অস্টিওপোরোসিসের একটি ভেড়ার মডেলে রেনাল ভিটামিন ডি এবং ফসফ্যাটোনিন-সম্পর্কিত জিনের প্রকাশ

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত:অস্টিওপোরোসিস বিশ্বজুড়ে একটি উল্লেখযোগ্য জনস্বাস্থ্য সমস্যা, মেনোপজ-পরবর্তী অস্টিওপরোসিস ইস্ট্রোজেনের ঘাটতির কারণে আনুমানিক 3/4 ক্ষেত্রে ঘটে। এই সমীক্ষায়, 18 বয়স্ক মেরিনো ওয়েস ডিম্বাশয় এবং 10 টি নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল। ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার মধ্যে তিনটিকে সাপ্তাহিকভাবে 400 মিলিগ্রাম মিথাইলপ্রেডনিসোলন দিয়ে 5 মাসের জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং তিনটিকে 2 মাস ধরে সাপ্তাহিক চিকিত্সা করা হয়েছিল, তারপরে একটি 3-মাস পুনরুদ্ধারের সময়কাল। 2 মাসে, পাঁচটি নিয়ন্ত্রণ প্রাণী এবং ছয়টি ডিম্বাশয়যুক্ত প্রাণীকে euthanized করা হয়েছিল। 5 মাস বয়সে, বাকি সব ভেড়ার euthanized করা হয়েছিল। NPT1, PTH1R, NPT2a, NPT2c, Klotho, FGFR1Illc, VDR, CYP24A1, CYP27B1, TRPV5, TRPV6, CalD9k, CalD28k, PMXNC1, এবং এর qPCR বিশ্লেষণের জন্য কিডনির নমুনাগুলি পোস্টমর্টেম সংগ্রহ করা হয়েছিল। অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় ডিম্বাশয় ভেড়ার ভিডিআর অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়া এবং 5 মাসে ইউথানেসিয়া অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় TRPV5, CYP24A1 এবং ক্লোথো জিনের অভিব্যক্তিতে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখায়। ক্লোথো এক্সপ্রেশনের পার্থক্যগুলি বারবার পরিমাপের জন্য সামঞ্জস্য করার পরে সর্বাধিক চিহ্নিত করা হয়েছিল (p=0.1)। ক্লোথো "অ্যান্টি-এজিং" হরমোন হিসাবে পরিচিত এবং এটি ক্যালসিয়াম এবং ফসফরাস বিপাকের সাথে জড়িত। ক্লোথো 2 মাসের জন্য গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার হাড়ের খনিজ ঘনত্ব পুনরুদ্ধারের সাথে জড়িত থাকতে পারে এবং তারপরে 5 মাসে ইউথানেশিয়া। ক্লোথোর ভূমিকা নিয়ে আরও গবেষণার সুপারিশ করা হয়।

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

কীওয়ার্ড:অস্টিওপরোসিস; ভেড়া ভিটামিন ডি; ফসফেটিং; qPCR; ক্যালসিয়াম বিপাক; ফসফরাস বিপাক; klotho

1। পরিচিতি

অস্টিওপোরোসিস হল বিশ্বের ক্রমবর্ধমান বার্ধক্যজনিত জনসংখ্যার জন্য একটি প্রধান জনস্বাস্থ্য সমস্যা, যা 205 সালে মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের প্রায় 17 বিলিয়ন মার্কিন ডলার খরচ করে এবং 2025 সালে USD 25 বিলিয়ন বৃদ্ধির অনুমান করা হয়েছে [1,2]। প্রায় 70-75 শতাংশ অস্টিওপরোসিস বোঝা মহিলাদের মধ্যে মেনোপজ-পরবর্তী অস্টিওপরোসিসের কারণে হয় [১], প্রাথমিক অস্টিওপরোসিস যার ফলে ইস্ট্রোজেনের ঘাটতির ফলে হাড়ের গঠন কমে যায় এবং হাড়ের শোষণ বৃদ্ধি পায়, যার ফলে হাড়ের ভর কমে যায় এবং হাড়ের ভঙ্গুরতা হয় [৩] . গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার মতো নির্দিষ্ট কারণগুলির জন্য অস্টিওপোরোসিসও গৌণ ঘটতে পারে। ভেড়া অস্টিওপরোসিস সহ বিভিন্ন মানব কঙ্কালের রোগের জন্য একটি সুপ্রতিষ্ঠিত বৃহৎ প্রাণীর মডেল। ভেড়ার মতো বড় প্রাণীর মডেলের একটি সুবিধা হল অর্থোপেডিক ইমপ্লান্ট, অস্ত্রোপচারের কৌশল এবং জৈব উপাদান পরীক্ষা করার ক্ষমতা [৪,৫]।

অস্টিওপোরোসিসের সবচেয়ে সাধারণ ভেড়ার মডেলগুলি হল 12 মাসের অপারেটিভভাবে ডিম্বাশয়যুক্ত ভেড়া এবং 6-মাসের ওভারিয়েক্টোমাইজ করা ভেড়া একটি ক্যালসিয়াম এবং ভিটামিন ডি-এর অভাবযুক্ত খাদ্যে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দেওয়া হয়[4]। ওভারিয়েক্টমি, গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা এবং কম ক্যালসিয়াম ডায়েট সহ পরিচিত অস্টিওপোরোসিস-জনিত কারণগুলির সংমিশ্রণ ব্যবহার করে, আমরা মাত্র 5 মাসে [6,7] অস্টিওপরোসিসের একটি ভেড়া মডেল স্থাপন করতে সক্ষম হয়েছি, এইভাবে আবাসন, শ্রম, এবং ফিড খরচ মডেল উন্নয়ন জড়িত. এই মডেলে, ডিম্বাশয় নিয়ন্ত্রণ ভেড়ার তুলনায় সি-টার্মিনাল টেলোপেপ্টাইড টাইপ I কোলাজেন (CTX-I, একটি হাড় রিসোর্পশন মার্কার) এবং অস্টিওক্যালসিন (হাড়ের টার্নওভার মার্কার) এর সিরাম ঘনত্ব বৃদ্ধি করতে দেখা গেছে। যে ভেড়াগুলি 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা পেয়েছে তাদের সিরাম CTX-I ঘনত্ব বেশি এবং সিরাম অস্টিওক্যালসিন ঘনত্ব কম। অতিরিক্তভাবে, ফেমোরাল এবং কটিদেশীয় মেরুদণ্ডের হাড়ের ঘনত্ব এবং প্রক্সিমাল টিবিয়ার মোট এবং ট্র্যাবেকুলার ভলিউমেট্রিক হাড়ের খনিজ ঘনত্ব পরীক্ষামূলকভাবে চিকিত্সা করা গ্রুপগুলিতে নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় কম ছিল, বিশেষত ওভারিয়েক্টোমাইজড গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা করা ভেদের জন্য [6]। অ্যামিনো অ্যাসিড এবং লিপিড বিপাকও ডিম্বাশয় এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ভেড়াগুলিতে পরিবর্তিত হতে দেখা গেছে [7]।cistanche wirkungঅন্যান্য ডিম্বাণু অস্টিওপরোসিস মডেলগুলিতেও অনুরূপ পরিবর্তন পাওয়া গেছে [৮]।

Cistanche বিরোধী বার্ধক্য করতে পারেন

ভিটামিন ডি প্রতিক্রিয়াশীল জিন এবং ফসফেটিং সিস্টেম আগে ডিম্বাশয় ভেড়ার মডেলগুলিতে অন্বেষণ করা হয়নি। ভিটামিন ডি, যার মধ্যে ১,25-ডাইহাইড্রোক্সিভিটামিন ডি সক্রিয় ফর্ম, অবশেষে ভিটামিন ডি রিসেপ্টর (ভিডিআর)-রেটিনয়েড এক্স রিসেপ্টর হেটেরোডাইমারের সাথে আবদ্ধ হয়ে প্লাজমা আয়নিত ক্যালসিয়াম এবং ফসফরাস ঘনত্ব বৃদ্ধি করে এবং অসংখ্য ভিটামিনের অভিব্যক্তি পরিবর্তন করে ডি-প্রতিক্রিয়াশীল জিন, যেমন ক্যালসিয়াম-বাইন্ডিং প্রোটিন (calbindin D9 এবং 28k (CalD9k, CalD28k)) এবং ক্যালসিয়াম চ্যানেল (ক্ষণস্থায়ী রিসেপ্টর সম্ভাব্য ক্যাটেশন চ্যানেল সাবফ্যামিলি V সদস্য 5 এবং 6 (TRPV5, TRPV6), প্লাজমা মেমব্রেন ক্যালসিয়াম AMPCA) , সোডিয়াম-ক্যালসিয়াম এক্সচেঞ্জার 1(NCX1)[9]। 1,25-ডাইহাইড্রোক্সিভিটামিন ডি এর উত্পাদন একটি শক্তভাবে নিয়ন্ত্রিত পদক্ষেপ, যার মাধ্যমে রেনাল লো হাইড্রোক্সিলেস (CYP27B1) 25-হাইড্রক্সিভিটামিন ডি-এর রূপান্তরকে অনুঘটক করে 1,25-ডাইহাইড্রোক্সিভিটামিন ডি, এবং এনজাইম 24-হাইড্রক্সিলেস(CYP24A1) 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি এবং 1,25-ডাইহাইড্রক্সি ভিটামিন ডি উভয়টিকে নিষ্ক্রিয় উপজাতগুলিতে ভেঙে দেয়।cistanche UKফসফেটিং সিস্টেম প্লাজমা ফসফরাস এবং ক্যালসিয়াম ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করে[10]। এই সিস্টেমের লিঞ্চপিন হল ফাইব্রোব্লাস্ট গ্রোথ ফ্যাক্টর 23, যা হাড়ের অস্টিওসাইট দ্বারা উত্পাদিত হয় এবং সোডিয়াম-ফসফেট কো-ট্রান্সপোর্টার (NPT1, NPT2a, NPTc2) এর অভিব্যক্তি হ্রাস করার জন্য কো-ফ্যাক্টর ক্লোথোতে আবদ্ধ হয়ে প্রাথমিকভাবে প্লাজমা ফসফরাস ঘনত্ব নিয়ন্ত্রণ করে। [১১]। প্যারাথাইরয়েড হরমোন, এবং 1,{11}}ডাইহাইড্রক্সি ভিটামিন ডি-এর আন্তঃসম্পর্কিত প্রভাবের কারণে, ক্যালসিয়াম বিপাকের উপর FGF23-এর প্রভাব নির্ণয় করা চ্যালেঞ্জিং ছিল, কিন্তু প্রমাণ রয়েছে যে এটি ক্যালসিয়াম এবং রেনালের অন্ত্রের শোষণ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। ক্যালসিয়াম পুনর্শোষণ[12,13]।

গ্লুকোকোর্টিকয়েডের ক্যালসিয়াম এবং ফসফরাস বিপাকের উপর অসংখ্য প্রভাব রয়েছে, যার মধ্যে অন্ত্রের ক্যালসিয়াম শোষণকে বাধা দেওয়া, রেনাল টিউবুলার ক্যালসিয়াম পুনঃশোষণ হ্রাস এবং রেনাল ফসফরাস পুনঃশোষণ [14-16] হ্রাস করা। উপরন্তু, সামান্য গবেষণা ভিটামিন ডি-প্রতিক্রিয়াশীল জিন এবং ফসফেটিং সিস্টেমের উপর ইস্ট্রোজেনের অভাবের প্রভাব পরীক্ষা করেছে [17,18]।

এই ওভারিয়েক্টোমাইজড, কম ক্যালসিয়াম ডায়েট, অস্টিওপোরোসিসের গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ভেড়ার মডেল ডিম্বাশয়ের কিডনিতে ফসফেটিং এবং ভিটামিন ডি-প্রতিক্রিয়াশীল জিনের প্রকাশের উপর এই চিকিত্সাগুলির প্রভাব সম্পর্কে প্রাথমিক তথ্য তৈরি করার একটি সুযোগ প্রদান করে। এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল দ্বিগুণ: (1) ওভারিয়েক্টমি বা ডিম্বাশয় এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা কিডনিতে ভিটামিন ডি এবং ফসফেটিং-সম্পর্কিত জিনের অভিব্যক্তিকে পরিবর্তন করেছে কিনা তা নির্ধারণ করা; (2) রেনাল ভিটামিন ডি এবং ফসফেটিং-সম্পর্কিত জিনের মধ্যে সম্পর্ক নির্ধারণ করা, সিরাম ভিটামিন ডি এবং সিরাম হাড়ের টার্নওভার মার্কার (CTX-I এবং osteocalcin)।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

অস্টিওপোরোসিসের ডিম্বাশয় ও গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ভেড়া মডেলের বিকাশের জন্য বিস্তারিত পদ্ধতিগুলি পূর্বে প্রকাশিত হয়েছে [6]। সংক্ষেপে, বয়স্ক মেরিনো ওয়েস (7-9 বছর বয়সী, n=28) এলোমেলোভাবে গ্রুপে বরাদ্দ করা হয়েছিল: কন্ট্রোল(n=10)ওভারিয়েক্টমাইজড (ওভিএক্স) (n=12), ডিম্বাশয় এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা (সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দ্বারা 40 মিলিগ্রাম মেথাইলপ্রেডনিসোলন) মাসিক 2 মাসের জন্য তারপরে 3 মাস (n=3) কোনও চিকিত্সা নেই এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা (400 মিলিগ্রাম মিথাইলপ্রেডনিসোলন) 5 মাসের জন্য মাসিক (n=3) .সাইট্রাস বায়োফ্ল্যাভোনয়েডসভেড়াগুলিকে একটি শস্যাগারে রাখা হয়েছিল এবং তাদের হয় একটি নিয়ন্ত্রণ (115 গ্রাম/কেজি ক্যালসিয়াম; 2.2 গ্রাম/ভেড়া প্রতি দিন) বা কম ক্যালসিয়াম (5 গ্রাম/কেজি ক্যালসিয়াম; 1 গ্রাম/ভেড়া প্রতি দিন) ভেড়ার গুলিকে ঘনীভূত খাদ্য [19] খাওয়ানো হয়েছিল। একটি অ-গর্ভবতী ভেড়ার জন্য রক্ষণাবেক্ষণের প্রয়োজনীয়তা হল প্রতিদিন 1.2 গ্রাম/ভেড়া[19]।

অস্ত্রোপচারের 2 মাস এবং 5 মাস পর জগুলার ভেনিপাংচারের মাধ্যমে রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। Osteocalcin মাইক্রো Vue Osteocalcin immunoassay kit ব্যবহার করে এবং CTX-I ব্যবহার করে IDS Serum CrossLaps ELISA কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল, যেমন পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছিল [6]সিরামের মোট ক্যালসিয়াম এবং ফসফরাস ঘনত্ব একটি AU680 ক্লিনিকাল ক্লিনিকাল ক্লিনিকাল চেমিজারে স্পেকট্রোফটোমেট্রি ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। , CA, USA)। আইসোটোপ ডিলিউশন লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাম ব্যবহার করে সিরাম 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্ব পরিমাপ করা হয়েছিল; এন্ডোল্যাব, ক্যান্টারবেরি হেলথ ল্যাবরেটরিজ, ক্রাইস্টচার্চ, নিউজিল্যান্ডে র্যাফি ভর স্পেকট্রোমেট্রি।

কয়েক মাস ধরে, কন্ট্রোল গ্রুপ থেকে 5 টিউই এবং OVX গ্রুপের 6 টি euthanized এবং necropsied হয়েছিল। 5 মাস বয়সে, অবশিষ্ট ভেড়াগুলিকেও euthanized করা হয়েছিল (নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ n =5, OVX গ্রুপ n=6, OVX প্লাস 2m glucocorticoids n=3 এবং OVX প্লাস 5m glucocorticoids n=5 ) এবং necropsied. মৃত্যুর 30 মিনিটের মধ্যে কিডনির নমুনা সংগ্রহ করা হয় এবং দুটি ভাগে ভাগ করা হয়, একটি নমুনা 10 শতাংশ নিরপেক্ষ বাফারযুক্ত ফরমালিনের মধ্যে রাখা হয় এবং হিস্টোলজির জন্য প্রক্রিয়া করা হয় এবং অন্যটি তরল নাইট্রোজেনে হিমায়িত হয় এবং হেমাটোক্সিলিন প্রক্রিয়া না হওয়া পর্যন্ত{11}} ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়। প্রাথমিক লেখক দ্বারা কিডনির ইওসিন-দাগযুক্ত অংশগুলি পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং উল্লেখযোগ্য ক্ষতগুলির অনুপস্থিতি নিশ্চিত করা হয়েছিল।

সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি ম্যাসি ইউনিভার্সিটি অ্যানিমেল এথিক্স কমিটি (অনুমোদন নম্বর 14/103) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল এবং ম্যাসি ইউনিভার্সিটি, পামারস্টন নর্থ, নিউজিল্যান্ডে গবেষণার জন্য জীবিত প্রাণীদের ব্যবহারের জন্য নৈতিক আচরণের কোড অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল।

RNA নিষ্কাশন এবং qPCR পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সঞ্চালিত হয়েছিল [20,21]। সংক্ষেপে, ট্রাই রিএজেন্ট (Gigma-Aldrich Inc, Merck KGaA, Darmstadt, Germany) প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে RNA বের করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে জিনোমিক ডিএনএ অ্যাম্বিয়ন টার্বো ডিএনএ ফ্রি (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক।, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) দিয়ে সরানো হয়েছিল। আরএনএ ঘনত্ব একটি কিউবিট 2৷{36}} ফ্লুরোমিটার এবং কিউবিট আরএনএ ব্রড রেঞ্জ অ্যাসে কিট (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক., ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল এবং 260/280 অনুপাত এবং চলমান নির্ধারণের মাধ্যমে আরএনএ গুণমান মূল্যায়ন করা হয়েছিল একটি আগারোজ জেলের উপর। ট্রান্সক্রিপ্টর প্রথম স্ট্র্যান্ড সিডিএনএ সংশ্লেষণ কিট (রোচে) সিডিএনএ সংশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রতিটি 20 μL প্রতিক্রিয়া মিশ্রণে 600 ng RNA, 2.5 μM oligo（dT）, 8mM RT প্রতিক্রিয়া বাফার, 1 mM dNTP, 10U রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেস, 20 U RNase ইনহিবিটর, এবং Rnase-Dnase-মুক্ত জল থাকে। প্রতিক্রিয়াটি 30 মিনিটের জন্য 55 ডিগ্রিতে, 5 মিনিটের জন্য 85 ডিগ্রিতে সঞ্চালিত হয়েছিল এবং তারপরে একটি ফলিত বায়োসিস্টেম ভেরিটি থার্মাল সাইক্লার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক।, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে 4 ডিগ্রিতে ঠান্ডা করা হয়েছিল। রিয়েল-টাইম কিউপিসিআর স্টেপওন প্লাস রিয়েল-টাইম পিসিআর মেশিন (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম, থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। প্রতিটি পিসিআর মিশ্রণে 5 ইউএল পাওয়ার এসওয়াইবিআর গ্রিন পিসিআর মাস্টার মিক্স (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক ইনক., ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ), সিডিএনএর টেবিল S1,10 এনজিতে তালিকাভুক্ত ঘনত্বে ফরোয়ার্ড এবং রিভার্স প্রাইমার থাকে এবং তারপর 10 μL পর্যন্ত তৈরি হয়। RNase, DNase-মুক্ত জল দিয়ে। পিসিআর প্রোটোকল 20 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রী, 95 ডিগ্রী ফর এবং 60 ডিগ্রীতে 40 সাইকেল এবং অবশেষে, 0.3 ডিগ্রী/15 সেকেন্ড গরম করার হার 60 ডিগ্রী থেকে 95 ডিগ্রী পর্যন্ত একটি গলিত বক্ররেখা নিয়ে গঠিত। বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেস ছাড়া জল এবং প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রতিটি পিসিআর রানে নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল এবং সমস্ত নমুনা সদৃশভাবে চালানো হয়েছিল। নিম্নলিখিত জিনগুলি মূল্যায়ন করা হয়েছিল: NPT1, PTH1R, NPT2a, NPT2c, Klotho, FGFR1IIC, VDR, CYP24A1, CYP27B1, TRPV5, TRPV6, CalD9k, CalD28k, PMCA, এবং NCX1। PKG1 এবং SDHA এর আগে ওভাইন কিডনিতে স্থিরভাবে প্রকাশ পাওয়া গেছে [20], এবং নমুনাগুলি 2-AACt পদ্ধতি [22] ব্যবহার করে এই জিনের অভিব্যক্তি এবং জিনের কার্যকারিতার সাপেক্ষে স্বাভাবিক করা হয়েছিল।

R ভার্সন সহ R Studio 1.3.1093[23] ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল

4৷{1}}.3 এবং পরিপাটি, nlme 3৷{4}} এবং গ্যারি

2.1.2 প্যাকেজ। লিনিয়ার মডেলগুলি লগ 10 রূপান্তরিত জিন ফোল্ড এক্সপ্রেশন ডেটাতে প্রয়োগ করা হয়েছিল। প্রথম মডেলে, জিনের অভিব্যক্তি ছিল ফলাফলের পরিবর্তনশীল, যখন গোষ্ঠী (নিয়ন্ত্রণ বা OVX কিন্তু গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা করা ভেড়া বাদ দিয়ে) এবং সময় (2 মিটার বা 5 মিটারে euthanized) ছিল নির্ভরশীল ভেরিয়েবল, একটি মিথস্ক্রিয়া শব্দ (গোষ্ঠী: সময়) অন্তর্ভুক্ত ছিল। দ্বিতীয় মডেলে, জিনের অভিব্যক্তি ছিল ফলাফলের পরিবর্তনশীল, যখন গ্রুপ (নিয়ন্ত্রণ, OVX, 2 মিটারের জন্য গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা সহ OVX এবং 5 মিটারের জন্য গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা সহ OVX) ছিল নির্ভরশীল পরিবর্তনশীল।সাইনোমোরিয়াম সুবিধাযেহেতু একাধিক ফলাফলের ভেরিয়েবল (জিন) গোষ্ঠীর মধ্যে পার্থক্যের জন্য পরীক্ষা করা হচ্ছিল, পি-মানগুলি অনুক্রমিক Holm পদ্ধতি ব্যবহার করে একাধিক পরীক্ষার জন্য সামঞ্জস্য করা হয়েছিল [24]। সিরাম ক্যালসিয়াম, ফসফরাস, এবং 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্ব জিন এক্সপ্রেশন মডেলগুলিতে পরীক্ষা করা হয়েছিল, কিন্তু তা উল্লেখযোগ্য ছিল না এবং গ্রুপগুলির মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্যের অভাবের কারণে অপসারণ করা হয়েছিল। অতিরিক্তভাবে, log10 রূপান্তরিত জিন ভাঁজ এক্সপ্রেশন ডেটা গ্রুপ, ইথানেশিয়ার সময়, বা সিরাম 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্বের দ্বারা পৃথক কিনা তা মূল্যায়ন করতে প্রধান উপাদান বিশ্লেষণ ব্যবহার করা হয়েছিল। স্পিয়ারম্যানের পেয়ারওয়াইজ পারস্পরিক সম্পর্ক এবং স্ক্যাটারপ্লটগুলি লগ 10 রূপান্তরিত জিন ফোল্ড এক্সপ্রেশন ডেটা এবং সিরাম বিশ্লেষকের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

3। ফলাফল

3.1.ওভারেক্টমির প্রভাব, ওভারিয়েক্টমির পর থেকে সময়, এবং সিরাম ক্যালসিয়াম, ফসফরাস এবং 25-হাইড্রক্সিভিটামিন ডি ঘনত্বের উপর গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা

প্রতিটি গ্রুপে সিরাম ক্যালসিয়াম, ফসফরাস এবং 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্বের সম্পূর্ণ ফলাফল চিত্র 1-এ উপস্থাপন করা হয়েছে৷ ওভারিয়েক্টোমাইজড এবং কম ক্যালসিয়াম ডায়েট গ্রুপ এবং নন-ওভারিয়েক্টমাইজড পর্যাপ্ত ক্যালসিয়াম ডায়েট গ্রুপ, এবং 2 মাস এবং 5 মাস ওভারিয়েক্টমির পর থেকে সময়। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে কম ক্যালসিয়াম ডায়েটের সাথে মিলিত ওভারিয়েক্টমি সিরাম ক্যালসিয়ামের ঘনত্বের উপর কোন প্রভাব ফেলেনি। যে ভেড়াগুলি ডিম্বাশয়ের জন্য ছিল এবং কয়েক মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, তারপরে 5 মাসে ইউথানেসিয়া হয়, সিরামে ক্যালসিয়ামের ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (p =0.0462, adj R20.13) কম ক্যালসিয়ামযুক্ত খাবারে 5 m ovariectomized এবং 5 m ovariectomized একটি কম ক্যালসিয়াম খাদ্য এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ভেড়া৷ যাইহোক, ডেটা পরীক্ষায় দেখা যায় যে এটি একটি প্রাণীর কারণে হতে পারে যা হাইপোক্যালসেমিক ছিল (1.52 mmol/L, রেফারেন্স পরিসীমা 2৷{17}}.7 mmol/L); অপসারণ এর এই প্রাণী কোন তাৎপর্য মুছে ফেলা.মরুভূমির হাইসিন্থঅন্যান্য সমস্ত ভেড়ার রেফারেন্স সীমার মধ্যে সিরাম ক্যালসিয়ামের ঘনত্ব ছিল। সিরাম ফসফরাস বা 25-হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্বে 5 মিটার ডিম্বাশয় এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ভেড়ার মধ্যে কোনো পার্থক্য দেখা যায়নি।

3.2.কিডনিতে ভিটামিন ডি এবং ফসফ্যাটোনিন-সম্পর্কিত জিনের প্রকাশের উপর ওভারিয়েক্টমির পর থেকে ওভারেক্টমির প্রভাব এবং সময়

ভিটামিন ডি এবং ফসফেটিং-সম্পর্কিত জিনের জিনের প্রকাশ ওভারিয়েক্টমি বা ওভারিয়েক্টমি (চিত্র 2) থেকে সময়ের সাথে সম্পর্কিত ছিল না। ব্যতিক্রম ছিল ভিটামিন ডি রিসেপ্টর(ভিডিআর), যার ফলে ওভিএক্স গ্রুপের উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ভিডিআর এক্সপ্রেশন ছিল(p=0.05, adj R2 0.16); যাইহোক, বারবার ব্যবস্থার জন্য সামঞ্জস্য করার পরে এই তাত্পর্য অদৃশ্য হয়ে গেছে।

3.3। অপারেটিভের 5 মাস পরে কিডনিতে ভিটামিন ডি এবং ফসফ্যাটোনিন-সম্পর্কিত জিনের প্রকাশের উপর ওভারেক্টমি এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার প্রভাব

সম্পূর্ণ ফলাফল চিত্র 3-এ উপস্থাপিত হয়েছে। অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় (p=0.04, adj R40.18), যখন TRPV5 (p{ {8}}.01, adj R20.31) এবং CYP24A1(p=0.005, adj R40.40) অভিব্যক্তি অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা OVX ভেড়াগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল।

ক্লোথোর অভিব্যক্তি সমস্ত গোষ্ঠীর মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল (p =0.01, adj R20.48), নিয়ন্ত্রণ ভেড়ার সর্বনিম্ন অভিব্যক্তি সহ। 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা OVX ভেড়ার সর্বোচ্চ প্রকাশ ছিল (p =0.002), তারপরে OVX ভেড়া (p=0.008) এবং তারপরে OVX ভেড়াগুলি 5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (p{ {10}}.03)। যাইহোক, যখন বারবার পরিমাপের জন্য সামঞ্জস্য করা হয়, তখন এই গোষ্ঠীগুলির মধ্যে জিনের অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল না, ক্লোথো 5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা OVX ভেড়ার মধ্যে সবচেয়ে বেশি পার্থক্য দেখায় (p=0.1)।

একইভাবে, VDR-এর অভিব্যক্তিটি সমস্ত গোষ্ঠীর মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল (p=0.03, adj R20.38)। ভিডিআরের সর্বশ্রেষ্ঠ অভিব্যক্তি OVX ভেড়ার মধ্যে ছিল যা মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (p=0.009), তারপরে OVX ভেড়া (p=0.01), তারপরে OVX ভেড়াকে 5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (p=0.05), এবং সর্বনিম্ন অভিব্যক্তি নিয়ন্ত্রণ ভেড়ার মধ্যে উপস্থিত ছিল।

3.4.গোষ্ঠীগুলির মধ্যে সামগ্রিক জিনের প্রকাশের PCA

2 এবং 5 মাসে OVX, নিয়ন্ত্রণ, এবং euthanasia-এর PCA বিশ্লেষণ বিভিন্ন গোষ্ঠীকে আলাদা করতে ব্যর্থ হয়েছে (চিত্র S1)। PCL এবং PC2 69.6 শতাংশ প্রকরণ ব্যাখ্যা করেছে। একইভাবে, 5 মাসে euthanized গ্রুপগুলির PCA বিশ্লেষণও বিভিন্ন গ্রুপকে আলাদা করতে ব্যর্থ হয়েছে। PCL এবং PC2 প্রকরণের 53.2 শতাংশ ব্যাখ্যা করেছে (চিত্র S2)। PCA বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে সিরাম ক্যালসিয়াম এবং 25- হাইড্রোক্সিভিটামিন ডি ঘনত্বের (চিত্র S3) সিরাম ক্যালসিয়াম এবং ফসফরাস দ্বারা সামগ্রিক জিনের অভিব্যক্তি ব্যাখ্যা করা যায়নি।

3.5.সমস্ত অ্যানালাইট এবং জিন এক্সপ্রেশনের মধ্যে পেয়ারওয়াইজ পারস্পরিক সম্পর্ক

ডিম্বাশয়ের অবস্থা নির্বিশেষে, খাদ্যের ক্যালসিয়ামের পরিমাণ, ওভারিয়েক্টমির পর থেকে সময় (2মি বা 5মি), বা গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার অবস্থা, এনপিটি 1 জিনের অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে এবং ইতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল (পি<001) with="" pth1r,="" npt2c,="" klotho,="" cyp24a1,="" trpv5,="" cald9k,="" and="" cald28k="" gene="" expression.="" pth1r="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><001) with="" npt2c,="" klotho,="" cyp24a1,="" cyp27b1,="" trpv5,="" and="" cald28k.="" npt2a="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" fgfr1wic.="" klotho="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cyp24a1,="" cyp27b1,="" trpv5,="" and="" cald28k.="" cyp24a1="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" trpv5="" and="" cald28k.="" trpv6="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cal9dk="" and="" pmca,="" while="" cal9dk="" was="" significantly="" positively="" correlated=""><0.001) with="" cald28k="" and="" pmca.="" none="" of="" the="" serum="" analytes="" measured="" (osteocalcin,="" ctx,="" 25ohd,="" ca,="" and="" p)="" were="" correlated="" with="" the="" expression="" of="" any="" genes.="" the="" full="" pairwise="" correlations="" are="" shown="" in="" figure="">

4। আলোচনা

এই গবেষণার ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার চিকিত্সা জিনের অভিব্যক্তিতে সবচেয়ে বেশি প্রভাব ফেলেছে, যখন ওভারিয়েক্টমি নিজেই এবং ওভারিয়েক্টমি (2 এবং 5 মাস) থেকে জিনের অভিব্যক্তিতে খুব কম প্রভাব ফেলেছিল। একটি অবিচ্ছিন্ন বিশ্লেষণে, TRPV5, CYP24A1 এবং ক্লোথো জিনের অভিব্যক্তিতে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখা গেছে 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার মধ্যে এবং 5 মাসে ইউথানেসিয়া এবং PTH1R তে ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার জন্য গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছে। ক্লোথো এক্সপ্রেশনে পার্থক্যগুলি বারবার ব্যবস্থার জন্য সামঞ্জস্য করার পরে সবচেয়ে বেশি চিহ্নিত করা হয়েছিল।

এই ভেড়ার প্রক্সিমাল টিবিয়ার পরিমাণগত পেরিফেরাল কম্পিউটেড টোমোগ্রাফি দেখায় যে ডিম্বাশয়ের মোট ভলিউমেট্রিক হাড়ের খনিজ ঘনত্ব (ভিবিএমডি) 8 শতাংশ হ্রাস পেয়েছে, 5 মাসের জন্য গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার সাথে ডিম্বাশয় 27 শতাংশ এবং ডিম্বাশয়ের সাথে গ্লুকোকোর্টিকয়েড 27 শতাংশ হ্রাস পেয়েছে 13 শতাংশ দ্বারা [6]। মজার বিষয় হল, ট্র্যাবেকুলার বিএমডি, ট্র্যাবেকুলার এলাকা এবং ট্র্যাবিকুলার হাড়ের খনিজ উপাদানগুলি 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার নিয়ন্ত্রণের মতো বা তার চেয়ে বেশি এবং 5 মাসে euthanized, হাড়ের ভর পুনরুদ্ধারের পরামর্শ দেয় [6]। গ্লুকোকোর্টিকয়েডের হাড়ের উপর বেশ কিছু ভালোভাবে নথিভুক্ত প্রভাব রয়েছে যা গ্লুকোকোর্টিকয়েড-প্ররোচিত অস্টিওপরোসিসের বিকাশের দিকে পরিচালিত করে। এই প্রভাবগুলির মধ্যে রয়েছে অস্টিওব্লাস্ট প্রোজেনিটর কোষ এবং অস্টিওব্লাস্ট গঠনে বাধা দেওয়া, অস্টিওব্লাস্ট অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি এবং অস্টিওড উত্পাদন হ্রাস করা, যার সবগুলি হাড়ের গঠন হ্রাস করে [25,26]। একই সময়ে, গ্লুকোকোর্টিকয়েডগুলি OPG এক্সপ্রেশন হ্রাস করে, RANKL এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি করে, অস্টিওক্লাস্ট গঠন বৃদ্ধি করে, অস্টিওক্লাস্ট অ্যাপোপটোসিস হ্রাস করে এবং অস্টিওক্লাস্ট [25,26] দ্বারা ক্যাথেপসিন এবং ম্যাট্রিক্স মেটালোপ্রোটিনেসের নিঃসরণ বৃদ্ধি করে হাড়ের শোষণ বাড়ায়।

ক্লোথো হল ফসফেটিং সিস্টেমের একটি অবিচ্ছেদ্য উপাদান, যার ফলে এটি কিডনিতে ফাইব্রোব্লাস্ট গ্রোথ ফ্যাক্টর 23(FGF23) এর সাথে আবদ্ধ হয়। klotho-FGF23 কমপ্লেক্স তারপর FGFR1IIC রিসেপ্টরের সাথে আবদ্ধ হয়, যা বিভিন্ন সেলুলার পথের সূচনা করে এবং অবশেষে, রেনাল 24-হাইড্রোক্সিলেস(CYP24A1) এক্সপ্রেশন এবং রেনাল লা-হাইড্রোক্সিলেস (CYP27B1 এবং রেনাল টিউবুলার) এর অবনমিতকরণের ফলে। Na/P II cotransporters (NPT2a এবং 2c) [১০]। 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েডের উপর ভেড়ার মধ্যে ক্লোথো-এর বর্ধিত অভিব্যক্তি (যার পার্থক্যগুলি বারবার সামঞ্জস্য করার পরে সবচেয়ে বেশি চিহ্নিত করা হয়েছিল) এবং তারপরে 5 মাসে euthanized এই বর্ধিত CYP241 অভিব্যক্তিটিকে ব্যাখ্যা করতে পারে যা ভেড়ার এই গোষ্ঠীতেও দেখা যায়, কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য না থাকা সত্ত্বেও সিরাম 25OHD ঘনত্ব।

ক্লোথো অ্যান্টি-এজিং প্রোটিন হিসাবে পরিচিত এবং ক্লোথো-ঘাটতি ইঁদুরের হাড়ের গঠন এবং হাড়ের রিসোর্পশন কম থাকে, যার ফলে কম হাড়ের টার্নওভার অস্টিওপেনিয়া হয় [27,28]। উপরন্তু, নির্দিষ্ট ক্লোথো জিন পলিমারফিজমগুলি মানুষের হাড়ের খনিজ ঘনত্ব হ্রাসের সাথে যুক্ত [২৯,৩০]। দ্রবণীয় ক্লোথো প্রারম্ভিক বৃদ্ধির প্রতিক্রিয়া প্রোটিন 1 (EGR-1) আপরেগুলেট করে এবং অস্টিওব্লাস্ট কোষ সংস্কৃতিতে হাড়ের পার্থক্য চিহ্নিতকারীর প্রকাশকে প্ররোচিত করে [৩১]অতিরিক্তভাবে গ্লুকোকোর্টিকয়েডগুলি ফাইব্রোব্লাস্ট বৃদ্ধির ফ্যাক্টর 232] দমন করতে পারে। সম্ভবত, 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েডের উপর ভেড়ার মধ্যে বৃহত্তর ক্লোথো অভিব্যক্তি এবং তারপর 5 মাসে euthanized এই ভেড়ার পোস্ট-গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার জন্য পুনরুদ্ধার প্রক্রিয়ার প্রতিফলন এবং হাড় গঠন এবং রিসোর্পশনে এটির ভূমিকা বিবেচনা করে, হাড় পুনরুদ্ধারের একটি মূল চালক। এবং, তাই, মানুষের মধ্যে অস্টিওপরোসিসের জন্য সম্ভাব্য একটি চিকিত্সা লক্ষ্য।

যাইহোক, ওভিএক্স ভেড়াও নিয়ন্ত্রণ ভেড়ার তুলনায় ক্লোথো এক্সপ্রেশন বাড়িয়েছে। একইভাবে, অ্যারোমাটেজ-ঘাটতি ইঁদুরের একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে ইস্ট্রোজেনের ঘাটতি ক্লোথো প্রোটিনের মাত্রা বাড়িয়ে দেয় এবং এস্ট্রাডিওল চিকিত্সা এই ইঁদুরগুলিতে ক্লোথো অভিব্যক্তি হ্রাস করে[17]। ইঁদুরের মধ্যে, ইস্ট্রোজেন NPT2a কে এমন একটি প্রক্রিয়ায় নিয়ন্ত্রণ করে যা klotho/FGF23 এবং PTH[18] থেকে স্বাধীন। যাইহোক, এই বর্তমান গবেষণায় ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়াগুলিতে এই প্রভাবটি দেখা যায়নি। অন্যথায়, ক্লোথোতে ইস্ট্রোজেনের ঘাটতির প্রভাব সম্পর্কে সামান্য সাহিত্য নেই। আরও গবেষণায় ক্লোথো এক্সপ্রেশনের উপর ওভারিয়েক্টমি এবং গ্লুকোকোর্টিকয়েড উভয়ের প্রভাব পরীক্ষা করা উচিত, বার্ধক্য এবং দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগে এর ভূমিকা বিবেচনা করে।

TRPV5 হল একটি এপিথেলিয়াল ক্যালসিয়াম চ্যানেল যা প্রধানত কিডনির দূরবর্তী আবর্তিত টিউবুল এবং সংযোগকারী টিউবুলে প্রকাশ করা হয় [20,33]। TRPV5 চ্যানেলটি গঠনমূলকভাবে উন্মুক্ত কিন্তু ক্যালসিয়াম-নির্ভর নিষ্ক্রিয়করণের মধ্য দিয়ে ক্যালসিয়াম-সেন্সিং প্রোটিন ক্যালমোডুলিনের সাথে মিলিত হয় [৩৪]। TRPV5 এক্সপ্রেশন PTH এবং 1,25(OH)D3 [35] দ্বারা বৃদ্ধি করা যেতে পারে। একটি ভেড়া যা 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েডের উপর ছিল এবং তারপরে 5 মাসে euthanized হয়েছিল হাইপোক্যালসেমিক, এবং অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় এই গ্রুপের ভেড়াগুলিতে সিরাম ক্যালসিয়ামের ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। তাই সম্ভবত, TRPV5 এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি এই প্রাণীদের মধ্যে সিরাম ক্যালসিয়াম ঘনত্ব হ্রাসের ফলস্বরূপ। গ্লুকোকোর্টিকয়েডগুলি TRPV6 এবং CalD9k [36,37] এর অভিব্যক্তি হ্রাস করে এবং ক্যালসিয়ামের মূত্রত্যাগ বৃদ্ধি করে অন্ত্রের ক্যালসিয়াম শোষণকে হ্রাস করতে দেখা গেছে [14], তবে সুস্থ ব্যক্তিদের মধ্যে চিকিত্সাগতভাবে উল্লেখযোগ্য হাইপোক্যালসেমিয়া অস্বাভাবিক। একইভাবে, কম সিরাম ক্যালসিয়াম ঘনত্বের ভেড়াগুলিতে হাইপোক্যালসেমিক টিটানির কোনও ক্লিনিকাল লক্ষণ দেখা যাচ্ছে না। বিকল্পভাবে, ভেড়ার গ্লুকোকোর্টিকয়েডের উপর 2 মাসের জন্য TRPV5 এর বর্ধিত অভিব্যক্তি এবং তারপর 5 মাসে euthanized পুনরুদ্ধার প্রক্রিয়াকে প্রতিফলিত করতে পারে, যার ফলে পুনরুদ্ধার করা ট্র্যাবেকুলার BMD, এলাকা এবং হাড়ের খনিজ উপাদান প্রতিস্থাপনের জন্য কিডনি থেকে ক্যালসিয়ামের বৃদ্ধির রিসোর্পশন প্রয়োজন।

5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ভেড়াগুলিতে, অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায় PTH1R এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি করা হয়েছিল। উপরন্তু, অন্যান্য গোষ্ঠীর তুলনায়, দলে ভেড়ার মধ্যে অভিব্যক্তিতে সামান্য তারতম্য ছিল। যদিও 5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ভেড়ার সিরাম ক্যালসিয়ামের ঘনত্বে কোনও পার্থক্য দেখা যায়নি, সম্ভবত এটি PTH এবং এর রিসেপ্টরের বর্ধিত ক্রিয়ার সাথে যুক্ত হতে পারে। পিটিএইচ নিঃসরণ এবং কর্মের উপর গ্লুকোকোর্টিকয়েডের প্রভাব অস্পষ্ট। মানুষের কিছু গবেষণায় দেখা গেছে যে গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা রোগীদের সিরাম পিটিএইচ ঘনত্ব বৃদ্ধি পেয়েছে, সাথে ক্যালসিয়াম শোষণ হ্রাস, প্রস্রাবের ক্যালসিয়াম নিঃসরণ বৃদ্ধি এবং হাড়ের ভর হ্রাস পেয়েছে [38,39]। যাইহোক, বেশিরভাগ গবেষণায় গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সা [38,40,41] এ মানুষের মধ্যে সিরাম পিটিএইচ ঘনত্বের কোন পরিবর্তন পাওয়া যায়নি। একটি সমীক্ষায় দেখা গেছে যে সম্ভবত গ্লুকোকোর্টিকয়েডের প্রভাব PTH এর ক্ষরণ পরিবর্তনের উপর, গ্লুকোকোর্টিকয়েড-চিকিত্সা করা ব্যক্তিদের মধ্যে PTH এর পালসাটাইল নিঃসরণ বৃদ্ধি পায়[4]। অন্যরা ডেক্সামেথাসোন [43,44] এর সাথে চিকিত্সার প্রতিক্রিয়া হিসাবে মেসেনকাইমাল স্টেম সেল এবং অস্টিওব্লাস্ট-সদৃশ কোষগুলিতে PTH1R এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি করেছে। যেমন, 5 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ভেড়ার রেনাল PTH1R এক্সপ্রেশনের বৃদ্ধি সম্ভবত 5 মাসের গ্লুকোকোর্টিকয়েড চিকিত্সার কারণে।

যদিও ওভারিয়েক্টমি একটি হালকা কম ক্যালসিয়াম খাদ্যের সাথে মিলিত হওয়ার ফলে জিনের অভিব্যক্তিতে ন্যূনতম পরিবর্তন ঘটে, এটি ভিডিআর-এর অভিব্যক্তিকে পরিবর্তন করে বলে মনে হয়, নিয়ন্ত্রণ ভেড়ার তুলনায় হালকা কম ক্যালসিয়ামের খাদ্যে ডিম্বাশয় ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার ভিডিআর প্রকাশ বেশি থাকে। এটি ওভারিয়েক্টোমাইজড ইঁদুরের উপর একটি সমীক্ষার বিপরীতে যেখানে সাধারণ ক্যালসিয়ামের মাত্রা সহ একটি খাদ্য খাওয়ানো তাদের রেনাল ভিডিআর এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি পেয়েছে, যখন কম ক্যালসিয়ামযুক্ত খাবার খাওয়ানো তারা ভিডিআর এক্সপ্রেশন হ্রাস করেছে [৪৫]। এই বর্তমান মেষ গবেষণায় কম ক্যালসিয়াম খাদ্যের প্রভাব থেকে VDR এর রেনাল এক্সপ্রেশনের উপর ওভারিয়েক্টমির প্রভাবকে আলাদা করা কঠিন। যাইহোক, গ্রুপগুলির মধ্যে সিরাম ক্যালসিয়ামের ঘনত্বের মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না (গ্লুকোকোর্টিকয়েড গ্রুপ বাদে) হালকা কম ক্যালসিয়াম খাদ্যের ন্যূনতম প্রভাব ছিল এবং সম্ভবত ওভারিয়েক্টমির কারণে ভিডিআর-এর উপর প্রভাব রয়েছে। যাইহোক, এই সম্পর্কগুলি তদন্ত করার জন্য আরও গবেষণার প্রয়োজন হবে।

পূর্ববর্তী দুটি গবেষণায় ভিটামিন ডি-প্রতিক্রিয়াশীল জিন এবং ভেড়ার কিডনিতে ফসফেটিং-সম্পর্কিত জিনের মধ্যে পৃথক সম্পর্ক পরীক্ষা করা হয়েছে [20,21]। যাইহোক, ভিটামিন ডি এবং ফসফেটিং পথের মধ্যে সম্পর্ক পরীক্ষা করা হয়নি। মজার বিষয় হল, এই দুটি কাগজে রিপোর্ট করা জিনের মধ্যে সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য পারস্পরিক সম্পর্কগুলি এই বর্তমান মেষ অধ্যয়নের জিন সম্পর্কের জন্যও সত্য, যা গবেষণার ফলাফল এবং এই জিনের মধ্যে সম্পর্কের মধ্যে সামঞ্জস্যের পরামর্শ দেয়।cistanche সালসা নির্যাসআগে রিপোর্ট করা হয়নি এমন আকর্ষণীয় সম্পর্কগুলির মধ্যে, যেমন কেউ ক্যালসিয়াম বিপাকের ক্ষেত্রে মূল ভূমিকার কারণে আশা করতে পারে, PTH1R-এর অভিব্যক্তিটি CalD28k, CalD9k, TRPV5 CYP27B1, CYP24A1, VDR, Klotho এবং NPT2c-এর সাথে অত্যন্ত সম্পর্কযুক্ত ছিল। ক্লোথোর অভিব্যক্তিটি টিআরপিভি 5 এর জিনের অভিব্যক্তির সাথে দৃঢ়ভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল, যা অন্যান্য সাহিত্যের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যা দেখায় যে ক্লোথো টিআরপিভি 5কে আপগ্রেগুলেট করে এবং রেনাল ক্যালসিয়াম পুনঃশোষণকে প্রচার করে [46,47]।

দুর্ভাগ্যবশত, পিসিএ বিশ্লেষণ ব্যবহার করে ভিটামিন ডি প্রতিক্রিয়াশীল এবং ফসফেটিং জিনের অভিব্যক্তির উপর ভিত্তি করে বিভিন্ন গ্রুপকে আলাদা করা যায়নি। এটি সম্ভবত এই গবেষণার প্রধান সীমাবদ্ধতার কারণে - ছোট নমুনার আকার। প্রতিটি গোষ্ঠীতে শুধুমাত্র 3-6টি প্রাণীর সাথে, এটি সম্ভবত গোষ্ঠীর মধ্যে জিনের অভিব্যক্তিতে পার্থক্য সনাক্ত করার ক্ষমতা সীমিত করেছে।

5। উপসংহার

এই সমীক্ষার ফলাফলগুলি দেখায় যে জিনের অভিব্যক্তিতে সর্বাধিক চিহ্নিত পার্থক্যগুলি 2 মাস ধরে গ্লুকোকোর্টিকয়েড দিয়ে চিকিত্সা করা ওভারিয়েক্টোমাইজড ভেড়ার রেনাল ক্লোথো এক্সপ্রেশনে ছিল যার পরে 5 মাস পুনরুদ্ধারের সময়কাল। প্রদত্ত ক্লোথো হল "অ্যান্টি-এজিং" হরমোন এবং ক্যালসিয়াম এবং ফসফেট বিপাকের ক্ষেত্রে এটির গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে, এটি সম্ভব যে এই হরমোনটি চিকিত্সা করা ভেড়ার ট্র্যাবেকুলার হাড়ের খনিজ ঘনত্ব এবং এলাকা পুনরুদ্ধারের সাথে সমালোচনামূলকভাবে জড়িত এবং তাই, সম্ভাব্য হতে পারে মানুষের অস্টিওপরোসিসের জন্য একটি চিকিত্সা লক্ষ্য। যাইহোক, ক্লোথোতে গ্লুকোকোর্টিকয়েড এবং ওভারিয়েক্টমির প্রভাব সম্পর্কে আরও গবেষণা প্রয়োজন।

এই নিবন্ধটি প্রাণী 2022, 12, 67 থেকে নেওয়া হয়েছে। https://doi.org/10.3390/ani12010067 https://www.mdpi.com/journal/animals