সিস্তানচেস হারবা থেকে কাঁচা পণ্য এবং ওয়াইন স্টিম-প্রক্রিয়াজাত পণ্যের গঠন এবং ঔষধের কার্যকারিতার পার্থক্য

বিমূর্ত:

উদ্দেশ্যপ্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে রাউকংগ্রং (সিস্তানচেস হারবা) এর রাসায়নিক গঠন এবং ঔষধের কার্যকারিতার পরিবর্তনের তুলনা করা, যাতে ওয়াইন দিয়ে স্টুইং করার নীতিটি স্পষ্ট করা যায়।

পদ্ধতি LC-MS প্রয়োগ করা হয়েছিল সিস্তাঞ্চস হার্বার সংকলনের আগে এবং পরে রাসায়নিক সংমিশ্রণের ধরন সনাক্ত করার জন্য, মাল্টিভেরিয়েট পরিসংখ্যান বিশ্লেষণের সাথে মিলিতভাবে ওয়াইন দিয়ে স্টু করার আগে এবং পরে বৈষম্যের উপাদানগুলি খুঁজে বের করার জন্য। হাইড্রোজেনেটেড কর্টিসোনকিডনি ইয়াং ঘাটতির ইঁদুর মডেল দ্বারা কার্যকারিতা পার্থক্য প্রমাণিত হয়েছিল।

ফলাফলথেকে মোট 45টি রাসায়নিক উপাদান চিহ্নিত করা হয়েছেCistanches Herba নমুনা; যৌগগুলি মধ্যে পার্থক্যের জন্য অবদান রাখেCistanches Herba এবং ওয়াইন-stewed Cistanches Herbaহয়echinacoside, verbascoside, isoacteoside এবং tubuloside B; সিস্তানচেস হার্বা থেকে মোট ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড নির্যাস ওয়াইন-স্ট্যুয়েড সিস্তানচেস হারবার তুলনায় কিডনি ইয়াং ঘাটতি সহ ইঁদুরের মডেলের উন্নতিতে আরও ভাল প্রভাব ফেলে। উপসংহার সিস্তানচে এর রচনাটি ওয়াইন দিয়ে পাকানোর পর পরিবর্তিত হয় এবং কিডনি ইয়াং এর ঘাটতির উপর প্রভাব বাড়ানো হয়। Cistanches Herbato ওয়াইন-স্ট্যুড Cistanches Herba থেকে রূপান্তরের উপাদানগুলি সক্রিয় উপাদান হতে পারে যা কিডনিকে শক্তিশালী করে এবং ইয়াংকে সমর্থন করে।

মূল শব্দ: Cistanches Herba; ওয়াইন-স্ট্যুড সিস্টাঞ্চস হারবা;কিডনি ইয়াং ঘাটতি;echinacoside;verbascoside; আইসোঅ্যাকটিওসাইড; টিউবুলসাইড বি

বিক্রয়ের জন্য উচ্চ মানের CISTANCHE হার্ব

Wecistanche এর সহায়ক পরিষেবা

ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

হোয়াটসঅ্যাপ/টেল:+86 15292862950

এটি "জিনসেং" নামে পরিচিত এবং প্রধানত অভ্যন্তরীণ মঙ্গোলিয়া, নিংজিয়া (আজুকি), গানসু (চাংমা), জিনজিয়াং এবং অন্যান্য অঞ্চলে বিতরণ করা হয় [1]। Cistanche প্রকৃতিতে উষ্ণ, স্বাদে মিষ্টি এবং নোনতা এবং কিডনি এবং বড় অন্ত্রের মেরিডিয়ানে প্রবেশ করে। এটি লিভার এবং কিডনিকে পুষ্ট করে, সার ও রক্তের উপকার করে এবং অন্ত্রকে আর্দ্র করে এবং কোষ্ঠকাঠিন্য দূর করে। এটি কিডনি ইয়াং ঘাটতি, পুরুষত্বহীনতা এবং বন্ধ্যাত্ব, কোমর এবং হাঁটুর ব্যথা, পেশী এবং হাড়ের দুর্বলতা, শুষ্ক অন্ত্র এবং কোষ্ঠকাঠিন্যের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে [2]। আধুনিক গবেষণা দেখায় যে সিস্তানচে স্কেল পাতা সহ মাংসল কান্ডে প্রধানত বিভিন্ন রাসায়নিক উপাদান থাকে যেমন ফেনাইলেথানল গ্লাইকোসাইড, সাইক্লোপেন্টেন ইথার টারপেনস এবং তাদের গ্লাইকোসাইড, লিগনান, শর্করা ইত্যাদি।বিরোধী বার্ধক্য,অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট,ডিমেনশিয়া বিরোধী,বিরোধী ক্লান্তি, এবং অন্ত্রকে আর্দ্র করে এবং কোষ্ঠকাঠিন্য থেকে মুক্তি দেয় [4]।

ওয়াইন দিয়ে স্টিউ করার পরে, সিস্তানচে এর কিডনি-টোনিফাইং এবং ইয়াং-বর্ধক প্রভাব উন্নত হয়। প্রক্রিয়াকরণ নীতিটি স্পষ্টভাবে ব্যাখ্যা করা হয়নি। ফ্যান ইয়ানান এট আল। [5-7] ইঁদুরের মলত্যাগ, ইমিউন ফাংশন, আন্ত্রিক নিউরোট্রান্সমিটার এবং প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে সম্পর্কিত জিনের অভিব্যক্তিতে সিস্টানচে-এর প্রভাব অধ্যয়ন করেছেন। দা এট আল। এর প্রক্রিয়াকরণ নীতি ব্যাখ্যা করার জন্য প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে ফেনাইলেথানল গ্লাইকোসাইডের প্রভাব ব্যবহার করে; ঝাং চাও এট আল। [৮] প্রক্রিয়াকরণের নীতি ব্যাখ্যা করার জন্য প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে ফেনাইলেথানল গ্লাইকোসাইডের বিষয়বস্তুর পরিবর্তন ব্যবহার করে; ঝাং শুয়ুন এট আল। [৯] সিস্টানচে প্রক্রিয়াকরণের প্রভাব ব্যাখ্যা করার জন্য প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে বেটাইনের বিষয়বস্তুর পরিবর্তনগুলি ব্যবহার করে। Cistanche প্রক্রিয়াকরণের উপর বিদ্যমান সাহিত্য প্রধানত ফার্মাকোলজির উপর ফোকাস করে, এবং উপাদানগুলির উপর গবেষণাও নির্দিষ্ট উপাদানগুলির বিষয়বস্তুর পরিবর্তনের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে, উপাদানগুলির পার্থক্যগুলির একটি পদ্ধতিগত অধ্যয়নের অভাব রয়েছে। এই পরীক্ষায় তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-ম্যাস স্পেকট্রোমেট্রি (এলসি-এমএস) প্রযুক্তি ব্যবহার করা হয়েছিল সিস্তানচে রাসায়নিক উপাদানগুলি সনাক্ত করতে, কাঁচা সিস্তানচে এবং ওয়াইন-স্ট্যুড পণ্যের মধ্যে পার্থক্য চিহ্নিত করতে এবং এর কার্যকারিতার পার্থক্য অধ্যয়ন করতে মাল্টিভেরিয়েট পরিসংখ্যান বিশ্লেষণের সাথে মিলিত হয়েছিল। হাইড্রোকোর্টিসোন দ্বারা প্ররোচিত কিডনি ইয়াং ঘাটতির ইঁদুরের মডেলের মাধ্যমে কাঁচা সিস্তানচে এবং ওয়াইন-স্ট্যুড পণ্য, যাতে এর উপাদান ভিত্তি ব্যাখ্যা করা যায়কিডনি টোনিফাই এবং ইয়াং প্রচারে সিস্টানচেএবং ওয়াইন-স্ট্যুড সিস্তানচে প্রক্রিয়াকরণের নীতি।

বিক্রয়ের জন্য উচ্চ মানের CISTANCHE হার্ব

1 উপাদান

1.1 যন্ত্র

আলটিমেট 3000 UPLC-LTQ অরবিট্র্যাপ XL ইলেক্ট্রোস্ট্যাটিক ফিল্ড ট্যান্ডেম আয়ন ট্র্যাপ হাই-রেজোলিউশন ভর স্পেকট্রোমিটার (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ইউএসএ), থেরাইও এক্সক্যালিবার ওয়ার্কস্টেশন; BT125D 1/100000 ইলেকট্রনিক ব্যালেন্স (Sartorius Instrument System, Germany); KQ500DE CNC অতিস্বনক ক্লিনার (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); XHF-D হাই-স্পিড ডিসপারসার (Guangzhou Hu Ruiming Instrument Co., Ltd.); মাল্টিস্কান এফসি মাইক্রোপ্লেট রিডার (থার্মো সায়েন্টিফিক); HC-3518 হাই-স্পিড সেন্ট্রিফিউজ (আনহুই ঝোংকে ঝোংজিয়া সায়েন্টিফিক ইনস্ট্রুমেন্ট কো., লিমিটেড); BW-YLS-1B বহুমুখী ইঁদুরের স্বেচ্ছাসেবী কার্যকলাপ রেকর্ডার (Shanghai Ruanlong Technology Development Co., Ltd.)।

1.2 ওষুধ

ভর স্পেকট্রোমেট্রি গ্রেড মিথানল (ফিশার); ভর স্পেকট্রোমেট্রি গ্রেড ফর্মিক অ্যাসিড (ভাংশ ভগ্নাংশ 99%, সিগমা অ্যালড্রিচ); জল (ওয়াটসন পাতিত জল); জিনকুই শেনকি পিলস (বেইজিং টংরেন্ট্যাং টেকনোলজি ডেভেলপমেন্ট কো., লিমিটেড ফার্মাসিউটিক্যাল ফ্যাক্টরি, ব্যাচ নম্বর 1701653); hydrocortisone succinate সোডিয়াম লবণ (Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., ব্যাচ নম্বর 011705067); সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (এসওডি) কিট (ব্যাচ নম্বর 20170115) এবং ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ) কিট (ব্যাচ নম্বর 20170117) নানজিং জিয়ানচেং বায়োটেকনোলজি কোং লিমিটেড থেকে কেনা হয়েছিল; টেস্টোস্টেরন (T) এবং estradiol (E2) নির্ধারণ করা হয়েছিল কিংডাও কেচুয়াং গুণমান পরিদর্শন কেন্দ্রে, এবং ক্রিয়েটিনিন (CREA) এবং রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN) অভ্যন্তরীণ মঙ্গোলিয়া মেডিকেল বিশ্ববিদ্যালয়ের বিশ্লেষণ ও পরীক্ষা কেন্দ্রে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

1.3 প্রাণী

100টি পুরুষ SD ইঁদুর, যার ওজন 180-200 গ্রাম, বেইজিংয়ের হাইডিয়ান জেলার জিংলং এক্সপেরিমেন্টাল অ্যানিমেল ফার্ম থেকে কেনা হয়েছিল, লাইসেন্স নম্বর: SCXK (বেইজিং) 2016-0003৷ এই প্রাণী পরীক্ষাটি বেইজিং ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছে, নীতিশাস্ত্র নম্বর: BUCM-4-2022091301-3095৷

1.4 নমুনা

বেইজিং ইউনিভার্সিটি অফ চাইনিজ মেডিসিনের স্কুল অফ চাইনিজ মেডিসিনের অধ্যাপক লি জিয়াংরি দ্বারা সিস্তানচে মরুভূমির ছয়টি ব্যাচকে প্রামাণিক হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং ওরোবাঞ্চেসি পরিবারের একটি উদ্ভিদ সিস্তানচে ডেজার্টিকোলা ওয়াইসি মা এর স্কেল পাতা সহ শুকনো মাংসল কান্ড থেকে উদ্ভূত হয়েছিল। নমুনাগুলির বিস্তারিত তথ্য সারণি 1 এ দেখানো হয়েছে।

সারণী 1 সিস্টাঞ্চ হার্বা নমুনার তথ্য পত্রক

2 পদ্ধতি

2.1 নমুনা প্রস্তুতি

2.1.1 কাঁচা পণ্যের প্রস্তুতি পরিষ্কার Cistanche deserticola নিন, এটি নরম করুন, এটি পুরু টুকরো করে কেটে নিন এবং শুকিয়ে নিন।

2.1.2 ওয়াইন-স্ট্যুড পণ্যের প্রস্তুতি

100 গ্রাম Cistanche deserticola স্লাইস নিন, 30 মিলি চালের ওয়াইন যোগ করুন, ভালভাবে মেশান এবং ওয়াইন শোষিত না হওয়া পর্যন্ত স্টু করুন। এটিকে 12 ঘন্টার জন্য জলে ভাজুন, এটি বের করে নিন এবং এটিকে কিছুটা ঠান্ডা হতে দিন এবং শুকিয়ে নিন। কাঁচা Cistanche deserticola এবং ওয়াইন-stewed Cistanche deserticola নমুনার জন্য চিত্র 1 দেখুন।

2.2 ওয়াইন স্টুইং আগে এবং পরে Cistanche deserticola উপাদানের পার্থক্য উপর অধ্যয়ন

2.2.1 সমাধানের প্রস্তুতি

প্রায় {{0}}.2 গ্রাম শুষ্ক নমুনা পাউডার নিন (একটি 65-জাল চালনির মধ্য দিয়ে যাওয়া), সঠিকভাবে ওজন করুন, একটি 50 মিলি বাদামী ভলিউমেট্রিক ফ্লাস্কে রাখুন, 50% মিথেনলের 25 মিলিলিটার যোগ করুন জলীয় দ্রবণ, শক্তভাবে সীলমোহর করুন, ভরের ওজন করুন, 30 মিনিটের জন্য ভিজিয়ে রাখুন, 40 মিনিটের জন্য অতিস্বনকভাবে চিকিত্সা করুন (পাওয়ার 250 ওয়াট, ফ্রিকোয়েন্সি 35 kHz), ঠান্ডা করুন, আবার ওজন করুন, হারানো ভর পূরণ করতে 50% মিথানল জলীয় দ্রবণ যোগ করুন, ঝাঁকান ভাল, দাঁড়াতে দিন, 0.22 μm মাইক্রোপোরাস ফিল্টার মেমব্রেনের মাধ্যমে সুপারনাট্যান্টকে ফিল্টার করুন এবং সমাধানটি পেতে একটি বাদামী তরল ফেজ বোতলে ফিল্টার রাখুন।

বিক্রয়ের জন্য উচ্চ মানের CISTANCHE হার্ব

2.2.2 ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা

জলের অ্যাক্যুইটি UPLCTM BEH C18 ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম (100 মিমি × 2.1 মিমি, 1.7 μm), কলামের তাপমাত্রা 35 ডিগ্রি ; নমুনা চেম্বারের তাপমাত্রা 10 ডিগ্রি, নমুনা ইনজেকশন ভলিউম 3 μL, মিথানল (A)-0.1% ফরমিক অ্যাসিড জলীয় দ্রবণ (B) মোবাইল ফেজ হিসাবে, গ্রেডিয়েন্ট ইলুশন: 0-4 মিনিট, 10%{ {13}}% মিথানল; 4-18 মিনিট, 26%-40% মিথানল; 18-24 মিনিট, 40%-100% মিথানল; 24-28 মিনিট, 100% মিথানল। ভলিউম প্রবাহ হার ছিল 0.3 mL/min, এবং সনাক্তকরণ তরঙ্গদৈর্ঘ্য ছিল 330 nm।

2.2.3 ভর স্পেকট্রোমেট্রি শর্ত

ইলেক্ট্রোস্প্রে আয়নাইজেশন সোর্স (ইএসআই) ব্যবহার করা হয়েছিল, নেতিবাচক আয়ন মোড স্ক্যানিং, কৈশিক তাপমাত্রা ছিল 350 ডিগ্রি, শিথ গ্যাসের আয়তনের প্রবাহের হার ছিল 30 আরবি, সহায়ক গ্যাসের ভলিউম প্রবাহের হার ছিল 10 আরবি, স্প্রে ভোল্টেজ ছিল 3

KV, কৈশিক ভোল্টেজ ছিল −35 V, টিউব লেন্সের ভোল্টেজ ছিল −110 V, স্ক্যানিং পরিসীমা ছিল m/z 100-1 000, ডেটা সংগ্রহের ব্যবস্থা ছিল Xcalibur 2.1।

2.2.4 প্রধান উপাদান বিশ্লেষণ (PCA)

সঠিক ভর-ধারণ সময় ডেটা জোড়ার দ্বি-মাত্রিক ম্যাট্রিক্স পাওয়ার পরে, উপকরণ প্যানেল সমস্ত স্বয়ংক্রিয়ভাবে আমদানিকৃত সঠিক ধারণ সময়ের তথ্য প্রদর্শন করবে এবং বর্ধিত পরিসংখ্যান মডিউলের PCA পদ্ধতি বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা হবে।

2.2.5 অর্থোগোনাল আংশিক ন্যূনতম বর্গক্ষেত্র বৈষম্যমূলক বিশ্লেষণ (OPLS-DA) LCMS ভর স্পেকট্রোমেট্রির উচ্চ সংবেদনশীলতার সাথে তরল ক্রোমাটোগ্রাফির উচ্চ বিচ্ছেদকে একত্রিত করে। সংগৃহীত ডেটা বেশ বড়, এবং ডেটা প্রক্রিয়া করার জন্য মাল্টিভেরিয়েট পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ প্রয়োজন। OPLS-DA ডেটাকে দুটি গ্রুপে বিভক্ত করে এবং বিপুল সংখ্যক অর্থোগোনালাইজড স্পেকট্রা পেতে একটি তত্ত্বাবধানে পরিসংখ্যান মডেল ব্যবহার করে, যা নমুনার দুটি গ্রুপের মধ্যে পার্থক্য স্পষ্টভাবে দেখায়। অতিরিক্ত চিত্র S-প্লট বিন্যাসে, প্রতিটি বিন্দু একটি সঠিক ভর ধরে রাখার সময় ডেটা জোড়ার প্রতিনিধিত্ব করে, X-অক্ষ পরিবর্তনশীলকে প্রতিনিধিত্ব করে, ডেটা বিন্দুটি শূন্য বিন্দু থেকে যত দূরে, নমুনা পার্থক্যে বিন্দুটির অবদান তত বেশি ; Y-অক্ষ একই নমুনা গোষ্ঠীর নমুনার মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ককে প্রতিনিধিত্ব করে, শূন্য বিন্দু থেকে সঠিক ভর এবং ধরে রাখার সময় ডেটা জোড়া যতদূর হবে, পারস্পরিক সম্পর্ক তত শক্তিশালী হবে। অতএব, এস-আকৃতির বক্ররেখার উভয় প্রান্তে ভর সঠিক ধরে রাখার সময় ডেটা জোড়া প্রতিটি নমুনা গ্রুপ থেকে সবচেয়ে নির্ভরযোগ্য বৈশিষ্ট্যযুক্ত আয়নগুলিকে উপস্থাপন করে।

বিক্রয়ের জন্য উচ্চ মানের CISTANCHE হার্ব

2.2.6 ভর স্পেকট্রোমেট্রি গঠন বিশ্লেষণ

বৈশিষ্ট্যযুক্ত আয়নগুলি পাওয়ার পর, উপাদানের রচনা এবং যৌগিক মিলগুলি সুনির্দিষ্ট আপেক্ষিক আণবিক ভর গণনা করে এবং বিদ্যমান ডাটাবেস এবং প্রাসঙ্গিক সাহিত্যকে একত্রিত করে ডিফারেনশিয়াল উপাদানগুলি সনাক্ত করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল।

2.3 ওয়াইন দিয়ে স্টুইং করার আগে এবং পরে কার্যকারিতার পার্থক্য নিয়ে অধ্যয়ন করুন

2.3.1 Cistanche deserticola নির্যাস প্রস্তুতি

Cistanche deserticola (ব্যাচ নম্বর 160901) এবং সংশ্লিষ্ট ওয়াইন-স্ট্যুড Cistanche deserticola পাউডার "2.2.1" এর অধীনে শর্ত অনুসারে নিষ্কাশন করা হয়েছিল, অতিস্বনক চিকিত্সার পরে ফিল্টার করা হয়েছিল, দুবার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল, ফিল্টারটি একত্রিত হয়েছিল, ভ্যাকুয়াম পাতন দ্বারা ঘনীভূত হয়েছিল, এবং বিনামূল্যে। শুকনো

2.3.2 প্রাণী পরীক্ষা গ্রুপিং এবং ওষুধ প্রশাসন

চিত্র. 1 সিস্তানচেস হারবা এ এবং ওয়াইন-স্ট্যুড সিস্তাঞ্চেস হারবা বি

(1) গ্রুপিং: ইঁদুরকে পানি এবং খাদ্যের বিনামূল্যে অ্যাক্সেস দেওয়া হয়েছিল। অভিযোজিত খাওয়ানোর 1 সপ্তাহ পরে, তাদের এলোমেলোভাবে 5 টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল (সারণী 2), প্রতিটি গ্রুপে 10 টি ইঁদুর সহ, যথা স্বাভাবিক গ্রুপ, মডেল গ্রুপ, কাঁচা সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা গ্রুপ (PR), ওয়াইন-স্ট্যুড সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা গ্রুপ (PW) , এবং ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ Jinkui Shenqi পিল গ্রুপ (JK)। (২) মডেলিং: সাধারণ গ্রুপ ব্যতীত, বাকি চারটি গ্রুপকে পরপর 14 দিন ধরে 20 মিলিগ্রাম/কেজি ডোজ সহ হাইড্রোকর্টিসোন সোডিয়াম সাকসিনেট ইনজেকশন im দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। সাধারণ গ্রুপকে সাধারণ স্যালাইনের একই ডোজ দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি গ্রুপের ইঁদুরের সাধারণ অবস্থা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল যে তারা ঠান্ডার ভয়, উষ্ণতার জন্য পছন্দ, ঠান্ডা অঙ্গ, পরিষ্কার এবং দীর্ঘ প্রস্রাব, কোঁকড়ানো এবং খিলান পিঠ, নিস্তেজ এবং অগোছালো চুল এবং মানসিক বিষণ্নতার মতো লক্ষণগুলি দেখিয়েছিল কিনা তা নির্ধারণ করতে। একই সময়ে, প্রতিটি গ্রুপের ইঁদুরের শরীরের ওজন, স্বতঃস্ফূর্ত কার্যকলাপের সংখ্যা, খাদ্য গ্রহণ, জল খাওয়া, প্রস্রাব আউটপুট এবং অন্যান্য সূচকগুলি পরিমাপ করা হয়েছিল।

(3) প্রশাসন: ইঁদুরের ডোজ জিনকুই শেনকি পিলস এবং সিস্তানচে ডেজার্টিকোলার ক্লিনিকাল ডোজের উপর ভিত্তি করে গণনা করা হয়েছিল। প্রতিটি Cistanche deserticola গ্রুপের ডোজ কাঁচা ওষুধের পরিপ্রেক্ষিতে 1.80 গ্রাম/কেজি ছিল। নির্দিষ্ট ডোজটি সারণি 2 এ দেখানো হয়েছে। সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা এবং জিনকুই শেনকি পিলের প্রতিটি নির্যাস ডিওনাইজড জলের সাথে একটি নির্দিষ্ট ঘনত্বের সমাধানে প্রস্তুত করা হয়েছিল। দ্রবণটি পরপর 30 দিনের জন্য 10 মিলি/কেজি পরিমাণের সাথে প্রতিদিন ইন্ট্রাগাস্ট্রিকভাবে পরিচালিত হয়েছিল। স্বাভাবিক গোষ্ঠী এবং মডেল গ্রুপকে প্রতিদিন সমান পরিমাণে ডিওনাইজড জল দিয়ে ইন্ট্রাগাস্ট্রিকভাবে পরিচালিত হয়েছিল। শরীরের ওজন সাপ্তাহিক পরিমাপ করা হয়েছিল এবং ইঁদুরের শরীরের ওজন অনুসারে ইন্ট্রাগাস্ট্রিকলি ভলিউম সামঞ্জস্য করা হয়েছিল। প্রশাসনের পরে, ইঁদুরগুলিকে 12 ঘন্টা উপোস করা হয়েছিল। পেন্টোবারবিটাল এনেস্থেশিয়ার পরে, সিরাম সূচক সনাক্তকরণের জন্য পেটের মহাধমনী থেকে রক্ত ​​সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রাসঙ্গিক সূচক সনাক্তকরণের জন্য কিডনি, অণ্ডকোষ, এপিডিডাইমিস, সেমিনাল ভেসিকল এবং প্রোস্টেট অপসারণ করা হয়েছিল।