আলফা-লাইপোইক অ্যাসিডের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব 5-ইঁদুরে ফ্লুরোরাসিল-প্ররোচিত গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিস পার্ট 1

বিমূর্ত: আলফা-লাইপোইক অ্যাসিড (ALA) ব্যাপকভাবে মাল্টিভিটামিন সূত্র এবং অ্যান্টি-এজিং পণ্যগুলিতে ব্যবহৃত হয়। এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল উইস্টার অ্যালবিনো ইঁদুরে 5-ফ্লুরোরাসিল (5-FU)-প্ররোচিত গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিস-এর উপর ALA-এর সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক সুবিধাগুলি তদন্ত করা। পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বৃহৎ অন্ত্র থেকে টিস্যু বের করে দেওয়া হয়েছিল, এবং জৈব রাসায়নিক সূচক যেমন TNF-, IL-1, MDA, GPx, SOD, MMP-1, {{ রক্তের সিরা প্রাপ্ত করা হয়েছিল 8}}, -8, এবং TIMP-1। একটি হিস্টোপ্যাথোলজিকাল গবেষণাও সঞ্চালিত হয়েছিল। ফলাফলগুলি টিস্যু এবং সেরা উভয় ক্ষেত্রেই মিউকোসাইটিস-উন্নত TNF-, IL-1, MDA, MMP-1, -2, -8, এবং TIMP-1 স্তরগুলি প্রকাশ করেছে এবং এই মানগুলি ALA চিকিত্সার পরে নাটকীয়ভাবে হ্রাস পেয়েছে। মিউকোসাইটিস গ্রুপগুলিতে হ্রাসকৃত এসওডি এবং জিপিএক্স ক্রিয়াকলাপগুলি এএলএ-চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিতে বিপরীত হয়েছিল। হিস্টোপ্যাথলজিকাল মূল্যায়ন অনুসারে, পাকস্থলী এবং ছোট অন্ত্রের মিউকোসাইটিস দ্বারা সৃষ্ট ক্ষতি ALA-চিকিত্সা করা গ্রুপে ফিরে আসে। ফলস্বরূপ, 5-FU থেরাপিতে ALA সম্পূরক প্রয়োগ গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিসে আক্রান্ত ক্যান্সার রোগীদের জন্য একটি প্রতিরক্ষামূলক হস্তক্ষেপ হিসাবে কাজ করতে পারে। ফলাফলের আলোকে, ALA, প্লিওট্রপিক বৈশিষ্ট্য সহ একটি খাদ্য থেকে প্রাপ্ত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, 5-FU-প্ররোচিত গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিসের জন্য একটি কার্যকর চিকিত্সা হতে পারে এবং ক্যান্সার রোগীদের ক্ষেত্রে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, প্রদাহ এবং টিস্যুর ক্ষতি প্রতিরোধ করতে পারে {{ 24} এফইউ থেরাপি।

সিস্টানচে গ্লাইকোসাইড হৃৎপিণ্ড ও যকৃতের টিস্যুতে SOD-এর কার্যকলাপকেও বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং প্রতিটি টিস্যুতে lipofuscin এবং MDA-এর উপাদানকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে, কার্যকরভাবে বিভিন্ন প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন র‌্যাডিকেল (OH-, H₂O₂, ইত্যাদি) এবং ডিএনএ-এর ক্ষতি থেকে রক্ষা করে। OH-র্যাডিক্যাল দ্বারা। Cistanche phenylethanoid glycosides মুক্ত র্যাডিকেলগুলির একটি শক্তিশালী স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা, ভিটামিন C-এর তুলনায় উচ্চ হ্রাস করার ক্ষমতা, শুক্রাণু সাসপেনশনে SOD-এর কার্যকলাপকে উন্নত করে, MDA-এর বিষয়বস্তু হ্রাস করে এবং শুক্রাণু ঝিল্লির কার্যকারিতার উপর একটি নির্দিষ্ট প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব ফেলে। সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডগুলি ডি-গ্যালাকটোজ দ্বারা সৃষ্ট পরীক্ষামূলকভাবে সেনসেন্ট ইঁদুরের এরিথ্রোসাইট এবং ফুসফুসের টিস্যুতে এসওডি এবং জিএসএইচ-পিএক্সের কার্যকলাপকে বাড়িয়ে তুলতে পারে, সেইসাথে ফুসফুস এবং প্লাজমাতে এমডিএ এবং কোলাজেনের উপাদান হ্রাস করতে পারে এবং ইলাস্টিনের উপাদান বাড়াতে পারে। ডিপিপিএইচের উপর একটি ভাল স্ক্যাভেঞ্জিং প্রভাব, সেন্সেন্ট ইঁদুরের হাইপোক্সিয়ার সময়কে দীর্ঘায়িত করে, সিরামে এসওডির কার্যকলাপকে উন্নত করে এবং পরীক্ষামূলকভাবে সেন্সেন্ট ইঁদুরের ফুসফুসের শারীরবৃত্তীয় অবক্ষয়কে বিলম্বিত করে সেলুলার মরফোলজিক্যাল অবক্ষয়ের সাথে, পরীক্ষাগুলি দেখিয়েছে যে সিস্টানচে ভাল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা রয়েছে। এবং ত্বকের বার্ধক্যজনিত রোগ প্রতিরোধ ও চিকিত্সার জন্য একটি ওষুধ হওয়ার সম্ভাবনা রয়েছে। একই সময়ে, সিস্তানচে ইচিনাকোসাইডের DPPH ফ্রি র‌্যাডিকেলগুলি স্ক্যাভেঞ্জ করার একটি উল্লেখযোগ্য ক্ষমতা রয়েছে এবং এটি প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতিকে স্ক্যাভেঞ্জ করতে পারে, মুক্ত র‌্যাডিক্যাল-প্ররোচিত কোলাজেন অবক্ষয় রোধ করতে পারে এবং থাইমিন ফ্রি র‌্যাডিক্যাল অ্যানিয়নের ক্ষতির উপর একটি ভাল মেরামত প্রভাব ফেলে।

Cistanche Tubulosa-এ ক্লিক করুন

【আরো তথ্যের জন্য:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1। পরিচিতি

আলফা-লাইপোইক অ্যাসিড (ALA) শাকসবজি (পালংশাক, ব্রকলি, টমেটো) এবং মাংস (বিশেষ করে ভিসেরা) সহ বিভিন্ন পুষ্টিকর সম্পূরক [1,2] সহ বিস্তৃত খাবারে উপস্থিত রয়েছে। এএলএ-এর অসংখ্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রভাব রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে অন্তঃসত্ত্বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রক্রিয়া সক্রিয়করণ এবং লোহা, দস্তা এবং তামার মতো ধাতব আয়নগুলির চিলেশন [3,4]। একটি অর্গানোসালফার অণু হিসাবে, ALA প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) স্ক্যাভেঞ্জ করতে পারে এবং টিস্যু অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম যেমন গ্লুটাথিয়ন পারক্সিডেস (GPx) এবং সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (SOD) [5-7] এর কার্যকলাপকে বাড়িয়ে তুলতে পারে। এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্যের কারণে, ALA ফুসফুসের ক্যান্সার [8], স্তন ক্যান্সার [9], এবং কোলন ক্যান্সার [10] এ ALA-নির্ভর কোষের মৃত্যু কমাতে পাওয়া গেছে। তদ্ব্যতীত, পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে ALA-তে প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্য রয়েছে [11-16]। ALA টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-আলফা (TNF-) এবং ইন্টারলিউকিন-1 (IL-1 ) [১৭,১৮] এর মতো প্রদাহজনক সাইটোকাইনগুলির অভিব্যক্তিকে সংশোধন করে প্রদাহ কমাতে কাজ করে। ALA এর ফার্মাকোলজিকাল সুবিধাগুলি কার্ডিওভাসকুলার, নিউরোপ্রোটেক্টিভ, জ্ঞানীয় এবং অ্যান্টি-এজিং মডেল সহ বিভিন্ন ধরণের ঔষধ-সম্পর্কিত ক্ষেত্রে প্রমাণিত হয়েছে [19]।

ক্যান্সার প্রতিটি দেশে মৃত্যুর প্রধান কারণ এবং দীর্ঘায়ু হওয়ার একটি বড় বাধা [20]। কেমোথেরাপিউটিক ওষুধের পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া ক্যান্সারের বিরুদ্ধে লড়াইয়ে সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ দুর্বল কারণগুলির মধ্যে একটি, এবং মিউকোসাইটিস ক্যান্সার রোগীদের মধ্যে সবচেয়ে প্রচলিত রোগগুলির মধ্যে একটি [২১]। মিউকোসাইটিস একটি প্যাথলজিকাল প্রদাহজনক অবস্থা যা গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল সিস্টেমের মিউকোসার আলসার এবং প্রদাহ দ্বারা চিহ্নিত করা হয় [22]। মিউকোসাইটিস ব্যথার কারণে ওপিওড ব্যথানাশক ওষুধের ব্যবহার বাড়ায় এবং পুষ্টিজনিত সমস্যার কারণে মোট প্যারেন্টেরাল পুষ্টিতে রূপান্তর দ্রুত করে [২৩]। মিউকোসাইটিস এবং মিউকোসাইটিস-সম্পর্কিত অসুবিধা রোগীর জীবনযাত্রার মান হ্রাস করে, যখন জীবন-হুমকির অবস্থার বিকাশ এবং থেরাপির প্রতি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দুর্বল ক্ষত চিকিত্সার কারণে উদ্বেগের কারণ [24]।

গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ম্যালিগন্যান্সিতে সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত কেমোথেরাপিউটিক ওষুধ হল পাইরিমিডিন অ্যানালগ 5-ফ্লুরোরাসিল (5-FU)। 5-এফইউ থাইমিডাইলেট সিন্থেস (টিএস) প্রতিরোধ করে এবং এর বিপাকীয় পদার্থকে আরএনএ এবং ডিএনএতে সংহত করে তার ক্যান্সার প্রতিরোধক প্রভাব প্রয়োগ করে [25]। যাইহোক, এই এজেন্ট গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিস প্ররোচিত করে, একটি গুরুতর দুর্বল পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া [26]। বিশেষ করে, অক্সিডেন্ট-অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ভারসাম্যের অবনতি, প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের মাত্রা বৃদ্ধি এবং প্রোটিওলাইটিক এনজাইম কার্যকলাপ এই প্রতিকূল প্রভাবগুলির বিকাশে একটি প্রধান ভূমিকা পালন করে। যদিও অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি ওষুধগুলি এই সমস্যাটির সমাধান করার প্রয়াসে ব্যবহার করা হয়েছে, একটি বিশেষভাবে শক্তিশালী থেরাপিউটিক পদ্ধতি এখনও সনাক্ত করা যায়নি [27,28]।

আজ অবধি, বিভিন্ন গবেষণায় বিভিন্ন ক্যান্সারে একসাথে 5-FU এবং ALA ব্যবহার করা হয়েছে; এর মধ্যে রয়েছে সার্ভিকাল এবং কোলোরেক্টাল টিউমার [২৯,৩০]। উপরন্তু, গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল মিউকোসাইটিস থেকে ক্যান্সার রোগীদের 5-FU দ্বারা প্ররোচিত প্রতিকূল প্রভাব থেকে প্রতিরোধ করার জন্য সহায়ক ওষুধগুলি চিকিত্সা পদ্ধতিতে অন্তর্ভুক্ত করা হতে পারে সুবিধাজনক। এইভাবে, এই অধ্যয়নের উদ্দেশ্য ছিল 5-FU দ্বারা তৈরি একটি মিউকোসাইটিস মডেলের সাহায্যে ইঁদুরগুলিতে ALA ব্যবহারের জৈবিক প্রভাবগুলি নির্ধারণ করা, চিকিত্সা প্রোটোকলগুলিতে প্রার্থী এজেন্ট হিসাবে এর সম্ভাব্য ব্যবহার পরীক্ষা করা ছাড়াও।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। প্রাণী

প্রাণীগুলো নিয়ার ইস্ট ইউনিভার্সিটির অ্যানিমেল এক্সপেরিমেন্ট ইউনিট থেকে নেওয়া হয়েছিল। ইঁদুরগুলি (উইস্টার অ্যালবিনো, উভয় লিঙ্গ) একটি আর্দ্রতা-নিয়ন্ত্রিত সুবিধা (50 ± 5 শতাংশ) 22 ± 2 ◦C তাপমাত্রায় শুরু থেকে 12:12 ঘন্টা অন্ধকার/আলো চক্রের অধীনে বজায় রাখা হয়েছিল। তাদের স্ট্যান্ডার্ড ইঁদুরের চাউ এবং পানীয় জলের কোন সীমাবদ্ধতা ছাড়াই খাওয়ানো ছিল অবাধ্য। ইঁদুরগুলিকে একটি প্লেক্সিগ্লাস খাঁচায় রাখা হয়েছিল (60 × 40 × 40 সেমি মাত্রা সহ প্রতি খাঁচায় 4 ইঁদুর)। অধ্যয়ন প্রোটোকলটি নিয়ার ইস্ট ইউনিভার্সিটি স্থানীয় প্রাণী পরীক্ষা নীতিশাস্ত্র কমিটি (অনুমোদন নং 2019/01 17 জানুয়ারী 2019 এবং 2020/11 27 নভেম্বর 2020) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল এবং 1964 সালের হেলসিঙ্কির ঘোষণাপত্রে উল্লিখিত নৈতিক নির্দেশিকা এবং তার পরে অনুসরণ করা হয়েছিল

200-250 গ্রাম ওজনের উভয় লিঙ্গের বত্রিশটি উইস্টার অ্যালবিনো ইঁদুরকে আটটি ইঁদুরের চারটি গ্রুপে বরাদ্দ করা হয়েছিল (n=8): নিয়ন্ত্রণ, ALA, মিউকোসাইটিস এবং মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপ। কন্ট্রোল গ্রুপ এক সপ্তাহের জন্য দিনে একবার শুধুমাত্র ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল (আইপি) স্যালাইন (এসএফ) পেয়েছে। ALA গ্রুপ 1 দিন [31,32] থেকে এক সপ্তাহের জন্য দিনে একবার 100 mg/kg ip ডোজে শুধুমাত্র ALA পেয়েছে। মিউকোসাইটিস গ্রুপটিকে SF (ip) দিয়ে 1 দিনে এবং 400 mg/kg 5-FU ip দিন 2 থেকে পরীক্ষা শেষ পর্যন্ত চিকিত্সা করা হয়েছিল [33]। মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপ 100 mg/kg ip ALA পেয়েছে এবং 400 mg/kg ip ip 5-FU দিনে ২য়। তারপর, পরীক্ষা শেষ না হওয়া পর্যন্ত 100 mg/kg/day ip ALA প্রশাসন অব্যাহত ছিল . প্রাণীদের এক সপ্তাহের জন্য পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল এবং সেই সময়ে কোনও মৃত্যুর অভিজ্ঞতা হয়নি। কেটামাইন/জাইলাজিন ওভারডোজের সংমিশ্রণ প্রশাসনের দ্বারা গবেষণার সময়কালের শেষে সমস্ত গোষ্ঠীর প্রাণীদের euthanized করা হয়েছিল। নিয়ার ইস্ট ইউনিভার্সিটির পশু হাসপাতালের ডায়াগনস্টিক ল্যাবরেটরি এবং হিস্টোপ্যাথলজি ল্যাবরেটরিতে ল্যাবরেটরি অ্যাসেস করা হয়েছিল।

2.2। রক্ত এবং টিস্যুর নমুনা সংগ্রহ

রক্তের নমুনা প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং সিরাম বিভাজক টিউবে পরীক্ষাগারে জমা দেওয়া হয়েছিল। সিরামের নমুনাগুলি 2000 × g এ 10 মিনিটের জন্য আলাদা করা হয়েছিল এবং পরবর্তী বিশ্লেষণ না হওয়া পর্যন্ত −80 ◦C তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল। অতিরিক্ত রক্ত ​​দূর করার জন্য পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বড় অন্ত্রের টিস্যু সংগ্রহ করে ফসফেট বাফার দ্রবণ (pH=7.4) দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়। তারপর, ল্যাবরেটরিতে ডেলিভারি করার পরে, তারা একটি সমজাতকরণ পদ্ধতির মধ্য দিয়ে যায়। RIPA বাফার (আইটেম নং 10010263, ব্যাচ নং 0490889-1, কেম্যান কেমিক্যালস, অ্যান আর্বার, MI, USA) এবং Dounce টিস্যু গ্রাইন্ডার সেট (D8938, Lot. 3110, Sigma) ব্যবহার করে প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুযায়ী টিস্যু সমজাতকরণ করা হয়েছিল -অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) বরফের উপর। সমজাতকরণের পরে, নমুনাগুলিকে 10 মিনিটের জন্য প্লাস 4 ◦C তাপমাত্রায় 1600 × g তে কেন্দ্রীভূত করা হয়েছিল। ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন নির্ধারণের কৌশলটি টিস্যু নমুনায় প্রোটিনের মাত্রা পরিমাপ করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল এবং পরবর্তী তদন্তের জন্য সুপারনাট্যান্টগুলিকে −80 ◦C তাপমাত্রায় হিমায়িত করা হয়েছিল।

2.3। জৈব রাসায়নিক সূচকের পরিমাপ

অ্যালানাইন ট্রান্সমিনেজ (ALT), অ্যাসপার্টেট ট্রান্সমিনেজ (AST), ক্ষারীয় ফসফেটেস (ALP), ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেস (LDH), লাইপেস (LIP), অ্যামাইলেজ (AMY), ক্রিয়েটিনিন, রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN), মোট প্রোটিন (TP) এর কার্যকলাপ , এবং অ্যালবামিনের মাত্রা একটি স্বয়ংক্রিয় BS-240 VET ক্লিনিকাল কেমিস্ট্রি অ্যানালাইজার (Mindray, Shenzhen, China) ব্যবহার করে সিরাম নমুনাগুলিতে জৈব রাসায়নিক সূচক হিসাবে পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.4। সেরা এবং টিস্যুতে সাইটোকাইনের পরিমাপ

সেরা এবং টিস্যু নমুনায় TNF- এবং IL-1 ঘনত্ব বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ইঁদুর-নির্দিষ্ট এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA) অ্যাস কিটস (ELR-TNF- এবং ELR-IL1 -, RayBiotech Life ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল Inc., Norcross, GA, USA) প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসরণ করে।

2.5। সেরা এবং টিস্যুতে ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেসেস (এমএমপি) এবং মেটালোপ্রোটিনেস-1 (টিআইএমপি-1) এর টিস্যু ইনহিবিটরগুলির পরিমাপ

এমএমপি এবং টিআইএমপি-1, যা ক্যান্সার এবং প্রদাহের মতো বিভিন্ন জৈবিক প্রক্রিয়ার সাথে জড়িত, প্রস্তুতকারকের নির্দেশাবলী এবং বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ইঁদুর-নির্দিষ্ট ELISA অ্যাসেস (MMP{ {2}} E-EL-R0617; Elabscience, Wuhan, China; MMP-2 ELR-MMP2; MMP-8 ELR-MMP8; TIMP-1 ELR-TIMP-1 RayBiotech Life Inc., Norcross, GA, USA)। MMPs এবং TIMP-1 এর সিরাম ঘনত্বকে pg/mL হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল, যখন টিস্যু স্তরগুলিকে pg/mg প্রোটিন হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল৷

2.6। টিস্যুতে ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ), জিপিএক্স এবং এসওডি পরিমাপ

লিপিড পারক্সিডেশন অবস্থা নির্ধারণের জন্য টিস্যুতে এমডিএ স্তরগুলি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ অ্যাস কিট ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল (টিবিএআরএস অ্যাসে কিট, আইটেম নম্বর 10009055, কেম্যান কেমিক্যালস, অ্যান আর্বার, এমআই, ইউএসএ)। পরিমাপের নীতিটি একটি অম্লীয় মাধ্যমে 60 মিনিটের জন্য ফুটন্ত জলে থায়োবারবিটুরিক অ্যাসিড (টিবিএ) এর সাথে প্রতিক্রিয়া এবং 532 এনএম-এ প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের শোষণের পরিমাপের উপর ভিত্তি করে (ওহকাওয়া এট আল।, 1979)। একটি VersaMax Tunable মাইক্রোপ্লেট রিডার শোষণ পরিমাপ করতে ব্যবহার করা হয়েছিল (আণবিক ডিভাইস, সান জোসে, CA, USA)। টিস্যুতে MDA ঘনত্ব nmol MDA/mg প্রোটিন হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল।

টিস্যুতে, GPx এবং SOD কার্যকলাপ রেডি-টু-ব্যবহারের অ্যাস কিট ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। (RANSEL RS505, RANSOD SD125, Randox Laboratories Ltd., Crumlin, UK) একটি স্বয়ংক্রিয় BS-240 VET ক্লিনিক্যাল কেমিস্ট্রি অ্যানালাইজার (Mindray, Shenzhen, China) ব্যবহার করে। টিস্যু নমুনাগুলিতে (পেট, ছোট অন্ত্র এবং বৃহৎ অন্ত্র) জিপিএক্স এবং এসওডির পরিমাণ U/mg প্রোটিন হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল।

2.7। হিস্টোপ্যাথলজিকাল মূল্যায়ন

পরীক্ষামূলক সময়ের পরপরই প্রাপ্ত পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বৃহৎ অন্ত্রের টিস্যুগুলি 10 শতাংশ (v/v) নিরপেক্ষ ফর্মালিন 24 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় স্থির করা হয়েছিল। স্থিরকরণের পরে, টিস্যুগুলি একটি টিস্যু ট্র্যাকিং ডিভাইসে স্থাপন করা হয়েছিল, Leica TP1020 (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany)। টিস্যু ট্র্যাকিং ডিভাইস থেকে নেওয়া টিস্যুগুলি প্যারাফিনে এমবেড করা হয়েছিল। মাইক্রোটোম Leica RM2255 (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germany) এর সাহায্যে টিস্যু থেকে 5-µm পুরুত্বের অংশগুলি কাটা হয়েছিল এবং রুটিন হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (HE) স্টেনিং করা হয়েছিল। লেইকা মাইক্রোসিস্টেম ফ্রেমওয়ার্ক ইন্টিগ্রেটেড ডিজিটাল ইমেজিং অ্যানালাইসিস সিস্টেম (লেইকা অ্যাপ্লিকেশান স্যুট সংস্করণ 3.0 সিরিজ 38132019, লাইকা আইসিসি50 এইচডি, লাইকা বায়োসিস্টেম নুসলোচ জিএমবিএইচ, নুস্লোচ জিএমবিএইচ) সহ লেইকা DM500 লাইট মাইক্রোস্কোপ দিয়ে বিভাগগুলি হিস্টোমরফোলজিকাল পরীক্ষা করা হয়েছিল।

2.8। পরিসংখ্যানিক বিশ্লেষণ

গ্রাফপ্যাড প্রিজম সফ্টওয়্যারটি পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল (সংস্করণ 7৷{2}}4, গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার, সান দিয়েগো, CA, USA)৷ সমস্ত ডেটা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি (X ± SD) হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। ডাটা গ্রুপের তুলনা করার জন্য ভ্যারিয়েন্স (ANOVA) পরীক্ষার একটি বিশ্লেষণ ব্যবহার করা হয়েছিল, যার পরে Tukey এর একাধিক তুলনা পরীক্ষা করা হয়েছিল। উপরন্তু, ক্রুস্কাল-ওয়ালিস পরীক্ষাটি গোষ্ঠীর মধ্যে হিস্টোমরফোলজিকাল স্কোর তুলনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। p <0.05 এর একটি পার্থক্য পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।

3। ফলাফল

3.1। ALA ইতিবাচকভাবে জৈব রাসায়নিক সূচকগুলিকে প্রভাবিত করে

সারণী 1 সিরাম এনজাইম কার্যকলাপ এবং বিপাক ঘনত্ব প্রদর্শন করে। কন্ট্রোল গ্রুপের সাথে তুলনা করলে, মিউকোসাইটিস গ্রুপে অ্যালবুমিন, ALT, AST, ALP, LDH, অ্যামাইলেজ, লাইপেজ, BUN, ক্রিয়েটিনিন এবং টিপি (p < 0।{3}}৫ এর উচ্চ মাত্রা ছিল। –0।{7}}00১)। যাইহোক, ALA প্লাস মিউকোসাইটিস গ্রুপ এবং মিউকোসাইটিস গ্রুপ (p <0.05–0.001) এর মধ্যে অ্যালবুমিন, AST, ALT, ALP, LDH, BUN, creatinine, amylase, BUN, এবং ক্রিয়েটিনিনের স্তরে একটি উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল। ALP, ALT, AST, LDH, এবং অ্যামাইলেজের মাত্রাগুলিও মিউকোসাইটিস এবং ALA গ্রুপের মধ্যে যথেষ্ট ভিন্ন ছিল (p <0.05–0.0001)। তদনুসারে, লিভারের এনজাইম, অগ্ন্যাশয় এনজাইম এবং বিপাকীয় পদার্থের মাত্রা নাটকীয়ভাবে মিউকোসাইটিস গ্রুপে কমে গেছে যখন চিকিৎসায় ALA যুক্ত করা হয়েছিল।

3.2। ALA প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির উত্পাদন হ্রাস করে

সিরাম, পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বৃহৎ অন্ত্রের নমুনায় প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন TNF- এবং IL-1-এর মাত্রা চিত্র 1-এ দেখা যায়। সেরা এবং সমস্ত ক্ষেত্রে TNF- এবং IL-1 মাত্রা কন্ট্রোল, ALA, এবং মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপের তুলনায় মিউকোসাইটিস গ্রুপের প্রাণীদের টিস্যু উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (p < 0।{8}}5–0।{14}}{ {17}}{{20}}1)। যাইহোক, মিউকোসাইটিস গ্রুপের তুলনায় মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ গ্রুপে সেরা এবং সমস্ত টিস্যুতে TNF- এবং IL-1 মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (p < 0.05–0.0001)। কন্ট্রোল এবং মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপের মধ্যে, ছোট এবং বড় অন্ত্রে TNF--এর মাত্রার মধ্যে যথেষ্ট পার্থক্য ছিল। (p <0.01)। এএলএ এবং মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ গ্রুপের মধ্যে বড় এবং ছোট অন্ত্রে TNF- স্তরে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল। (যথাক্রমে p < 0.01, p < 0.001)। অধিকন্তু, পেটে IL-1 মাত্রার পরিপ্রেক্ষিতে কন্ট্রোল এবং মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপের মধ্যে পরিসংখ্যানগতভাবে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল (p <0.05)। অতএব, ALA মিউকোসাইটিসে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করতে দেখা গেছে।

3.3। ALA চিকিত্সা লিপিড পারক্সিডেশন হ্রাস করে এবং টিস্যুতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির ক্রিয়াকলাপ বাড়ায়

টিস্যু স্তরে পেরোক্সিডেশন এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট স্থিতি মূল্যায়নের জন্য এমডিএ স্তর, জিপিএক্স এবং এসওডি ক্রিয়াকলাপগুলি পরিমাপ করা হয়েছিল (চিত্র 2)। কন্ট্রোল, এএলএ এবং মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ গ্রুপের তুলনায় মিউকোসাইটিস গ্রুপের পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বড় অন্ত্রে এমডিএর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (p < 0।{3}}5–{5}} .0001)। এছাড়াও, মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ গ্রুপের বৃহৎ অন্ত্রে এমডিএর স্তরগুলি নিয়ন্ত্রণ এবং এএলএ গ্রুপের (পি <0.0001) থেকে যথেষ্ট আলাদা ছিল।

কন্ট্রোল এবং এএলএ গ্রুপের ইঁদুরের সমস্ত টিস্যুতে মিউকোসাইটিস গ্রুপের ইঁদুরের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চ SOD মাত্রা ছিল (p < {{0}}৷{4}}5–0৷{8} }}{{10}}01)। ALA এবং মিউকোসাইটিস প্লাস ALA গ্রুপে (p <0.01) বৃহৎ অন্ত্রের নমুনাগুলিতে SOD মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল। পেটের নমুনায়, ALA এবং Mucositis প্লাস ALA গ্রুপে (p <0.05) SOD মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। তদ্ব্যতীত, মিউকোসাইটিস গ্রুপের ইঁদুরের ছোট অন্ত্রে এসওডি স্তরগুলি এএলএ গ্রুপের (পি <0.05) এসওডি স্তরের তুলনায় যথেষ্ট কম ছিল। যাইহোক, মিউকোসাইটিস এবং মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ গ্রুপের প্রাণীদের পাকস্থলী এবং বৃহৎ অন্ত্রে এসওডি স্তরগুলি যথেষ্ট আলাদা ছিল (p <0.05–0.0001)।

3.4। ALA চিকিত্সা টিস্যু MMPs এবং TIMP এর মাত্রা বাড়ায়-1

সিরাম, পাকস্থলী, ক্ষুদ্রান্ত্র এবং বৃহৎ অন্ত্রে MMP{{0}}, MMP-2, MMP-8, এবং TIMP-1 কার্যকলাপগুলি (সারণী 2) উল্লেখযোগ্যভাবে ছিল কন্ট্রোল এবং ALA গ্রুপের তুলনায় মিউকোসাইটিস গ্রুপে বেশি (p < 0।{13}}5–0.0001)। MMP-1, MMP-2, MMP-8, এবং TIMP-1 মাত্রার বৃদ্ধি মিউকোসাইটিস ইঁদুরের সেরা এবং পাকস্থলী, ছোট অন্ত্র এবং বড় অন্ত্রে উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করা হয়েছিল মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ ইঁদুর (পি <0.05–0.0001), যদিও মিউকোসাইটিস প্লাস এএলএ এবং মিউকোসাইটিস গ্রুপের মধ্যে সিরাম এমএমপি-8 স্তরের কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না।