NGF কোলেস্টেরল বিপাককে মডিউল করে এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে নিউরোপ্রোটেকশন প্রদানকারী গ্লিয়াল কোষে ApoE নিঃসরণকে উদ্দীপিত করে পার্ট 1
Aug 31, 2023
বিমূর্ত:
কোলেস্টেরল মস্তিষ্কে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, যেখানে অ্যাস্ট্রোসাইটিক কার্যকলাপ বিশেষ করে বিপাক নিয়ন্ত্রণ করে। প্রকৃতপক্ষে, প্রাপ্তবয়স্ক নিউরনগুলি তাদের কোলেস্টেরল জৈব সংশ্লেষণকে দমন করে এবং অ্যাস্ট্রোসাইট থেকে নিঃসৃত ApoE সমৃদ্ধ কণার মাধ্যমে এই স্টেরল আমদানি করে। সাম্প্রতিক প্রমাণগুলি পরামর্শ দেয় যে স্নায়ু বৃদ্ধির ফ্যাক্টর (এনজিএফ) কোষের বিপাককে প্রভাবিত করে নিউরোট্রফিক কার্যকলাপ চালাতে পারে।
নিউরন হল মৌলিক একক যা মানুষের মস্তিষ্ক তৈরি করে। নিউরনের মধ্যে সংযোগের মাধ্যমে, তারা আমাদের সেরিব্রাল কর্টেক্স গঠন করে, যা আমাদের সমস্ত জ্ঞান এবং স্মৃতি বহন করে। অতএব, নিউরনগুলি স্মৃতিশক্তির সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত।
নিউরনের প্রধান কাজ তথ্য প্রেরণ করা। প্রতিটি নিউরনের একটি সিন্যাপস থাকে, যা অন্যান্য নিউরনের ডেনড্রাইট এবং অ্যাক্সনকে সংযুক্ত করে। যখন একটি নিউরন একটি সংকেত পায়, তখন এটি সেই নিউরনগুলিতে সংকেত প্রেরণ করে যার সাথে এটি সংযুক্ত থাকে। এই সংকেত, যাকে বলা হয় নিউরোনাল ট্রান্সমিশন, মেমরি গঠন, সঞ্চয়স্থান এবং পুনরুদ্ধারের অন্যতম প্রধান প্রক্রিয়া।
আমাদের মস্তিষ্ককে সুস্থ রাখার জন্য, আমরা ব্যায়ামের মাধ্যমে আমাদের নিউরনের সঠিক কার্যকারিতা প্রচার করতে পারি। শারীরিক ব্যায়াম মস্তিষ্কে রক্ত সঞ্চালন এবং অক্সিজেন সরবরাহ উন্নত করে, যার ফলে নিউরনের সংখ্যা এবং সংযোগ বৃদ্ধি পায়। একই সময়ে, বিভিন্ন সামাজিক এবং শেখার ক্রিয়াকলাপ নতুন মস্তিষ্কের অঞ্চলে নতুন নিউরন গঠন করতে পারে এবং মস্তিষ্কের প্লাস্টিসিটি বাড়াতে পারে।
যখন আমাদের আরও বেশি, আরও সক্রিয় নিউরন থাকে, তখন আমাদের স্মৃতিশক্তি শক্তিশালী হয়। সেরিব্রাল কর্টেক্সের নিউরনের মধ্যে সমন্বয় আরও সমান হয়ে যায়, যা আমাদের জন্য তথ্য সংরক্ষণ এবং পুনরুদ্ধার করা সহজ করে তোলে, আমাদের জ্ঞানীয় ক্ষমতার উন্নতি করে। এছাড়াও, বিপুল সংখ্যক নিউরন এবং নিউরনের মধ্যে সংযোগগুলিও আমাদের প্রতিক্রিয়ার গতি এবং সিদ্ধান্ত নেওয়ার ক্ষমতাকে উন্নত করবে।
অতএব, স্বাস্থ্যকর নিউরন বজায় রাখা এবং স্মৃতিশক্তির উন্নতি একই সাথে চলে। শারীরিক ব্যায়াম, বিভিন্ন সামাজিক ও শেখার ক্রিয়াকলাপ এবং খাদ্যাভ্যাসের উপর মনোযোগ কেন্দ্রীভূত করে আমরা সুস্থ নিউরনগুলিকে উন্নীত করে আমাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারি। আসুন আমাদের মস্তিষ্কের স্বাস্থ্যকে সমর্থন করার জন্য একসাথে কাজ করুন! দেখা যায় আমাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে হবে। Cistanche deserticola উল্লেখযোগ্যভাবে স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে কারণ Cistanche deserticola হল একটি ঐতিহ্যবাহী চীনা ঔষধি উপাদান যার অনেকগুলি অনন্য প্রভাব রয়েছে, যার মধ্যে একটি হল স্মৃতিশক্তি উন্নত করা। কিমা করা মাংসের কার্যকারিতা কার্বক্সিলিক অ্যাসিড, পলিস্যাকারাইডস, ফ্ল্যাভোনয়েড ইত্যাদি সহ বিভিন্ন সক্রিয় উপাদান থেকে আসে। এই উপাদানগুলি বিভিন্ন চ্যানেলের মাধ্যমে মস্তিষ্কের স্বাস্থ্যের উন্নতি করতে পারে।
মস্তিষ্কের কার্যকারিতা উন্নত করার উপায়গুলি জানুন ক্লিক করুন
তা সত্ত্বেও, গ্লিয়াল কোলেস্টেরল হোমিওস্টেসিসে এনজিএফ-এর প্রভাব এখনও স্পষ্ট করা যায়নি। এই প্রকল্পের লক্ষ্য হল এনজিএফ গ্লিয়াল কোষে কোলেস্টেরল বিপাককে প্রভাবিত করতে পারে কিনা তা মূল্যায়ন করা। U373 অ্যাস্ট্রোসাইট থেকে প্রাপ্ত সেল লাইনটি এই লক্ষ্যে পৌঁছানোর জন্য একটি পরীক্ষামূলক মডেল হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইমিউনোব্লট এবং এলিসা বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে কোলেস্টেরল বিপাক নেটওয়ার্কের অন্তর্গত প্রোটিন এবং এনজাইমগুলি গ্লিয়াল কোষে এনজিএফ চিকিত্সার সময় বৃদ্ধি পেয়েছে। তদ্ব্যতীত, এনজিএফ উল্লেখযোগ্যভাবে ApoE ক্ষরণ এবং সংস্কৃতির মাধ্যমে বহির্মুখী কোলেস্টেরলের পরিমাণ বাড়িয়েছে।
সহ-সংস্কৃতি এবং ইউ373-শর্তযুক্ত মাঝারি পরীক্ষাগুলি দেখায় যে এনজিএফ চিকিত্সা দক্ষতার সাথে এন1ই-115 নিউরোনাল কোষগুলিতে রোটেনোন-মধ্যস্থ সাইটোটক্সিসিটি প্রতিরোধ করে। বিপরীতভাবে, এনজিএফ চিকিত্সা দ্বারা মধ্যস্থতা করা নিউরোপ্রোটেকশন দমন করা হয়েছিল যখন N1E-115 ApoE- নীরব U373 কোষগুলির সাথে সহ-সংস্কৃতি করা হয়েছিল। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দেয় যে এনজিএফ গ্লিয়াল কোষগুলিতে কোলেস্টেরল হোমিওস্টেসিস নিয়ন্ত্রণ করে। আরও গুরুত্বপূর্ণভাবে, এনজিএফ অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে নিউরোপ্রোটেকশন প্রয়োগ করে, সম্ভবত গ্লিয়াল এপিওই নিঃসরণের সাথে যুক্ত।
কীওয়ার্ড:
ApoE; astrocyte; কোলেস্টেরল; পৃথকীকরণ; স্নায়ু বৃদ্ধি ফ্যাক্টর; বিপাক; নিউরন; প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি; রোটেনোন
1। পরিচিতি
মস্তিষ্ক পুরো শরীরে সর্বাধিক পরিমাণে কোলেস্টেরল দ্বারা চিহ্নিত করা হয় [1]। সেন্ট্রাল নার্ভাস সিস্টেমে (সিএনএস) এই স্টেরলের ব্যতিক্রমী ঘনত্ব এই সত্য দ্বারা ন্যায্য যে কোলেস্টেরল বেশ কয়েকটি মৌলিক জৈবিক প্রক্রিয়ার সাথে জড়িত। উল্লেখ্য, কোলেস্টেরলের একটি উল্লেখযোগ্য পরিমাণ অ্যাস্ট্রোসাইট এবং নিউরনের প্লাজমা মেমব্রেনে একত্রিত হয়, যেখানে এটি একটি সঠিক সেলুলার রূপবিদ্যা এবং মেমব্রেন রিসেপ্টর এবং সিনাপটিক নিউরোট্রান্সমিশনের সঠিক কার্যকারিতাকে সংজ্ঞায়িত করে [2]।
নিউরাইট আউটগ্রোথ, সিন্যাপটোজেনেসিস এবং নিউরোট্রান্সমিটার রিলিজের জন্য প্রয়োজনীয় নতুন ঝিল্লি গঠনের জন্যও কোলেস্টেরল অপরিহার্য, এইভাবে নিউরোনাল পার্থক্য এবং পরিপক্কতা [3-7] এর ক্ষেত্রে গুরুত্বপূর্ণ।
মূলত, মস্তিষ্কের সমস্ত কোলেস্টেরল সিটুতে ডি নভো বায়োসিন্থেসিস থেকে উদ্ভূত হয়। বিশেষত, রক্ত-মস্তিষ্কের বাধা (BBB) সিস্টেমিক সঞ্চালনের মাধ্যমে পরিবাহিত লাইপোপ্রোটিন থেকে প্রাপ্ত কোলেস্টেরল গ্রহণকে বাধা দেয় [8]। এই কারণে, স্নায়ু কোষগুলি এই লিপিডের জন্য তাদের নিজস্ব চাহিদা স্বাধীনভাবে পরিচালনা করার জন্য একটি অনুকরণীয় নিয়ন্ত্রক নেটওয়ার্ক তৈরি করে। একটি সু-স্বীকৃত মডেল প্রতিষ্ঠিত করে যে ভ্রূণজনিত হওয়ার পরে, জন্ম পরবর্তী সময়ে, কোলেস্টেরল জৈবসংশ্লেষণ নাটকীয়ভাবে নিউরনে কমে যায়, অ্যাকশন পটেনশিয়াল তৈরির জন্য নিয়োজিত শক্তি সঞ্চয় করার প্রচেষ্টায়।
তদনুসারে, অ্যাস্ট্রোসাইটগুলি কোলেস্টেরলের ইফ্ফি নিউরোনাল প্রয়োজনীয়তা পূরণ করে, যার সংশ্লেষণ বিশেষভাবে উচ্চারিত হয় [1,9,10]। অ্যাস্ট্রোসাইট দ্বারা নিউরনে উত্পাদিত কোলেস্টেরল সরবরাহ অনুভূমিক পরিবহনের একটি মার্জিত প্রক্রিয়া বোঝায়, যার মধ্যে গুরুত্বপূর্ণ প্রোটিন এবং কণা জড়িত। বিশেষত, কোলেস্টেরল রপ্তানি অ্যাস্ট্রোসাইটে শুরু হয়, যেখানে নব্য-সংশ্লেষিত কোলেস্টেরল অ্যাপলিপোপ্রোটিন ই (ApoE) ধারণকারী নবজাতীয় লিপোপ্রোটিন কণাগুলিতে লোড হয়। জমা হওয়া প্রমাণগুলি ইঙ্গিত করে যে ApoE-সমৃদ্ধ কণাগুলির লিপিডেশন ট্রান্সপোর্টার ATP-বাইন্ডিং ক্যাসেট A1 (ABCA1) [11] দ্বারা মধ্যস্থতা করে। পরবর্তীকালে, একবার বহির্কোষীয় স্থানের মধ্যে ছেড়ে দেওয়া হলে, রিসেপ্টর-মধ্যস্থ এন্ডোসাইটোসিস লো-ডেনসিটিনসিটি লিপোপ্রোটিন রিসেপ্টর (LDLr) এবং LDLr-সম্পর্কিত প্রোটিন 1 (LRP1) [12] এর মাধ্যমে নিউরনগুলির দ্বারা ApoE- ধারণকারী লাইপোপ্রোটিনসাপ্টেনটেকেন।
নিউরোনাল হোমিওস্টেসিসে অ্যাস্ট্রোসাইট থেকে প্রাপ্ত কোলেস্টেরলের মূল ভূমিকা অনুসারে, পরীক্ষামূলক ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে ApoE-সমৃদ্ধ লাইপোপ্রোটিনগুলিতে থাকা কোলেস্টেরল উল্লেখযোগ্যভাবে ডেনড্রাইট পার্থক্য এবং সিনাপটিক ফাংশন [13,14] বাড়ায়। হান্টিংটন ডিজিজ (এইচডি) অ্যাস্ট্রোসাইট থেকে অ্যাকর্ডিন্যাস্ট্রোসাইট কন্ডিশন্ডেড মাধ্যম, যা শুধুমাত্র একটি পরিমিত পরিমাণ ApoE-লাইপোপ্রোটিন-বাউন্ড কোলেস্টেরল নিঃসরণ করে, এইচডি নিউরনগুলিতে নিউরাইট বৃদ্ধি এবং সিনাপটিক কার্যকলাপকে মারাত্মকভাবে প্রভাবিত করে [15]।
অ্যাস্ট্রোসাইট থেকে প্রাপ্ত ApoE-যুক্ত কণাগুলির নিউরোট্রফিক অ্যাকশন আরও ApoE ঘাটতির প্রভাব দ্বারা টিকে থাকে, যা হিপোক্যাম্পাসে প্রাপ্তবয়স্কদের নিউরোজেনেসিসকে স্পষ্টভাবে বাধা দেয় [16]। অ্যাস্ট্রোসাইট-নিউরন কোলেস্টেরল ক্রসস্টাল অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে নিউরোপ্রোটেকশনেও গুরুত্বপূর্ণ। উদাহরণস্বরূপ, কিছু রিপোর্ট দেখায় যে ApoE হাইড্রোজেন পারক্সাইড এক্সপোজার দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ ক্ষতি এবং অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয় [17,18]।
এই পর্যবেক্ষণগুলি থেকে, মস্তিষ্কে কোলেস্টেরল হোমিওস্ট্যাসিসের রক্ষণাবেক্ষণের জন্য স্নায়ু কোষগুলির কার্যকারিতা নিশ্চিত করার জন্য প্রয়োজনীয়, এবং এই লিপিডের নিয়ন্ত্রণের অন্তর্নিহিত বিপাকীয় পথগুলিকে বেশ কয়েকটি নিউরোফিজিওলজিকাল প্রক্রিয়ার সংঘটন সংরক্ষণের জন্য সূক্ষ্মভাবে নিয়ন্ত্রণ করা উচিত।
সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, নিউরোট্রফিনগুলি কোষ বিপাকের অপরিহার্য খেলোয়াড় হিসাবে আবির্ভূত হয়েছে [2,19-22]। নিউরোট্রফিনগুলি বৃদ্ধির কারণগুলির একটি ছোট পরিবারের অন্তর্গত যা নিউরোনাল বিকাশ, বেঁচে থাকা এবং প্লাস্টিকতায় একটি অসংলগ্ন ভূমিকা রাখে [23]। অতি সম্প্রতি, এই সিগন্যালিং অণুগুলিও কোলেস্টেরল বিপাক [2,22] সহ কোষ বিপাকের গুরুত্বপূর্ণ মডুলেটর হিসাবে স্বীকৃত হয়েছে।
পরীক্ষামূলক প্রমাণ হাইলাইট করে যে স্নায়ু বৃদ্ধির ফ্যাক্টর (এনজিএফ), নিউরোট্রফিন পরিবারের প্রোটোটাইপ সদস্য, নিউরোনাল কোষ এবং হেপাটোসাইটগুলিতে কোলেস্টেরল জৈব সংশ্লেষণকে উদ্দীপিত করে [24,25]। মজার বিষয় হল, এই ঘটনাগুলির মধ্যে অন্তত আংশিকভাবে, কম-সম্পর্কিত নিউরোট্রফিন রিসেপ্টর p75NTR জড়িত, যা স্টেরল রেগুলেটরি এলিমেন্ট বাইন্ডিং প্রোটিন 2 (SREBP-2) কে সক্রিয় করে এবং ফলস্বরূপ, কোলেস্টেরল-সম্পর্কিত প্রতিলিপিকে প্ররোচিত করে। জিন [২৫]। কোলেস্টেরল বিপাকের উপর এনজিএফ-এর কার্যকলাপ শুধুমাত্র জৈব সংশ্লেষণে সীমাবদ্ধ নয়, কারণ এটি নিউরনে এলডিএলআর এক্সপ্রেশন বাড়িয়ে কলেস্টেরল গ্রহণকেও উৎসাহিত করে [২৬]।
এই তথ্য সত্ত্বেও, কোলেস্টেরল হোমিওস্টেসিস নিয়ন্ত্রণে এনজিএফ-এর সম্ভাব্য অবদান সম্পর্কে জ্ঞান এখনও বিশেষভাবে সীমিত বলে মনে হয়। উল্লেখযোগ্যভাবে, অ্যাস্ট্রোসাইটিক কোষে কোলেস্টেরল বিপাক নিয়ন্ত্রণে এনজিএফ দ্বারা পরিচালিত ভূমিকা মূল্যায়ন করার পদ্ধতিগত অধ্যয়নের অভাব রয়েছে। অ্যাস্ট্রোসাইট দ্বারা উত্পাদিত কোলেস্টেরল নিউরোনাল ফিজিওলজির গ্যারান্টি দেওয়ার জন্য অপরিহার্য, এটি বিবেচনা করা গুরুত্বপূর্ণ যে গ্লিয়াল কোষের পাশাপাশি আন্তঃকোষীয় কোলেস্টেরল পরিবহনে কোলেস্টেরল বিপাককে প্রভাবিত করতে পারে কিনা, যার অদ্ভুত নিয়ন্ত্রণ মস্তিষ্কের স্বাস্থ্য নিশ্চিত করার জন্য অপরিহার্য।
এই কাজের ভিত্তিতে, লক্ষ্য হল গ্লিয়াল কোষে কোলেস্টেরল বিপাকের মড্যুলেশনে এনজিএফ-এর সম্ভাব্য সম্পৃক্ততা, সেইসাথে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস পরিস্থিতিতে নিউরোনাল পার্থক্য এবং নিউরোনাল বেঁচে থাকার উপর এর প্রভাব অন্বেষণ করা।
2. ফলাফল
2.1। U373 এক্সপ্রেস উভয় NGF রিসেপ্টর TrkA এবং p75NTR
এনজিএফ প্রাথমিকভাবে নিউরোনাল কোষগুলির জন্য একটি নির্দিষ্ট ট্রপিজম সহ একটি বৃদ্ধির কারণ হিসাবে চিহ্নিত হয়েছিল। যাইহোক, জমে থাকা প্রমাণ প্রমাণ করে যে এই নিউরোট্রফিনটি বেশ কয়েকটি অ-নিউরোনাল কোষ এবং টিস্যুতে জৈবিক প্রভাবকেও প্ররোচিত করে [22]। এনজিএফ-এর ক্রিয়াকলাপ নিশ্চিত করা হয় উচ্চ-সম্পর্কযুক্ত রিসেপ্টর TrkAd-এর সাথে নিম্ন-সম্বন্ধীয় রিসেপ্টর p75NTR [2] এর সাথে আবদ্ধ হওয়ার মাধ্যমে।
এইভাবে, আমরা প্রাথমিকভাবে নিশ্চিত করেছি যে U373 কোষগুলি NGF রিসেপ্টরগুলিকে প্রকাশ করে কিনা। উল্লেখযোগ্যভাবে, U373 হল একটি অ্যাস্ট্রোসাইটোমা সেল লাইন যা ব্যাপকভাবে অ্যাস্ট্রোসাইট সেল কালচার মডেল হিসাবে নিযুক্ত করা হয়, কারণ বেশ কয়েকটি প্রতিবেদনে ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে তারা অ্যাস্ট্রোসাইটের আকারগত, বিপাকীয় এবং কার্যকরী বৈশিষ্ট্যগুলির পুনরুত্পাদনকারী [27-29]। প্রকাশিত তথ্য অনুসারে [৩০], ইমিউনোফ্লোরেসেন্স বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে U373 কোষগুলি TrkA এবং p75NTR উভয়কেই প্রশংসনীয় স্তরে প্রকাশ করে (চিত্র S1A)। এই ফলাফলগুলি ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ দ্বারাও নিশ্চিত করা হয়েছিল, পরামর্শ দেয় যে U373 কোষগুলির এনজিএফ-এর প্রতি সম্পূর্ণ প্রতিক্রিয়াশীল হওয়ার সম্ভাবনা রয়েছে।
যেহেতু এনজিএফ প্রশাসন তার রিসেপ্টরগুলির অভিব্যক্তি স্তরকে প্রভাবিত করতে পারে, সম্ভাব্যভাবে TrkA এবং/অথবা p75NTR [31-33] দ্বারা সংকেত পথের মধ্যে ভারসাম্য পরিবর্তন করে, উভয় রিসেপ্টরের অভিব্যক্তিটি 48 ঘন্টা এনজিএফ চিকিত্সার উপরও পরীক্ষা করা হয়েছিল। যাইহোক, নিউরোট্রফিন (চিত্র S1B) এর সাথে উদ্দীপনার পরে TrkA এবং p75NTR উভয়ের প্রোটিনের পরিমাণে কোন পরিবর্তন পরিলক্ষিত হয়নি।
2.3। NGF U373 দ্বারা সংস্কৃতির মাধ্যমে কোলেস্টেরল নিঃসরণ বৃদ্ধি করে
প্রাপ্ত ফলাফলগুলি আমাদের অধ্যয়ন করতে প্ররোচিত করেছে যে এনজিএফ দ্বারা মধ্যস্থতা করা প্রভাবগুলি কোলেস্টেরল সামগ্রীর মড্যুলেশনকে প্রতিফলিত করতে পারে কিনা। কোলেস্টেরিল এস্টার সহ নিরপেক্ষ লিপিডগুলি কল্পনা করতে অয়েল রেড ও স্টেনিং করা হয়েছিল। U373 কোষে পাওয়া লিপিড ফোঁটার আকার এবং সংখ্যা প্রাথমিক অ্যাস্ট্রোসাইট [34,35] এর জন্য রিপোর্ট করা অনুরূপ।
যাইহোক, এনজিএফ চিকিত্সার উপর কোন পরিবর্তন পরিলক্ষিত হয়নি (চিত্র 2A এবং S2A, B)। একইভাবে, ফিলিপিন স্টেনিং (চিত্র 2B এবং S2C) দ্বারা মূল্যায়ন করা ফ্রি কোলেস্টেরলের পরিমাণে কোনও পরিবর্তন সনাক্ত করা যায়নি। কোলেস্টেরল এনজাইমেটিক অ্যাস দ্বারা অন্তঃকোষীয় কোলেস্টেরলের মাত্রার উপর উল্লেখযোগ্য প্রভাবের অভাব আরও বজায় ছিল, যা হাইলাইট করে যে এনজিএফ মোট কোলেস্টেরল, ফ্রি কোলেস্টেরল এবং কোলেস্টেরল এস্টার (চিত্র 2C) এর বিষয়বস্তুকে পরিবর্তন করেনি।
বিপরীতভাবে, U{0}}চিকিত্সা করা NGF (চিত্র 2D) এর সংস্কৃতি মাধ্যমে কোলেস্টেরলের পরিমাণ (মুক্ত, এস্টার এবং মোট) উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। যখন সামগ্রিকভাবে মূল্যায়ন করা হয়, তখন এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে এনজিএফ ApoE-যুক্ত কণাগুলির ABCA1-মধ্যস্থিত প্রবাহ বৃদ্ধি করে কোলেস্টেরল এক্সট্রুশনকে উৎসাহিত করে।
চিত্র 1. NGF U373 কোষে কোলেস্টেরল হোমিওস্টেসিসে জড়িত প্রধান প্রোটিনের অভিব্যক্তিকে সংশোধন করে এবং U373 সংস্কৃতি মাধ্যমে ApoE ক্ষরণ n বাড়ায়। (A–G) SREBP-1, SREBP-2, HMGCR, LDLr, NPC1, ABCA1, এবং ApoE-এর প্রতিনিধি ওয়েস্টার্ন ব্লট এবং যানবাহন (Ctrl) এবং NGF (100 এনজি) দিয়ে চিকিত্সা করা U373 কোষে ঘনত্বের বিশ্লেষণ /mL) 48 ঘন্টার জন্য। n=6 বিভিন্ন পরীক্ষা।
অ্যাক্টিন এবং ভিনকুলিন লোডিং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। (এইচ) যানবাহন- এবং এনজিএফ-চিকিত্সা করা U373 সংস্কৃতি মাধ্যমে এলিসা অ্যাস দ্বারা ApoE স্তরের (µg/mL) পরিমাপ। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। ডেটা প্রতিনিধিত্ব মানে ± SD. পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ একটি একক জোড়াবিহীন Studet-পরীক্ষা পরীক্ষার দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। * p < 0৷{7}}5, ** p < 0.01, *** p < 0.001৷
2.4। p75NTR আংশিকভাবে কোলেস্টেরল প্রোটিন নেটওয়ার্কে এনজিএফ-মধ্যস্থ প্রভাবের সাথে জড়িত
পরীক্ষামূলক ফলাফলগুলি দেখায় যে এনজিএফ তার কম-সম্পর্কের রিসেপ্টর p75NTR [25] সক্রিয় করার মাধ্যমে লিভার কোষে কোলেস্টেরল বিপাককে প্রভাবিত করে। এই সিগন্যালিং পথটি অ্যাস্ট্রোসাইটিক কোষগুলিতেও সংরক্ষিত হতে পারে কিনা তা পরীক্ষা করার জন্য, আমরা LM11A-31 দিয়ে U373 চিকিত্সা করেছি, একটি ছোট লিগ্যান্ড যা একটি নির্দিষ্ট p75NTR মডুলেটর হিসাবে কাজ করে। এই যৌগটি TrkA সক্রিয় করে না কিন্তু, NGF এর অনুরূপভাবে, p75NTR ডাউনস্ট্রিম সিগন্যালিং পাথওয়ের আনয়ন করে [36]। LM11A-31 HMGCR এর NGF-মধ্যস্থতা বৃদ্ধির নকল করেছে (চিত্র 3A)।
যাইহোক, কোলেস্টেরল বিপাকের সাথে জড়িত অন্যান্য প্রোটিনগুলিতে কোন পরিবর্তন পরিলক্ষিত হয়নি (চিত্র 3B-D), বা বহির্কোষী ApoE (চিত্র 3E) এবং কোলেস্টেরল (মোট, মুক্ত এবং এস্টার) সংস্কৃতি মাধ্যমের পরিমাণে (চিত্র 3F) প্রকাশ করা হয়নি। ) সম্মিলিতভাবে, এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে HMGCR-এর NGF-প্ররোচিত অভিব্যক্তি p75NTR কার্যকলাপ দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়, যেখানে NPC1, ABCA1, ApoE নিঃসরণ এবং কোলেস্টেরল এক্সট্রুশনের উপর প্রভাবগুলি সম্ভবত অন্যান্য ট্রান্সডাকশন পথের উপর নির্ভরশীল, সম্ভবত TrkA জড়িত।
চিত্র 2. নিরপেক্ষ লিপিড এবং কোলেস্টেরল সামগ্রীর উপর এনজিএফ প্রভাব। (A) U373 কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য যানবাহন (Ctrl) বা NGF (100 ng/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং তারপরে নিরপেক্ষ লিপিডগুলির অন্তঃকোষীয় বিষয়বস্তু কল্পনা করতে অয়েল রেড ও দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। (বি) 48 ঘন্টার জন্য যানবাহন (Ctrl) এবং NGF (100 ng/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা U373 কোষগুলিতে সঞ্চালিত ফিলিপিন স্টেনিংয়ের প্রতিনিধি চিত্র। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। (সি) যানবাহন- এবং এনজিএফ-চিকিত্সা করা U373 কোষে অন্তঃকোষীয় কোলেস্টেরলের মাত্রা (মোট কোলেস্টেরল, ফ্রি কোলেস্টেরল এবং কোলেস্টেরল এস্টার) পরিমাণ নির্ধারণ। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। (D) 48 ঘন্টার জন্য গাড়ি (Ctrl) এবং NGF (100 ng/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা U373 কোষের সংস্কৃতি মাধ্যমে কোলেস্টেরলের পরিমাণ নির্ধারণ (মোট কোলেস্টেরল, ফ্রি কোলেস্টেরল এবং কোলেস্টেরল এস্টার)। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। ডেটা প্রতিনিধিত্ব মানে ± SD. একটি জোড়াবিহীন ছাত্রের টি-পরীক্ষা গেয়ে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ** পি<0.01.
চিত্র 3. কোলেস্টেরল বিপাক এবং নিঃসরণে LM11A-31 দ্বারা p75NTR মড্যুলেশনের প্রভাব। (A–D) 48 ঘন্টার জন্য যানবাহন (Ctrl) এবং LM11A-31 (0.1 µM) দিয়ে চিকিত্সা করা U373 কোষে HMGCR, ABCA1, NPC1, এবং ApoE-এর প্রতিনিধিত্বমূলক ওয়েস্টার্ন ব্লট এবং ডেনসিটোমেট্রিক বিশ্লেষণ। n=4 বিভিন্ন পরীক্ষা।
প্রোটিন লোডিং স্বাভাবিক করার জন্য ভিনকুলিন একটি গৃহস্থালি প্রোটিন হিসাবে কাজ করে। (E) যানবাহন- এবং LM11A-31-চিকিত্সা করা U373 কোষ থেকে ELISA অ্যাস দ্বারা ApoE পরিমাণের পরিমাণ (µg/mL)। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। (F) 48 ঘন্টার জন্য যানবাহন (Ctrl) এবং LM11A-31 (0.1 µM) দিয়ে চিকিত্সা করা U373 কোষের সংস্কৃতি মাধ্যমে কোলেস্টেরলের পরিমাণ নির্ধারণ (মোট কোলেস্টেরল, ফ্রি কোলেস্টেরল এবং কোলেস্টেরল এস্টার)। n=3 বিভিন্ন পরীক্ষা। ডেটা প্রতিনিধিত্ব মানে ± SD. পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ একটি একক unpaired Studet-পরীক্ষা পরীক্ষা ব্যবহার করে বাহিত হয়. *** p < 0.001.
For more information:1950477648nn@gmail.com
