আলোক সংবেদনশীল প্রো-ড্রাগ ন্যানো অ্যাসেম্বলিগুলিকে আশ্রয় করে একটি কেমোথেরাপিউটিক সুপ্ততা ফাংশন ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপির সম্ভাবনা তৈরি করে

বিমূর্ত

কেমোথেরাপি এবং ফটোডাইনামিক থেরাপির মতো কার্যকর থেরাপির সাথে মিলিত ইমিউনোথেরাপি হল উন্নত ক্যানসার চিকিত্সার জন্য টিউমার-বিরোধী প্রতিরোধ ক্ষমতা সক্রিয় করার একটি সফল কৌশল। যাইহোক, মাল্টিফাংশনাল বায়োডিগ্রেডেবল, বায়োকম্প্যাটিবল, কম-বিষাক্ত কিন্তু অত্যন্ত দক্ষ, এবং ক্লিনিক্যালি উপলব্ধ রূপান্তরিত ন্যানো-ইমিউনোস্টিমুল্যান্টগুলি একটি চ্যালেঞ্জ রয়ে গেছে এবং এর প্রচুর চাহিদা রয়েছে। এখানে, আমরা তিনটি বহুমুখী উপাদানের স্ব-একত্রিত প্রাকৃতিক ছোট অণু বেটুলিনিক অ্যাসিড (BA), একটি জলে দ্রবণীয় চিটোসান অলিগোস্যাকারাইড (COS), একত্রিত করে একটি অভিনব ক্যারিয়ার-মুক্ত ফটো-কেমোথেরাপিউটিক ন্যানো-প্রোড্রাগ COS-BA/Ce6 NPs রিপোর্ট এবং ডিজাইন করি। এবং একটি কম বিষাক্ত ফটোসেনসিটাইজার ক্লোরিন e6 (Ce6) ইমিউন অ্যাডজুভেন্ট অ্যান্টি-পিডি-এল1-মিডিয়াটেড ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপির অ্যান্টিটিউমার কার্যকারিতা বাড়াতে। আমরা দেখাই যে ডিজাইন করা ন্যানোড্রাগগুলি কাঙ্ক্ষিত নিম্ন সাইটোটক্সিসিটি সহ কেমোথেরাপিউটিক প্রভাবে একটি স্মার্ট এবং স্বতন্ত্র "সুপ্তাবস্থা" বৈশিষ্ট্য এবং একাধিক অনুকূল থেরাপিউটিক বৈশিষ্ট্যগুলিকে আশ্রয় করে যার মধ্যে উন্নত 1 O2 জেনারেশন Ce6 এর হ্রাস শক্তির ব্যবধান, pH- প্রতিক্রিয়াশীলতা, বায়োডগ্রাফি, ভাল। বায়োকম্প্যাটিবিলিটি, একটি অত্যন্ত দক্ষ, সিনারজিস্টিক ফটোকেমোথেরাপি নিশ্চিত করে। অধিকন্তু, অ্যান্টি-পিডি-এল১ থেরাপির সাথে মিলিত হলে, ন্যানো-সমন্বয়-ভিত্তিক কেমোথেরাপি এবং কেমোথেরাপি/ফটোডাইনামিক থেরাপি (পিডিটি) উভয়ই কার্যকরভাবে অ্যান্টিটিউমার প্রতিরোধ ক্ষমতা সক্রিয় করতে পারে যখন প্রাথমিক বা দূরবর্তী টিউমারগুলির চিকিত্সা করা হয়, ক্লিনিকাল ইমিউনোথেরাপির জন্য সম্ভাব্য আকর্ষণীয় সম্ভাবনা উন্মুক্ত করে।

সিস্টানচে টিউবুলোসা-অ্যান্টিটিউমারের উপকারিতা

কীওয়ার্ড

ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপি; ন্যানো-ইমিউনোস্টিমুল্যান্টস; কেমোথেরাপিউটিক সুপ্ততা; প্রো-ড্রাগ; স্ব-সমাবেশ; প্রাকৃতিক ছোট অণু; বেটুলিনিক অ্যাসিড; ফটোডাইনামিক থেরাপি

1। পরিচিতি

ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপি, যেমন PD-L1 বা CTLA-4 ব্যবহার করে ইমিউন চেকপয়েন্ট ব্লকেড কৌশল হোস্টের ইমিউন সিস্টেমকে সক্রিয় করে ক্যান্সারের বিরুদ্ধে লড়াই করে, নিঃসন্দেহে ক্যান্সারের চিকিৎসায় বিপ্লব এনেছে 1,2। দুর্ভাগ্যবশত, দুর্বল ইমিউন প্রতিক্রিয়া এবং অকার্যকর থেরাপিউটিক প্রভাবগুলি এর ক্লিনিকাল সম্ভাবনাগুলিকে ব্যাপকভাবে সীমিত করে 3,4। সম্প্রতি, বর্তমান গবেষণায় দেখা গেছে যে কেমোথেরাপি 5, ফটোডাইনামিক থেরাপি (PDT)6, ফটোথার্মাল থেরাপি (PTT)7 এবং রেডিওথেরাপি 8 এর মতো অন্যান্য পদ্ধতির সাথে ইমিউনোথেরাপির সংমিশ্রণ, ক্যান্সার কোষগুলিকে ইমিউনোজেনিক কোষের মৃত্যুতে প্ররোচিত করে কার্যকরভাবে অ্যান্টিটিউমার ইমিউনোজেনিসিটি ট্রিগার করতে পারে ( আইসিডি)9, যা টিউমার-বিরোধী প্রতিরোধ ক্ষমতা সক্রিয় করতে ইমিউন মডুলেশনের সম্ভাবনার পরামর্শ দেয়। ইমিউনোথেরাপি কৌশলগুলির এই সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণের উপর ভিত্তি করে ন্যানোম্যাটেরিয়ালের অসংখ্য উদ্ভাবনী নকশাগুলি অজৈব 10, পলিমার11 এবং বায়োমিমেটিক 12 ন্যানো পার্টিকেলস (NPs) সহ উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত ক্যান্সার-বিরোধী কার্যকলাপ অর্জন করেছে। যাইহোক, বহুমুখী বায়োডিগ্রেডেবল, বায়োকম্প্যাটিবল, কম বিষাক্ততা কিন্তু অত্যন্ত দক্ষ, এবং ক্লিনিক্যালি উপলব্ধ রূপান্তরিত ন্যানো-ইমিউনোস্টিমুল্যান্টগুলি একটি বড় চ্যালেঞ্জ এবং বিশাল চাহিদা। প্রাকৃতিক জৈবিক পদার্থ যেমন নিউক্লিক অ্যাসিড 13, প্রোটিন 12, পেপটাইডস14,15 এবং ছোট আণবিক প্রাকৃতিক পণ্য16,17 তাদের অন্তর্নিহিত সুবিধার কারণে (যেমন, জৈব সামঞ্জস্যপূর্ণতা, অ-বিষাক্ততা) চিকিৎসা অ্যাপ্লিকেশনের জন্য একটি উল্লেখযোগ্য গবেষণার আগ্রহ তৈরি করেছে। বিশেষ করে সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, স্ব-সমাবেশের ফাংশন ধারণকারী ক্যানসার বায়োঅ্যাকটিভ টেরপেনয়েড প্রাকৃতিক ছোট অণু (এনএসএম) ধারাবাহিকভাবে 18,19 আবিষ্কৃত হয়েছে। উদাহরণস্বরূপ, বেটুলিনিক অ্যাসিড (বিএ), এরগোস্টেরল (ইটি), এবং অ্যাবিয়েটিক অ্যাসিড (এএ) মাইক্রোন বা ন্যানো-গঠিত কণাতে স্ব-একত্রিত হতে পারে। এই এনএসএমগুলি সিনারজিস্টিক কেমোথেরাপি এবং পিডিটি-এর জন্য টিউমার এজেন্ট বিকাশের জন্য ব্যবহার করার জন্য আকর্ষণীয় বিল্ডিং ব্লক। তারা সহজে ন্যানো-ফ্যাব্রিকেশন, উন্নত জৈব সামঞ্জস্যতা এবং বায়োডিগ্রেডেবিলিটি, কম লিভারের আঘাতের সাথে কম বিষাক্ততা এবং অ্যান্টিটিউমার থেরাপি 20e23-এ উচ্চ সমন্বয়বাদের উল্লেখযোগ্য সুবিধাগুলি প্রদর্শন করতে প্রমাণিত হয়েছে। এটি সিনারজিস্টিক ইমিউনোথেরাপির জন্য চিকিত্সাগতভাবে উপলব্ধ অনুবাদযোগ্য ন্যানো-ইমিউনোস্টিমুল্যান্টগুলি বিকাশের জন্য প্রতিশ্রুতিবদ্ধ বিকল্প সরবরাহ করে। যাইহোক, এই এনএসএমগুলির সাধারণত শক্তিশালী লিপোফিলিসিটি অদক্ষ সেলুলার এন্ডোসাইটোসিসের দিকে পরিচালিত করে, যা তাদের ক্যান্সার প্রতিরোধী কার্যকলাপকে দুর্বল করে দেয় এবং ক্যান্সারের চিকিত্সার জন্য তাদের ক্লিনিকাল মান সীমিত করে। সাধারণভাবে রিপোর্ট করা ন্যানোকম্পোজিটের মতোই, সংশ্লিষ্ট এনএসএম ন্যানো-ফর্মুলেশনগুলি কেমোথেরাপিউটিক প্রভাবগুলিকে উন্নত করতে সেলুলার গ্রহণকে উন্নীত করে, কিন্তু অসাবধানতাবশত সাধারণ কোষগুলিতে অ-নির্দিষ্ট সাইটোটক্সিসিটির ঝুঁকি বাড়িয়ে দেয়। তাই, টেরপেনয়েড এনএসএম ন্যানো-এজেন্টের বিষাক্ততা কমিয়ে স্বাভাবিক টিস্যুতে কীভাবে অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকারিতা বাড়ানো যায় তা সিনারজিস্টিক ইমিউনোথেরাপি প্রক্রিয়ার একটি গুরুত্বপূর্ণ সমস্যা হিসাবে গভীরভাবে চিন্তা করা মূল্যবান।

পুরুষদের জন্য cistanche উপকারিতা-প্রতিরোধ ক্ষমতা শক্তিশালী করে

হাইড্রোফিলিসিটি25 বৃদ্ধির মাধ্যমে লাইপোফিলিক ছোট অণুর কোষ গ্রহণকে উন্নত করতে প্রো-ড্রাগ কৌশলগুলি ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে। সাধারণত, অ্যামফিফিলিক ওষুধগুলি বিশেষত হাইড্রোফিলিক বা লিপোফিলিক ওষুধের তুলনায় উচ্চতর সেলুলার গ্রহণের দক্ষতার অধিকারী। সেলুলার ফ্যাগোসাইটোসিস যত বেশি, থেরাপিউটিক কার্যকারিতা তত ভাল। এইভাবে, অ্যামফিফিলিক টেরপেনয়েড এনএসএম প্রো-ড্রাগ অণুগুলির বিকাশ তাদের থেরাপিউটিক প্রভাব সর্বাধিক করার জন্য একটি সম্ভাব্য পদ্ধতি হতে পারে। এছাড়াও, নির্দিষ্ট টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্টের উদ্দীপনা-প্রতিক্রিয়াশীল ন্যানোড্রাগগুলি (যেমন, অ্যাসিড, রেডক্স প্রতিক্রিয়াশীলতা) ওষুধের মুক্তি নিয়ন্ত্রণের জন্য দুর্দান্ত প্রতিশ্রুতি রাখে, যা কেমোথেরাপিউটিক ওষুধের সাইটোটক্সিসিটি দমন করতে সুবিধাজনক 27,28৷ এদিকে, সুপারমোলিকুলার একত্রিতকরণ (উদাহরণস্বরূপ, একটি পুনরাবৃত্তি পদ্ধতি) ছিল অত্যন্ত জল-দ্রবণীয় বাহক-মুক্ত ন্যানোড্রাগস 22,29 প্রস্তুত করার একটি কার্যকর কৌশল, যা আশা করা যেতে পারে যে অ্যামফিফিলিক এনএসএম-এর ফ্যাগোসাইটোসিস কার্যকারিতা কিছুটা কমিয়ে দেবে, যার ফলে তাদের পূর্ব-প্রস্তুতি হ্রাস পাবে। পরিকল্পিত সাইটোটক্সিসিটি। আমরা অনুমান করি যে উদ্দীপক-প্রতিক্রিয়াশীল এবং সম্পূর্ণরূপে হাইড্রোফিলিক ন্যানোড্রাগগুলি আরও অ্যাম্ফিফিলিক এনএসএম প্রো-ড্রাগের উপর ভিত্তি করে প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল এবং কার্যকরভাবে সাধারণ কোষে এর অ-নির্দিষ্ট সাইটোটক্সিসিটি দমন করতে পারে যখন অত্যন্ত বিষাক্ত অ্যামফিফিলিক এনএসএমগুলিকে টিউমার কোষে প্রকাশ করতে উদ্দীপিত করে, তাদের সাধারণ কোষগুলিতে ফ্যাসিলাইট এবং ফ্যাসিলাইটগুলি তৈরি করে। টিউমার সাইটে সক্রিয়করণ। অ্যামফিফিলিক প্রো-ড্রাগ অণু প্রস্তুত করার জন্য টেরপেনয়েড এনএসএম সংশোধন করার জন্য উপযুক্ত জল-দ্রবণীয় এবং উদ্দীপক-প্রতিক্রিয়াশীল অগ্রদূত নির্বাচন করা গুরুত্বপূর্ণ। বছরের পর বছর ধরে, chitosan oligosaccharides (COS), chitosan এর ক্ষয়প্রাপ্ত পণ্য হিসাবে, শুধুমাত্র ভাল জল দ্রবণীয়তা এবং প্রচুর eOH oreNH2 গ্রুপ রয়েছে যা একটি ভাল pH প্রতিক্রিয়ার দিকে পরিচালিত করে কিন্তু ক্রিয়াকলাপ নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে হোস্টের রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বৃদ্ধি করে উপকারী টিউমার ক্রিয়াকলাপও রয়েছে। ইমিউন কোষ যেমন মনোসাইট ম্যাক্রোফেজ এবং লিম্ফোসাইট 30,31। এগুলি সিনারজিস্টিক ইমিউনোথেরাপির জন্য উদ্দীপনা-প্রতিক্রিয়াশীল লক্ষ্য ন্যানো ইমিউনোস্টিমুল্যান্ট তৈরির বিশাল সম্ভাবনার গ্যারান্টি দেয়।

এখানে, উপরোক্ত বিবেচনার ভিত্তিতে, আমাদের পরীক্ষামূলক নকশায়, বেটুলিনিক অ্যাসিড (BA) এর একটি পেন্টাসাইক্লিক ট্রাইটারপেন এনএসএম একটি শক্তিশালী অ্যান্টিক্যান্সার এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়32, কেমোথেরাপিউটিক প্রভাবকে উন্নত করার জন্য একটি অ্যামফিফিলিক COS-BA অণু সংশ্লেষণ করার জন্য COS চালু করা হয়েছিল। ক্লোরিন e6 (Ce6), একটি বহুল ব্যবহৃত ফটোসেনসিটাইজার যার খুব কম/অন্ধকার বিষাক্ততা নেই33, একটি সরাসরি সহ-সমাবেশের কৌশল ব্যবহার করে একটি সম্পূর্ণ জল-দ্রবণীয় ক্যারিয়ার-মুক্ত ফটোসেনসিটিভ প্রোড্রাগ COS-BA/Ce6 NPs তৈরি করতে নিযুক্ত করা হয়েছিল। COS-BA/Ce6 NPs দুটি থেরাপিউটিক পদ্ধতি, কেমোথেরাপি এবং ফটোডাইনামিক থেরাপি (PDT) একত্রিত করে, যা টি কোষে টিউমার থেকে প্রাপ্ত অ্যান্টিজেনের উপস্থাপনাকে কার্যকরভাবে বৃদ্ধি করতে পারে, একটি ইমিউন অ্যাডজাভেন্ট অ্যান্টি-PD-L1 এর সহায়তায় শক্তিশালী ইমিউনোলজিক্যাল প্রতিক্রিয়া তৈরি করে। অত্যন্ত দক্ষ এবং সিনার্জিস্টিক অ্যান্টি-টিউমার কেমোথেরাপি/পিডিটি/ইমিউনোথেরাপি (স্কিম 1) ঘটাতে। প্রকৌশলী COS-BA/Ce6 NPs ছলনাময় কেমোথেরাপির প্রভাব সহ একটি স্মার্ট সুপ্ততা ফাংশন দেখিয়েছে, যেমন, নন-ইরেডিয়েটেড কো-অ্যাসেম্বল এনপিগুলি অ্যাম্ফিফিলিক COS-BA-এর তুলনায় অ্যাম্ফিফিলিক COS-BA-এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বাধাপ্রাপ্ত দেখায়। স্বতন্ত্র পিএইচ-প্রতিক্রিয়াশীল আচরণের জন্য দায়ী, এটি ভিভোতে স্বাভাবিক টিস্যুতে কম বিষাক্ততা এবং জৈব নিরাপত্তা দেয় কিন্তু দুর্বল অম্লীয় টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট34-এ হাইপারঅ্যাকটিভ COS-BA-এর উদ্দীপক মুক্তির কারণে টিউমার টিস্যুর জন্য অত্যন্ত বিষাক্ত। আমাদের সর্বোত্তম জ্ঞানে, বর্তমানে, এই কেমোথেরাপিউটিক সুপ্ততা ফাংশনকে আশ্রয় করে এমন ডিজাইন করা ন্যানো ওষুধগুলি এখনও খুব কমই রিপোর্ট করা হয়েছে। ইতিমধ্যে, ন্যানোড্রাগের একাধিক অনুকূল থেরাপিউটিক বৈশিষ্ট্য রয়েছে যেমন Ce6-এর শক্তি ব্যবধান (DEST) হ্রাস করে উন্নত 1 O2 প্রজন্ম, দ্রুত জৈবিক বিপাক এবং বর্ধিত টিউমার জমা, যা কেমোথেরাপি এবং PDT চিকিত্সার একটি দক্ষ এবং নিরাপদ অ্যান্টিটিউমার সংমিশ্রণের দিকে পরিচালিত করে। আরও গুরুত্বপূর্ণ, NP-ভিত্তিক কেমোথেরাপি এবং কেমোথেরাপি/PDT উভয় সিস্টেমই প্রাথমিক বা দূরবর্তী টিউমারগুলিতে TNF-a এবং IFN-g-উৎপাদনকারী CD8þ T কোষের বিস্তারকে সহজতর করে টিউমার প্রতিরোধ ক্ষমতা কার্যকর করতে পারে। আমাদের প্রস্তাবিত বায়োডিগ্রেডেবল, বায়োকম্প্যাটিবল, অনন্যভাবে সুপ্ত, জৈব-নিরাপদ, এবং অত্যন্ত দক্ষ ফটো-কেমোথেরাপিউটিক ন্যানো-ড্রাগ উল্লেখযোগ্য সিস্টেমিক ইমিউন থেরাপিউটিক প্রতিক্রিয়া অর্জন করে, দূরবর্তী বা মেটাস্ট্যাটিক ক্যান্সার থেরাপির চিকিৎসায় ক্লিনিকাল প্রয়োগের জন্য আকর্ষণীয় সম্ভাবনা উন্মুক্ত করে।

স্কিম 1 পিডিটি এবং কো-অ্যাসেম্বলড COS-BA/Ce6 NPs-এর কেমোথেরাপি একটি সিস্টেমিক অ্যান্টিটিউমার ইমিউনোথেরাপি প্ররোচিত করার জন্য অ্যান্টি-পিডি-এল1কে শক্তিশালী করে। জল-দ্রবণীয় COS-এর প্রবর্তন কার্যকরভাবে BA-এর কেমোথেরাপিউটিক কার্যকলাপকে বাড়িয়ে তুলতে পারে (অর্ধ-তলোয়ার হিসাবে চিত্রিত), যার ফলে একটি হাইপারঅ্যাকটিভ COS-BA অ্যামফিফিলিক প্রোড্রাগ (লং-সোর্ড) হয়। ফটোসেনসিটাইজার Ce6 (স্ক্যাবার্ড) এর সাথে একত্রিত হলে, শেল-গঠিত এবং পিএইচ-সংবেদনশীল ন্যানো-অ্যাসেম্বলিগুলির একটি স্মার্ট এবং স্বতন্ত্র "সুপ্ততা" ফাংশন ছিল যা স্বাভাবিক টিস্যুতে কেমোথেরাপিউটিক বিষাক্ততাকে বাধা দেয়। কিন্তু, একবার এটি এসে পৌঁছলে এবং অ্যাসিডিক (Hþ) টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট দ্বারা উদ্দীপিত হলে, অত্যন্ত সক্রিয় অ্যামফিফিলিক প্রোড্রাগ COS-BA প্রকাশিত হবে যার ফলে উল্লেখযোগ্য কেমোথেরাপি হবে। উপরন্তু, নির্মিত সহ-সমাবেশগুলি Ce6-এর সিঙ্গলেট এবং ট্রিপলেট উত্তেজিত রাজ্যের (DEST) মধ্যে শক্তির ব্যবধান হ্রাস দ্বারা প্ররোচিত উন্নত একক অক্সিজেন (1 O2) প্রজন্মের সাথে চমৎকার PDT কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছে। একটি অ্যান্টি-পিডি-এল1 চেকপয়েন্ট অবরোধের সাথে মিলিত, কেমোথেরাপি/পিডিটি চিকিত্সার পরে টিউমার-সম্পর্কিত অ্যান্টিজেনের মুক্তি দূরবর্তী ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপির জন্য একটি সিস্টেমিক অ্যান্টিটিউমার ইমিউন প্রতিক্রিয়া কার্যকরভাবে সক্রিয় করতে পারে।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। COS-BA এর সংশ্লেষণ

বেটুলিনিক অ্যাসিড (40 মিলিগ্রাম, 0.1 মিলিমিটার), ইডিসি (38 মিলিগ্রাম, 0.2 মিলিমিটার), এবং এনএইচএস (17 মিলিগ্রাম, 0.15 মিলিগ্রাম) ) 3 মিলি এন, এন-ডাইমিথাইলফর্মাইড (ডিএমএফ) দ্রবীভূত হয়েছিল। ঘরের তাপমাত্রায় ৩0 মিনিট নাড়ার পর, 96 মিলিগ্রাম COS জলের দ্রবণ (1 মিলি) আলতোভাবে মিশ্রণে ড্রপওয়াইসে যোগ করা হয় এবং 24 ঘন্টার জন্য নাড়তে থাকে। তারপরে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি CH2Cl2 দিয়ে পাতলা করা হয়েছিল এবং বারবার নিষ্কাশন করা হয়েছিল। CH2Cl2 স্তরটি একটি সিলিকা জেল কলামে বাষ্পীভূত এবং শুদ্ধ করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়াহীন BA প্রাথমিকভাবে পেট্রোলিয়াম ইথার ব্যবহার করে সরানো হয়েছিল: অ্যাসিটোন (5:1, v/v) ইলুয়েন্ট হিসাবে, এবং তারপর সাদা COS-BA (ফলন: 42%) প্রাপ্ত করার জন্য 3:1 এ পরিবর্তিত হয়েছিল, যেখানে COSকে ডাইমার হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল ( n Z 2)। 1 H NMR (40{{70}} MHz, CDCl3) d: 8.98 (1H, s, BA-28 O] CeNH), 4.73 (1H, s, H -29a), 4.60 (1H, s, H-29b), 3.18 (1H, dd, JZ 4.8, 10.8 Hz, H-3), 2.95e3.93 (8H, m, COS), 2.64 (3H, s, CH3eCOS), 0.76 (3H, s, H-24), 0.83 (3H, s, H-25), 0.90 (3H, s, H{ {69}}), 0.97 (3H, s, H-26), 0.98 (3H, s, H-27), 1.70 (3H, s, H-30)। 13C NMR (100 MHz, CDCl3) d: 179.18 (CO, COS), 156.43 (C- 28), 150.97 (C-20), 109.03 (C-29), 78.74, 77.04 , 69.32, 69.22, 65.25, 58.14, 55.62, 55.21, 53.65, 53.22, 50.52, 45.96, 44.32,44.11, 41.85, 40,53.538, 40.5387. 04, 36.39, 35.31, 34.21, 31.81, 31.54, 31.17, 30.28 , 29.09, 27.80, 27.22, 25.74, 25.53, 20.91, 19.48, 18.12, 16.02, 15.87, 15.17, 14.65, 14.62। ESIeMS m/z: 814.5871 [M‒6H] (C44H72N2O12)।

2.2। COS-BA/Ce6 NPs এর প্রস্তুতি

সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs এক ধাপ পুনঃপ্রতিষ্ঠা পদ্ধতি দ্বারা প্রস্তুত করা হয়েছিল। সাধারণত, Ce6 এর 5 mL (33 mmol/L) এবং 40 mL COS-BA (33 mmol/L) DMSO সমাধানগুলি প্রথমে মিশ্রিত করা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, আল্ট্রাসোনিকেশন (KQ-250E, ShuMei, Kunshan, China) এর অধীনে 10 mL NaOH (50 mmol/L) সমন্বিত 1 mL জলে মিশ্রণটি দ্রুত ইনজেকশন করা হয়েছিল। 10 মিনিটের জন্য sonication পরে, COS-BA/Ce6 NPs 25 মিনিটের জন্য 13,000 rpm (TGL-16G, Xiangyi, Changsha, China) এ সেন্ট্রিফিউগেশন দ্বারা প্রাপ্ত হয়েছিল৷ COS-BA থেকে Ce6 এর বিভিন্ন অনুপাত সহ অন্যান্য ফর্মুলেশনগুলি 3:1 এর ধ্রুবক NaOH থেকে Ce6 মোলার অনুপাতের সাথে একই পদ্ধতিতে প্রস্তুত করা হয়েছিল।

2.3। সেল লাইন

মানব MCF-7, HepG2, LO2, এবং মাউস 4T1, L929 সেল লাইনগুলি ইনস্টিটিউট অফ বায়োকেমিস্ট্রি অ্যান্ড সেল বায়োলজি, SIBS, CAS (চীন) দ্বারা সরবরাহ করা হয়। MCF-7, HepG2, এবং LO2 DMEM মাধ্যমে 10% ফেটাল বোভাইন সিরাম (FBS, Gibco) এবং 1% পেনিসিলিন-স্ট্রেপ্টোমাইসিন অ্যান্টিবায়োটিক (লাইফ টেকনোলজি, USA) 37 C. 4T1 এবং L929-এ সংস্কৃত হয়েছিল উপরের অনুপাতের সাথে RMPI-1640 মাধ্যম।

2.4। সেলুলার আপটেক এবং এন্ডোসাইটিক পাথওয়ে স্টাডিজ

সেলুলার গ্রহণের তদন্তের জন্য, 4T1 বা LO2 কোষগুলি বিনামূল্যে Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs (Ce6 এর সমতুল্য ঘনত্ব: 1.7 mg/mL, COS-BA: 19.5 mg/mL, BA: 10 দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল .8 mg/mL) বিভিন্ন সময়ের জন্য। ওয়াশিং, ফিক্সিং এবং DIPA (#D9542, সিগমা) দাগ দেওয়ার পরে, কোষগুলিকে একটি ফ্লুরোসেন্ট ইনভার্টেড মাইক্রোস্কোপ (FIM) (DSY-2000X, UP Optotech, Changchun, China) অধীনে চিত্রিত করা হয়েছিল। গুয়াভা ইজিসাইট মিনি সিস্টেম (মার্ক মিলিপুর, জার্মানি) ব্যবহার করে ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা নির্ধারণ করা হয়েছিল। গ্রহণের দক্ষতার পরিমাপের জন্য, BA এবং COS-BA এর সেলুলার সঞ্চয় HPLC (Agilent 1200, USA) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। সাধারণত, 4T1 কোষকে 0.5 এবং 3 ঘন্টার জন্য বিনামূল্যে COS-BA বা BA (সমতুল্য BA: 25 mg/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। পিবিএস দিয়ে ধোয়ার পর, কোষের ছোরা সংগ্রহ করা হয় এবং সেল লাইসিসের জন্য অতিস্বনক সমজাতীয়করণ (JY92-IIN, Scientz Biotechnology, Ningbo, China) করা হয়। তারপরে, নমুনাগুলি লাইওফিলাইজ করার পরে এইচপিএলসি বিশ্লেষণের জন্য ক্লোরোফর্ম দ্বারা COS-BA বা BA বের করা হয়েছিল। মোবাইল ফেজ ছিল জল (0.2% ফসফরিক অ্যাসিড) এবং 1.0 মিলি/মিনিট প্রবাহের হারে অ্যাসিটোনিট্রিল, এবং সিওএস-বিএ এবং বিএ বিশ্লেষণের জন্য অনুরূপ আয়তনের অনুপাত ছিল যথাক্রমে 60:40 এবং 15:85 (v/v)। . সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছিল 213 এনএম। COS-BA/Ce6 NPs-এর এন্ডোসাইটিক পথের তদন্তের জন্য, 4T1 কোষগুলিকে 6-কূপ প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল এবং 24 ঘণ্টার জন্য 30 মিনিটের জন্য বিভিন্ন এন্ডোসাইটোসিস ইনহিবিটর দিয়ে প্রিট্রিটেড করার আগে ইনকিউব করা হয়েছিল, একটি মাইক্রোপিনোসাইটোসিস ইনহিবিটর [50 mmol/L' সহ , ইথাইল আইসোপ্রোপাইল অ্যামিলোরাইড (EIPA) (#N132356, আলাদিন)], একটি ক্ল্যাথ্রিন-মধ্যস্থ এন্ডোসাইটোসিস ইনহিবিটর [20 mmol/L, ক্লোরপ্রোমাজিন (#C7010, সোলারবিও)], একটি caveolae-মধ্যস্থিত এন্ডোসাইটোসিস ইনহিবিটর (5/L) #IN0260, সোলারবিও)], এবং একটি লাইসোসোম অ্যাসিডিফিকেশন ইনহিবিটর [50 mmol/L, ক্লোরোকুইন ফসফেট (#C9720, সোলারবিও)]35। এরপরে, কোষগুলিকে 2 mL COS-BA/Ce6 NPs (Ce6: 1.7 mg/mL, COS-BA: 19.5 mg/mL) দিয়ে 2 ঘন্টার জন্য আরও সংস্কৃতি করা হয়েছিল এবং FIM (UP Optotech) এর অধীনে চিত্রিত করা হয়েছিল। 37 C এ এন্ডোসাইটিক ইনহিবিটর ছাড়া ইনকিউব করা কোষগুলিকে শক্তি-নির্ভর এন্ডোসাইটোসিসের মূল্যায়নের জন্য নিয়ন্ত্রণ হিসাবে এবং নিম্ন-তাপমাত্রা ইনকিউবেশনে (4 C) সেট করা হয়েছিল। এদিকে, কোষের গড় ফ্লুরোসেন্স তীব্রতাও প্রবাহ সাইটোমেট্রি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল।

cistanche tubulosa- ইমিউন সিস্টেম উন্নত

Cistanche Enhance Immunity পণ্য দেখতে এখানে ক্লিক করুন

【আরো জন্য জিজ্ঞাসা করুন】 ইমেল:cindy.xue@wecistanche.com / Whats অ্যাপ: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.5। সাইটোটক্সিসিটি পরীক্ষা

4T1 কোষ একটি 96-কূপ প্লেটে বীজ করা হয়েছিল। তারপর কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য COS-BA NPs এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। পরবর্তীতে, 10 mL MTT (#M158055, আলাদিন) ডাই (5 mg/mL) কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং অতিরিক্ত 4 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল, এবং তারপর 150 mL DMSO যোগ করা হয়েছিল ফরমাজান ক্রিস্টালগুলিকে দ্রবীভূত করার জন্য . 492 এনএম এ প্রতিটি কূপের শোষণ একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার দ্বারা রেকর্ড করা হয়েছিল। বিকিরণ গোষ্ঠীর জন্য, কোষগুলিকে 4 ঘন্টার জন্য ওষুধ দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, তারপর 10 মিনিটের জন্য 675  10 এনএম আলো দ্বারা বিকিরণ করা হয়েছিল এবং অতিরিক্ত 20 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল৷ COS-BA/ Ce6 NPs-এর সাইটোটক্সিসিটি (CE6-এর 1 mg/mL 11.5 mg/mL COS-BA এবং 6.4 mg/mL BA) অন্যান্য কোষের (MCF-7, HepG2, LO2, এবং L929) বিরুদ্ধে শুধুমাত্র একটি ভিন্ন মাধ্যমের সাথে একই MTT অ্যাস দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। ইতিমধ্যে, Chou Talalay থিওরেম calculation36 ব্যবহার করে CompuSyn 2.0 সফ্টওয়্যার দ্বারা সংমিশ্রণ সূচক গণনা করা হয়েছিল।

2.6। পশুর মডেল

হারবিন মেডিকেল ইউনিভার্সিটি অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি দ্বারা অনুমোদিত প্রোটোকল অনুসারে সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি কার্যকর করা হয়েছিল। 4T1 কোষগুলি RMPI-1640 মাঝারিতে স্থগিত করা হয়েছিল এবং প্রতিটি মহিলা BALB/c মাউসের ডান-পিঠে (18e22 গ্রাম, 6e7 সপ্তাহ বয়সী) সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল।

2.7। ইন/প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং

একটি 200 mL COS-BA/Ce6 NPs 5% গ্লুকোজ দ্রবণ (সমতুল্য Ce6: 0.35 mg/mL, COS-BA: 4.02 mg/mL) টিউমার বহনকারী ইঁদুরের মধ্যে লেজের শিরা দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। এর পরে, একটি পূর্বনির্ধারিত সময়ে টিউমার সাইটগুলির ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং একটি AniView 100/600 মাল্টি-মডেল ব্যবহার করে ভিভো অ্যানিমেল ইমেজিং সিস্টেম (গুয়াংঝো বায়োলাইট বায়োটেকনোলজি কোং, লিমিটেড, চীন) 630 এনএম-এ উত্তেজনা সহ সঞ্চালিত হয়েছিল। 24 ঘন্টা পোস্ট-ইনজেকশনের পরে, প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংয়ের জন্য প্রধান অঙ্গগুলি (হার্ট, লিভার, প্লীহা, ফুসফুস এবং কিডনি) এবং টিউমার সংগ্রহ করা হয়েছিল। এছাড়াও, Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs এর iv ইনজেকশনের পরে বিভিন্ন সময়ে টিউমার এবং প্রধান অঙ্গগুলির প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স চিত্রগুলিও মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

2.8। ভিভো কেমোথেরাপি/পিডিটি-তে

4T1-বহনকারী ইঁদুর (75e100 mm3 ) এলোমেলোভাবে ছয়টি গ্রুপে বিভক্ত (n Z 5): 1) 5% গ্লুকোজ দ্রবণ; 2) Ce6; 3) বিকিরণ সঙ্গে Ce6; 4) COS-BA (40.2 mg/kg, যেখানে BA: 22.3 mg/kg); 5) COS-BA/Ce6 NPs; 6) বিকিরণ সহ COS-BA/Ce6 NPs। প্রতিটি গ্রুপের জন্য, ইঁদুরকে 200 মিলি COS-BA/Ce6 NPs (সমতুল্য Ce6: 3.5 মিলিগ্রাম/শরীরের কেজি) লেজের শিরা দিয়ে 0, 2 এবং 4 দিনে ইনজেকশন দেওয়া হয়। বিকিরণ গোষ্ঠীর জন্য, 4 ঘন্টায় প্রতিটি ইঞ্জেকশনের পরে, সমস্ত ইঁদুরকে আইসোফ্লুরেন দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং টিউমার সাইটগুলিকে 15 মিনিটের জন্য 675  10 nm (150 mW/cm2 ) আলো দ্বারা বিকিরণ করা হয়েছিল। টিউমারের পরিমাণ এবং ইঁদুরের শরীরের ওজন প্রতি অন্য দিনে রেকর্ড করা হয়। টিউমার ভলিউম সূত্র দ্বারা গণনা করা হয়: VZ width2 length/2. 14 দিনের চিকিত্সার পরে, টিউমারগুলিকে সাধারণভাবে ব্যবহৃত সমীকরণ দ্বারা টিউমার প্রতিরোধ অনুপাত (টিআইআর) গণনা করার জন্য এক্সাইজ করা হয়েছিল এবং ওজন করা হয়েছিল: TIRZ (1 নমুনা/নিয়ন্ত্রণ) 100%। যেখানে নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণ ছিল প্রতিটি চিকিত্সা করা গ্রুপের গড় টিউমার ওজন এবং যথাক্রমে 5% গ্লুকোজ জলীয় দ্রবণ গ্রুপ।

2.9। ভিভো কেমোথেরাপি/পিডিটি/ইমিউনোথেরাপিতে

ইমিউনোথেরাপির সাথে মিলিত COS-BA/Ce6 NPs এর সম্ভাব্যতা প্রদর্শনের জন্য, দ্বিপাক্ষিক টিউমার মডেলটি 4T1 কোষের বাম এবং ডান দিকের অংশে সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশনের মাধ্যমে ডিজাইন করা হয়েছিল। যখন টিউমারগুলি 75e100 mm3 এর কাছাকাছি পৌঁছেছিল, তখন ইঁদুরগুলিকে পাঁচটি দলে ভাগ করা হয়েছিল। (1) নিয়ন্ত্রণ; (2) COS-BA/ Ce6 NPs (COS-BA Z 40.2 mg/kg, যেখানে BA Z 22.3 mg/kg); (3) COS-BA/Ce6 NPs þ আলো; (4) COS-BA/Ce6 NPs þ অ্যান্টি-PDL1; (5) COS-BA/Ce6 NPs þ বিরোধী PD-L1 þ আলো। 0 তম দিনে, 200 mL 5% গ্লুকোজ দ্রবণ (গ্রুপ 1) বা COS-BA/Ce6 NPs (Ce6 Z 3.5 mg/kg) (গ্রুপ 2, 3, 4, 5) ইঁদুরের মধ্যে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। 4 ঘন্টা পোস্ট-ইনজেকশনের পরে, গ্রুপ 3 এবং 4 এর ডান টিউমারগুলি 15 মিনিটের জন্য বিকিরণ করা হয়েছিল। বাম টিউমারগুলি প্রকাশ না করার জন্য ইঁদুরগুলিকে আইসোফ্লুরেন দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং একপাশে ঘূর্ণায়মান করা হয়েছিল। তারপরে অ্যান্টি-PD-L1 অ্যান্টিবডি (BioXcell, পণ্য নম্বর: BE0101, ক্লোন নম্বর: 10F.9G2) 2, 4 এবং 6 দিন (প্রতি ইঞ্জেকশন প্রতি মাউস 15 মিলিগ্রাম) গ্রুপ 4 এবং 5 এর জন্য ইঁদুরের মধ্যে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি টিউমারের দৈর্ঘ্য এবং প্রস্থ প্রতি অন্য দিন পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। চিকিত্সার 14 দিন পর, ইলিসা অ্যাস (ইবায়োসায়েন্স) ব্যবহার করে ইন্টারফেরন-গামা (IFN-g) (#KMC4021) এবং টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর (TNF-a) (#BMS607-3) মূল্যায়ন করার জন্য ইঁদুরের রক্তের সিরাম সংগ্রহ করা হয়েছিল। ) টিউমারগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল, বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল, লাল রক্তকণিকা লাইসিস বাফার দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং সেন্ট্রিফিউগেশনের মাধ্যমে পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। তারপর, সেল সাসপেনশন অ্যান্টি-CD3-FITC (#MA1-10187, ক্লোন 145-2C11, eBioscience) এবং অ্যান্টি-CD8a-PE (#12-0081-85) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল, ক্লোন 53-6.7, ইবায়োসায়েন্স)। পরবর্তীতে, বিভিন্ন চিকিত্সার পরে ডান এবং বাম টিউমারে সাইটোটক্সিক টি লিম্ফোসাইট (CTL) অনুপ্রবেশ ফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

3। ফলাফল এবং আলোচনা

3.1। COS-BA/ Ce6 NPs এর সংশ্লেষণ, বানোয়াট এবং চরিত্রায়ন

এই গবেষণায়, আমরা জলে দ্রবণীয় চিটোসান অলিগোস্যাকারাইড (COS) এর উপর ভিত্তি করে একটি অভিনব প্রোড্রাগ ছোট অণু COS-BA ডিজাইন করি, যা হাইড্রোফিলিসিটি বৃদ্ধির মাধ্যমে কোষের গ্রহণকে উন্নত করে পেন্টাসাইক্লিক ট্রাইটারপেন বেটুলিনিক অ্যাসিড (BA) এর কেমোথেরাপিউটিক কার্যকলাপকে উন্নত করতে পারে। এখানে নিযুক্ত COS (পলিমারাইজেশনের ডিগ্রি, DP: 2e6) আমাদের পূর্বে বর্ণিত পদ্ধতি30 দ্বারা প্রস্তুত করা হয়েছিল। তারপরে, সিওএস-বিএ একটি ডিহাইড্রেশন ঘনীভবন প্রতিক্রিয়ার মাধ্যমে সংশ্লেষিত হয়েছিল। COS-এর প্রধান উপাদান বিশ্লেষণের সাথে মিলিত, COS-BA-এর রাসায়নিক কাঠামোটিকে একটি ডিস্যাকারাইড (DP:2) পরিবর্তিত BA (সহায়ক তথ্য চিত্র S1) বলে মনে করা হয়েছিল, যা 1 H NMR, 13C NMR এবং ESIeMS দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। (সহায়ক তথ্য ডুমুর। S2eS4)। প্রতিনিধি 1 H NMR-এর বিশ্লেষণে COS-এর 2.64e3.93 পিপিএম এবং C]CH2 পিকস (4.60, 4.73 পিপিএম) BA এর কাছাকাছি COS-এর স্বতন্ত্র প্রোটন সংকেত দেখায়, COS-BA (চিত্র 1A) এর সফল সংশ্লেষণ প্রদর্শন করে। সমন্বিত সিনারজিস্টিক অ্যান্টিটিউমার রিএজেন্ট COS-BA/Ce6 NPs-এর প্রস্তুতির জন্য, একটি অত্যন্ত দক্ষ ফটোসেনসিটাইজার Ce6-এর সাথে সহযোগিতা করে একটি বহুমুখী পুনঃবর্ষণ পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রাথমিক মোলার অনুপাত পরিবর্তন করে, উভয় COS-BA/Ce6 সহ-সমাবেশের ফর্মুলেশনগুলি মড্যুলেটেড আকারের সাথে গোলাকার ন্যানোস্ট্রাকচার গঠন করতে পারে (চিত্র 1B এবং সহায়ক তথ্য চিত্র S5)। COS-BA/Ce6-এর বিভিন্ন ইনপুট অনুপাত জুড়ে, COS-BA/Ce6 NPs-এর হাইড্রোফিলিক ব্যাস নেতিবাচক z-সম্ভাবনা সহ 200e300 nm-এর কাছাকাছি ছিল। 8:1 ফর্মুলেশনে প্রস্তুত করা NPs তুলনামূলকভাবে ছোট আকারের (249 এনএম) সহ একটি নিম্ন পলিডিসপারসিটি সূচক (PDI, 0.143) দেখিয়েছে তা বিবেচনা করে, সমন্বিত চিকিত্সার জন্য যথেষ্ট পরিমাণ কেমোথেরাপিউটিক এজেন্ট COS-BAও প্রয়োজন ছিল। অতএব, আমরা নিম্নলিখিত অধ্যয়নের জন্য COS-BA/Ce6 (8:1) এর সূত্রগুলি বেছে নিয়েছি। এই অপ্টিমাইজেশানের অধীনে, COS-BA/Ce6 NPs সংকীর্ণ আকারের বন্টন (চিত্র 1C) এবং ভাল জল-দ্রবণীয়তা প্রদর্শন করেছে, যা এর কোলয়েড প্রকৃতি নির্দেশ করে (চিত্র 1D)। এই সফল সহ-সমাবেশের পিছনে কারণগুলি অন্বেষণ করতে, বিনামূল্যে COS-BA-এর প্রাথমিক স্ব-সমাবেশের আচরণ স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি (SEM) (চিত্র 1E) ব্যবহার করে তদন্ত করা হয়েছিল, যা পরামর্শ দিয়েছিল যে COS-BA একটি অত্যন্ত অভিন্ন ন্যানো- গঠন করতে পারে। w168 nm এর গোলক, যা বোঝায় যে COS-এর রাসায়নিক পরিবর্তন বিএ-এর স্ব-সমাবেশের ক্ষমতাকে পরিবর্তন করে না (সহায়ক তথ্য চিত্র S6)। এটি সেই সম্পত্তি যা শেষ পর্যন্ত সহ-সমাবেশগুলির সফল নির্মাণকে প্ররোচিত করে। উল্লেখযোগ্যভাবে, ট্রান্সমিশন ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি (TEM) দ্বারা নিশ্চিত হওয়া কঠিন ন্যানোস্ট্রাকচার ছাড়াও, COS-BA/ Ce6 NPs একটি স্বতন্ত্র শেল কাঠামো মুক্ত COS-BA NPs দেখিয়েছিল, এবং গড় শেল বেধ ছিল প্রায় 2.35 এনএম। অন্যান্য ভৌত রাসায়নিক বৈশিষ্ট্য চিত্র 1F এ সংক্ষিপ্ত করা হয়েছে। এছাড়াও, COS-BA/Ce6 NPs 5.38 mV এর নেতিবাচক z-সম্ভাবনা এবং w249 nm এর হাইড্রোডাইনামিক আকার দেখিয়েছে, SEM (w182 nm) থেকে প্রাপ্ত এর চেয়ে বেশি। একই সাথে, উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) দ্বারা নির্ধারিত হিসাবে Ce6 লোডিং এবং এনক্যাপসুলেশন দক্ষতা যথাক্রমে 8.1 এবং 96% ছিল। এছাড়াও, FT-IR ডেটা (চিত্র 1G) এই সহ-সমাবেশটিকে আরও নিশ্চিত করেছে কারণ COS-BA/Ce6 NPs বৈশিষ্ট্যযুক্ত C]N, CeN, এবং C]CH Ce6 এর শিখরগুলি 1633, 1078 এবং 633 সেমি 1-এ প্রদর্শিত হয়েছে। , যথাক্রমে।

cistanche tubulosa- ইমিউন সিস্টেম উন্নত

3.2। সহ-একত্রিত প্রক্রিয়া এবং শেল গঠন গঠন

পরবর্তীকালে, সহ-সমাবেশ প্রক্রিয়াটি আরও ভালভাবে বোঝার জন্য, আমরা প্রথমে NPs-এর প্রাথমিক গঠন প্রক্রিয়াটি তদন্ত করেছি। আমরা দেখেছি যে Ce6 এর সাথে COS-BA-এর সহ-সমাবেশ স্বতঃস্ফূর্ত হতে পারে কারণ এই দুটি প্রজাতি গোলাকার ন্যানোস্ট্রাকচার গঠন করতে পারে এমনকি যদি সোনিকেশন (সহায়ক তথ্য চিত্র S7) ছাড়াই হতে পারে, যা নেতিবাচক গিবস মুক্ত শক্তি পরিবর্তনের (ডিজি) কারণে হতে পারে। ) সহ-সমাবেশে37. এই স্বতঃস্ফূর্ত সমাবেশটি COS-BA এবং Ce6 এর মধ্যে একটি শক্তিশালী আন্তঃআণবিক মিথস্ক্রিয়া করার পরামর্শ দিয়েছে। সাধারণত, সুপারমোলিকুলার সেলফ (বা কো-) অ্যাসেম্বলিতে আন্তঃআণবিক মিথস্ক্রিয়াগুলি হল ননকোভ্যালেন্ট p‒p-স্ট্যাকিং, হাইড্রোজেন বন্ধন এবং ভ্যান ডার ওয়ালস ফোর্স 38,39। এই বিশ্লেষণের জন্য, আমরা তারপরে COS-BA/Ce6 NPs (চিত্র 1H এবং F) এর UV শোষণের তদন্ত করেছি, যা একটি লাল-স্থানান্তরিত Soret (410 nm) এবং Qy (667 nm) ব্যান্ডগুলির তুলনায় সুপারিশ করেছিল বিনামূল্যে Ce6 (যথাক্রমে 405 এবং 665 এনএম)। এদিকে, COS-BA-এর উল্লেখযোগ্য লাল-স্থানান্তরিত বৈশিষ্ট্যযুক্ত শোষণও পাওয়া যেতে পারে, যা COS-BA এবং Ce640 এর মধ্যে সম্ভাব্য আন্তঃআণবিক পিপি স্ট্যাকিং নির্দেশ করে। তাছাড়া, সার্ফ্যাক্ট্যান্ট সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট (SDS, 0.2% w/v) (সহায়ক তথ্য চিত্র S8) দিয়ে ইনকিউব করার পরে, COS-BA/Ce6 NPs 641 nm-এ একটি নতুন নীল-পরিবর্তিত Qy ব্যান্ড দেখিয়েছে এবং নাটকীয়ভাবে ফ্লুরোসেন্স পুনরুদ্ধার করেছে, প্রদর্শন করেছে যে হাইড্রোফোবিক মিথস্ক্রিয়াগুলি সহ-সমাবেশ 28-এ অবদান রাখে। যেহেতু এই সহযোগী ননকোভ্যালেন্ট মিথস্ক্রিয়া, সহ-সমাবেশগুলি জলে অসাধারণ ফ্লুরোসেন্স শেনিং (98.2%) দেখিয়েছে (চিত্র 1I)। সমষ্টিগতভাবে, এটা বিশ্বাস করা যুক্তিসঙ্গত যে পি-পি স্ট্যাকিং এবং হাইড্রোফোবিক মিথস্ক্রিয়া সহ-সমাবেশ নির্মাণের জন্য প্রধান চালিকা শক্তি হতে পারে। এরপরে, সমাবেশ প্রক্রিয়াটিকে আরও স্বজ্ঞাতভাবে কল্পনা করতে এবং শেল-গঠিত NPগুলি কেন গঠন করতে পারে তার অন্তর্নিহিত কারণগুলি প্রকাশ করার জন্য, আমরা একটি জলের বাক্সে 16টি অপ্টিমাইজড COS-BA অণু এবং অতিরিক্ত দুটি Ce6 সমন্বিত একটি সরলীকৃত আণবিক গতিবিদ্যা (MD) সিমুলেশন মডেল সম্পাদন করেছি। . প্রাথমিকভাবে, আমরা সিমুলেশন সময়ের 5 এনএসের মধ্যে COS-BA স্ব-সমাবেশগুলির সম্ভাব্য মিথস্ক্রিয়া/বাইন্ডিং মূল্যায়ন করেছি (চিত্র 2A এবং সহায়ক তথ্য চিত্র। S9)। আমরা দেখেছি যে, COS ভগ্নাংশে অসংখ্য আন্তঃআণবিক হাইড্রোজেন বন্ধন ব্যতীত, COS-BA-এর মধ্যে কয়েকটি জোড়া আন্তঃআণবিক H-বন্ধনও লক্ষ্য করা যেতে পারে (চিত্র 2B এবং সহায়ক তথ্য চিত্র S10), যা নির্দেশ করে যে হাইড্রোজেন বন্ধন এক হতে পারে। COS-BA NPs গঠনের প্রধান চালিকা শক্তি। বিশেষ করে আকর্ষণীয়, COS-BA স্ব-সমাবেশে, সমস্ত COS-BA অণু একটি আপাতদৃষ্টিতে প্রতিসম কাঠামো গঠন করে (চিত্র 2C)। এই আকর্ষণীয় ঘটনাটি আমাদের এই সম্পত্তি এবং শেল-গঠিত COSBA NPs গঠনের মধ্যে সম্ভাব্য সম্পর্ক অন্বেষণ করতে অনুপ্রাণিত করেছে। তারপরে, আমরা বাক্সের ইউনিটগুলি প্রসারিত করার চেষ্টা করেছি। আশ্চর্যজনকভাবে, COS-BA অণু সমন্বিত সংযুক্ত বাক্সগুলি নিয়মিতভাবে সাজানো হয়েছিল যার ফলে একটি "অর্থোগোনাল" ফাঁপা নেটওয়ার্ক কাঠামো তৈরি হয়েছিল (সহায়ক তথ্য চিত্র S11)। আরও গুরুত্বপূর্ণ, আমরা এলোমেলোভাবে শেল অণুগুলির বেধ গণনা করেছি এবং খুঁজে পেয়েছি যেগুলি TEM (w2.35 nm) (চিত্র 2D) এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। ফাঁকা নেটওয়ার্ক কাঠামো গঠনের এই প্রবণতা শেলস্ট্রাকচার্ড এনপি গঠনের জন্য দায়ী হতে পারে। এই ধারণাটি পরীক্ষা করার জন্য, COS-BA/ Ce6 সহ-সমাবেশগুলির MD কাঠামো সিমুলেট করা হয়েছিল (চিত্র 2E এবং সহায়ক তথ্য চিত্র S12)। সিওএস-বিএ স্ব-সমাবেশগুলির মতো, সহ-সমাবেশগুলিতেও প্রচুর সংখ্যক ইন্ট্রামলিকুলার এবং আন্তঃআণবিক এইচ-বন্ড পাওয়া গেছে (চিত্র 2এফ এবং সহায়ক তথ্য চিত্র। S13)। অতিরিক্তভাবে, COS-BA এর C]C এবং Ce6 এর সুগন্ধযুক্ত রিং এর মধ্যে সম্ভাব্য pp স্ট্যাকিং সহ-সমাবেশগুলিতে (চিত্র 2G) পরিলক্ষিত হয়েছিল, যা পূর্ববর্তী UV তদন্তের ডেটার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। বাক্সের সংখ্যা বাড়ানোর পরে, অনুরূপ ফাঁপা নেটওয়ার্ক কাঠামো এখনও পাওয়া যেতে পারে, শুধুমাত্র হ্রাসকৃত নিয়মিততা এবং অর্থগোনালিটি (সহায়ক তথ্য চিত্র S14)। এটি COSBA NPs-এর তুলনায় COS-BA/Ce6 NPs-এর অ-অভিন্ন রূপবিদ্যার সম্ভাব্য কারণ হতে পারে। তদুপরি, আণবিক শেল-স্তরের দূরত্বটিও TEM (চিত্র 2H) ব্যবহার করে দেখা যায় NPs-এর শেল বেধের (w2.35 nm) কাছাকাছি। সম্মিলিতভাবে, আমরা অনুমান করেছি যে শেল স্ট্রাকচার্ড COS-BA/Ce6 NPs বা COS-BA NPs এর গঠন মূলত ফাঁপা শেল নেটওয়ার্ক কাঠামোতে একত্রিত হওয়ার অণুগুলির এই প্রবণতার জন্য দায়ী হতে পারে।

চিত্র 1 কাইটোসান অলিগোস্যাকারাইড-সংশোধিত বেটুলিনিক অ্যাসিড (COS-BA) প্রোড্রাগ-মিডিয়াটেড ন্যানো-অ্যাসেম্বলি COS-BA/Ce6 NPs-এর বানান এবং বৈশিষ্ট্য। (A) COS-BA এর 1 H NMR-এর পরিবর্ধিত মূল অবস্থান। (B) বিভিন্ন COS-BA/Ce6 অনুপাত সহ সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NP-এর প্রস্তুতি। (C) বিল্ডিং ব্লক হিসাবে COS-BA এবং Ce6 (মোলার অনুপাত, 8:1) ব্যবহার করে COS-BA/Ce6 NPs-এর আকার বিতরণ। (D) জলের দ্রবণীয়তা এবং সহ-সমাবেশগুলির Tyndall প্রভাব, একটি কোলয়েড প্রকৃতি নির্দেশ করে। (E) বিনামূল্যে COS-BA স্ব-সমাবেশ এবং সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs-এর SEM এবং TEM ছবি। (F) COS-BA/Ce6 NPs এর ভৌত রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যের সারাংশ। (G) FT-IR স্পেকট্রা, (H) UV Vis স্পেকট্রা, এবং (I) বিনামূল্যে Ce6, COS-BA, এবং জলে সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs-এর ফ্লুরোসেন্স নির্গমন স্পেকট্রা৷

চিত্র 2 (A) COS-BA স্ব-সমাবেশ এবং (E) 8:1 (COS-BA) এর কাঠামোগত ইউনিট মোলার অনুপাত সহ 5 এনএসের জন্য আণবিক গতিবিদ্যা (MD) সিমুলেশনের পরে সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs এর কাঠামো /Ce6, Ce6 লোডিং দক্ষতার উপর ভিত্তি করে গণনা করা হয়)। লাইন মডেলটি H2O এর জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল এবং স্টিক মডেলগুলি COS-BA বা Ce6 অণুকে উপস্থাপন করে, যেখানে Ce6 এর C পরমাণুগুলি বেগুনি দিয়ে লেবেলযুক্ত। (B) এর স্ব-সমাবেশ এবং (F) COS-BA/Ce6 NPs সহ-সমাবেশগুলিতে COS-BA অণুগুলির মধ্যে হাইড্রোজেন বন্ডের তথ্য৷ (C) MD সিমুলেশনের পরে COS-BA আণবিক বিন্যাসের দৃশ্যত প্রতিসম কাঠামো। (G) COS-BA এবং Ce6 এর মধ্যে সম্ভাব্য আণবিক মিথস্ক্রিয়া সম্ভাব্য pp স্ট্যাকিং দেখায়। (D) বিনামূল্যে COSBA স্ব-সমাবেশ এবং (H) COS-BA/Ce6 NPs সহ-সমাবেশগুলির সংশ্লিষ্ট MD বক্সগুলিকে প্রসারিত করার পরে একটি "অর্থোগোনাল" ফাঁপা নেটওয়ার্ক কাঠামোতে শেল অণুগুলির নির্দেশিত বেধ।

3.3। উন্নত 1 O2 প্রজন্মের শক্তি প্রক্রিয়া

এর পরে, আমরা সিঙ্গলেট অক্সিজেন (1 O2) এর জেনারেশনকে আরও পরীক্ষা করেছি, যা একটি প্রোব হিসাবে DPBF (1,3-ডিফেনিলাইসোবেনজোফুরান) ব্যবহার করে PDT কার্যকারিতার একটি সমালোচনামূলক প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS)। DPBF-এর সাথে COS-BA/ Ce6 NPs-এর মিশ্রণের দ্রবণগুলির টেকসই বিকিরণের পরে, DPBF-এর UV শোষণ তীব্রতায় হ্রাস পেয়েছে, যা 1 O2 প্রজন্মকে নির্দেশ করে (চিত্র 3A)। মিথিলিন ব্লু (MB) রেফারেন্সের সাথে তুলনা করার পরে, COS-BA/ Ce6 NPs-এর F ( 1 O2) হিসাবে গণনা করা হয়েছিল 0.26, বিনামূল্যে Ce6 (FZ0.19) থেকে সামান্য বেশি (চিত্র 3বি)। সাধারণত, ফটোসেনসিটাইজার দ্বারা শোষিত শক্তি তিনটি শিথিলকরণ পথের মধ্য দিয়ে যাবে যার মধ্যে রয়েছে ফ্লুরোসেন্স, কম্পনশীল শিথিলকরণের মাধ্যমে গরম করার প্রভাব এবং একটি ইন্টারসিস্টেম ক্রসিং (ISC)41 এর মাধ্যমে ROS জেনারেশন। উল্লেখযোগ্যভাবে নিভে যাওয়া ফ্লুরোসেন্স নির্গমনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, COS-BA/ Ce6 NPs এছাড়াও জলে কোনো গরম করার প্রভাবকে উন্নীত করেনি (সহায়ক তথ্য চিত্র S15), যা COS-BA-এর সাথে Ce6-এর সহ-সমাবেশের পরে একটি বর্ধিত ISC প্রক্রিয়া বোঝায়, এইভাবে নেতৃত্ব দেয় উন্নত 1 O2 প্রজন্মের কাছে। এই ধরনের প্রভাবের আণবিক প্রক্রিয়াকে আরও ব্যাখ্যা করার জন্য, আমরা ঘনত্ব কার্যকরী তত্ত্ব (DFT) (চিত্র 3C) দ্বারা MD সিমুলেশন থেকে প্রাপ্ত সম্ভাব্য pp স্ট্যাকিং সমন্বিত COS-BA/Ce6 এর সম্ভাব্য একক-অণু মডেলটিকে অপ্টিমাইজ করার এবং গণনা করার চেষ্টা করেছি। . আশ্চর্যজনকভাবে, COS-BA/Ce6 ফ্রি Ce6 (579.30 nm) এর তুলনায় 581.24 nm একটি পর্যবেক্ষণযোগ্য লাল-স্থানান্তরিত UV শোষণ দেখিয়েছে, যা পিপি স্ট্যাকিং (চিত্র 3D) এর ঘটনাকে নির্দেশ করে। যদিও COS-BA/Ce6-এর এনার্জি মিনিমাইজড জ্যামিতি ইনপুটেড MD কনফিগারেশনের সাথে সামান্য স্ট্রাকচারাল পার্থক্য দেখিয়েছে, C]C বা C]O বন্ডের মধ্যে COS-BA এর মধ্যে স্বাতন্ত্র্যসূচক pstacking Ce6 এর পোরফাইন রিং এর সাথে এখনও পর্যবেক্ষণযোগ্য ছিল, আরও যাচাই করে যে উপরে p-p স্ট্যাকিং সম্ভব। ইতিমধ্যে, এটি সম্প্রতি প্রমাণিত হয়েছে যে p‒p স্ট্যাকিং দ্বারা বর্ধিত ইলেকট্রন-দানের দক্ষতা ISC প্রক্রিয়া42কে সহজতর করতে পারে, যখন ISC হার (KISC) (1/DEST) 2,43 এর সমানুপাতিক। অর্থাৎ, ফটোসেনসিটাইজারের নিম্ন শক্তির ব্যবধান (DEST) দক্ষ ROS উৎপাদনের প্রচার ISC প্রক্রিয়াকে উন্নত করবে। আমরা পরবর্তীতে যথাক্রমে Ce6 এবং COS-BA/Ce6 (চিত্র 3E) এর সর্বনিম্ন উত্তেজিত সিঙ্গেল স্টেট (S1) এবং ট্রিপলেট স্টেট (T1) গণনা করি। ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে COS-BA/Ce6 ফ্রি Ce6 (1.2001 eV) এর তুলনায় 1.1892 eV-এর হ্রাস DEST দেখিয়েছে, উন্নত ISC প্রক্রিয়া নিশ্চিত করেছে। DEST-এর হ্রাস 1 O2 উৎপাদনের জন্য সহায়ক, যা অন্যান্য ন্যানোফটোসেনসিটাইজার 44-এও যাচাই করা হয়েছে। একসাথে নেওয়া, পি-স্ট্যাকিং COS-BA-এর সাথে সহ-সমাবেশের পরে Ce6-এর DEST কমিয়ে দেয়, এইভাবে উন্নত 1 O2 প্রজন্মের দিকে পরিচালিত করে।

চিত্র 3 COS-BA/Ce6 NPs দ্বারা প্ররোচিত উন্নত 1 O2 প্রজন্মের শক্তি প্রক্রিয়া। (A) COS-BA/Ce6 NPs-এর দীর্ঘস্থায়ী বিকিরণের পর 1,3-ডিফেনাইলিসোবেনজোফুরান (DPBF)-এর ফটোডিকপোজিশনের UV ভিস স্পেকট্রা। (B) DPBF UV শোষণ পরিবর্তনের (DOD) প্রথম-ক্রমের প্লটগুলিতে, রেফারেন্স যৌগ হিসাবে DMSO-তে মিথিলিন ব্লু (MB) (FZ 0.52) ব্যবহার করে 1 O2 ফলন মূল্যায়ন করা হয়েছিল। (C) পাশ এবং সামনে থেকে দেখা একটি সম্ভাব্য একক-অণু COS-BA/Ce6 মডেলের শক্তি-সংকুচিত কাঠামো, যা MD সিমুলেশন এবং DFT গণনার পরে COS-BA এর সাথে Ce6-এর মধ্যে প্রাথমিক আণবিক কনফিগারেশন অনুসারে প্রাপ্ত হয়েছিল। (D) বিনামূল্যে Ce6 এর UV Vis শোষণ স্পেকট্রা ট্রানজিশন (উল্লম্ব বার) এবং একটি অপ্টিমাইজ করা COS-BA/Ce6 মডেলের পূর্বাভাস। (E) তাদের সর্বনিম্ন উত্তেজিত সিঙ্গেল স্টেট (S1) এবং সর্বনিম্ন ট্রিপলেট স্টেট (T1), যথাক্রমে, [Gaussian 09/B3LYP/6-31G (d, p)] গণনা করা হয়েছে। যেখানে DEST কে ES1 ET1 হিসাবে গণনা করা হয়েছিল৷

3.4। কেমোথেরাপির সুপ্ততার বৈশিষ্ট্য

পরবর্তীকালে, বর্তমান গবেষণায় নকশার ধারণাটি যাচাই করার জন্য যে অ্যামফিফিলিক COS-BA অণু বিকাশ করা হাইড্রোফিলিসিটি বৃদ্ধির মাধ্যমে কোষ গ্রহণের উন্নতির মাধ্যমে কার্যকরভাবে BA-এর থেরাপিউটিক প্রভাবকে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং এর মধ্যে আরও উদ্দীপনা-প্রতিক্রিয়াশীল এবং সম্পূর্ণ হাইড্রোফিলিক COS-BA/Ce6 তৈরি করতে পারে। NPs স্বাভাবিক টিস্যুতে এর সুপ্ততা এবং টিউমার সাইটগুলিতে সক্রিয়করণের সুবিধা দেয়। এই অনুমান পরীক্ষা করার জন্য, আমরা প্রথমে বিভিন্ন বাফার সমাধানে (চিত্র 4A) COS-BA/Ce6 NPs-এর ড্রাগ রিলিজ আচরণ তদন্ত করেছি। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে COS-BA/Ce6 NPs 24 ঘন্টার পরে pH 5.6 এ 88% এবং pH 7.4 এ 57% ক্রমবর্ধমান Ce6 রিলিজের সাথে একটি pH- প্রতিক্রিয়াশীল আচরণ দেখিয়েছে। এই বৈশিষ্ট্যটি সম্ভবত অম্লীয় Hþ45 প্রবর্তনের পরে COS-BA/Ce6 NPs-তে বিদ্যমান অসংখ্য হাইড্রোজেন বন্ডের ধ্বংস থেকে উদ্ভূত হয়েছিল, এইভাবে Ce6 রিলিজ বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 4B)। সরাসরি অম্লীয় পরিবেশে ইনকিউবেশনের পরে COS-BA/Ce6 NPs-এর বিচ্ছিন্নকরণ দ্বারা এটি আরও নিশ্চিত করা হয়েছিল (চিত্র 4C)। এই পিএইচ-প্রতিক্রিয়াশীল বৈশিষ্ট্যটি দুর্বলভাবে অম্লীয় টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট34 এর কারণে একটি কার্যকর অ্যান্টিটিউমার থেরাপির জন্য উপকারী হতে পারে। এদিকে, COS-BA/Ce6 NPs-এর আরও ভাল স্থিতিশীলতা ছিল কারণ PBS এবং 1640-RMPI সেল কালচার মিডিয়ামে 10 দিনের জন্য ইনকিউবেশনের পরে কোনও উল্লেখযোগ্য আকার বা PDI পরিবর্তন লক্ষ্য করা যায়নি (সহায়ক তথ্য চিত্র S16), যা গুরুত্বপূর্ণ হবে আরও বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশনের জন্য তাদের সম্ভাব্য ব্যবহারের জন্য। পরবর্তীকালে, মুক্ত লিপোফিলিক BA (যোগাযোগ কোণ q: 133.3 ) এবং amphiphilic COS-BA (q: 52 ) (চিত্র 4D) এর সাইটোটক্সিসিটি মূল্যায়ন করে একটি স্ট্যান্ডার্ড মিথাইল থিয়াজোলিল-ডিফেনাইল টেট্রাজিয়াম (বিটিটিএমসিয়াম) হিসাবে আরও তদন্ত করা হয়েছিল। ভবিষ্যদ্বাণী অনুসারে, হয় 4T1 ক্যান্সার কোষ বা সাধারণ LO2 হেপাটোসাইটের জন্য, পৃথক COS-এর তুলনামূলকভাবে কম ডোজে মূলত কোনও অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপ নেই। এটি শুধুমাত্র উচ্চ ঘনত্বে (প্রায় মিলিগ্রাম স্তরে)30 NF-kB সিগন্যালিং পাথওয়েকে প্ররোচিত করার মাধ্যমে সক্রিয় করা COS-এর অ্যান্টি-প্রলিফারেশন প্রভাবগুলির কারণে হতে পারে। যেখানে, COS-BA অত্যন্ত কম IC50 মান (4T1 এর জন্য 6.03 mg/mL এবং LO2 এর জন্য 9.92 mg/mL) BA এর তুলনায় (4T1 এর জন্য 17.63 mg/mL এবং 20.53 mg/2m এর জন্য এমনকি 20.53 mg/mL) সহ উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত সাইটোটক্সিসিটি সম্পাদন করে। একই ভর ঘনত্বে (চিত্র 4ই এবং জে)। প্রাপ্ত ফলাফলগুলি বোঝায় যে জলে দ্রবণীয় COS-এর পরিবর্তন লিপোফিলিক BA-এর সেলুলার গ্রহণের দক্ষতাকে ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি করে, এইভাবে COS-BA-এর শক্তিশালী অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপের দিকে পরিচালিত করে। গ্রহণের দক্ষতা পরিমাপ করার জন্য, 4T1 কোষের মধ্যে BA বা COS-BA জমা হওয়া সরাসরি HPLC (সাপোর্টিং ইনফরমেশন Fig. S17) দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। ফলাফলগুলি স্পষ্টভাবে সমর্থন করে যে অ্যামফিফিলিক COS-BA বিনামূল্যে BA (প্রায় 3. উপরের উপসংহারটি HepG2 এবং MCF-7 ক্যান্সার কোষের বিরুদ্ধে amphiphilic COSBA এর উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত সাইটোটক্সিসিটি দ্বারা সমর্থিত হয়েছিল (সাপোর্টিং ইনফরমেশন Fig. S18), যা ডিজাইন ধারণার সাথে ভালভাবে সামঞ্জস্যপূর্ণ। Ce6-এর সাথে সহ-সমাবেশের পরে, আমরা দেখতে পেলাম যে COS-BA/Ce6 NPs বিকিরণ ব্যতীত 4T1 ক্যান্সার কোষের বিরুদ্ধে সমতুল্য COS-BA এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বাধাপ্রাপ্ত সাইটোটক্সিসিটি প্রদর্শন করে, বিশেষ করে 11.5 mg/mL, কিন্তু মৌলিক PDT কার্যকলাপ প্রভাবিত হয়নি ( চিত্র 4F)। এই ঘটনাটিকে আরও সম্পূর্ণরূপে যাচাই করার জন্য, আমরা MCF-7 এবং HepG2 সহ অন্যান্য ক্যান্সার কোষগুলির বিরুদ্ধে COS-BA/Ce6 NPs-এর ইন ভিট্রো সাইটোটক্সিসিটি আরও তদন্ত করেছি। মজার বিষয় হল, এমফিফিলিক COS-BA MCF-7 কোষের বিরুদ্ধে খুব শক্তিশালী সাইটোটক্সিসিটি দেখিয়েছে (চিত্র 4G), কিন্তু কেমোথেরাপিউটিক কার্যকলাপ Ce6 এর সাথে সহ-সমাবেশের পরে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, অর্থাৎ, অ-বিকিরণিত COS-BA/Ce6 NPs। অনুরূপ ফলাফল শুধুমাত্র সামান্য হ্রাস (চিত্র 4H) সঙ্গে HepG2 কোষে পরিলক্ষিত হয়েছে। উপরের সিদ্ধান্তগুলিকে আরও সমর্থন করার জন্য, আমরা সাধারণ মাউস ফাইব্রোব্লাস্ট L929 কোষ এবং মানব LO2 হেপাটোসাইট (চিত্র 4I) এর বিরুদ্ধে ন্যানো-অ্যাসেম্বলি এবং COS-BA-এর কেমোথেরাপিউটিক প্রভাবগুলিও মূল্যায়ন করেছি। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs উল্লেখযোগ্যভাবে মূল অত্যন্ত বিষাক্ত অ্যামফিফিলিক ড্রাগ COS-BA কমিয়েছে, চমৎকার জৈব সামঞ্জস্যতা দেখায়। সাইটোটক্সিসিটি বিশ্লেষণ করে, অ্যামফিফিলিক COS-BA-এর IC50 মানগুলি ক্যান্সার বা স্বাভাবিক কোষ নির্বিশেষে সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs-এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র 4J)। অর্থাৎ, সম্পূর্ণরূপে হাইড্রোফিলিক এবং উদ্দীপক-প্রতিক্রিয়াশীল ন্যানো কোস্যাম্বলিগুলি তৈরি করা কার্যকরভাবে অ্যামফিফিলিক ড্রাগ COS-BA-এর উচ্চ সাইটোটক্সিসিটি দমন করতে পারে। স্বাতন্ত্র্যসূচক pH-প্রতিক্রিয়াশীল বৈশিষ্ট্য বিবেচনা করে, মনে হয় যে COS-BA/Ce6 NPগুলি কাঙ্ক্ষিত কম কেমোথেরাপির বিষাক্ততা সহ স্বাভাবিক টিস্যুতে সুপ্ত থাকবে, কিন্তু দুর্বল অম্লীয় টিউমারে অত্যন্ত বিষাক্ত COS-BA এর উদ্দীপক মুক্তির কারণে টিউমার টিস্যুতে সক্রিয় থাকবে। মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট একসাথে নেওয়া, কেমোথেরাপিউটিক রিএজেন্টগুলির ব্যাপকভাবে রিপোর্ট করা নিউ-ফাংশনালাইজেশনের বিপরীতে যা ক্যান্সার প্রতিরোধী কার্যকলাপকে বাড়িয়েছে 22,23, অ্যামফিফিলিক COS-BA মধ্যস্থতাযুক্ত ন্যানো-অ্যাসেম্বলিগুলি কেবল একটি স্মার্ট "সুপ্তাবস্থা" বৈশিষ্ট্য প্রদর্শন করে না, যার সাথে প্রতারণামূলক কেমোথেরাপির প্রভাব রয়েছে কিন্তু বিশাল সম্ভাবনাময় PDT কার্যকলাপ দেখায়। স্মার্ট অ্যান্টিটিউমার থেরাপির জন্য।

চিত্র 4 (A) পিবিএস (pH 7.4, 6.5 বা 5.6) এ COS-BA/Ce6 NPs থেকে ইন ভিট্রো Ce6 প্রকাশ করা প্রোফাইল যাতে টুইন 80 (0.5%, v/v) রয়েছে 37 C. (B) সম্ভাব্য pH- প্রতিক্রিয়াশীল প্রক্রিয়া যা Hþ NPs-এর বিচ্ছিন্নকরণকে ট্রিগার করে। (C) প্রায় pH 4৷{45}} জলে সরাসরি ইনকিউবেশনের পরে COS-BA/Ce6 NPs-এর বিচ্ছিন্নকরণ৷ (D) যথাক্রমে বিনামূল্যে BA, Ce6, COS-BA, এবং COS-BA/Ce6 NPs-এর যোগাযোগ কোণ৷ (ই) প্রতিনিধি ক্যান্সার 4T1 এবং সাধারণ LO2 কোষের বিরুদ্ধে বিনামূল্যে BA, COS, এবং amphiphilic COS-BA-এর সেল সাইটোটক্সিসিটি। (F) 4T1, (G) MCF-7, (H) HepG2 ক্যান্সার কোষের কোষের কার্যকারিতা নির্দেশিত সমতুল্য COS-BA ঘনত্বে বিকিরণ সহ/বিহীন বিনামূল্যে COS-BA, COS-BA/Ce6 NPs দিয়ে ইনকিউবেশন করার পরে 24 ঘন্টার জন্য (I) সাধারণ LO2 এবং L929 কোষের বিপরীতে বিনামূল্যে COS-BA, নন-ইরেডিয়েটেড COS-BA/Ce6 NP-এর সেল সাইটোটক্সিসিটি। (J) ক্যান্সার এবং স্বাভাবিক কোষের বিরুদ্ধে COS-BA-এর IC50 বিশ্লেষণ। ডেটা SD (n Z 6) হিসাবে প্রকাশ করা হয়। *P ˂ 0.05, **P ˂ 0.01, এবং ***P ˂ 0.001 উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখায়।

এই কেমোথেরাপি সুপ্ততার বৈশিষ্ট্যের পিছনে সম্ভাব্য কারণগুলি অন্বেষণ করতে, COS-BA/Ce6 NPs-এর সময়-নির্ভর সেলুলার গ্রহণের আচরণটি 4T1 ক্যান্সার কোষগুলির সাথে ইনকিউবেশন করে ধারাবাহিকভাবে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে, যদিও COS-BA/Ce6 NPs উল্লেখযোগ্য ফ্লুরোসেন্স শেনিং দেখিয়েছে, তবুও তারা শক্তিশালী সাইটোপ্লাজমিক রেড ফ্লুরোসেন্সের কারণে ফ্রি Ce6-এর তুলনায় বর্ধিত ফ্যাগোসাইটিক দক্ষতা দেখিয়েছে, যেমন ফ্লো সাইটোমেট্রি কোয়ান্টিটেটিভ অ্যানালিসিস (F.5) দ্বারা নির্ধারিত। এনপিগুলির এই উন্নত সেলুলার অভ্যন্তরীণকরণকে এন্ডোসাইটোসিস 21 এর জন্য দায়ী করা যেতে পারে। একসাথে নেওয়া, আমরা অনুমান করেছি যে, যদিও উচ্চ জলে দ্রবণীয় সহ-সমাবেশগুলি COS-BA/Ce6 NPs (যোগাযোগ কোণ q: 36.7 ) লিপোফিলিক Ce6 (q: 132.6, BA এর কাছাকাছি) এর তুলনায় উন্নত সেলুলার এন্ডোসাইটোসিস প্রদর্শন করেছে, ফ্যাফিসিটোসিসের হ্রাস অ্যামফিফিলিক COS-BA অণুর তুলনায় NPs প্রদর্শিত হতে পারে, এইভাবে COS-BA/Ce6 NPs-এর কেমোথেরাপিউটিক সাইটোটক্সিসিটি দমন করে। অর্থাৎ, কোষ গ্রহণের দক্ষতা উচ্চ থেকে নিম্ন পর্যন্ত যেমন অনুক্রম: অ্যামফিফিলিক COS-BA, হাইড্রোফিলিক COS-BA/Ce6 NPs, লিপোফিলিক BA বা Ce6। আরও গুরুত্বপূর্ণভাবে, সেলুলার এনপিগুলির অপর্যাপ্ত বিচ্ছিন্নতা দুর্বল কেমোথেরাপিউটিক প্রভাবের আরেকটি গুরুত্বপূর্ণ কারণ হতে পারে, যার সবকটিই COS-BA/Ce6 NPs-এর স্মার্ট কেমোথেরাপি সুপ্ততার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। এছাড়া, যেহেতু NPs-এর বিচ্ছিন্নকরণ বিশেষভাবে টিউমার কোষের অম্লীয় পরিবেশে পরিচালিত হয়েছিল, pH- প্রতিক্রিয়াশীল বৈশিষ্ট্য প্রদর্শনের জন্য, আমরা আরও চেষ্টা করেছি সাধারণ LO2 কোষে COS-BA/Ce6 NPs-এর গ্রহণের প্রভাব তুলনা করার (চিত্র 5B) . যাইহোক, COS-BA/Ce6 NPs LO2 কোষে উল্লেখযোগ্যভাবে বাধাপ্রাপ্ত Ce6 রেড ফ্লুরোসেন্স প্রদর্শন করেনি। বিপরীতে, LO2 দ্বারা গ্রহণের আচরণটি 4T1 ক্যান্সার কোষের অনুরূপ ছিল, যা পরামর্শ দেয় যে COS-BA/Ce6 NP গুলি এমনকি সাধারণ কোষগুলিতেও বিচ্ছিন্ন হতে পারে, যার ফলে ভিতরে বিদ্যমান দুর্বল অম্লীয় pH আন্তঃকোষীয় অংশগুলি (এন্ডোসোম/লাইসোসোম) হতে পারে। ক্যান্সার এবং স্বাভাবিক কোষ উভয়ই ৪৬। যেহেতু এনপি-এর সেলুলার গ্রহণ এন্ডোসাইটোসিস প্রক্রিয়ার উপর নির্ভর করে, তাই সরাসরি ওষুধের ইনকিউবেশন সেলুলার স্তরে COS-BA/Ce6 NPs-এর pH- প্রতিক্রিয়াশীলতাকে হাইলাইট করতে পারে না। তবুও, টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট (TME) সাধারণ টিস্যুর তুলনায় অত্যন্ত অম্লীয়। ক্যান্সার আন্তঃকোষীয় বা TME নির্বিশেষে, COS-BA/ Ce6 NPs pH- প্রতিক্রিয়াশীল হতে পারে এবং অত্যন্ত বিষাক্ত COS-BA নিঃসরণকে ট্রিগার করতে বিচ্ছিন্ন হতে পারে। যেখানে, স্বাভাবিক টিস্যুতে, COS-BA/Ce6 NPs শুধুমাত্র একটি সাধারণ সেলুলার পরিবেশে প্রবেশ করার পরে বিচ্ছিন্ন করা যেতে পারে, COSBA মুক্তির সম্ভাবনা হ্রাস করে। অতএব, আমরা টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্টে COS-BA/Ce6 NPs-এর কেমোথেরাপির সুপ্ততা বৈশিষ্ট্যটি বৈধ এবং নির্ভরযোগ্য, এবং বর্তমান গবেষণায় নকশা ধারণাটি সম্ভাব্য।

3.5। COS-BA/ Ce6 NPs-এর ইন ভিট্রো কেমোথেরাপি/পিডিটি অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকারিতা

অতিরিক্তভাবে, COS-BA/Ce6 NPs-এর ভিট্রো কেমোথেরাপি/পিডিটি অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকারিতা বিস্তারিত করার আগে এবং এন্ডোসাইটোসিস প্রক্রিয়াকে আরও উন্মোচন করার জন্য, আমরা ক্লোরপ্রোমাজিন (ক্ল্যাথ্রিন-মিডিয়াটেড) সহ সংশ্লিষ্ট এন্ডোসাইটিক ইনহিবিটর যুক্ত করে চারটি প্রধান এন্ডোসাইটোসিস পথ অধ্যয়ন করি। লাইসোসোম অ্যাসিডিফিকেশন ইনহিবিটর), নাইস্ট্যাটিন (ক্যাভিওলা-মিডিয়াটেড), এবং একটি ম্যাক্রোপিনোসাইটোসিস ইনহিবিটর ইআইপিএ (ইথিলিসোপ্রোপাইল অ্যামিলোরাইড) (চিত্র 5 সি এবং ডি)। আমরা লক্ষ্য করি যে nystatin এবং chlorpromazine এর প্রবর্তন EIPA এবং ক্লোরোকুইন ফসফেটের তুলনায় ফ্যাগোসাইটিক কার্যকারিতাকে আরও দক্ষতার সাথে বাধা দিতে পারে, স্বাভাবিক 37 C এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কমে যাওয়া সেলুলার ফ্লুরোসেন্স দেখায়। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে COS-BA/Ce6 NPs প্রধানত আমার দ্বারা অভ্যন্তরীণভাবে 37 সি-এর তুলনায়। ক্ল্যাথ্রিন এবং ক্যাভিওলা-মধ্যস্থ এন্ডোসাইটোসিস পথ। যেহেতু আন্তঃআণবিক মিথস্ক্রিয়া দ্বারা 1 O2 প্রজন্ম বৃদ্ধি পেয়েছে, COS-BA/Ce6 NPs Ce6 এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বর্ধিত আন্তঃকোষীয় ROS ফলন প্রদর্শন করে যেমনটি DCFH প্রোবের শক্তিশালী সবুজ প্রতিপ্রভ দ্বারা নির্দেশিত (চিত্র 5E), উচ্চতর ফোটোডাইনামিক দক্ষতা বোঝায়। এমটিটি অ্যাসেসগুলি দেখায় যে বিকিরণের অধীনে COS-BA/Ce6 NPs সমতুল্য Ce6 এর তুলনায় 4T1 কোষে একটি উল্লেখযোগ্যভাবে বর্ধিত প্রতিরোধের প্রভাব সঞ্চালন করে, যেখানে বিকিরণ ছাড়াই তুলনামূলকভাবে মাঝারি সাইটোটক্সিসিটি থাকে (চিত্র 5F)। উল্লেখযোগ্যভাবে, COS-BA/Ce6 NPs-এ Ce6 (0.53 mg/mL) এর IC50 ফ্রি Ce6 (1.39 mg/mL) (চিত্র 5G) থেকে অনেক কম ছিল, যা উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত PDT কার্যকারিতার পরামর্শ দেয়, যা ছিল মানুষের MCF-7 এবং HepG2 ক্যান্সার কোষের বিরুদ্ধে COSBA/Ce6 NPs-এর সাইটোটক্সিসিটি দ্বারা আরও নিখুঁতভাবে প্রদর্শিত হয়েছে (সহায়ক তথ্য চিত্র S19)। একইভাবে, বিনামূল্যে Ce6 এর সাথে তুলনা করে, তুলনামূলকভাবে কম IC25, IC50, এবং IC75 মানগুলি সহ-সমাবেশগুলিতেও পরিলক্ষিত হয়েছে (চিত্র 5G)। এদিকে, অন্ধকারে একক Ce6 PDT এবং NPs-এর একক কেমোথেরাপির সাথে তুলনা করে, COS-BA/Ce6 NPs বিকিরণের অধীনে উপরোক্ত তিনটি ক্যান্সার কোষের বিরুদ্ধে আরও কার্যকর সম্মিলিত কেমোথেরাপি/PDT অর্জন করেছে, একটি সমন্বয় দেখায় (সংমিশ্রণ সূচক: CI ˂ 1) ( চিত্র 5I)। এছাড়াও, ক্যালসিন-অ্যাসিটক্সিমিথাইল এস্টার (ক্যালসিন-এএম) এবং প্রপিডিয়াম আয়োডাইড (পিআই) ব্যবহার করে জীবিত/মৃত কোষের ফ্লুরোসেন্স ডুয়াল স্টেনিং আরও নিশ্চিত করেছে যে COS-BA/Ce6 NPs দক্ষতার সাথে সেল অ্যাপোপটোসিস এবং নেক্রোসিস প্ররোচিত করতে পারে, কারণ চিকিত্সা করা কোষগুলি প্রায় ছিল। লাল PI ফ্লুরোসেন্স সংকেত সহ যখন বিকিরণের পরে অতিরিক্ত 10 ঘন্টার জন্য সংস্কৃতি করা হয় (চিত্র 5H)। এদিকে, নন-ইরেডিয়েটেড COS-BA/Ce6 NPs (উচ্চ ডোজ Ce6: 3.2 mg/mL) এরও কিছু কেমোথেরাপিউটিক কার্যকলাপ ছিল যেমনটি একই সাথে AM এবং PI সংকেত দ্বারা দেখা যায়। COS-BA/Ce6 NPs-এর এই উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত PDT কার্যকলাপকে অতিরিক্ত 20 ঘন্টা (সাপোর্টিং ইনফরমেশন Fig. S20) জন্য চিকিত্সার পরে AM/PI স্টেনিং দ্বারা আরও বৈধ করা হয়েছিল। অধিকন্তু, COS-BA/Ce6 NPs-PDT-চিকিত্সা করা 4T1 কোষে 1 O2 এবং $OH48-এর আলাদাভাবে বিশেষ নির্গমনকারী সোডিয়াম অ্যাজাইড (SA) এবং D-mannitol (DM) যোগ করার সময়, স্পষ্টতই বর্ধিত কোষের কার্যকারিতা বোঝায় যে টাইপ I ($OH) এবং টাইপ II (1 O2) ফটোরিঅ্যাকশনগুলি একই সাথে COSBA/Ce6 NPs-মধ্যস্থিত PDT প্রক্রিয়ায় (চিত্র 5J) ঘটেছে। তদুপরি, COS-BA/Ce6 NPs বিশেষত নগণ্য লোহিত রক্তকণিকা হিমোলাইসিস (চিত্র 5K) দ্বারা নির্দেশিত হিসাবে আরও ভাল রক্তের সামঞ্জস্যের অধিকারী, যা শিরায় প্রশাসনের মাধ্যমে বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশনগুলির সম্ভাবনার পরামর্শ দেয়।

3.6। COS-BA/Ce6 NPs-এর ভিভো বায়োডিস্ট্রিবিউশনে

পরবর্তীকালে, ইন ভিভো ডিস্ট্রিবিউশন তদন্তের আগে, আমরা পরবর্তীতে COS-BA/Ce6 NPs-এর ফার্মাকোকিনেটিক্সের মূল্যায়ন করেছিলাম সমতুল্য Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs দিয়ে শিরায় ইনজেকশন দেওয়ার পরে রক্তে Ce6 ঘনত্ব পর্যবেক্ষণ করে। রক্তে Ce6 ঘনত্ব-সময়ের প্রোফাইল (চিত্র 6A) এবং তুলনামূলক ফার্মাকোকিনেটিক প্যারামিটার (সহায়ক তথ্য সারণী S1) স্পষ্টভাবে সমর্থন করে যে COS-BA/Ce6 NPs-এর রক্তপ্রবাহে দীর্ঘায়িত সঞ্চালন রয়েছে, যা টিউমারে আরও বেশি জমা হতে পারে। সাইট বিশেষ করে, COS-BA/Ce6 NPs 2 ঘন্টার মধ্যে দ্রুত রক্ত ​​নির্মূল করেছে, যা অনুকূল বায়োডিগ্রেডেবিলিটি বোঝায়। তদনুসারে, আমরা তখন COS-BA/Ce6 NPs (চিত্র 6B এবং C) এর ভিভো বায়োডিস্ট্রিবিউশন এবং টিউমার জমা করার ক্ষমতা তদন্ত করেছি। সার্বজনীনভাবে রিপোর্ট করা Ce6 nanocomposites33-এর মতো, COS-BA/Ce6 NPs পুরো শরীর জুড়ে দ্রুত বিতরণ করা যেতে পারে। বিশেষ করে প্রথম 4 ঘন্টার সময়, অ্যাসেম্বলিগুলি বিনামূল্যে Ce6 এর তুলনায় টিউমার সাইটগুলিতে স্পষ্টতই শক্তিশালী ফ্লুরোসেন্স নির্গমন প্রদর্শন করেছিল, যা COS-BA/Ce6 NPs-এর উন্নত ধারণ এবং টিউমার-লক্ষ্যযুক্ত সঞ্চয় ক্ষমতার পরামর্শ দেয়, সম্ভবত প্যাসিভ বর্ধিত ব্যাপ্তিযোগ্যতা ধারণ ক্ষমতা (EPR) এর জন্য দায়ী। ন্যানো কণা দ্বারা afforded14. 6 ঘন্টা পোস্টইনজেকশনের পরে, টিউমার সাইটগুলিতে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা ধীরে ধীরে দ্রুত হ্রাস পায়। উল্লেখযোগ্যভাবে, ফ্রি পজিটিভ ড্রাগ29 এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বর্ধিত টিউমার জমে থাকা সাধারণভাবে রিপোর্ট করা ন্যানোকম্পোজিটের বিপরীতে, COS-BA/Ce6 NPs বিনামূল্যে Ce6 (চিত্র 6C) এর তুলনায় 24 ঘন্টা পোস্ট-ইনজেকশনে টিউমার বসে খুব বিশিষ্ট জমা দেখায়নি, যা ছিল আরও এক্সাইজড টিউমারের ইমেজিং দ্বারা সমর্থিত (চিত্র 6D এবং ই)। প্রাকৃতিক ছোট জৈব অণুগুলির প্রবর্তনের জন্য এনপিগুলির চমৎকার জৈব-অবচনযোগ্যতা দায়ী হতে পারে। এটি অন্যান্য টেরপেনয়েড ছোট অণু-মধ্যস্থ ন্যানো-অ্যাসেম্বলির সাথেও পরিলক্ষিত হয়েছিল। এছাড়াও, COS-BA/Ce6 NPs বিনামূল্যে Ce6 (চিত্র 6E) হিসাবে অনুরূপ টিস্যু বিতরণ দেখায় এবং প্রাক্তন ভিভো গড় প্রতিপ্রভ তীব্রতা সাধারণত ভিভোতে উপস্থাপিত তুলনায় কম ছিল, যা আরও ভাল বায়োডিগ্রেডেবিলিটি বোঝায়। অতিরিক্তভাবে, NPs এবং Ce6 এর ইনজেকশনের পর 2 এবং 4 ঘন্টার মধ্যে ঘনিষ্ঠ ফ্লুরোসেন্স স্তরের পার্থক্য বিবেচনা করে, সেইসাথে পরীক্ষামূলক অপারেবিলিটি যা ইরেডিয়েশনের জন্য পর্যাপ্ত ব্যবধানের অনুমতি দেয়, প্রশাসনের 4 ঘন্টা পরবর্তী PDT থেরাপির জন্য হালকা সময় পয়েন্ট হিসাবে বেছে নেওয়া হয়েছিল।

COS-BA/Ce6 NPs-এর বর্ধিত ইপিআর প্রভাবকে আরও যাচাই করার জন্য বিনামূল্যে Ce6-এর তুলনায় 24 ঘণ্টায় খুব বেশি বিশিষ্ট টিউমার জমা না হওয়ার বিষয়টি বিবেচনা করে, আমরা ন্যানোড্রাগ দিয়ে ইনজেকশন দেওয়ার পরে বিভিন্ন সময়ে টিউমারের প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স চিত্রগুলি পর্যবেক্ষণ করেছি ( চিত্র 6F এবং G)। লক্ষণীয়ভাবে, হয় 20 মিনিটে বা 12 ঘন্টা পরে ইনজেকশনে, COS-BA/Ce6 NPs প্রকৃতপক্ষে বিনামূল্যে Ce6 এর চেয়ে টিউমার সাইটগুলিতে শক্তিশালী প্রতিপ্রভ নির্গমন দেখিয়েছিল, চমৎকার এবং উন্নত টিউমার জমা করার ক্ষমতা প্রদর্শন করে। এদিকে, সময় অতিবাহিত হওয়ার সাথে সাথে, টিউমার টিস্যুতে ধরে রাখা ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা ধীরে ধীরে দুর্বল হয়ে পড়ে (চিত্র 6G), যা সম্পূর্ণরূপে ভিভো প্রাণী ফ্লুরোসেন্স ইমেজিংয়ের ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। স্পষ্টতই, এই দ্রুত জৈবিক বিপাক এবং বর্ধিত টিউমার সঞ্চয়ন সম্ভাব্য দীর্ঘমেয়াদী পুঞ্জীভূত বিষাক্ততাকে এড়িয়ে যায়, যা উন্নত জৈব নিরাপত্তার সাথে অত্যন্ত দক্ষ অ্যান্টিটিউমার থেরাপির নিশ্চয়তা দেয়।

চিত্র 5 COS-BA/Ce6 NPs-এর ইন ভিট্রো অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকারিতা। (A) 4T1 ক্যান্সার কোষের সেলুলার অভ্যন্তরীণকরণ এবং (B) LO2 স্বাভাবিক কোষগুলি বিনামূল্যে Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs-এ 0.5 এবং 3 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছে, এবং ফ্লুরোসেন্স তীব্রতার অনুরূপ প্রবাহ সাইটোমেট্রিক বিশ্লেষণ। (C) নির্দিষ্ট এন্ডোসাইটিক পাথওয়ে অধ্যয়নের গ্রহণে বাধা এবং (D) ক্লোরপ্রোমাজিন, ক্লোরোকুইন, এনইলিপিএপিএ (এনইলিপিএপিএ) সহ এন্ডোসাইটিক ইনহিবিটর সহ/বিহীন COSBA/Ce6 NPs এর সাথে ইনকিউবেশনের পরে ফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা পরিমাপ করা কোষগুলির অনুরূপ প্রতিপ্রভ তীব্রতা। স্কেল বার Z 20 মিমি। (E) সেলুলার ROS প্রজন্ম বিনামূল্যে Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs দ্বারা প্ররোচিত (সমান Ce6: 1.6 mg/mL)। স্কেল বার Z 20 মিমি। (F) 24 ঘন্টার জন্য বিভিন্ন চিকিত্সার পরে 4T1 কোষের কোষের কার্যক্ষমতা। (G) যথাক্রমে 4T1, MCF-7, এবং HepG2 কোষের বিপরীতে বিনামূল্যে Ce6 এবং COS-BA/Ce6 NPs-এর IC25, IC50, IC75 বিশ্লেষণ। (H) Calcein-AM/propidium iodide (PI) COS-BA/Ce6 NPs (Ce6: 1.6 mg/mL)-এর লাইভ/মৃত দাগ - অতিরিক্ত 10 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে 4T1 কোষের চিকিত্সা করা, সেইসাথে অ-বিকিরণযুক্ত COS- BA/Ce6 NPs (Ce6: 3.2 mg/mL)। স্কেল বার Z 50 মিমি। (I) 4T1, MCF-7, এবং HepG2 কোষে COS-BA/Ce6 NPs-এর সংমিশ্রণ সূচক (CI), চৌ তালালে উপপাদ্য গণনা দ্বারা নির্ধারিত। (J) PDT প্রক্রিয়া (টাইপ I এবং টাইপ II) COS-BA/Ce6 NPs এর বিকিরণ দ্বারা প্ররোচিত এবং যথাক্রমে নির্দিষ্ট 1 O2 এবং $OH quencher সোডিয়াম এজিড (SA) এবং D-mannitol (DM) দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়। (কে) 4 ঘন্টার জন্য COS-BA/Ce6 NPs এর সাথে ইনকিউবেশনের পরে লোহিত রক্তকণিকার শতাংশ হিমোলাইসিস। ডেটা SD (n Z 3) হিসাবে প্রকাশ করা হয়। *P ˂ 0.05, **P ˂ 0.01, এবং ***P ˂ 0.001 উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখায়।

ছবি 6 ভিভো রক্ত ​​সঞ্চালন এবং COS-BA/Ce6 NPs এর বায়োডিস্ট্রিবিউশনে। (A) iv সমতুল্য Ce6 বা সহ-একত্রিত COS-BA/Ce6 NPs (n Z 3) এর ইঞ্জেকশন দেওয়ার পরে রক্তে Ce6 ঘনত্ব-সময়ের প্রোফাইল। (বি) বিভিন্ন সময় পয়েন্টে নির্দেশিত ওষুধের iv ইনজেকশনের পরে 4T1 টিউমার বহনকারী ইঁদুরের পুরো শরীরের প্রতিপ্রভ চিত্র। (C) (B) টিউমার সাইট থেকে প্রাপ্ত গড় ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা। (D) 24 ঘন্টায় উপরের ইঁদুর থেকে টিউমার এবং প্রধান অঙ্গগুলির প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স চিত্র এবং সংশ্লিষ্ট (E) ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা পরিমাণগত ফলাফল (n Z 3)। (F) Ce6 বা COS-BA/Ce6 NPs-এর iv ইনজেকশনের পরে বিভিন্ন সময়ে টিউমার এবং প্রধান অঙ্গগুলির প্রাক্তন ভিভো ফ্লুরোসেন্স ছবি এবং (G) টিউমারগুলির অনুরূপ ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা বিশ্লেষণ। ডেটা SD (n Z 3) হিসাবে প্রকাশ করা হয়।

3.7। ভিভো কেমোথেরাপি/পিডিটি কম্বিনেটরিয়াল অ্যান্টি-টিউমার চিকিত্সায় 

অনন্য সুপ্ততা বৈশিষ্ট্য, ভাল বায়োডিগ্রেডেবিলিটি এবং পিডিটি কার্যকলাপ দ্বারা অনুপ্রাণিত, ইন ভিভো কেমোথেরাপি/পিডিটি সংমিশ্রণ অ্যান্টিটিউমার থেরাপি তদন্ত করা হয়েছিল। 4T1 টিউমার বহনকারী ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে 6 টি দলে বিভক্ত করা হয়েছিল এবং মোট তিনটি ডোজের জন্য প্রতি 2 দিনে সমতুল্য Ce6 (3.5 মিলিগ্রাম/শরীরের কেজি) দিয়ে শিরায় ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। ইনজেকশনের 4 ঘন্টা পরে, হালকা গ্রুপের ইঁদুরের টিউমার সাইটগুলি 15 মিনিটের জন্য বিকিরণ করা হয়েছিল (চিত্র 7A)। এদিকে, সংশ্লিষ্ট টিউমারের পরিমাণ বা শরীরের ওজন প্রতি অন্য দিন রেকর্ড করা হয়েছিল। 14 দিনের চিকিত্সার পরে (চিত্র 7বি), বিকিরণ সহ বিনামূল্যে Ce6 এবং বিনামূল্যে COS-BA টিউমার দমনে অকার্যকর ছিল, সম্ভবত টিউমার টিস্যুতে সীমিত ওষুধ জমা হওয়ার কারণে। বিপরীতে, COS-BA/Ce6 NPs-এর বিকিরণের পরে, সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য টিউমার প্রতিরোধ পরিলক্ষিত হয়েছিল, চমৎকার কেমোথেরাপি/পিডিটি সংমিশ্রণের কার্যকারিতা যাচাই করে। গড় টিউমার ওজন (Fig. 7D) এবং বিচ্ছিন্ন টিউমারের অনুরূপ ফটোগ্রাফ (Fig. 7E) উভয়ই ইরেডিয়েশনের অধীনে COS-BA/Ce6 NPs-এর সর্বোত্তম অ্যান্টিটিউমার কার্যকারিতা প্রদর্শন করেছে, যেমন চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলি অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় সবচেয়ে ছোট টিউমারের আকার দেখায়। পিডিটি-চিকিত্সা করা COS-BA/Ce6 NPs-এর গড় টিউমার প্রতিরোধের অনুপাত 80.3% এ পৌঁছেছে, বিনামূল্যে Ce6 PDT (42.4%), এবং বিনামূল্যে COS-BA (38.5%) থেকে বেশি। উল্লেখযোগ্যভাবে, যদিও পূর্ববর্তী ইন ভিট্রো গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে আলো ছাড়াই COS-BA/Ce6 NPs কেমোথেরাপিউটিক কার্যকলাপের একটি সুপ্ত কার্য দেখায়, তবুও তারা বিনামূল্যে COS-BA (চিত্র 7D) এর তুলনায় একটি উন্নত টিউমার দক্ষতা (49.5%) সম্পাদন করে। আমরা অনুমান করেছি যে দুটি সম্ভাব্য কারণ এই ফলাফলে অবদান রাখে, একটি হল ব্যাপকভাবে রিপোর্ট করা EPR প্রভাবের কারণে COS-BA/Ce6 NPs-এর উচ্চতর টিউমার জমে। আরেকটি কারণ হল দুর্বল অম্লীয় টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট যা অত্যন্ত বিষাক্ত COS-BA নিঃসরণকে উদ্দীপিত করে। COS-BA (সাপোর্টিং ইনফরমেশন Fig. S21) এর উচ্চতর সমালোচনামূলক মাইসেল ঘনত্বের (CMC, 187 mg/mL) কারণে, এটি টিউমার পরিবেশে মনোমার অবস্থায় থাকতে পারে, এইভাবে অ-বিকিরণযুক্ত COS-এর উন্নত কেমোথেরাপির পক্ষে। BA/Ce6 NPs। এছাড়া, COS-BA/Ce6 NPs-এর উচ্চতর ক্যান্সার প্রতিরোধক কার্যকারিতা যাচাই করার জন্য, টিউমারের হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) স্টেনিং করা হয়েছিল (চিত্র 7G)।

চিত্র 7 একটি সাবকুটেনিয়াস 4T1 জেনোগ্রাফ্ট মডেলের সাথে কার্যকারিতা অধ্যয়ন। (A) ভিভো পিডিটি চিকিত্সার পরিকল্পিত চিত্র। (B) টিউমার বৃদ্ধির প্রোফাইল, (C) শরীরের ওজনের পরিবর্তন, এবং (D) নির্দেশিত গোষ্ঠীতে বিভিন্ন চিকিত্সার পরে 4T1- বহনকারী ইঁদুরের টিউমার প্রতিরোধ অনুপাত ধারণকারী টিউমার ওজনগুলি (প্রতিটি গ্রুপের জন্য n Z 5)। (ই) চিকিত্সার পরে প্রতিনিধি ইঁদুর থেকে এক্সাইজড টিউমারের চিত্র। (F) 14 দিনের জন্য COS-BA/Ce6 NPs এর সাথে চিকিত্সার পরে সিরাম জৈব রসায়ন বিশ্লেষণ। (জি) বিভিন্ন চিকিত্সার পরে এক্সাইজড টিউমার বিভাগের প্রতিনিধি H&E স্টেনিং। স্কেল বার Z 50 মিমি। (H) বিনামূল্যে Ce6 এবং COS-BA/Ce6 NPs PDT-চিকিত্সা করা টিউমার বিভাগগুলির TUNEL স্টেনিং। স্কেল বার Z 20 মিমি **P < 0.01 উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্দেশ করে।

ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে COS-BA/Ce6 NPs-PDT-চিকিত্সা করা টিউমার বিভাগগুলি গুরুতর টিস্যু ক্ষয় এবং নিউক্লিয়াসের ঘাটতি দেখায়, যখন অন্যান্য গ্রুপগুলিতে মাঝারি টিস্যু নেক্রোসিস পরিলক্ষিত হয়। একই সাথে, বিনামূল্যের Ce6 আলোর সাথে তুলনা করে, বিকিরণের অধীনে COS-BA/Ce6 NPs উল্লেখযোগ্যভাবে TUNEL-পজিটিভ কোষের সংখ্যা বৃদ্ধি করেছে যা আরও শক্তিশালী বাদামী নিউক্লিয়ার স্টেনিং (চিত্র 7H) দেখাচ্ছে, যা আরও চমৎকার কেমোথেরাপি/PDT সংমিশ্রণ থেরাপি নিশ্চিত করে। তদুপরি, সমস্ত গোষ্ঠীতে (চিত্র 7C) দেহের ওজনের কোনও সুস্পষ্ট বৈচিত্র লক্ষ্য করা যায়নি। এমনকি যদি COSBA/Ce6 NPs বা Ce6 লাইট গ্রুপগুলি প্রশাসনের সময় শরীরের ওজনে সামান্য হ্রাস পায়, তবে কিছু দিন পরে শরীরের ওজন স্বাভাবিক অবস্থায় ফিরে আসে। চিকিত্সার শেষে সংগ্রহ করা প্রধান অঙ্গগুলিতে কোনও স্পষ্ট ক্ষতি বা প্রদাহজনক ক্ষত পাওয়া যায়নি (সহায়ক তথ্য চিত্র S22), উভয়ই COS-BA/Ce6 NPs-এর কম/কোন পদ্ধতিগত বিষাক্ততা এবং ভাল জৈব নিরাপত্তা নির্দেশ করে। অধিকন্তু, যদিও COS-BA/Ce6 NPs প্রধানত লিভারের টিস্যুতে জমা হয়, তবে সংশ্লিষ্ট লিভার ফাংশন মার্কারগুলি (ALT, AST, এবং ALP) স্বাভাবিক সুস্থ ইঁদুরের (চিত্র 7F) তুলনায় উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন দেখায়নি, যা আরও ভাল জৈব সামঞ্জস্যের পরামর্শ দেয়। উপরন্তু, রেনাল ফাংশন মার্কার (BUN, CRE, এবং UA) এবং জৈব রাসায়নিক পরামিতি (ALB, এবং TBIL) সাধারণ ইঁদুরের মতোই বলে মনে হয়েছে, যা আরও ভাল জৈব নিরাপত্তা নির্দেশ করে। স্পষ্টতই, এই প্রোড্রাগ জৈব ক্ষুদ্র অণু COS-BA-মধ্যস্থিত সহ-সমাবেশগুলি COS-BA/Ce6 NPs এর একাধিক অনুকূল থেরাপিউটিক বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা ক্লিনিকাল মেডিসিনে অ্যাপ্লিকেশনের জন্য আকর্ষণীয় সম্ভাবনা উন্মুক্ত করে।

3.8। সম্মিলিত কেমোথেরাপি/PDT এবং অ্যান্টি-PD-L1 অবরোধের অ্যান্টিটিউমার প্রতিরোধ ক্ষমতা

সম্প্রতি, অসংখ্য উদ্ভাবনী গবেষণায় দেখা গেছে যে অন্যান্য চিকিত্সা পদ্ধতির সাথে ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপির সংমিশ্রণ কার্যকরভাবে প্রাথমিক বা দূরবর্তী টিউমার 1 নির্মূল করার জন্য টিউমার-নির্দিষ্ট ইমিউন প্রতিক্রিয়া জাগিয়ে তুলতে পারে। COS-BA/Ce6 NPs-এর অনন্য কেমোথেরাপির সুপ্ততা ফাংশন এবং চমৎকার কেমোথেরাপি/পিডিটি টিউমার অ্যান্টিটিউমার কার্যকারিতা দ্বারা উত্সাহিত, আমরা এইভাবে ভাবছি যে এটি অত্যন্ত দক্ষ অ্যান্টিটিউমার থেরাপির জন্য একটি ইমিউন অ্যাডজাভেন্ট অ্যান্টি-PD-L1 এর সহায়তায় ইমিউনোলজিকাল প্রতিক্রিয়াগুলিও ট্রিগার করতে পারে কিনা। . এটি কি দূরবর্তী টিউমারগুলির চিকিত্সা করতে পারে যা সরাসরি পিডিটি চিকিত্সা ব্যবহার করে চিকিত্সা করা যায় না, যার ফলে ক্লিনিকাল অ্যান্টিক্যান্সার অ্যাপ্লিকেশনগুলির জন্য একটি বিকল্প কৌশল প্রদান করে? এই অনুমান পরীক্ষা করার জন্য, এই গবেষণায়, একটি "দুটি টিউমার" মডেল প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল এবং বিস্তারিত পরীক্ষা পদ্ধতি চিত্র 8A-তে দেখানো হয়েছিল। সাধারণত, দুটি 4T1 টিউমার প্রতিটি মাউসের বাম এবং ডান দিকের উভয় অংশে টিকা দেওয়া হয়েছিল। শুধুমাত্র অ্যান্টি-পিডি-এল1-এর একটি সুস্পষ্ট ইমিউনোথেরাপিউটিক প্রভাব নেই, 50, পরীক্ষাগুলিকে 5টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল, যার মধ্যে একটি অচিকিৎসা করা হয়েছে, COS-BA/Ce6 NPs, COS-BA/Ce6 NPs-এর সাথে অ্যান্টি-PD-L1, COS- আলোর সাথে BA/Ce6 NPs, আলোর সাথে COS-BA/Ce6 NPs এবং অ্যান্টি-PD-L1। NPs (Ce6: 3.5 mg/kg) এর একটি একক iv ইনজেকশনের পরে, হালকা দলগুলির ডান টিউমারগুলি (প্রাথমিক টিউমার) 15 মিনিটের জন্য PDT/ কেমোথেরাপির ইমিউনোলজিকাল প্রভাবগুলি মূল্যায়নের জন্য বিকিরণ করা হয়েছিল, যখন বাম টিউমারগুলি (দূরবর্তী টিউমার) সমস্ত গোষ্ঠীতে কোনও চিকিত্সা ছাড়াই পৃথক কেমোথেরাপির জন্য নির্বাচন করা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, 2, 4 এবং 6 দিনে, ইমিউন গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে মোট তিনটি ডোজের জন্য অ্যান্টি-পিডি-এল1 অ্যান্টিবডি (প্রতি মাউস প্রতি 15 মিলিগ্রাম) দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। উল্লেখযোগ্যভাবে, PDT চিকিত্সা নির্বিশেষে, COS-BA/Ce6 NPs প্লাস অ্যান্টি-PD-L1 দক্ষতার সাথে প্রাথমিক টিউমারের অগ্রগতিকে বাধা দিতে পারে (চিত্র 8B)। এবং সংশ্লিষ্ট গড় টিউমার প্রতিরোধের অনুপাত পৃথকভাবে 86.7% (বিকিরণ) এবং 76.5% (কোনও বিকিরণ নয়), পৃথক কেমোথেরাপি (5.7%) বা কেমোথেরাপি/PDT (27.4%) চিকিত্সা (চিত্র 8C) থেকে অনেক বেশি। . 14 দিনের চিকিত্সার পরে ছিন্ন টিউমার (চিত্র 8D) এবং 4T1-বিহারকারী ইঁদুরের (সহায়ক তথ্য চিত্র S23) এর ছবিগুলিও উপরের সিদ্ধান্তটিকে দৃশ্যত সমর্থন করেছিল। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে NPs-ভিত্তিক কেমোথেরাপি এবং কেমোথেরাপি/PDT উভয়ই কার্যকরভাবে অ্যান্টিটিউমার প্রতিরোধ ক্ষমতা সক্রিয় করতে পারে। এদিকে, সবচেয়ে আশ্চর্যজনকভাবে, অ্যান্টি-পিডি-এল 1 ব্লকেড প্লাস এনপিগুলি অ-বিকিরণিত দূরবর্তী (বাম) টিউমারগুলিতে (চিত্র 8ই এবং এফ) একটি অসাধারণ টিউমার প্রতিরোধের প্রভাব প্রদান করে, যা সাধারণত একা COS-BA/Ce6 NPs থেকে শক্তিশালী ছিল, যা ছিল এছাড়াও চিকিত্সার পরে সংশ্লিষ্ট ছিন্ন টিউমার এবং ইঁদুরের চিত্রগুলি দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছে (চিত্র 8D এবং চিত্র। S23), আরও প্রমাণ করে যে COS-BA/Ce6 NPs দ্বারা প্ররোচিত দক্ষ অ্যান্টিটিউমার প্রতিরোধী প্রতিক্রিয়া।

এই দক্ষ টিউমার প্রতিরোধী প্রতিক্রিয়া সম্পূর্ণরূপে অন্বেষণ করার জন্য, CD8þ সাইটোটক্সিক টি লিম্ফোসাইটস (CTLs), ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপি 4 এর জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ ইমিউনোসাইট, চিকিত্সার 14 দিনের পরে ডান বা বাম টিউমারের ইমিউন কোষগুলিকে বিশ্লেষণ করে আরও মূল্যায়ন করা হয়েছিল। এটি পাওয়া গেছে যে COS-BA/Ce6 NPs প্লাস অ্যান্টি-PD-L1 PDT চিকিত্সা সহ বা ছাড়া প্রাথমিক টিউমারগুলিতে শক্তিশালী CD8þ CTL অনুপ্রবেশকে প্ররোচিত করেছে (চিত্র 8H এবং J)। COS-BA/Ce6 NPs-ভিত্তিক কেমোথেরাপি/PDT প্লাস অ্যান্টি-PD-L1 চিকিত্সার পরে CD8þ CTL অনুপ্রবেশ 11.3% পর্যন্ত ছিল, COS-BA/Ce6 NPs প্লাস অ্যান্টি-PD-L1 (9.63%) থেকে সামান্য বেশি এবং COS-BA/ Ce6 NPs-ভিত্তিক কেমোথেরাপি (5.12%) বা একা কেমোথেরাপি/PDT (4.07%) দিয়ে চিকিত্সা সহ অ্যান্টি-PD-L1 ছাড়া অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় অনেক বেশি। একইভাবে, নন-ইমিউন গ্রুপের তুলনায়, COS-BA/Ce6 NPs প্লাস এন্টিপিডি-এল1 পিডিটি চিকিত্সা (চিত্র 8I এবং কে) ছাড়া বা ছাড়া ইঁদুরের জন্য বাম (দূরবর্তী) টিউমারগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে CTL অনুপ্রবেশ লক্ষ্য করা গেছে। কেমোথেরাপি বা কেমোথেরাপি/পিডিটি সংমিশ্রণ থেরাপি দ্বারা প্ররোচিত অত্যন্ত কার্যকর ইমিউন প্রতিক্রিয়া বোঝায়। এদিকে, অ্যান্টি-PD-L1 প্রবর্তনের পর, COS-BA/Ce6-ভিত্তিক কেমোথেরাপি এবং কেমোথেরাপি/PDT উভয়ই একাধিক সাইটোকাইনের শক্তিশালী উত্পাদনের দিকে পরিচালিত করে যা টিউমার সহ CTLs8-এর সাইটোটক্সিক ফাংশন নিয়ন্ত্রণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। 14 দিনের চিকিত্সার পরে ইঁদুরের সিরাম নমুনায় নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-আলফা (TNF-a) (চিত্র 8L) এবং ইন্টারফেরন-গামা (IFN-g) (চিত্র 8M), আরও সমর্থন করে যে কার্যকর অ্যান্টিটিউমার প্রতিরোধী প্রতিক্রিয়া ছিল। এছাড়া, বিভিন্ন চিকিৎসা গোষ্ঠীতে (চিত্র 8N) শরীরের ওজনে কোনো আপাত পরিবর্তন পরিলক্ষিত হয়নি, যা এই সম্মিলিত কেমোথেরাপি/PDT/ইমিউনোথেরাপির অনুকূল জৈব নিরাপত্তা নির্দেশ করে। একসাথে নেওয়া, আমরা দেখতে পেলাম যে যদিও আলোর সাথে অ্যান্টি-PD-L1 প্লাস COSBA/Ce6 NPs সঠিক টিউমারগুলির বিরুদ্ধে অ-বিকিরণকারী গ্রুপের (76.5%) তুলনায় সামান্য বেশি টিউমার প্রতিরোধের অনুপাত (86.7%) দেখিয়েছে। PDT (চিত্র 8B‒D) এর প্রভাবের কারণে, PDT (চিত্র 8E‒G) এর উপস্থিতি (77.8%) বা অনুপস্থিতিতে (78.4%) বাম টিউমারগুলিতে থেরাপিউটিক প্রভাবগুলিতে কোনও উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি। আমরা অনুমান করি যে নিম্নলিখিত সম্ভাব্য কারণগুলি এই ঘটনার দিকে পরিচালিত করে। প্রথমত, কেমোথেরাপি বা পিডিটি-এর পদ্ধতির জন্য অ্যান্টি-পিডি-এল1 চেকপয়েন্ট অবরোধের ইমিউনোলজিক্যাল প্রভাব বৃদ্ধি করে, জমা হওয়া গবেষণায় প্রমাণিত হয়েছে যে এই চিকিত্সা পদ্ধতিগুলি টিউমার এলাকায় তীব্র প্রদাহকে ট্রিগার করতে পারে, যার ফলে টিউমার-সম্পর্কিত অ্যান্টিজেনের উপস্থাপনা বৃদ্ধি পায়। কোষ, এইভাবে ক্যান্সার কোষগুলিকে ICD8,9 সহ্য করতে প্ররোচিত করে। আইসিডির অধীনে থাকা টিউমার কোষগুলি ইমিউনোজেনিক্যালি মরে যাওয়া টিউমার কোষের পৃষ্ঠে ক্যালরেটিকুলিন (সিআরটি) এবং উচ্চ-গতিশীলতা গ্রুপ বক্স 1 (এইচএমজিবি1) প্রকাশ করে "বিপদ" সংকেত প্রকাশ করে "আমাকে খাওয়া" সংকেতগুলিকে নিয়ন্ত্রণ করবে, ডেনড্রাইটিক কোষগুলির সক্রিয়করণকে উন্নীত করবে। CTL সক্রিয় করতে, যার কার্যকলাপ অ্যান্টি-PD-L1 দ্বারা উন্নত করা যেতে পারে, এইভাবে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত অ্যান্টিক্যান্সার ইমিউনোথেরাপি51।

চিত্র 8 COS-BA/Ce6 NPs-ভিত্তিক কেমোথেরাপি/PDT প্লাস চেকপয়েন্ট ব্লকেড অ্যান্টি-PD-L1 ইমিউনোথেরাপির অ্যান্টি-টিউমার প্রভাব। (A) অ্যান্টি-PD-L1 থেরাপি সহ CNPs-ভিত্তিক কেমোথেরাপি/PDT-এর পরিকল্পিত চিত্র। (BeD) (B) টিউমার বৃদ্ধির প্রোফাইল, (C) গড় টিউমার ওজন, এবং (D) নির্দেশিত হিসাবে 14 দিনের জন্য বিভিন্ন চিকিত্সার পরে প্রাথমিক (ডান) টিউমারগুলির জন্য প্রতিনিধি ইঁদুরের কাছ থেকে বের করা টিউমারের চিত্র। (ইইজি) (ই) টিউমার বৃদ্ধির বক্ররেখা, (এফ) গড় টিউমার ওজন এবং (জি) নির্দেশিত বিভিন্ন চিকিত্সার পরে অ-বিকিরণিত দূরবর্তী (বাম) টিউমারগুলির জন্য এক্সাইজড টিউমারের চিত্র। (এইচ) ডান টিউমারে CD8þ T কোষের জনসংখ্যা এবং (J) CTL অনুপ্রবেশের শতাংশ 14 দিনের চিকিত্সার পরে প্রবাহ সাইটোমেট্রি দ্বারা পরিমাণগতভাবে সনাক্ত করা হয়েছিল। (I, K) 14 দিনে বাম টিউমারে CD8þ T কোষের জনসংখ্যা ফ্লো সাইটোমেট্রি (n Z 3) দ্বারা পরিমাণগতভাবে সনাক্ত করা হয়েছিল। (L) IFN-g এবং (M) TNF-a ELISA অ্যাস (n Z 3) দ্বারা পরিমাপ করা সহ 14 দিনের চিকিত্সার পরে সেরাতে সাইটোকাইনগুলির নিঃসরণ। (এন) বিভিন্ন চিকিত্সার সময় ইঁদুরের শরীরের ওজনের পরিবর্তন। *P < 0।{25}}5, **P < 0.01, এবং ***P < 0.001 উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখায়।

দ্বিতীয়ত, এই কাজে, COS-BA/Ce6 NPs একসাথে বাম এবং ডান টিউমারে বিতরণ করা যেতে পারে, বাম কেমোথেরাপি এবং ডান কেমোথেরাপি/PDT উভয়েরই ICD-এর অধীনে টিউমার কোষগুলিকে প্ররোচিত করার বিশাল সম্ভাবনা রয়েছে। এদিকে, COS-BA/Ce6 NPs শুধুমাত্র একটি ডোজে পরিচালিত হয়, ইমিউনোথেরাপি প্রধানত অ্যান্টি-PD-L1 এর তিনটি ডোজ নির্ভর করে, কেমোথেরাপি হোক বা কেমোথেরাপি/PDT, সেগুলি শুধুমাত্র প্রাইমার। পৃথক কেমোথেরাপি এবং সম্মিলিত কেমোথেরাপি/পিডিটি চিকিত্সার মধ্যে টিউমার সেল আইসিডি প্ররোচিত করার থেরাপিউটিক পার্থক্যগুলি খুব বিশিষ্ট নাও হতে পারে। বাম দিকে CD8þ CTL-এর শতাংশ (চিত্র 8I এবং K) এবং ডানদিকের টিউমার (চিত্র 8H এবং J) উপরোক্ত অনুমানকে সমর্থন করে, PDT-এর উপস্থিতি বা অনুপস্থিতিতে CD8þ CTL-তে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি। অতএব, COS-BA/Ce6 NPs প্লাস অ্যান্টি-PD-L1 বিকিরণ সহ বা ছাড়াই বাম টিউমারগুলির বিরুদ্ধে অনুরূপ ক্যান্সার প্রতিরোধী দক্ষতা অর্জন করেছে। অধিকন্তু, যেহেতু 4T1 কোষগুলি PD-L152-এর নিম্ন স্তরের প্রকাশ করে, একা-এন্টি-PD-L1 4T1 স্তন ক্যান্সারে 53,54-এর কোনো সুস্পষ্ট ইমিউনোথেরাপিউটিক প্রভাব রয়েছে বলে ব্যাপকভাবে প্রমাণিত হয়েছে। COS-BA/Ce6 NPs দ্বারা মধ্যস্থতা করা ICD প্রভাবগুলি আরও তদন্তের পরোয়ানা থাকা সত্ত্বেও, উপস্থাপিত ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে COS-BA/Ce6 NPs অ্যান্টি-PD-L1 এর সহায়তায় উল্লেখযোগ্যভাবে বর্ধিত প্রতিরোধ ক্ষমতা অর্জন করে। সমষ্টিগতভাবে, এটা মনে হয় যে COS-BA/Ce6 NPs প্রকৃতপক্ষে অ্যান্টি-PD-L1 এর ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপিকে শক্তিশালী করেছে, শুধুমাত্র একটি সংমিশ্রণ থেরাপি নয়। যদিও অ্যান্টি-পিডি-এল1 প্লাস সিওএস-বিএ/সি 6 এনপিগুলি পিডিটি চিকিত্সার সাথে বা ছাড়াই থেরাপিউটিক প্রভাবগুলিতে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখায়নি, তাদের উভয়ই সিওএস-বিএ/সি 6 এনপিগুলির একটি ডোজের তুলনায় স্পষ্টতই বর্ধিত অ্যান্টিটিউমার কার্যকারিতা দেখিয়েছে। অর্থাৎ, হালকা চিকিত্সা না করলেও, একবার ইমিউন অ্যাডজুভেন্ট অ্যান্টিপিডি-এল1 চালু করা হলে, COS-BA/Ce6 NPs কেমোথেরাপির পরে টিউমারের অবশিষ্টাংশের ইমিউনোজেনিসিটি বাড়ানো যেতে পারে যার ফলে অসাধারণ সিস্টেমিক অ্যান্টিটিউমার ইমিউন প্রতিক্রিয়া দেখা দেয়, এইভাবে কার্যকর দমনের দিকে পরিচালিত করে। প্রাথমিক বা দূরবর্তী টিউমারগুলির। এইভাবে, ক্লিনিকাল অ্যান্টিক্যান্সার ইমিউনোথেরাপির সময় NPs-এর সাথে বারবার চিকিত্সার মাধ্যমে প্রাথমিক এবং মেটাস্ট্যাটিক টিউমারগুলি নির্মূল করা সম্ভব হওয়া উচিত। স্পষ্টতই, এই ফলাফলগুলি সম্মিলিতভাবে COS-BA/Ce6 NPs দ্বারা প্ররোচিত অত্যন্ত কার্যকরী এবং সিনারজিস্টিক অ্যান্টিটিউমার ইমিউন প্রতিক্রিয়ার প্রমাণ দেয় যা একটি অ্যান্টি-PD-L1 অবরোধের সাথে, হয় একা কেমোথেরাপির সাথে বা কেমোথেরাপি/PDT-এর সাথে সংমিশ্রণে।

cistanche tubulosa- ইমিউন সিস্টেম উন্নত

4। উপসংহার

সংক্ষেপে, আমরা উদ্দেশ্যমূলকভাবে একটি বায়োকম্প্যাটিবল, বায়োডিগ্রেডেবল, কম বিষাক্ত কিন্তু অত্যন্ত দক্ষ এবং ক্লিনিক্যালি উপলব্ধ রূপান্তরিত ফটো-কেমোথেরাপিউটিক ন্যানো-প্রোড্রাগ COS-BA/Ce6 NPs ডিজাইন করেছি, সংশ্লেষিত করেছি এবং তিনটি মাল্টি-ফাংশনাল উপাদানের সংমিশ্রণে স্ব-সংশ্লেষিত প্রাকৃতিক অ্যাসিড তৈরি করেছি। (BA), একটি জলে দ্রবণীয় COS, এবং সম্মিলিত কেমোথেরাপি/PDT-এর জন্য একটি কম বিষাক্ত ফটোসেনসিটাইজার Ce6। এটি পরবর্তীকালে অ্যান্টি-PD-L1 অবরোধের সংমিশ্রণে অত্যন্ত কার্যকরী এবং সিনারজিস্টিক অ্যান্টিটিউমার ইমিউন প্রতিক্রিয়া ট্রিগার করে, হয় একা কেমোথেরাপির সাথে বা কেমোথেরাপি/পিডিটি-এর সাথে সংমিশ্রণে। বিশেষত, আমরা দেখাই যে ফাঁকা নেটওয়ার্ক আণবিক বিন্যাস শেল-গঠিত ন্যানো পার্টিকেল গঠনের সুবিধা দিতে পারে। জলে দ্রবণীয় সিওএস-এর পরিবর্তনগুলি একটি অ্যামফিফিলিক প্রোড্রাগ তৈরি করে লিপোফিলিক প্রাকৃতিক ছোট অণুগুলির অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপকে ব্যাপকভাবে বাড়িয়ে তুলতে পারে। আমরা আরও দেখাই যে ফলস্বরূপ ন্যানোড্রাগগুলি একাধিক অনুকূল থেরাপিউটিক বৈশিষ্ট্যগুলি দেখিয়েছে, বিশেষত একটি স্মার্ট "সুপ্তাবস্থা" ফাংশন যা কেমোথেরাপির প্রভাব রয়েছে। স্বাতন্ত্র্যসূচক pH প্রতিক্রিয়াশীলতার সাথে মিলিত, এই সহ-সমাবেশগুলি সাধারণ টিস্যুগুলির সাথে কম বিষাক্ততা এবং জৈব নিরাপত্তা সঞ্চালন করে তবে টিউমার টিস্যুগুলির জন্য অত্যন্ত বিষাক্ত। উন্নত 1 O2 প্রজন্মের সাথে, ভাল বায়োডিগ্রেডেবিলিটি এবং বায়োকম্প্যাটিবিলিটি, যার সবকটিই অত্যন্ত দক্ষ, সিনার্জিস্টিক এবং সুরক্ষিত ক্যানসার প্রতিরোধী কেমোথেরাপি/PDT/ ইমিউনোথেরাপিতে অবদান রেখেছে। বিশেষ করে, পিডিটি চিকিত্সা ছাড়াই পৃথক কেমোথেরাপি পদ্ধতিগত অ্যান্টিটিউমার ইমিউন প্রতিক্রিয়া সক্রিয় করতে পারে, যা ক্লিনিক্যালি সিনারজিস্টিক অ্যান্টিক্যান্সার কেমোথেরাপি ইমিউনোথেরাপির জন্য আকর্ষণীয় সম্ভাবনা উন্মুক্ত করে। সামগ্রিকভাবে, এই কাজটি ক্লিনিকাল ইমিউনোথেরাপির জন্য প্রাকৃতিক বহুমুখী উচ্চ বায়োঅ্যাকটিভ, এবং কম-বিষাক্ত ন্যানো-ইমিউনোস্টিমুল্যান্ট বিকাশের জন্য প্রতিশ্রুতিবদ্ধ অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে।

তথ্যসূত্র

1. সাং ডব্লিউ, ঝাং জেড, ডাই ওয়াইএল, চেন এক্সওয়াই। ন্যানোমেটেরিয়াল-ভিত্তিক সিনারজিস্টিক কম্বিনেশন ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপিতে সাম্প্রতিক অগ্রগতি। Chem Soc Rev 2019; 48:3771e810।

2. Li XY, Guo XM, Ling JB, Tang Z, Huang GN, He LZ, et al. ন্যানোমেডিসিন-ভিত্তিক ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপিগুলি টিউমার-সম্পর্কিত ম্যাক্রোফেজগুলিকে পুনঃপ্রোগ্রাম করে তৈরি করা হয়েছে। ন্যানোস্কেল 2021;13:4705e27।

3. Chao Y, Xu LG, Liang C, Feng LZ, Xu J, Dong ZL, et al. সম্মিলিত স্থানীয় ইমিউনোস্টিমুলেটরি রেডিওআইসোটোপ থেরাপি এবং সিস্টেমিক ইমিউন চেকপয়েন্ট অবরোধ শক্তিশালী অ্যান্টিটিউমার প্রতিক্রিয়া প্রদান করে। Nat Biomed Eng 2018;2:611e21.

4. ওয়েন ওয়াইওয়াই, চেন এক্স, ঝু এক্সএফ, গং ওয়াইসি, ইউয়ান জিএল, কিন এক্সওয়াই, এট আল। টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট প্রতিক্রিয়া সহ ফটোথার্মাল-কেমোথেরাপি সমন্বিত ন্যানো পার্টিকেলগুলি কোলোরেক্টাল ক্যান্সারের দক্ষ চিকিত্সার জন্য ইমিউনোজেনিক কোষের মৃত্যুর আনয়নকে উন্নত করেছে। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2019; 11:43393e408।

5. Peng JR, Xiao Y, Yang Q, Liu QY, Chen Y, Shi K, et al. পেপটাইড-রিপ্রোগ্রাম করা ছোট অণু ন্যানো অ্যাসেম্বলির অন্তঃকোষীয় একত্রীকরণ ক্যান্সার কেমোথেরাপি এবং কম্বিনেটরিয়াল ইমিউনোথেরাপি বাড়ায়। অ্যাক্টা ফার্ম সিন বি 2021; 11:1069e82।

6. গান W, Kuang J, Li CX, Zhang MK, Zheng DW, Zeng X, et al. প্রাথমিক এবং ফুসফুসের মেটাস্টেসিস টিউমার নির্মূলের জন্য ফটোডাইনামিক থেরাপির উপর ভিত্তি করে উন্নত ইমিউনোথেরাপি। ACS ন্যানো 2018;12:1978e89।

7. ওয়াং সি, জু এলজি, লিয়াং সি, জিয়াং জে, পেং আর, লিউ জেড। ক্যান্সার মেটাস্ট্যাসিসকে বাধা দেওয়ার জন্য অ্যান্টি-সিটিএলএ-4 থেরাপির সংমিশ্রণে কার্বন ন্যানোটিউব দিয়ে ফটোথার্মাল থেরাপির মাধ্যমে ইমিউনোলজিকাল প্রতিক্রিয়া। অ্যাডভ ম্যাটার 2014;26:8154e62।

8. He CB, Duan XP, Guo NN, Chan C, Poon C, Weichselbaum RR, et al. কোর-শেল ন্যানোস্কেল সমন্বয় পলিমারগুলি চেকপয়েন্ট ব্লকেড ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপিকে শক্তিশালী করতে কেমোথেরাপি এবং ফটোডাইনামিক থেরাপিকে একত্রিত করে। ন্যাট কমিউন 2016;7:12499।

9. Galluzzi L, Buque A, Kepp O, Zitvogel L, Kroemer G. ক্যান্সার এবং সংক্রামক রোগে ইমিউনোজেনিক কোষের মৃত্যু। Nat Rev Immunol 2017;17:97e111।

10. চিয়াং সিএস, লিন ওয়াইজে, লি আর, লাই ওয়াইএইচ, চেং এইচডব্লিউ, সিএইচ সিএইচ, এট আল। ফুকোইডান-ভিত্তিক চৌম্বকীয় ন্যানো পার্টিকেল এবং ইমিউনোমোডুলেটরগুলির সংমিশ্রণ টিউমার-স্থানীয় ইমিউনোথেরাপি বাড়ায়। ন্যাট ন্যানোটেকনোল 2018;13:746e54।

11. Zheng XL, Ge JC, Wu JS, Liu WM, Guo L, Jia QY, et al. দ্বৈত ফটোঅ্যাকটিভ ক্যান্সার ইমেজিং এবং থেরাপির জন্য একটি কাছাকাছি-ইনফ্রারেড আলো-চালিত থেরানোস্টিক হিসাবে বায়োডিগ্রেডেবল হাইপোক্রেটিন ডেরিভেটিভ ন্যানোভেসিকল। বায়োমেটেরিয়ালস 2018;185:133e41।

12. Spicer CD, Jumeaux C, Gupta B, Stevens MM. পেপটাইড এবং প্রোটিন ন্যানো পার্টিকেল বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশনের জন্য বহুমুখী প্ল্যাটফর্মকে সংযুক্ত করে। Chem Soc Rev 2018;47:3574e620।

13. Mei YL, Wang RB, Jiang W, Bo Y, Zhang TF, Yu JL, et al. ক্যান্সার ইমিউনোথেরাপিতে নিউক্লিক অ্যাসিড ডেলিভারির জন্য ন্যানোম্যাটেরিয়ালগুলিতে সাম্প্রতিক অগ্রগতি। বায়োমেটার সাই 2019;7:2640e51।

14. ঝেং ওয়াইএল, ইয়ে জেএক্স, লি জেডওয়াই, চেন এইচজে, গাও ওয়াই। সোনো ফটো ডায়নামিক ক্যান্সার থেরাপির সাম্প্রতিক অগ্রগতি: উন্নত নতুন সংবেদনশীল থেকে ন্যানো প্রযুক্তি-ভিত্তিক কার্যকারিতা-বর্ধক কৌশল পর্যন্ত। অ্যাক্টা ফার্ম সিন বি 2021; 11:2197e219।

15. Li SK, Zou QL, Li YX, Yuan CQ, Xing RR, Yan XH। স্মার্ট পেপটাইড-ভিত্তিক সুপারমোলিকুলার ফটোডাইনামিক মেটালো-ন্যানো ওষুধগুলি মাল্টিকম্পোনেন্ট সমন্বয় স্ব-সমাবেশ দ্বারা ডিজাইন করা হয়েছে। J Am Chem Soc 2018; 140:10794e802।

16. Zhi KK, Wang JC, Zhao HT, Yang X. ওষুধ সরবরাহের জন্য স্ব-একত্রিত ছোট অণু প্রাকৃতিক পণ্য জেল: ছোট অণু প্রাকৃতিক পণ্যের নতুন প্রয়োগে একটি যুগান্তকারী। অ্যাক্টা ফার্ম সিন বি 2020; 10: 913e27।

17. ইয়াং এক্স, মা সি, চেন জেডএম, লিউ জে, লিউ এফওয়াই, জি আরবি, এট আল। একক ছোট অণু-একত্রিত ন্যানো পার্টিকেলগুলি কার্যকর মৌখিক ওষুধ সরবরাহের মধ্যস্থতা করে। ন্যানো রেস 2019;12:2468e76।

18. Zhi KK, Zhao HT, Yang X, Zhang H, Wang JC, Wang J, et al. প্রাকৃতিক পণ্য জিলেটর এবং জীব থেকে তাদের প্রাপ্ত করার জন্য একটি সাধারণ পদ্ধতি। ন্যানোস্কেল 2018;10:3639e43।

19. চেং জেজে, ফু এসওয়াই, কিন জেড, হান ওয়াই, ইয়াং এক্স। স্ব-একত্রিত প্রাকৃতিক ছোট অণু ডাইটারপেন অ্যাসিড সহ অনুকূল অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপ এবং সিনারজিস্টিকভাবে উন্নত অ্যান্টিটিউমার কেমোথেরাপির জন্য জৈব নিরাপত্তা। জে মেটার কেম বি 2021;9:2674e87।

20. ওয়াং জেসি, ঝাও এইচটি, ঝি কেকে, ইয়াং এক্স। প্রাকৃতিক সক্রিয় ছোট-অণু ড্রাগ-লোডিং প্রক্রিয়া এবং অত্যন্ত দক্ষ সিনারজিস্টিক অ্যান্টিটিউমার কার্যকারিতার অনুসন্ধান। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2020;12:6827e39।

21. চেং জেজে, ঝাও এইচটি, ইয়াও এল, লি ওয়াই, কিউ বিকে, ওয়াং জে, এট আল। বর্ধিত অ্যান্টিটিউমার ফটোডাইনামিক থেরাপির জন্য অ্যান্টিক্যান্সার অ্যাক্টিভিটি-মধ্যস্থিত সুপারমোলিকুলার ফটোসেনসিটাইজার সহ সহজ এবং বহুমুখী প্রাকৃতিক স্ব-একত্রিত স্টেরল। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2019; 11: 29498e511।

22. চেং জেজে, ঝাও এইচটি, ওয়াং জেসি, হান ওয়াই, ইয়াং এক্স। অত্যন্ত দক্ষ সিনারজিস্টিক এবং বর্ধিত টাইপ I ফটোকেমোথেরাপির জন্য আলোক সংবেদনশীল ওষুধের বায়োঅ্যাকটিভ প্রাকৃতিক ছোট অণু-সংযোজন। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2020; 12:43488e500।

23. ওয়াং জেসি, ঝাও এইচটি, কিয়াও ডব্লিউএস, চেং জেজে, হান ওয়াই, ইয়াং এক্স। টিস্যু প্রতিরক্ষামূলক ক্রিয়াগুলির সাথে সিনারজিস্টিক বর্ধিত অ্যান্টিটিউমারের জন্য প্রাকৃতিক ছোট পণ্যগুলির সহ-সমাবেশ দ্বারা ন্যানোমেডিসিন-কাম-ক্যারিয়ার। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2020;12:42537e50।

24. Xi JC, Liu HP. সেলফ ডেলিভারি এমফিফিলিক ওষুধ এবং ভ্যাকসিনের ডিজাইনে সাম্প্রতিক অগ্রগতি। Adv Ther 2019;3:1900107.

25. ঝাং আরএস, কিন এক্সএফ, কং এফডি, চেন পিডব্লিউ, প্যান জিজে। কোষের ঝিল্লির উপাদানগুলির সাথে মিথস্ক্রিয়ার মাধ্যমে থেরাপিউটিক সত্তার সেলুলার গ্রহণের উন্নতি করা। ড্রাগ ডেলিভ 2019; 26:328e42।

26. পুজালস এস, জিরাল্ট ই. প্রোলিন সমৃদ্ধ, অ্যাম্ফিপ্যাথিক কোষ-ভেদকারী পেপটাইড। Adv Drug Deliv Rev 2008;60:473e84.

27. করিমি এম, ঘসেমি এ, সাহান্দি জাঙ্গাবাদ পি, রাহিঘি আর, মুসাভি বসরি এসএম, মিরশেকারি এইচ, এট আল। উদ্দীপনা-প্রতিক্রিয়াশীল ড্রাগ/জিন ডেলিভারি সিস্টেমে স্মার্ট মাইক্রো/ন্যানো পার্টিকেল। Chem Soc Rev 2016;45:1457e501.

28. চেং জেজে, লি এক্সওয়াই, ওয়াং এস, হান ওয়াই, ঝাও এইচটি, ইয়াং এক্স। সিনারজিস্টিকভাবে উন্নত ফটোকেমোথেরাপির জন্য গ্লুটাথিয়ন প্রতিক্রিয়া এবং জৈব নিরাপত্তা সহ ক্যারিয়ার-মুক্ত ট্রাইটারপেন প্রোড্রাগস। ACS অ্যাপল মেটার ইন্টারফেস 2021;13:245e56।

29. লি এক্সএস, লি এসওয়াই, ইউন জে. সুপারমোলিকুলার ফটোসেনসিটাইজারগুলি ফটোডাইনামিক থেরাপিকে পুনরুজ্জীবিত করে। Chem Soc Rev 2018;47:1174e88.

30. Zou P, Yuan SJ, Yang X, Guo YZ, Li LN, Xu CW, et al. NF-kB সিগন্যালিং পাথওয়ের মাধ্যমে অর্থোটোপিক লিভার টিউমারের বিরুদ্ধে কাইটোসান অলিগোস্যাকারাইডের কাঠামোগত বৈশিষ্ট্য এবং অ্যান্টিটিউমার প্রভাব। J Funct Foods 2019;57:157e65.

31. Zhai XC, Yuan SJ, Yang X, Zou P, Li NL, Li GY, et al. Chitosan oligosaccharides প্রতিক্রিয়াশীল-অক্সিজেন-প্রজাতি-নির্ভর এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম স্ট্রেসের মাধ্যমে মানুষের রেনাল কার্সিনোমাতে অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করে। জে এগ্রিক ফুড কেম 2019; 67:1691e701।

32. Deng G, Ma C, Zhao HT, Zhang SQ, Liu J, Liu FY, et al. গ্লাইবারাইড-লোডেড বেটুলিনিক অ্যাসিড ন্যানো পার্টিকেলের মাধ্যমে ইস্কেমিক স্ট্রোকের জন্য অ্যান্টি-এডিমা এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সংমিশ্রণ থেরাপি। থেরানোস্টিকস 2019; 9: 6991e7002।

33. Liu K, Xing RR, Zou QL, Ma GH, Mo¨hwald H, Yan XH। অ্যান্টিক্যান্সার ফটোডাইনামিক থেরাপির দিকে ফটোসেনসিটাইজারগুলির সাধারণ পেপটাইড-টিউনড স্ব-সমাবেশ। Angew Chem Int Ed Engl 2016;55:3036e9.

34. Li Y, Lin JY, Wang PY, Luo Q, Lin HR, Zhang Y, et al. টিউমার মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট রেসপন্সিভ শেপ-রিভার্সাল সেলফ-টার্গেটিং ভাইরাস ইমেজিং-নির্দেশিত কাছাকাছি-ইনফ্রারেড-II ফটোথার্মাল কেমোথেরাপির জন্য অনুপ্রাণিত ন্যানোড্রাগ। ACS ন্যানো 2019; 13:12912e28।

35. Sawada SI, Sato YT, Kawasaki R, Yasuoka JI, Mizuta R, Sasaki Y, et al. এক্সোসোম ইন্ট্রাসেলুলার ডেলিভারির জন্য ন্যানোজেল হাইব্রিড অ্যাসেম্বলি: এক্সোসোম সারফেস পলিমার ইঞ্জিনিয়ারিং দ্বারা এন্ডোসাইটোসিস এবং ফিউশনের উপর প্রভাব। বায়োমেটার সাই 2020; 8:619e30।

36. চৌ টিসি। তাত্ত্বিক ভিত্তি, পরীক্ষামূলক নকশা, এবং ড্রাগ কম্বিনেশন স্টাডিতে সিনারজিজম এবং প্রতিপক্ষের কম্পিউটারাইজড সিমুলেশন। ফার্মাকল রেভ 2006;58:621e81।

37. Zhao YP, Zhao YN, Ma QS, Sun B, Wang QP, Ding Z, et al. সিনারজিস্টিক কেমো-ফটোডাইনামিক থেরাপির জন্য বিশুদ্ধ ওষুধের অণুর স্ব-সমাবেশের মাধ্যমে ক্যারিয়ার-মুক্ত, দ্বৈত-কার্যকরী ন্যানোরোড। Int J Nanomed 2019;14:8665e83.

38. মাএ এক্স, ঝাও ওয়াইএল। হোস্ট-গেস্ট ইন্টারঅ্যাকশনের উপর ভিত্তি করে সুপারমোলিকুলার সিস্টেমের বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশন। Chem Rev 2015;115:7794e839.

39. Qin XH, Zhang MZ, Hu X, Du Q, Zhao ZP, Jiang Y, et al. ল্যাকটেট বিপাক নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে পরিবর্ধিত ফটোডাইনামিক থেরাপির জন্য একটি নতুন ডিজাইন করা ক্লোরিন ই6 ডেরিভেটিভের ন্যানোইঞ্জিনিয়ারিং। ন্যানোস্কেল 2021;13:11953e62।

40. Du Q, Qin XH, Zhang MZ, Zhao ZP, Li Q, Ren XM, et al. একটি মাইটোকন্ড্রিয়াল-মেটাবলিজম-নিয়ন্ত্রণযোগ্য ক্যারিয়ার-মুক্ত ন্যানোড্রাগ ফটোথার্মাল থেরাপির সংবেদনশীলতা বাড়াতে। Chem Commun (Camb) 2021;57:8993e6.

41. Li XS, Yu S, Lee D, Kim G, Lee B, Cho Y, et al. নিউক্লিক-অ্যাসিড-চালিত অ্যাক্টিভেটেবল ন্যানোথেরানোস্টিকসের সহজ সুপারমোলিকুলার পদ্ধতি যা ফটোডাইনামিক থেরাপির ত্রুটিগুলি কাটিয়ে ওঠে। ACS ন্যানো 2018; 12:681e8.

2. গিলসন আরসি, ব্ল্যাক কেসি, লেন ডিডি, অ্যাচিলেফু এস। হাইব্রিড টিও2-রুথেনিয়াম ন্যানো-ফটোসেনসিটাইজার সিনারজিস্টিকভাবে হাইপোক্সিক এবং নরমোক্সিক উভয় অবস্থায় প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি তৈরি করে। Angew Chem Int Ed Engl 2017;56:10717e20.

43. Xu SD, Yuan YY, Cai XL, Zhang CJ, Hu F, Liang J, et al. সিঙ্গেল-ট্রিপলেট এনার্জি গ্যাপ টিউনিং: অ্যাগ্রিগেশন-ইনডিউসড এমিশন (AIE) বৈশিষ্ট্য সহ দক্ষ ফটোসেনসিটাইজারগুলির জন্য একটি অনন্য পদ্ধতি। Chem Sci 2015;6:5824e30।

44. Wu WB, Mao D, Xu SD, Kenry, Hu F, Li XQ, et al. পলিমারাইজেশন উন্নত ফটোসেন্সিটাইজেশন। কেম 2018;4:1937e51।

45. কুন্ডু পিকে, সামন্ত ডি, লিজরোভিস আর, মার্গুলিস বি, ঝাও এইচ, বোর্নার এম, এট আল। আলোক-নিয়ন্ত্রিত নন-ফটোরস্পন্সিভ ন্যানো পার্টিকেলগুলির স্ব-সমাবেশ। Nat Chem 2015;7:646e52.

46. ​​Miyazaki M, Yuba E, Hayashi H, Harada A, Kono K. Hyaluronic অ্যাসিড-ভিত্তিক pH-সংবেদনশীল পলিমার-সংশোধিত লাইপোসোম কোষ-নির্দিষ্ট আন্তঃকোষীয় ওষুধ বিতরণ ব্যবস্থার জন্য। বায়োকনজুগ কেম 2018;29:44e55।

47. Zhang JY, Liu ZN, Lian P, Qian J, Li XW, Wang L, et al. পিএইচ পরিবর্তনযোগ্য কাছাকাছি-ইনফ্রারেড ফ্লুরোসেন্স এবং ফটোথার্মাল প্রভাবের মাধ্যমে নির্বাচনী ইমেজিং এবং ক্যান্সার কোষের মৃত্যু। Chem Sci 2016;7:5995e6005.

48. চেং JJ, Tan GH, Li WT, Zhang HY, Wu XD, Wang ZQ, et al. চিটোসান-সহায়তা মাল্টিফাংশনাল ম্যাগনেটিক Fe3O4@ SiO2@CS@pyropheophorbide-এর সহজ সংশ্লেষণ- ফটোডাইনামিক থেরাপির জন্য একটি ফ্লুরোসেন্ট ন্যানো পার্টিকেল। নিউ জে কেম 2016;40:8522e34।

49. চেং জেজে, ওয়াং এস, ঝাও এইচটি, লিউ ওয়াই, ইয়াং এক্স। বায়োডিগ্রেডেবল এবং গ্লুটাথিয়ন রেসপন্সিভ ইউরসোলিক অ্যাসিড প্রোড্রাগ মধ্যস্থিত আলোক সংবেদনশীল ন্যানোড্রাগের স্ব-সমাবেশ প্রক্রিয়া এবং কার্যকর সিনারজিস্টিক অ্যান্টিটিউমার কেমোফোটোথেরাপির অন্বেষণ। বায়োমেটার সাই 2021;9: 3762e75।

50. ইয়াং ওয়াই, জু জে, সান ওয়াই, মো এলটি, লিউ বি, প্যান এক্সএস, এট আল। অ-অ্যান্টিবডি ইমিউন চেকপয়েন্ট ব্লকেড থেরাপি সক্ষম করার জন্য জীবিত কোষগুলিতে অ্যাপটামার-ভিত্তিক লজিক কম্পিউটিং প্রতিক্রিয়া। J Am Chem Soc 2021;143: 8391e401.

51. Kuai R, Yuan WM, Son SJ, Nam J, Xu Y, Fan YC, et al. ন্যানোডিস্ক-ভিত্তিক সংমিশ্রণ কেমোইমিউনোথেরাপির সাথে প্রতিষ্ঠিত টিউমার নির্মূল। Sci Adv 2018;4:eaao1736.

52. Lesniak WG, Chatterjee S, Gabrielson M, Lisok A, Wharram B, Pomper MG, et al. পিইটি সহ [(64)Cu]এটেজোলিজুমাব ব্যবহার করে টিউমারগুলিতে PD-L1 সনাক্তকরণ। বায়োকনজুগ কেম 2016;27:2103e10।

53. Sagiv-Barfi I, Kohrt HEK, Czerwinski DK, Ng PP, Chang BY, Levy R. চেকপয়েন্ট অবরোধের মাধ্যমে থেরাপিউটিক অ্যান্টিটিউমার অনাক্রম্যতা ইব্রুটিনিব দ্বারা বৃদ্ধি পায়, যা BTK এবং ITK উভয়েরই প্রতিরোধক। Proc Natl Acad Sci USA 2015;112:E966e72।

54. Liang C, Chao Y, Yi X, Xu J, Feng LZ, Zhao Q, et al. ন্যানো পার্টিকেল-মধ্যস্থিত অভ্যন্তরীণ রেডিওআইসোটোপ থেরাপি স্থানীয়ভাবে সিনারজিস্টিকভাবে উন্নত ক্যান্সার থেরাপির জন্য টিউমার ভাস্কুলেচার ব্যাপ্তিযোগ্যতা বাড়াতে। বায়োমেটেরিয়ালস 2019;197:368e79।