প্লাজমোডিয়াম বার্গেই-সংক্রমিত ইঁদুরের লিভার এবং কিডনির কার্যকারিতায় ক্যাসিয়া স্পেক্টাবিলিস ডিসির ইথানোলিক পাতার নির্যাসের বিষাক্ত মূল্যায়ন এবং প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব
Oct 30, 2023
1। পরিচিতি
আজ পর্যন্ত, সমস্যাপ্লাজমোডিয়ামম্যালেরিয়া নির্মূলের জন্য বিদ্যমান ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী ওষুধের প্রতি পরজীবী প্রতিরোধ এখনও একটি প্রধান সমস্যা [1-3]। তাই, ম্যালেরিয়ারোধী ওষুধের নতুন উত্স আবিষ্কারের উপর গবেষণা, যার মধ্যে একটি ঔষধি গাছ থেকে, করা অব্যাহত রয়েছে [৪]।ভিভোতেএবংভিট্রোতেমডেলগুলি দীর্ঘকাল ধরে ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী পরীক্ষায় ব্যবহৃত হয়েছে। বিংশ শতাব্দীর শেষার্ধে,প্লাজমোডিয়াম বার্গেইবাপ্লাজমোডিয়াম yoeliiইঁদুর সংক্রমিত করতে ব্যবহৃত হয়। এদিকে,পি. বার্গেইলিভার পর্যায়ে অধ্যয়নের জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত প্রজাতি হয়ে ওঠে, বিশেষ করে ম্যালেরিয়ার পুনরাবৃত্তি [5-7] তদন্ত করার জন্য হিপনোজয়েট গঠন।
কিডনির জন্য সিস্টানচের ভেষজ ফর্মুলেশন পেতে এখানে ক্লিক করুন
ইন্দোনেশিয়ার ঐতিহ্যবাহী উদ্ভিদগুলির মধ্যে একটি, Caesalpiniaceae পরিবারের Cassia spectabilis DC, P. falciparum এর বিরুদ্ধে ভিট্রোতে এবং P. berghei [8, 9] এর বিরুদ্ধে ম্যালেরিয়া চিকিৎসায় পরীক্ষামূলকভাবে প্রমাণিত হয়েছে, যা নির্দেশ করে যে C. spectabilis DC উদ্ভিদ ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী ওষুধের প্রার্থী হিসাবে আরও উন্নত হওয়ার সম্ভাবনা রয়েছে। পূর্ববর্তী কাজগুলি রিপোর্ট করেছে যে BALB/c ইঁদুরে P. berghei ANKA-এর বিরুদ্ধে C. spectabilis DC পাতার 90% ইথানোলিক নির্যাসের উপর একটি ইন ভিভো পরীক্ষায় দেখা গেছে যে একটি ED50 মান ছিল 131.5 mg/kg BW [9], এবং এটি খুব শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছে। ভাল ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী কার্যকলাপ [10]।
অধিকন্তু, C. spectabilis DC-এর নির্যাস, ভগ্নাংশ, উপভগ্নাংশ এবং বিচ্ছিন্ন যৌগগুলি তাদের ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী কার্যকলাপের জন্য ভিট্রোতে পরীক্ষা করা হয়েছে। *এই উদ্ভিদের সক্রিয় যৌগ সফলভাবে একটি যৌগ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছে যা (–){{0}}হাইড্রোক্সিকাসিনের অনুরূপ, এবং এর ইন ভিট্রো অ্যান্টিম্যালেরিয়াল অ্যাক্টিভিটি পরীক্ষায় 0.016 ug/mL এর খুব কম IC50 দেখানো হয়েছে। 11], যা একটি খুব শক্তিশালী অ্যান্টিম্যালেরিয়াল কার্যকলাপ হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয় [12]।
P. berghei ANKA-সংক্রমিত ইঁদুরের যকৃত এবং কিডনির কার্যকারিতার উপর C. spectabilis DC পাতার নির্যাস উন্নত করার নিরাপত্তা ও প্রভাব পরীক্ষা করে ম্যালেরিয়ার ওষুধের প্রতিরোধ ক্ষমতা কাটিয়ে ওঠার বিষয়ে এই উদ্ভিদের গবেষণা অব্যাহত রাখা হয়েছে। পরজীবী দ্বারা সংক্রামিত ইঁদুরের লিভার এবং কিডনি ফাংশনে ম্যালেরিয়া প্রতিরোধী কার্যকলাপ রয়েছে এমন ঔষধি উদ্ভিদের প্রভাবের উপর গবেষণা অধ্যয়ন ব্যাপকভাবে [১৩-১৬], সেইসাথে তীব্র এবং উপ-তীব্র বিষাক্ততা পরীক্ষা [১৭-২০] করা হয়েছে। শারীরবৃত্তীয় প্রক্রিয়া নিয়ন্ত্রণে লিভারের একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে। একটি অঙ্গ বিপাক, নিঃসরণ এবং সঞ্চয়ের মতো বেশ কয়েকটি গুরুত্বপূর্ণ কার্যের সাথে জড়িত। এছাড়াও, লিভারের অন্তঃসত্ত্বা এবং বহির্মুখী যৌগগুলির ডিটক্সিফিকেশন এবং নির্গমনে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে [21-24]।
ম্যালেরিয়াল প্যারাসাইট-সংক্রমিত মহিলা অ্যানোফিলিস মশার কামড়ে যখন স্পোরোজয়েটগুলি সংক্রমিত হয় তখন ম্যালেরিয়াল সংক্রমণ শুরু হয়। রক্ত খাওয়ানোর সময়, সংক্রামিত মহিলা অ্যানোফিলিস পরজীবীর স্পোরোজয়েট পর্যায়ে ইনজেকশন দেয় [25, 26]। মানবদেহে প্রায় এক ঘণ্টা ভ্রমণ করার পর, স্পোরোজয়েটরা লিভারে প্রবেশ করে, হেপাটোসাইটকে আক্রমণ করে এবং এক্সোইরিথ্রোসাইটিক সিজোগনির অযৌন চক্র শুরু করে। যকৃতের কোষের অভ্যন্তরে, পরজীবীগুলি অযৌনভাবে সংখ্যাবৃদ্ধি করে, যতক্ষণ না তারা পরিপক্ক স্কিজন্টে পৌঁছায় এবং অবশেষে, হেপাটোসাইট বিস্ফোরণে সংক্রামিত হওয়ার পরে প্রচুর সংখ্যক মেরোজোয়েট তৈরি করে এবং রক্তপ্রবাহে প্রবেশ করে। *ই সংক্রামিত হেপাটোসাইট এবং মেরোজয়েটগুলি ফেটে যাওয়ার কারণে লিভারের ক্ষতি করে যা রক্ত প্রবাহে প্রবেশ করে এবং লোহিত রক্তকণিকায় এরিথ্রোসাইটিক চক্র শুরু করে [27, 28]। লিভারের কোষে যে ক্ষতি হয় তা লিভার ফাংশনে কাজ করে এমন এনজাইম, বিশেষ করে ট্রান্সমিনেজ এনজাইম, এবং লিভারের চেহারায় রূপগত পরিবর্তন বাড়াতে পারে [২৯, ৩০], যেমন হেপাটোমেগালি। হেপাটোস্প্লেনোমেগালি মানুষের [৩১] এবং ইঁদুরের [৩২] মধ্যে ম্যালেরিয়াল সংক্রমণের একটি সাধারণ বৈশিষ্ট্য যা ম্যালেরিয়াল পরজীবীর দীর্ঘস্থায়ী সংস্পর্শে আসে। তবে ম্যালেরিয়ার সংক্রমণে কিডনি বড় হয় না।
লিভারের কর্মহীনতা রক্তরস গ্লুটামিক অক্সালোএসেটিক ট্রান্সমিনেজ (SGOT) এবং প্লাজমা গ্লুটামিক পাইরুভিক ট্রান্সমিনেজ (SGPT) এর হেপাটোসেলুলার ট্রান্সামিনেশন দ্বারা বা টিস্যুর হিস্টোলজিক্যাল পরীক্ষার মাধ্যমে সনাক্ত করা যেতে পারে [33]। সর্বাধিক সাধারণ ক্ষতি হল অ্যাপোপটোটিক কোষের মৃত্যু বা হেপাটোসাইট নেক্রোসিস সক্রিয়করণ [34-36]। ক্লিনিক্যালি গুরুত্বপূর্ণ কিডনির জড়িততা পি. ফ্যালসিপেরাম এবং পি. ম্যালেরিয়া দ্বারা সংক্রমণের সাথে যুক্ত। *ই পি. ফ্যালসিপেরামের সংক্রমণ তীব্র প্রকাশ তৈরি করে, লক্ষণবিহীন থেকে শুরু করে প্রস্রাবের ব্যাধি পর্যন্ত, এবং তীব্র রেনাল ফেইলিউর (ARF) বা তীব্র কিডনি আঘাত (AKI) এর জন্য হালকা ইলেক্ট্রোলাইট ব্যাঘাত ঘটায় যার জন্য ডায়ালাইসিস সহায়তা প্রয়োজন [২৭, ৩৭]। *ই ম্যালেরিয়ার জটিলতায় AKI-এর ক্ষেত্রে উচ্চ মৃত্যুহারে অবদান রাখার জন্য পরিচিত, যা প্রায় 75% ক্ষেত্রে। *ই হিস্টোলজিকাল অধ্যয়ন ম্যালেরিয়া-সম্পর্কিত AKI [৩৮]-এর মূল হেমোডাইনামিক ফ্যাক্টর হিসাবে গ্লোমেরুলোনফ্রাইটিস, তীব্র টিউবুলার নেক্রোসিস এবং ইন্টারস্টিশিয়াল নেফ্রাইটিসের উপস্থিতির পরামর্শ দেয়। সাধারণত, প্রস্রাবে পর্যাপ্ত পরিমাণে প্রোটিনের উপস্থিতি এবং প্লাজমা ইউরিয়া, ক্রিয়েটিনিন এবং প্লাজমা ইলেক্ট্রোলাইটের মাত্রা [৩৯] বৃদ্ধির মাধ্যমে কিডনির কর্মহীনতার মাত্রা সনাক্ত করা যায়।
BALB/c ইঁদুরে C. spectabilis DC (EECS) পাতার 90% ইথানোলিক নির্যাসের বিষাক্ততা, এরপর এনজাইম পরীক্ষা, হিস্টোপ্যাথলজি এবং EECS-এর পরে লিভার ও কিডনির কার্যকারিতাকে প্রভাবিত করতে পারে।
2। সামগ্রী ও পদ্ধতি
2.1। উদ্ভিদ উপাদান এবং EECS এর প্রস্তুতি। *ই সি. স্পেক্টাবিলিস
ডিসি পাতা LIPI (ইন্দোনেশিয়া রিসার্চ সেন্টার), বোটানিক্যাল গার্ডেন, পুরওদাদি, পূর্ব জাভা, ইন্দোনেশিয়া (B-160/IPH.06/KS.02/III/ 2019) এ কেনা এবং নির্ধারণ করা হয়েছে। *ই নমুনাটি ফার্মাকগনোসি এবং ফাইটোকেমিস্ট্রি বিভাগে হার্বেরিয়াম হিসাবে জমা করা হয়েছিল, ফার্মেসি অনুষদ, ইউনিভার্সিটাস এয়ারলাঙ্গা। *ই পাতাগুলি বহিরাগত দূষিত পদার্থগুলি অপসারণের জন্য কলের জল দিয়ে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে ধুয়ে ফেলা হয়, 45 ডিগ্রিতে শুকানো হয় এবং একটি গ্রাইন্ডারের সাহায্যে গুঁড়ো করে ফেলে। *ই নিষ্কাশনটি 3 × 24 ঘন্টার জন্য 2,500 মিলি 90% ইথানল (25-30 ডিগ্রিতে) একটি ফ্লাস্কে পাউডার প্ল্যান্টের উপকরণ (500 গ্রাম) ম্যাসেরেট করে করা হয়েছিল। *ই নিষ্কাশন দ্রাবক আলাদা করা হয়েছিল, ফিল্টার পেপারের মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং ঘূর্ণমান বাষ্পীভবনের দ্বারা হ্রাসকৃত চাপে বাষ্পীভূত হয়েছিল। *ই 1000 গ্রাম শুকনো ওজনের ইথানলিক নির্যাস ফলন। স্পেকটেবিলিস ডিসি পাতার পাউডার ছিল 10.20% (w/w) এবং এই পরীক্ষায় ব্যবহার করা হয়েছিল।
2.2। প্রাণী।
6-8 সপ্তাহ বয়সী পুরুষ BALB/c ইঁদুর, 25-30 গ্রাম ওজন, গবেষণায় ব্যবহার করা হয়েছিল। সমস্ত ইঁদুর ফার্মা ভেটেরিনারি সেন্টার, প্রাণিসম্পদ অধিদপ্তর এবং কৃষি স্বাস্থ্য মন্ত্রণালয়, সুরাবায়া, পূর্ব জাভা, ইন্দোনেশিয়া থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। *ই প্রাণীগুলিকে আদর্শ অবস্থার অধীনে রাখা হয়েছিল এবং একটি স্টক ডায়েট এবং জল খাওয়ানো হয়েছিল। *অধ্যয়ন প্রোটোকলের অনুমোদন প্রাপ্ত হয়েছে পশু গবেষণার নীতিশাস্ত্র কমিটি, Universitas Air langga, Indonesia, Number 2.KE.181.10.2018 থেকে।
2.3। তীব্র বিষাক্ততা পরীক্ষা।
EECS কে ওজনযুক্ত করা হয়েছিল এবং পছন্দসই ডোজ পেতে 0.5% সোডিয়াম কার্বোক্সিমিথাইল সেলুলোজ (Na CMC) দিয়ে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়েছিল। নির্যাস খাওয়ানোর আগে BALB/c ইঁদুরকে 24 ঘন্টা উপোস করা হয়েছিল। *ই প্রাণীদের তিনটি দলে ভাগ করা হয়েছিল, প্রতিটি গ্রুপে পাঁচটি ইঁদুর রয়েছে। * প্রতিটি গ্রুপের জন্য ডোজ ছিল 1,250; 2,500; এবং যথাক্রমে 5,000 mg/kg BW। প্রতিটি ইঁদুরের সাধারণ আচরণ প্রতিটি ডোজ পরে এক ঘন্টার জন্য অবিচ্ছিন্নভাবে প্রতি চার ঘন্টা পর পর পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল এবং তারপরে 24 ঘন্টা [40-42]।
2.4। সাব্যাকিউট টক্সিসিটি টেস্ট।
সাবঅ্যাকিউট টক্সিসিটি টেস্টে, ইঁদুরকে তিনটি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল এবং প্রতিটি গ্রুপকে একবারে, পাঁচবার এবং 28 দিনের জন্য 150 মিলিগ্রাম/কেজি BW দৈনিক মৌখিক ডোজের দশ বার EECS দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল; স্বাভাবিক নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীকে শুধুমাত্র খাদ্য ও পানীয়ের বিজ্ঞাপন লিবিটাম দেওয়া হয়েছিল [43]। *ই প্রাণীদের বিষাক্ততার কোনো চিহ্নের জন্য 28 দিনের জন্য পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। পর্যবেক্ষণের সময়কালের শেষে, সমস্ত প্রাণীকে ইথার অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে বলি দেওয়া হয়েছিল এবং স্থূল এবং হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পরীক্ষার জন্য সমস্ত প্রাণী থেকে লিভার এবং কিডনির মতো গুরুত্বপূর্ণ অঙ্গগুলি সরানো হয়েছিল।
2.5। ইঁদুরের পরজীবী।
প্লাজমোডিয়াম বার্গেই ANKA-এর ক্লোরোকুইন সংবেদনশীলতা ইনস্টিটিউট অফ বায়োমোলিকুলার ইজকম্যান, জাকার্তা, ইন্দোনেশিয়া থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং এই গবেষণায় ব্যবহৃত সিরিয়াল পাসিং দ্বারা রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল।
2.6। SGOT এবং SGPT এর প্লাজমা স্তরে EECS এর প্রভাব।
*পরীক্ষাটি পিটার্সের উপর ভিত্তি করে একটি দমনমূলক পরীক্ষা ছিল [44]। * SGOT এবং SGPT এর প্লাজমা স্তরে EECS-এর মূল্যায়নের আগে দমনমূলক পরীক্ষা করা হয়েছিল। *ই প্রাণীরা P. berghei ANKA দ্বারা সংক্রামিত হয়েছিল এবং A, B, C, D, এবং E এর পাঁচটি গ্রুপে বিভক্ত ছিল। এবং তিন দিনের জন্য প্রতিদিন চলতে থাকে (D1-D3)। গ্রুপ A নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসেবে মৌখিকভাবে 0.5% Na CMC পেয়েছে। গ্রুপ B এবং C চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিকে যথাক্রমে 150 এবং 200 mg/kg BW এর একক মৌখিক ডোজে EECS দেওয়া হয়েছিল। গ্রুপ ডি 100 মিলিগ্রাম/কেজি BW এর একক মৌখিক ডোজে ক্লোরোকুইন দেওয়া একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ ছিল। তদুপরি, গ্রুপ ই একটি স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণ হিসাবে পরজীবী দ্বারা সংক্রামিত ছিল না এবং শুধুমাত্র খাদ্য এবং পানীয় অ্যাড লিবিটাম দেওয়া হয়েছিল। চতুর্থ দিনে (D4), প্রতিটি মাউসের রক্তের দাগ প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং মাইক্রোস্কোপিকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল। আরও, SGOT এবং SGPT স্তরের পরিমাপের আগে প্লাজমা সংগ্রহ করা হয়েছিল।
2.7। লিভার এবং কিডনির হিস্টোপ্যাথোলজিতে EECS এর প্রভাব।
পর্যবেক্ষণের সময় শেষে, লিভার এবং কিডনি অপসারণের আগে সমস্ত প্রাণীকে ইথার অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে বলি দেওয়া হয়েছিল। অঙ্গগুলির ওজন করার পরে, টিস্যুগুলিকে 10% ফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল এবং হেমাটোক্সিলিন-ইওসিন (H&E) দাগের জন্য আরও প্রক্রিয়া করা হয়েছিল। *ই হিস্টোপ্যাথলজিকাল পর্যবেক্ষণ টিস্যুগুলির অবক্ষয়কারী এবং নেক্রোটিক কোষগুলিতে EECS এর বিষাক্ত প্রভাব খুঁজে বের করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল। *ই ক্ষতি গ্রেড করা হয়েছে গিবসন-করলে এট আল-এর উপর ভিত্তি করে। [৪৫]।
2.8। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ.
*ই ডেটা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি (SD) হিসাবে উপস্থাপিত হয়েছিল। বৈচিত্র্যের একমুখী বিশ্লেষণ (ANOVA) চিকিত্সাগুলির মধ্যে সাধারণত বিতরণ করা ডেটা তুলনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল, তারপরে একটি ভিন্ন তাত্পর্য প্রাপ্ত হলে একটি পোস্ট-হক একাধিক তুলনা পরীক্ষা দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। যখন ডেটা স্বাভাবিকভাবে বিতরণ করা হয়নি, তখন ক্রুস্কাল-ওয়ালিস এবং মান-হুইটনি ইউ-টেস্ট চিকিত্সার মধ্যে পার্থক্যগুলি মূল্যায়ন করতে ব্যবহার করা হয়েছিল।
সাপোর্টিভ সার্ভিস অফ ওয়েসিস্তানচে- চীনের বৃহত্তম সিস্টানচে রপ্তানিকারক:
ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/টেল:+86 15292862950
আরও স্পেসিফিকেশন বিশদ বিবরণের জন্য কেনাকাটা করুন:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
