মুরগির হাড়ের কোলাজেন পেপটাইডের মৌখিক গ্রহণ কোলাজেনের অবক্ষয় এবং সংশ্লেষণ নিয়ন্ত্রণ করে, প্রদাহকে বাধা দেয় এবং লাইসোসোম সক্রিয় করে ইঁদুরের ত্বকের বার্ধক্য প্রতিরোধ করে

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত:ত্বক বার্ধক্যের উপর খাদ্যের প্রভাব একটি আকর্ষণীয় গবেষণার বিষয় হয়ে উঠেছে। পূর্ববর্তী গবেষণায় বেশিরভাগই বার্ধক্যজনিত ত্বকে সামুদ্রিক জীব থেকে প্রাপ্ত কোলাজেন পেপটাইডের উপকারী প্রভাবের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করা হয়েছে যখন মৌখিকভাবে পরিচালনা করা হয়, যখন বার্ধক্যের ত্বকে পোল্ট্রি থেকে প্রাপ্ত কোলাজেন পেপটাইডের উপকারী প্রভাব খুব কমই রিপোর্ট করা হয়েছে। এই গবেষণায়, কোলাজেন পেপটাইডগুলি এনজাইমেটিক হাইড্রোলাইসিস দ্বারা মুরগির হাড় থেকে প্রস্তুত করা হয়েছিল, এবং ডি-গ্যালাকটোজের সাথে মিলিত ইউভি দ্বারা প্ররোচিত ত্বকের বার্ধক্য হ্রাস করার জন্য মৌখিকভাবে পরিচালিত কোলাজেন পেপটাইডগুলির কার্যকারিতার প্রভাব এবং প্রক্রিয়া তদন্ত করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে মুরগির হাড়ের কোলাজেনের কোলাজেনের সাধারণ বৈশিষ্ট্য রয়েছে এবং মুরগির হাড়ের কোলাজেন পেপটাইডস (CPs) ছিল মূলত ছোট আণবিক পেপটাইড যার আণবিক ওজন ছিল<3000 da.="" in="" vivo="" experiments="" showed="" that="" cps="" had="" a="" significant="" relieving="" effect="" on="" aging="" skin,="" indicated="" by="" the="" changes="" in="" the="" compostion="" and="" structure="" of="" the="" aging="" skin,="" improvement="" of="" skin="" antioxidant="" level,="" and="" inhibition="" of="" inflammation;="" the="" relieving="" effect="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps.="" further="" investigation="" showed="" that="" cps="" first="" reduce="" the="" level="" of="" skin="" oxidation,inhibit="" the="" expression="" of="" the="" key="" transcription="" factor="" ap-1(c-jun="" and="" c-fos),="" then="" activate="" the="" tgf-β/smad="" signaling="" pathway="" to="" promote="" collagen="" synthesis,="" inhibit="" the="" expression="" of="" mmp-1/3="" to="" inhibit="" collagen="" degradation,and="" inhibit="" skin="" inflammation="" to="" alleviate="" skin="" aging="" in="" mice.="" moreover,="" the="" skin="" transcriptome="" found="" that="" lysosomes="" activated="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" may="" be="" an="" important="" pathway="" for="" cps="" in="" anti-skin="" aging,="" and="" is="" worthy="" of="" further="" research.="" these="" results="" suggested="" that="" cps="" might="" be="" used="" as="" a="" functional="" anti-aging="" nutritional="">

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

কীওয়ার্ড:কোলাজেন পেপটাইড; বিরোধী পক্বতা; চামড়া প্রতিলিপি;কোলাজেন সংশ্লেষণ;লাইসোসোম

1। পরিচিতি

স্বাস্থ্য যুগ, সঠিকভাবে একটি স্বাস্থ্যকর খাদ্যাভ্যাস অনুসরণ করা, ত্বকের বার্ধক্যের ক্ষেত্রে পুষ্টির ভূমিকা নির্ধারণ করা এবং তারুণ্য ও স্বাস্থ্যকর ত্বক বজায় রাখতে কী খাবেন তা নির্ধারণ করা কঠিন সমস্যা। ত্বক শরীরের বৃহত্তম অঙ্গ, এপিডার্মিস, ডার্মিস এবং সাবকুটেনিয়াস লেয়ার নিয়ে গঠিত। এটি বাহ্যিক কারণ থেকে শরীরকে রক্ষা করার জন্য একটি বাধা হিসেবে কাজ করে এবং স্বাস্থ্য ও সৌন্দর্যের ক্ষেত্রেও ভূমিকা রাখে[1. ত্বকের বার্ধক্য একটি জটিল প্রক্রিয়া, যা কালানুক্রমিক বার্ধক্য এবং ফটো-এজিং-এ বিভক্ত এবং অভ্যন্তরীণ এবং বাহ্যিক উভয় কারণের দ্বারা প্রভাবিত হয়।cistanche স্টেমপ্রধান বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে রয়েছে কোষে ম্যাক্রোমোলিকুলার ক্ষতি জমা হওয়া, স্টেম সেল ফাংশনের পতন (টিস্যু পুনর্নবীকরণের প্রচার), এবং ত্বকের শারীরিক অখণ্ডতার ধীরে ধীরে ক্ষতি [2]। ত্বকের বার্ধক্য সৃষ্টিকারী প্রধান আণবিক প্রক্রিয়াগুলির মধ্যে প্রধানত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, টেলোমেরে শর্টনিং, ডিএনএ ড্যামেজ, জেনেটিক মিউটেশন, মাইক্রো-আরএনএ রেগুলেশন, অ্যাডভান্সড গ্লাইকেশন এন্ড-প্রোডাক্ট একুমুলেশন এবং ইনফ্লাম-এজিং 3] অন্তর্ভুক্ত। ফটো-এজিং হল ত্বকের এপিডার্মাল হাইপারপ্লাসিয়া, শুকিয়ে যাওয়া এবং অতিবেগুনী বিকিরণ দ্বারা প্ররোচিত এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্সের অবক্ষয়। ফটো-বার্ধক্যের প্রধান কারণ হল অতিবেগুনী বিকিরণ দ্বারা উত্পন্ন প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) যা ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেসেস (MMPs) এবং টাইপ-I প্রো-কোলাজেনের অভিব্যক্তি মধ্যস্থতা করে যেমন মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস (MAPK) সিগন্যালিংয়ের মাধ্যমে। পাথওয়ে, এইভাবে ত্বকে এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্স (ECM) এর অবক্ষয় এবং ফাইব্রোব্লাস্টের অ্যাপোপটোসিস [৪]। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, ত্বকের স্বাস্থ্য বজায় রাখা এবং বার্ধক্য বিলম্বিত করা জনপ্রিয় হয়ে উঠেছে, এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-এজিং ফাংশন সহ বায়োঅ্যাকটিভ পেপটাইড এবং পলিফেনলের মতো প্রাকৃতিক উপাদানগুলি সন্ধান করা একটি গবেষণার হটস্পট হয়ে উঠেছে [5]।

Cistanche এন্টি বার্ধক্য করতে পারে

যাইহোক, কোলাজেনের একটি বড় আণবিক ওজন রয়েছে এবং সরাসরি শোষিত এবং ব্যবহার করা কঠিন, যেখানে কোলাজেন হাইড্রোলাইসিসের পরে ছোট আণবিক কোলাজেন পেপটাইডগুলির শক্তিশালী জৈবিক কার্যকলাপ এবং একটি উচ্চ শোষণ হার রয়েছে [6]। ইতিমধ্যে, খাদ্য, ওষুধ, টিস্যু ইঞ্জিনিয়ারিং, প্রসাধনী এবং অন্যান্য ক্ষেত্রে কোলাজেনের ব্যাপক প্রয়োগ কম আণবিক ওজন, উচ্চ শোষণ দক্ষতা এবং শক্তিশালী জৈবিক কার্যকলাপের সাথে কোলাজেন পেপটাইডগুলিকে কার্যকরী খাদ্য এবং চিকিৎসা গবেষণায় একটি নতুন প্রিয় করে তুলেছে [{{1] }}] কোলাজেন পেপটাইডগুলি ছোট, কোলাজেন হাইড্রোলাইসিসের পরে প্রাপ্ত 2-20 অ্যামিনো অ্যাসিডের অবশিষ্টাংশ ধারণ করে। তাদের সম্ভাব্য অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ফাংশন এবং ইমিউন রেগুলেশন এবং ত্বকের ফাইব্রোব্লাস্টগুলিতে অ্যান্টিঅক্সিডেশন এবং বিস্তারের প্রভাবের কারণে এগুলি ত্বকের বার্ধক্যের চিকিত্সার জন্য একটি খাদ্যতালিকাগত সম্পূরক হিসাবে ব্যবহৃত হয় [10]।

মৌখিক প্রশাসনের পরে, কোলাজেন পেপটাইডগুলি ছোট পেপটাইডের আকারে শোষিত হয় এবং দ্রুত রক্তে স্থানান্তরিত হয় এবং অবশেষে, কিডনেভস, ত্বক, জয়েন্ট এবং অন্যান্য টিস্যুতে সংরক্ষণ এবং ব্যবহার করা হয়। 14 দিন পরে, ইঁদুরের ত্বকে তেজস্ক্রিয়তার মাত্রা বেশি থাকে যেগুলিকে C14-লেবেলযুক্ত কোলাজেন পেপটাইড দিয়ে গ্যাভেজ করা হয়েছিল।cistanche tubulosa উপকারিতা এবং পার্শ্ব প্রতিক্রিয়াকোলাজেন পেপটাইডগুলি শরীর দ্বারা প্রায় সম্পূর্ণরূপে শোষিত এবং ব্যবহার করা যেতে পারে, যেখানে কোলাজেনের শোষণ এবং ব্যবহারের হার মাত্র 50-60 শতাংশ [6,11-13]। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, মাছের চামড়া, মাছের স্কেল, গরুর হাড়, গরুর চামড়া এবং শূকরের চামড়া থেকে পাওয়া কোলাজেন হাইড্রোলাইসেটগুলি ত্বকের বার্ধক্য হ্রাসে উপকারী প্রভাব রয়েছে বলে ব্যাপকভাবে রিপোর্ট করা হয়েছে এবং গবেষকদের কাছ থেকে যথেষ্ট মনোযোগ পেয়েছে। উদাহরণস্বরূপ, সিলভার কার্প ত্বক থেকে বিচ্ছিন্ন কোলাজেন পেপটাইডগুলি প্রো-কোলাজেন সংশ্লেষণের প্রচার করে এবং TGF-/Smad পথকে সক্রিয় করে AP-1, MMP-1, এবং MMP-3 প্রোটিনের প্রকাশকে বাধা দেয়। কোলাজেনের অবক্ষয় রোধ করতে এবং ফটোজেড ত্বকের কোষগুলি মেরামত করতে [14]। বোভাইন কোলাজেন পেপটাইডের মৌখিক প্রশাসন ত্বকের শিথিলতা উন্নত করতে পারে, কোলাজেন সামগ্রী এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম কার্যকলাপ বৃদ্ধি করতে পারে, কোলাজেন ফাইবার মেরামত করতে পারে এবং বার্ধক্যজনিত ইঁদুরগুলিতে ত্বকের কোলাজেন অনুপাতকে স্বাভাবিক করতে পারে [15]। যাইহোক, বিভিন্ন উত্স থেকে কোলাজেন পেপটাইডের বিভিন্ন প্রভাব রয়েছে। কোলাজেন পেপটাইডের মৌখিক প্রশাসনের পরে রক্তে অত্যন্ত সক্রিয় পেপটাইডের পরিমাণ এবং গঠন কোলাজেনের উত্সের উপর নির্ভর করে [10]। ইউভিএ-প্ররোচিত ফাইব্রোব্লাস্ট আঘাতের বিরুদ্ধে মুরগির ত্বক থেকে নিষ্কাশিত কোলাজেন পেপটাইডের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব শুকর, গরু বা তেলাপিয়ার ত্বক থেকে নিষ্কাশিত কোলাজেন পেপটাইডের চেয়ে উচ্চতর ছিল এবং এর প্রভাব কোলাজেন থেকে প্রাপ্ত ট্রিপেপটাইড (গ্লাই-প্রো) এর সমতুল্য ছিল। -হাইপ)[16]।

ধর্মীয় বিশ্বাস এবং রোগ সংক্রান্ত উদ্বেগ (যেমন পাগল গরুর রোগ) মানুষকে ধীরে ধীরে কোলাজেন এবং এর পণ্যগুলির বিকাশের দিকটি স্থলজ স্তন্যপায়ী প্রাণী থেকে পোল্ট্রি এবং সামুদ্রিক জীবের দিকে সরাতে পরিচালিত করেছে|17I. পোল্ট্রি প্রক্রিয়াকরণের প্রধান উপজাত হিসাবে, মুরগি হাড় কোলাজেন পণ্যগুলির একটি প্রতিশ্রুতিশীল উত্স। এটি শুধুমাত্র সম্পদের অপচয় এবং পরিবেশ দূষণ কমায় না বরং উপ-পণ্যের দক্ষ ব্যবহারের অনুমতি দেয়। অতএব, এই গবেষণায়, আমরা কাঁচামাল হিসাবে মুরগির হাড়ের কোলাজেন পেপটাইড ব্যবহার করেছি, ত্বকের বার্ধক্য রোধে কোলাজেন পেপটাইডের মৌখিক প্রশাসনের প্রভাব মূল্যায়নের মডেল হিসাবে ত্বকের বার্ধক্যকে প্ররোচিত করতে ডি-গ্যালাকটোজ এবং ইউভি দিয়ে চিকিত্সা করা নগ্ন ইঁদুরের সাথে। ইঁদুর এবং প্রাসঙ্গিক প্রক্রিয়া নির্ধারণ.

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1. উপাদান, রাসায়নিক, এবং প্রাণী

ইউনান এগ্রিকালচারাল ইউনিভার্সিটি (কুনমিং, চীন) এর মুরগির খামারগুলি মুরগির হাড়ের খাবার পেতে খরচ করা মুরগিগুলিকে আলাদা, শুকানো এবং চূর্ণ করা হয়েছিল। Su-peroxide dismutase (SOD), catalase (CAT), এবং glutathione peroxidase (GSH-PX) কিটগুলি Soleibao Biotechnology Co., Ltd. (Beijing, China) থেকে কেনা হয়েছিল। হাইড্রক্সিপ্রোলিন (HYP), ইন্টারলিউকিন-1 (IL-1x), ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেস-1/3 (MMP-1/3), টাইপ I প্রো-কোলাজেন, এবং হায়ালুরোনিক অ্যাসিড (HA) এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসে (ELISA) কিটগুলি নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। স্বাস্থ্যকর মহিলা BALB/C লোমহীন ইঁদুর (18±2g, ছয় সপ্তাহ বয়সী) নানিজিং জাঙ্ক বায়োইঞ্জিনিয়ারিং কর্পোরেশন, লিমিটেড (নানজিং, চীন) থেকে পারমিট নম্বর সহ কেনা হয়েছিল: SCXK(SU)2016-0010৷cistanche tubulosa নির্যাসপেপসিন এবং প্যাপেইন আলাদিন বায়োকেমিক্যাল টেকনোলজি কোং, লিমিটেড (সাংহাই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল এবং অন্যান্য রাসায়নিক ছিল বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের। সমস্ত ইঁদুর ইউনান প্রদেশের ল্যাবরেটরি অ্যানিমাল কেয়ারের নিয়ম-নীতি অনুসরণ করে পরিচালনা করা হয়েছিল এবং ইউনান এগ্রিকালচারাল ইউনিভার্সিটি অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি (অনুমোদন আইডি: YAUACUC01) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

2.2। কোলজেন প্রস্তুতি এবং অ্যামিনো অ্যাসিড রচনা

মুরগির হাড়ের কোলাজেনের নিষ্কাশন এবং অ্যামিনো অ্যাসিড গঠন লিউয়েট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসরণ করে। [18]সামান্য পরিবর্তন সহ। মুরগির হাড়ের গুঁড়া নাড়াচাড়া করে ভেজানো হয়েছিল 0৷{5}}5 M NaOH,10 শতাংশ n-হেক্সেন, এবং 0.25 M EDTA দ্রবণ (pH7.5 ) 1/10 (m/o) অনুপাতে। প্রতিটি ধাপে, নমুনাটি 36 ঘন্টার জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল, এবং হাড়ের গুঁড়ো ফুলে যাওয়ার জন্য, হাড়ের গুঁড়া থেকে নন-কোলাজেন প্রোটিন, চর্বি এবং খনিজগুলি অপসারণ করতে প্রতি 6 ঘন্টা অন্তর ভেজানো দ্রবণ পরিবর্তন করা হয়েছিল। নমুনাটি প্রতিটি পদক্ষেপের পরে নিরপেক্ষতার জন্য বিশুদ্ধ জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। প্রি-ট্রিটেড মুরগির হাড়ের খাবারে 0.5 M হিমবাহী অ্যাসিটিক অ্যাসিডের সাথে 0.1 শতাংশ (w/v) পেপসিন 1:10 (w/v) এর কঠিন থেকে তরল অনুপাতে মেশানো হয়েছিল এবং ক্রমাগত নাড়াচাড়া করা হয়েছিল এবং 4 ডিগ্রিতে বের করা হয়েছিল। 48 ঘন্টা। তারপরে এটি ফিল্টার করা হয়েছিল, এবং ফিল্টারটি 15,000×g এ 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টের pHof 7{30}}.8 এ NaOH দ্রবণে সমন্বয় করা হয়েছিল, এবং NaCl 1.5 M এর চূড়ান্ত ঘনত্বে যোগ করা হয়েছিল। লবণ বের করার জন্য মিশ্রণটিকে 4 ডিগ্রিতে 12 ঘন্টা অবিচ্ছিন্ন রাখার পরে, কোলাজেন রেসিপিটেটকে 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রিতে 15,000×g সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, তারপর 0.5 M অ্যাসিটিক অ্যাসিড দিয়ে দ্রবীভূত করা হয়েছিল, বিশুদ্ধ জলে ডায়ালাইজ করা হয়েছিল, ফ্রিজে শুকানো হয়েছিল এবং তৈরি পণ্যটি ছিল মুরগির হাড়ের কোলাজেন।

মুরগির হাড়ের কোলাজেনের অ্যামিনো অ্যাসিড গঠন Sykam S433D অ্যামিনো অ্যাসিড স্বয়ংক্রিয় বিশ্লেষক (মিউনিখ, জার্মানি) দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। পরীক্ষা করার জন্য একটি নির্দিষ্ট পরিমাণ কোলাজেন নমুনা একটি সিল করা টিউবে নেওয়া হয়েছিল, এতে 10 mL6 M HCl যোগ করা হয়েছিল এবং 24 ঘন্টার জন্য 110C তাপমাত্রায় হাইড্রোলভজ করা হয়েছিল। হাইড্রোলাইজেট নাইট্রোজেন ফুঁ দিয়ে ঘনীভূত হয়েছিল এবং 20 মিলি সাইট্রিক অ্যাসিড বাফারে পুনরায় দ্রবীভূত হয়েছিল। একটি 0.22 um মাইক্রোপোরাস মেমব্রেন দিয়ে মাইক্রোফিল্ট্রেশনের পরে, অ্যামিনো অ্যাসিড স্পেকট্রাম বিশ্লেষণের জন্য 20 μL হাইড্রোলাইজেট নেওয়া হয়েছিল। নমুনায় অ্যামিনো অ্যাসিডের পরিমাণ শতাংশে প্রকাশ করা হয়েছিল।

2.3। কোলাজেন পেপটাইড (CPs) এর প্রস্তুতি এবং আণবিক ওজন বিতরণ

আমাদের পূর্ববর্তী অপ্টিমাইজেশন প্রক্রিয়ার ফলাফল অনুসারে, 1:40 (ভর অনুপাত) একটি এনজাইম-থেকে-সাবস্ট্রেট অনুপাতের প্যাপেইন ব্যবহার করে সিপি তৈরি করা হয়েছিল। 5 ঘন্টার জন্য 63 ডিগ্রিতে pH to7 এবং এনজাইমেটিক হাইড্রোলাইসিস সামঞ্জস্য করার পরে, 15 মিনিটের জন্য ফুটন্ত জলের স্নানে এনজাইম নিষ্ক্রিয় করা হয়েছিল। এনজাইম হাইড্রোলাইজেটকে ডিসল্ট করা হয়েছিল এবং লাইওফিলাইজড করা হয়েছিল, 0.1 শতাংশ ফর্মিক অ্যাসিড দ্রবণে পুনরায় দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং সুপারনাট্যান্ট পাওয়ার জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। AQ Exactive HF অরবিট্র্যাপ উচ্চ-রেজোলিউশন ভর স্পেকট্রোমিটার-QE-HF(থার্মো ফিশার, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ), ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন (ESI, 350-1800 মিটারের সম্পূর্ণ স্ক্যান মোডে কোলাজেন হাইড্রোলাইজেট বিশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল) /z, এবং ফলাফলগুলি পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল এবং Proteome Discoverer 2.1 সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

2.4.পশু পরীক্ষা

মহিলা BALB/C লোমহীন ইঁদুরকে (n{{0}}) তাপমাত্রা (24±1 ডিগ্রি), আর্দ্রতা (60 ±5 শতাংশ), এবং একটি নিয়ন্ত্রিত অবস্থায় একটি ঘরে রাখা হয়েছিল এক সপ্তাহের জন্য 12 ঘন্টা দিন-রাত্রি চক্র। তাদের খাদ্য ও পানির জন্য অবাধ প্রবেশাধিকার দেওয়া হয়েছিল। অভিযোজনের এক সপ্তাহ পর, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে নিম্নলিখিত পাঁচটি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল (প্রতি গ্রুপে n=11):(i)। সাধারণ গ্রুপ (N): UV unexposed; প্রতিদিন 0.4 মিলি স্যালাইনের মৌখিক প্রশাসন। (ii)। মডেল গ্রুপ (M): UVexposed প্লাস D-galactose (0.2 mL); প্রতিদিন 0.4 মিলি স্যালাইনের মৌখিক প্রশাসন।

(i) কম ডোজ কোলাজেন পেপটাইড গ্রুপ (এলসিপি): ইউভি এক্সপোজড প্লাস ডি-গ্যালাকটোজ (0.2 মিলি); মৌখিক

প্রতিদিন 0.4 mL CPs (ডোজ: 200mg:kg-1 শরীরের ওজন) প্রশাসন।

(iv)। মাঝারি ডোজ কোলাজেন পেপটাইডস গ্রুপ (MCPs): UV উন্মুক্ত প্লাস ডি-গ্যালাকটোজ; মৌখিক

প্রতিদিন 0.4 mL CPs (ডোজ: 500 mg·kg-1 শরীরের ওজন) এর প্রশাসন।

(v) উচ্চ মাত্রার কোলাজেন পেপটাইড গ্রুপ (HCPs): UVexposed প্লাস D-galactose; মৌখিক প্রশাসন-

প্রতিদিন 0.4 mL CPs (ডোজ: 1000 mg kg-1 শরীরের ওজন) এর ট্রেশন।

ডি-গ্যালাকটোজ চিকিত্সা মাউসের ঘাড়ের পিছনে 10 শতাংশ ডি-গ্যালাকটোজ দ্রবণের 0.2 mL সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দ্বারা সঞ্চালিত হয়েছিল (ডোজ:1৷{19}}g/ কেজি-1শরীরের ওজন) দৈনিক। UVirradiation একটি 40 W UVA-340 LAMIP (O-panel, Cleveland, USA, পিক তরঙ্গদৈর্ঘ্য: 340 nm) দিয়ে সঞ্চালিত হয়েছিল, বাতি এবং ইঁদুরের পিছনের মধ্যে দূরত্ব ছিল 30 সেমি (230 m J/cm) -), এবং বিকিরণ সাত সপ্তাহ (49 দিন) ধরে প্রতিদিন 30 মিনিট স্থায়ী হয়। বিকিরণের তীব্রতা একটি UVA365-রেডিওমিটার (Xinbao Keyi Electronic Technology Co., Ltd., Xi'an, China) দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। ডি-গ্যালাকটোজ এবং ইউভি চিকিত্সার এক ঘন্টা পরে, ইঁদুরগুলিকে প্রতিদিন মৌখিকভাবে 0.4 মিলি সিপি দেওয়া হয়েছিল। শেষ বিকিরণের পরে, ইঁদুরগুলিকে অবেদন দেওয়া হয়েছিল, ওজন করা হয়েছিল এবং পরবর্তী বিশ্লেষণের জন্য টিস্যুগুলি নমুনা করা হয়েছিল।

2.5। ত্বকের আর্দ্রতা, ভিসারাল ইনডেক্স এবং শরীরের ওজন বৃদ্ধি

ত্বকের আর্দ্রতা ISO 1442 দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল, এবং ভিসারাল সূচক নিম্নলিখিত সমীকরণটি ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল: ভিসারাল সূচক(g/kg)= ভিসারাল ওজন/দেহের ওজন।

2.6। ত্বকের অক্সিডেটিও স্ট্রেস, HA, এবং HYP ​​বিষয়বস্তু

টিস্যু হোমোজেনাইজার (TGrinder OSE-Y30, Tiangen Biochemical Technology Co., Ltd., Beijing, China) দিয়ে বরফের স্নানে স্বাভাবিক স্যালাইনের (w/w) নয় গুণ পরিমাণে ত্বকের নমুনাগুলিকে একজাত করা হয়েছিল এবং তারপর 2000-এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। 10 মিনিটের জন্য ×g এবং 4 ডিগ্রি। সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (এসওডি), ক্যাটালেস (সিএটি), এবং গ্লুটাথিয়ন পারক্সিডেস (জিএসএইচ-পিএক্স), এবং সংগৃহীত সুপারনাট্যান্টে হাইলুরোনিক অ্যাসিড (এইচএ) এবং হাইড্রোক্সিপ্রোলিন (এইচওয়াইপি) এর বিষয়বস্তুগুলি বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে নির্ধারিত হয়েছিল। সংশ্লিষ্ট কিটগুলির সাথে সম্পর্কিত নির্দেশাবলী।

2.7.স্কিন হিস্টোলজিক্যাল

মাউসের ত্বকের নমুনাগুলি 24 ঘন্টার জন্য 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল, ডিহাইড্রেটেড, প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল এবং কাটা হয়েছিল। ত্বকের অংশগুলি হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (HE) দিয়ে দাগযুক্ত ছিল এবং একটি ECLIPSE CI-E ফরোয়ার্ড ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (নিকন, জাপান) দিয়ে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। ত্বকের এপিডার্মিস এবং ডার্মিসের পুরুত্ব Halcon 13 ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল৷{5}}.1.1 সফ্টওয়্যার (MVTec, মিউনিখ, জার্মানি)৷

2.8। স্কিন ট্রান্সক্রিপ্টোম সিকোয়েন্সিং

2.8.1। আরএনএ এক্সট্রাকশন, লাইব্রেরি কনস্ট্রাকশন এবং ট্রান্সক্রিপ্টোম সিকোয়েন্সিং

প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে RNeasy Mini Kit (Tiangen Bio-Chemical Technology Co., Ltd., Beijing, China) ব্যবহার করে ইঁদুরের চামড়া থেকে মোট RNA বের করা হয়েছিল। আরএনএর বিশুদ্ধতা এবং ঘনত্ব kaiaoK5500Spectrophoto-meter (Kaiao, Beijing, China) ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল; RNA অখণ্ডতা RNA Nano 6000 Assay Kit এবং Bioanalyzer 2100 সিস্টেম (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনার ট্রান্সক্রিপশনাল সিকোয়েন্সিং বিশ্লেষণটি Biolinker Technology Company Limited (Kunming, China) দ্বারা সম্পাদিত হয়েছিল। সংক্ষেপে, সূচক-কোডেড নমুনাগুলির ক্লাস্টারিং একটি cBot ক্লাস্টার প্রজন্মের সিস্টেমে HiSeq PE ক্লাস্টার কিট v4-cBot-HS(llu-mina) ব্যবহার করে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। ক্লাস্টার জেনারেশনের পরে, লাইব্রেরিগুলিকে একটি ইলুমিনা প্ল্যাটফর্মে সিকোয়েন্স করা হয়েছিল, এবং 150 bp পেয়ারড-এন্ড রিড তৈরি হয়েছিল৷

2.8.2। আরএনএ-সিকোয়েন্সিং ডেটার বায়োইনফরমেটিক্স বিশ্লেষণ

জিন অন্টোলজি (জিও) এবং কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া অফ জিনস অ্যান্ড জিনোম (কেইজিজি) ডিফারেন্সিয়ালভাবে প্রকাশিত জিনগুলির (ডিইজি) সমৃদ্ধ বিশ্লেষণ R ভাষা ক্লাস্টার বিশ্লেষক প্যাকেজ ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। যখন p-মান 0.05 এর কম ছিল, তখন GO এবং KEGG দ্বারা সমৃদ্ধ আইটেম এবং পথগুলিকে তাৎপর্যপূর্ণ বলে মনে করা হত৷

2.8.3। বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ-পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (qRT-PCR)

QRT-PCR পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সঞ্চালিত হয়েছিল [19]।

2.9। ওয়েস্টার ব্লট

পার্ক এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুযায়ী। [20], ওয়েস্টার্ন ব্লট (WB) বিশ্লেষণটি ইঁদুরের ত্বকের বার্ধক্যজনিত প্রোটিনের অভিব্যক্তির পরিমাণ নির্ধারণের জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রতিটি ট্রিটমেন্ট গ্রুপে স্কিন লাইসেটের প্রোটিন ঘনত্ব বিসিএ কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল, এসডিএস-পেজ (10 শতাংশ অ্যাক্রিলামাইড জেল) দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল, একটি পিভিডিএফ ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল, 5 শতাংশ স্কিম মিল্ক দিয়ে ব্লক করা হয়েছিল, এবং উপযুক্ত পরিমাণে প্রাথমিক স্তর দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। অ্যান্টিবডি (TGF-b1, c-Fos,c-Jun, Samd2/3, এবং -actin) রাতারাতি 4 ডিগ্রিতে। টিবিএসটি দিয়ে ধোয়ার পরে, নমুনাগুলিকে সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলির সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 1 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল।cistanche tubulosa পর্যালোচনাকেমিডক এক্সআরএস প্লাস কেমিলুমিনেসেন্স জেল ইমেজার (বায়োরএডি, হারকিউলিস, সিএ, ইউএসএ) নির্দিষ্ট প্রোটিন সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইমেজ] সফ্টওয়্যারটি প্রতিটি চিকিত্সা গ্রুপে লক্ষ্য প্রোটিনের অভিব্যক্তির পরিমাণ নির্ধারণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল এবং ফলাফলগুলি -অ্যাক্টিন প্রোটিনে স্বাভাবিক করা ঘনত্বের মান দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা হয়েছিল।

2.10.ELISA

এমএমপি-1, এমএমপি-3, টাইপ I প্রো-কোলাজেন, এবং আইএল-1 এবং ত্বকের লাইসিস ফ্লুইডের এক্সপ্রেশন স্তরগুলি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসাই দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। কিটের সাথে প্রদত্ত নির্দেশাবলী অনুসারে পরীক্ষাটি পরিচালিত হয়েছিল।

2.11.পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ

সমস্ত ফলাফল SPSS 21 (IBM Inc., Armonk, NY, USA) সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে বিশ্লেষন করা হয়েছিল ভিন্নতা (ANOVA) এবং ডানকানের মাল্টিপল রেঞ্জ টেস্টের একমুখী বিশ্লেষণের মাধ্যমে, তাত্পর্য স্তর p এ সেট করা হয়েছে<0.05. originpro="" 2017(originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±="" standard="" deviation="">

3। ফলাফল এবং আলোচনা

3.1.কোলাজেনের অ্যামিনো অ্যাসিড রচনা

মুরগির হাড়ের কোলাজেনের অ্যামিনো অ্যাসিড গঠনটি সারণী 1-এ দেখানো হয়েছে। নমুনাগুলিতে গ্লাই ছিল প্রধান অ্যামিনো অ্যাসিড, যা মোট অ্যামিনো অ্যাসিডের প্রায় এক-তৃতীয়াংশ (2786 শতাংশ) এবং হাইপ ছিল কোলাজেনের মধ্যে বিশেষ অ্যামিনো অ্যাসিড, যা 9.83 শতাংশের জন্য দায়ী। কোলাজেন অণুর প্রধান বৈশিষ্ট্যগুলি ছিল বারবার Gly-XY সিকোয়েন্স এবং তিনটি চেইনের সমন্বয়ে গঠিত অনন্য ট্রিপল-হেলিকাল গঠন। গ্লাই মোট অ্যামিনো অ্যাসিডের প্রায় এক-তৃতীয়াংশের জন্য দায়ী, X এবং Y প্রায়শই প্রোলিন এবং হাইড্রোক্সিপ্রোলিন ছিল, বা যে কোনও অবশিষ্টাংশ হতে পারে [২১]। নমুনার অ্যামিনো অ্যাসিড গঠন পূর্ববর্তী গবেষণায় রিপোর্ট করা মুরগির হাড়ের কোলাজেনের মতো এবং কোলাজেনের সাধারণ বৈশিষ্ট্য ছিল [22]।

3.2। CPs এর আণবিক ওজন বিতরণ

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da (Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da, 65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 দা, 72 শতাংশ)। যাইহোক, জার্মান গেলিটা কোম্পানি বেশ কিছু ক্লিনিকাল গবেষণার মাধ্যমে দেখিয়েছে যে কোলাজেন পেপটাইডের প্রভাব মূলত কোলাজেন পেপটাইডের আণবিক ওজনের পরিবর্তে মানুষের কোলাজেনের অবক্ষয়ের পরে কোলাজেন পেপটাইডের বৈশিষ্ট্যের সাথে তার মিলের মাত্রা দ্বারা নির্ধারিত হয়। তারা দেখেছে যে 2000 Da-এর গড় আণবিক ওজন সহ VERISOL③ পণ্যটি ত্বকের ফাইব্রোব্লাস্টগুলিতে সবচেয়ে উদ্দীপক প্রভাব ফেলে, যখন 3000 Da-এর গড় আণবিক ওজন সহ ফোরটিজেলটিএম পণ্যটি তরুণাস্থি মেরামতের উপর বিশেষ প্রভাব ফেলে [25-27]।

3.3। ত্বকের বার্ধক্য কমাতে ওরাল সিপির প্রভাব

3.3.1.শারীরিক ওজন এবং অঙ্গ সূচক

শরীরের ওজন সূচক এবং অঙ্গ সূচক গুরুত্বপূর্ণ এবং ইঁদুরের স্বাস্থ্যের অবস্থা প্রতিফলিত করে। পরীক্ষার সময়কালে প্রতিটি গ্রুপে ইঁদুরের ওজন স্বাভাবিকভাবে বৃদ্ধি পায় (সারণী 2)। এম গ্রুপের গড় ওজন বৃদ্ধি এন গ্রুপের তুলনায় কম ছিল এবং সিপি ট্রিটমেন্ট গ্রুপের তুলনায় এম গ্রুপের তুলনায় বেশি ছিল, ইঁদুরের উপর সিপি-এর কোনো পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া নেই বলে পরামর্শ দেয়। পূর্ববর্তী রিপোর্টে, কোলাজেন পেপটাইড-চিকিত্সা করা ইঁদুরের ডোজ বেশিরভাগই ছিল 100-1000 mg/kg.bw·d, এবং তেলাপিয়া কোলাজেন পেপটাইডের নিরাপদ ডোজ 4.07 g/kg.bw·d [{{6} }] একইভাবে, তেলাপিয়া স্কেল কোলাজেন পেপটাইড (ডোজ: 500 এবং 1000 mg/kg·bw·d) দিয়ে গ্যাভেজ করার পরে চামড়া-বয়স্ক ইঁদুরের বৃদ্ধিও আমাদের ফলাফলের মতো ছিল [২৯]। প্লীহা হিউমারাল এবং সেলুলার অনাক্রম্যতাতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, এইভাবে, প্লীহা সূচকটি প্রায়শই ইমিউন সিস্টেমের কার্যকারিতা মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়।cistanche UKThe liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups (p >0.05)। ফলাফলগুলি পূর্ববর্তী গবেষণাগুলির মত ছিল [30], ইঙ্গিত করে যে সিপিগুলি নিরাপদ এবং ইঁদুরের রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা কিছুটা উন্নত করতে পারে।

3.3.2.ত্বকের গঠন

ইউভি এবং ডি-গ্যালাকটোজ ট্রিটমেন্ট (এম গ্রুপ) উল্লেখযোগ্যভাবে ত্বকের আর্দ্রতা, এইচএ এবং হাইপ কন্টেন্ট হ্রাস করেছে, N গ্রুপের তুলনায় যথাক্রমে 13.36 শতাংশ, 24.08 শতাংশ এবং 15.83 শতাংশ (p)<0.05)(table 2).="" the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

ত্বকের আর্দ্রতা কন্টেন্টের পরিবর্তনের কারণে বলিরেখা এবং ত্বক ঝুলে যায় এবং ত্বকের কোলাজেন এবং HA[31] এর মতো ম্যাট্রিক্স উপাদান দ্বারা প্রভাবিত হয়। হাইড্রোক্সিপ্রোলিন কোলাজেনের একটি স্থিতিশীল, সমৃদ্ধ এবং বিশেষ অ্যামিনো অ্যাসিড, এবং এর বিষয়বস্তু পরোক্ষভাবে ত্বকে কোলাজেনের বিষয়বস্তু, সেইসাথে ত্বকের বার্ধক্যকে প্রতিফলিত করতে পারে। উপরন্তু, HA, যা ত্বকের ECM-তে অত্যন্ত প্রকাশ করা হয়, একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। ত্বকের জলের ভারসাম্য, অসমোটিক চাপ, আর্দ্রতা ধারণ, এবং জল সঞ্চয় ব্যবস্থা এবং ত্বকের কাঠামোগত উপাদান হিসাবে স্থিতিস্থাপকতা নিয়ন্ত্রণে [৩২]। এই গবেষণায়, সিপি গ্রহণের পরে ত্বকে আর্দ্রতা, HYP এবং HA এর সামগ্রী উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে, যা CPs দ্বারা কোলাজেন এবং HA সংশ্লেষণের প্রচারের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। অধিকন্তু, HYP এবং HA বৃদ্ধির ফলে আর্দ্রতার পরিমাণ বৃদ্ধি পায়।

3.3.3। ত্বকের হিস্টোলজিক্যাল পরিবর্তন

সাত সপ্তাহ একটানা চিকিৎসার পর ইঁদুরের পেছনের ত্বকের হিস্টোলজিক্যাল পরিবর্তন চিত্র 2-এ দেখানো হয়েছে। এম গ্রুপের বার্ধক্যজনিত ত্বকের ত্বকের তুলনায় রুক্ষ পৃষ্ঠ, পুরু এপিডার্মিস, পাতলা ডার্মিস এবং স্পার্স কোষের বৈশিষ্ট্য দেখায়। এন গ্রুপ। যাইহোক, সিপি-এর মৌখিক প্রশাসনের পরে ইঁদুরের বার্ধক্যজনিত ত্বকের অবস্থার উন্নতি হয়, এন গ্রুপের ইঁদুরের মতোই একটি মসৃণ, সুশৃঙ্খল এবং সম্পূর্ণ কাঠামো বজায় থাকে। সুতরাং, ত্বকের ডার্মিস উল্লেখযোগ্যভাবে পাতলা ছিল এবং এন গ্রুপের তুলনায় এম গ্রুপে এপিডার্মিস উল্লেখযোগ্যভাবে ঘন ছিল (পি<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously="" [4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" in="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4। ত্বকের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং প্রদাহজনক মাত্রা

অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির কার্যকলাপ নির্ধারণ করা শরীরের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট স্তরের মূল্যায়ন করার জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত পদ্ধতি [২৮]। চিত্র 3-তে দেখানো হয়েছে, M গ্রুপে CAT, SOD, GSH-Px এবং MDA বিষয়বস্তুর কার্যক্রম N গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (p<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-pxactivities,and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,="" and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activate="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrixcollagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

উপরন্তু, ROS দ্বারা সৃষ্ট সেলুলার প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াও ত্বকের বার্ধক্যে অবদান রাখে। UV এবং D-galactose চিকিত্সার (Mgroup) পরে, N গ্রুপের তুলনায় ইঁদুরের ত্বকে IL-lo-এর উপাদান উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 3D) ), ইঙ্গিত করে যে ত্বক একটি উল্লেখযোগ্য প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছে (পি<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05),indicating that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the'o,="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4। ত্বকের বার্ধক্য কমাতে ডায়েটারি সিপি-এর কর্মের প্রক্রিয়া

3.4.1.RNA-Seq ডেটার বিশ্লেষণ এবং বৈধতা

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GOenrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A) and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B). The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group (Figure 4A,B). Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs,4303 genes were significantly expressed in the mice skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" sixgenes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes="" (including="" fos,="" jun,="" cxcll,and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated="" (figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

জিওএনরিচমেন্ট বিশ্লেষণ এবং কেইজিজি ডাটাবেস সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণ ডিইজিগুলির জৈবিক কার্যাবলী আরও তদন্তের জন্য সহায়তা প্রদান করে। জিও বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে ডিইজিগুলি জৈবিক প্রক্রিয়াগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে সমৃদ্ধ হয়েছিল যেমন ডিএনএ প্রতিলিপি, হিমোপোয়েসিস নিয়ন্ত্রণ, হাইড্রোলেজ কার্যকলাপ নিয়ন্ত্রণ এবং সাইটোকাইন উত্পাদন; কোষের উপাদানগুলিতে, যার মধ্যে লাইটিক ভ্যাকুওল এবং লাইসোসোম, কোলাজেন-ধারণকারী এবং অন্যান্য সম্পর্কিত জিনগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে সমৃদ্ধ হয়েছিল; আণবিক ফাংশনের পরিপ্রেক্ষিতে, রিসেপ্টর-লিগ্যান্ড অ্যাক্টিভিটি, সাইটোকাইন কার্যকলাপ এবং অন্যান্য সম্পর্কিত জিনগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে সমৃদ্ধ হয়েছিল (চিত্র 5)। ডিইজি দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত প্রথম 20টি সংকেত পথের কেইজিজি সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণ চিত্র 5-এ দেখানো হয়েছে। সাইটোকাইন-রিসেপ্টর মিথস্ক্রিয়া, লাইসোসোম, নিউরোঅ্যাকটিভ লিগ্যান্ড-রিসেপ্টর মিথস্ক্রিয়া, কোষ চক্র, সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাস এবং টিজিএফ-পথ<05) were="" closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" or-ganelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" diferentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors[40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging[14].="" gene="" functional="" enrichment="" anal-ysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41].="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2। ত্বকের বার্ধক্য কমাতে সিপি-এর ক্রিয়া পদ্ধতির যাচাইকরণ

মৌখিক সিপি দ্বারা ত্বকের বার্ধক্য হ্রাসে TGF- সিগন্যালিং পাথওয়ে এবং সাইটোকাইন-রিসেপ্টর মিথস্ক্রিয়াটির ভূমিকা যাচাই করার জন্য, TGF- সিগন্যালিং পাথওয়েতে TGF- এবং ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর Smad2/3 যাচাই করার জন্য WB বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, সেইসাথে মূল ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর AP-1 (c-Fos এবং c-Jun) যা সাইটোকাইন নিয়ন্ত্রণ করে। MMP-1, MMP-3, Type I প্রো-কোলাজেন, এবং IL-1-এর বিষয়বস্তু ELISA দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল৷ WB বিশ্লেষণের ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে গ্রুপ M-এ TGF-, Smad2 এবং Smad3-এর অভিব্যক্তিটি N(p) গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল।<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner(figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" mgroup="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp="" group=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

AP-1 প্রোটিন হল জুন এবং ফস ফ্যামিলি প্রোটিনের একটি ডাইমেরিক কমপ্লেক্স এবং এটি ত্বকের প্রদাহ এবং সাইটোকাইন এক্সপ্রেশনের একটি গুরুত্বপূর্ণ নিয়ামক। সাধারণত, c-Jun এবং c-Fos এর সমন্বয়ে গঠিত জটিলটি ত্বকে সর্বোচ্চ ট্রান্সক্রিপশনাল কার্যকলাপ দেখায় [41,A42]। বার্ধক্যজনিত ত্বকের কোষে উৎপাদিত ROS প্রথমে AP-1 প্রোটিন সক্রিয় করে এবং তারপর ডাউনস্ট্রিম সাইটোকাইনগুলি (যেমন IL-1), MMPs, এবং TGF- সংকেত পথকে ট্রান্সক্রিপশন এবং অনুবাদের মাধ্যমে নিয়ন্ত্রণ করে, এইভাবে ত্বকের বার্ধক্যকে সহজ করে তোলে[43] ,44]। TGF-/Smad সিগন্যালিং প্রতিক্রিয়া হল একটি ধ্রুপদী কোলাজেন সংশ্লেষণ পথ, এবং Smad ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরটি এই সংকেত ট্রান্সডাকশন পাথওয়ের মূলে রয়েছে। TGF- রিসেপ্টরের সাথে আবদ্ধ হয়ে ডাউনস্ট্রিম Smad2 এবং Smad3 এর ফসফোরিলেশন এবং সক্রিয়করণকে ট্রিগার করে, যার ফলে COLI [14] এর সংশ্লেষণ বৃদ্ধি পায়।

উপরন্তু, ELISA ফলাফল দেখায় যে M গ্রুপের ত্বকে MP-1, MMP-3, এবং IL-1a-এর বিষয়বস্তু N গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল এবং টাইপেল প্রো-কোলাজেনের বিষয়বস্তু উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (p<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,mmp-3,and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1o="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

উপরোক্ত পথগুলি ছাড়াও, এই গবেষণায়, সিপি ট্রিটমেন্টের পরে আপ-নিয়ন্ত্রিত জিনগুলি লাইসোসোম পাথওয়েতে উল্লেখযোগ্যভাবে সমৃদ্ধ হয়েছিল, যা ইঙ্গিত করে যে সিপি চিকিত্সা ত্বকে লাইসোসোমকে সক্রিয় করেছে (চিত্র 5)। পূর্ববর্তী অধ্যয়নগুলি ইঙ্গিত করে যে সক্রিয় লাইসোসোমগুলি পরিষ্কার একত্রিত করে এবং বার্ধক্যের সময় সেনেসেন্ট নিউরাল স্টেম সেলগুলির সক্রিয়করণকে উন্নত করে [45]। এগুলি ছাড়াও, লাইসোসোমের বৃদ্ধি ফাংশন কোষের সুপ্ততা রোধ করতে অন্তঃকোষীয় ROS এর ঘনত্ব কমাতে পারে। একইভাবে, লাইসোসোম ফাংশনের কোনো হ্রাস অন্তঃকোষীয় ROS ঘনত্বকে বাড়িয়ে তুলতে পারে যা শেষ পর্যন্ত কোষের সুপ্ততাকে উন্নীত করে [৪৬]যদিও আমরা এই গবেষণাপত্রে এটিকে পদ্ধতিগতভাবে যাচাই করিনি, এই ফলাফল এবং পূর্ববর্তী প্রতিবেদনগুলি বোঝায় যে লাইসোসোমাল ফাংশন সক্রিয়করণের প্রধান উপায় হতে পারে ত্বকের বার্ধক্য কমাতে CPs, এবং আমরা এটি যাচাই করার লক্ষ্য চালিয়ে যাব।

অতএব, এই গবেষণায় দেখা গেছে যে খাদ্যতালিকাগত সিপিগুলি ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে UV এবং D-galactose দ্বারা প্ররোচিত ত্বকের বার্ধক্য হ্রাস করতে পারে। CPs ত্বকের অক্সিডেশন লেভেল কমিয়ে, AP-1(c-জুন এবং সি-ফোস) মূল ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরগুলির প্রকাশকে বাধা দিয়ে, কোলাজেন সংশ্লেষণকে উন্নীত করার জন্য TGF-/Smad সিগন্যালিং পাথওয়েকে সক্রিয় করে, এর অভিব্যক্তিকে বাধা দিয়ে ত্বকের বার্ধক্য দূর করে এমএমপি-1 এবং এমএমপি-3 (যা কোলাজেনের অবক্ষয়কে বাধা দেয়), এবং ত্বকের বার্ধক্য কমাতে ত্বকের প্রদাহকে বাধা দেয় (চিত্র 8)। তাছাড়া, বর্তমান গবেষণায় আমাদের ফলাফলগুলিও পরামর্শ দেয় যে সক্রিয় লাইসোসোম একটি হতে পারে। ত্বকের বার্ধক্য নিয়ন্ত্রণের জন্য সিপি-এর গুরুত্বপূর্ণ পথ, যা বিশেষ মনোযোগের দাবি রাখে।

4। উপসংহার

সংক্ষেপে, এই গবেষণাটি নিশ্চিত করেছে যে মুরগির হাড়ের কোলা-জেন পেপটাইডের খাদ্যতালিকাগত পরিপূরক অতিবেগুনী বিকিরণ এবং ডি-গ্যালাকটোজ দ্বারা প্ররোচিত ত্বকের বার্ধক্যকে উল্লেখযোগ্যভাবে উপশম করতে পারে একাধিক পথের মাধ্যমে, যার মধ্যে রয়েছে প্রো-কোলাজেন সংশ্লেষণের প্রচার, কোলাজেন অবক্ষয় প্রতিরোধ, ত্বকের অ্যান্টিঅক্সিড লেভেলের উন্নতি। এবং inhibiting inflama-tion; উপশমটি CPs-এর সাথে ডোজ-নির্ভর ছিল। একটি বিশদ তদন্তে দেখা গেছে যে CPs প্রথমে ত্বকের অক্সিডেশনের মাত্রা কমায়, মূল ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর AP-1(c-Jun এবং c-Fos) এর প্রকাশকে বাধা দেয় এবং তারপর প্রচারের জন্য TGF- /Smad সিগন্যালিং পাথওয়ে সক্রিয় করে কোলাজেন সংশ্লেষণ, কোলাজেনের অবক্ষয় রোধ করতে MMP-1 এবং MMP-3 এর প্রকাশকে বাধা দেয় এবং ইঁদুরের ত্বকের বার্ধক্য কমাতে ত্বকের প্রদাহকে বাধা দেয়। এছাড়াও, লাইসোসোমগুলির সক্রিয়করণও সিপি-র ত্বকের বার্ধক্য দূর করার প্রধান পথ হতে পারে, যা ফলো-আপ গবেষণা এবং যাচাইয়ের যোগ্য। এই ফলাফলগুলি ত্বকের বার্ধক্য কমাতে কোলাজেন পেপটাইড প্রয়োগ করার জন্য একটি তাত্ত্বিক ভিত্তি প্রদান করে এবং কার্যকরী খাবারে প্রাণীর উপ-পণ্যের ব্যাপক ব্যবহারের সুযোগ বিস্তৃত করে।

এই নিবন্ধটি পুষ্টি 2022, 14, 1622 থেকে নেওয়া হয়েছে। https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients