cistanche মোট গ্লাইকোসাইড কি ঘ্রাণশক্তিতে প্রভাব ফেলে?

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ইঁদুরের ঘ্রাণজনিত কোষ এবং তাদের নিউরোট্রফিক উপাদানগুলির নিঃসরণে সিস্টানচে মোট গ্লাইকোসাইডের প্রভাব

লি চুয়াংফেং, গুও জিনিউ, ঝাং জু, লিউ ইউনান

স্পাইনাল কর্ড ইনজুরি (SCI) কেন্দ্রীয় একটি গুরুতর আঘাতস্নায়ুতন্ত্র, মোট আঘাতের {{0}}.2 শতাংশ —0.5 শতাংশের জন্য অ্যাকাউন্টিং। মেরুদণ্ডের ফ্র্যাকচারে, 16 শতাংশ —40 শতাংশ মেরুদণ্ডের আঘাতের কারণে জটিল, প্রায়ই গুরুতর অক্ষমতা সৃষ্টি করে, যার ফলে দৈনন্দিন জীবনে অসুবিধা হয় যা রোগীদের জীবনযাত্রার মানকে প্রভাবিত করে এবং পরিবার ও সমাজের জন্য একটি বড় বোঝা তৈরি করে।ঘ্রাণঘটিতensheathing কোষ (OECs) হল একটি বিশেষ ধরনের স্নায়ু আঠা। প্লাজমা কোষ মস্তিষ্কে স্থানান্তর করতে পারেঘ্রাণজস্নায়ু অ্যাক্সন এবং এনজিএফ, জিডিএনএফ, বিডিএনএফ, এনটি-3, নিউরোপেপটাইড-ওয়াই, এবং এস-100 এর মতো অনেক বৃদ্ধির কারণ নিঃসরণ করতে পারে। এর এই বৈশিষ্ট্যগুলির কারণেঘ্রাণজকোষ ঢেলে রাখা, OECs কে SCI মেরামত করার জন্য কোষ প্রতিস্থাপনের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল বীজ কোষ হিসাবে বিবেচনা করা হয়। বর্তমানে, পুনর্বাসন ওষুধের ক্ষেত্রে এসসিআই-এর চিকিত্সা মূলত ব্যাপক পুনর্বাসনের উপর ভিত্তি করে। একটি আরো কার্যকর পদ্ধতি খুঁজে বের করার জন্য, নিম্নলিখিত গবেষণার প্রভাব উপর বাহিত হয়েছেcistancheমোটগ্লাইকোসাইডOEC তে:

ঘ্রাণযুক্ত কোষের জন্য সিস্টানচে মোট গ্লাইকোসাইড

1 উপাদান এবং পদ্ধতি

1.1 পরীক্ষামূলক উপকরণ

উইস্টার ইঁদুর (ইনার মঙ্গোলিয়া ইউনিভার্সিটির প্রাণী কেন্দ্র দ্বারা সরবরাহ করা);cistancheমোটগ্লাইকোসাইড, DMEM/F12 মিডিয়াম, ভ্রূণ বাছুরের সিরাম (FCS), পলি-ডি-লাইসিন, অ্যারাবিনোসাইড (আরা-সি), ট্রিপসিন, ডি-হ্যাঙ্কস সলিউশন, খরগোশ অ্যান্টি-পি75এনজিএফআর (সান্তা ক্রুজ), এলিসা কিট (প্রোমেগা), সেল ইনকিউবেটর (থার্মো-এইচইপিএ ক্লাস 100), ইনভার্টেড ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপ (অলিম্পাস CKX41, জাপান), আল্ট্রা-ক্লিন ওয়ার্কবেঞ্চ (Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd.) কোম্পানি, SW-CJ-2FD), এনজাইম লেবেল বিশ্লেষক (ওয়েলস্ক্যান এমকেএইচ), ফ্লো সাইটোমিটার, ইত্যাদি।

1.2 গবেষণা পদ্ধতি

1.2.1 OECs সংস্কৃতি, শুদ্ধিকরণ এবং সনাক্তকরণ: উইস্টার ইঁদুরকে শিরশ্ছেদ করে বলি দেওয়া হয়েছিল এবং 5 মিনিটের জন্য ওয়াইনে ভিজিয়ে রাখা হয়েছিল। সামনের খুলিটি খোলার জন্য খোলা হয়েছিলঘ্রাণজবাল্ব দুইঘ্রাণজবাল্বগুলি সম্পূর্ণরূপে একটি বিচ্ছিন্ন মাইক্রোস্কোপের নীচে সরানো হয়েছিল। ডি-হ্যাঙ্কস দ্রবণে ধোয়া; কাটাঘ্রাণজমাইক্রোসার্জিক্যাল কাঁচি সহ বাল্ব, 2ml 0.25 শতাংশ প্যানক্রিয়াটিন যোগ করুন এবং 20 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করুন; একটি 2ml সেন্ট্রিফিউজ টিউবে 10 শতাংশ বাছুরের সিরাম ধারণকারী D MEM/F12 কালচার মিডিয়াম যোগ করুন মাঝখানে হজম বন্ধ করা হয়েছিল; বাস পাইপেট 800 rpm-এ অসম্পূর্ণভাবে হজম হওয়া টিস্যুকে উচ্চাকাঙ্খিত করে এবং 5 মিনিটের জন্য কেন্দ্রীভূত করে, সুপারনাট্যান্টকে ফেলে দেয়; অবশেষে শর্তযুক্ত মাধ্যম ব্যবহার করা হয়েছে (20 শতাংশ FCS প্লাস 20|i, mol/LForskolin প্লাস 20|ig/mlBPE প্লাস DMEM /F12) এটিকে lx 107ml একক-কোষ সাসপেনশনে পরিণত করুন, এটি একটি পলিলাইসিন-কোটেড সেল কালচার ফ্লাস্কে টিকা দিন এটি একটি 37 ডিগ্রী, 5 শতাংশ CO2 ইনকিউবেটর, এবং তারপর Arac যোগ করুন পরিশোধন 36 ঘন্টা বাহিত হয়. ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল কোষ সনাক্তকরণ এবং ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ পর্যবেক্ষণের জন্য খরগোশ-বিরোধী p75E এবং FITC-লেবেলযুক্ত ছাগল-বিরোধী খরগোশ IgG সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি ব্যবহার করুন।

1.2.2 এর প্রভাব নির্ধারণ করতে MTT এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করুনcistanche মোট গ্লাইকোসাইডচালুঘ্রাণজকোষ ensheathing: সংস্কৃত এবং শুদ্ধ টিকাঘ্রাণজ1X106-এ একটি 96-কূপ প্লেটে কোষ ঢেলে দিন এবং যোগ করুনcistanche মোট গ্লাইকোসাইড(ক্রিয়ার ঘনত্ব হল Ijig/ml, 10mg/ml, 100mg/ml), OD মান পরিমাপ করুন এবং 24 ঘন্টা কর্মের পর কোষ প্রবাহ সাইটোমেট্রি পরিমাপ করুন। কন্ট্রোল গ্রুপ সেট আপ করুন এবংCistanche মোট গ্লাইকোসাইডবিভিন্ন ঘনত্ব গ্রুপ: গ্রুপ A (নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ): সিরাম-ধারণকারী সংস্কৃতি মাধ্যম একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়; গ্রুপ বি (cistanche মোট গ্লাইকোসাইডকম ঘনত্ব গ্রুপ: lilig/ml); গ্রুপ সি (সিস্টানচে মোট গ্লাইকোসাইড মাঝারি ঘনত্ব গ্রুপ: L10jxg/MK); গ্রুপ ডি (cistanche মোট গ্লাইকোসাইডউচ্চ ঘনত্ব গ্রুপ: 100|xg/mlo): প্রতিটি গ্রুপে 15টি ইঁদুর।

1.2.3 ELISA দ্বারা সুপারন্যাট্যান্টে নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর বিষয়বস্তু নির্ধারণ: সংস্কৃত এবং শুদ্ধ করাঘ্রাণজ1x106-এ একটি 6-কূপ প্লেটে কোষ ঢেলে দেওয়া, যোগ করুনcistanche মোট গ্লাইকোসাইড(উপরের মতো একই ঘনত্ব) 24 ঘন্টা পরে এবং 24 ঘন্টা কাজ করে, এবং আলাদাভাবে সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করে, -80 লং এ সংরক্ষণ করা হয়। তরলে স্নায়ু বৃদ্ধির কারণগুলির বিষয়বস্তু ELISA পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল।

1.3 পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ

এই অধ্যয়নের ডেটা পরিমাপ ডেটা হিসাবে বিবেচিত হয়, এবং প্রাপ্ত ডেটা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি হিসাবে প্রকাশ করা হয় এবং SPSS 11৷{1}} পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার ব্যবহার করা হয়৷ প্রাপ্ত তথ্য বৈচিত্র্য বিশ্লেষণ দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়, এবং P<0.05 indicates="" that="" there="" is="" a="" significant="">

2 ফলাফল

2.1 এর প্রভাবcistancheমোট গ্লাইকোসাইডসঘ্রাণজকোষ ensheathing

2.1.1 মিথাইল অক্সাজোল টেট্রাজল পদ্ধতি (MT) নির্ধারণের ফলাফল: গ্রুপ A: 0.617±0.149; গ্রুপ B: 0.589±0.147; গ্রুপ সি: 0.761±0.138; গ্রুপ ডি: 0.732±0.234. মধ্যে তুলনাCistanche মোট গ্লাইকোসাইড group (B) and Control group (A), P>0.05, পার্থক্য উল্লেখযোগ্য ছিল না;Cistanche মোট গ্লাইকোসাইড10mg/ml, 100mg/ml ঘনত্ব গ্রুপ (C, D) কন্ট্রোল গ্রুপ (A) P এর তুলনায়<0.05, the="" difference="" is="">

2.1.2 ফ্লো সাইটোমেট্রি নির্ধারণের ফলাফল চিত্র 1 এ দেখানো হয়েছে। কন্ট্রোল গ্রুপের সাথে তুলনা করে,cistanche মোট গ্লাইকোসাইডগ্রুপটি কন্ট্রোল গ্রুপের চেয়ে বেশি ছিল এবং অ্যাপোপটোটিক কোষের শতাংশ নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের চেয়ে কম ছিল।

2.2 এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA) ফলাফল

পরীক্ষার ফলাফলে দেখা গেছে যে গ্লিয়াল-সেল-লাইন-ডিরাইভড নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর (GDNF): ডোজ করার আগে: 302.1±16.6 pg/ml, গ্রুপ A: 340.5±13.2pg/ml; গ্রুপ B: 333.2±23.6pg/ml; গ্রুপ সি: 355.2±17.6pg/ml; গ্রুপ ডি; 379.2±15.3pg/ml প্রাক-প্রশাসনের সাথে তুলনা করে, GDNF বিষয়বস্তু উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে; কন্ট্রোল গ্রুপ (A) এর সাথে তুলনা করে, এর GDNF বিষয়বস্তুCistanche মোট গ্লাইকোসাইড100mg/ml ঘনত্ব গ্রুপ (D) উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করা হয়েছিল।

3 আলোচনা

অ্যাক্সনগুলির পুনর্জন্মের অসুবিধা হল মেরুদন্ডের আঘাতের পরে পুনরুদ্ধার করা কঠিন হওয়ার একটি প্রধান কারণ। কেন্দ্রীয় নিউরন অ্যাক্সনগুলির পুনর্জন্মে ওইসিগুলির ভূমিকা রয়েছে যা অন্য ধরণের কোষগুলি প্রতিস্থাপন করা কঠিন। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, গবেষণাঘ্রাণজকোষ ensheathing একটি হট স্পট পরিণত হয়েছে.ঘ্রাণঘটিতএনশিথিং কোষ হল একটি বিশেষ ধরনের গ্লিয়াল কোষ যার মধ্যে শোয়ান কোষ এবং অ্যাস্ট্রোসাইটের বৈশিষ্ট্য রয়েছে। তারা থেকে উদ্ভূতঘ্রাণজবেসমেন্ট ঝিল্লি এবং ব্যাপকভাবে পৃষ্ঠের উপর বিতরণ করা হয়ঘ্রাণজশ্লেষ্মা,ঘ্রাণজস্নায়ু, এবংঘ্রাণজবাল্ব এটা বিভক্ত এবং জীবনের জন্য পুনর্জন্ম করার ক্ষমতা আছে এবং অনুষঙ্গী করতে পারেনঘ্রাণজস্নায়ু অ্যাক্সনগুলি মস্তিষ্কে স্থানান্তরিত হয়। এর axonsঘ্রাণজস্নায়ু প্রতি 30-60 দিনে পেরিফেরাল নার্ভাস সিস্টেম এবং কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের মধ্যে সংযোগস্থলের মধ্য দিয়ে যেতে পারে, পুনরায় বৃদ্ধি পেতে পারেঘ্রাণজখাপ এবং সিনাপটিক সংযোগ স্থাপন.ঘ্রাণঘটিতএনজিএফ, বিডিএনএফ, জিডিএনএফ, এনটি-3, নিউরোপেপটাইড-ওয়াই, এবং এস-100-এর মতো অনেকগুলি বৃদ্ধির কারণগুলি ঢেকে রাখা কোষগুলিকে নিঃসরণ করতে পারে। গবেষণায় দেখা গেছে যে নার্ভ গ্রোথ ফ্যাক্টর (এনজিএফ) মেরুদন্ডের লাল নিউক্লিয়াস নিউরনকে অ্যাট্রোফি থেকে প্রতিরোধ করতে পারে এবং কর্টিকোস্পাইনাল ট্র্যাক্ট স্প্রাউটকে শক্তিশালী করতে পারে এবং লাল নিউক্লিয়াস মেরুদন্ডের স্নায়ু পথের পুনর্জন্মকে উন্নীত করতে পারে; মস্তিষ্ক থেকে প্রাপ্ত নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর (BDNF) এবং নিউরোট্রফিন-3 (NT-3) উভয়ই অ্যাক্সোটোমাইজড ইনজুরি সহ প্রাপ্তবয়স্ক ইঁদুরের লাল নিউক্লিয়াস স্পাইনাল কর্ড সেল অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধ করতে পারে এবং মৃত নিউরনগুলিকে উদ্ধার করতে পারে এবং অ্যাক্সোনাল পুনরুত্থানকে উন্নীত করতে পারে। এছাড়াও,ঘ্রাণজএনশেথিং কোষগুলি তাদের কোষের ঝিল্লিতে অন্যান্য কারণগুলিও প্রকাশ করে, যেমন স্নায়ু কোষের আনুগত্য ফ্যাক্টর (N-CAM), যা কোষের আনুগত্য এবং অ্যাক্সন বৃদ্ধিতে জড়িত। এর এই বৈশিষ্ট্যগুলির কারণেঘ্রাণজকোষ ঢেলে রাখা, OECs কে SCI মেরামত করার জন্য কোষ প্রতিস্থাপনের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল বীজ কোষ হিসাবে বিবেচনা করা হয়।

এর রাসায়নিক উপাদানসিস্তানচেপ্রধানত phenylethanoid glycosides, iridoids, উদ্বায়ী উপাদান, lignans, polysaccharides, এবং alkaloids অন্তর্ভুক্ত। গবেষণায় এমনটাই পাওয়া গেছেসিস্তানচেএবং এর রাসায়নিক উপাদানগুলির নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব রয়েছে। ডেং এট আল। টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর (TNF) দ্বারা প্ররোচিত SH-SY5Y নিউরনের অ্যাপোপটোসিসে টিউবুলোসা বি-এর প্রভাব অধ্যয়ন করেছে। ফলাফলগুলি দেখায় যে 100ug/ SH-SY5Y নিউরনগুলি 36 ঘন্টার TNF চিকিত্সার পর সাধারণ অ্যাপোপটোসিস বৈশিষ্ট্যগুলি দেখায়, যখন টিউবুলিন বি 2 ঘন্টার জন্য চিকিত্সা TNF দ্বারা প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে। এছাড়াও, গবেষণায় আরও দেখা গেছে যে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি ক্যাসপেস-3 এবং ক্যাসপেস-8, এবং মিথাইল ফিনাইল টেট্রাহাইড্রোপাইরিডিন (এমপিটিপি) দ্বারা সৃষ্ট C57 মাউস ব্ল্যাক প্রতিরোধ করে ইঁদুর সেরিবেলার গ্রানুল কোষের অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দিতে পারে। মানের ডোপামিনার্জিক নিউরনের ক্ষতির একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব রয়েছে। শুধু তাই নয়, কিন্তুসিস্তানচেএছাড়াও স্নায়ুতন্ত্রের ইস্কিমিয়া-রিপারফিউশনের মতো বিভিন্ন ক্ষতি উপশম করতে পারে। মাউস ব্রেইন ইস্কেমিয়া ইনজুরি এক্সপেরিমেন্ট দেখায় যে সেরিব্রাল ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন গ্রুপে ইসকেমিয়ার পরে 24 ঘন্টা এবং 48 ঘন্টা ইনফার্কের পরিসর গড়ে 72.98 শতাংশ এবং 60.45 শতাংশ। বিপরীতে,cistancheমোট গ্লাইকোসাইড বড়, মাঝারি এবং কম ডোজ গ্রুপ (250.0mg·kg/d; 125.0mg·kg/d; 62.5mg·kg/d) ইঁদুরের মস্তিষ্ক তৈরি করতে পারে সেরিব্রাল ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন 24 ঘন্টা পরে ইনফার্কের আকার 25.94 শতাংশ, 25.81 শতাংশ এবং 31.13 শতাংশে হ্রাস পেয়েছে এবং 48 ঘন্টা পরে সেরিব্রাল ইনফার্কশনের আকার 22.14 শতাংশ, 20.06 শতাংশ এবং 22.27 শতাংশে হ্রাস পেয়েছে৷ উভয়ের মধ্যে একটি উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল, নিউরোনাল অ্যাপোপটোসিসে একটি উল্লেখযোগ্য বাধা প্রভাব দেখায়।

এই গবেষণায়, বিভিন্ন ঘনত্বcistanche মোট গ্লাইকোসাইডOECs তে প্রয়োগ করা হয়েছিল। MTT পদ্ধতি এবং প্রবাহ সাইটোমেট্রি পরিমাপ নিশ্চিত করেছে যে 10mg/ml100mg/mlcistanche মোট গ্লাইকোসাইডএর বিস্তার প্রচার করতে পারেঘ্রাণজকোষ ensheathing. প্রবাহ সাইটোমেট্রির ফলাফল দেখায় যেcistanche মোট গ্লাইকোসাইডএর বিস্তার প্রচার করতে পারেঘ্রাণজকোষ ensheathing এটা প্রধানত G1 চক্রের বিস্তার প্রচার করেঘ্রাণজশুক্রাণু কোষ এবং উল্লেখযোগ্যভাবে apoptotic কোষ হ্রাস. অতএব,Cistanche মোট গ্লাইকোসাইডএর বিস্তার প্রচার করতে পারে নাঘ্রাণজকোষকে ঢেকে রাখে কিন্তু কোষের কার্যকলাপ বৃদ্ধি করে এবং তাদের অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয়। এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস এটি প্রমাণ করেCistanche মোট গ্লাইকোসাইডউল্লেখযোগ্যভাবে দ্বারা GDNF এর নিঃসরণ প্রচার করতে পারেঘ্রাণজকোষ ensheathing. উপরের ফলাফলগুলি ক্লিনিকাল প্রয়োগের জন্য একটি পরীক্ষামূলক ভিত্তি প্রদান করেCistanche মোট গ্লাইকোসাইড.

তথ্যসূত্র

[১] কিউ ওয়েইহং, ঝু হংজিয়াং, ঝাং বাইক্সিয়াং, এট আল। পুনর্বাসনের সময় মেরুদণ্ডের আঘাতের রোগীদের জীবনযাত্রার মানকে প্রভাবিত করার কারণগুলি [জে]। চাইনিজ জার্নাল অফ রিহ্যাবিলিটেশন মেডিসিন, 2009, 4(24): 313।

[২] রিখটার MW, Fletcher PA, Liu J, et al. লামিনা প্রপ্রিয়া এবংঘ্রাণজবুল এনশিথিং কোষগুলি ডিফারেনশিয়াল ইন্টিগ্রেশন এবং মাইগ্রেশন প্রদর্শন করে এবং ক্ষতযুক্ত মেরুদন্ডে ডিফারেনশিয়াল অ্যাক্সন স্প্রুটিংকে উৎসাহিত করে[জে]। J Neurosci,2005.25(46):10700 -10711।

[৩] ন্যায্য R, Bamet SC. ঘ্রাণজনিত কোষ: কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের মেরামতে তাদের ভূমিকা [J.Int J Biochem Cell Biol. 2005,37(4):693-699।

[৪] চেন এক্স, ফ্যাং এইচ শোব জেই। শুদ্ধের বহুমাত্রিকতা। প্রতিস্থাপিত গ্লুকোজ বেসাল কোষঘ্রাণজএপিথেলিয়াম [জে]। J Comp Neurol,2004, 46914):457—474।

[৫] লা পি, জোন্স এলএল। Tuszynski MH. বিডিএনএফ-এক্সপ্রেসিং ম্যারোস্ট্রোমাল সেল; মেরুদণ্ডের আঘাত [J] সাইটগুলিতে ব্যাপক অক্ষীয় বৃদ্ধি সমর্থন করে। এক্সপ নিউরোল, 2005,191(2):344—360।

[৬] ডেং এম, ঝাও জেওয়াই, জু এক্সডি, এট আল। নিউরোনাল কোষে টিএনএফ-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসে টিউবুলোসা বি-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব [জে]। Acta Pharmacol Sin,2004,25(102 1276

[7] TianXue-Fei, PuXiao-Ping.ফেনাইলেথানয়েডগ্লাইকোসাইডথেকেসিস্তানচসালসা নিউরনে 1-মিথাইল-4-ফেনাইলপাইরিডিনিয়াম আয়ন দ্বারা প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয়[J]। J Ethnopharmacol,2005,97 (1):59.

[৮] গেং এক্স, গান এল পু এক্স, এট আল। নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব