সিস্টাঞ্চের কার্যকরী উপাদান: ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের পৃথকীকরণ এবং পরিশোধন পদ্ধতি

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com

উচ্চ গতির কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা সিস্টানচে ডেজার্টিকোলা থেকে ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডের বিচ্ছিন্নতা এবং পরিশোধন

লি এ,বি, রং সাও বি,*, রেমন্ড ইয়াং বি, চুনমিং লিউ এ,

জে. ক্রিস্টোফার ইয়ং খ, হংহুই ঝু খ

রসায়ন বিভাগ, চাংচুন নরমাল ইউনিভার্সিটি, চাংচুন 130032, চীন

b Guelph Food Research Centre, Agriculture and Agri-Food Canada, 93 Stone Road West, Guelph, Ontario, Canada N1G 5C9

31 মে 2007 প্রাপ্ত; সংশোধিত আকারে প্রাপ্ত 16 অক্টোবর 2007; 29 অক্টোবর 2007 গৃহীত

বিমূর্ত:

পাঁচphenylethanoid glycosides(পিএইচজি),echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside, এবং 20-acetylacteoside, বিচ্ছিন্ন এবং বিশুদ্ধ করা হয়েছিলCistanche deserticolaপ্রথমবার হাই-স্পিড কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি (HSCCC) দ্বারা দুটি বিফাসিক সিস্টেম ব্যবহার করে, একটিতে ইথাইল অ্যাসিটেট-ইথানল-ওয়াটার (5:0.5:4.5, v/v/v) এবং অন্যটি ইথাইল অ্যাসিটেট–এন-বুটানল–ইথানল-ওয়াটার ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v)। ইচিনাকোসাইডের মোট 28.5 মিলিগ্রাম, 18.4 মিলিগ্রামসিস্টানোসাইড এ, 14.6 মিলিগ্রামঅ্যাক্টিওসাইড, 30.1 মিলিগ্রাম আইসোঅ্যাকটিওসাইড এবং 25.2 মিলিগ্রাম 20- অ্যাসিটিল্যাকটিওসাইড 1412 মিলিগ্রাম এন-বুটানল নির্যাস থেকে বিশুদ্ধ করা হয়েছিলCistanche deserticola, HPLC দ্বারা নির্ধারিত প্রতিটি 92.5 শতাংশের বেশি বিশুদ্ধতায়। কাঠামোগুলি তাদের ধরে রাখার সময় দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল, নেতিবাচক আয়ন মোডে UV, LC-ESI-MS, এবং NMR পরীক্ষা দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। পাঁচটি যৌগের বৈশিষ্ট্যগত LC-ESI-MSn ফ্র্যাগমেন্টেশন প্যাটার্ন নিয়ে আলোচনা করা হয়েছে, এবং এই গুরুত্বপূর্ণ ঔষধি উদ্ভিদ থেকে PhG-এর কাঠামোগত শনাক্তকরণের জন্য এটি একটি অত্যন্ত সুনির্দিষ্ট এবং দরকারী টুল হিসাবে পাওয়া গেছে।

ক্রাউন কপিরাইট © 2007 এলসেভিয়ার লিমিটেড দ্বারা প্রকাশিত। সর্বস্বত্ব সংরক্ষিত।

কীওয়ার্ড:Cistanche deserticola; ফেনাইলেথানয়েড;ইচিনাকোসাইড; সিস্টানোসাইড এ;অ্যাক্টিওসাইড; আইসোকটিওসাইড; 20-Acetylacteoside; এইচএসসিসিসি; LC-ESI-MS; NMR

1। পরিচিতি

Cistanche deserticolaওয়াইসি মা একটি সুপরিচিত চীনা ভেষজ ওষুধ এবং আজকের কার্যকরী খাদ্য উপাদান বা খাদ্য সম্পূরক (ওং, লি, চেং এবং চেন, 2006) অনুরূপ ঐতিহ্যগত প্রস্তুতিতে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে। সি. মরুভূমির প্রধান জৈব সক্রিয় উপাদানগুলি হলphenylethanoidগ্লাইকোসাইডস (PhGs), সহechinacoside, acteoside, isoacteoside, 20-acetylacteoside, এবংসিস্টানোসাইড এ(কোবায়াশি, কারাসাওয়া, এবং মিয়াসে, 1984; কোবায়াশি এট আল।, 1987)। PhGs উদ্ভিদ রাজ্যে ব্যাপকভাবে বিতরণ করা হয় এবং তাদের বিভিন্ন জৈবিক ক্রিয়াকলাপের জন্য ব্যাপকভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে যেমন হেপাটোপ্রোটেকটিভ (Xiong et al., 1998), অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি, antinociceptive কার্যকলাপ (Schapoval et al., 1998), এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ (Cheng) , Wei, Guo, Ni, & Liu, 2005; He, Lau, Xu, Li, & But, 2000; Li, Wang, & Wang, 1997; Li, Wang, Zheng, Liu, & Jia, 1993; Wang, Jiang , Wu, & Wang, 2001; Xiong, Kadota, Tani, & Namba, 1996), যৌন ফাংশন উন্নত করা (Xie & Wu, 1993; Zong, He, Wu, & Chen, 1996), এবং sedative effect (Lu, 1998) .

উপরোক্ত তাৎপর্যপূর্ণ জৈব ক্রিয়াকলাপের কারণে, প্রথাগত চীনা ওষুধের ব্যবহার সম্পর্কিত বিভিন্ন ইন ভিট্রো এবং ভিভো গবেষণার জন্য রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে প্রচুর পরিমাণে বিশুদ্ধ যৌগ জরুরীভাবে প্রয়োজন। পিএইচজিগুলির বিচ্ছিন্নতা, বিশুদ্ধকরণ এবং কাঠামোগত বৈশিষ্ট্যের জন্য কার্যকর পদ্ধতিগুলি তাই প্রয়োজনীয় হয়ে উঠেছে। যাইহোক, এই ধরনের কাজের জন্য সাধারণত নমুনা পরিষ্কার এবং বিচ্ছিন্নতার জন্য একাধিক ক্রোমাটোগ্রাফিক পদক্ষেপের ব্যবহার প্রয়োজন (গ্রস, লাহলুব, অ্যাঙ্কলিন, শুল্টেন, এবং স্টিচার, 1988; নিশিমুরা, সাসাকি, ইনাগাকি, চিন, এবং মিৎসুহাশি, 1991; রাভন, নিশিবে , Sasahara, & Li, 1990; Shoyama, Matsumoto, & Nishioka, 1987), যা সাধারণত বিচ্ছেদের সময় কঠিন সমর্থনের উপর PhG-এর অপরিবর্তনীয় শোষণের কারণে পুনরুদ্ধারের হার কম হয় (লেই এট আল।, 2001)। বিপরীতে, হাই-স্পিড কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি (এইচএসসিসিসি) উদ্ভিদের নির্যাস থেকে কিছু পিএইচজি আলাদা করার জন্য প্রচলিত ক্রোমাটোগ্রাফিক কৌশলগুলির একটি কার্যকর বিকল্প হয়ে উঠেছে (লেই এট আল।, 2001; লি এট আল।, 2005)। লেই এট আল। সফলভাবে পৃথক করা হয়েছেঅ্যাক্টিওসাইডএবং এইচএসসিসিসি (লেই এট আল।, 2001) ব্যবহার করে সিস্তানচেস সালসা (সিএ মে।) জি. বেক থেকে 20-এসিটাইল্যাক্টোসাইড। এই কাগজের লেখক পূর্বে বিচ্ছেদ রিপোর্ট করেছেনঅ্যাক্টিওসাইডএবং HSCCC দ্বারা Plantago psyllium L. থেকে আইসোঅ্যাকটিওসাইড (লি এট আল।, 2005)। যাইহোক, থেকে একাধিক পিএইচজি পৃথকীকরণ এবং শুদ্ধকরণের বিষয়ে কোন প্রতিবেদন প্রকাশিত হয়নিCistanche deserticolaHSCCC ব্যবহার করে। মানগুলির অভাবের কারণে, LC-MS পদ্ধতিগুলি উদ্ভিদের নির্যাসে কিছু PhG-এর দ্রুত চরিত্রায়ন এবং সনাক্তকরণের জন্য একটি শক্তিশালী বিশ্লেষণাত্মক হাতিয়ার হিসাবে তৈরি এবং ব্যবহার করা হয়েছে (লি এট আল।, 2005; ওয়াং এট আল।, 2000)।

এই কাগজে, আমরা ইচিনাকোসাইড প্রস্তুতির জন্য বিকশিত একটি HSCCC পদ্ধতির প্রতিবেদন করি,সিস্টানোসাইড এ, acteoside, isoacteoside এবং 20-acetylacteoside থেকেCistanche deserticola. পৃথক করা পাঁচটি PhG-এর বৈশিষ্ট্য এবং বিশ্লেষণ ইন-লাইন ইএসআই ভর স্পেকট্রোমেট্রি এবং এনএমআর পরীক্ষা-নিরীক্ষার সাথে মিলিত LC ব্যবহার করে সম্পন্ন হয়েছিল। ধরে রাখার সময়, আণবিক ওজন এবং পাঁচটি পিএইচজির বৈশিষ্ট্যযুক্ত খণ্ড আয়নগুলি এই কাগজে উপস্থাপন এবং আলোচনা করা হয়েছে। এই তদন্তে চিহ্নিত পাঁচটি PhG-এর গঠন চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে।

echinacosidecistanche মধ্যে

2. পরীক্ষামূলক

2.1। রাসায়নিক এবং বিকারক

অ্যাক্টিওসাইডসিগমা-অলড্রিচ (ওক-ভিলে, অন) থেকে কেনা হয়েছিল, ইচিনাকোসাইড ক্রোমাডেক্স (সান্তা আনা, CA) থেকে কেনা হয়েছিল। আইসোকটিওসাইড পি. সাইলিয়াম এল. (লি এট আল।, 2005) থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল।Cistanche deserticolaবেইজিং টংরেনটাং মেডিসিনাল স্টোর (চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। সমস্ত দ্রাবক এইচপিএলসি গ্রেডের ছিল এবং ক্যালেডন ল্যাবরেটরিজ লিমিটেড (জর্জটাউন, অন) থেকে কেনা হয়েছিল।

2.2। নমুনা প্রস্তুতি

Cistanche deserticola(20 গ্রাম) 100 মিলি 80 শতাংশ জলীয় ইথানল সহ 12 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় পাঁচবার নিষ্কাশন করা হয়েছিল। প্রতিবার নিষ্কাশন মিশ্রণটি হোয়াটম্যান নং 1 ফিল্টার পেপার (হোয়াটম্যান ইন্টারন্যাশনাল লিমিটেড, মেইডস্টোন, ইংল্যান্ড) এর মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল। সম্মিলিত ফিল্টারটি শূন্যস্থানে 100 মিলিগ্রামে <40 ডিগ্রিতে="" ঘনীভূত="" ছিল।="" ফলস্বরূপ="" জলীয়="" দ্রবণটি="" দুবার="" ডিফ্যাট="" করা="" হয়েছিল,="" প্রতিটিতে="" 100="" মিলি="" হেক্সেন="" দিয়ে,="" এবং="" তারপরে="" 100="" মিলি="" এন-বুটানল="" দিয়ে="" পরপর="" পাঁচবার="" নিষ্কাশন="" করা="" হয়েছিল।="" n-বুটানল="" স্তরগুলিকে="" একত্রিত="" করা="" হয়েছিল="" এবং=""><40 ডিগ্রিতে="" শূন্যস্থানে="" শুষ্কতায়="" ঘনীভূত="" করা="" হয়েছিল,="" যা="" 2.2="" গ্রাম="" এন-বুটানল="" নির্যাস="" পেয়েছিল।="" hsccc="" বিভাজনের="" আগে="" নির্যাসটি="" -20="" ডিগ্রিতে="" সংরক্ষণ="" করা="">

2.3। HSCCC বিচ্ছেদ পদ্ধতি

প্রস্তুতিমূলক HSCCC একটি মডেল CCC{{0}} উচ্চ-গতির কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফিতে (ফার্মা-টেক রিসার্চ, বাল্টিমোর, মেরিল্যান্ড ইউএসএ) সম্পাদিত হয়েছিল। এই যন্ত্রটিতে তিনটি প্রস্তুতিমূলক কয়েল ছিল, সিরিজে সংযুক্ত ছিল (মোট আয়তন, 325 মিলি)। যন্ত্রের বিপ্লব গতি 0 এবং 2000 rpm এর মধ্যে নিয়ন্ত্রিত হতে পারে। এইচএসসিসিসি সিস্টেমটি একটি এইচপিএলসি পাম্প (ফার্মা-টেক রিসার্চ, বাল্টিমোর, মেরিল্যান্ড, ইউএসএ), একটি মডেল 450 ইউভি ডিটেক্টর (অলটেক, ইউএসএ), একটি মডেল এল 120 ​​ই ফ্ল্যাট-বেড রেকর্ডার (লিনসিস ইনক।, প্রিন্সটন জেসিটি,) দিয়ে সজ্জিত ছিল। USA), একটি ভগ্নাংশ সংগ্রাহক (Advantec MFS Inc., USA) এবং একটি 10-mL নমুনা লুপ সহ একটি নমুনা ইনজেকশন ভালভ।

ইথাইল অ্যাসিটেট-ইথানল-জলের একটি মিশ্রণ (5:0.5:4.5, v/v/v) একটি বিভাজক ফানেলে জোরালোভাবে ঝাঁকানো হয়েছিল এবং ঘরের তাপমাত্রায় দাঁড়ানো এবং আলাদা হতে দেওয়া হয়েছিল। দুটি পর্যায় ভারসাম্য পৌঁছানোর পরে এইচএসসিসিসিতে ব্যবহার করা হয়েছিল। সম্পূর্ণ কুণ্ডলীকৃত কলামটি প্রথমে উপরের স্তর দিয়ে পূর্ণ করা হয়েছিল, যা স্থির পর্যায় হিসাবে কাজ করে। নীচের স্তরটি (মোবাইল ফেজ) তারপরে 1.5 মিলি/মিনিট প্রবাহের হারে কলামের হেড-এন্ডে পাম্প করা হয়েছিল। ঘূর্ণন গতি 1050 rpm এ সেট করা হয়েছিল৷ একটি নমুনা (প্রতিবার প্রায় 230 মিলিগ্রাম)- ইথাইল অ্যাসিটেট-ইথানল-জল (5:0.5:4.5, v/v/v) এর মিশ্রণের 8 মিলি মিলিমিটারে দ্রবীভূত করা হয়েছিল সিস্টেমটি হাইড্রোডাইনামিকে পৌঁছানোর পরে ইনজেকশন ভালভের মধ্যে লোড করা হয়েছিল ভারসাম্য এই বাইফেসিক দ্রাবক সিস্টেমটি পার্টিশন সহগ (K) এর উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছিল, যা ছিল 0.87, 1.11 এবং 1.32অ্যাক্টিওসাইড, যথাক্রমে আইসোঅ্যাকটিওসাইড এবং 20 টি এসিটাইল্যাক্টোসাইড। K মান হল HPLC (চিত্র 2) দ্বারা নির্ধারিত একই যৌগের উপরের এবং নীচের স্তরগুলিতে ঘনত্বের অনুপাত। কলামের আউটলেট থেকে নির্গত 254 এনএম-এ একটি UV ডিটেক্টর দ্বারা ক্রমাগত নিরীক্ষণ করা হয়েছিল এবং প্রতিটি টিউবের জন্য 4 মিনিটে একটি ভগ্নাংশ সংগ্রাহক সেট করে পরীক্ষা টিউবে সংগ্রহ করা হয়েছিল।

2.4। এলসি শর্ত

স্ট্যাটিক অটো-স্যাম্পলার এবং একটি ফটোডিওড অ্যারে ডিটেক্টর (ডিএডি) পিএইচজি বিশ্লেষণের জন্য এন-বুটানল নির্যাস ব্যবহার করা হয়েছিলCistanche deserticolaএবং HSCCC বিচ্ছেদ থেকে সংগৃহীত ভগ্নাংশ। বিচ্ছেদটি একটি ফেনোমেনেক্স ওডিএস-সি 18 কলামে (250 × 4.6 মিমি, 5 এলএম) একটি C18 গার্ড কলাম সহ বাহিত হয়েছিল। বাইনারি মোবাইল ফেজটিতে অ্যাসিটোনিট্রিল (দ্রাবক A) এবং 2 শতাংশ অ্যাসিটিক অ্যাসিড (দ্রাবক বি) ধারণকারী জল রয়েছে। সমস্ত দ্রাবক একটি মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল

{{0}}.45 lm ফিল্টার ব্যবহারের আগে। 25 মিনিটের মোট রান টাইমের জন্য ফ্লো-রেট 1।{6}} মিলি/মিনিট এ স্থির রাখা হয়েছিল। সিস্টেমটি একটি গ্রেডিয়েন্ট প্রোগ্রামের সাথে চালানো হয়েছিল: 0–20 মিনিট: 90 শতাংশ বি থেকে 60 শতাংশ বি; 20-22 মিনিট: 60 শতাংশ বি থেকে 0 শতাংশ বি; এবং 22– 25 মিনিট, 0 শতাংশ বি থেকে 90 শতাংশ বি। নমুনা ইনজেকশনের পরিমাণ ছিল 10 এলএল। একটি ডিএডি ডিটেক্টর দ্বারা আগ্রহের শিখরগুলি 320 এনএম এ পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।

2.5। LC-ESI-MS পরীক্ষা-নিরীক্ষা

LC-MS পরীক্ষাগুলি একটি ফিনিগান LCQ DECA আয়ন ট্র্যাপ ভর স্পেকট্রোমিটার (থার্মো ফিনিগান, সান জোসে, CA, USA) ব্যবহার করে একটি ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন (ESI) উত্স দিয়ে সজ্জিত করা হয়েছিল। নমুনাগুলি একই ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থায় বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ডেটা সংগ্রহের জন্য একটি নেতিবাচক মডেল ব্যবহার করা হয়েছিল। খাপ গ্যাস এবং সহায়ক প্রবাহের হার যথাক্রমে 96 এবং 7 (নিচ্ছাকৃত ইউনিট) এ সেট করা হয়েছিল। কৈশিক ভোল্টেজ 29 V এ সেট করা হয়েছিল এবং এর তাপমাত্রা 350 ডিগ্রিতে নিয়ন্ত্রিত হয়েছিল। প্রবেশদ্বার লেন্স ভোল্টেজ 40 V এ স্থির করা হয়েছিল এবং মাল্টিপোল RF প্রশস্ততা 540 V এ সেট করা হয়েছিল। ESI সুই ভোল্টেজ 4.5 kV এ নিয়ন্ত্রিত হয়েছিল। টিউব লেন্স অফসেট 16 V, মাল্টিপোল লেন্স 1 অফসেট 8.20 V এবং মাল্টিপোল লেন্স 2 অফসেট ছিল 10.5 V। আয়ন সনাক্তকরণের জন্য ইলেকট্রন মাল্টিপ্লায়ার ভোল্টেজ 980 V এ সেট করা হয়েছিল।

2.6। সনাক্তকরণের জন্য NMR

NMR স্পেকট্রা একটি Bruker Avance-600 স্পেকট্রোমিটারে রেকর্ড করা হয়েছিল (Bruker BioSpin Ltd., Milton, Canada)। শুধুমাত্র যৌগ 2 এবং 5 (কোন মান উপলব্ধ নেই) NMR পরীক্ষা-নিরীক্ষার অধীন ছিল। নমুনা CD3OD এ দ্রবীভূত করা হয়েছিল।

3। ফলাফল এবং আলোচনা

3.1। HSCCC বিচ্ছেদ

এর এন-বুটানল নির্যাসCistanche deserticolaএবং HSCCC দ্বারা বিচ্ছিন্ন প্রতিটি শিখরের সাথে সম্পর্কিত ভগ্নাংশগুলি HPLC দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, এবং ফলাফলগুলি চিত্র 2-এ দেওয়া হয়েছে। পাঁচটি প্রধান যৌগ (চূড়া 1-5) পৃথক করা হয়েছিল এবং 9.2 মিনিট, 10.7 মিনিট, 12.3 মিনিটে ধরে রাখার সময়ের সাথে সনাক্ত করা হয়েছিল ,

যথাক্রমে 13.3 মিনিট এবং 16.2 মিনিট।

একটি সফল HSCCC বিচ্ছেদ মূলত একটি উপযুক্ত দুই-ফেজ দ্রাবক সিস্টেমের উপর নির্ভর করে যা পছন্দসই যৌগের জন্য 1 এর কাছাকাছি একটি আদর্শ পার্টিশন সহগ (K) প্রদান করে। এই ধরনের বাইফেসিক সিস্টেমের একটি যুক্তিসঙ্গতভাবে সংক্ষিপ্ত নিষ্পত্তির সময় পাওয়া উচিত (চেন, গেমস, এবং জোন্স, 2003; ফুকো এবং শেভোলট, 1998; ওকা, ওকা, এবং ইটো, 1991)। আমাদের পরীক্ষায়, আমরা লক্ষ্য যৌগগুলির দ্রবণীয়তা অনুসারে দ্রাবক সিস্টেমের চারটি সিরিজ নির্বাচন করেছিCistanche deserticola. এইচপিএলসি প্রতিটি পর্যায়ে ঘনত্ব পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল, যেখান থেকে লক্ষ্য যৌগগুলির কে মানগুলি গণনা করা হয়েছিল। দুটি সিস্টেম, ইথাইল অ্যাসিটেট- এন-বুটানল-ইথানল-ওয়াটার (4:0.6:0.6:5, v/v/v/v) এবং ইথাইল অ্যাসিটেট-জল (1: 1, v/v), আলাদা করার জন্য আগে HSCCC-এ ব্যবহার করা হয়েছেঅ্যাক্টিওসাইডএবং 20-সি থেকে অ্যাসিটিল্যাক্টোসাইড। সালসা,অ্যাক্টিওসাইড, এবং পি. সাইলিয়াম থেকে আইসোঅ্যাকটিওসাইড, যথাক্রমে (লেই এট আল।, 2001; লি এট আল।, 2005)। যদিও প্রথম সিস্টেমের তুলনামূলকভাবে সংক্ষিপ্ত নিষ্পত্তির সময় ছিল, তবে পিএইচজিগুলিকে আলাদা করার ক্ষেত্রে এটির কার্যকারিতা খারাপ ছিল।Cistanche deserticola, যৌগ 1 এবং 2 এর জন্য কম K মান এবং যৌগ 3-5 এর জন্য উচ্চ K মানগুলির কারণে। দ্বিতীয় সিস্টেমে 1-4 যৌগগুলির জন্য K মানগুলি খুব কম ছিল, কিন্তু যৌগ 5 (সারণী 1) এর জন্য খুব বেশি। ইথাইল অ্যাসিটেট-ইথানল-জল (5:{{10}}.5:4.5, v/v/v) সমন্বিত একটি পরিবর্তিত সিস্টেম 0.87, 1.11, 3-5 যৌগগুলির জন্য একটি আদর্শ K মান দিয়েছে। এবং 1.32, যথাক্রমে, এবং এই তিনটি যৌগ (চিত্র 3A এবং B) এর ভাল পৃথকীকরণের ফলে। এই সিস্টেম, তবে উত্পাদিত

যৌগিক 1 এবং 2-এর জন্য একটি K মান খুবই ছোট, যার ফলে দুটি যৌগ দ্রাবক সামনের কাছাকাছি কো-ইলুট হয়ে যায় (চিত্র 3A-তে ভগ্নাংশ 1)। সিস্টেমে আরও পরিবর্তন v) যৌগিক 1 এবং 2-এর জন্য K মানগুলিকে যথাক্রমে 0.52 এবং 0.92-এ উন্নীত করেছে, এবং সম্পূর্ণ পৃথকীকরণের দিকে পরিচালিত করেছে (চিত্র 3C)। চিত্র 3A একটি HSCCC বিচ্ছেদ দেখায় n-butanol নির্যাস 230 মিলিগ্রাম ধারণকারী নমুনাCistanche deserticolaইথাইল অ্যাসিটেট-ইথানল-জল ব্যবহার করে (5:0.5:4.5, v/v/v)। যে ভগ্নাংশগুলিকে HPLC দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল যে শুধুমাত্র যৌগগুলি 3, 4, বা 5 ধারণ করা হয়েছিল তাদের আলাদাভাবে একত্রিত করা হয়েছিল এবং 3 এবং 4 যৌগগুলিকে পুল করা হয়েছিল, ফ্রিজ-শুকানো হয়েছিল এবং আরও আলাদা করার জন্য HSCCC-এর কাছে পুনরায় সাবজেক্ট করা হয়েছিল (চিত্র 3B)। উপরে বর্ণিত দ্বি-পদক্ষেপের HSCCC বিচ্ছেদ 1412 mg n-butanol নির্যাস থেকে মোট 14.6 mg, 30.1 mg, এবং 25.2 mg যৌগ 3-5 পেয়েছে। চিত্র 3C ইথাইল অ্যাসিটেট–এন-বুটানল–ইথানল-জল (0.5:0.5) ব্যবহার করে যৌগ 1 এবং 2 (প্রথম বিভাজনে ভগ্নাংশ 1) ধারণকারী নমুনার এইচএসসিসিসি বিচ্ছেদ দেখায় :0.1:1, v/v/ v/v)। মোট 28.5 এবং 18.4 মিলিগ্রাম যৌগ 1 এবং 2 প্রাপ্ত হয়েছিল। ফ্রিজ-শুকনো যৌগ 1-5 এর ক্রোমাটোগ্রাফিক বিশুদ্ধতা ছিল 92.5 শতাংশের বেশি, যা সরাসরি LC-ESI-MS এবং NMR বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল।

3.2। LC-ESI-MS এবং NMR দ্বারা কাঠামোগত শনাক্তকরণ

যৌগ 1, 3, এবং 4-এর অস্থায়ী শনাক্তকরণ প্রামাণিক ইচিনাকোসাইডগুলির সাথে সমন্বিত ধরে রাখার সময় এবং UV বর্ণালী ডেটা দ্বারা অর্জন করা হয়েছিল,অ্যাক্টিওসাইড, এবং isoacteoside (চিত্র 2)। যৌগ 2 এবং 5 অজানা ছিল, তবে, সমস্ত পাঁচটি যৌগের UV বর্ণালী অত্যন্ত একই রকম ছিল, যা অনুরূপ কাঠামোগত বৈশিষ্ট্যগুলি নির্দেশ করে।

এই পাঁচটি যৌগের গঠন আরও তদন্ত করার জন্য, LC-ESI-MSn পরীক্ষা-নিরীক্ষার চেষ্টা করা হয়েছিল এবং ফলাফলগুলি চিত্র 4 এবং সারণী 2-এ দেখানো হয়েছে। চিত্র 2-এর শিখর (1-5) সম্পর্কিত যৌগগুলি তীব্র ডিপ্রোটোনেটেড আণবিক আয়ন প্রদর্শন করেছে [MH] — m/z 785, 799, 623, 623, এবং 665 যথাক্রমে, নেতিবাচক মোডে। ডাইমেরিক [2এম এইচ]— চিত্র 2-এ 1-4 শিখরগুলির জন্যও আয়নগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল৷ এগুলি 1-5 শিখরগুলির আণবিক ওজনকে যথাক্রমে 786, 800, 624, 624 এবং 666 নিশ্চিত করেছে৷ LC-MSN ডেটা (টেবিল 2) পাঁচটি PhG-এর জন্য অত্যন্ত দরকারী কাঠামোগত তথ্য প্রদান করেছে, যেমন নিরপেক্ষ ক্ষতি

একটি পরীক্ষামূলক পদ্ধতি: প্রতিটি নমুনার প্রায় 1 মিলিগ্রাম একটি 10 ​​মিলি টেস্ট টিউবে ওজন করা হয়েছিল যার মধ্যে প্রাক-সমিত দুই-ফেজ দ্রাবক সিস্টেমের প্রতিটি পর্যায়ে 1 মিলি যুক্ত করা হয়েছিল। টেস্টটিউবটি 1 মিনিটের জন্য জোরে ঝাঁকানো ছিল এবং এটি সম্পূর্ণ আলাদা না হওয়া পর্যন্ত দাঁড়াতে দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি স্তরের 100 lL একটি অ্যালিকোট বের করা হয়েছিল এবং শূন্যস্থানে শুষ্কতার জন্য আলাদাভাবে বাষ্পীভূত করা হয়েছিল<40 °c.="" the="" residue="" was="" dissolved="" in="" 10="" ll="" methanol="" and="" analyzed="" by="" hplc="" for="" determining="" the="" partition="" coefficient="" (k)="" of="" compounds="" 1–5.="" the="" k="" value="" was="" expressed="" as="" the="" peak="" area="" of="" the="" target="" compound="" in="" the="" upper="" phase="" divided="" by="" that="" in="" the="" lower="">

ক্যাফেওয়েল ময়েটি (162), গ্লুকোজ মোয়েটি (162), র্যামনোজ মোয়েটি (146), একটি CH2 র্যাডিক্যাল (14), এবং COCH2 গ্রুপ (42)।

পিক 1-এর LC-ESI-MS চিত্র 4A-এ দেখানো হয়েছে। ডিপ্রোটোনেটেড মলিকুলার আয়ন [MH] — m/z 785 এ উচ্চ প্রাচুর্য এবং একটি dimeric deprotonated আণবিক

আয়ন [2M H]— m/z 1571-এ নেতিবাচক মোডে দেখা গেছে, যা 786 এর আণবিক ওজনের ইঙ্গিত দেয়, যা ইচিনাকোসাইডের সমান ছিল। m/z 785 আয়নগুলির LC-MS2 পরীক্ষায় আরও তদন্তে m/z 623 এ একটি প্রধান কন্যা আয়ন পাওয়া গেছে (চিত্র 4B) সরাসরি m/z 785 থেকে ক্যাফেওয়েল ময়েটি বা হেক্সোজ মোয়েটি হারিয়ে যাওয়ার ফলে [এম] 162 হি]—। m/z 623-এর LC–MS3 স্পেকট্রাম m/z 477 এবং 461 এ দুটি প্রধান আয়ন এবং m/z 315 এবং 179 এ দুটি ছোট আয়ন প্রদর্শন করেছে (চিত্র 3C, টেবিল 2)। m/z 623 এবং ফ্র্যাগমেন্ট আয়ন m/z 477 এবং 461 এর মধ্যে ভরের পার্থক্য ছিল যথাক্রমে 146 এবং 162, একটি র্যামনোজ ইউনিট এবং একটি গ্লুকোজ ময়েটি বা একটি ক্যাফ-ফিল ময়েটি [M 162 H] — হারানোর সাথে সম্পর্কিত। m/z 623 আয়নগুলিও m/z 315 আয়ন তৈরি করতে একটি ক্যাফয়েল ময়তা এবং একটি র্যামনোজ মোয়েটি হারিয়েছে। m/z 179 এ আয়নটি ক্যাফেওয়েল ময়েটির ক্লিভেজ থেকে উত্পাদিত হয়েছিল, ক্যাফেওয়েল ময়েটির অংশে নেতিবাচক চার্জ অবশিষ্ট ছিল। খাঁটি ইচিনাকোসাইডের উপর LC-ESI-MSN পরীক্ষা একই বিভক্তকরণ প্যাটার্ন দেখিয়েছে। পিক 1 তাই ইচিনাকোসাইড বলে নিশ্চিত করা হয়েছিল।

পিক 2-এর জন্য, LC–ESI-MS m/z 799 কে ডিপ্রটোনেটেড আণবিক আয়ন [MH]— এবং m/z 1599 কে এর ডাইমেরিক আয়ন হিসাবে দেখিয়েছে, যা 800 এর আণবিক ভরের ইঙ্গিত দেয়। MS2 পরীক্ষার সময়, m/z 799 আয়ন তিনটি কন্যা গঠন করে

m/z 637, 623, এবং 475 এ আয়ন (সারণী 1)। m/z 637-এ আয়নটি সরাসরি m/z 799-এর মূল আয়ন থেকে আবার ক্যাফেওয়েল [M-162—H]— বা গ্লুকোজ আংশিক [M—162—H]—-এর নিরপেক্ষ ক্ষতির কারণে উৎপন্ন হয়েছিল। m/z 623 এ আয়ন একটি CH2 র্যাডিকেলের ক্ষতির ফলে। m/z 475-এ আয়নটি গঠিত হয়েছিল ক্যাফেওয়েল ময়েটি [M 162 H]— এবং প্যারেন্ট আয়ন থেকে গ্লুকোজ ময়তা উভয়ের নিরপেক্ষ ক্ষতি থেকে। m/z 637-এ MS3 পরীক্ষাটি m/z 619, 491, এবং 475 এ তিনটি আয়ন তৈরি করেছে, যা যথাক্রমে একটি জল, একটি র্যামনোজ ইউনিট, এবং একটি গ্লুকোজ মোয়েটির ক্ষতির সাথে সম্পর্কিত। MS3 গবেষণায় m/z 623 কন্যা আয়ন m/z 461 এবং 315 উৎপন্ন করেছে, যা উপরে আলোচিত ইচিনাকোসাইডের মতো একই ফ্র্যাগমেন্টেশন পথ অনুসরণ করেছে। LC- ESI-MSN ডেটা পিক 2-এর জন্য একটি অস্থায়ী শনাক্তকরণ সমর্থন করেসিস্টানোসাইড এ.

এলসি-ইএসআই-এমএস পরীক্ষাগুলি শিখরগুলির জন্যও পরিচালিত হয়েছিল

3 এবং 4 (চিত্র 2-এ tR 12.49 এবং 13.46 মিনিট)। উভয় শিখরই একই [MH]- আয়ন m/z 623 এবং dimer m/z 1247 এ ঋণাত্মক মোডে (সারণী 1), নির্দেশ করে যে তারা সম্ভবত একই আণবিক ওজন সহ আইসোমার।

624, একইঅ্যাক্টিওসাইডএবং আইসোঅ্যাকটিওসাইড। [MH]— আয়নগুলির MS2 বর্ণালীও m/z 461-এর একই কন্যা আয়ন দেখায়, যা প্যারেন্ট আয়ন m/z 623 (টেবিল 1) থেকে ক্যাফেওয়েল ময়েটি হারানোর ইঙ্গিত দেয়। দুটি যৌগের জন্য অনুরূপ MS3 স্পেকট্রা প্রাপ্ত হয়েছিল। পিক 3-এর জন্য, m/z 461-এ আয়নের MS3 স্পেকট্রাম m/z 315, 161, এবং 135-এ তিনটি আয়ন তৈরি করেছে। m/z 315 রমনোজ হারানোর পরে গঠিত হয়েছে যেমনটি আগে আলোচনা করা হয়েছে। আয়ন m/z 161 ক্যাফেওয়েল ময়েটির ক্লিভেজ থেকে উত্পাদিত হয়েছিল, তারপরে আরও একটি জলের ক্ষতি হয়েছিল; চার্জটি ক্যাফেয়েল মোয়েটির অংশে রয়ে গেছে। m/z 135 [agly-cone 18 H]-এ আয়ন C1 অবস্থানে গ্লাইকোসিডিক বন্ডের ক্লিভেজ থেকে একটি জলের অতিরিক্ত ক্ষতির সাথে উদ্ভূত হয়, চার্জটি অ্যাগ্লাইকোন মোয়ায়েটির অংশে থাকে। পিক 4 এর MS3 স্পেকট্রাম m/z 135-এ অনুপস্থিত আয়ন ব্যতীত পিক 3-এর মতো একই ফ্র্যাগমেন্টেশন পথ অনুসরণ করে। এই দুটি যৌগের আণবিক আয়ন এবং বিভক্তকরণের ধরণগুলি সাহিত্যের ডেটার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।অ্যাক্টিওসাইডএবং আইসোঅ্যাকটিওসাইড (ওয়াং এট আল।, 2000), যদিও একটি অতিরিক্ত আয়ন m/z 153 পাওয়া গেছে এবং

ওয়াং এট আল দ্বারা [এগ্লাইকোন এইচ] হিসাবে নির্ধারিত। (ওয়াং এট আল।, 2000)। আমাদের পরীক্ষায় m/z 135 দেওয়ার জন্য এই আয়নটি অস্থির এবং জল হারিয়ে যেতে পারে। MS ডেটার উপর ভিত্তি করে এবং মানগুলির সাথে শিখর 3 এবং 4 এর সামঞ্জস্যপূর্ণ ধরে রাখার সময়, তাই তাদের হিসাবে চিহ্নিত করা হয়অ্যাক্টিওসাইডএবং আইসোঅ্যাকটিওসাইড, যথাক্রমে।

পিক 5-এর LC-ESI-MS ডেটা সারণি 2-এ দেখানো হয়েছে। একটি ডিপ্রোটোনেটেড আণবিক আয়ন [MH]— (m/z 665) ছিল একমাত্র আয়ন যা নেতিবাচক মোডে পাওয়া যায়, যার আণবিক ভর 666 বোঝায়। তিন কন্যা আয়ন MS2 পরীক্ষায় m/z 623, 503, এবং 461 এ পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল (সারণী 2)। m/z 623 এবং 503-এ কন্যা আয়নগুলি যথাক্রমে একটি COCH2 গ্রুপ এবং একটি ক্যাফেওয়েল ময়েটি হারানোর মাধ্যমে পিতামাতার আয়ন থেকে সরাসরি গঠিত হয়েছিল। m/z 461-এ আয়নটি এসেছে ক্যাফেওয়েল এবং COCH2 moiety [M 162 42 H]— উভয়েরই ক্ষয় থেকে এসেছে। MS পরীক্ষায়, m/z 623 m/z 461 উৎপন্ন করেছে, এবং m/z 503 m/z 485, 461, এবং 315-এ তিনটি আয়ন দিয়েছে। কন্যা আয়ন m/z 461-এর MS3 স্পেকট্রাম 443-এ দুটি আয়ন দিয়েছে এবং 315. এই সমীক্ষায় রিপোর্ট করা অন্যান্য যৌগের সাথে এবং রিপোর্ট করা অন্যান্য যৌগগুলির সাথে পিক 5 এর LC- MSN ফ্র্যাগমেন্টেশন প্যাটার্ন তুলনা করে আমরা এই সিদ্ধান্তে পৌঁছেছি যে শিখর 5 কাঠামোগতভাবে অত্যন্ত সম্পর্কিত ছিল R3 অবস্থানে COCH3 ইউনিটের পার্থক্যের সাথে অ্যাক্টিওসাইডে। একটি অস্থায়ী পরিচয় তাই শিখর 5-কে 20-অ্যাসিটিল্যাকটিওসাইড (চিত্র 1) হিসাবে দেওয়া হয়েছিল।

দুটি অস্থায়ীভাবে চিহ্নিত যৌগগুলির গঠন, শিখর 2 (সিস্টানোসাইড এ হিসাবে) এবং শিখর 5 (20-এসিটাইল-অ্যাকটিওসাইড হিসাবে) তাদের গঠনগুলি 1H NMR দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। যৌগ 2 এবং 5 এর সমস্ত প্রোটনের রাসায়নিক পরিবর্তন এবং কাপলিং ধ্রুবকগুলি, সারণি 3-তে দেখানো হিসাবে, রিপোর্ট করা NMR ডেটার সাথে মিলে যায়সিস্টানোসাইড এএবং যথাক্রমে 20-অ্যাসিটিল্যাক্টোসাইড (কোবায়াশি এট আল।, 1984, 1987)। 2D NMR পরীক্ষাগুলি (দীর্ঘ-পরিসরের COSY, ROESY, এবং CH পারস্পরিক সম্পর্ক) বর্তমান গবেষণায়ও পরিচালিত হয়েছিল এবং তারা আরও শনাক্তকরণ নিশ্চিত করেছে (ডেটা দেখানো হয়নি)।

phenylethanoidcistanche মধ্যে glycosides

4। উপসংহার

বর্তমান কাগজে, এইচএসসিসিসি সফলভাবে ইচিনাকোসাইডের বিচ্ছিন্নতা এবং বিশুদ্ধকরণের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল,সিস্টানোসাইড এ, অ্যাক্টিওসাইড, আইসোঅ্যাকটিওসাইড, এবং 20-সি. ডেসার্টিকোলার এন-বুটানল নির্যাস থেকে অ্যাসিটিল্যাকটিওসাইড। তাই এটি বায়োঅ্যাকটিভের আধা-প্রস্তুতিমূলক পৃথকীকরণের জন্য একটি প্রমাণিত উপায়। ইতিমধ্যে, Cistanche deserticola-এর পাঁচটি PhG-এর কাঠামো LC-ESI-MSN-এর মাধ্যমে তদন্ত করা হয়েছে; পিএইচজিগুলির কিছু বৈশিষ্ট্যযুক্ত বৈশিষ্ট্য পাওয়া গেছে, যা আমাদের কাঠামোর কার্যকরী গোষ্ঠীগুলি নির্ধারণ করতে দেয়। LC-ESI-MSN পদ্ধতি তাই দ্রুত সনাক্তকরণের জন্য একটি শক্তিশালী হাতিয়ারphenylethanoidsএবং তাদের গ্লাইকোসাইডCistanche deserticolaনির্যাস, বিশেষ করে যখন NMR ডেটা দ্বারা প্রমাণিত হয়।

স্বীকৃতি

এনএমআর পরীক্ষায় সহায়তার জন্য লেখকরা নিউক্লিয়ার ম্যাগনেটিক রেজোন্যান্স সেন্টার, ইউনিভার্সিটি অফ গেল্ফ, অন্টারিও, কানাডার জুন গুকে ধন্যবাদ জানাতে চাই। এই প্রকল্পটি আংশিকভাবে জিলিন প্রদেশ, চীন (নং 20060904) থেকে তহবিল দ্বারা সমর্থিত ছিল।

তথ্যসূত্র

চেন, এলজে, গেমস, ডিই, এবং জোন্স, জে. (2003)। উচ্চ-গতির কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা অরক্সিলাম ইন্ডিকামের বীজ থেকে চারটি ফ্ল্যাভোনয়েড উপাদানের বিচ্ছিন্নতা এবং সনাক্তকরণ। জার্নাল অফ ক্রোমাটোগ্রাফি এ, 988, 95-105।

চেং, XY, Wei, T., Guo, B., Ni, W., & Liu, CZ (2005)।Cistanche deserticolaসেল সাসপেনশন সংস্কৃতি:ফেনাইলেথানয়েডglycosides জৈব সংশ্লেষণ এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ. প্রক্রিয়া বায়োকেমিস্ট্রি, 40, 3119– 3124।

Foucault, AP, & Chevolot, L. (1998)। কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি: ইন্সট্রুমেন্টেশন, দ্রাবক নির্বাচন, এবং প্রাকৃতিক পণ্য শোধনে সাম্প্রতিক কিছু প্রয়োগ। জার্নাল অফ ক্রোমাটোগ্রাফি এ, 808, 3-22।

গ্রস, G.-A., Lahloub, MF, Anklin, C., Schulten, H.-R., & Sticher, O. (1988)। Teucrioside, Teucrium Chamaedrys থেকে একটি phenylpropanoid গ্লাইকোসাইড। ফাইটোকেমিস্ট্রি, 27, 1459-1463।

He, ZD, Lau, KM, Xu, HX, Li, PC, & But, PPH (2000)।

এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপphenylethanoidব্র্যান্ডিসিয়া সুযোগ থেকে গ্লাইকোসাইড। জার্নাল অফ এথনোফার্মাকোলজি, 71, 483-486।

Kobayashi, H., Karasawa, H., & Miyase, T. (1984)। Cistanchis Herba এর উপাদানের উপর অধ্যয়ন. III. নতুন ফিনাইলপ্রোপ্যানয়েড গ্লাইকোসাইডের বিচ্ছিন্নতা এবং গঠন,সিস্টানোসাইড এএবং বি. কেমিক্যাল অ্যান্ড ফার্মাসিউটিক্যাল বুলেটিন, 32, 3009-3014।

Kobayashi, H., Oguchi, H., Takizawa, N., Miyase, T., Ueno, A., Usmanghani, K., et al. (1987)। নতুনphenylethanoidথেকে গ্লাইকোসাইডসিস্তানচেtubulosa (Schrenk) হুক। এফআই কেমিক্যাল অ্যান্ড ফার্মাসিউটিক্যাল বুলেটিন, 35, 3309–3314।

Lei, L., Yang, FQ, Zhang, TY, Tu, PF, Wu, LJ, & Ito, Y. (2001)।

এর প্রস্তুতিমূলক বিচ্ছিন্নতা এবং পরিশোধনঅ্যাক্টিওসাইডএবং কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা Cistanches সালসা (CA Mey) G. Beck থেকে 2'-অ্যাসিটাইল অ্যাক্টিওসাইড। জার্নাল অফ ক্রোমাটোগ্রাফি এ, 912, 181-185।

Li, L., Tsao, R., Liu, ZQ, Liu, SY, Yang, R., Young, JC, et al. (2005)। এর বিচ্ছিন্নতা এবং পরিশোধনঅ্যাক্টিওসাইডএবং উচ্চ গতির কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা প্লান্টাগো সাইলিয়াম এল থেকে আইসোঅ্যাকটিওসাইড। জার্নাল অফ ক্রোমাটোগ্রাফি এ, 1063, 161–169।

Li, LL, Wang, XW, & Wang, XF (1997)। অ্যান্টিলিপিড পারক্সিডেশন এবং হার্বা সিস্টাঞ্চে গ্লাইকোসাইডের অ্যান্টি-রেডিক্যাল অ্যাকশন। চায়না জার্নাল অফ চাইনিজ মেটেরিয়া মেডিকা, 22, 364–367।

Li, J., Wang, PF, Zheng, RL, Liu, ZM, & Jia, ZJ (1993)। ভিট্রোতে অক্সিডেটিভ হেমোলাইসিসের বিরুদ্ধে পেডিকুলারিস থেকে ফিনাইলপ্রোপ্যানয়েড গ্লাইকোসাইডের সুরক্ষা। প্লান্টা মেডিকা, 59, 315-317।

লু, এমসি (1998)। এর উপশমকারী প্রভাব উপর অধ্যয়নCistanche deserticolaজার্নাল অফ এথনোফার্মাকোলজি, 59, 161-165।

নিশিমুরা, এইচ., সাসাকি, এইচ., ইনাগাকি, এন., চিন, এম., এবং মিৎসুহাশি, এইচ. (1991)। Stachys szeboldzz থেকে নয়টি ফিনিথাইল অ্যালকোহল গ্লাইকোসাইড। ফাইটোকেমিস্ট্রি, 30, 965-969।

Oka, F., Oka, H., & Ito, Y. (1991)। উচ্চ-গতির কাউন্টার-কারেন্ট ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য উপযুক্ত দুই-ফেজ দ্রাবক সিস্টেমের জন্য একটি পদ্ধতিগত অনুসন্ধান। ক্রোমাটোগ্রাফি জার্নাল, 538, 99-108।

Ravn, H., Nishibe, S., Sasahara, M., & Li, X. (1990)। প্লান্টাগো এশিয়াটিকা থেকে ফেনোলিক যৌগ। ফাইটোকেমিস্ট্রি, 29, 3627–3631।

Schapoval, EES, Winter de Vargas, MR, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, & Henriques, AT (1998)। Stachytarpheta cayennensis থেকে নির্যাস এবং বিচ্ছিন্ন যৌগের অ্যান্টিইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টিনোসাইসেপটিভ কার্যকলাপ। জার্নাল অফ এথনোফার্মাকোলজি, 60, 53-59। শোয়ামা, ওয়াই., মাতসুমোটো, এম., এবং নিশিওকা, আই. (1987)। Rehmannia glutinosa Var এর রোগাক্রান্ত শিকড় থেকে ফেনোলিক গ্লাইকোসাইড। পুরপুরিয়া। ফাইটোকেমিস্ট্রি, 26, 983-986।

Wang, XW, Jiang, XY, Wu, LY, & Wang, XF (2001)। এর গ্লাইকোসাইডের স্ক্যাভেঞ্জিং প্রভাবCistanche deserticolaফ্রি র্যাডিকেল এবং ভিট্রোতে OH-প্ররোচিত DNA ক্ষতির বিরুদ্ধে এর সুরক্ষার উপর। চাইনিজ ফার্মাকোলজির জার্নাল, 36, 29-31।

Wang, YM, Zhang, SJ, Luo, GA, Hu, YN, Hu, JP, Liu, L., Zhu,

Y., & Wang, HJ (2000)। বিশ্লেষণphenylethanoidLC/ESI-MS/MS দ্বারা ভেষজ Cistanchis এর নির্যাস মধ্যে glycosides. অ্যাক্টা ফার্মাসিউটিকা সিনিকা, 35, 839-842।

Wong, C.-C., Li, H.-B., Cheng, K.-W., & Chen, F. (2006)। 30টি চীনা ঔষধি গাছের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্রিয়াকলাপের একটি পদ্ধতিগত জরিপ ফেরিক হ্রাসকারী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পাওয়ার অ্যাস ব্যবহার করে। খাদ্য রসায়ন, 97, 705-711। Xie, JH, & Wu, CF (1993)। এর ইথানোলিক নির্যাসের প্রভাবCistanche deserticolaইঁদুরে মনোমাইন নিউরোট্রান্সমিটারের বিষয়বস্তুতে

মস্তিষ্ক চীনা ঐতিহ্যগত এবং ভেষজ ওষুধ, 24, 417-419।

Xiong, Q., Hase, K., Tezuka, Y., Tani, T., Namba, T., & Kadota, S. (1998)। এর হেপাটোপ্রোটেকটিভ কার্যকলাপphenylethanoidsথেকেCistanche deserticola. প্লান্টা মেডিকা, 64, 120-125।

Xiong, QB, Kadota, S., Tani, T., & Namba, T. (1996)। থেকে ফেনাইলেথানয়েডের অ্যান্টিঅক্সিডেটিভ প্রভাবCistanche deserticola. জৈবিক ও ফার্মাসিউটিক্যাল বুলেটিন, 19, 1580-1585।

Zong, G., He, W., Wu, GL, & Chen, LH (1996)। মধ্যে তুলনাCistanche deserticolaওয়াইসি মা ওসিস্তানচেটিউবুলার (Schenk) কিছু ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যকলাপের উপর Wight. জার্নাল অফ ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন, 21, 436-438।