সেরিব্রাল ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন সহ ইঁদুরের অক্সিডেটিভ স্ট্রেস ইনজুরিতে এবং সেল অ্যাপোপটোসিসে সিস্টানচে ডেসার্টিকোলা টোটাল গ্লাইকোসাইডের প্রভাব Ⅰ

অ্যাবস্টরাক্ট

উদ্দেশ্য: এর প্রভাব এবং সম্ভাব্য প্রক্রিয়াগুলি অন্বেষণ করাCistanche deserticola মোট গ্লাইকোসাইডসেরিব্রাল সহ ইঁদুরের অক্সিডেটিভ স্ট্রেস ড্যামেজ এবং নার্ভ সেল অ্যাপোপটোসিসের উপর (GCs)ইস্কেমিয়া রিপারফিউশন আঘাত(সিআইআরআই)।

পদ্ধতি: মিডল সেরিব্রাল আর্টারি অক্লুশন (MCAO) মডেলটি সিউচার এমবোলাইজেশন পদ্ধতি ব্যবহার করে মডেল ইঁদুরগুলিতে তৈরি করা হয়েছিল। মডেলটি সফলভাবে প্রতিষ্ঠিত হওয়ার পর, ড্রাগ গ্রুপের (GCs) ইঁদুরগুলিকে 50 mg/(kg·d) পরপর 14 দিন ধরে গ্যাভেজ দিয়ে GCs দেওয়া হয়েছিল; শাম অপারেশন গ্রুপ (শ্যাম) এবং মডেল গ্রুপের (মডেল) ইঁদুরগুলিকে একই পরিমাণ সাধারণ স্যালাইন দেওয়া হয়েছিল। মৌখিক প্রশাসন. প্রশাসনের পরে, স্নায়বিক ঘাটতি মূল্যায়নের জন্য লঙ্গা স্কোর পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল; তারপরে ইঁদুর বলি দেওয়া হয়েছিল, এবং সেরিব্রাল ইনফার্কট এলাকার শতাংশ গণনা করতে টিটিসি স্টেনিং করা হয়েছিল; সিরাম সনাক্ত করতে ELISA পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিলম্যালন্ডিয়ালডিহাইড(MDA) বিষয়বস্তু,সুপারঅক্সাইড ডিসমিউটেজ(SOD) এবংগ্লুটাথিয়ন পেরোক্সিডেস (জিএসএইচ-পিএক্স)কার্যকলাপ; মস্তিষ্কের টিস্যুতে নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর E2-সম্পর্কিত ফ্যাক্টর 2 (Nrf2), হিম অক্সিজেনেস-1 (HO-1) এবং B সনাক্ত করতে ওয়েস্টার্ন ব্লটসেলুলার লিম্ফোমা/লিউকেমিয়া-2 (Bcl-2), Bcl-2-সংশ্লিষ্ট X প্রোটিন (Bax), এবং ক্যাসপেস-3 (ক্যাস্পেস-3) এক্সপ্রেশন।

ফলাফল: শাম গ্রুপের সাথে তুলনা করে, মডেল গ্রুপের স্নায়বিক ঘাটতি বৃদ্ধি পেয়েছে, সেরিব্রাল ইনফার্কশন এলাকার শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে,MDA বিষয়বস্তু বৃদ্ধি, SOD এবং GSH-Px কার্যকলাপ হ্রাস, এবং Nrf 2, HO -1 এবং Bc l-2 প্রোটিন অভিব্যক্তি স্তর হ্রাস Bax এবং Caspase-3 এর প্রোটিন প্রকাশের মাত্রা বৃদ্ধি পেয়েছে; মডেল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, GCs গ্রুপে ইঁদুরের স্নায়বিক ঘাটতি স্কোর হ্রাস পেয়েছে, সেরিব্রাল ইনফার্কশন এলাকার শতাংশ হ্রাস পেয়েছে,MDA বিষয়বস্তু কমে গেছে, SOD এবং GS H-Px কার্যকলাপ বৃদ্ধি পায়, Nrf 2, HO -1 এবং Bcl - 2 এর প্রোটিন প্রকাশের মাত্রা বৃদ্ধি পায়, এবং Bax এবং Caspase - 3 এর প্রোটিন প্রকাশের মাত্রা হ্রাস পায়। উপসংহার: GCs কার্যকরভাবে সেরিব্রাল ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন আঘাত কমাতে পারে, এবং এর প্রক্রিয়া Nrf 2 / HO - 1 পথ সক্রিয় করার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, যার ফলে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের মাত্রা হ্রাস করে এবং নার্ভ সেল অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয়।

[মূল শব্দ]Cistanche deserticola মোট গ্লাইকোসাইড; সেরিব্রাল ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন আঘাত; অক্সিডেটিভ স্ট্রেস; কোষ অ্যাপোপটোসিস

প্রাকৃতিক জৈব CISTANCHE নির্যাস

আরো বিস্তারিত পেতে ক্লিক করুন

সাপোর্টিভ সার্ভিস অফ ওয়েসিস্তানচে- চীনের বৃহত্তম সিস্টানচে রপ্তানিকারক:

ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/টেল:+86 15292862950

আরও নির্দিষ্ট বিবরণের জন্য কেনাকাটা করুন:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

সেরিব্রাল ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন,

CIS অত্যন্ত সঙ্গে একটি রোগউচ্চ অসুস্থতা, অক্ষমতাএবংমৃত্যুর হার. মস্তিষ্কের কোষগুলি ইসকেমিয়া এবং হাইপোক্সিয়ার প্রতি অত্যন্ত সংবেদনশীল, তাই যত তাড়াতাড়ি সম্ভব সেরিব্রাল রক্তনালীগুলিকে পুনরুদ্ধার করা তীব্র ইস্কেমিক স্ট্রোকের সাথে মোকাবিলা করার সবচেয়ে কার্যকর উপায়। ইন্ট্রাভেনাস থ্রম্বোলাইসিস এবং মেকানিক্যাল থ্রম্বেক্টমি বর্তমানে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত পদ্ধতি, তবে তাদের তুলনামূলকভাবে

সংকীর্ণ সময় উইন্ডো এবং অন্যান্য অনিয়ন্ত্রিত কারণের কারণে, শুধুমাত্র<10% of stroke patients can achieve vascular recanalization within an effective time. সেরিব্রাল ইস্কেমিয়া রিপারফিউশন, CIRI হল এক ধরনের সেরিব্রাল রক্তনালী পুনরুদ্ধার স্টেনোসিস থেকে একটি সুপারইম্পোজড প্যাথলজিক্যাল ক্ষতি যা রক্ত ​​প্রবাহের সময় ঘটে। বর্তমানে এটি বিশ্বাস করা হয় যে এর প্যাথলজিকাল মেকানিজম উত্তেজক অ্যামিনো অ্যাসিডের বিষাক্ততা, ক্যালসিয়াম ওভারলোড, প্রদাহজনক কারণের মুক্তি এবং মাইটোকন্ড্রিয়াল ক্ষতির কারণে অক্সিজেন মুক্ত র্যাডিকেল জমা হওয়ার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে [1], যা শেষ পর্যন্ত রক্ত-মস্তিষ্কের বাধা ধ্বংস, মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যাধির দিকে পরিচালিত করে। , নার্ভ সেল অ্যাপোপটোসিস, এবং নেক্রোসিস [1] 2] এবং প্রতিক্রিয়াগুলির একটি সিরিজ, যার ফলে স্নায়বিক ঘাটতি আরও বেড়ে যায়।

Cistanche deserticola মোট গ্লাইকোসাইডস (cistanche, GCs এর গ্লাইকোসাইড) ঐতিহ্যবাহী চীনা ঔষধ Herba Cistanche থেকে উদ্ভূত হয় প্রধান সক্রিয় উপাদান ইঞ্চি কান্ড এবং শিকড় থেকে বের করা হয়)। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে GCs কার্যকরভাবে লিপিড পারক্সিডেশনকে বাধা দিতে পারে, মাইটোকন্ড্রিয়াল ফাংশন উন্নত করতে পারে, অতিরিক্ত অক্সিজেন মুক্ত র্যাডিকেলগুলি অপসারণ করতে পারে, প্রদাহজনক সাইটোকাইনগুলির মুক্তিকে বাধা দিতে পারে, সাইটোটক্সিসিটি কমাতে পারে, অ্যান্টি-প্ল্যাটলেট একত্রিত করতে পারে, কোষের প্রসারণকে বাধা দিতে পারে, নিউরোকোনড্রোসিস এবং নিউক্লিয়ার লেভেল প্রতিরোধ করতে পারে। এর ফলে অ্যান্টি-বার্ধক্য, অ্যান্টি-টিউমার, অ্যান্টি-ডিপ্রেশন, রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ানো, ইস্কেমিক কার্ডিওভাসকুলার এবং সেরিব্রোভাসকুলার রোগের উন্নতি, শেখার এবং মেমরির ক্ষমতা এবং জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করা এবং প্রজনন উন্নতি করা [3]।

গবেষণায় দেখা গেছে যে GC কোষের অক্সিডেটিভ ক্ষতি কমাতে পারে এবং রক্ত-মস্তিষ্কের বাধার অখণ্ডতা বজায় রাখতে পারে।

[৪]; GCs কার্যকরভাবে কোষের কার্যকারিতা উন্নত করতে পারে এবং ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন [৫] এর পরে প্রদাহ এবং অ্যাপোপটোসিসকে ব্লক করতে পারে; এনআরএফ 2 অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রক্রিয়াগুলিতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [6]। উপরের পটভূমির উপর ভিত্তি করে, এই নিবন্ধটির লক্ষ্য সিআইআরআই মডেলের প্রতিলিপি করে সিআইআরআই-এর পরে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং অ্যাপোপটোসিসে জিসিগুলির প্রভাব এবং সম্ভাব্য পথগুলি আরও অধ্যয়ন করা।

1 উপাদান এবং পদ্ধতি

1. 1 ওষুধ এবং বিকারক GCs (SN-5692, বিশুদ্ধতা 98%, পশ্চিমী

Anshenong Biotechnology Co., Ltd.), 2% triphenyltetrazolium chloride (TTC) ডাই সলিউশন (Beijing Solebao Technology Co., Ltd.), ELISA কিট (Beijing Boosen Co., Ltd.), BCA প্রোটিন পরিমাণগত বিশ্লেষণ কিট (USA সেল সিগন্যালিং) প্রযুক্তি কোম্পানি), খরগোশের অ্যান্টি-মাউস অ্যান্টিবডি Bcl-2, Bax, Caspas অ্যান্টিবডি যেমন e-3, Nrf 2, HO-1, এবং ছাগল অ্যান্টি-রবিট সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি সবই এখান থেকে কেনা হয়েছিল মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের প্রোটিনটেক কোম্পানি।

1. 2 যন্ত্র

সেন্ট্রিফিউজ (মডেল: TDL-40B, Shanghai Anheng Scientific Instrument Factory), মাইক্রোপ্লেট রিডার (Model: Max-M5, American Molecular Devices Company), SDS- PAGE ইলেক্ট্রোফোরেসিস যন্ত্র (মডেল: DYY-7C, Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. কোম্পানি), জেল স্ক্যানার (মডেল: 4466611, US BIO-RAD কোম্পানি)।

1. 3টি প্রাণী

পুরুষ উইস্টার ইঁদুর [SCXK (বেইজিং) 2019-0010], পরিষ্কার গ্রেড, 8 সপ্তাহ বয়সী, শরীরের ওজন 250-280 গ্রাম।

1. 3 পদ্ধতি

1. 3. 1 গ্রুপিং এবং মডেলিং

একটি সাধারণ র্যান্ডমাইজেশন পদ্ধতি ব্যবহার করে ইঁদুরগুলিকে শাম গ্রুপ (শাম), মডেল গ্রুপ (মডেল) এবং ড্রাগ গ্রুপ (জিসি) এ বিভক্ত করা হয়েছিল। প্রতিটি দলে 15টি ইঁদুর ছিল। তারা অভিযোজিতভাবে 1 সপ্তাহের জন্য উত্থাপিত হয়েছিল এবং তারপরে মডেল করা হয়েছিল। অস্ত্রোপচারের 12 ঘন্টা আগে কঠোরভাবে উপবাস এবং উপবাস, মডেল গ্রুপ এবং GCs গ্রুপ সিউচার এমবোলাইজেশন পদ্ধতি [7] ব্যবহার করে মধ্যম সেরিব্রাল আর্টারি অক্লুশন (মিডল সেরিব্রাল আর্টারি অক্লুশন) তৈরি করতে। অক্লুশন, MCAO) ইঁদুরের মডেল, রিপারফিউশন অর্জনের জন্য ইস্কিমিয়ার 2 ঘন্টা পরে এম্বুলাস অপসারণ করা হয়েছিল। , রিপারফিউশন শুরুর সময় রেকর্ড করুন। ক্ষতটি সেলাই করা হয়েছিল, ত্বকটি আয়োডোফোর দিয়ে জীবাণুমুক্ত করা হয়েছিল, এবং প্রাণীগুলিকে খাঁচায় ফিরিয়ে দিয়ে লালন-পালন করা হয়েছিল এবং তারপর 24 ঘন্টার জন্য পারফিউজ করা হয়েছিল। শাম গ্রুপের ইঁদুরের অপারেশন মডেল ইঁদুরের মতোই ছিল, কিন্তু কোনো প্লাগিং করা হয়নি। অবশেষে, প্রতিটি গ্রুপে 10 টি ইঁদুর পরবর্তী পরীক্ষার জন্য ধরে রাখা হয়েছিল।

1. 3. 2. প্রশাসনিক পদ্ধতি

GCs পাউডার নিন এবং একটি 15 mg/mL সমাধান প্রস্তুত করতে বিশুদ্ধ জল যোগ করুন। প্রাথমিক গবেষণায় দেখা গেছে যে 50 mg/(kg·d) ডোজ অন্যান্য ডোজ গ্রুপের তুলনায় ভালো [8], তাই এই পরীক্ষার জন্য নির্বাচিত ডোজ আগের মতই। GCs গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে 24 ঘন্টা ইসকেমিয়া এবং রিপারফিউশনের পরে গ্যাভেজ দ্বারা GC দেওয়া হয়েছিল এবং শাম গ্রুপ এবং মডেল গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে 14 দিনের জন্য গ্যাভেজ দ্বারা সমান পরিমাণে সাধারণ স্যালাইন দেওয়া হয়েছিল।

1. 3. 3 স্নায়বিক ঘাটতি স্কোর

লঙ্গা স্কোরিং পদ্ধতি [7] অস্ত্রোপচারের 24 ঘন্টা পরে স্কোর করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং 1 থেকে 3 স্কোর সহ মডেল ইঁদুরগুলিকে পরবর্তী পরীক্ষার জন্য ধরে রাখা হয়েছিল। শেষ ডোজ পরে স্কোর. 0 পয়েন্ট: কোনোটিই নয়

স্নায়বিক লক্ষণ; 1 বিন্দু: সামান্য স্নায়বিক ঘাটতি, লেজ উত্তোলনের সময় বিপরীতমুখী অগ্রভাগ নমনীয় হয় এবং উঁচু হয় এবং কাঁধে যোগ হয়; 2 পয়েন্ট: মাঝারি স্নায়বিক ঘাটতি, লেজ উত্তোলন করার সময় বিপরীতমুখী অগ্রভাগ নমনীয় হয় এবং উঁচু হয়ে যায়, কাঁধের সংযোজন, হাঁটার সময় ক্ষতের বিপরীত দিকে বৃত্তে বাঁক; 3 পয়েন্ট: গুরুতর স্নায়বিক ঘাটতি, হাঁটার সময় ক্ষতের বিপরীত দিকে ঝুঁকে থাকা; 4 পয়েন্ট: অচেতন এবং স্বায়ত্তশাসিত কার্যক্রম।

1. 3. 4 সেরিব্রাল ইনফার্কশন এলাকার শতাংশ নির্ধারণ

শেষ প্রশাসনের পরে, প্রতিটি গ্রুপ থেকে 4 টি ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে নির্বাচন করা হয়েছিল, গভীরভাবে চেতনানাশক করা হয়েছিল, শিরচ্ছেদ করা হয়েছিল এবং তাদের মস্তিষ্ক দ্রুত সরিয়ে ফেলা হয়েছিল।

20 মিনিটের জন্য একটি -20 ডিগ্রি রেফ্রিজারেটরে মস্তিষ্কের টিস্যু দ্রুত হিমায়িত করুন। মস্তিষ্কের টিস্যু তুলনামূলকভাবে স্থির হওয়ার পরে, এটি বের করে নিন। মস্তিষ্কের অগ্রবর্তী মেরুর ছেদ থেকে শুরু করে অপটিক চিয়াজম পর্যন্ত, এবং কপাল থেকে অসিপুট পর্যন্ত, করোনাল সমতল বরাবর ইঁদুরের মস্তিষ্ক কাটুন। 2 মিমি পুরুত্বের সাথে 5টি ব্রেইন স্লাইস করে কেটে নিন, এগুলিকে 2% টিটিসি দ্রবণে নিমজ্জিত করুন, 15 মিনিটের জন্য রঙ করার জন্য 37 ডিগ্রি জলের স্নানে রাখুন, সেগুলি উল্টে দিন এবং আরও 15 মিনিটের জন্য রঙ করুন। অবশেষে, মস্তিষ্কের টুকরোগুলিকে 4% প্যারাফর্মালডিহাইড দ্রবণে নিমজ্জিত করা হয়েছিল এবং ছবি তোলার আগে 12 ঘন্টার জন্য স্থির করা হয়েছিল। সাধারণ মস্তিষ্কের টিস্যু লাল এবং ইনফার্কটেড মস্তিষ্কের টিস্যু সাদাতে দেখানো হয়েছিল। প্রতিটি মস্তিষ্কের স্লাইসের ইনফার্কশন হার বিশ্লেষণ এবং গণনা করতে ইমেজ সফ্টওয়্যার ব্যবহার করুন। ইনফার্কশন রেট=ইনফার্ক এলাকা/মস্তিষ্কের স্লাইসের মোট এলাকা × 100%।

1. 3. 5 অক্সিডেটিভ স্ট্রেস সম্পর্কিত সূচকগুলির সনাক্তকরণ

ইঁদুরটিকে অবেদন দিন, 4 মিলি অ্যাবডোমিনাল অ্যাওর্টা রক্ত ​​নিন, এটিকে পরিষ্কার ইপি টিউবগুলিতে রাখুন এবং এটিকে 4 ডিগ্রী রেফ্রিজারেটরে 0 এর জন্য রাখুন। 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রীতে 5 ঘন্টার জন্য 3 500 r/min এ সেন্ট্রিফিউজ করুন, সুপারনাট্যান্ট নিন এবং অবশেষে প্রতিটি গ্রুপে 3 টি ইঁদুরের সিরাম ধরে রাখুন। ম্যালন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ) এবং সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ) এর বিষয়বস্তু ELISA কিট অপারেটিং পদ্ধতি অনুসারে নির্ধারিত হয়েছিল। ই বরখাস্ত করা,

SOD), glutathione peroxidase (glutathione peroxidase, GSH-Px) কার্যকলাপ।

1. 3. 6 পশ্চিমী দাগ সনাক্তকরণ

অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং অ্যাপোপটোসিস-সম্পর্কিত প্রোটিনগুলি মস্তিষ্কের টিস্যুতে Nrf 2, HO -1, Bcl -2, Bax এবং Caspase -3 প্রোটিনের অভিব্যক্তি পরিমাপ করার জন্য পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রতিটি গ্রুপ থেকে তিনটি ইঁদুর নির্বাচন করা হয়েছিল, এবং রোগাক্রান্ত এলাকা থেকে একটি উপযুক্ত পরিমাণ সেরিব্রাল কর্টেক্স নেওয়া হয়েছিল, এতে লাইসিস দ্রবণ যোগ করা হয়েছিল এবং প্রোটিন নিষ্কাশনের পরে প্রোটিনের ঘনত্ব গণনা করা হয়েছিল। প্রোটিন জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস করার পর, ঝিল্লিতে স্থানান্তর করা হয়, 2 ঘন্টার জন্য ব্লকিং দ্রবণ দিয়ে ব্লক করা হয়, ধুয়ে ফেলা হয় এবং তারপর রাতারাতি 4 ডিগ্রিতে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউব করা হয়, পরের দিন, টিবিএসটি অপসারণ করা হয়, ধুয়ে ফেলা হয় এবং 2-এর জন্য ইনকিউবেশনের জন্য সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি যোগ করা হয়। জ. ধূসর মান বিশ্লেষণ করতে ইমেজিং বিশ্লেষকের উপর লক্ষ্য ব্যান্ড রাখুন। আপেক্ষিক স্ট্রিপ ধূসর মান, আপেক্ষিক স্ট্রিপ ধূসর মান=টার্গেট স্ট্রিপ ধূসর মান / অভ্যন্তরীণ রেফারেন্স স্ট্রিপ ধূসর মান গণনা করুন।

1. 4 পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ পদ্ধতি

ডেটা অ্যাপ্লিকেশান SPSS 25. ডেটা বিশ্লেষণের জন্য 0 সফ্টওয়্যার, এবং এই নিবন্ধের পরিসংখ্যান গ্রাফগুলি গ্রাফপ্যাড প্রিজম 8 সফ্টওয়্যার দিয়ে আঁকা হয়েছে৷ সাধারণ বিতরণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ডেটা ফলাফলগুলিকে গড় ± মান বিচ্যুতি হিসাবে প্রকাশ করা হয়। ভিন্নতার এক-ফ্যাক্টর বিশ্লেষণ একাধিক নমুনার মধ্যে তুলনা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং LSD-t দুটি স্বাধীন নমুনার মধ্যে তুলনা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। পরীক্ষা, P < 0 দিয়ে। 05 নির্দেশ করে যে পার্থক্যটি পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ।