্রিপল-ড্রাগ কম্বিনেশন হিসেবে। এলএন সহ ইঁদুরের কিডনিতে জিনের প্রকাশের প্রোফাইল (লুপাস নেফ্রাইটিস)মোনোথেরাপির তুলনায় কম্বিনেশন থেরাপির অ্যাডিটিভ এবং সিনারজিস্টিক প্রভাবগুলির জন্য অ্যাকাউন্ট হতে পারে এমন সম্ভাব্য প্রক্রিয়াগুলি প্রকাশ করেছে। 45টি নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত জিনের মধ্যে একটি যা সংমিশ্রণ থেরাপির দ্বারা স্বতন্ত্রভাবে সংশোধিত হয় ক্যাসপেস-1 (6)৷ এটি ইনফ্ল্যামাসোম দ্বারা সক্রিয় করা হয়, যা একটি ইন্টিগ্রেটেড ক্যাসপেস অ্যাফিনিটি ডোমেন সহ NLRP3, প্রো-ক্যাস্পেস-1 এবং অ্যাপোপটোসিস-সম্পর্কিত স্পেক-লাইক প্রোটিন (ASC) দ্বারা গঠিত মাল্টিপ্রোটিন অলিগোমার। NLRP3/ASC/caspase-1 ইনফ্ল্যামাসোম LN-এর প্যাথোজেনেসিসের মূল অবদানকারী হিসাবে স্বীকৃত হয়েছে (লুপাস নেফ্রাইটিস). এনএলআরপি৩ ইনফ্ল্যামাসোম ক্যাসপেস-1 সক্রিয় করার মাধ্যমে স্বতঃপ্রদাহজনিত ব্যাধিগুলিকে চালিত করে, প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন তৈরির সূচনা করে যেমন IL-1, যা LN(7-9) এ পডোসাইট কর্মহীনতার ট্রিগার করতে পরিচিত।

সক্রিয় ক্যাসপেস-1 এর N- এবং C-টার্মিনাল ডোমেনের সংযোগের মধ্যে গ্যাসডার্মিন D(GSDMD) কে ক্লিভ করে। তারপর, এন-টার্মিনাল ডোমেন কোষের ঝিল্লিতে ছিদ্র গঠনের সুবিধা দেয়, কোষকে উদ্দীপিত করেpyroptosisএবং সাইটোকাইন IL-1 এবং IL-18 উৎপাদন (10)। উদীয়মান গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে GSDMD- মধ্যস্থতাpyroptosisঅটোইমিউন এনসেফালোমাইলাইটিস (11), মাল্টিপল স্ক্লেরোসিস (12), অ্যালকোহলিক হেপাটাইটিস (13), এবং প্রদাহজনক অন্ত্রের রোগ (14) সহ রোগের অগ্রগতিতে অংশগ্রহণ করে। উপরন্তু, ক্যাসপেসের জেনেটিক বা ফার্মাকোলজিক্যাল বাধা-1/GSDMD আছে ডায়াবেটিক কিডনি রোগ (15, 16) এবং তীব্র কিডনি আঘাতের পরে (17-19) এর মুরিন মডেলগুলিতে আঘাত থেকে কিডনিকে রক্ষা করার জন্য প্রদর্শিত হয়েছে। যাহোক,pyroptosisএলএন-এ (লুপাস নেফ্রাইটিস)এখনও পর্যন্ত খারাপভাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছে(20)। আমরা অনুমান করেছি যে সমন্বয় থেরাপি এলএন-তে উপকারী প্রভাব প্রদান করেছে (লুপাস নেফ্রাইটিস)) বাধা দিয়েpyroptosisক্যাসপেস-1/GSDMD দ্বারা প্ররোচিত।

বর্তমান গবেষণায়, কিডনি টিস্যুতে ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি সক্রিয়করণের পাশাপাশি ক্যাসপেস-1/জিএসডিএমডি-নির্ভর কম্বিনেশন থেরাপির প্রভাবগুলি তদন্ত করা হয়েছিলpyroptosisএমআরএল/এলপিআর ইঁদুর এবং এলএন রোগীদের মধ্যে বাধা (লুপাস নেফ্রাইটিস) এর সম্ভাব্য পারস্পরিক সম্পর্কpyroptosisSLE ডিজিজ অ্যাক্টিভিটি ইনডেক্স (SLEDAI) সহ এবং চিকিত্সার প্রতিক্রিয়াগুলিও মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

জন্য চিকিত্সাpyroptosis

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

অধ্যয়ন জনসংখ্যা

গবেষণা দলটি এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) তালিকাভুক্তির আগে 6 মাসের কম বা সমান। রোগীর বয়সের পরিসর ছিল 18-65 বছর এবং সকলেই আমেরিকান কলেজ অফ রিউমাটোলজি ফর SLE (2l, 22) এবং ইন্টারন্যাশনাল সোসাইটি অফ নেফ্রোলজি/রেনাল প্যাথলজি সোসাইটি (2003) এর শ্রেণিবিন্যাস মানদণ্ড পূরণ করেছে। ঝেজিয়াং ইউনিভার্সিটি স্কুল অফ মেডিসিন এবং নানজিং ইউনিভার্সিটি স্কুল অফ মেডিসিন থেকে রোগীদের নিয়োগ করা হয়েছিল যাদের প্রোটিনুরিয়া (1.5 g/d এর চেয়ে বেশি বা সমান) এবং সিরাম ক্রিয়েটিনিনের ঘনত্ব 265.2 umol/L এর চেয়ে কম বা সমান। বর্জনের মানদণ্ড অন্তর্ভুক্ত: একজন রোগীর আগে উচ্চ মাত্রায় মিথাইলপ্রেডনিসোলন দিয়ে চিকিৎসা করা হয়েছিল; জীববিজ্ঞান (নির্দিষ্ট প্যাথোজেনিক অণুকে লক্ষ্য করে) বা সংমিশ্রণ থেরাপি; স্ক্রীনিংয়ের 12 সপ্তাহের মধ্যে বর্তমান প্লাজমাফেরেসিস বা ইন্ট্রাভেনাস গ্লোবুলিন দিয়ে চিকিত্সা; অস্বাভাবিক লিভার ফাংশন; বর্তমান সক্রিয় সংক্রমণ; এবং অধ্যয়ন শুরু হওয়ার 4 সপ্তাহের মধ্যে একটি ম্যালিগন্যান্ট টিউমার। এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগীরা 3 দিনের জন্য 0.5 গ্রাম/ডি ডোজে মিথাইলপ্রেডনিসোলন দিয়ে পালস থেরাপি পান। মিথাইলপ্রেডনিসোলোন পালস থেরাপি শেষ হলে, প্রেডনিসোন (0.6 মিলিগ্রাম/কেজি/ডি), এমএমএফ (0.5 গ্রাম, দুই ডোজ/ডি), এবং ট্যাক্রোলিমাস (2 মিগ্রা, দুটি ডোজ/ডি) মোট 4 সপ্তাহের জন্য দেওয়া হয়েছিল। তারপরে প্রিডনিসোনের ডোজ, যা এখনও MMF(0.5 g, দুই ডোজ/d) এবং ট্যাক্রোলিমাস (2 mg, দুই ডোজ/d) এর সাথে একত্রিত ছিল, যতক্ষণ না প্রতি 2 সপ্তাহে 5 mg/d দ্বারা হ্রাস করা হয়েছিল। একটি 10 mg/d রক্ষণাবেক্ষণ ডোজ অর্জন করা হয়েছিল (4)। সম্পূর্ণ মওকুফ (CR) একটি 24-ঘন্টা মূত্রনালীর প্রোটিনের ঘনত্ব 0.4 গ্রাম এর কম বা সমান, সক্রিয় প্রস্রাবের পলির অনুপস্থিতি, একটি সিরাম অ্যালবুমিন ঘনত্ব 35 g/L এর চেয়ে বেশি বা সমান, এবং স্বাভাবিক ক্রিয়েটিনিন হিসাবে নেওয়া হয়েছিল (23)। আংশিক মওকুফ (PR) কে 24-ঘন্টা মূত্রনালীর প্রোটিনের ঘনত্ব 3.5 গ্রাম থেকে কম বা সমান, 30 গ্রাম/ এর চেয়ে বেশি বা সমান সিরাম অ্যালবুমিন ঘনত্বের 50 শতাংশের বেশি বা সমান হিসাবে নেওয়া হয়েছিল। L, এবং বেসলাইন থেকে সিরাম ক্রিয়েটিনিনের ঘনত্বে 25 শতাংশের একটি স্বাভাবিক বা কম বা সমান। আমাদের প্রাতিষ্ঠানিক পর্যালোচনা বোর্ড অধ্যয়ন অনুমোদন করেছে (নং IIT20200410A) এবং সমস্ত রোগী তালিকাভুক্তির আগে লিখিত সম্মতি প্রদান করেছে।

পশুর মডেল

মহিলা MRL/emoji-FasPr(MRL/LPR) ইঁদুরগুলি SLAC Laboratory Animal Co.Ltd (Shanghai, China) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল, সমস্ত ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে একটি র্যান্ডম সংখ্যা জেনারেটরের সাহায্যে ভাগ করা হয়েছিল, প্রতিটি গ্রুপে 5টি ইঁদুর এবং প্রতিটি খাঁচা . তাদের 8 সপ্তাহ বয়সে মৌখিকভাবে 0.5 মিগ্রা/কেজি ট্যাক্রোলিমাস (MCE HY-13756), 50 mg/kg MMF(MCE HY-B0199), এবং 1 mg/ এর সংমিশ্রণে চিকিত্সা করা হয়েছিল। কেজি প্রিডনিসোন (MCE HY-B0214) বা গাড়ি প্রতিদিন মোট 8 সপ্তাহের জন্য পূর্বে বর্ণিত (6)। Ac-FLTD-CMK MCE দ্বারা সংশ্লেষিত হয়েছিল এবং প্রতিদিন 10 mg/kg ip ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। সমস্ত চিকিত্সা নিম্নলিখিত সনাক্তকরণের জন্য দায়ী অংশগ্রহণকারীদের অন্ধ করা হয়েছিল। অ্যালবুওয়েল এম এবং ক্রিয়েটিনাইন কম্প্যানিয়ন (এক্সেল, ফিল, ইউএস) ব্যবহার করে প্রস্রাবের অ্যালবুমিন থেকে ক্রিয়েটিনিন অনুপাত (ইউএসিআর) নির্ধারণ করা হয়েছিল। কিডনির নমুনাগুলি হিস্টোলজিক্যাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং এবং ইমিউনোব্লটিং বিশ্লেষণের জন্য নিষ্কাশিত কিডনি কর্টিসের আগে 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইডে স্থির করা হয়েছিল। ইঁদুরের ব্যবহার আমাদের প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণী পরিচর্যা ও ব্যবহার কমিটি (নং৷{20}}) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল৷

ইঁদুরের গ্লোমেরুলি বিচ্ছিন্নতা এবং পোডোসাইট সংস্কৃতি

Glomeruli আগে বর্ণিত (24) হিসাবে 12- সপ্তাহ বয়সী মহিলা C57 এবং MRL/LPR ইঁদুরের কিডনি থেকে বিশুদ্ধ করা হয়েছিল। চেতনানাশক ইঁদুরগুলিকে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস প্রিহিটেড ম্যাগনেটিক পুঁতি দিয়ে পারফিউজ করা হয়েছিল। কিডনি অপসারণ করা হয় এবং বরফের উপর 1 mm³ এ কিমা করা হয়। তারপর রেনাল টিস্যুগুলি 30 মিনিটের জন্য 1 mg/ml collagenase এবং 100 U/ml DNase I দিয়ে 37 ডিগ্রীতে হজম করা হয়েছিল, তারপরে 100-μm ফ্যালকন সেল স্ট্রেনার（431752, BD) দিয়ে দুবার ফিল্টার করা হয়েছিল। 4 ডিগ্রী HBSS দ্রবণ (H1025, Solarbio) এবং 200g এ মৃদু সেন্ট্রিফিউগেশন দিয়ে 5 মিনিটের জন্য বেশ কিছু ধোয়ার পর, ম্যাগনেটিক স্ট্যান্ড (HY-K0200, MCE) ব্যবহার করে গ্লোমেরুলি যুক্ত পুঁতি সংগ্রহ করা হয় এবং HBSS সলিউশন দিয়ে তিনবার ধুয়ে ফেলা হয়। বিচ্ছিন্ন গ্লোমেরুলি টাইপ I কোলাজেন (C3867, সিগমা-অ্যালড্রিচ) 5 শতাংশ CO-তে প্রলিপ্ত কালচারড খাবারে, জেফরি (25) দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে 37 ডিগ্রিতে সংস্কৃতি করা হয়েছিল। ইন-ভিট্রো পরীক্ষায় প্যাসেজ 2 পডোসাইট ব্যবহার করা হয়েছিল।পাইরোপ্টোসিসআনয়ন, সাইটোটক্সিসিটি, এবং IL-1 সিক্রেশন সনাক্তকরণ

এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের পোডোসাইটগুলিকে 1 মিলিগ্রাম/মিলি এলপিএস (টেল-পিবি5এলপিএস, ইনভিভোজেন) 4 ঘন্টার জন্য অপটি-এমইএম-এ সমাধান করা হয়েছিল, তারপরে 5 মিমি এটিপি (tlrlatpl, ইন ভিভো জিন) উদ্দীপনা দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। C57 ইঁদুরের পডোসাইটগুলি স্বাভাবিক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। মনোথেরাপি ট্যাক্রোলিমাস（10μM）, MMF（luM）, এবং prednisone（10μM）, বা সম্মিলিত থেরাপি এলপিএস প্রাইমিংয়ের আগে 1 ঘন্টার জন্য কোষের সাথে প্রাক-ইনকিউবেট করা হয়েছিল। উদ্দীপনার পরে সাইটোটক্সিসিটি নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে সাইটোটক্সিসিটি সনাক্তকরণ কিট (11644793001, রোচে) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। উদ্দীপকের পরে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে IL-1 মাউস ELISA কিট(BMS6002, Invitrogen) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।

অ্যান্টিবডি এবং রিএজেন্ট

ক্যাসপেস-1(sc-398715, সান্তা ক্রুজ বায়োটেক), GSDMDC1 (sc-81868, সান্তা ক্রুজ বায়োটেক) স্তরগুলি প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে মূল্যায়ন করা হয়েছিল৷পাইরোপ্টোসিসপেরিফেরাল রক্তে ফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা FAM FLICAMCaspase-1 Kit(Bio-Rad, USA) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

গ্রাফপ্যাড প্রিজম (সংস্করণ 8৷{1}}) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং ডেটা ± SD হিসাবে দেওয়া হয়েছে৷ পিয়ারসনের পারস্পরিক সম্পর্ক ব্যবহার করে ছাত্রদের টি-টেস্ট এবং পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণ ব্যবহার করে দুটি গ্রুপ তুলনা পরিচালিত হয়েছিল। দুই লেজযুক্ত পি<0.05 was="" considered="" statistically="">

জন্য চিকিত্সামধ্যে pyroptosisলুপাস নেফ্রাইটিস (LN)

ফলাফল

জিএসডিএমডি-মধ্যস্থপাইরোপ্টোসিসLN দ্বারা প্রভাবিত কিডনিতে সক্রিয় হয় (লুপাসনেফ্রাইটিস)

GSDMD LN এর প্যাথোজেনেসিসে অবদান রেখেছে কিনা তা তদন্ত করতে (লুপাসনেফ্রাইটিস), আমরা প্রথমে LN থেকে নেওয়া কিডনি নমুনায় GSDMD এর প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তর পরীক্ষা করেছিলুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী। ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল বিশ্লেষণে এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) টাইপ IV, V, I প্লাস ভ্যান্ড IV প্লাস V সহ রোগীদের এবং সুস্থ বিষয়ের তুলনায়। GSDMD সর্বজনীনভাবে প্রকাশ করা হয়েছিল গ্লোমেরুলার পডোসাইট, টিউবুলার কোষ এবং এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী। ইতিবাচক (লাল তীর) এবং নেতিবাচক দাগ (কালো তীর) সহ এলাকাটি বড় করা হয়েছিল (চিত্র 1A)। তখন কিডনিতে GSDMD- পজিটিভ এলাকার শতাংশ অনুমান করা হয়েছিল (চিত্র 1B)। এমআরএল/এলপিআর ইঁদুর এবং বন্য-প্রকার নিয়ন্ত্রণের কিডনিতে অনুরূপ ফলাফল পাওয়া গেছে। ইমিউনোব্লটিং বিশ্লেষণ এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের কিডনি নমুনাগুলিতে (চিত্র 1C) জিএসডিএমডির প্রকাশ এবং বিভাজন ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। গ্লোমেরুলার পডোসাইটস, টিউবুলার কোষ এবং অনুপ্রবেশকৃত আন্তঃস্থায়ী কোষগুলিতে জিএসডিএমডি নিয়ন্ত্রণ ইঁদুরের তুলনায় এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরে উন্নত হয়েছিল (চিত্র 1 ডি)। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে GSDMD- মধ্যস্থতা LN দ্বারা প্রভাবিত রেনাল টিস্যুতে সক্রিয় হয়েছিল (লুপাসনেফ্রাইটিস).

চিত্র 1|LN (লুপাস নেফ্রাইটিস) দ্বারা আক্রান্ত রোগী এবং ইঁদুরের কিডনিতে GSDMD দৃঢ়ভাবে উন্নীত এবং ক্লিভ করা হয়।

(ক) স্বাস্থ্যকর বিষয় থেকে নেওয়া রেনাল নমুনায় জিএসডিএমডির ইমিউনোকেমিক্যাল স্টেনিং এবং এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী, ইতিবাচক (লাল তীর) এবং নেতিবাচক দাগ (কালো তীর) বড় করা হয়েছিল।

(B) GSDMD পজিটিভ এলাকার পরিমাপ টাইপ III প্লাস V, IV, IV প্লাস V, V LN (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী এবং সুস্থ বিষয়.

(সি) তিন জোড়া নিয়ন্ত্রণ এবং এমআরএল/এলপিআর ইঁদুর থেকে রেনাল কর্টেক্সে পূর্ণ-দৈর্ঘ্য, ক্লিভড এন-টার্মিনাল ডোমেন এবং সি-টার্মিনাল ডোমেন জিএসডিএমডির ইমিউনোব্লট বিশ্লেষণ।

(ডি) নিয়ন্ত্রণ এবং এমআরএল/এলপিআর ইঁদুর থেকে নেওয়া কিডনি নমুনাগুলিতে জিএসডিএমডির ইমিউনোকেমিক্যাল স্টেনিং।

*p < {{0}}.05,="" **p=""><0.01। এলএন="">লুপাসনেফ্রাইটিস), লুপাসনেফ্রাইটিস; FL, পূর্ণ-দৈর্ঘ্য; এনটি, এন-টার্মিনাল ডোমেইন; সিটি, সি-টার্মিনাল ডোমেইন।

সংমিশ্রণ চিকিত্সা জিএসডিএমডি-মধ্যস্থতাকে দমন করেপাইরোপ্টোসিসভিট্রোতে প্রাথমিক পডোসাইটগুলিতে সক্রিয়করণ

কম্বিনেশন থেরাপির প্রতিষেধক প্রভাবগুলি তদন্ত করতেpyroptosis, আমরা প্ররোচিত করার জন্য এলপিএস প্লাস এটিপি উদ্দীপনা পদ্ধতি প্রয়োগ করেছিpyroptosisএমআরএল/এলপিআর ইঁদুর থেকে পডোসাইটগুলিতে, সাধারণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে বন্য-টাইপ C57 ইঁদুর থেকে পডোসাইট গ্রহণ করা। MRLlpr ইঁদুর থেকে পোডোসাইটগুলি 4 ঘন্টার জন্য এলপিএস দিয়ে প্রাইম করা হয়েছিল এবং পরবর্তীতে এটিপি দিয়ে 4 ঘন্টার জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল, এটি জিএসডিএমডি-মধ্যস্থতার জন্য সাধারণত ব্যবহৃত উদ্দীপনা।pyroptosisসক্রিয়করণ (26)। স্বাভাবিক নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে, পডোসাইট পরবর্তীতে পাইরোপ্টোটিক আকারগত বৈশিষ্ট্য যেমন কোষের ফোলাভাব এবং বুদবুদ দেখায়। কম্বিনেশন থেরাপির সাথে প্রিট্রিটমেন্ট উল্লেখযোগ্যভাবে পাইরোপটোটিক মরফোলজিক্যাল বৈশিষ্ট্য এবং সাইটোটক্সিসিটি (চিত্র 2A) উন্নত করেছে। এলপিএস প্লাস এটিপি প্ররোচিত পডোসাইট সাইটোটক্সিসিটি। তুলনামূলকভাবে, সম্মিলিত থেরাপি LPS প্লাস ATP উদ্দীপনা (চিত্র 2B, C) দ্বারা প্ররোচিত সুপারনাট্যান্টে সাইটোটক্সিসিটি এবং IL-1 ক্ষরণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। জিএসডিএমডি-মধ্যস্থতার আরও সক্রিয়করণ যাচাই করতেpyroptosis, আমরা ইমিউনোব্লটিং ব্যবহার করে ক্যানোনিকাল ইনফ্ল্যামাসোম এবং জিএসডিএমডি অ্যাক্টিভেশন বিশ্লেষণ করেছি। pyroptotic morphological পরিবর্তন এবং সাইটোটক্সিসিটির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, LPS প্লাস ATP উল্লেখযোগ্যভাবে সক্রিয় NLRP3, ক্যাসপেস-1, এবং পডোসাইটে ক্লিভড GSDMD (চিত্র 2D)। সংমিশ্রণ চিকিত্সা NLRP3 এবং ক্যাসপেস-1 সক্রিয়করণকে উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করে এবং GSDMD N-টার্মিনালের স্তরকে হ্রাস করে। উল্লেখযোগ্যভাবে, ট্যাক্রোলিমাস, MMF, বা প্রিডনিসোন সহ মনোথেরাপি LPS প্লাস ATP উদ্দীপিত কোষ সাইটোটক্সিসিটি এবং L-1 ক্ষরণকে দমন করে, কিন্তু সংমিশ্রণ থেরাপি ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি-তে আরও উল্লেখযোগ্য প্রতিরোধমূলক প্রভাব দেখায়। এই ফলাফলগুলি প্রমাণ প্রদান করে যা এই দৃষ্টিভঙ্গিকে সমর্থন করে যে সংমিশ্রণ চিকিত্সা জিএসডিএমডি-মধ্যস্থতাকে উন্নত করেছেpyroptosisNLRP3 এবং ক্যাসপেসের সক্রিয়করণকে দমন করে-1।

চিত্র 2|কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট ভিট্রোতে পডোসাইটের পাইরোপ্টোসিসকে কমিয়ে দেয়।

(A) পাইরোপটোটিক বৈশিষ্ট্যগুলি এলপিএস প্লাস এটিপি দিয়ে ইনকিউবেট করার পরে এবং সংমিশ্রণ চিকিত্সার সাথে প্রিট্রিট করার পরে সংস্কৃতিযুক্ত প্রাথমিক পডোসাইটগুলিতে প্রদর্শিত হয়েছিল। তীরগুলি পাইরোপ্টোটিক-এর মতো বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শনকারী কোষগুলিকে নির্দেশ করে।

(বি) LDH নিঃসরণ দ্বারা পরিমাপ করা হিসাবে চ্যালেঞ্জযুক্ত কোষ থেকে সুপারন্যাট্যান্টগুলি কোষের মৃত্যুর জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

(C) IL-1b প্রকাশের জন্য চ্যালেঞ্জ করা কোষ থেকে সুপারন্যাট্যান্টগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

(D) ট্যাক্রোলিমাস, MMF, প্রিডনিসোন, বা NLRP3 ইনফ্ল্যামাসোম অ্যাক্টিভেশনের পরে সংমিশ্রণ চিকিত্সার পরে NLRP3, ক্যাসপেস-1, GSDMD-NT, এবং ASC এক্সপ্রেশনের ইমিউনোব্লটিং বিশ্লেষণ।

*p < {{0}}৷{4}}৫;="" **p="">< 0.01;="" ***p=""><0.001; ****p=""><0.0001। এলডিএইচ,="" ল্যাকটেট="">

DSMO, ডাইমিথাইল সালফক্সাইড, FK506, ট্যাক্রোলিমাস; MMF, mycophenolate mofetil; PNS, prednisone; COM, কম্বিনেশন থেরাপি; এএসসি, অ্যাপোপটোসিস-সম্পর্কিত স্পেক-জাতীয় প্রোটিন।

কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট সাপ্রেসড ক্যাসপেস-1/GSDMD-প্ররোচিতপাইরোপ্টোসিসএমআরএল/এলপিআর ইঁদুরে

আট সপ্তাহ বয়সী এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরকে এমএমএফ, ট্যাক্রোলিমাস এবং প্রিডনিসোন বা যানবাহন নিয়ন্ত্রণের সংমিশ্রণ দেওয়া হয়েছিল। পূর্ববর্তী একটি গবেষণার (6) সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, 8 সপ্তাহের জন্য চিকিত্সার পরে, গাড়ি এবং সংমিশ্রণ চিকিত্সা গোষ্ঠীর মধ্যে মৃত্যুহার বা শরীরের ওজনে কোনও পার্থক্য পাওয়া যায়নি। গাড়ির গ্রুপের বিপরীতে, প্রোটিনুরিয়া, গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস এবং রেনাল ইন্টারস্টিশিয়াল ইমিউন কোষের অনুপ্রবেশ (পরিপূরক চিত্র 1) প্রতিরোধে সমন্বয় থেরাপি খুবই কার্যকর ছিল।

এরপরে, আমরা কম্বিনেশন থেরাপি এবং যানবাহন নিয়ন্ত্রণ গ্রুপগুলিতে ক্যাসপেস-1 এবং GSDMD এক্সপ্রেশন স্তরগুলি পরীক্ষা করেছি। ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে গ্লোমেরুলার এবং রেনাল ইন্টারস্টিশিয়াল ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি এক্সপ্রেশন কম্বিনেশন থেরাপি গ্রুপে (চিত্র 3A) উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ইমিউনোব্লটিং বিশ্লেষণে কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট গ্রুপের (চিত্র 3বি) কিডনি কর্টিসে ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি-এর একটি হ্রাস প্রকাশ এবং ক্লিভেজও পাওয়া গেছে। অধিকন্তু, ক্যাসপেস-1/প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড (পিআই) ডাবল-পজিটিভ কোষগুলি প্রবাহ সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল এবং একটিpyroptosisFAM ক্যাসপেস-1কিট। ফলাফলগুলি এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের ক্যাসপেস-1*/পিআই' পেরিফেরাল ব্লাড সেল নম্বরগুলির একটি উল্লেখযোগ্য হ্রাস প্রকাশ করেছে যা যানবাহনের সাথে চিকিত্সা করা এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের তুলনায় সংমিশ্রণ চিকিত্সা পেয়েছে।(চিত্র 3C,D)। উপরন্তু, সংমিশ্রণ চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে সিরাম Ii ঘনত্ব (চিত্র 3E) হ্রাস করেছে। আমরা এইভাবে উপসংহারে পৌঁছেছি যে সংমিশ্রণ চিকিত্সা ক্যাসপেস চাপা-1/GSDMD-প্ররোচিতpyroptosisএলএন এর কিডনি এবং রক্তের কোষে (লুপাসনেফ্রাইটিস) ইঁদুর।

চিত্র 3|এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরে কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট অ্যাটেনুয়েটেড ক্যাসপেস-1/জিএসডিএমডি-মিডিয়াটেড পাইরোপ্টোসিস।

(A) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের কিডনি নমুনায় জিএসডিএমডি এবং ক্যাসপেসের-1 ইমিউনোকেমিক্যাল স্টেনিং। যানবাহন নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি এক্সপ্রেশন সংমিশ্রণ চিকিত্সা গ্রুপে লক্ষণীয়ভাবে বাধা দেওয়া হয়েছিল।

(খ) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের রেনাল কর্টেক্স নমুনায় পূর্ণ-দৈর্ঘ্য এবং ক্লিভড জিএসডিএমডি এবং ক্যাসপেস-1 এর ইমিউনোব্লট বিশ্লেষণ; যানবাহন এবং সংমিশ্রণ চিকিত্সা গ্রুপ থেকে ফলাফলের তুলনা।

(C) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুর থেকে পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের FACS যাদের সম্মিলিত চিকিত্সা দেওয়া হয়েছিল বা দেওয়া হয়নি।

(D) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের পরিমাণ নির্ধারণ করা হয়েছে বা না দেওয়া হয়েছে কম্বিনেশন থেরাপি।

(ঙ) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরে সিরাম আইএল{{0}}বি ঘনত্বের পরিমাণ নির্ধারণ করা হয়েছে বা না দেওয়া হয়েছে কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট। ####P <0.0001। facs,="" ফ্লুরোসেন্স-অ্যাক্টিভেটেড="" সেল="" বাছাই;="" সিটি,="" কম্বিনেশন="">

কম্বিনেশন থেরাপি সাপ্রেসড ক্যাসপেস-1/GSDMD-প্ররোচিতপাইরোপ্টোসিসLN তে (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী

জানুয়ারী 2020 এবং জুন 2020 এর মধ্যে, LN-এ আক্রান্ত 47 রোগীলুপাসনেফ্রাইটিস) নথিভুক্ত করা হয়েছিল এবং 43 সপ্তাহের সংমিশ্রণ থেরাপি 24- সম্পূর্ণ করেছে৷ নথিভুক্ত গোষ্ঠীর বেসলাইন রোগ এবং জনসংখ্যা সম্পূরক সারণী 1 এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। ক্যাসপেসের পরিমাণ-1/প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড(পিআই ডাবল-পজিটিভ কোষগুলি LN রোগীদের মধ্যে পরিচালিত হয়েছিল)লুপাসনেফ্রাইটিস) টাইপ III, IV, V, III প্লাস V, IV প্লাস V এবং একটি ব্যবহার করে স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণেpyroptosisFAM ক্যাসপেস-1 কিট এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি। স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের সংখ্যা বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 4A, B)। আমরা ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষগুলিও পরীক্ষা করেছি 24-সপ্তাহ থেরাপির পরে এবং বেসলাইনে। ইন্ডাকশন থেরাপির 24-সপ্তাহের পরে, CR এবং PR-এর ঘটনা যথাক্রমে 39.5 শতাংশ (17/43) এবং 32.6 শতাংশ (14/43) ছিল৷ CR এবং PR রোগীদের পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডবল-পজিটিভ সেল নম্বরগুলি বেসলাইনের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 4C)। এছাড়াও আমরা ক্যাসপেসের মধ্যে একটি পারস্পরিক সম্পর্ক চিহ্নিত করেছি-1 প্ররোচিত৷pyroptosisএবং SLEDA; ডেটা স্পষ্টভাবে দেখায় যে পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI পজিটিভ অনুপাত SLEDAI (চিত্র 4D) এর সাথে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল। Ac-FLTD-CMK, একটি GSDMD-প্রাপ্ত ইনহিবিটর, LN এর বিকাশকে বাধা দেয় (লুপাসনেফ্রাইটিস).

চিত্র 4|LN (লুপাস নেফ্রাইটিস) রোগীদের মধ্যে কম্বিনেশন থেরাপি অ্যাটেনুয়েটেড ক্যাসপেস-1-মিডিয়াটেড পাইরোপটোসিস।

(ক) এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগীদের সংমিশ্রণ থেরাপির সাথে বা ছাড়াই চিকিত্সা করা হয়।

(বি) পেরিফেরাল টাইপের III, IV, V, III প্লাস V, এবং IV প্লাস V LN (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী এবং সুস্থ বিষয়.

(C) LN এর পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের পরিমাণ নির্ধারণ (লুপাসনেফ্রাইটিস) বেসলাইনে রোগীরা, CR, PR, এবং কম্বিনেশন থেরাপির পরে নন-রিমিশন।

(D) SLE-DAI-এর সাথে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ সেল অনুপাতের পারস্পরিক সম্পর্ক বিশ্লেষণ।

**p < 0.01.="" facs,="" ফ্লুরোসেন্স-অ্যাক্টিভেটেড="" সেল="" বাছাই;="" এলএন="">লুপাসনেফ্রাইটিস), লুপাসনেফ্রাইটিস; CR, সম্পূর্ণ মওকুফ; PR, আংশিক মওকুফ; SLE-DAI, সিস্টেমিক লুপাস erythematosus রোগ কার্যকলাপ সূচক।

সাম্প্রতিক একটি সমীক্ষায় দেখা গেছে যে GSDMDhmice SLE.17-এর একটি ইমিকুইমোড-প্ররোচিত মডেলে রেনাল C3 এবং IgG জমা, আরও গুরুতর রেনাল ইনজুরি এবং বর্ধিত মৃত্যুহার বিকাশ করেছে।লুপাসনেফ্রাইটিস), MRL/LPR ইঁদুরগুলিকে Ac-FLTD-CMK21 দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল 8-সপ্তাহ-পুরোনো থেকে, গাড়ির নিয়ন্ত্রণের সাথে। চিকিত্সার 8-সপ্তাহ পরে, গাড়ি এবং Ac-FLTD-CMK চিকিত্সা করা গ্রুপের মধ্যে মৃত্যুহার বা শরীরের ওজনের মধ্যে কোনো পার্থক্য পাওয়া যায়নি। যানবাহন নিয়ন্ত্রণ ইঁদুরের তুলনায়, Ac-FLTD-CMK-চিকিত্সা করা MRL/LPR ইঁদুরের প্রস্রাবের অ্যালবুমিন-ক্রিয়েটিনিন অনুপাত (চিত্র 5A), কম সিরাম ক্রিয়েটিনিন ঘনত্ব (চিত্র 5B), কম গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস (চিত্র 5C), এবং CD3 ছিল , CD4, এবং CD68 পজিটিভ কোষ অনুপ্রবেশ (চিত্র 5D)। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রির ফলাফলগুলি GSDMD(চিত্র 5D) এবং ELISA(চিত্র 5E) দ্বারা নির্ধারিত সিরাম IL-1 নিঃসরণের একটি কম অভিব্যক্তি দেখিয়েছে। সম্মিলিতভাবে, ডেটা পরামর্শ দিয়েছে যে Ac-FLTD-CMK বাধা দিয়েছেpyroptosisএলএন দ্বারা প্রভাবিত কিডনিতে (লুপাসনেফ্রাইটিস).

চিত্র 5|Ac-FLTD-CMK, একটি GSDMD- থেকে প্রাপ্ত ইনহিবিটর, LN (লুপাস নেফ্রাইটিস) এর বিকাশকে বাধা দেয়।

(A) প্রস্রাবের অ্যালবুমিন-থেকে-ক্রিয়েটিনিন অনুপাত এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরগুলিতে গণনা করা হয়েছিল যেগুলিকে জিএসডিএমডি ইনহিবিটার দেওয়া হয়েছিল বা দেওয়া হয়নি।

(বি) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরের সিরাম ক্রিয়েটিনিনকে জিএসডিএমডি ইনহিবিটর দেওয়া বা দেওয়া হয়নি।

(সি) পিরিওডিক অ্যাসিড-শিফ (পিএএস) এবং কোয়ান্টিফিকেশন গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস শতাংশে দাগযুক্ত কিডনির নমুনার প্রতিনিধি চিত্র।

(D) CD3, CD4, F4/80, এবং GSDMD এর ইমিউনোকেমিক্যাল স্টেনিং। (ই) এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরে সিরাম IL-1b ঘনত্বের পরিমাপ একটি GSDMD ইনহিবিটার দেওয়া বা না দেওয়া।

ডেটা গড় ± SEM হিসাবে দেখানো হয়। #p < {{0}}.05,="" ##p=""><>

আলোচনা

কম্বিনেশন থেরাপি একটি প্রতিশ্রুতিশীল কৌশল কারণ উচ্চ CR এবং সামগ্রিক প্রতিক্রিয়া হার, ক্ষমা করার জন্য একটি সংক্ষিপ্ত সময় এবং কম পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া। এখন পর্যন্ত, সমন্বয় থেরাপির অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়া জানা ছিল না। সম্প্রতি, Fu et al.(6) MRL/LPR ইঁদুরকে মনোথেরাপি বা কম্বিনেশন থেরাপির মাধ্যমে চিকিত্সা করেছেন এবং পুরো কিডনিতে একটি ব্যাপক ট্রান্সক্রিপ্টমিক বিশ্লেষণ করেছেন। মজার বিষয় হল, তারা সেই সংমিশ্রণ থেরাপি খুঁজে পেয়েছে কিন্তু মনোথেরাপি নয় বিশেষভাবে এবং অনন্যভাবে চাপা ক্যাসপেস-1 অভিব্যক্তি।

NLRP3/ASC/caspase-1 ইনফ্ল্যামাসোম এখন LN এর প্যাথোজেনেসিসের মূল অবদানকারী হিসাবে স্বীকৃতলুপাসনেফ্রাইটিস) পডোসাইটের NLRP3 ইনফ্ল্যামাসোমগুলি লুপাস-প্রবণ ইঁদুরে এবং এলএন রোগীদের মধ্যে সক্রিয় হয় (লুপাসনেফ্রাইটিস) যখন এনএলআরপি৩ ইনফ্ল্যামাসোমগুলিকে ক্যাসপেস-1 ইনহিবিটর দিয়ে দমন করা হয়, তখন প্রোটিনুরিয়া, রেনাল হিস্টোলজিক্যাল ক্ষত এবং পডোসাইট ফুট প্রসেস ইফেসমেন্ট লুপাস-প্রবণ ইঁদুরে (8) উন্নত করা হয়। হুয়াং এট আল। (27) রিপোর্ট করেছে যে NLRP3 LN এর টিউবুলার কোষগুলিতে প্রকাশ করা হয়েছিল (লুপাসনেফ্রাইটিস) চতুর্থ শ্রেণি এবং সেই NLRP3 অ্যাক্টিভেশনটি এলএন রোগীদের জন্য কার্যকলাপ সূচক স্কোরের সাথে ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল। ক্যাসপেস-1 লুপাস এবং ভাস্কুলার কর্মহীনতায় একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করতে প্রমাণিত হয়েছে, এবং এইভাবে এটি অভিনব থেরাপিউটিক হস্তক্ষেপের জন্য একটি সম্ভাব্য লক্ষ্য (28)৷ উদীয়মান পরীক্ষামূলক ওষুধ যেমন RIP3(29), P2X7 রিসেপ্টর বিরোধী (30), GSK-3 ইনহিবিটরস (31) এবং একটি Nrf2 অ্যাগোনিস্ট (32) LN এর বিকাশকে বাধা দেয়লুপাসনেফ্রাইটিস) MRL/LPR ইঁদুরের মধ্যে NLRP3/ASC/caspase-1 প্রদাহজনক কার্যকলাপ, যা LN-এ NLRP3/ASC/caspase-1 প্রদাহের গুরুত্ব এবং সমালোচনাকে হাইলাইট করে। IL-18-এর বর্ধিত সিরাম ঘনত্ব রোগের তীব্রতা এবং SLE রোগীদের কিডনিতে আঘাত/জড়িত হওয়ার মাত্রার সাথে সম্পর্কযুক্ত (33)। আমাদের জ্ঞানের সর্বোত্তমভাবে, এটা মনে হয় যে গ্যাসডার্মিন পরিবারের বিকাশের জন্য অপরিহার্য হতে পারেpyroptosis, কিন্তু SLE রোগীদের মধ্যে GSDMD/GSDME-এর উপস্থিতির প্রমাণের ঘাটতি রয়েছে।

সামগ্রিকভাবে, আমরা এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগী এবং MRL/LPR ইঁদুর। GSDMD দৃঢ়ভাবে প্ররোচিত এবং গ্লোমেরুলার পডোসাইট এবং টিউবুলার কোষ এবং অনুপ্রবেশকারী আন্তঃস্থায়ী কোষগুলিতে ক্লিভ করা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, এমআরএল/এলপিআর ইঁদুরকে এমএমএফ, ট্যাক্রোলিমাস এবং প্রিডনিসোন বা গাড়ির সংমিশ্রণ দেওয়া হয়েছিল। যানবাহন নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর সাথে তুলনা করে, কম্বিনেশন ট্রিটমেন্ট গ্রুপে ক্যাসপেস-1 এবং জিএসডিএমডি সক্রিয়করণ হ্রাস করা হয়েছিল। এর ডিগ্রিpyroptosisপেরিফেরাল রক্তেও এলএন-এ অনেক কম ছিল (লুপাসনেফ্রাইটিস) সংমিশ্রণ থেরাপি প্রশাসনের পরে রোগীদের. তাছাড়া,pyroptosisপেরিফেরাল রক্তে ইতিবাচকভাবে SLEDAI এর সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল, যা পরামর্শ দেয় যেpyroptosisপেরিফেরাল রক্তে SLE কার্যকলাপের জন্য একটি উল্লেখযোগ্য চিহ্নিতকারী হিসাবে কাজ করতে পারে। আমরা এইভাবে অনুমান করেছি যে সমন্বয় থেরাপি LN-তে উপকারী প্রভাব প্রদান করতে পারে (লুপাসনেফ্রাইটিস) বাধা দিয়েpyroptosisক্যাসপেস-1/GSDMD দ্বারা প্ররোচিত। AC-FLTD-CMK-এর সাথে একটি কমপ্লেক্সে ক্যাসপেসের পূর্ববর্তী স্ফটিক কাঠামোগত অধ্যয়নগুলি অনেকগুলি এনজাইম-ইনহিবিটর মিথস্ক্রিয়া প্রকাশ করেছে যা ক্যাসপেসের দ্বারা GSDMD স্বীকৃতিকে বাধা দেয়-1। যাইহোক, আমরা দেখেছি যে Ac-FLTD-CMK, যা একটি GSDMD-প্রাপ্ত ইনহিবিটর হিসাবে কাজ করে, বাধা দেয়pyroptosisLN তে (লুপাসনেফ্রাইটিস), যা একটি ভিন্ন প্রক্রিয়া দ্বারা প্ররোচিত হতে পারে।

সম্প্রতি, SLE(34) এর একটি TLR7-প্রেরিত মুরিন মডেলে, GSDMD-/-ইঁদুরের কিডনির ক্ষতি এবং মৃত্যুহার বৃদ্ধি পেয়েছে, যা প্রাথমিকভাবে পরামর্শ দিয়েছিল যে GSDMD মুছে ফেলার একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব থাকবে এবং এর সাথে যুক্ত হবে পদ্ধতিগত প্রদাহ এবং অটোঅ্যান্টিবডিগুলির উত্পাদন সম্পর্কিত বর্ধিত মৃত্যুহার। জিএসডিএমডি-ঘাটতি ইঁদুরগুলি কিডনির নমুনাগুলিতে একটি গ্লোমেরুলার ইমিউন কমপ্লেক্সের আরও বিশিষ্ট ডিপোজিশন এবং বন্য ধরণের ইঁদুরের তুলনায় উচ্চ প্রোটিনুরিয়া বিকাশ করে। জিএসডিএমডি-/লিম্ফোসাইটগুলিতেও এক্সট্রা সেলুলার এইচএমজিবি১ এর বর্ধিত নিঃসরণ পাওয়া গেছে যা নেক্রোসিস/pyroptosisযখন GSDMD অনুপস্থিত ছিল তখন ঘটেছিল।

ক্যাসপেস-1 ট্রিগারpyroptosisGSDMD ক্লিভেজ দ্বারা। বিপরীতে, জিএসডিএমডি-ঘাটতি বা জিএসডিএমডি-নিম্ন কোষে, ক্যাসপেস-1 অ্যাপোপটোসিস শুরু করে এবং তারপরে জিএসডিএমই-নির্ভর সেকেন্ডারি নেক্রোসিস এবংpyroptosis. থেরাপির পরে যখন GSDMD কার্যকলাপ অনুপস্থিত থাকে, GSDME সম্ভবত ক্যাসপেস-3-মধ্যস্থিত অ্যাপোপটোসিসকেও পরিবর্তন করতে পারেpyroptosis(৩৫,৩৬) এছাড়াও, ক্যাসপেসের সক্রিয়করণ-8 ম্যাক্রোফেজগুলিতে অনেক উন্নত ছিল যেগুলি GSDMD ঘাটতি ছিল। TLR7-প্ররোচিত GSDMD-ঘাটতি LN (লুপাসনেফ্রাইটিস) ইঁদুর (34)। এইভাবে, জিএসডিএমডির অনুপস্থিতিতে, সম্ভবত ক্যাসপেস-1 ক্যাসপেসের সাথে সহযোগিতা করে-8 ক্যাসপেস-3-জিএসডিএমই-মধ্যস্থ অ্যাপোপটোসিসে পরিবর্তন করতেpyroptosisLN তে (লুপাসনেফ্রাইটিস), একটি অনুমান যা আরও পরীক্ষামূলক তদন্তের দাবি করে।

বর্তমান গবেষণায় বেশ কিছু সীমাবদ্ধতা রয়েছে। প্রথমত, বর্তমান তথ্যের উপর ভিত্তি করে, আমরা যাচাই করেছি যে সমন্বয় থেরাপি দমন করতে পারেpyroptosis, কিন্তু অন্যান্য চিকিত্সা যেমন স্টেরয়েড এবং MMF, স্টেরয়েড এবং ট্যাক্রোলিমাস বা অ্যান্টি-CD20 অ্যান্টিবডির দ্বৈত থেরাপিরও তুলনামূলক প্রভাব থাকতে পারে। দ্বিতীয়ত, ক্যাসপেসের উপর কম্বিনেশন থেরাপির বাধা প্রভাবের সঠিক আণবিক প্রক্রিয়া-1 ভালভাবে অন্বেষণ করা হয়নি। শেষ কিন্তু অন্তত নয়, আমরা এসএলই-ডিএআই-এর সাথে পেরিফেরাল রক্তে ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের সম্পর্ক পর্যবেক্ষণ করি এবং একটি পূর্ববর্তী LN (লুপাসনেফ্রাইটিস) রোগীর দল। রোগের কার্যকলাপ এবং চিকিত্সার প্রতিক্রিয়ার জন্য ক্যাসপেস-1/PI ডাবল-পজিটিভ কোষের ক্লিনিকাল ভবিষ্যদ্বাণীমূলক মান একটি বৃহত্তর সম্ভাব্য দলে আরও তদন্ত করা দরকার।

সামগ্রিকভাবে, আমরা শনাক্ত করেছি যে কম্বিনেশন থেরাপি ক্যাসপেস-1/GSDMD-প্ররোচিত করে দমন করে এর উপকারী প্রভাবগুলি প্রদান করেpyroptosisLN তে (লুপাসনেফ্রাইটিস), যা জড়িত সেলুলার প্রক্রিয়াগুলির মধ্যে একটি অভিনব অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে। প্রকৃতপক্ষে, সংমিশ্রণ থেরাপি বিশেষভাবে এবং অনন্যভাবে ক্যাসপেস-1 অভিব্যক্তিকে চাপা দেয়। NLRP3 এবং ক্যাসপেসের ফার্মাকোলজিক্যাল বা জেনেটিক বাধা-1 উন্নত রেনাল ফাংশন এবং LN-তে অটোইমিউনিটি দমন করে (লুপাসনেফ্রাইটিস) এলএন (লুপাসনেফ্রাইটিস) আরও অধ্যয়নের যোগ্য, এবং LN রোগীদের GSDMD লক্ষ্য করে থেরাপি (লুপাসনেফ্রাইটিস) খুব সাবধানে মূল্যায়ন করা প্রয়োজন.

জন্য চিকিত্সা পদ্ধতিpyroptosis

তথ্যসূত্র

1. সাক্সেনা আর, মহাজন টি, মোহন সি।লুপাসনেফ্রাইটিস: বর্তমান আপডেট। আর্থ্রাইটিস রেস থার (2011)13:240.doi: 10.1186/ar3378

2. An Y, Zhang H, Liu Z. Individualizing Therapy inলুপাসনেফ্রাইটিস. কিডনি আন্তর্জাতিক প্রতিনিধি (2019)4:1366-72.doi: 10.1016/j.ekir.2019.08.005

3. Bao H, Liu ZH, Xie HL, Hu WX, Zhang HT, LiLS. ক্লাস V প্লাস IV এর সফল চিকিৎসালুপাসনেফ্রাইটিসমাল্টিটার্গেট থেরাপি সহ। J Am Soc Nephrol (2008)19:2001-10.doi: 10.1681/ASN.2007121272

4. লিউ জেড, ঝাং এইচ, লিউ জেড, জিং সি, ফু পি, নি জেড, এট আল। এর আনয়ন চিকিত্সার জন্য মাল্টিটার্গেট থেরাপিলুপাসনেফ্রাইটিস: একটি র্যান্ডমাইজড ট্রায়াল, অ্যান ইন্টার্ন মেড (2015)162:18-26। DOI: 10.7326/M14-1030

5. Zhang H, Liu Z, Zhou M, Liu Z, Chen J, Xing C, et al. এর রক্ষণাবেক্ষণ চিকিত্সার জন্য মাল্টিটার্গেট থেরাপিলুপাসনেফ্রাইটিস. J Am Soc Nephrol(2017)28:3671-8.doi:10.1681/ASN.2017030263

6. Fu J, Wang Z, Lee K, Wei C, Liu Z, Zhang M, et al. ট্রান্সক্রিপ্টোমিক বিশ্লেষণ এর জন্য কম্বিনেশন থেরাপিতে নভেল সিনারজিস্টিক মেকানিজম উন্মোচন করেলুপাসনেফ্রাইটিস. কিডনি Int(2018)93:416-29.doi: 10.1016/j.kint.2017.08.031

7. উমমারিনো ডি।লুপাসনেফ্রাইটিস: NLRP3 ইনফ্ল্যামাসোম পোডোসাইট ডিসফাংশনকে জ্বালায়। Nat Rev Rheumatol(2017)13:451.doi: 10.1038/Orpheum. 2017.9