তাদের কাঠামোগত বৈশিষ্ট্য অনুযায়ী ত্বকের উপর ফ্ল্যাভোনয়েডের প্রভাব: একটি পর্যালোচনা

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত:পটভূমি: মায়োকার্ডিয়াল ইনফার্কশন (MI), বিলিয়ন কার্ডিওমায়োসাইট নষ্ট হয়ে যায়। সর্বোত্তম থেরাপি কার্যকরভাবে ক্ষতিগ্রস্ত কার্ডিওমায়োসাইটগুলিকে প্রতিস্থাপন করতে হবে, সম্ভবত স্টেম কোষগুলি প্রাপ্তবয়স্ক কার্যকরী কার্ডিওমায়োসাইটগুলিতে খোদাই এবং পার্থক্য করতে সক্ষম। যেমন, কার্ডিয়াক অ্যাট্রিয়াল অ্যাপেনডেজ স্টেম সেল (CASCs) উপযুক্ত প্রার্থী। যাইহোক, কার্ডিয়াক অঞ্চলে যেখানে CASC প্রতিস্থাপন করা হয় সেখানে উন্নত গ্লাইকেশন এন্ড প্রোডাক্টের (AGEs) উচ্চ স্তরের উপস্থিতি তাদের পুনর্জন্মের সম্ভাবনাকে প্রভাবিত করতে পারে। এই সমীক্ষায়, আমরা পরীক্ষা করি যে AGEগুলি ভিট্রোতে CASC-এর বৈশিষ্ট্যগুলিকে পরিবর্তন করে কিনা। পদ্ধতি এবং ফলাফল: সংস্কৃতিতে CASC গুলি AGEs ঘনত্ব （50 ug/mL থেকে 400 ug/mL） এর সংস্পর্শে এসেছে। AGEs এক্সপোজারের 72 ঘন্টা পরে CASCs বেঁচে থাকা, বিস্তার এবং স্থানান্তর ক্ষমতা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। Apoptosis ক্রমবর্ধমান AGEs ঘনত্বের সাথে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। এই AGE-এর ক্ষতিকর প্রভাবগুলি AGEs （RAGE） inhibitor （25μM FPS-ZM1） এর জন্য একটি রিসেপ্টর দিয়ে প্রাক-ইনকিউবেশন দ্বারা আংশিকভাবে ভোঁতা হয়ে গিয়েছিল, যা পর্যবেক্ষণ করা নেতিবাচক প্রভাবগুলিতে RAGE-এর জড়িত থাকার ইঙ্গিত দেয়। উপসংহার: AGE-এর CASCs বেঁচে থাকা, প্রসারণ, মাইগ্রেশন এবং ভিট্রোতে অ্যাপোপটোসিসের উপর একটি সময়-এবং ঘনত্ব-নির্ভর নেতিবাচক প্রভাব রয়েছে, যা RAGE সক্রিয়করণের মাধ্যমে আংশিকভাবে মধ্যস্থতা করে। MI আরও পরীক্ষার পর স্টেম সেল থেরাপির সেটিংয়ে অ্যান্টি-AGE থেরাপিগুলি কার্যকর চিকিত্সা কিনা।

কীওয়ার্ড:সস্য কোষ; অ্যালডিহাইড ডিহাইড্রোজেনেস; CASCs; গ্লাইকেটেড প্রোটিন; উন্নত গ্লাইকেশন শেষ পণ্য; বিস্তার apoptosis; মাইগ্রেশন RAGE বাধা

1। পরিচিতি

করোনারি হার্ট ডিজিজ (CHD) বিশ্বব্যাপী মৃত্যুহার এবং অসুস্থতার প্রধান কারণ হিসাবে রয়ে গেছে, মায়োকার্ডিয়াল ইনফার্কশন (MI) হল CHD-এর সবচেয়ে সাধারণ রূপ [1]। করোনারি ধমনীর সম্পূর্ণ বা আংশিক অবরোধ থেকে MI এর ফলাফল। ইস্কেমিক এলাকায়, অক্সিজেন এবং পুষ্টি সীমিত হয়, যার ফলে মায়োকার্ডিয়াল কোষের মৃত্যু হয়। ইনফার্কের আকার একাধিক কারণের উপর নির্ভর করে, যেমন ঝুঁকিতে থাকা ইস্কেমিক এলাকার আকার, করোনারি অবরোধের অবস্থান এবং সময়কাল এবং অবশিষ্ট সমান্তরাল রক্ত ​​​​প্রবাহের পরিমাণ [1,2]। যেহেতু প্রাপ্তবয়স্ক কার্ডিওমায়োসাইটের ন্যূনতম পুনরুত্থান বৈশিষ্ট্য রয়েছে, তাই ক্ষতিগ্রস্ত টিস্যুর অভ্যন্তরীণ মেরামত অধরা থেকে যায়। একটি থেরাপিউটিক পদ্ধতির সন্ধান করা যা কার্যকরীভাবে কার্যকরী সংকোচনশীল টিস্যু দিয়ে মায়োকার্ডিয়াল দাগ প্রতিস্থাপন করে হারানো কার্ডিয়াক টিস্যু পুনরুদ্ধার করার একমাত্র বিকল্প।কত cistanche নিতেঅস্থি মজ্জা কোষ (BMCs) সহ কোষ থেরাপির থেরাপিউটিক সম্ভাব্যতা এবং প্রক্রিয়াগুলি উদ্ঘাটনের জন্য অনেক গবেষণা প্রচেষ্টা করা হয়েছে। অস্থি মজ্জাতে হেমাটোপয়েটিক স্টেম সেল (এইচএসসি), এন্ডোথেলিয়াল প্রোজেনিটর সেল (ইপিসি), এবং মেসেনকাইমাল স্টেম সেল (এমএসসি) রয়েছে[3]। মনোনিউক্লিয়ার বিএমসি এবং এমএসসিগুলির সাথে ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলি পোস্ট-এমআই কার্ডিয়াক ফাংশনে উল্লেখযোগ্য উন্নতি করতে ব্যর্থ হয়েছে। যেহেতু মনোনিউক্লিয়ার বিএমসি এবং এমএসসিগুলি কার্ডিওমায়োসাইটের মধ্যে পার্থক্য করে না, তাই পরিলক্ষিত সীমিত উন্নতিগুলি প্যারাক্রাইন মেকানিজমের জন্য দায়ী হতে পারে [4,5]। পোস্ট-এমআই কার্ডিয়াক ফাংশন উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করার জন্য, গবেষণার ফোকাস রেসিডেন্ট কার্ডিয়াক স্টেম সেল (সিএসসি) এর দিকে স্থানান্তরিত হয়েছে যেমন সি-কিট প্লাস, স্ক্যা-1 প্লাস, আইএল-1 প্লাস-সেল, এবং কার্ডিওস্ফিয়ার, যাদের কার্ডিওমায়োসাইট হওয়ার জন্য প্রি-প্রোগ্রাম করা হতে পারে। তবুও, কার্ডিয়াক পুনর্জন্মে তাদের সাফল্য দুর্বল [6]।

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

গত বছরগুলিতে, আমাদের গবেষণা দল 'কার্ডিয়াক অ্যাট্রিয়াল স্টেম সেল' (CASCs) নামে একটি নতুন ধরনের কার্ডিয়াক স্টেম সেল আবিষ্কার করেছে। অন্যান্য স্টেম সেলের বিপরীতে, CASC গুলি অসাধারণ কার্ডিওমায়োজেনিক পার্থক্য বৈশিষ্ট্য প্রদর্শন করে, যা তাদের কার্ডিয়াক পুনর্জন্মের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল প্রার্থী করে তোলে [৪]। অ্যাট্রিয়াল অ্যাপেন্ডেজ থেকে এই স্টেম সেল জনসংখ্যার বিচ্ছিন্নতা উচ্চ অ্যালডিহাইড ডিহাইড্রোজেনেস (ALDH) কার্যকলাপের উপর ভিত্তি করে। উচ্চ ALDH কার্যকলাপ অন্যান্য স্টেম সেলের প্রকারেও রিপোর্ট করা হয়েছে, যেমন MSC, HSC, এবং অন্যদের মধ্যে নিউরাল এবং ক্যান্সার স্টেম সেল[7-9]। যেহেতু ALDH কার্ডিওপ্রোটেক্টিভ হিসাবে প্রমাণিত হয়েছে এবং চাপের পরিস্থিতিতে কোষের বেঁচে থাকার প্রচার করে, তাই ইস্কেমিক পরিস্থিতিতে একটি ALDH প্লাস স্টেম সেল জনসংখ্যা ব্যবহার করা এই প্রসঙ্গে, উপকারী হতে পারে [4,10]। ALDH কার্যকলাপ, সারফেস অ্যান্টিজেন প্রোফাইল, এবং কার্ডিওমায়োজেনিক ডিফারেন্সিয়েশন ক্ষমতা [১১] এর মতো মৌলিক বৈশিষ্ট্যগুলি না হারিয়ে CASCগুলিকে ক্লিনিক্যালি প্রাসঙ্গিক সংখ্যা পর্যন্ত প্রসারিত করা যেতে পারে। এই প্রদত্ত ক্লিনিকে এই থেরাপিউটিক পদ্ধতির অনুবাদের জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। উপরন্তু, আমরা দেখিয়েছি যে অটোলগাস CASCs ট্রান্সপ্লান্টেশনের ফলে উন্নত বাম ভেন্ট্রিকুলার ফাংশন হয়, যার ফলে পর্যাপ্ত স্টেম সেল এনগ্র্যাফ্টমেন্ট এবং আরও CASCs পার্থক্য [4,12]।

MI রোগীদের ক্ষেত্রে, উন্নত গ্লাইকেশন এন্ড-প্রোডাক্টের (AGEs) মাত্রা বৃদ্ধি পায় [১৩] AGE হল প্রোটিন এবং/অথবা লিপিড যা গ্লাইকেশন দ্বারা অপরিবর্তনীয়ভাবে ক্ষতিগ্রস্থ হয়, এমন একটি প্রক্রিয়া যেখানে শর্করা হ্রাস করা লিপিড বা প্রোটিনের অ্যামিনো গ্রুপের সাথে অ-এনজাইম্যাটিকভাবে প্রতিক্রিয়া দেখায়। . গ্লাইকেশন ছাড়াও, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রোটিন এবং/অথবা লিপিডের অক্সিডেশনের মাধ্যমে AGEs গঠনের দিকে পরিচালিত করে [14]। AGEগুলি অন্তঃসত্ত্বাভাবে গঠিত হয় এবং স্বাভাবিকভাবে বার্ধক্যের সাথে বা MI-এর মতো রোগগত পরিস্থিতিতে শরীরে জমা হয় যখন অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের মাত্রা বৃদ্ধি পায় [15-17]।একটি cistanche কিঅধিকন্তু, পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে AGE গুলি ভিট্রো [18-20]-এর বিভিন্ন ধরনের স্টেম কোষকে প্রভাবিত করে। স্টেম সেলের প্রসারিত হওয়ার ক্ষমতা AGEs দ্বারা হ্রাস পায় এবং AGEs প্রয়োগে অ্যাপোপটোটিক হার বৃদ্ধি পায়। এই প্রভাবগুলি অ্যাপোপটোটিক পাথওয়ে সক্রিয়করণ, RAGE, বা অত্যধিক ROS গঠন সহ বেশ কয়েকটি প্রক্রিয়ার মাধ্যমে কার্যকর করা যেতে পারে [20]। AGEs CASC-এর বৈশিষ্ট্যগুলিকেও প্রভাবিত করে কিনা তা অজানা থেকে যায়। এই ফলাফলগুলি প্রশ্ন উত্থাপন করে যে AGEs CASC-এর থেরাপিউটিক কার্যকারিতাকে নেতিবাচকভাবে প্রভাবিত করতে পারে, যা MI-এর চিকিত্সা হিসাবে ব্যবহৃত হয়। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য তাই AGE-এর ইন ভিট্রো প্রভাব এবং CASCS-এর বিস্তার, বেঁচে থাকা এবং স্থানান্তরের উপর এর রিসেপ্টর RAGE-এর সম্ভাব্য সক্রিয়করণ পরীক্ষা করা।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। প্রাণী পরীক্ষা

প্রাণী পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য EU নির্দেশিকা 2010/63/EU অনুযায়ী পশু অধ্যয়ন পরিচালিত হয়েছিল এবং পশু পরীক্ষার জন্য স্থানীয় নৈতিক কমিটি (UHasselt, Belgium, Diepenbeek; ID 201919K) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। সমস্ত প্রাণীকে 12h-12ঘন্টা আলো-অন্ধকার চক্রের সাথে তাপমাত্রা-নিয়ন্ত্রিত পরিবেশে (21 ডিগ্রি, 60 শতাংশ আর্দ্রতা) রাখা হয়েছিল। তাদের একটি প্রমিত প্যালেট ডায়েট খাওয়ানো হয়েছিল যেখানে জল পাওয়া যায়।

2.2.ইঁদুর CASCs বিচ্ছিন্নতা এবং সম্প্রসারণ

CASCগুলি ডান অ্যাট্রিয়াল অ্যাপেন্ডেজ থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল, যেমন আগে বর্ণনা করা হয়েছিল [4]সংক্ষেপে, ইঁদুরগুলিকে হেপারিন দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল (1000 ইউনিট/কেজি, ইন্ট্রাপেরিটোনলি (আইপি)) এবং এর ওভারডোজ দিয়ে euthanized করা হয়েছিল সোডিয়াম পেন্টোবারবিটাল (ডোলেথাল, ভেটোকুইনল, আর্টসেলার বেলজিয়াম, 200 মিলিগ্রাম/কেজি, আইপি)। হৃৎপিণ্ড সংগ্রহ করা হয়েছিল, একটি সাধারণ টাইরোড দ্রবণ (137mMNaCl, 5.4mMKCl, 0.5mMMgClz,1mN1mClu, taM1mCa, taM1mcine, taM1mCa8, 0.5mMMgClz, 0.5mMMgCl. ,pH7.4), এবং ডান অ্যাট্রিয়াল অ্যাপেন্ডেজগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল। নিষ্কাশিত ডান অ্যাট্রিয়াল অ্যাপেন্ডেজ টিস্যু ~1 mm³ এর টুকরো টুকরো করে কেটে ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন (PBS) দিয়ে ধুয়ে এনজাইম্যাটিকভাবে 30 মিনিটের জন্য হ্যাঙ্কের ব্যালেন্সড সল্ট সলিউশনে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। 0.6 WU/mL collagenase NB 4 (Serva, Heidelberg, Germany) এবং 20 mM Carly ধারণকারী।bioflavonoidsALDHt কোষগুলি Aldefluor কিট (STEMCELL প্রযুক্তি, Evergem, Belgium) অনুসারে দাগযুক্ত ছিল। ALDHt কোষগুলিকে CASC হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল এবং X-VIVO 15 মিডিয়াতে (BD FACS Aria) 20 শতাংশ ভ্রূণ বাছুরের সিরাম (FCS) এবং 2 শতাংশ পেনিসিলিন/স্ট্রেপ্টোমাইসিন (P/S) এর সাথে পরিপূরক (লোনজা, বাসেল, সুইজারল্যান্ড) ফ্লো-সর্ট করা হয়েছিল। . বিচ্ছিন্ন CASC গুলি প্রতি কূপের ঘনত্বে 60,000 কোষের ঘনত্বে 6-কূপ প্লেটে বীজ করা হয়েছিল এবং 5 শতাংশ CO2 বায়ুমণ্ডল সহ একটি আর্দ্র ইনকিউবেটরে 37 ডিগ্রিতে সেদ্ধ করা হয়েছিল। মাধ্যমটি প্রতি 2 থেকে 3 দিনে পরিবর্তিত হয়েছিল। যখন CASCগুলি 80 শতাংশ সঙ্গমে পৌঁছেছে, তখন ট্রিপসিন ব্যবহার করে ফসল কাটা হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষার জন্য, প্যাসেজ 1 CASC ব্যবহার করা হয়েছিল।

Cistanche বিরোধী বার্ধক্য করতে পারেন

2.3.AGEs প্রস্তুতি

AGEগুলি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল [21]। সংক্ষেপে, বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (BSA; 7 mg/mL) গ্লাইকোলডিহাইড ডাইমার (90 মিমি; সিগমা-অলড্রিচ, ডিজেম, বেলজিয়াম) দ্বারা জীবাণুমুক্ত পিবিএস (pH7.4) তে 5 দিনের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। এই দ্রবণটি PBS এর বিরুদ্ধে ডায়ালাইজ করা হয়েছিল, 2 ঘন্টার জন্য এবং রাতারাতি 4 ডিগ্রীতে অপ্রতিক্রিয়াহীন গ্লাইকোলডিহাইড অপসারণের জন্য (3.4 kDa কাট-অফ। AGEs ফিল্টার করা হয়েছিল (0.2 um ফিল্টার, সারস্টেড, এন্টওয়ার্প, বেলজিয়াম)। PBS(7mg/mL) এ বিএসএ ইনকিউবেট করা হয়েছিল। ) একটি নিয়ন্ত্রণ সমাধান হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

2.4.প্রসারণ এবং বেঁচে থাকার পরীক্ষা

প্রপিডিয়াম আয়োডাইড (পিআই) অ্যাস সহ প্রসারণ এবং বেঁচে থাকার অ্যাসগুলি চালানো হয়েছিল, যেমনটি গারভয়েস এট আল দ্বারা বর্ণিত হয়েছে। এবং লো মোনাকো এট আল [২২,২৩]। সংক্ষেপে, 10 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S সহ X-VIVO মাধ্যমের একটি 96-কূপ প্লেটে CASCগুলিকে বীজ দেওয়া হয়েছিল৷ প্রসারণ অ্যাসেসের জন্য, প্রতি কূপে 5000 কোষ বীজ করা হয়েছিল। বেঁচে থাকার পরীক্ষাগুলির জন্য, প্রতি কূপে 100 কোষ বীজ করা হয়েছিল। 24 ঘন্টা পরে, মাধ্যমটিতে পাঁচটি ভিন্ন শর্ত যুক্ত করা হয়েছিল: 400 ug/mL BSA, 50 ug/mL, 100 ug/mL, 200 ug/mL, এবং 400 ug/mL AGEs৷ বিস্তার পরিমাপ করার জন্য, 2 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S সহ X-VIVO মাধ্যমে BSA বা AGE যোগ করা হয়েছিল।cistanche কিনুনবেঁচে থাকার পরিমাপ করতে BSA বা AGEগুলিকে X-VIVO মাধ্যমে যোগ করা হয়েছিল 0 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S। তিনটি ভিন্ন টাইম পয়েন্টের (24,48, এবং 72 h) পরে, মাধ্যমটিকে Lysis বাফার A100 (ChemoMetec, Kaiserslautern, Germany) দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল, তারপরে PI(10 ug/) এর সাথে পরিপূরক সমপরিমাণ স্থিতিশীল বাফার বি (চেমোমেটেক) দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। এমএল, সিগমা)। অন্ধকারে 15 মিনিটের একটি ইনকিউবেশন পিরিয়ডের পরে, ফ্লুওস্টার অপটিমা প্লেট রিডার (বিএমজি ল্যাবটেক, ওর্টেনবার্গ, জার্মানি) ব্যবহার করে 540 এনএম, নির্গমন তরঙ্গদৈর্ঘ্য 612 এনএম এবং 2000 বৃদ্ধিতে ফ্লুরোসেন্স পরিমাপ করা হয়েছিল৷ পরীক্ষাগুলি করা হয়েছিল৷ তৃতীয়ক মধ্যে. 400 ug/mL BSA দিয়ে প্রাপ্ত ডেটাতে ডেটা স্বাভাবিক করা হয়েছিল।

2.5.মাইগ্রেশন অ্যাসে

X-VIVO মিডিয়ামে 10 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S সহ প্রতি কূপের ঘনত্বে CASCগুলিকে একটি {{0}}কূপ প্লেটে 5000 কোষের ঘনত্বে বীজ দেওয়া হয়েছিল৷ মাধ্যমটিতে পাঁচটি শর্ত যুক্ত করা হয়েছে: 400 ug/mL BSA, 50 ug/mL, 100 ug/mL, 200 ug/mL, এবং 400 ug/mL AGEs৷ 72 ঘন্টার একটি ইনকিউবেশন পিরিয়ডের পরে, শর্তযুক্ত CASCগুলি ট্রিপসিন ব্যবহার করে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং একটি ট্রান্সওয়েল মাইগ্রেশন অ্যাসের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। ThinCerts-এ (Greiner Bio-One, Vilvoorde, Belgium) 8 um ছিদ্র আকারের একটি ছিদ্রযুক্ত ঝিল্লি, প্রতি শর্তে 100,000 কোষগুলিকে X-VIVO মাধ্যমে 0 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S দিয়ে বীজ করা হয়েছিল। ThinCerts 2 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S সহ X-VIVO মাধ্যম সহ 24-কূপ প্লেটে স্থাপন করা হয়েছিল। মাইগ্রেশনের 24 ঘন্টা পরে, ThinCerts 15 মিনিটের জন্য 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড (PFA) দিয়ে স্থির করা হয়েছিল এবং 0.1 দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। 30 মিনিটের জন্য শতাংশ ক্রিস্টাল ভায়োলেট। যে কোষগুলি স্থানান্তরিত হয়নি সেগুলি ThinCerts-এর উপরের দিকে সরানো হয়েছিল, তারপরে AxioVision 4.6 সফ্টওয়্যার (Carl Zeiss, Zaventem, Belgium) দিয়ে স্থানান্তরিত CASC-এর পরিমাণ পরিমাপ করা হয়েছিল৷ 400 ug/mL BSA দিয়ে প্রাপ্ত ডেটাতে ডেটা স্বাভাবিক করা হয়েছিল।

2.6.অ্যাপটোসিস অ্যাস

CASC গুলিকে একটি 96-কূপ প্লেটে 10 ঘনত্বে,00 কূপে প্রতি কূপ X-VIVO মাধ্যমে 2 শতাংশ FCS এবং 2 শতাংশ P/S দিয়ে বীজ করা হয়েছিল৷ অ্যাপোপটোসিস অধ্যয়ন করার জন্য, IncuCyte8 ক্যাসপেস-3/7 গ্রীন অ্যাপোপটোসিস অ্যাসে রিএজেন্ট ব্যবহার করে একটি ক্যাসপেস অ্যাস সঞ্চালিত হয়েছিল (পাতলা 1/100, সার্টোরিয়াস, শার্বিক, বেলজিয়াম)। মাধ্যমটিতে পাঁচটি শর্ত যুক্ত করা হয়েছে: 400 ug/mL BSA, 50 ug/mL, 100 ug/mL, 200 ug/mL, এবং 400 ug/mL AGEs৷ CASCs FCS ছাড়া X-VIVO মাধ্যমের মধ্যে সংস্কৃত এবং 2 শতাংশ P/ এস একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি ত্রিগুণে সঞ্চালিত হয়েছিল। IncuCyte@S3Live-Cell Analysis System (Sartorius, Schaarbeek, Belgium) ব্যবহার করে 24,48 এবং 72 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে ছবি তোলা হয়েছিল। অ্যাপোপটোটিক কোষ দ্বারা দখলকৃত এলাকার বিশ্লেষণ IncuCyte* SX1 লাইভ-সেল বিশ্লেষণ সিস্টেম (Sartorius, Schaarbeek, Belgium) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। ডেটা ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণে স্বাভাবিক করা হয়েছিল ( প্লাস, এফসিএস ছাড়াই এক্স-ভিভো মাঝারি)।

2.7. ইন ভিট্রো রেজ ইনহিবিশন

CASC-এর বিস্তার, বেঁচে থাকা এবং স্থানান্তরে RAGE অ্যাক্টিভেশনের অবদান মূল্যায়ন করতে RAGE-কে বাধা দেওয়া হয়েছিল। সংক্ষেপে, CASCগুলি RAGE বিরোধী FPS-ZM1 (10 এবং 25 uM, Calbiochem/Merck, Overijse, Belgium) এর সাথে একটি 5 শতাংশ CO2 ইনকিউবেটরে 37 ডিগ্রিতে প্রাক-ইনকিউবেট করা হয়েছিল। 2 ঘন্টা প্রাক-ইনকিউবেশনের পরে, 400 ug/mL AGE যোগ করা হয়েছিল।cistanche অস্ট্রেলিয়া24 48, এবং 72 ঘন্টা পরে, উপরে বর্ণিত হিসাবে বিস্তার এবং বেঁচে থাকা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। 72 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে, পূর্ব-শর্তযুক্ত CASCগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং উপরে বর্ণিত হিসাবে একটি ট্রান্সওয়েল মাইগ্রেশন অ্যাস এর জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.8.পরিসংখ্যান

গ্রাফপ্যাড প্রিজম 9 ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল৷{1}}৷{2}} সফ্টওয়্যার৷cistanchশাপিরো-উইল্ক পরীক্ষার মাধ্যমে ডেটার স্বাভাবিক বন্টন মূল্যায়ন করা হয়েছিল। সাধারণত বিতরণ করা ডেটা বারবার পরিমাপের সাথে একমুখী ANOVA পরীক্ষার সাপেক্ষে, তারপরে Holm-Sidak-এর একাধিক তুলনা পরীক্ষা করা হয়। যখন ডেটা সাধারণত বিতরণ করা হত না, তখন নন-প্যারামেট্রিকাল ফ্রিডম্যান পরীক্ষাটি ডনের একাধিক তুলনা পরীক্ষা দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল। সমস্ত ডেটা গড় (SEM) এর গড় ± স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি হিসাবে প্রকাশ করা হয়। p এর একটি মান<0.05 was="" considered="" statistically="">

3। ফলাফল

3.1.AGEs এক্সপোজার নেতিবাচকভাবে CASC এর বিস্তার এবং বেঁচে থাকাকে প্রভাবিত করে

চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে, সময়ের সাথে AGEs উল্লেখযোগ্যভাবে এবং ধীরে ধীরে CASC-এর বিস্তার হ্রাস করেছে। CASCs বিস্তারের উপর AGE-এর নেতিবাচক প্রভাবও ঘনত্ব-নির্ভর ছিল। 72 ঘন্টার পরে, 100 ug/mL, 200 ug/mL, এবং 400 ug/mL AGEs এর ঘনত্ব BSA এর তুলনায় CASCs বিস্তারকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে （চিত্র 1C; 80 শতাংশ ±7n100ug/mL, 74 শতাংশ ±3in 20m, 20mg এবং 65 শতাংশ ±4 ইন 400 ug/mL AGEs）। একা BSA-এর প্রয়োগ CASC-এর প্রসারণ ক্ষমতাকে প্রভাবিত করেনি (পরিপূরক পদার্থের চিত্র নম্বর)। চিত্র 2-এ দেখানো হয়েছে, AGE-এর ক্রমবর্ধমান ঘনত্ব নেতিবাচকভাবে CASC-এর বেঁচে থাকাকে প্রভাবিত করেছে। 48 (চিত্র 2B) এবং 72 ঘন্টা (চিত্র 2C; 100 ug/mL-এ 85 শতাংশ ±3, 200 ug/mL-এ 73 শতাংশ ±3, এবং 64 শতাংশ ±4in 400 ug/mL AGEs) পরে AGE-এর উল্লেখযোগ্য প্রভাব পরিলক্ষিত হয়েছে। .একা BSA প্রয়োগ CASC-এর বেঁচে থাকার ক্ষমতাকে প্রভাবিত করেনি (চিত্র S1)।

3.2. বর্ধিত AGEs ঘনত্ব CASCs অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি করে

CASCs অ্যাপোপটোসিসে বিভিন্ন AGEs ঘনত্ব （50,100,20 এবং 400 ug/mL） এর প্রভাব ব্যাখ্যা করার জন্য, একটি ক্যাসপেস অ্যাস করা হয়েছিল। ক্যাসপেস 3/7 প্রকাশকারী কোষের শতাংশ বিভিন্ন সময় পয়েন্টে পরিমাপ করা হয়েছিল: 24 (চিত্র 3A), 48 (চিত্র 3B), এবং 72 (চিত্র 3C) h। সময়ের সাথে সাথে অ্যাপোপটোটিক হার ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পায় (চিত্র 3C,72h; 400 ug/mL AGEs vs.18 শতাংশ ±3in BSA-তে চিত্র 3C,72h; 77 শতাংশ ±17)।

3.3.AGEs এক্সপোজার CASC-এর মাইগ্রেশন ক্ষমতা হ্রাস করে

CASCs মাইগ্রেশন ক্ষমতা 72h ইনকিউবেশনের পরে AGE-এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে একটি ট্রান্সওয়েল মাইগ্রেশন অ্যাস দিয়ে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। চিত্র 4-এ, BSA এবং বিভিন্ন AGEs ঘনত্ব (50,100, 200, এবং 400 ug/mL) এর সাথে ইনকিউবেশনের পরে CASCs মাইগ্রেশনের প্রতিনিধি উদাহরণ উপস্থাপন করা হয়েছে। স্থানান্তরের পরিমাণ চিত্র 4F এ দেখানো হয়েছে। BSA-এর তুলনায়, 400 ug/mL AGEs （চিত্র 4E, F; 75 শতাংশ ±5in 400 ug/mL AGEs） সহ CASC গুলিকে ইনকিউব করা হলে মাইগ্রেশনে একটি উল্লেখযোগ্য হ্রাস পরিলক্ষিত হয়।

3.4.CASC-তে AGE-এর ক্ষতিকর প্রভাবগুলি RAGE অ্যাক্টিভেশন দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়

AGE-এর পরিলক্ষিত ক্ষতিকারক প্রভাবগুলিতে RAGE অ্যাক্টিভেশনের অবদান মূল্যায়ন করতে, RAGE বিরোধী FPS-ZM1 এর সাথে ইনকিউবেশনের পরে CASC-এর বিস্তার, বেঁচে থাকা এবং স্থানান্তর মূল্যায়ন করা হয়েছিল। 400 ug/mL AGEs-এর সংস্পর্শে আসার আগে, CASCগুলিকে 10 বা 25 uM FPS-ZM1 দিয়ে 2 ঘন্টার জন্য প্রাক-ইনকিউবেট করা হয়েছিল। একা FPS-ZMl-এর প্রয়োগ (10 এবং 25 uM) প্রসারিত ক্ষমতা বা CASCs (চিত্র S2) এর বেঁচে থাকাকে প্রভাবিত করেনি। CASCs বিস্তার (চিত্র 5A-C) 24(A), 48(B), এবং 72(C)h পরে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে, 25 uM FPS-ZM1 (চিত্র 5A-C) এর সাথে প্রাক-ইনকিউবেশনের পরে AGEs দ্বারা CASCs বিস্তারের নেতিবাচক প্রভাব উল্লেখযোগ্যভাবে ভোঁতা হয়। প্রকৃতপক্ষে, 24 এবং 48 ঘন্টা পরে, 400 ug/mL AGEs এক্সপোজার সহ CASCs বিস্তার উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছিল （24h, চিত্র 5A; 25 μM FPS-ZM1 বনাম 79 শতাংশ ±5 400 ug/sug/sug-এ 104 শতাংশ 士8; 48h, Figure5B;95 শতাংশ ±5in 25 μM FPS-ZM1 বনাম.70 শতাংশ ±4in 400 ug/mL AGEs）। 72 ঘন্টা পরে, একই প্রবণতা পরিলক্ষিত হয়েছিল। যখন RAGE বাধা দেওয়া হয়েছিল তখন বিস্তারের প্রবণতা ছিল （চিত্র; 80 শতাংশ ±8in25μMFPS-ZM1 বনাম.67 শতাংশ ±5in 400 ug/mL AGEs,p=0.06）। বেঁচে থাকা (চিত্র 6A-C) 24(A), 48(B), এবং 72(C)h পরে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। AGEs (চিত্র 2) দ্বারা CASC-এর বেঁচে থাকার নেতিবাচক প্রভাব 25 uM FPS-ZM1 (চিত্র 6A-C) এর সাথে প্রাক-ইনকিউবেশনের পরে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছে। ২৪ ঘণ্টার পরে, বেঁচে থাকার উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নতি হয়েছে (চিত্র 6A; 25 μM FPS-তে 104 শতাংশ ±7- ZM1 বনাম 400 ug/mL AGEs-এ 91 শতাংশ ±4)। এই প্রবণতাটি 48 ঘণ্টার পরেও পরিলক্ষিত হয়েছে (চিত্র 6B; 91 শতাংশ ±5 25 μM FPS-ZM1 বনাম 81 শতাংশ ±5in 400 ug/mL AGES,p =0.07)। 400 ug/mL AGEs এবং FPS-ZMl সহ 72 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে CASCs মাইগ্রেশনের প্রতিনিধি উদাহরণগুলি চিত্রে উপস্থাপন করা হয়েছে এবং চিত্রে পরিমাপ করা হয়েছে। 25 uM FPS-ZMI সহ CASC-এর প্রাক-ইনকিউবেশন CASC-এর স্থানান্তর ক্ষমতা হ্রাস রোধ করতে পারে (AGEs expos সহ পরিলক্ষিত হয়) চিত্র 7B; 98 শতাংশ ±6 25 uM FPS-ZM1 বনাম 7 শতাংশ ±8in 400ug/mL AGEs,p=0.07）।

4। আলোচনা

আমাদের অধ্যয়নটি প্রথম দেখায় যে AGEগুলি CASC-এর বৈশিষ্ট্যগুলিকে প্রভাবিত করে, যথা বেঁচে থাকা, বিস্তার, স্থানান্তর এবং ভিট্রোতে অ্যাপোপটোসিস। আমাদের ডেটা দেখায় যে এই প্রভাবগুলি ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে RAGE অ্যাক্টিভেশনের মাধ্যমে আংশিকভাবে মধ্যস্থতা করা হয়।

4.1.MI-এ AGE-এর ভূমিকা

তীব্র MI [২৪,২৫] রোগীদের মধ্যে সংবহনমূলক AGE-এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পায় [২৪,২৫] তবে, তারা কীভাবে এমআই-এর প্যাথোফিজিওলজিতে জড়িত তা এখনও স্পষ্ট নয়। প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) হল AGE-এর সংশ্লেষণে জড়িত প্রধান অবদানকারী। অক্সিডেটিভ স্ট্রেস মেইলার্ড প্রতিক্রিয়ায় প্রতিক্রিয়াশীল কার্বনাইল যৌগ এবং অ্যামাডোরি পণ্যগুলির গ্লাইকোক্সিডেশন গঠনে প্ররোচিত করতে পারে। যেমন, AGE গুলি অপরিবর্তনীয়ভাবে গঠিত হয় এবং MI-এর পরে হৃদয়ে জমা হয় এবং সম্ভাব্যভাবে প্রতিকূল কার্ডিয়াক ফেনোটাইপকে আরও খারাপ করে বলে মনে করা হয় [26,27]। উপরন্তু, নিউট্রোফিলস এবং সক্রিয় ম্যাক্রোফেজ, এমআই-তে প্রদাহজনক প্রক্রিয়ার সাথে জড়িত, AGEs সংশ্লেষণের প্রধান অবদানকারী [২৮,২৯]। এই ইমিউন কোষগুলি AGEs নিঃসরণ করে এবং MI-তে AGEs গঠনের মূল সূচনাকারী হিসাবে রিপোর্ট করা হয়। 4.2.AGEs ঘনত্বের শারীরবৃত্তীয় প্রাসঙ্গিকতা

আমাদের গবেষণায়, আমরা AGEs ঘনত্বের বিস্তৃত পরিসর পরীক্ষা করেছি （50 থেকে 400 ug/mL） স্টেম কোষে AGE-এর প্রভাবের তদন্তে অন্যান্য ইন ভিট্রো গবেষণায় ব্যবহৃত AGEs ঘনত্ব, 15 থেকে 500 ug/mL 【20】। ব্যবহৃত ঘনত্বের উল্লেখযোগ্য পরিবর্তনশীলতা রয়েছে, তবে উচ্চতর AGEs স্তরগুলি সাধারণত একাধিক রোগে আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে পাওয়া শারীরবৃত্তীয় প্লাজমা স্তরকে প্রতিফলিত করে। প্রকৃতপক্ষে, ডায়াবেটিস রোগীদের মধ্যে AGEs-অ্যালবুমিনের ঘনত্ব 50 থেকে 400 ug/mL [30] পর্যন্ত দেখানো হয়েছে। কার্ডিওভাসকুলার রোগে আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে AGE-এর মাত্রা 200 ug/mL পর্যন্ত ঘনত্বে বাড়তে পারে [31,32]। প্রাথমিক পর্যায়ে আল্জ্হেইমার রোগের রোগীদের ক্ষেত্রে, ন্যানোস্কেল পরিসরে নিম্ন AGE-এর ঘনত্বও রিপোর্ট করা হয় [৩৩]। যাইহোক, AGEs পরিমাপের জন্য ব্যবহৃত বিভিন্ন বিশ্লেষণী পদ্ধতি এবং বিভিন্ন ধরনের AGE-এর বৈচিত্র্যের কারণে, ভিভোতে নির্ভরযোগ্য AGE-এর ঘনত্বের অনুমান প্রযুক্তিগতভাবে চ্যালেঞ্জিং এবং সম্ভবত একটি অবমূল্যায়ন [৩৪]।

4.3.AGEs CASC বৈশিষ্ট্যের উপর নেতিবাচক প্রভাব ফেলে

এমনকি যদি CASC ট্রান্সপ্লান্টেশন MI-পরবর্তী কার্ডিয়াক পুনর্জন্মের জন্য প্রতিশ্রুতিবদ্ধ সম্ভাবনা দেখায়, কোষগুলির বেঁচে থাকা এবং পুনর্জন্মের ক্ষমতা একটি সমস্যা থেকে যায়। ইসকেমিক অঞ্চলগুলি একটি প্রতিকূল পরিবেশ হিসাবে পরিচিত যেখানে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, প্রদাহ এবং ফাইব্রোসিস এবং AGEs টিস্যুর মাত্রা বৃদ্ধির সাথে মিলিত হয়। AGEs CASC-এর পুনরুত্পাদন ক্ষমতাকে প্রভাবিত করবে কিনা তা অজানা ছিল কিন্তু কার্ডিয়াক পুনর্জন্ম এবং CASCs-এর প্রতিশ্রুতিশীল পুনরুত্পাদন ক্ষমতার প্রসঙ্গে গুরুত্বপূর্ণ জ্ঞান হতে পারে। একটি ঘনত্ব- এবং সময়-নির্ভর পদ্ধতিতে। তদ্ব্যতীত, AGE-এর সংস্পর্শে CASCs অ্যাপোপটোসিসে ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পায়। আমাদের ডেটা একাধিক ধরণের অন্যান্য স্টেম সেলগুলিতে AGE-এর প্রভাব পরীক্ষা করার অধ্যয়নের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, যেখানে প্রসারিত ক্ষমতা পরিবর্তিত হয় এবং অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি পায় [20]। প্রকৃতপক্ষে, Zhu et al. AGEs [16] এর বিভিন্ন ঘনত্বের সংস্পর্শে আসার পরে EPCs বিস্তারে উল্লেখযোগ্য হ্রাস প্রদর্শন করেছে। একই প্রভাব সান এট আল দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ইপিসি-তেও, যেখানে অ্যাপোপটোটিক হারের বৃদ্ধি p38 MAPK পাথওয়ে অ্যাক্টিভেশন দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়েছিল [35]। AGE-এর সংস্পর্শে আসা NSCগুলির ফলে স্টেম সেলের বিস্তারের ডোজ-নির্ভর হ্রাস ঘটে, যা PPARy পথের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করে [36]। অ্যাডিপোজ টিস্যু থেকে প্রাপ্ত স্টেম সেল (ADSCs), ক্যাসপেস 3 অ্যাক্টিভেশন বৃদ্ধির ফলে অ্যাপোপটোটিক হার বৃদ্ধি পায় [37]। ইয়াং এট আল। AGE-এর ঘনত্ব-নির্ভর উপায়ে MSC-তে নিম্ন বিস্তার এবং স্থানান্তর ক্ষমতা রিপোর্ট করা হয়েছে। এই প্রভাবটি অত্যধিক ROS উৎপাদনের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করা হয়েছিল [18]। CASC-এর উপর ক্ষতিকর প্রভাবগুলি, কার্ডিয়াক উত্সের একটি খুব আলাদা স্টেম সেল জনসংখ্যা, অত্যধিক ROS উত্পাদনের মাধ্যমেও মধ্যস্থতা করা হয়েছে কিনা তা নির্ধারণ করা বাকি রয়েছে।

এটি দেখানো হয়েছে যে অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া যেখানে AGEs অঙ্গ ফাংশনের উপর তাদের নেতিবাচক প্রভাবগুলি চালায় তা নির্ভরশীল এবং/অথবা RAGE রিসেপ্টর সক্রিয়করণের উপর নির্ভরশীল [15]। অনেক স্টেম সেল ধরণের গবেষণায় দেখা যায় যে AGE গুলি তাদের প্রভাবগুলিকে মধ্যস্থতা করে মূলত RAGE বা অন্যান্য অ্যাপোপটোটিক পথগুলি সক্রিয় করার মাধ্যমে[20]। AGEs দ্বারা RAGE অ্যাক্টিভেশন MAPK-এর সক্রিয়করণ ঘটায়, যা JNK এবং p38-এর ফসফোরিলেশনের দিকে পরিচালিত করে] এই ফসফরিলেট প্রোটিনগুলি নিউক্লিয়াসে বিভিন্ন প্রো-অ্যাপোপ্টোটিক ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরগুলির ট্রান্সক্রিপশন বাড়ায়, যার ফলে অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি পায়। এর পাশে, ক্যাসপেস পথগুলি সক্রিয় করা যেতে পারে, যার ফলে AGEs-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিস হয়[39]। ফলো-আপ অধ্যয়নগুলি আণবিক প্রক্রিয়াগুলি উন্মোচন করার জন্য প্রয়োজনীয় থাকে যার দ্বারা AGE-এর নিম্নধারার প্রভাবগুলি CASC-তে প্ররোচিত হয়। যাইহোক, আমরা দেখিয়েছি যে FPS-ZM1 দ্বারা RAGE-ব্লক করার পরে, CASC-তে AGE-এর পরিলক্ষিত প্রভাবগুলি ভোঁতা হয়ে গিয়েছিল। অতএব, আমাদের ডেটা দৃঢ়ভাবে নির্দেশ করে যে AGEs RAGE-এর বাঁধাই এবং সক্রিয়করণের মাধ্যমে সম্ভবত CASC-তে তাদের প্রভাবের মধ্যস্থতা করে। Jak/STAT, PI3K/Akt, MAPK, অত্যধিক ROS উত্পাদন, বা অন্যান্য সিগন্যালিং পথ জড়িত কিনা, আরও চিহ্নিত করা বাকি আছে। আমাদের ডেটা ঝাং এট আল দ্বারা বর্ণিত কাজের সাথেও সঙ্গতিপূর্ণ, যেখানে FPS-ZMl এছাড়াও RAGE ব্লক করে ADSC-তে AGE-এর নেতিবাচক প্রভাবগুলিকে উল্টে দিয়েছে, আরও নিশ্চিত করেছে যে RAGE অ্যাক্টিভেশনের গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকার কারণে ক্ষতিকারক প্রভাবগুলির মধ্যস্থতাকারী হিসাবে AGEs[40]।

4.4। কার্ডিওভাসকুলার ডিজিজ এবং বর্তমান সীমাবদ্ধতার জন্য অ্যান্টি-AGE থেরাপির জন্য ভবিষ্যত দৃষ্টিভঙ্গি

অ্যান্টি-AGEs থেরাপির ব্যবহার এবং MI-এর পরে স্টেম সেল ট্রান্সপ্লান্টেশনে তাদের সম্ভাব্য যুক্ত মান সম্পর্কে ভিভো নিশ্চিতকরণ ক্লিনিকে অনুবাদ করার আগে একটি প্রাণীর মডেলে নিশ্চিত করা প্রয়োজন। এটি একাধিক ইন ভিট্রো গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে PPARy ইনহিবিটর রোসিগ্লিটাজোন [41,42], MAPK ইনহিবিটরস [18,35,43], বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি [4] স্টেম সেলগুলিতে AGE-এর মধ্যস্থতাকারী প্রভাবগুলিকে কমিয়ে দিতে পারে। যাইহোক, স্টেম সেল ট্রান্সপ্লান্টেশনের সংমিশ্রণে একটি থেরাপিউটিক হস্তক্ষেপ হিসাবে ভিভোতে তাদের প্রভাব এখন পর্যন্ত কখনই সমাধান করা হয়নি। শরীরে AGE-এর মাত্রা কমানোর একাধিক কৌশল রয়েছে। Pyridoxamine (PM) হল Amadori-to-AGEs রূপান্তর হ্রাস করে এবং কার্বোনিল যৌগগুলি স্ক্যাভেঞ্জিং করে AGEs গঠনের একটি প্রতিরোধক। কার্যকারিতা, সেইসাথে পিএম চিকিত্সার নিরাপত্তা, ডায়াবেটিস রোগীদের সাথে ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলিতে প্রদর্শিত হয়েছে [৪৫]। যাইহোক, 2014 সালে নেফ্রোজেনেক্সের একটি ক্লিনিকাল ট্রায়াল, অ্যান্টি-ডায়াবেটিক থেরাপি হিসাবে পাইরিডোরিন[(অর্থাৎ, পিএম) পরীক্ষা করা, আর্থিক সমস্যার কারণে বন্ধ করা হয়েছিল [46]। অন্য কোন ক্লিনিকাল ট্রায়াল বর্তমানে PM কে থেরাপি হিসাবে তদন্ত করছে না। যাইহোক, PM এর সাথে AGEs গঠনে বাধা দেওয়া কার্ডিয়াক পুনর্জন্মের উদ্দেশ্যে স্টেম সেল সম্ভাবনা উন্নত করার একটি কৌশল হতে পারে। এছাড়াও, AGEs গঠনের অন্যান্য ইনহিবিটর, যেমন aminoguanidine, ভবিষ্যতে MI-এর পরে AGE-এর মাত্রা কমাতে ব্যবহার করা যেতে পারে। ACTION II ক্লিনিকাল ট্রায়াল ডায়াবেটিস রোগীদের মধ্যে aminoguanidine এর কার্যকারিতা দেখিয়েছে। যদিও অ্যামিনোগুয়ানিডিন এই রোগীদের সর্বোচ্চ সিরাম ক্রিয়েটিনিনের মাত্রায় পৌঁছানোর সময়কে দ্বিগুণ করার প্রাথমিক শেষ বিন্দুকে উল্লেখযোগ্যভাবে কমাতে ব্যর্থ হয়েছে, ডায়াবেটিসের জটিলতার উপর অন্যান্য চিকিৎসাগতভাবে গুরুত্বপূর্ণ প্রভাব যেমন প্রোটিনুরিয়া এবং সংবহনকারী লিপিড ঘনত্ব হ্রাস দেখানো হয়েছে। যাইহোক, বিপরীতমুখী প্রতিকূল প্রভাবগুলির কারণে যেমন অটোঅ্যান্টিবডি, ফ্লু-এর মতো লক্ষণ এবং অ্যানিমিয়া, এই ট্রায়ালটি বন্ধ করা হয়েছিল এবং ক্লিনিকে অনুবাদ সীমিত রয়ে গেছে [47,48]। এছাড়াও, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট যেমন N-acetyl-L-cysteine ​​(NAC) বা glutathione আমাদের খাদ্যের পরিপূরক হিসাবে ব্যবহার করা স্টেম সেল থেরাপির জন্য কিছু উপকারী ফলাফল প্রদান করতে পারে, কারণ তারা জিনোমিক স্থিতিশীলতা বাড়ায়, আনুগত্য উন্নত করে এবং স্টেম সেল বিস্তারকে উদ্দীপিত করে। 49]। যাইহোক, কোষ-নির্দিষ্ট ক্রিয়াগুলি স্টেম কোষের প্রকারের মধ্যে আলাদা, এবং স্টেম সেল ট্রান্সপ্লান্টেশনের সাথে সংমিশ্রণে ব্যবহৃত হলে তাদের থেরাপিউটিক কার্যকারিতা মূল্যায়ন করার জন্য ডোজ-প্রতিক্রিয়া ক্লিনিকাল ট্রায়ালের প্রয়োজন হয়। আরেকটি বিকল্প হল ALT-71 থেরাপির মাধ্যমে AGEগুলিকে ভেঙে ফেলা। ALT-711 কার্বনাইলের মধ্যে কার্বন-কার্বনের সীমানা ছিন্ন করতে সক্ষম, যার ফলে AGEs অণুগুলির মধ্যে ক্রস-লিঙ্ক ভেঙে যায়। যাইহোক, বেশ কিছু ক্লিনিকাল ট্রায়াল প্রাণী গবেষণায় ALT-711 এর উপকারী প্রভাবগুলি নিশ্চিত করতে পারেনি। অধিকন্তু, RAGE-এর ইনহিবিটার (যেমন FPS-ZM1) বা RAGE পাথওয়েতে ডাউনস্ট্রিম অণুর ইনহিবিটররা AGEs/RAGE সেল সিগন্যালিং অক্ষে হস্তক্ষেপ করতে পারে, যার ফলে স্টেম সেলগুলিতে AGEs-মধ্যস্থিত প্রভাবগুলিকে ব্লক করে। স্টেম সেলগুলিতে AGEs ব্লক করার জন্য বিভিন্ন ধরণের ছোট অণু এবং ইনহিবিটারগুলির কার্যকারিতা একাধিক ইন ভিট্রো পরীক্ষায় প্রদর্শিত হয়েছে [18,35,44] তবে প্রাণী মডেলগুলিতে এর আগে কখনও পরীক্ষা করা হয়নি। অতএব, আমরা কেবল অনুমান করতে পারি যে এই ইনহিবিটারগুলি ভিভো পরিস্থিতিতে AGE-কে ব্লক করতে দক্ষ, তবে প্রমাণ-ধারণা পরীক্ষাগুলির প্রয়োজন। অবশেষে, স্টেম সেল থেরাপির সংমিশ্রণে AGE-গুলিকে ব্লক করার আরেকটি বিকল্প হল জেনেটিকালি স্টেম সেলগুলিকে নিজেদের পরিবর্তন করা। সেল থেরাপির কার্যকারিতা উন্নত করতে sRAGE-এর অত্যধিক এক্সপ্রেশন AGEs স্ক্যাভেঞ্জিং (এবং অন্যান্য RAGE ligands যেমন amyloid-) বাড়াতে পরিচিত। এটি আল্জ্হেইমের রোগের জন্য থেরাপি হিসাবে sRAGE- secreting MSC-তে দেখানো হয়েছে [50,51], আর্থ্রাইটিস [52], এবং পারকিনসন রোগ [53]। sRAGE secreting MSC গুলি বেশিদিন বেঁচে ছিল, মাইগ্রেশন ক্ষমতা বাড়িয়েছিল, অ্যাপোপটোসিস থেকে আরও ভাল সুরক্ষিত ছিল এবং প্রদাহ বিরোধী বৈশিষ্ট্য ছিল। এছাড়াও, RAGE-এর নিম্ননিয়ন্ত্রণ, যার ফলে AGE-এর জন্য স্টেম কোষগুলিকে সংবেদনশীল করা, কোষগুলির কার্যকারিতা উন্নত করার বিকল্প হতে পারে। এই কৌশলগুলি এমআই এবং কার্ডিয়াক মেরামতের সেটিংয়েও প্রযোজ্য হতে পারে কিনা তা তদন্ত করা বাকি রয়েছে। সংক্ষেপে বলতে গেলে, এই সমস্ত কৌশলগুলির লক্ষ্য স্টেম সেল কার্যকারিতা এবং ধারণ উন্নত করার জন্য AGE-গুলিকে মোকাবেলা করা। যাইহোক, এই থেরাপিউটিক বিকল্পগুলি অনুমানমূলক থেকে যায় এবং ক্লিনিকাল সেটিংয়ে অনুবাদ করার আগে CASC থেরাপির সাথে সমন্বয়ে ভিভোতে তদন্ত করা প্রয়োজন। 5। উপসংহার

আমরা দেখতে পেয়েছি যে AGE-এর সময়-এবং ঘনত্ব-নির্ভর, CASC-এর বৈশিষ্ট্যের উপর ধীরে ধীরে প্রভাব রয়েছে, অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি করে এবং ভিট্রোতে বেঁচে থাকা, প্রসারণ এবং স্থানান্তর হ্রাস করে। এই প্রভাবগুলির পিছনে কাজ করার প্রক্রিয়াগুলি আরও তদন্ত করা বাকি রয়েছে, যদিও আমরা দেখিয়েছি যে RAGE অ্যাক্টিভেশন এই AGE-সম্পর্কিত নেতিবাচক প্রভাবগুলির জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ অবদানকারী। ভিভোতে AGE-কে টার্গেট করা এমআই-এর পরে CASC-এর থেরাপিউটিক ক্ষমতা উন্নত করতে পারে কিনা, আরও তদন্ত করা বাকি রয়েছে।

এই নিবন্ধটি জে ক্লিন থেকে নেওয়া হয়েছে। মেড. 2021, 10, 2964। https://doi.org/10.3390/jcm10132964 https://www.mdpi.com/journal/jcm