Ifosfamide বিষাক্ততার তদন্ত লিভার এবং কিডনিতে সাধারণ আপস্ট্রিম রেগুলেটরকে প্ররোচিত করে

যোগাযোগ: emily.li@wecistanche.com

Hyoung-Yun Han, et al

বিমূর্ত:

Ifosfamide হল একটি অ্যালকাইলেটিং এজেন্ট, সাইক্লোফসফামাইডের একটি সিন্থেটিক অ্যানালগ, যা বিভিন্ন কঠিন ক্যান্সারের চিকিৎসায় ব্যবহৃত হয়। এই গবেষণায়, গুড ল্যাবরেটরি প্র্যাকটিস নির্দেশিকাগুলির অধীনে ইঁদুরগুলিতে একক-এবং মাল্টিপল-ডোজ ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল অ্যাডমিনিস্ট্রেশন ব্যবহার করে আইফোসফামাইডের বিষাক্ততা মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং টক্সিকোলজিকাল ফিফাইন্ডিংগুলিকে সমর্থন করার জন্য একটি অতিরিক্ত মাইক্রোয়ারে পরীক্ষা অনুসরণ করা হয়েছিল। Ifosfamide (50 mg/kg) এর একক ডোজ কোনো রোগগত পরিবর্তন আনেনি। এদিকে, রক্তে ইউরিয়া নাইট্রোজেন এবং ক্রিয়েটিনিনের মাত্রা উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি সহ, 7 এবং 28 দিন পরপর পরিচালিত গ্রুপগুলিতে গুরুতর রেনাল বিষাক্ততা পরিলক্ষিত হয়েছে। টক্স-তালিকা বিশ্লেষণে, কোলেস্টেরল সংশ্লেষণ-সম্পর্কিত জিনগুলি বেশিরভাগ লিভারে প্রভাবিত হয়েছিল এবং রেনাল ব্যর্থতা-সম্পর্কিত জিনগুলি প্রভাবিত হয়েছিলকিডনিifosfamide প্রশাসনের পরে। অধিকন্তু, ইন্টারফেরন নিয়ন্ত্রক ফ্যাক্টর 7 প্রধান আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক হিসাবে নির্বাচিত হয়েছিল যা উভয় ক্ষেত্রেই পরিবর্তিত হয়েছিলযকৃতএবংকিডনি, এবং অন্যান্য টার্গেট জিনের সাথে ইন্টারঅ্যাক্ট করতে পাওয়া গেছে, যেমন ইউবিকুইটিন নির্দিষ্ট পেপটাইডেজ 18, র্যাডিকাল এস-এডেনোসিল মেথিওনিন ডোমেন যার মধ্যে 2, এবং ইন্টারফেরন-উদ্দীপিত জিন 15, যা আরও রিয়েল-টাইম RT-PCR বিশ্লেষণ দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। উপসংহারে, কিডনি-পক্ষপাতমূলক ইফোসফামাইড অঙ্গের বিষাক্ততা পুনঃনিশ্চিত করা হয়েছে এবং উভয় ক্ষেত্রেই অভিন্নভাবে পরিবর্তিত জিন সনাক্ত করা হয়েছে।যকৃতএবংকিডনি. আইফোসফামাইড-প্ররোচিত জিন এবং অঙ্গের বিষাক্ততার মধ্যে সঠিক সম্পর্ক প্রকাশ করার জন্য আরও বিস্তৃত টক্সিকোজেনোমিক অধ্যয়ন প্রয়োজন।

কীওয়ার্ড:ifosfamide; হেপাটোটক্সিসিটি; নেফ্রোটক্সিসিটি; ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল বিষাক্ততা

সিস্টানচে লিভার ও কিডনির জন্য ভালো

1। পরিচিতি

Ifosfamide হল একটি অ্যালকাইলেটিং এজেন্ট, সাইক্লোফসফামাইডের একটি সিন্থেটিক অ্যানালগ, যা সারকোমাস এবং লিম্ফোমাস সহ বিভিন্ন কঠিন ক্যান্সারের চিকিৎসায় ব্যবহৃত হয়। ইফোসফামাইড হল একটি কোষ চক্র অনির্দিষ্ট অ্যান্টিক্যান্সার ড্রাগ যা ডিএনএ প্রতিলিপি এবং আরএনএ উৎপাদনে হস্তক্ষেপ করে [১]। যদিও অন্যান্য বিষাক্ত অ্যালকাইলেটিং এজেন্টগুলির তুলনায় আইফোসফামাইড তুলনামূলকভাবে ভালভাবে সহ্য করা হয়, তবে এটি অসংখ্য জীবন-হুমকির প্রতিকূল প্রভাবের সাথে যুক্ত বলে জানা যায় যা এর ক্লিনিকাল ব্যবহারকে সীমিত করে [2]। আইফোসফামাইডের প্রধান পার্শ্বপ্রতিক্রিয়াগুলির মধ্যে রয়েছে তীব্র রেনাল ইনজুরি যা ইফোসফামাইড থেকে প্রতিক্রিয়াশীল বিষাক্ত প্রজাতির ফলে, তীব্র সহকিডনি আঘাত, ইন্টারস্টিশিয়াল নেফ্রাইটিস, হেমোরেজিক সিস্টাইটিস এবং ফ্যানকোনি সিন্ড্রোম [৩]। ক্লিনিকগুলিতে, এমন রোগীদের মধ্যে গুরুতর একাধিক অঙ্গের বিষাক্ততার রিপোর্ট করা হয়েছিল যারা প্রাথমিক রেনাল বিষাক্ততার সম্মুখীন হয়েছিল এবং বারবার উচ্চ-ডোজ আইফোসফামাইড-প্ররোচিত একটি অঙ্গ ব্যর্থতার কারণ হয়েছিল যা পরবর্তী অঙ্গ ব্যর্থতার দিকে পরিচালিত করেছিল [4,5]।

Ifosfamide, acrolein, এবং chloroacetaldehyde-এর বিষাক্ত বিপাক, ifosfamide অঙ্গের বিষাক্ততার জন্য একটি প্রধান দায়ী ফ্যাক্টর। পূর্ববর্তী অধ্যয়নগুলি প্রধানত বিষাক্ত বিপাক, বিশেষত সাইটোক্রোম P450 (CYP) [6] তে ifosfamide রূপান্তরকে প্রভাবিত করে এমন কারণগুলির উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছে। কিডনিতে তুলনামূলকভাবে প্রচুর পরিমাণে CYP3A4 এবং CYP3A5 আইফোসফামাইডে বিষাক্ত পরিবর্তন ঘটায় এবং নেফ্রোটক্সিসিটি প্ররোচিত করে [7]। অ্যাক্রোলিন একটি অত্যন্ত প্রতিক্রিয়াশীল অ্যালডিহাইড যা অন্তঃকোষীয় প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিডেটিভ জিন পথকে সক্রিয় করতে পারে এবং কোষের অর্গানেলকে ক্ষতিগ্রস্ত করতে পারে। ক্লোরোসেটালডিহাইড মাইটোকন্ড্রিয়াল রেসপিরেটরি চেইনে কমপ্লেক্স I অ্যাক্টিভেশনের দমনের কথা জানিয়েছে যা আন্তঃকোষীয় গ্লুটাথিয়ন (GSH) হ্রাস এবং কোষের মৃত্যুর কারণ হতে পারে [8]।

বিষাক্ততার অধ্যয়নের জন্য নির্দিষ্ট অঙ্গকে লক্ষ্য করার চেয়ে ওষুধের পদ্ধতিগত প্রভাব বোঝার জন্য একটি একাধিক অঙ্গ বিষাক্ত গবেষণা বেশি সহায়ক। যকৃত এবং কিডনি হল প্রধান অঙ্গ যেগুলি মাদক বিপাক এবং মলত্যাগে অংশগ্রহণ করে এবং এই প্রধান অঙ্গগুলি ওষুধের প্রতিকূল প্রতিক্রিয়ার প্রবণতা রাখে; অঙ্গের বিষাক্ততা প্রায়ই অনুসরণ করে। অধিকন্তু, সমন্বিত বিষাক্ত মূল্যায়ন বিভিন্ন প্যাথলজিকাল ফাইন্ডিংগুলি উপস্থাপন করতে পারে যা সিস্টেমে ড্রাগ-প্ররোচিত বিষাক্ততা বুঝতে এবং ভবিষ্যদ্বাণী করতে সহায়তা করতে পারে।

অনেক গবেষণা রাসায়নিকের সম্ভাব্য নেতিবাচক প্রভাবের পূর্বাভাস দিতে জিন এক্সপ্রেশন প্রোফাইল ব্যবহার করেছে। যাইহোক, বেশিরভাগ পূর্ববর্তী গবেষণায় শুধুমাত্র সীমিত প্যাথলজিকাল লক্ষণগুলির সাথে একক-টার্গেট অঙ্গের বিষাক্ততা মূল্যায়নের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করা হয়েছিল [9]। তদুপরি, মাইক্রোয়ারে-ভিত্তিক জিন প্রোফাইলিংয়ের সাথে মিলিত হয়ে, এটি বিষাক্ততার একটি ব্যাপক সিস্টেম-স্তরের বোঝা তৈরি করবে যা সম্ভাব্য ড্রাগ-সম্পর্কিত বিষাক্ততা প্রতিরোধ করতে পারে [10]। এই বিষয়ে, জিন এক্সপ্রেশন প্রোফাইলিংয়ের সাথে সমন্বিত বহু-অর্গান টক্সিকোলজিকাল পন্থাগুলি একক অঙ্গের বিষাক্ততা মূল্যায়ন থেকে প্রাপ্ত বিষাক্ততা ডেটা কাটিয়ে উঠতে বিষাক্ততার পূর্বাভাস মডেল স্টাডিতে ব্যবহার করা হয়েছে, যা সিস্টেমে ওষুধের বিষাক্ত প্রক্রিয়া বোঝার জন্য অপর্যাপ্ত [১১]।

এই গবেষণায়, আমরা আইফোসফামাইডের বিষাক্ততা বর্ণনা করিকিডনিএবংযকৃতSprague-Dawley (SD) ইঁদুরে তীব্র এবং বারবার এক্সপোজারের পরে। সহায়ক জিন এক্সপ্রেশন প্রোফাইলিং অ্যাসগুলি লিভার এবং উভয় ক্ষেত্রেই আইফোসফামাইড দ্বারা পরিবর্তিত সাধারণ লক্ষ্য জিনটি প্রকাশ করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিলকিডনি, ইন্টিগ্রেটিভ ifosfamide বিষাক্ততার একটি অন্তর্দৃষ্টির পরামর্শ দিচ্ছে।

2. ফলাফল

2.1। একক ডোজ বিষাক্ততা অধ্যয়ন

12.5, 25, এবং 50 mg/kg ifosfamide গ্রুপে কোন বিষাক্ততা পরিলক্ষিত হয়নি - মৃত্যু, বিষাক্ত লক্ষণ, শরীরের ওজন পরিবর্তন বা হিস্টোপ্যাথলজিকাল ফিফাইন্ডিং নয়।

এদিকে, হেমাটোলজি গবেষণায়, রেটিকুলোসাইট (RET) এর আপেক্ষিক সংখ্যা এবং নিউট্রোফিলস (NEUA) এবং লিম্ফোসাইট (LYMA) এর পরম সংখ্যা ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে হ্রাস পেয়েছে।

2.2। এক সপ্তাহের পুনরাবৃত্তি ডোজ বিষাক্ততা অধ্যয়ন

আইফোসফামাইড গ্রহণের 1 সপ্তাহ পরে শরীরের সামগ্রিক ওজন হ্রাস পেয়েছে এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি গ্রুপে শরীরের ওজন হ্রাসের গড় মান 75 মিলিগ্রাম/কেজি গ্রুপের তুলনায় বেশি ছিল (সারণী 1)। এদিকে, ইফোসফামাইড-চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিতে আপেক্ষিক অঙ্গের ওজন ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পেয়েছে (সারণী 2)।

পরপর এক সপ্তাহের আইফোসফামাইড আইপি প্রশাসন ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে RBC, HGB, HCT, MCV এবং PLT সহ হেমাটোলজি সূচককে দমন করে (সারণী 3)। তদুপরি, আইফোসফামাইড গ্রুপের (সারণী 4) তুলনায় BUN এবং CREA নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে 1.2 গুণ বৃদ্ধি পেয়েছে।কিডনিআঘাতআরও একটি হিস্টোপ্যাথোলজিকাল গবেষণা দ্বারা সমর্থিত ছিল।

75 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি ইফোসফামাইড গ্রুপে (চিত্র 1A) ইঁদুরের লিভারে কোনও হিস্টোপ্যাথলজিকাল লক্ষণ পরিলক্ষিত হয়নি। এদিকে, দকিডনি75 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি আইফোসফামাইড গ্রুপগুলির মধ্যে নলাকার অবক্ষয়/প্রসারণ (100 মিলিগ্রাম/কেজি গ্রুপে 1 মাঝারি), একক কোষের নেক্রোসিস, ইউরোথেলিয়াম হাইপারপ্লাসিয়া এবং ফোকাল হেমোরেজ সহ প্যাথলজিক পরিবর্তনের ন্যূনতম থেকে সামান্য গ্রেড পাওয়া গেছে। /জট (সারণী 5)। এছাড়াও, রেনাল টিউবুল এলাকায় KIM-1 এক্সপ্রেশনের একটি সুস্পষ্ট বৃদ্ধি লক্ষ্য করা গেছেকিডনি100 মিলিগ্রাম/কেজি গ্রুপের (চিত্র 1বি)।

2.3। চার সপ্তাহের পুনরাবৃত্তি ডোজ বিষাক্ততা অধ্যয়ন

21 এবং 10 দিন পরপর প্রশাসনের পর যথাক্রমে 50 (5/10) এবং 70 (10/10) mg/kg-চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিতে মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয়েছিল। অধিকন্তু, আপেক্ষিক অঙ্গের ওজন বৃদ্ধির সাথে শরীরের ওজন হ্রাস,যকৃত, এবংকিডনি, সমস্ত ifosfamide-চিকিত্সা করা গ্রুপে, 4-সপ্তাহের পুনরাবৃত্তি ডোজ বিষাক্ততা সমর্থন করে।

হেমাটোলজিকাল এবং সিরাম জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণগুলি বেঁচে থাকা বিষয়গুলিতে সঞ্চালিত হয়েছিল। RET, RBC, MONA, EOSA, এবং LUCA সহ বেশ কয়েকটি রক্তের পরামিতি, আইফোসফামাইড প্রশাসনের 4 সপ্তাহ পরে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে।

কন্ট্রোল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণগুলি ইফোসফামাইড প্রশাসনের 4 সপ্তাহ পরে পরিসংখ্যানগত পার্থক্য দেখায়। উদাহরণস্বরূপ, AST এবং CK এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে, এবং A/G অনুপাত, GLU, এবং GGT হ্রাস পেয়েছে (p < 0.01)="" চিকিত্সা="" করা="" 50="" mg/kg="" গ্রুপে,="" যখন="" নিয়ন্ত্রণের="" সাথে="" তুলনা="" করা="" হয়="">

2.4। Ifosfamide-প্ররোচিত জিন এক্সপ্রেশন বিশ্লেষণ

আইফোসফামাইড-প্ররোচিত ডিইজিগুলি লিভারে সনাক্ত করা হয়েছিল এবংকিডনিটিস্যু (সারণী 6)। লিভারের জন্য, ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিনের মধ্যে 2672টি জিন 100 মিলিগ্রাম/কেজি BW/দিনে অন্তর্ভুক্ত ছিল, 1283টি জিনকে আপ-নিয়ন্ত্রিত করা হয়েছিল এবং 1389টি জিনকে নিয়ন্ত্রিত করা হয়েছিল। কিডনিতে, 100 মিলিগ্রাম/কেজি BW/দিনে 401টি জিন আলাদাভাবে প্রকাশ করা হয়েছিল — 149 জিনগুলিকে আপ-নিয়ন্ত্রিত করা হয়েছিল, এবং 252টি জিনকে নিয়ন্ত্রিত করা হয়েছিল। লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই ডাউন-নিয়ন্ত্রিত জিনের সংখ্যা আপ-নিয়ন্ত্রিত জিনের সংখ্যার চেয়ে বেশি ছিল। এটি পরামর্শ দিতে পারে যে আইফোসফামাইড চিকিত্সা জিনের প্রকাশকে বাধা দেয় বলে মনে হচ্ছে।

জৈবিক ফাংশন বিশ্লেষণের ফলাফলগুলি সারণি 7 এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। 1- সপ্তাহের ifosfamide প্রশাসনের ফলে লিভারের বেশিরভাগ অঙ্গের বিকাশের সাথে সম্পর্কিত জিনগুলিকে পরিবর্তন করা হয়েছে। মধ্যেকিডনি, এটি নিশ্চিত করা হয়েছিল যে ইমিউন কোষ স্থানীয়করণের সাথে সম্পর্কিত জিনগুলি বেশিরভাগই প্রভাবিত হয়েছিল।

ডিইজি-এর ক্যানোনিকাল পাথওয়ে বিশ্লেষণে, কোলেস্টেরল সংশ্লেষণ এবং অ্যান্টিজেন উপস্থাপনা পথ-সম্পর্কিত জিনের পরিবর্তনগুলি স্পষ্ট ছিলযকৃতএবংকিডনিটিস্যু, যথাক্রমে (চিত্র 2)। অধিকন্তু, LXE/RXR এবং তীব্র ফেজ প্রতিক্রিয়া সংকেত ছিল সাধারণ শীর্ষ-নিয়ন্ত্রিত ক্যানোনিকাল পাথওয়েযকৃতএবংকিডনি, যা যথাক্রমে লিপিড হোমিওস্টেসিস এবং প্রদাহজনক সাইটোকাইন সিগন্যালিংয়ে জড়িত ছিল।

লিভার টক্স-তালিকা বিশ্লেষণে, কোলেস্টেরল সংশ্লেষণ-সম্পর্কিত জিনগুলি বেশিরভাগই প্রভাবিত হয়েছিল, যার পরে ইতিবাচক তীব্র ফেজ প্রতিক্রিয়া প্রোটিন এবং তীব্র রেনাল ব্যর্থতা প্যানেল (সারণী 8) দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। অধিকন্তু, কিডনি তালিকার ফলাফল থেকে জানা যায় যে রেনাল ব্যর্থতা-সম্পর্কিত জিনগুলি সাধারণত ইফোসফামাইড দ্বারা প্রভাবিত হয়েছিল, যার মধ্যে বিপরীত গ্লোমেরুলোনফ্রাইটিস বায়োমার্কার এবং তীব্র রেনাল ব্যর্থতা প্যানেল রয়েছে।

আইপিএ জ্ঞান ভিত্তির উপর ভিত্তি করে, একটি সাধারণ আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক লিভার এবং কিডনিতে ইফোসফামাইড চিকিত্সার পরে জিনের প্রকাশ নিয়ন্ত্রণ করে (চিত্র 3)। IRF7 হল প্রধান নিয়ন্ত্রক যা লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই পরিবর্তিত হয়েছিল এবং অন্যান্য টার্গেট জিন যেমন USP18, RSAD2 এবং ISG15 এর সাথে যোগাযোগ করতে দেখা গেছে। অধিকন্তু, রিয়েল-টাইম RT-PCR বিশ্লেষণ IRF7, USP18, RSAD2, এবং ISG15-এর অভিব্যক্তি নিশ্চিত করেছে। যদিও প্রতিটি জিনের পরিবর্তনের পরিমাণ লিভার এবং কিডনির মধ্যে আলাদা ছিল, তবে ইফোসফামাইড প্রশাসনের 1 সপ্তাহ পরে লিভার এবং কিডনি উভয় টিস্যুতে অভিব্যক্তি দমন করা হয়েছিল। RSAD2 এবং USP18 বেশিরভাগই যথাক্রমে যকৃত এবং কিডনিতে আইফোসফামাইড চিকিত্সার মাধ্যমে জিন পরিবর্তন করেছে।

3. আলোচনা

এই গবেষণায়, জিএলপি স্ট্যান্ডার্ডের অধীনে ইঁদুরের আইপি রুটের মাধ্যমে বিভিন্ন ডোজ এবং এক্সপোজার শর্তাবলীর সাথে একাধিক অঙ্গে ব্যাপক ইফোসফামাইড বিষাক্ততা অনুসন্ধান করা হয়েছিল। ক্লিনিকগুলিতে, ইফোসফামাইড গ্রহণযোগ্য ইমিউনোথেরাপির সাথে মিলিত সাইটোটক্সিক এবং ইমিউনোমোডুলেটরি প্রভাবগুলির সাথে একটি বিমোডাল অ্যান্টিটিউমার অ্যাকশন প্রয়োগ করতে পারে [12]। ইফোসফামাইড প্রধানত রেনাল রুট দ্বারা নির্মূল করা হয় বলে পরিচিত এবং প্রায় 80 শতাংশ ডোজ অপরিবর্তিত আকারে রয়েছে, নেফ্রোটক্সিসিটি আইফোসফামাইডের একটি সাধারণভাবে পরিচিত পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া, এবং ক্লোরোএসিটালডিহাইড এবং অ্যাক্রোলিনের মতো বিপাকগুলি এর ক্লিনিকাল ব্যবহারের জন্য দায়ী [১৩, 14]।

বর্তমান সমীক্ষায়, একটি 1-সপ্তাহের পুনরাবৃত্ত বিষাক্ততা অধ্যয়ন ifosfamide-প্রাপ্ত অঙ্গের বিষাক্ততা অন্বেষণের জন্য উপযুক্ত ছিল। ইফোসফামাইড প্রশাসনের এক সপ্তাহ ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে রক্তের সূচককে দমন করে, যা সাধারণত আইফোসফামাইড থেকে প্রাপ্ত মাইলোসপ্রেশনকে প্রতিফলিত করতে পারে। নেফ্রোটক্সিসিটির পাশাপাশি, বেশ কয়েকটি প্রতিবেদনে ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে মাইলোসপ্রেশন হল প্রধান ডোজ-সীমিত আইফোসফামাইড বিষাক্ততার মধ্যে একটি, এবং লিউকোপেনিয়া সাধারণত থ্রম্বোসাইটোপেনিয়া [15,16] এর চেয়ে বেশি গুরুতর। ইফোসফামাইড নেফ্রোটক্সিসিটি ফ্যানকোনি সিন্ড্রোমের দিকে পরিচালিত করতে পারে, যেখানে প্রক্সিমাল টিউবুল ফাংশন একটি প্রতিবন্ধকতা দেখা দেয় যার ফলে অপরিবর্তনীয় ক্ষতি হয় এবং বিষাক্ত বিপাক অ্যাক্রোলিন হেমোরেজিক সিস্টাইটিস [17] এর সাথে ইউরোটক্সিসিটি উস্কে দেয়। এটি বর্তমান গবেষণার ফলাফল অনুসারে। হিস্টোপ্যাথলজিকাল স্টাডিতে, ইফোসফামাইড থেকে প্রাপ্ত প্যাথলজিকাল পরিবর্তনগুলি অন্বেষণ করতে কিডনি এবং লিভার পরীক্ষা করা হয়েছিল। 75 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি আইফোসফ্যামাইড-প্রশাসিত উভয় গ্রুপেই, রেনাল পেলভিস এলাকায় ইউরোথেলিয়াম হাইপারপ্লাসিয়ার সাথে টিউবুলার অবক্ষয় এবং প্রসারণের বড় অংশ সনাক্ত করা হয়েছিল। অধিকন্তু, KIM-1 এর অভিব্যক্তি, একটি রেনাল প্রক্সিমাল টিউবিউল ইনজুরি অণু, আইপোসফামাইড-সম্পর্কিত নেফ্রোটক্সিসিটির উপস্থিতি সমর্থন করে। এদিকে, লিভারে শুধুমাত্র ন্যূনতম পেরিপোর্টাল ভ্যাকুয়ালেশন পরিলক্ষিত হয়েছে। তদুপরি, যদিও AST এবং ALT মানগুলি ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে হ্রাস পেয়েছে, পরিবর্তনগুলি রেফারেন্স সীমার মধ্যে ছিল [18]। লিভারের এনজাইমের মাত্রা কমে যাওয়ার আরও গভীর কারণগুলি আরও অধ্যয়ন করতে হবে। এটি সাধারণত গৃহীত হয় যে আইফোসফামাইড একটি অ্যালকাইলেটিং এজেন্ট যা কদাচিৎ হেপাটোটক্সিসিটির সাথে যুক্ত থাকে এবং শুধুমাত্র কয়েকটি ক্ষেত্রে লিভারের আঘাতের জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে, বিশেষ করে যখন ডক্সোরুবিসিনের মতো অন্যান্য কেমোথেরাপিউটিক ওষুধের সাথে মিলিত হয় [১৯]।

সম্প্রতি, উচ্চ-থ্রুপুট প্রযুক্তির সাথে টক্সিকোলজিতে জিন এক্সপ্রেশন ডেটাতে উল্লেখযোগ্য অগ্রগতি বিষাক্ততার গবেষণায় পর্যাপ্ত পরিমাণে বড় ডেটাসেট তৈরির দিকে পরিচালিত করেছে, এবং রাসায়নিক বিষাক্ততার পূর্বাভাস [10,20] এ জিন প্রোফাইল প্রয়োগ করার জন্য অনেক প্রচেষ্টা করা হয়েছে। এই গবেষণায়, আইফোসফামাইড প্রশাসন দ্বারা প্ররোচিত ট্রান্সক্রিপ্টোম প্রতিক্রিয়া বিশ্লেষণ করার জন্য মাইক্রোয়ারে বিশ্লেষণ পরিচালিত হয়েছিল এবং 1.5 এর চেয়ে বড় বা সমান ভাঁজ পরিবর্তন সহ ডিইজিগুলিকে লক্ষ্য জিন হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল এবং জৈবিক ফাংশন, ক্যানোনিকাল পাথওয়ে এবং টক্স তালিকা বিশ্লেষণ ব্যবহার করা হয়েছিল। আইফোসফামাইড-প্ররোচিত জিনের কাজ বোঝার জন্য। লিভার এবং কিডনিতে বহু-অঙ্গ বিষাক্ততার সম্ভাবনা মূল্যায়ন করার জন্য একটি অতিরিক্ত আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

এই সমীক্ষায়, ডিইজি 1।{1}}ভাঁজ পরিবর্তন করা হয়েছে, এবং ডাউনরেগুলেটেড জিনগুলি লিভার (52 শতাংশ) এবং কিডনি (62 শতাংশ) উভয় ক্ষেত্রেই আপ-রেগুলেটেড জিনের চেয়ে কিছুটা বেশি প্রভাবশালী ছিল। জৈবিক ফাংশন বিশ্লেষণের ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে আইফোসফামাইড জিন পরিবর্তন করে, টিস্যু বিকাশের সাথে সম্পর্কিত জৈবিক কার্যাবলী যা সাধারণত লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই পরিলক্ষিত হয়।

স্নোবার এট আল দ্বারা একটি পূর্ববর্তী গবেষণা। [২১] রিপোর্ট করা হয়েছে যে আইফোসফামাইড চিকিত্সা মাইক্রোফ্লুইডিক সংস্কৃতিতে এনআরএফ-2 মধ্যস্থতাকারী স্ট্রেস অক্সিডেটিভ প্রতিক্রিয়া পথগুলিকে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত করতে পাওয়া গেছে [২১]। পূর্ববর্তী অধ্যয়নগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, NRF2-মধ্যস্থিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিক্রিয়া পথটি উল্লেখযোগ্যভাবে শীর্ষ নেটওয়ার্কগুলির দ্বারা সংশোধিত হয়েছিল, যা বর্তমান ক্যানোনিকাল পাথওয়ে এবং টক্স-তালিকা বিশ্লেষণ উভয় দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল৷ বর্তমান পরিবর্তিত Nrf-2 মধ্যস্থতা স্ট্রেস অক্সিডেটিভ প্রতিক্রিয়া পথগুলি ifosfamide বিষাক্ত বিপাকের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত হতে পারে। একাধিক আইফোসফামাইড বিষাক্ত বিপাক GSH এর সাথে প্রতিক্রিয়া করতে পারে, একটি শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, পথের ধারে বিভিন্ন স্থানে সংযোজক তৈরি করতে এবং GSH স্তর হ্রাসের ফলে বিষাক্ততা বৃদ্ধি পায়, যা ইফোসফামাইড অঙ্গের বিষাক্ততায় অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের অন্তর্নিহিততা নির্দেশ করে [8,22] ]। এই বিষয়ে, মেসনা এবং এন-এসিটাইলসিস্টাইন আইফোসফামাইড অঙ্গের বিষাক্ততা দূর করতে ব্যবহার করা হয়েছিল। মেসনা একটি কম ক্ষতিকারক পদার্থ গঠনের জন্য মাইকেল সংযোজনের মাধ্যমে প্রধানত অ্যাক্রোলিনের বিরুদ্ধে, আইফোসফামাইড বিষাক্ত বিপাকের সাথে আবদ্ধ হয়ে একটি আঞ্চলিক ডিটক্সিফিফিক্যান্ট হিসাবে কাজ করে [২৩]। উপরন্তু, এন-অ্যাসিটিলসিস্টাইনের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ রয়েছে এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস অবস্থার অধীনে GSH হ্রাসকে উন্নত করে বলে জানা গেছে [24]। নেফ্রোটক্সিক অবস্থার অধীনে নিয়ন্ত্রিত ifosfamide প্রতিষেধক এবং পথের মধ্যে সঠিক সম্পর্ক ব্যাখ্যা করার জন্য আরও অধ্যয়ন প্রয়োজন। আমরা অনুমান করতে পারি যে mesna বা N-acetylcysteine ​​দ্বারা ifosfamide বিষাক্ততার উন্নতির পরে উন্নত Nrf-2-মধ্যস্থ স্ট্রেস অক্সিডেটিভ প্রতিক্রিয়া পথ অনুসরণ করা হতে পারে।

এই গবেষণায়, প্রদাহ-সম্পর্কিত সংকেতগুলি সাধারণত লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই আপ-নিয়ন্ত্রিত ছিল, যা ক্যানোনিকাল পাথওয়ে বিশ্লেষণে তীব্র ফেজ সংকেত দ্বারা স্বীকৃত হতে পারে। এই ফলাফলটি উভয় টিস্যুতে ইফোসফামাইড অঙ্গের বিষাক্ততার প্যাথোফিজিওলজিতে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়ার প্রভাব নির্দেশ করে, যা আরও আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক বিশ্লেষণ দ্বারা সমর্থিত হয়েছিল। আপস্ট্রিম রেগুলেটর বিশ্লেষণে, IRF7 এবং ইন্টারফেরন (IFN) সিগন্যাল-সম্পর্কিত জিনগুলি, USP18, RSAD2 এবং ISG15 সহ, লিভার এবং কিডনির সাধারণ আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রক হিসাবে নির্বাচিত হয়েছিল। IRF7 হল একটি লিম্ফয়েড-নির্দিষ্ট ফ্যাক্টর, যা গঠনমূলকভাবে ইমিউন সেল সাইটোপ্লাজমে প্রকাশ করা হয় এবং এটি টাইপ I ইন্টারফেরন, ভাইরাস সংক্রমণ এবং বিভিন্ন কোষের বাহ্যিক উদ্দীপনা দ্বারাও প্ররোচিত হতে পারে [25]। পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় বিভিন্ন টিউমার কোষে IRF7 এর বিতর্কিত প্রো- বা অ্যান্টি-অনকোজেনিক বৈশিষ্ট্যগুলি রিপোর্ট করা হয়েছে এবং IRF7 এক্সপ্রেশনের পরিবর্তনগুলি ডিএনএ ক্ষতির সাথে যুক্ত ছিল [26-28]।

অ্যান্টিভাইরাল ফাংশনগুলির জন্য টাইপ I IFN এর গুরুত্বপূর্ণ নিয়ন্ত্রক ভূমিকা ছাড়াও, IRF7 টিএলআর 4 সংকেত পথের মাধ্যমে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াগুলিকে দমন করার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল [২৯]। তাছাড়া, Stout-Delgado et al. [৩০] রিপোর্ট করেছে যে বার্ধক্যজনিত অক্সিডেটিভ বৃদ্ধি IRF7 কার্যকলাপকে ব্যাহত করে, যেখানে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এজেন্টদের দ্বারা চাপ হ্রাস IRF7 কার্যকলাপকে উন্নত করে। এই গবেষণায়, ifosfamide প্রশাসন আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রকদের অভিব্যক্তিকে দমন করে, এবং অভিব্যক্তির ধরণগুলি লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই অভিন্ন ছিল। আইআরএফ 7 এক্সপ্রেশনের বর্তমান পরিবর্তনগুলি আইফোসফামাইডের প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া এবং সাইটোটক্সিক অ্যালকিলেটিং এজেন্ট সম্পত্তির সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, যা আইএফওসফামাইড অঙ্গের বিষাক্ততার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিবদ্ধ লক্ষ্য হিসাবে IRF7 এর পরামর্শ দিতে পারে।

এই গবেষণায়, আমরা একটি জিন খুঁজে পেয়েছি যা আইফোসফামাইড প্রশাসনের পরে লিভার এবং কিডনি উভয় ক্ষেত্রেই অভিন্নভাবে বাধাপ্রাপ্ত হয়েছিল, তবে এর বিষাক্ত তাত্পর্যের ব্যাখ্যাটি কেবল কিডনির উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করা হয়েছিল, যা বর্তমান আবিষ্কারকে সীমাবদ্ধ করে। অধিকন্তু, বর্তমানে পরিবর্তিত জিনের উপর বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ইফোসফামাইড প্রতিষেধকের প্রভাব সম্পর্কিত আরও নিশ্চিতকরণমূলক গবেষণা বর্তমান তথ্যগুলিকে সমর্থন করতে পারে।

উপসংহারে, আইফোসফামাইড প্রশাসনের বারবার বিষাক্ততা গবেষণায় (1 সপ্তাহ) হেপাটোটক্সিসিটির পরিবর্তে পক্ষপাতদুষ্ট নেফ্রোটক্সিসিটি পাওয়া গেছে। উপরন্তু, বর্তমান ফলাফল IFosfamide-প্ররোচিত হেপাটোটক্সিসিটি এবং নেফ্রোটক্সিসিটি মেকানিজমের প্রমাণ প্রদান করে যা IRF-7 নিরোধকে জড়িত করে। ইমিউন-সম্পর্কিত অঙ্গগুলির আরও টক্সিকোজেনমিক অধ্যয়নের প্রয়োজন হয় ইফোসফামাইডের পদ্ধতিগত বিষাক্ত প্রক্রিয়া ব্যাখ্যা করার জন্য এবং জিন এবং অঙ্গের বিষাক্ততার মধ্যে সম্পর্ককে সমর্থন করার জন্য।

4. উপকরণ এবং পদ্ধতি

4.1। প্রাণী অধ্যয়ন

আট-সপ্তাহ বয়সী পুরুষ-নির্দিষ্ট প্যাথোজেন-মুক্ত স্প্রাগ-ডাওলি (SD) ইঁদুর (n=140) Orient Bio Inc. (Seongnam, Korea) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। পরীক্ষার আগে এক সপ্তাহের জন্য প্রাণীগুলি পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং পরীক্ষাগার পরিবেশগত অবস্থার সাথে অভ্যস্ত হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীকে নিয়ন্ত্রিত ল্যাবরেটরি অবস্থার অধীনে প্লাস্টিকের খাঁচায় রাখা হয়েছিল (তাপমাত্রা, 23 ± 3 ◦C; আর্দ্রতা, 55 ± 10 শতাংশ; এবং 12/12-ঘণ্টা আলো/অন্ধকার চক্র) পরীক্ষাগার চৌ এবং জলের বিজ্ঞাপন লিবিটাম সহ। কোরিয়া ইনস্টিটিউট অফ টক্সিকোলজি (ডেজিয়ন, কোরিয়া) এর প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণীর যত্ন ও ব্যবহার কমিটি দ্বারা প্রাণী অধ্যয়নটি অনুমোদিত হয়েছিল এবং কোরিয়া ফুড অ্যান্ড ড্রাগ অ্যাডমিনিস্ট্রেশনের ওষুধের সুরক্ষা মূল্যায়নের জন্য পরীক্ষার নির্দেশিকা মেনে সমস্ত পদ্ধতি সম্পাদিত হয়েছিল। প্রাণী অধ্যয়নটি তিনটি বিভাগে বিভক্ত ছিল: একক ডোজ (তীব্র) এবং পুনরাবৃত্তি ডোজ (1 সপ্তাহ এবং 4 সপ্তাহ) পরপর প্রশাসনের বিষাক্ততা অধ্যয়ন। প্রতিটি বিষাক্ত গবেষণায় পাথ/টক্স সিস্টেম (সংস্করণ 4.2.2, Xybion মেডিকেল সিস্টেম কর্পোরেশন, লরেন্সভিল, NJ, USA) ব্যবহার করে চল্লিশটি ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে চারটি গ্রুপে (নিয়ন্ত্রণ, t1,t2, এবং t3) বরাদ্দ করা হয়েছিল।

4.2। বিষাক্ততা পরীক্ষা

বিষাক্ততার অধ্যয়নটি তিনটি বিভাগে বিভক্ত ছিল: একক ডোজ (তীব্র) এবং দুটি পুনরাবৃত্তি ডোজ (1 সপ্তাহ বা 4 সপ্তাহের পরপর ডোজ) বিষাক্ততা অধ্যয়ন। প্রতিটি বিষাক্ততা অধ্যয়নের জন্য, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে পর্যাপ্ত গোষ্ঠীতে বরাদ্দ করা হয়েছিল (নিয়ন্ত্রণ, ডোজ 1, ডোজ 2, এবং ডোজ 3 একক এবং 4- সপ্তাহের বিষাক্ততা অধ্যয়নের জন্য; নিয়ন্ত্রণ, ডোজ 1, এবং ডোজ 2 এর জন্য 1- সপ্তাহের বিষাক্ততা অধ্যয়ন) পাথ/টক্স সিস্টেম ব্যবহার করে (সংস্করণ। 4.2.2, Xybion মেডিকেল সিস্টেম কর্পোরেশন, লরেন্সভিল, NJ, USA)। বিষাক্ততার গবেষণায়, ইফোসফামাইড ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল (আইপি) রুটের মাধ্যমে পরিচালিত হয়েছিল এবং নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠী পাতিত জল (ডিডাব্লু) পেয়েছিল। বিষাক্ততা অধ্যয়নে ব্যবহৃত আইফোসফামাইড ডোজটি নিম্নরূপ ছিল: তীব্র বিষাক্ততা অধ্যয়ন (12.5, 25, এবং 50 মিলিগ্রাম/কেজি), 1-সপ্তাহের বিষাক্ততা অধ্যয়ন (75 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি BW/দিন), এবং {{19} }}সপ্তাহের বিষাক্ততা অধ্যয়ন (25, 50, এবং 70 মিলিগ্রাম/কেজি BW/দিন)। পশুদের সাধারণ ক্লিনিকাল লক্ষণ, শরীরের ওজন, এবং মৃত্যুর হার প্রশাসনের সময় প্রতিদিন রেকর্ড করা হয়েছিল, এবং শেষ ইফোসফামাইড প্রশাসনের 24 ঘন্টা পরে সমস্ত প্রাণীকে বলি দেওয়া হয়েছিল। রক্তের নমুনাগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং যথাক্রমে সিরাম বায়োকেমিস্ট্রি এবং হেমাটোলজিকাল বিশ্লেষণের জন্য মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউব এবং EDTA-K2 টিউবে স্থাপন করা হয়েছিল। লিভার এবং কিডনি টিস্যুগুলি ফর্মালডিহাইডে স্থির করা হয়েছিল এবং হিস্টোপ্যাথোলজিকাল বিশ্লেষণের শিকার হয়েছিল। অতিরিক্ত ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি, মাইক্রোয়ারে বিশ্লেষণ এবং রিয়েল-টাইম আরটি-পিসিআর সাবঅ্যাকিউট টক্সিসিটি স্টাডি (100 মিলিগ্রাম/কেজি BW/দিন) থেকে লিভার এবং কিডনি টিস্যুতে সঞ্চালিত হয়েছিল।

4.3। হেমাটোলজিকাল এবং সিরাম বায়োকেমিক্যাল বিশ্লেষণ

স্ট্যান্ডার্ড হেমাটোলজিকাল পরীক্ষাগুলি একটি ADVIA 120 হেমাটোলজি সিস্টেম (বেয়ার, ফার্নওয়াল্ড, জার্মানি) ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল। নিম্নলিখিত সূচকগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল: শ্বেত রক্ত ​​​​কোষ গণনা (WBC), লোহিত রক্ত ​​​​কোষের সংখ্যা (RBC), হেমাটোক্রিট (HCT), হিমোগ্লোবিনের ঘনত্ব, গড় কর্পাসকুলার ভলিউম (MCV), গড় কর্পাসকুলার হিমোগ্লোবিন (MCH), প্লেটলেট গণনা (PLT), লিম্ফোসাইট (LYM), মনোসাইট (MON), নিউট্রোফিল (NEU), বেসোফিল (BAS), ইওসিনোফিল (EOS), এবং বড় অস্থির কোষ (LUC), এবং রেটিকুলোসাইট (RET) গণনা।

জৈব রসায়ন পরীক্ষাটি সেন্ট্রিফিউজড সিরাম সহ একটি স্বয়ংক্রিয় বিশ্লেষক (TBA 120FRNEO; Toshiba Corp., Tokyo, Japan) ব্যবহার করে করা হয়েছিল। প্রধান জৈব রাসায়নিক সূচকগুলি ছিল অ্যালানাইন অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (ALT), অ্যাসপার্টেট অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (AST), ক্ষারীয় ফসফেটেস (ALP), রক্তের প্রস্রাব নাইট্রোজেন (BUN), ক্রিয়েটিনিন (CREA), গ্লুকোজ (GLU), মোট কোলেস্টেরল (TCHO), অ্যালবুমিন/গ্লোবুলিন অনুপাত। (A/G), ট্রাইগ্লিসারাইডস (TG), মোট বিলিরুবিন (TB), গামা-গ্লুটামিল ট্রান্সফারেজ (GGT), ফসফোলিপিডস (PL), ক্যালসিয়াম, ক্লোরাইড, অজৈব সোডিয়াম, ফসফরাস এবং পটাসিয়াম।

4.4। হিস্টোপ্যাথলজিকাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি পরীক্ষা

প্যারাফিন-এম্বেডেড টিস্যুগুলিকে 5-µm পুরুত্বে ভাগ করা হয়েছিল, হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং মাইক্রোস্কোপিকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল।

কিডনি টিস্যু ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রির শিকার হয়েছিল। অনির্দিষ্ট দাগ আটকানোর জন্য ডিপ্যারাফিনাইজড এবং ধোয়া অংশগুলিকে 10 শতাংশ ছাগলের সিরাম দিয়ে প্রিঙ্কুব করা হয়েছিল। তারপরে স্লাইডগুলি রাতারাতি প্রাথমিক অ্যান্টি-KIM1 অ্যান্টিবডি (1:750; সান্তা ক্রুজ, CA, USA) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি অপসারণের পরে, বিভাগগুলি VECTASTAIN এলিট ABC HRP কিট (ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ, পিটারবরো, ইউকে) দিয়ে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল এবং KIM1 এক্সপ্রেশন একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের অধীনে পরীক্ষা করা হয়েছিল।

4.5। মাইক্রোয়ারে বিশ্লেষণ এবং প্রোটিন-প্রোটিন ইন্টারঅ্যাকশন (পিপিআই) বিশ্লেষণ

1-সপ্তাহ (100 mg/kg) গ্রুপের লিভার এবং কিডনি একজাত করা হয়েছিল, এবং মোট RNA একটি RNase মিনি কিট (কিয়াজেন) দিয়ে বের করা হয়েছিল। সিডিএনএ সংশ্লেষণ একটি সিডিএনএ সংশ্লেষণ কিট (অ্যাফিমেট্রিক্স, অ্যাফিমেট্রিক্স, সান্তা ক্লারা, সিএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে অর্জন করা হয়েছিল এবং মাইক্রোয়ারে এবং পিপিআই বিশ্লেষণের শিকার হয়েছিল।

GeneChip Scanner 3000 (Affymetrix Santa Clara, CA, USA), এবং ফলাফল GeneSpring GX v13.0 বিশ্লেষণ সফ্টওয়্যার (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA) ব্যবহার করে প্রক্রিয়া করা হয়েছিল৷ ভিন্নভাবে প্রকাশিত জিনগুলি (DEGs), যা 15-ভাঁজের বেশি পরিবর্তিত হয়েছে ifosfamide প্রশাসনের পরে, Tukey-এর পোস্ট-হক টেস্টের সাথে ভিন্নতার একমুখী বিশ্লেষণ (ANOVA) ব্যবহার করে নির্বাচন করা হয়েছিল। নির্বাচিত ডিইজিগুলির জৈবিক ফাংশন এবং ক্যানোনিকাল পাথওয়েগুলি ইনজেনুইটি পাথওয়ে অ্যানালাইসিস সফ্টওয়্যার (আইপিএ, সংস্করণ 9.0; ইনজেনুইটি সিস্টেমস, রেডউড সিটি, সিএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং আপস্ট্রিম নিয়ন্ত্রকদের সনাক্ত করতে একটি আপস্ট্রিম রেগুলেটর বিশ্লেষণ করা হয়েছিল ifosfamide বিষাক্ততা থেকে প্রাপ্ত ডিইজিগুলির জন্য দায়ী। ডিইজিগুলির অতিরিক্ত প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া (পিপিআই) নেটওয়ার্ক বিশ্লেষণ STRING সফ্টওয়্যার (সংস্করণ 10) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল, এবং মিথস্ক্রিয়াটি নিশ্চিত হয়েছিল যখন মাঝারি আত্মবিশ্বাসের স্কোর 0.4-এর বেশি ছিল। প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া হল আনুমানিক সম্ভাব্যতা যে জিন এবং জিনোম পথের কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়ায় দুটি প্রোটিনের মধ্যে একটি পূর্বাভাসিত লিঙ্ক বিদ্যমান।

4.6। পরিমাণগত রিয়েল-টাইম RT-PCR স্টাডি

মাইক্রোয়ারে গবেষণায় সাধারণ নিয়ন্ত্রক জিনের অভিব্যক্তি পরিমাণগত রিয়েল-টাইম RT-PCR ব্যবহার করে নিশ্চিত করা হয়েছিল। জিন-নির্দিষ্ট প্রাইমার বায়োনিয়ার (ডেজিয়ন, কোরিয়া) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। প্রাইমারের ক্রমগুলি নিম্নরূপ ছিল: ইন্টারফেরন রেগুলেটরি ফ্যাক্টর 7 (IRF7): ফরোয়ার্ড, 5-TGCTTGTCTAGCACCAATAG-3 এবং বিপরীত, 5-CACAAGGTCACTAGAGATG-3; ubiquitin নির্দিষ্ট peptidase 18 (USP18): ফরোয়ার্ড, 5-CTGTAGTTTGTCTCCCAACA-3 এবং বিপরীত 5-GAACTGATTACCTCCCACTG-3; 2(RSAD2) সমন্বিত র্যাডিকাল এস-এডেনোসিল মেথিওনিন ডোমেইন: ফরোয়ার্ড, 5-ACCAATCATCAGAGGTTGAC-3 এবং বিপরীত, 5-CTGCATGATTGTTTCTTGGAC-3; ইন্টারফেরন-উদ্দীপিত জিন 15 (ISG15): এগিয়ে, 5-AAGTCTCCAAGACCAATTC-3এবং বিপরীত, 5-CTACATTGGCTCTGGATAGG-30।

প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে, সুপারস্ক্রিপ্ট II (ইনভিট্রোজেন, কার্লস ব্যাড, CA, USA) এবং অলিগো-ডিটি প্রাইমার ব্যবহার করে মোট আরএনএ সিডিএনএ-তে বিপরীতভাবে প্রতিলিপি করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুসারে, এসওয়াইবিআর গ্রিন মাস্টার মিক্স (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম) সহ স্টেপঅনপ্লাস রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, কার্লসব্যাড, সিএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে আপস্ট্রিম রেগুলেটরি-সম্পর্কিত জিনের mRNA এক্সপ্রেশন স্তরগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। 18S রাইবোসোমাল আরএনএ প্রাইমার একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল, এবং ফলাফলগুলি সাধারণ নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় ভাঁজ পরিবর্তন হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল।

4.7। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

একাধিক তুলনা পদ্ধতি ব্যবহার করে ডেটা পরিসংখ্যানগতভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। যখন বার্টলেটের পরীক্ষায় ভ্যারিয়েন্স সমজাতীয়তা থেকে কোনো উল্লেখযোগ্য বিচ্যুতি দেখা যায়নি, তখন প্রকরণের বিশ্লেষণ (ANOVA) ব্যবহার করা হয়েছিল তা নির্ধারণ করার জন্য যে কোনো গ্রুপের অর্থ p < {{0}}.05="" এর="" তাৎপর্য="" স্তরে="" ভিন্ন="" কিনা।="" অতিরিক্তভাবে,="" ডানেটের="" পরীক্ষাটি="" নিয়ন্ত্রণ="" এবং="" চিকিত্সা="" গোষ্ঠীর="" মধ্যে="" ডেটার="" পার্থক্য="" নির্ধারণের="" জন্য="" ব্যবহার="" করা="" হয়েছিল="" যখন="" anova="" পরীক্ষা="" থেকে="" ডেটা="" তাৎপর্যপূর্ণ="" বলে="" প্রমাণিত="" হয়েছিল।="" অধিকন্তু,="" যখন="" বার্টলেটের="" পরীক্ষা="" থেকে="" বৈচিত্র্যের="" সমজাতীয়তা="" থেকে="" উল্লেখযোগ্য="" বিচ্যুতি="" পরিলক্ষিত="" হয়,="" তখন="" একটি="" নন-প্যারামেট্রিক="" তুলনা="" পরীক্ষা,="" ক্রুস্কাল-ওয়ালিস="" (এইচ)="" পরীক্ষা,="" পি=""><0.05-এ গ্রুপের="" অর্থের="" মধ্যে="" পার্থক্য="" আছে="" কিনা="" তা="" নির্ধারণ="" করার="" জন্য="" পরিচালিত="" হয়েছিল।="" যখন="" kruskal–wallis="" (h)="" পরীক্ষায়="" একটি="" উল্লেখযোগ্য="" পার্থক্য="" পরিলক্ষিত="" হয়,="" তখন="" dunn's="" rank="" subtest="" করা="" হয়েছিল="" নির্দিষ্ট="" জোড়া="" গ্রুপ="" ডেটার="" পরিমাপ="" করার="" জন্য="" যেগুলি="" গড়="" থেকে="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" আলাদা="" ছিল।="" ফিশারের="" সঠিক="" পরীক্ষাটি="" ডেটা="" জোড়ার="" তুলনা="" করার="" জন্য="" পরিচালিত="" হয়েছিল="" (ব্যাপকতা="" এবং="" শতাংশ="" সহ)।="" সম্ভাবনার="" মাত্রা="" 1="" বা="" 5="" শতাংশ="" নির্ধারণ="" করা="" হয়েছিল।="" পাথ/টক্স="" (সংস্করণ।="" 4.2.2,="" xybion="" মেডিকেল="" সিস্টেম="" কর্পোরেশন,="" লরেন্সভিল,="" এনজে,="" ইউএসএ)="" ব্যবহার="" করে="" নিয়ন্ত্রণ="" গোষ্ঠীর="" সাথে="" বিভিন্ন="" চিকিত্সা="" গ্রুপের="" ডেটা="" তুলনা="" করে="" পরিসংখ্যানগত="" বিশ্লেষণ="" করা="">

ডেটা উপলব্ধতা বিবৃতি:

তথ্য নিবন্ধ বা সম্পূরক উপকরণ মধ্যে রয়েছে.

স্বার্থের সংঘাত:

লেখকরা ঘোষণা করেছেন যে, তাদের প্রতিদ্বন্দ্বীতার আগ্রহ নেই।

তথ্যসূত্র

1. পালমেরিনি, ই.; সেতোলা, ই.; গ্রিগনানি, জি.; ডি'অ্যামব্রোসিও, এল.; কম্যান্ডোন, এ.; রিঘি, এ.; লংহি, এ.; সিসারি, এম.; পাইওলি, এ.; হাকিম, আর.; ইত্যাদি রিল্যাপসড এবং অপসারণযোগ্য উচ্চ-গ্রেড অস্টিওসারকোমা রোগীদের উচ্চ ডোজ ইফোসফামাইড: একটি পূর্ববর্তী সিরিজ। সেল 2020, 9, 2389। [CrossRef]
2. Klastersky, J. Ifosfamide এর পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া। অনকোলজি 2003, 65, 7-10। [ক্রসরেফ]
3. স্প্রেঞ্জার্স, বি.; ল্যাপম্যান, এস. ইফোসফামাইডের ক্রমবর্ধমান ব্যথা। ক্লিন। কিডনি জে. 2020, 13, 500-503। [ক্রসরেফ]
4. ইলিয়াস, খ্রি. আয়াশ, এলজে; হুইলার, সি.; শোয়ার্টজ, জি.; টেপলার, আই.; McCauley, M.; মাজানেট, আর.; স্নিপার, এল.; ফ্রেই, ই., 3য়; অ্যান্টম্যান, কেএইচ হাই-ডোজ ইফোসফামাইড/কারবোপ্ল্যাটিন/ইটোপোসাইড সহ অটোলোগাস হেমাটোপয়েটিক স্টেম সেল সমর্থন: নিরাপত্তা এবং ভবিষ্যতের দিকনির্দেশ। সেমিন। অনকল। 1994, 21, 83-85। [পাবমেড]
5. মোলেনকপফ, এ.; ডু বোইস, এ.; মীরপোহল, এইচজি সিকোয়েন্সিয়াল কোর্স এবং ইফোসফামাইড-প্ররোচিত বহু-অঙ্গ বিষাক্ততার সম্ভাব্য ব্যবস্থাপনা। গেবার্টশিল্ফ ফ্রয়েনহেইল্কড। 1996, 56, 525-528। [ক্রসরেফ]
6. আলেক্সা, কে.; ম্যাটসেল, ডি.; ক্রাউস, কে.; জেলবোইন, এইচ.; ইটো, এস.; কোরেন, জি. সাইটোক্রোম পি450 3এ এবং 2বি6 বিকাশশীল কিডনিতে: ইফোসফামাইড নেফ্রোটক্সিসিটির জন্য প্রভাব। পেডিয়াটার। নেফ্রোল। 2005, 20, 872-885। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
7. লোভেনবার্গ, ডি.; কাঁটা, সিএফ; ডেস্তা, জেড.; ফ্লকহার্ট, ডিএ; অল্টম্যান, আরবি; ক্লেইন, টিই ফার্মজিকেবি সারাংশ: ইফোসফামাইড পথ, ফার্মাকোকিনেটিক্স এবং ফার্মাকোডাইনামিক্স। ফার্মাকোজেনেট। জিনোম। 2014, 24, 133। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
8. ম্যাকঅ্যালিস্টার, এসএল; মার্টিন-ব্রিসাক, এন.; লাউ, ভি.; ইয়াং, কে.; O'Brien, PJ Acrolein এবং chloroacetaldehyde: কোষের একটি পরীক্ষা এবং বিষাক্ততার কোষ-মুক্ত বায়োমার্কার। কেম। বায়োল মিথস্ক্রিয়া 2013, 202, 259–266। [ক্রসরেফ]
9. কিম, জে.; শিন, এম. জিন-অভিব্যক্তি ডেটা ব্যবহার করে মাল্টি-অর্গান ড্রাগ-ইনডিউসড টক্সিসিটি ভবিষ্যদ্বাণীর একটি সমন্বিত মডেল। বিএমসি বায়োইনফর্ম। 2014, 15, S2। [ক্রসরেফ]
10. আলেকজান্ডার-ড্যান, বি.; Pruteanu, LL; ওরটন, ই.; শর্মা, এন.; Berindan-Neagoe, I.; মোডোস, ডি.; বেন্ডার, এ. টক্সিকোজেনোমিক্সের উন্নয়ন: জিন এক্সপ্রেশন ডেটা থেকে যৌগ-প্ররোচিত বিষাক্ততা বোঝা এবং ভবিষ্যদ্বাণী করা। মোল. Omics 2018, 14, 218–236। [ক্রসরেফ]
11. An, YR; কিম, জেওয়াই; কিম, একাধিক অঙ্গের বিষাক্ততা মূল্যায়নের জন্য একটি ভবিষ্যদ্বাণীমূলক মডেলের ওয়াইএস নির্মাণ। মোল. সেল টক্সিকল। 2016, 12, 1-6। [ক্রসরেফ]
12. বিনোট্টো, জি.; ট্রেন্টিন, এল.; Semenzato, G. Ifosfamide এবং cyclophosphamide: ইমিউনো সার্ভিলেন্সের উপর প্রভাব। অনকোলজি 2003, 65, 17-20। [ক্রসরেফ]
13. Schwerdt, G.; গোর্দজানি, এন.; বেনেসিক, এ.; ফ্রয়েডিঙ্গার, আর.; ওলনি, বি.; Kirchhoff, A.; গেকল, এম. ক্লোরোএসিটালডিহাইড- এবং মানব প্রক্সিমাল টিউবুল কোষের অ্যাক্রোলিন প্ররোচিত মৃত্যু। পেডিয়াটার। নেফ্রোল। 2006, 21, 60-67। [ক্রসরেফ]
14. Ensergueix, G.; প্যালেট, এন.; জোলি, ডি.; লেভি, সি.; চৌভেট, এস.; ট্রিভিন, সি.; অগাস্টো, জেএফ; Boudet, R.; আবুদাগ্গা, এইচ.; টাচার্ড, জি.; ইত্যাদি প্রাপ্তবয়স্ক রোগীদের মধ্যে ইফোসফামাইড নেফ্রোটক্সিসিটি। ক্লিন। কিডনি জে. 2020, 13, 660–665। [ক্রসরেফ]
15. ডিচ্যান্ট, কেএল; ব্রগডেন, আরএন; পিলকিংটন, টি.; ফল্ডস, ডি. ইফোসফামাইড/মেসনা। এর অ্যান্টিনোপ্লাস্টিক কার্যকলাপ, ফার্মাকোকিনেটিক বৈশিষ্ট্য এবং ক্যান্সারে থেরাপিউটিক কার্যকারিতার পর্যালোচনা। ড্রাগস 1991, 42, 428-467। [ক্রসরেফ]
16. প্রঙ্ক, এলসি; শ্রিভার্স, ডি.; শেলেনস, জেএইচএম; ডি ব্রুইজন, ইএ; রোপণ, এ.; Locci-Tonelli, D.; গ্রাল্ট, ভি.; Verweij, J.; ভ্যান ওস্টেরম, AT ফেজ I উন্নত কঠিন টিউমারযুক্ত রোগীদের মধ্যে ডসেট্যাক্সেল এবং ইফোসফামাইডের উপর অধ্যয়ন করেন। ব্র. জে. ক্যান্সার। 1998, 77, 153-158। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
17. স্কিনার, আর. শিশুদের মধ্যে ক্রনিক ইফোসফামাইড নেফ্রোটক্সিসিটি। মেড. পেডিয়াটার অনকল। 2003, 41, 190-197। [ক্রসরেফ]
18. শার্প, পি।; ভিলানো, জেএস দ্য ল্যাবরেটরি র‍্যাট; CRC প্রেস: Boca Raton, FL, USA, 2012।
19. চেউং, এমসি; জোন্স, আরএল; জুডসন, আই. সারকোমার চিকিত্সায় ইফোসফামাইডের সাথে তীব্র লিভারের বিষাক্ততা: একটি কেস রিপোর্ট। জে মেড কেস রেপ. 2011, 5, 180। [ক্রসরেফ]
20. কুই, ওয়াই।; পলস, আরএস ড্রাগ-প্ররোচিত বিষাক্ততার প্রক্রিয়া বোঝার জন্য ট্রান্সক্রিপ্টমিক্সের ব্যবহার। ফার্মাকোজেনমিক্স 2010, 11, 573–585। [ক্রসরেফ]
21. স্নোবার, এলসি; জ্যাক, এস.; মঙ্গে, এম.; লিগালাইস, সি.; Leclerc, E. মাইক্রোফ্লুইডিক বায়োচিপগুলিতে চাষ করা MDCK কোষের উপর ifosfamide এর প্রভাবের ট্রান্সক্রিপ্টমিক বিশ্লেষণ। জিনোমিক্স 2012, 100, 27-34। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
22. ডিরভেন, এইচএ; মেগেনস, এল.; ওডশোর্ন, এমজে; ডিঙ্গেমানসে, এমএ; ভ্যান ওমেন, বি.; ভ্যান ব্লেডারেন, সাইটোস্ট্যাটিক ড্রাগ ইফোসফামাইডের পিজে গ্লুটাথিয়ন কনজুগেশন এবং হিউম্যান গ্লুটাথিয়ন এস-ট্রান্সফারেসের ভূমিকা। কেম। রেস টক্সিকল। 1995, 8, 979-986। [ক্রসরেফ]
23. জিলানী, আর.; জাহানবখশ, এস.; কোহান-গদর, এইচআর; ঠাকুর, এম.; খান, এস.; আলধাহেরি, এসআর; ইয়াং, জেড.; আন্দ্রেয়ানা, পি.; মরিস, আর.; আবু-সৌদ, এইচএম মেসনা (2-মারক্যাপ্টোইথেন সোডিয়াম সালফোনেট) মাইলোপেরক্সিডেসের নিয়ন্ত্রক হিসাবে কাজ করে। ফ্রি রেডিক। বায়োল মেড. 2017, 110, 54-62। [ক্রসরেফ]

24. আলনাহদী, এ.; জন, এ.; রেজা, এইচ. এন-এসিটাইল সিস্টাইন অগ্ন্যাশয়ের রিন-5এফ কোষে উচ্চ গ্লুকোজ/উচ্চ পামিটিক অ্যাসিড চিকিত্সার কারণে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং গ্লুটাথিয়ন-নির্ভর রেডক্স ভারসাম্যহীনতা হ্রাস করে। PLOS ONE 2019, 14, e0226696। [ক্রসরেফ]

25. ঝাং, এল.; Pagano, JS IRF-7, Epstein-Barr ভাইরাস লেটেন্সির সাথে যুক্ত একটি নতুন ইন্টারফেরন নিয়ন্ত্রক ফ্যাক্টর। মোল. সেল বায়োল। 1997, 17, 5748-5757। [ক্রসরেফ]
26. প্যাগানো, জেএস ভাইরাস এবং লিম্ফোমাস। N. ইংরেজি জে মেড 2002, 347, 78-79। [ক্রসরেফ]
27. রোমিউ-মুরেজ, আর.; সোলিস, এম.; নারদিন, এ.; গৌবাউ, ডি.; ব্যারন-বোডো, ভি.; লিন, আর.; ম্যাসি, বি.; সালসেডো, এম.; হিস্কট, জে. হিউম্যান ম্যাক্রোফেজগুলির অ্যান্টিটিউমার বৈশিষ্ট্য সক্রিয়করণে IFN রেগুলেটরি ফ্যাক্টর (IRF)-3 এবং IRF-7 এর জন্য আলাদা ভূমিকা। ক্যান্সার রেস. 2006, 66, 10576–10585। [ক্রসরেফ]
28. নিং, এস.; প্যাগানো, জেএস; নাপিত, GN IRF7: সক্রিয়করণ, নিয়ন্ত্রণ, পরিবর্তন, এবং ফাংশন। জিন ইমিউন। 2011, 12, 399-414। [ক্রসরেফ]
29. চেন, পিজি; গুয়ান, ওয়াইজে; ঝা, জিএম; জিয়াও, এক্সকিউ; ঝু, এইচএস; ঝাং, সিওয়াই; ওয়াং, ওয়াইওয়াই; লি, এইচপি সোয়াইন IRF3/IRF7 একটি TLR4 সংকেত পথের মাধ্যমে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া কমিয়ে দেয়। অনকোটার্গেট 2017, 8, 61958। [ক্রসরেফ]
30. Stout-Delgado, HW; ইয়াং, এক্স।; ওয়াকার, WE; তেসার, বিএম; গোল্ডস্টেইন, ডিআর এজিং TLR9 অ্যাক্টিভেশনের সময় প্লাজমাসাইটয়েড ডেনড্রাইটিক কোষে IFN রেগুলেটরি ফ্যাক্টর 7 আপ-নিয়ন্ত্রণকে ব্যাহত করে। জে. ইমিউনল। রেস 2008, 181, 6747-6756। [ক্রসরেফ]