কুওয়ানন টি এবং স্যাঙ্গেনন এ মরুস আলবা থেকে বিচ্ছিন্ন হয়ে BV2 এবং RAW264.7 কোষে NF-κB এবং HO-1/Nrf2 সিগন্যালিং পাথওয়েগুলি নিয়ন্ত্রণ করে প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব প্রয়োগ করে

আরও তথ্যের জন্য. যোগাযোগtina.xiang@wecistanche.com

বিমূর্ত: আমরা পূর্বে মোরাস আলবা ছালের মিথানোলিক নির্যাস নিয়ে তদন্ত করেছি এবং নির্যাস থেকে 11টি যৌগ চিহ্নিত করেছি: কুওয়ানন জি(1), কুওয়ানা ই (2), কুওয়ানা টি(3), স্যাঞ্জেনন এ(4), স্যাঞ্জেনন এম(5), সানজেনল A(6), মুলবেরোফুরান B(7), মুলবেরোফুরান G(8), moracin M(9), moracin O(10), এবং norartocarpanone (11)। এখানে, আমরা তদন্তপ্রদাহ বিরোধীমাইক্রোগ্লিয়াল কোষ (BV2) এবং ম্যাক্রোফেজগুলিতে (RAW264.7) এই যৌগগুলির প্রভাব। তাদের মধ্যে, 3 এবং 4 এই কোষগুলিতে লাইপোপলিস্যাকারাইড (এলপিএস)-প্ররোচিত নাইট্রিক অক্সাইডের উত্পাদনকে উল্লেখযোগ্যভাবে বাধা দেয়, যা এই দুটি যৌগের প্রদাহ-বিরোধী বৈশিষ্ট্যের পরামর্শ দেয়। এই যৌগগুলি প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2, ইন্টারলিউকিন-6, এবং টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-সি, এবং এলপিএস উদ্দীপনার পরে ইন্ডুসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস এবং সাইক্লোঅক্সিজেনেসের প্রকাশকে{10}} বাধা দেয়। 3 এবং 4 এর সাথে প্রিট্রিটমেন্ট উভয় কোষের মধ্যে পারমাণবিক ফ্যাক্টর কাপ্পা বি সংকেত পথের সক্রিয়করণকে বাধা দেয়। যৌগগুলি নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর এরিথ্রয়েড 2-সম্পর্কিত ফ্যাক্টর 2 সক্রিয়করণের মাধ্যমে হিম অক্সিজেনেস(HO)-1 এর অভিব্যক্তিকেও প্ররোচিত করেছিল। HO-1 এর কার্যকলাপকে দমন করার ফলে প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি বিপরীত হয় 3 এবং 4 দিয়ে প্রিট্রিটমেন্ট করে, পরামর্শ দেয় যে প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি HO-1 দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়েছিল৷ একসাথে নেওয়া, 3 এবং 4 এর জন্য থেরাপিউটিক এবং প্রতিরোধমূলক এজেন্ট বিকাশের জন্য সম্ভাব্য প্রার্থীপ্রদাহজনক রোগ.

কীওয়ার্ড: মরাস আলবা; কুওয়ানন টি; sanggenon A; BV2; RAW264.7 কোষ; বিরোধী প্রদাহজনক প্রভাব

আরো পণ্য জানতে এখানে ক্লিক করুন

1। পরিচিতি

Morus alba, Moraceae পরিবারের অন্তর্গত একটি ঔষধি উদ্ভিদ, ঐতিহ্যগত ওষুধে পালমোনারি প্রদাহজনিত অবস্থার চিকিৎসার জন্য ব্যবহৃত হয়েছে [1]। এর মূলের ছালে বিভিন্ন সক্রিয় উপাদান রয়েছে যেমন umbelliferone, scopoletin, mucins, tannins,ফ্ল্যাভোনয়েড(মোরুসিন, মুলবেরিন, মালবেরিক্রোমিন, সাইক্লোমুলবেরিন, মোরাসিন পি, মোরাসিন ও, মালবেররোফুরান কিউ, কুওয়ানা ই, এবং কুওয়ানন এইচ)[2], 2-আরিলবেনজোফুরানস (মোরাসেনিন ডি, মোরাসিন পি, মোরাসিন ও, এবং মালবেরোফুরান ও), এবং প্রিনিলেটেড ফ্ল্যাভোনয়েড (লিকোফ্লেভন সি, সাইক্লোমুলবেরিন, নিওসাইক্লোমোরুসিন, স্যাঞ্জেনন আই, মোরুসিন এবং কুওয়ানা ইউ)[3,4]। এম. আলবা নির্যাস এবং সক্রিয় যৌগগুলি ফুসফুসের রোগকে উপশম করতে পারে, যা সাম্প্রতিক গবেষণা [5-7] দ্বারা প্রকাশ করা হয়েছে। ফুসফুসে M.alba-এর ফার্মাকোলজিক্যাল প্রভাব ছাড়াও, টি-বিএইচপি-প্ররোচিত HepG2 কোষে আইসোপ্রিনাইলেটেড ফ্ল্যাভোনয়েড (স্যাঞ্জেনল কিউ, কুওয়ানা টি, স্যাঞ্জেনন এন, মালবেররোফুরান জি, এবং মালবেররোফুরান সি) হেপাটোপ্রোটেকটিভ প্রভাব ফেলে [৮]। প্রিনাইল-ফ্ল্যাভোনয়েড (কুওয়ানন এ, কুওয়ানা সি, কুওয়ানা টি, এবং মরুসিন) এবং ট্রাইটারপেনয়েডস (বেটুলিন অ্যাসিড, অ্যাভেল এবং -সিটোস্টেরল) উল্লেখযোগ্যভাবে 3T3-L1 অ্যাডিপোসাইটের পার্থক্যকে বাধা দেয় [9]। মরিন হাইড্রেট, এম. আলবার প্রধান ফ্ল্যাভোনয়েড উপাদান, দীর্ঘস্থায়ী অপ্রত্যাশিত স্ট্রেস-প্ররোচিত স্মৃতিশক্তির দুর্বলতা দূর করে, ইঙ্গিত করে যে এই যৌগটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাকে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং নিউরোইনফ্ল্যামেটরি পথগুলিকে বাধা দিতে পারে [10]। এই গবেষণাগুলি পরামর্শ দেয় যে M.alba তে থাকা উপাদানগুলি বিভিন্ন রোগের চিকিত্সার জন্য সম্ভাব্য প্রার্থী।

প্রদাহ, ক্ষতিকারক উদ্দীপকের একটি জটিল আত্মরক্ষার প্রতিক্রিয়া, ম্যাক্রোফেজ, মনোসাইট, লিউকোসাইট, মাস্ট কোষ এবং অন্যান্য কোষের ধরন সহ বেশ কয়েকটি ইমিউন কোষের সক্রিয়করণের মাধ্যমে ইমিউন প্রতিরক্ষায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [১১]। ম্যাক্রোফেজগুলি শরীরের সর্বাধিক প্রচুর এবং ব্যাপকভাবে বিতরণ করা প্রতিরোধক কোষ, এবং মাইক্রোগ্লিয়া হল কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের (সিএনএস) আবাসিক ম্যাক্রোফেজ [12]। ম্যাক্রোফেজ এবং মাইক্রোগ্লিয়াল কোষগুলি প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়ার মূল খেলোয়াড়। এগুলি লাইপোপলিস্যাকারাইড (এলপিএস), সাইটোকাইনস এবং কেমোকাইনের মতো উদ্দীপনার প্রতিক্রিয়া হিসাবে সক্রিয় করা যেতে পারে এবং প্রদাহজনক অবস্থাকে প্ররোচিত করে [13]। প্রদাহজনক অবস্থার অধীনে, অত্যধিক সক্রিয় ম্যাক্রোফেজ এবং মাইক্রোগ্লিয়াল কোষগুলি প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি মধ্যস্থতাকারীর (নাইট্রিক অক্সাইড (NO), প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিন E2(PGE,), inducible নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস (iNOS), এবং সাইক্লোক্সিজেনেস (COX)) এর অস্বাভাবিক নিয়ন্ত্রণ ঘটায়{6} ) এবং প্রো-ইনফ্লেমেটরি সাইটোকাইনস (ইন্টারলিউকিন (IL)-6 এবং টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর (TNF)-a), পারমাণবিক ফ্যাক্টর কাপ্পা বি (NF-B) সংকেত পথের সক্রিয়করণের মাধ্যমে[14,15]। প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি মধ্যস্থতাকারীদের বর্ধিত মাত্রা প্রদাহজনিত রোগের অগ্রগতিকে আরও বাড়িয়ে তোলে, যা আরও প্রদাহজনক কারণগুলির সক্রিয়তা বাড়ায়, যার ফলে একটি দুষ্টচক্রের সৃষ্টি হয়[16]। অতএব, প্রদাহজনক রোগের চিকিত্সা এবং প্রতিরোধের জন্য প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারীদের নিয়ন্ত্রণ করা অপরিহার্য।

হিম অক্সিজেনেস (HO)-1 হল একটি হার-সীমিত এনজাইম যা বিলিভারডিন, লৌহঘটিত আয়ন (Fe2 প্লাস), এবং কার্বন মনোক্সাইড (CO)[17]-এ হিমের অবক্ষয়কে অনুঘটক করে। HO-1 আবেশন পারমাণবিক ফ্যাক্টর এরিথ্রয়েড 2-সম্পর্কিত ফ্যাক্টর 2(Nrf2) সক্রিয়করণ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। HO-1 টিস্যু রক্ষা এবং শরীরের হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রাখতে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং প্রদাহের প্রতিক্রিয়া হিসাবে প্ররোচিত হতে পারে[18]। তাই, প্রদাহজনিত রোগের চিকিৎসার সম্ভাব্য কৌশলগুলির মধ্যে একটি হল HO-1 ইনডাকশনকে টার্গেট করা।

প্রদাহজনিত রোগের চিকিৎসার জন্য প্রাকৃতিক পণ্য থেকে প্রার্থী(দের) অন্বেষণের জন্য আমাদের চলমান প্রচেষ্টায়, আমরা এখানে উপস্থাপন করছিবিরোধী প্রদাহজনক প্রভাবLPS-প্ররোচিত BV2 এবং RAW264.7 কোষে M.alba থেকে বিচ্ছিন্ন 11l যৌগগুলির মধ্যে।

2. ফলাফল

2.1.BV2 এবং RAW264.7 কোষের কার্যক্ষমতার উপর M.alba থেকে বিচ্ছিন্ন 11টি যৌগের প্রভাব

পূর্ববর্তী গবেষণায়, M.alba এর মূলের ছাল জলীয় মিথানলে নিষ্কাশন করা হয়েছিল, এবং প্রাপ্ত নির্যাসগুলিকে পর্যায়ক্রমে EtOAc, n-BuOH এবং H2O2 তে বিভক্ত করা হয়েছিল। EtOAc ভগ্নাংশের বারবার SiO2, ODS, এবং Sephadex LH-20 কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি 11টি যৌগ প্রদান করে, যেমন কুওয়ানন G(1), কুওয়ানা ই(2), কুওয়ানা টি (3), সানজেনন A(4), সানজেনন এম(5), স্যাঞ্জেনল এ(6), মুলবেরফুরান বি(7), মুলবেরফুরান জি(8), মোরাসিন এম(9), মোরাসিন ও(10), এবং নরর্টোকার্পনোন (11)[6,19,20]। M.alba থেকে বিচ্ছিন্ন 11টি যৌগের রাসায়নিক গঠন চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে। এই যৌগগুলির সাইটোটক্সিক প্রভাব নির্ধারণ করতে, একটি 3-(4,5-ডাইমেথাইলথিয়াজল-2-yl){{ 26}}। (চিত্র ২). যৌগ 2, 3 এবং 4 এর 80 μM এ বিষাক্ত প্রভাব ছিল, যৌগ 5 এর 40 μM এ বিষাক্ত প্রভাব ছিল। বিষাক্ততা মূল্যায়নের ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, একটি অ-বিষাক্ত ঘনত্বের পরিসর নির্বাচন করা হয়েছিল পরবর্তী অধ্যয়নের জন্য প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলির উপর (যৌগ 2, 3,4 40 uM, যৌগ 5 200 μM, এবং অন্যান্য যৌগগুলি 80 μM) .

BV2 এবং RAW264.7 কোষে প্রদাহজনিত কারণ এবং iNOS প্রোটিনের প্রকাশের উপর M. alba থেকে বিচ্ছিন্ন যৌগগুলির 2.2. প্রভাব

NO কার্ডিওভাসকুলার, স্নায়বিক, এবং একটি বিনামূল্যে র্যাডিক্যালইমিউন সিস্টেম. এটি অন্তঃকোষীয় হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রাখে, নিউরোট্রান্সমিটার পরিবহন করে এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি কার্যকলাপ এবং সাইটোটক্সিসিটি নিয়ন্ত্রণ করে। যাইহোক, যখন প্রচুর পরিমাণে NO উত্পাদিত হয়, তখন এটি শরীরের উপর ক্ষতিকর প্রভাব ফেলে, যার মধ্যে ভাসোডিলেশন, সাইটোটক্সিসিটি এবং টিস্যুর ক্ষতি হয় [21,22]। তারপরে আমরা এলপিএস-প্ররোচিত BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলিতে নাইট্রাইট উত্পাদনের উপর এই যৌগগুলির প্রভাবগুলি পরীক্ষা করেছি। কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য LPS (1 ug/mL) দিয়ে উদ্দীপনার 2 ঘন্টা আগে যৌগের বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। যৌগগুলির মধ্যে, শুধুমাত্র যৌগ 3 (কুওয়াননটি) এবং 4 (সাঙ্গেনন এ) উল্লেখযোগ্যভাবে BV2 এবং RAW264.7 কোষ লাইন (চিত্র 3) উভয় ক্ষেত্রে নাইট্রাইট উত্পাদনকে বাধা দেয়। এছাড়াও, আমরা যৌগিক প্রিট্রিটমেন্টের পরে এলপিএস-চিকিত্সা করা গোষ্ঠী এবং এলপিএস প্রিট্রিটমেন্টের পরে যৌগ-চিকিত্সা করা গোষ্ঠীর মধ্যে নাইট্রাইট উত্পাদনের প্রতিরোধমূলক প্রভাবের তুলনা করার জন্য একটি অতিরিক্ত পরীক্ষা পরিচালনা করেছি। ফলস্বরূপ, দুটি পরীক্ষামূলক গোষ্ঠীর (পরিপূরক চিত্র S1) মধ্যে নাইট্রাইট উত্পাদনের প্রতিরোধমূলক প্রভাবে কোনও পার্থক্য ছিল না। অতএব, এই গবেষণায়, এলপিএসের চিকিত্সা করার আগে 2 ~ 3 ঘন্টার মধ্যে যৌগগুলির সাথে প্রাক-চিকিত্সা ব্যবহার করে নিম্নলিখিত পরীক্ষাগুলি পরিচালিত হয়েছিল।

প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি প্রোটিন ইনডিসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস (আইএনওএস) দ্বারা NO-এর উৎপাদন বৃদ্ধি পায়। যাইহোক, iNOS-এর অত্যধিক এক্সপ্রেশন রোগের প্যাথোফিজিওলজিকে গুরুতরভাবে ক্ষতিগ্রস্ত করে [২৩]। যৌগগুলি 3 এবং 4 ঘনত্ব-নির্ভর পদ্ধতিতে iNOS-এর প্রকাশকে বাধা দেয় (চিত্র 4)। আমরা BV2 এবং RAW264.7 কোষে প্রদাহজনক কারণগুলির LPS-প্ররোচিত অভিব্যক্তিতে যৌগ 3 এবং 4 এর প্রভাবগুলি পরীক্ষা করেছি। কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য LPS (1 ug/mL) দিয়ে উদ্দীপনা দেওয়ার আগে 2 ঘন্টার জন্য যৌগ 3 এবং 4 এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। উভয় যৌগই BV2 এবং RAW264.7 কোষে PGE2, TNF এবং IL-6-এর LPS-প্ররোচিত অভিব্যক্তিকে উল্লেখযোগ্যভাবে বাধা দেয় (চিত্র 5)। ফলাফলগুলি দেখায় যে যৌগ 3 এবং 4 এর সাথে প্রাক-চিকিত্সা BV2 এবং RAW264.7 কোষে LPS-প্ররোচিত প্রদাহকে দমন করে।

2.3.BV2 এবং RAW264.7 কোষে NF-xB ট্রান্সলোকেশনে যৌগ 3 এবং 4 এর প্রভাব

NF-kB হল একটি ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর যা iNOS এক্সপ্রেশন নিয়ন্ত্রণ করে [24]। সাধারণ NF-kB নিয়ন্ত্রক প্রোটিন যেমন IKB সহ কমপ্লেক্স গঠন করে তার নিষ্ক্রিয় আকারে থাকে। যাইহোক, যখন এটি LPS দ্বারা সক্রিয় হয়, তখন IkBa ফসফোরিলেশন দ্বারা অবনমিত হয় এবং NF-kB (যেমন p65) নিউক্লিয়াসে স্থানান্তরিত হয় [25], যা প্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারী জিনকে প্রচার করে এবং প্রদাহজনক কারণগুলির প্রকাশকে প্ররোচিত করে [26]। LPS-অ্যাক্টিভেটেড BV2 এবং RAW264.7 কোষে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি ফ্যাক্টরগুলির উত্পাদনের উপর যৌগ 3 এবং 4 এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব আরও পরীক্ষা করার জন্য, আমরা যৌগ 3 এবং 4, LPS, বা সঙ্গে চিকিত্সা করা কোষগুলিতে p65-এর পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশনের অভিব্যক্তি তদন্ত করেছি। উভয়ই একটি অ্যান্টি-p65 FITC-লেবেলযুক্ত অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে। DAPI পারমাণবিক দাগের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। কন্ট্রোল গ্রুপে, p65 এক্সপ্রেশন সাইটোসোলে সনাক্ত করা হয়েছিল। যাইহোক, এলপিএস-প্ররোচিত কোষগুলিতে, নিউক্লিয়াসে p65 জমে সনাক্ত করা হয়েছিল, যেমন DAPI এবং p65 স্টেনিংয়ের একত্রিত চিত্রগুলিতে নির্দেশিত হয়েছে। তদ্ব্যতীত, এলপিএস-প্ররোচিত কোষের সাথে তুলনা করে, যৌগ 3 এবং 4 NF-KB (p65) DNA- বাঁধাই কার্যকলাপ (চিত্র 6A, B) এবং পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশন (চিত্র 6C-F) এ LPS- মধ্যস্থতা বৃদ্ধিকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে যৌগ 3 এবং 4 হল এলপিএস-উদ্দীপিত NF-kB পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশনের নেতিবাচক নিয়ন্ত্রক।

2.4.BV2 এবং RAW264.7-এর Nrf2/HO-1 পাথওয়েতে যৌগ 3 এবং 4-এর প্রভাব

সেল হেম অক্সিজেনেস-1(HO-1) পারমাণবিক ফ্যাক্টর ই2-সম্পর্কিত ফ্যাক্টর 2(Nrf2), Nrf2/HO-1 পথ একটি শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সংকেত সিস্টেমের লক্ষ্য কার্বন মনোক্সাইড (CO), বিলিভারডিন এবং হিমে বিনামূল্যে আয়রন প্রচারের জন্য [27]। কার্বন মনোক্সাইড, হিম ক্যাটাবোলিজমের একটি বায়বীয় বিপাক, ভাসোডিলেশন এবং প্রোইনফ্ল্যামেটরি প্রতিক্রিয়াগুলির নিয়ন্ত্রক প্রভাব প্রদর্শন করে [২৮]। এছাড়াও, HO-1 কোষগুলিকে প্রদাহ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে রক্ষা করতে এবং সক্রিয় ম্যাক্রোফেজগুলিতে নাইট্রাইট উত্পাদন নিয়ন্ত্রণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [২৯]। 3 এবং 4 যৌগগুলি HO-1-এর এক্সপ্রেশন স্তর বাড়ায় কিনা তা তদন্ত করার জন্য আমরা ওয়েস্টার্ন ব্লটিং করেছি, যেখানে সুপরিচিত HO-1 ইনডুসার কোবাল্ট প্রোটোপোরফাইরিন (CoPP) HO{{ বৃদ্ধির ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। 16}} প্রোটিন অভিব্যক্তি। [৩০]। ফলাফলগুলি প্রকাশ করেছে যে যৌগ 3 এবং 4 এছাড়াও HO-1 (চিত্র 7) এর অভিব্যক্তিকে নিয়ন্ত্রণ করেছে। আমরা আরও অন্বেষণ করেছি যে যৌগ 3 এবং 4 Nrf2 এর সক্রিয়করণকে নিয়ন্ত্রণ করে কিনা। নিউক্লিয়াসে Nrf2-এর স্থানান্তর একটি সময়-নির্ভর পদ্ধতিতে বৃদ্ধি করা হয়েছিল, যা নির্দেশ করে যে যৌগ 3 এবং 4 উল্লেখযোগ্যভাবে BV2 এবং RAW264.7 কোষে Nrf2/HO-1 পথকে আপ-রেগুলেট করেছে (চিত্র 8)।

3 এবং 4 যৌগগুলির অ্যান্টি-নিউরোইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাবগুলি BV2 এবং RAW264.7 কোষে HO-1 এক্সপ্রেশনের সাথে সম্পর্কিত কিনা তা আরও পরীক্ষা করার জন্য, আমরা টিন প্রোটোপোরফাইরিন-IX(SNPP) এর সাথে পরীক্ষাগুলির একটি সেট করেছি। যা HO-1 এর একটি নির্বাচনী কার্যকলাপ প্রতিরোধক। SNPP ব্যবহার করে যা HO-1 এর অভিব্যক্তিকে হ্রাস করতে পারে, আমরা নির্ধারণ করার চেষ্টা করেছি যে HO-1 LPS 【31】 দ্বারা প্ররোচিত প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়ার উপর উপরের যৌগগুলির প্রতিরোধমূলক প্রভাবের মধ্যস্থতা করে কিনা৷ 50 uM SNPP সহ বা ছাড়া 2 ঘন্টার জন্য 20 μM যৌগ 3 এবং 4 দিয়ে কোষের চিকিত্সা করার পরে তাদের 24 ঘন্টার জন্য LPS দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। যদিও যৌগগুলি 3 এবং 4 LPS প্ররোচিত BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলিতে নাইট্রাইট উত্পাদন হ্রাস করে, তাদের প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি SNPP চিকিত্সার দ্বারা বিপরীত হয়েছিল (চিত্র 9)। এলপিএস উদ্দীপনার পরে শুধুমাত্র এসএনপিপি নাইট্রিক অক্সাইড (NO) উৎপাদনকে প্রভাবিত করেনি, পরামর্শ দেয় যে যৌগ 3 এবং 4 এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব HO-1 এক্সপ্রেশন দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়।

3. আলোচনা

বর্তমান গবেষণায় দেখা গেছে যে কুওয়ানা টি এবং স্যাঞ্জেনন এ বিভি2 এবং RAW264.7 কোষে এলপিএস-প্ররোচিত প্রদাহকে দমন করে। এই যৌগগুলি IL-6 এবং TNF- সহ NO, PGE2, এবং প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির LPS-প্ররোচিত উত্পাদনকে বাধা দেয় এবং BV2 এবং RAW264.7 কোষ উভয়েই iNOS এবং COX-2 এর প্রকাশকে বাধা দেয়। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে কুওয়ানা টি এবং স্যাঞ্জেনন এ এনএফ-কেবি সিগন্যালিং পাথওয়েকে নিষ্ক্রিয় করে তাদের প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব প্রয়োগ করেছে। উপরন্তু, এই যৌগগুলি Nrf2 অ্যাক্টিভেশনের মাধ্যমে HO-1 এর অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করেছিল৷ উপরন্তু, এই যৌগগুলি Nrf2 অ্যাক্টিভেশনের মাধ্যমে HO-1 এর অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করেছিল, এবং এই প্রভাবটি এর সাথে সম্পর্কিত বলেও নিশ্চিত করা হয়েছিল বিরোধী প্রদাহজনক কার্যকলাপ.

Nitric oxide synthase (NOS) has three isoforms: neuronal NOS (nNOS; NOS1), iNOS (NOS2), and endothelial eNOS (NOS3)[32]. iNOS is an inducible form that is upregulated in response to various stimuli, including LPS, cytokines, chemokines, and stress, while nNOS and eNOS are constitutive forms that catalyze continuous NO secretion at basal concentrations J33]. Similar to iNOS, COX-2 is also an inducible form upregulated by various inflammatory stimuli, such as cytokines, growth factors, tumor promoters, and bacterial LPS[34]. Its other isoform, COX-1, is constitutively expressed in most tissues under normal physiological conditions [35].COX-2 exerts an enzymatic effect on the conversion of prostaglandin H2 (PGH2), which converts arachidonic acid to PGE, prostaglandin 12(PGI2), prostaglandin F2a (PGF>.), এবং থ্রোমবক্সেন A2(TXA,)[361. প্রদাহজনক অবস্থার অধীনে, iNOS এবং COX-2-এর মাত্রা বৃদ্ধি পায়, যার ফলে যথাক্রমে NO এবং PGE2-এর অত্যধিক উৎপাদন হয় এবং প্রদাহজনিত ব্যাধিগুলির বৃদ্ধির দিকে পরিচালিত করে [37]। বর্তমান সমীক্ষায়, এলপিএস-উত্তেজক BV2 এবং RAW264.7 কোষে কোন উৎপাদন বাধাগ্রস্ত হয় কিনা তা নির্ধারণ করতে আমরা প্রথমে M.alba থেকে বিচ্ছিন্ন 11টি যৌগ মূল্যায়ন করেছি। আমাদের ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ BV2 এবং RAW264.7 উভয় কোষেই সবচেয়ে শক্তিশালী প্রতিরোধমূলক প্রভাব প্রয়োগ করেছে (চিত্র 3)। আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণায়, মোরাসিন এম অ্যালভিওলার ম্যাক্রোফেজগুলিতে একটি প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব ফেলেছিল, কিন্তু আমাদের ফলাফলগুলি ভিন্ন দেখায়। প্যাটার্ন যাইহোক, যেহেতু প্রতিটি কোষের আলাদা বৈশিষ্ট্য রয়েছে, তাই একই প্রক্রিয়া J38 সহ বিভিন্ন ক্রিয়াকলাপ প্রদর্শিত হতে পারে। অতএব, এই কাগজের ফলাফলের মতো, এটি নিশ্চিত করা হয়েছিল যে মোরাসিন এম-এর BV2 এবং RAW264.7 কোষে চিকিত্সার ঘনত্ব পর্যন্ত কোনও প্রদাহ-বিরোধী কার্যকলাপ ছিল না। অতএব, আরও পরীক্ষার জন্য কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ নির্বাচন করা হয়েছিল।

সাইটোকাইনগুলির প্রদাহজনক এবং ইমিউন প্রতিক্রিয়াগুলির উপর একটি জটিল নিয়ন্ত্রক প্রভাব রয়েছে [39]। ম্যাক্রোফেজ এবং মাইক্রোগ্লিয়াল কোষগুলির সক্রিয়করণ প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন J40 এর নিঃসরণ বাড়ায় এবং এই বর্ধিত নিঃসরণ আরও সাইটোকাইন নিঃসরণের দিকে পরিচালিত করে [41]। IL-6 হল অন্যতম প্রধান সাইটোকাইন এবং এটি একটি দ্রবণীয় মধ্যস্থতাকারী যা প্রদাহ, ইমিউন প্রতিক্রিয়া এবং হেমাটোপয়েসিসের জন্য দায়ী [42]। IL-6 সিগন্যালিং দুটি ভিন্ন প্রক্রিয়ার মাধ্যমে নিয়ন্ত্রিত হয়, যার মধ্যে রয়েছে ঝিল্লি-বাউন্ড IL-6 রিসেপ্টর (mblL6R) এবং দ্রবণীয় IL-6 রিসেপ্টরের স্বীকৃতি (sIL6R)[43]। উভয় প্রক্রিয়াই গ্লাইকোপ্রোটিন (GP)130 অ্যাক্টিভেশনের সাথে যুক্ত, যার ফলে ডাউনস্ট্রিম সিগন্যালিং অণু সক্রিয় হয়, যার মধ্যে রয়েছে জানুস কিনেস (IAK)/সিগন্যাল ট্রান্সডুসার এবং অ্যাক্টিভেটর অফ ট্রান্সক্রিপশন (STAT)কাইনেস, ফসফোইনোসাইটাইড 3-কাইনেস (PI3K) ), এবং মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস (MAPK)[44]। IL-6 ক্যান্সার, সংক্রমণ, অটোইমিউন রোগ, অগ্ন্যাশয় রোগ এবং কার্ডিওভাসকুলার রোগে আক্রান্ত রোগীদের প্রদাহের মাত্রা পূর্বাভাস এবং মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়।

TNF-, আরেকটি প্রধান সাইটোকাইন, অনেক ইমিউন এবং প্রদাহজনক প্রক্রিয়াতেও গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, যেমন ইমিউন কোষের বিস্তার, অ্যাপোপটোসিস, নেক্রোসিস এবং বেঁচে থাকা। TNF- এর জৈবিক প্রভাব দুটি ভিন্ন রিসেপ্টর, টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর রিসেপ্টর (TNFR)1 এবং TNFR2 এর সাথে আবদ্ধ হয়ে নিয়ন্ত্রিত হয়। TNFR1 হল বেশিরভাগ কোষে TNF- কার্যকলাপের প্রধান মধ্যস্থতাকারী, কারণ TNFR2-এর TNF- এর সাথে কম বাঁধাই করার সম্পর্ক রয়েছে, যার ফলে TNF- TNFR1 থেকে TNFR2 থেকে আরও সহজে বিচ্ছিন্ন হয়। TNF-তে অস্বাভাবিকতা- সংকেত এবং TNF-এর অত্যধিক উত্পাদন- রিউমাটয়েড আর্থ্রাইটিস, সোরিয়াসিস, ক্রোনের রোগ, এথেরোস্ক্লেরোসিস, সেপসিস, ডায়াবেটিস এবং স্থূলতা সহ অনেক রোগের বিকাশ ঘটায় [৪৫,৪৬। অতএব, প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া এবং প্রদাহজনিত রোগের বিকাশকে দমন ও প্রতিরোধ করার জন্য প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলির উত্পাদনকে বাধা দেওয়া গুরুত্বপূর্ণ। বর্তমান সমীক্ষায়, কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ BV2 এবং RAW264.7 উভয় কোষেই IL-6 এবং TNF--এর LPS-প্ররোচিত উত্পাদনকে বাধা দেয়।

NF-KB হল সবচেয়ে সর্বব্যাপী প্রতিলিপি উপাদান 48]। নিষ্ক্রিয় অবস্থায়, NF-kB সাবইউনিটগুলি সাইটোপ্লাজমে তার ইনহিবিটর প্রোটিনের সাথে আবদ্ধ থাকে, ইনহিবিটর কাপ্পা B (kB)-। এলপিএস এবং সাইটোকাইন সহ বেশ কিছু উদ্দীপনা আইকেবি-র ফসফোরিলেশন এবং অবক্ষয় ঘটায়, যা নিউক্লিয়াসে এনএফ-কেবি সাবইউনিটগুলির মুক্তি এবং স্থানান্তর করার অনুমতি দেয়। ট্রান্সলোকেটেড সাবুনিটগুলি ডিএনএ-তে টার্গেট জিনের kB সাইটগুলির সাথে আবদ্ধ হয়, যার ফলে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি মধ্যস্থতাকারীদের এনকোডিং জিনের ট্রান্সক্রিপশন অন্তর্ভুক্ত করা হয় [49]। অতএব, NF-kB পথের নিষ্ক্রিয়তা প্রদাহজনিত রোগের জন্য একটি থেরাপিউটিক লক্ষ্য হতে পারে। বর্তমান গবেষণায়, কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ-এর সাথে প্রিট্রিটমেন্ট ডিএনএ-বাইন্ডিং কার্যকলাপ এবং এনএফ-কেবি সাবুনিটগুলির পারমাণবিক স্থানান্তরকে বাধা দিয়ে NF-kB সংকেতের LPS-প্ররোচিত সক্রিয়করণকে বাধা দেয় (চিত্র 6)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ-এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি এনএফ-কেবি সংকেত পথের নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে প্রয়োগ করা হয়।

স্বাভাবিক অবস্থায়, Nrf2 সাইটোপ্লাজমে কেলচের মতো ECH-সংশ্লিষ্ট প্রোটিন 1 (Keap1) এর সাথে আবদ্ধ হয়। যাইহোক, এটি কিপল থেকে বিচ্ছিন্ন হয়ে যায়, নিউক্লিয়াসে স্থানান্তরিত হয় এবং ডিএনএ-তে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিক্রিয়া উপাদান (ARE) সাইটগুলির সাথে আবদ্ধ হয়, যা HO-1, NAD(P)H এনকোডিং সহ বিভিন্ন অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট জিনের প্রকাশের দিকে পরিচালিত করে : কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস 1(NQO1), পেরোক্সিরেডক্সিন (Prx), এবং থিওরেডক্সিন (Trx)[50]। বিশেষ করে, HO-1 অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাবের সাথে সম্পর্কিত বলে পরিচিত, এবং এর কার্যকলাপ CO-এর স্তর দ্বারা প্রতিনিধিত্ব করা হয়, HO-এর এনজাইমেটিক কার্যকলাপের দ্বারা হিম থেকে উৎপন্ন তিনটি উপজাতের মধ্যে একটি{{12 }} [৫১]। বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা দেখতে পেয়েছি যে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন A-প্ররোচিত HO-1 এক্সপ্রেশন Nrf2 (চিত্র 7 এবং 8) সক্রিয় করে৷ উপরন্তু, আমরা HO-1 কার্যকলাপের একটি নির্বাচনী ইনহিবিটার, SNPP ব্যবহার করে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন A এবং HO{20}} এক্সপ্রেশনের অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি প্রভাবের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক যাচাই করেছি। NO এবং TNF- উত্পাদন এবং NF-kB অ্যাক্টিভেশনের উপর কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন A-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবগুলি SNPP (চিত্র 9) এর সাথে সহ-চিকিৎসা দ্বারা আংশিকভাবে বিপরীত হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ-এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি HO-1 অভিব্যক্তি দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়।

4. উপকরণ এবং পদ্ধতি

4.1। উপকরণ

রোজওয়েল পার্ক মেমোরিয়াল ইনস্টিটিউট 1640 (RPMI 1640) এবং ভ্রূণের বোভাইন সিরাম Gibco BRL Co. (Grand Island, NY, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। সমস্ত রাসায়নিক সিগমা-অলড্রিচ কেমিক্যাল কোং (সেন্ট লুইস, এমও, ইউএসএ) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। প্রাথমিক অ্যান্টিবডি অ্যান্টি-আইএনওএস, অ্যান্টি-- -অ্যাক্টিন, অ্যান্টি-পি65, এবং অ্যান্টি-এইচও-1 সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি (সান্তা ক্রুজ, CA, USA) থেকে কেনা হয়েছিল; এবং মিলিপুর থেকে খরগোশ-বিরোধী এবং মাউস-বিরোধী সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি

(বিলেরিকা, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র)। PGE, IL-6, এবং TNF- এর জন্য এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (ELISA) কিটগুলি R&DSystems Inc. (Minneapolis, MN, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। মরাস আলবা থেকে 11টি যৌগের বিচ্ছিন্নতা এবং কাঠামোগত সংকল্প অন্যত্র বর্ণনা করা হয়েছে [19-21]।

4.2। কোষ সংস্কৃতি এবং কার্যকারিতা পরীক্ষা

BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলি RPMI 1640-এ 5×105 কোষ/mL এর ঘনত্বে 1 শতাংশ অ্যান্টিবায়োটিক (পেনিসিলিন-স্ট্রেপ্টোমাইসিন) এবং 10 শতাংশ তাপ-নিষ্ক্রিয় FBS এর সাথে সম্পূরক ছিল। পূর্বে বর্ণিত পদ্ধতি [52] অনুসারে, 95 শতাংশ বায়ুমণ্ডল সহ একটি আর্দ্র 5 শতাংশ CO-এ কোষগুলি 37 ডিগ্রিতে সংষ্কৃত হয়েছিল।

4.3। NO উৎপাদনের পরিমাপ

নাইট্রাইটের উৎপাদন, NO অক্সিডেশনের একটি স্থিতিশীল শেষ পণ্য, কোষে NO উৎপাদনের সূচক হিসাবে পরিমাপ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, শর্তযুক্ত মিডিয়াতে নাইট্রাইটের ঘনত্ব গ্রিস প্রতিক্রিয়া [53] এর উপর ভিত্তি করে একটি পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারিত হয়েছিল। পরীক্ষার বিস্তারিত পূর্বে বর্ণনা করা হয়েছে [54]।

4.4। PGE2 Ass4y/

পূর্বে বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে প্রতিটি নমুনায় PGEz-এর ঘনত্ব বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ELISA কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল [55]।

4.5.IL-6 এবং TNF-a স্তরের পরিমাপ

বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ কিট ব্যবহার করে IL-6 এবং TNF-এর মাত্রা নির্ধারণের জন্য সংস্কৃতির মাধ্যমটি সংগ্রহ করা হয়েছিল (BioLegend, San Diego, CA, USA)। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে পরীক্ষা করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলিকে 20×10 কোষ/কূপের ঘনত্বে 24-ওয়েল কালচার প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ELISA কিটগুলির সাথে IL-6 এবং TNF- এর ঘনত্ব পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

4.6। ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ

ছুরিযুক্ত BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলি পিবিএস দিয়ে ধুয়ে RIPA বাফারে লাইজ করা হয়েছিল। বায়ো-র্যাড ল্যাবরেটরিজ (#5000006; হারকিউলিস, CA, USA) থেকে প্রাপ্ত প্রোটিন অ্যাস ডাই রিএজেন্ট ঘনত্ব ব্যবহার করে সমান পরিমাণে প্রোটিনের পরিমাণ নির্ধারণ করা হয়েছিল, নমুনা লোডিং বাফারে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং SDS-PAGE ব্যবহার করে আলাদা করা হয়েছিল। বিচ্ছিন্ন প্রোটিনগুলি তারপরে একটি নাইট্রোসেলুলোজ ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। ঝিল্লির সাথে অ-নির্দিষ্ট আবদ্ধতা স্কিম দুধের দ্রবণে ইনকিউবেশন দ্বারা অবরুদ্ধ করা হয়েছিল। ঝিল্লিটি রাতারাতি 4 ডিগ্রিতে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (যার সবকটিই 1:1000 এ ব্যবহার করা হয়েছিল) দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং তারপর একটি হর্সরাডিশ পেরোক্সিডেস-কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (যার সবকটি 1:5000 এ ব্যবহার করা হয়েছিল) (মিলিপুর) [ 31]।

4.7.NF-xB স্থানীয়করণ এবং ইমিউনোফ্লোরেসেন্স বিশ্লেষণ

NF-kB-এর স্থানীয়করণ অধ্যয়ন করার জন্য, BV2 এবং RAW264.7 কোষগুলি ল্যাব-টেক II চেম্বার স্লাইডে সংষ্কৃত করা হয়েছিল এবং 1-এর জন্য LPS উদ্দীপনার (0.5 ug/mL) আগে 2 ঘন্টার জন্য যৌগগুলির বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। জ. কোষগুলিকে তখন ফরমালিনের মধ্যে স্থির করা হয় এবং ঠান্ডা অ্যাসিটোন দিয়ে ব্যাপ্ত করা হয় এবং অ্যান্টি-p65 অ্যান্টিবডি (1:200) দিয়ে পরীক্ষা করা হয়, তারপরে ফ্লুরোসেসিন আইসোথিওসায়ানেট-লেবেলযুক্ত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (1:1000) (আলেক্সা ফ্লুর 488, ইনভিট্রোজেন) দিয়ে ইনকিউবেশন করা হয়। নিউক্লিয়াসকে কল্পনা করার জন্য, কোষগুলিকে 4'6-ডায়ামিডিনো-2-ফিনিলিন্ডোল （ডিএপিআই এর 1 ug/mL দিয়ে 30 মিনিটের জন্য, 5 মিনিটের জন্য PBS দিয়ে ধুয়ে এবং 50 μL ভেক্টাশিল্ড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ, Burlingame, CA, USA)। দাগযুক্ত কোষগুলি ভিজ্যুয়ালাইজ করা হয়েছিল এবং একটি Zeiss ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (Provis AX70; Olympus Optical Co., Tokyo, Japan) ব্যবহার করে ছবিগুলি অর্জিত হয়েছিল। [৩১]।

4.8। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

ডেটা তিনটি স্বাধীন পরীক্ষার গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি হিসাবে উপস্থাপিত হয়। ভিন্নতার একমুখী বিশ্লেষণ, তারপরে টুকির একাধিক তুলনা পরীক্ষা, তিনটি গোষ্ঠীর মধ্যে পার্থক্য তুলনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। গ্রাফপ্যাড প্রিজম সফ্টওয়্যার (সংস্করণ 5.01, গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার ইনক।, সান দিয়েগো, CA, USA) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

5। উপসংহার

Kuwanon T এবং sangenon A NO, PGE2, IL-6, এবং TNF- এবং iNOS এবং COX-এর অভিব্যক্তিকে বাধা দিয়ে LPS-প্ররোচিত BV2 এবং RAW264.7 কোষে প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব প্রয়োগ করেছে{{8} } আমাদের ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে এই প্রতিরোধক প্রভাবগুলি কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন এ-এর সাথে চিকিত্সার মাধ্যমে NF-KB পথ নিষ্ক্রিয় করার মাধ্যমে মধ্যস্থতা করা হয়েছিল। উপরন্তু, এই যৌগগুলি নিউক্লিয়াসে Nrf2-এর স্থানান্তর সক্রিয় করে HO{10}} এর অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করে। . আমাদের অনুসন্ধানগুলি প্রমাণ করেছে যে কুওয়ানন টি এবং স্যাঞ্জেনন A দ্বারা প্ররোচিত HO-1 অভিব্যক্তি LPS-প্ররোচিত প্রদাহের বিরুদ্ধে দমনমূলক প্রভাবগুলির সাথে যুক্ত ছিল। একসাথে নেওয়া, আমাদের ফলাফলগুলি প্রমাণ দেয় যে M. Albu থেকে বিচ্ছিন্ন Kuwana T এবং sangenon A, আলঝেইমার রোগ এবং পারকিনসন রোগের মতো নিউরোইনফ্ল্যামেটরি রোগের জন্য থেরাপিউটিক এবং প্রতিরোধক এজেন্টগুলির বিকাশের প্রার্থী হতে পারে।