Alox15 মুছে ফেলা কিডনির কর্মহীনতার উন্নতি করে এবং কিডনিতে PGD2 বৃদ্ধির দ্বারা এফব্রোসিসকে বাধা দেয়
Mar 12, 2022
CISTANCHE কিডনি/রেনাল ইনফেকশনের উন্নতি ঘটাবে
ভূমিকা
পলিআনস্যাচুরেটেড ফ্যাটি অ্যাসিড (PUFA) এবং তাদের বিপাকগুলি বিভিন্ন অঙ্গে প্রদাহ এবং এর রেজোলিউশনের সাথে যুক্ত [1]। অক্সিলিপিন, যা PUFA এর অক্সিডেশন দ্বারা উত্পাদিত হয়, লিপিড মধ্যস্থতাকারী হিসাবে PUFA এর জৈবিক কার্যকলাপের জন্য গুরুত্বপূর্ণ [1, 2]। অক্সিলিপিনের জৈব সংশ্লেষণ বিভিন্ন এনজাইম দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়, যেমন lipoxygenase (LOX), cyclooxygenase (COX), এবং cytochrome P450 (CYP) [3]। এই এনজাইমগুলি বেশ কয়েকটি লিপিড বিপাক তৈরি করে, যেমন প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিনস, লিউকোট্রিনস এবং লিপক্সিন, যেগুলি প্রদাহ নিয়ন্ত্রণের সাথে ব্যাপকভাবে জড়িত [1, 4]। উদাহরণস্বরূপ, ALOX15, LOX-এর একটি প্রধান উপপ্রকার, এর বিপাকীয় পদার্থের মাধ্যমে প্রোইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টি-ইনফ্যামেটরি বৈশিষ্ট্যের একটি দ্বৈত দিক রয়েছে [5]: ALOX15 ইওসিনোফিল, ব্রঙ্কোআলভিওলার এপিথেলিয়াল কোষ এবং অ্যালভিওলার ম্যাক্রোফেজে অ-প্যাথোলজিকাল অবস্থার মধ্যে অত্যন্ত প্রকাশ পায় [5] ], এবং হাঁপানি [৭], ফুসফুসের আঘাত [৮] এবং হার্ট ফেইলিউর [৯] এর তীব্রতা বৃদ্ধি করে, যেখানে এটি আর্থ্রাইটিস [১০] এবং ইস্কেমিক ব্রেইনের [১১] প্রদাহ প্রতিরোধ করে। উপরন্তু, লিপিড মধ্যস্থতাকারী এবং তাদের এনজাইমগুলি অঙ্গ ফাইব্রোসিসের পাশাপাশি প্রদাহকে প্রভাবিত করে। নির্দিষ্ট লিপিড মধ্যস্থতাকারীরা ফুসফুস [১২], লিভার [১৩] এবং হার্টের [১৪] ফাইব্রোসিসের প্যাথোজেনেসিসের সাথে জড়িত। একইভাবে, উপরে উল্লিখিত ALOX15 ডার্মাল ফাইব্রোসিসের মতো ফাইব্রোসিসের প্যাথোজেনেসিসের সাথেও যুক্ত [15]।
সাধারণ ক্রনিক রোগগুলির মধ্যে একটি দীর্ঘস্থায়ী কিডনীর রোগ(CKD), যা সকল স্তরে মিলিতভাবে সাধারণ জনসংখ্যার প্রায় 8-16 শতাংশকে প্রভাবিত করে [16]। যদিও CKD প্যাথোজেনেসিস জটিল এবং অন্তর্নিহিত রোগের উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হয়কিডনিটিস্যু সাধারণত অকার্যকর হয়ে যায়, যার ফলে শেষ পর্যায়ে চলে যায়রেচনজনিত ব্যর্থতাদীর্ঘস্থায়ী প্রদাহ এবং পরবর্তী ফাইব্রোসিস দ্বারা সৃষ্ট [17]। উল্লিখিত হিসাবে, PUFAs থেকে প্রাপ্ত লিপিড মধ্যস্থতাকারীরা প্রদাহ এবং এর ফলে ফাইব্রোসিসের সাথে দৃঢ়ভাবে যুক্ত। উদাহরণস্বরূপ, লিপোক্সিন এবং রেজলভিন রেনাল ফাইব্রোসিস [18, 19] প্রতিরোধ করে, তবে এই প্রভাবগুলি এখনও প্রতিবন্ধী রোগীদের সাথে CKD মডেলে পরীক্ষা করা হয়নিকিডনি ফাংশন।তাছাড়া, CKD-তে ব্যাপক লিপিডোমিক প্রোফাইলকিডনিটিস্যুগুলি এখনও রিপোর্ট করা হয়নি। এইভাবে, CKD প্যাথোজেনেসিসে লিপিড বিপাকীয় এনজাইম এবং তাদের পণ্যগুলির ভূমিকা খারাপভাবে বোঝা যায় নি।এই অধ্যয়নের লক্ষ্য হল ফ্যাটি অ্যাসিড বিপাককারী এনজাইম এবং তাদের পণ্যগুলির সম্পৃক্ততা ব্যাখ্যা করারেনাল5/6 নেফ্রেক্টোমাইজড (Nx) CKD মডেলের ইঁদুরের প্রতিবন্ধকতা। এই সমীক্ষাটি প্রকাশ করেছে যে Alox15 এর ট্রান্সক্রিপশন এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশন উভয় মাত্রাই CKD-তে বৃদ্ধি পেয়েছেকিডনি, এবং Alox15-/- ইঁদুরগুলি উন্নত দেখানো হয়েছেকিডনিCKD মডেলে কর্মহীনতা এবং ফাইব্রোসিস। তাছাড়া, PGD2, যা CKD-তে বর্ধিত লিপিড মেটাবোলাইটকিডনিAlox15−/− ইঁদুর, প্রক্সিমাল টিউবুলার কালচারড কোষে এপিথেলিয়াল-মেসেনকাইমাল ট্রানজিশন (EMT) বাধা দেয়। অতএব, Alox15 বাধা এবং/অথবা PGD2 প্রশাসন CKD এবং ফাইব্রোসিসের একটি অভিনব থেরাপিউটিক লক্ষ্য হতে পারে।
কীওয়ার্ড:দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ; লিপক্সিজেনেস; ALOX15; মধ্যস্থতাকারী লিপিডোমিক্স; পলিআনস্যাচুরেটেড ফ্যাটি অ্যাসিড; রেনাল
CISTANCHE কিডনি/রেনাল ফাংশন উন্নত করবে
উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ
প্রাণী এবং পরীক্ষাএই সমীক্ষায় 8-সপ্তাহ-বয়সী পুরুষ C57BL/6 J ইঁদুর (CLEA জাপান) ব্যবহার করা হয়েছিল, যেগুলি সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষার আগে 1 সপ্তাহের জন্য মানিয়ে গিয়েছিল। অধিকন্তু, Alox15−/- ইঁদুরগুলি C57BL/6 J ব্যাকগ্রাউন্ডে (জ্যাকসন ল্যাবরেটরি) তৈরি করা হয়েছিল এবং 5/6 Nx মডেলটি পূর্ববর্তী একটি গবেষণা অনুসারে প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল [20]। আমরা মূল্যায়নের জন্য রক্তের নমুনা সংগ্রহ করেছিরেনাল ফাংশনএবংকিডনি5/6 Nx পরে 8 সপ্তাহে ইমিউনোব্লটিং এবং পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়ার জন্য টিস্যু নমুনা এবং 5/6 Nx পরে 40 সপ্তাহে হিস্টোলজিক্যাল বিশ্লেষণের জন্য। সমস্ত পরীক্ষা-নিরীক্ষা TMDU-এর প্রাণী গবেষণার জন্য নির্দেশিকা মেনে চলে এবং TMDU-এর এনিম্যাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি আমাদের স্টাডি প্রোটোকল অনুমোদন করেছে (অনুমোদন নম্বর: A2019-117C4)।
LC-MS/MS-ভিত্তিক মধ্যস্থতাকারী লিপিডোমিক্সআমরা পূর্বে বর্ণিত হিসাবে LC-MS/MS বিশ্লেষণ পরিচালনা করেছি [21, 22]। পদ্ধতির বিশদ পরিপূরক পদ্ধতিতে বর্ণনা করা হয়েছে,অন্যান্য পরীক্ষামূলক পদ্ধতিআমরা পরিপূরক পদ্ধতিতে অন্যান্য পরীক্ষামূলক পদ্ধতি বর্ণনা করেছি।
ফলাফল
Alox15 এর mRNA মাত্রা 5/6 Nx কিডনিতে বৃদ্ধি পেয়েছেসিকেডিতে অক্সিলিপিন এনজাইমের পরিমাণগত পরিবর্তনকিডনিপূর্বে বর্ণিত হিসাবে C57BL/6 ইঁদুরকে শ্যাম অপারেশন বা 5/6 Nx প্রয়োগ করে তদন্ত করা হয়েছিল [20]। কিডনিতে প্রকাশিত প্রধান অক্সিলিপিন এনজাইমের অভিব্যক্তি বিশ্লেষণ করতে (Alox15, Alox5, Ptgs1 (COX1), Ptgs2 (COX2), Cyp4a12 এবং Cyp2c44) [23, 24], আমরা বের করেছিকিডনিনমুনা এনজাইমগুলির মধ্যে, 5/6 Nx-এ Alox15কিডনিশ্যামের তুলনায় একটি উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত mRNA স্তর (P=0.0004) ছিলকিডনি(আকার 1). বিপরীতভাবে, অন্যান্য প্রধান এনজাইমের mRNA স্তরগুলি এই CKD মডেলে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়নি।
রেনাল প্রক্সিমাল টিউবুলার কোষগুলিতে অ্যালোক্স 15 এর প্রোটিন স্তর বৃদ্ধি পেয়েছে5/6 Nx-একিডনি, ALOX15 প্রোটিনের মাত্রাও বৃদ্ধি পেয়েছে (P=0.0078), যেমনটি বর্ধিত ট্রান্সক্রিপশনাল লেভেল (চিত্র 2a) দ্বারা প্রত্যাশিত। কোন কোষের ধরনগুলি সিকেডিতে অ্যালোক্স 15 প্রোটিনের মাত্রা বাড়িয়েছে তা নির্ধারণ করতেকিডনি,আমরা সিটু হাইব্রিডাইজেশন দ্বারা Alox15 mRNA এর স্থানীয়করণ পরীক্ষা করেছি। এমআরএনএ-তে সিটু হাইব্রিডাইজেশনে প্রকাশ করা হয়েছে যে অ্যালোক্স 15-এর উচ্চ অভিব্যক্তি স্তর এখানে স্থানীয়করণ করা হয়েছিলরেনাল5/6 Nx মডেলে নলাকার কোষ, কিন্তু গ্লোমেরুলিতে নয় (চিত্র 2b)। হিস্টোলজিকাল বৈশিষ্ট্যগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে অ্যালোক্স 15 এমআরএনএ প্রক্সিমাল টিউবুলে দৃঢ়ভাবে প্রকাশ করা হয়েছিল।
অ্যালোক্স15-/- ইঁদুর 5/6 Nx মডেলে রেনাল ক্ষতি এবং ফাইব্রোসিস প্রতিরোধী ছিল5/6 Nx CKD-একিডনি, ALOX15 এর ট্রান্সক্রিপশনাল এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশনের মাত্রা উন্নত করা হয়েছিল। অতএব, আমরা তদন্ত করেছি যে এবং কীভাবে ALOX15 পরিপ্রেক্ষিতে CKD-তে ভূমিকা পালন করেকিডনিকর্মহীনতা এবং রেনাল ফাইব্রোসিস। এই উদ্দেশ্যে, Alox15−/- ইঁদুর 5/6 Nx CKD মডেলে প্রয়োগ করা হয়েছিল। মজার ব্যাপার হল, সিরাম ক্র এবং রক্তে ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN) মাত্রা Alox15-/- 5/6 Nx ইঁদুরে কম ছিল
ওয়াইল্ড-টাইপ (ডব্লিউটি) ইঁদুরের তুলনায় (চিত্র 3a), নির্দেশ করে যে Alox15 হ্রাস CKD প্যাথোজেনেসিসে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব দেখিয়েছে। তদনুসারে, NGAL (aকিডনি ক্ষতিমার্কার) ডব্লিউটি ইঁদুরের তুলনায় অ্যালোক্স15-/- ইঁদুরে প্রোটিনের অভিব্যক্তি দমন করা হয়েছিল (চিত্র 3বি)। উপরন্তু, Alox15-/- মাউসকিডনিকমে Col1a1, Fn এবং Acta2 (SMA) mRNA মাত্রা (চিত্র 3c), এবং ফাইব্রোনেক্টিন এবং SMA প্রোটিন এক্সপ্রেশন (চিত্র 3d) হ্রাস পেয়েছে। তাছাড়া, Alox15-/- মাউসকিডনিম্যাসনের ট্রাইক্রোম স্টেনিং (চিত্র 3e) এ দেখানো স্পষ্টভাবে দমন করা ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোটিক পরিবর্তনগুলি প্রদর্শিত হয়েছে। অতএব, Alox15 মুছে ফেলার উন্নতি হয়কিডনিCKD পশুর মডেলে কর্মহীনতা এবং ফাইব্রোসিস।
মধ্যস্থতাকারী লিপিডোমিক্স অ্যালোক্স15-/- CKD কিডনিতে পরিবর্তিত PUFA বিপাক প্রকাশ করেছেএই কাগজের ভূমিকা বিভাগে উল্লিখিত হিসাবে, Alox15 এর জৈবিক প্রভাবগুলি Alox15 দ্বারা উত্পন্ন লিপিড মধ্যস্থতাকারীদের সাথে সম্পর্কিত। CKD-তে Alox15 দ্বারা উত্পাদিত লিপিড বিপাকের প্রোফাইল ব্যাখ্যা করতেকিডনি,আমরা শ্যাম এবং 5/6 এনএক্স পরীক্ষা করেছি এবং তুলনা করেছিকিডনিLC-MS/MS-ভিত্তিক মধ্যস্থতাকারী লিপিডোমিক্স দ্বারা নমুনাগুলি WT ইঁদুর এবং Alox15−/- CKD ইঁদুরের মধ্যে লিপিড মধ্যস্থতাকারী প্রোফাইলগুলি নির্ধারণ করতে (পরিপূরক সারণী 1)। সারণী 1 লিপিড বিপাক দেখায় যা 5/6 Nx অবস্থার অধীনে Alox15 plus/plus এবং Alox15−/− ইঁদুরের মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল। উপরন্তু, আমরা তাদের সাবস্ট্রেট এবং তাদের বিপাকীয় এনজাইম দ্বারা শ্রেণিবিন্যাস সহ লিপিড মধ্যস্থতাকারীদের পথের মানচিত্র তৈরি করেছি (চিত্র 4)। আলক্সের একটি সিরিজ15-উত্পন্ন PUFA বিপাক যেমন 14-HDoHE, 17-HDoHE, এবং 15-HEPA [5, 25-27] উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে CKD মডেলগুলিতে যা পারস্পরিক সম্পর্কযুক্ত ALOX15 এক্সপ্রেশনের বর্ধিত স্তরে ভালকিডনি (P=0.0018, 0.0008,<0.0001, respectively),="" and="" their="" elevations="" under="" ckd="" conditions="" were="" completely="" suppressed="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 5).="" besides="" 14-hdohe,="" 17-hdohe,="" and="" 15-hepa,="" the="" levels="" of="" 18-hepa,="" 10-hdohe,="" 11-hdohe,="" 13-hdohe,="" 16-hdohe,="" and="" dgla="" were="" also="" significantly="" decreased="" in="" alox15−/−="" ckd="">কিডনিWT CKD কিডনিগুলির তুলনায়, যেখানে Alox15−/− CKD কিডনিতে শুধুমাত্র PGD2 উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 6)।
PGD2 সংস্কৃত কিডনি কোষগুলিতে EMT দমন করে5/6 Nx অবস্থার অধীনে Alox15 plus/plus এবং Alox15−/− ইঁদুরের মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন লিপিড মেটাবোলাইটের প্রভাবগুলি NRK-52E কোষগুলিতে এই লিপিডগুলি পরিচালনা করে পরীক্ষা করা হয়েছিল যেগুলি প্রো-ফাইব্রোটিক সাইটোকাইন TGF দ্বারা সক্রিয় হয়েছিল - 1। আমরা সংস্কৃতিতে এই লিপিডগুলির প্রভাব নির্ধারণ করতে TGF- 1 এর প্রতিক্রিয়া হিসাবে Cola1a এবং Acta2 (SMA) এর mRNA এক্সপ্রেশন মূল্যায়ন করেছি (চিত্র 7a)। এর মধ্যে, PGD2 TGF- 1 এর প্রতিক্রিয়া হিসাবে NRK-52E কোষগুলিতে একটি শক্তিশালী অ্যান্টিফাইব্রোটিক প্রভাব প্রদান করেছে। COL1A1 এবং SMA এক্সপ্রেশনে PGD2 এর দমনমূলক প্রভাব যথাক্রমে 7.12 μM এবং 6.48 μM এর EC50 এর সাথে ডোজ-নির্ভর ছিল (চিত্র 7b)। উপরন্তু, আমরা HK-2 কোষে একই পরীক্ষা-নিরীক্ষা চালিয়েছি, যেগুলি সাধারণ প্রাপ্তবয়স্ক মানুষের থেকে অমরত্বপ্রাপ্ত প্রক্সিমাল টিউবল এপিথেলিয়াল কোষ।কিডনি,এবং একটি অনুরূপ ফলাফল পাওয়া গেছে, তা হল, PGD2 (চিত্র 7c) এর সাথে চিকিত্সার প্রতিক্রিয়া হিসাবে ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে COL1A1 এবং SMA বাধা। অতএব, Alox15−/- CKD-এ PGD2-এর মাত্রা বৃদ্ধি পেয়েছেকিডনিCKD এ অ্যান্টিফাইব্রোটিক প্রভাবে অবদান রাখতে পারে।
CISTANCHE কিডনি/রেনাল ব্যথার উন্নতি ঘটাবে
15-PGDH, একটি প্রধান PGD2-মেটাবোলাইজিং এনজাইম, Alox15-/- CKD কিডনিতে হ্রাস পেয়েছেPGD2 বৃদ্ধির প্রক্রিয়াটি স্পষ্ট করতেকিডনিAlox15−/− CKD মডেল ইঁদুরের, আমরা PGD2 সিন্থেসের mRNA স্তর পরিমাপ করেছি। পিজিডি 2 সিন্থেস (পিজিডিএস) এর দুটি আইসোফর্ম রয়েছে: লিপোক্যালিন পিজিডিএস (এল-পিজিডিএস) এবং হেমাটোপয়েটিক পিজিডিএস (এইচ-পিজিডিএস) [২৮]। এল-পিজিডিএস এবং এইচ-পিজিডিএস উভয় স্তরই 5/6 এনএক্স অবস্থার অধীনে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে যখন ছদ্মবেশী অবস্থার সাথে তুলনা করা হয়েছে।কিডনিWT ইঁদুরের (চিত্র 8a, উভয় P<0.0001) indicating="" that="" increased="" pgd2="" in="" ckd="" is="" due="" to="" increased="" pgd2="" synthases.="" conversely,="" the="" increase="" in="" l-pgds="" and="" h-pgds="" under="" 5/6="" nx="" conditions="" was="" significantly="" inhibited="" in="" alox15−/−="" mice="" (fig. 8a)="" indicating="" that="" the="" increase="" in="" pgd2="" in="" alox15−/−="" ckd="" model="" mice="" was="" not="" due="" to="" increased="" production="" by="" pgds.="" then,="" we="" examined="" mrna="" levels="" of="" cox-1="" and="" cox-2="" as="" more="" upstream="" synthases="" of="" the="" prostaglandin-producing="" pathway.="" we="" also="" measured="" mrna="" levels="" of="" 15-pgdh="" and="">1C18, যা প্রধান PGD2-বিপাকীয় এনজাইম হিসেবে পরিচিত [২৯, ৩০]। COX-1, COX-2, এবং AKR1C18-এর mRNA মাত্রা অপরিবর্তিত থাকলেও, CKD-তে 15-PGDH-এর mRNA স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছেকিডনিAlox15−/− ইঁদুরের যখন WT ইঁদুরের সাথে তুলনা করা হয় (চিত্র 8b, P=0.0325), যা সম্ভাব্যভাবে CKD-এ PGD2 বৃদ্ধির দিকে পরিচালিত করেকিডনিAlox15-/- ইঁদুরের।
আলোচনা
এই গবেষণায় প্রমাণিত হয়েছে যে CKDকিডনিনমুনা, Alox15 এর ট্রান্সক্রিপশন এবং প্রোটিন উভয় মাত্রা বৃদ্ধি করা হয়েছিল, এবংকিডনিকর্মহীনতা এবং ফাইব্রোসিস অ্যালোক্স15-/- ইঁদুরগুলিতে উন্নত করা হয়েছিল। উপরন্তু, LC-MS/MS-ভিত্তিক মধ্যস্থতাকারী লিপিডোমিক্স প্রকাশ করেছে যে Alox15-/- CKD মাউসকিডনিWT ইঁদুরের তুলনায় PGD 2 এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। PGD2 NRK-52E এবং HK-2 কোষের EMT বাধা দেয়; সুতরাং, PGD2 বৃদ্ধি Alox15-/- ইঁদুরের প্রতিরোধে অবদান রাখতে পারেকিডনি আঘাতএবং ফাইব্রোসিস। মধ্যকার সম্পর্কমূত্রাশয় - সম্বন্ধীয় ব্যাধিএবং মানুষের সিরাম বা প্লাজমাতে লিপিডমিক্স ব্যবহার করে লিপিড প্রোফাইলগুলি ব্যাপকভাবে তদন্ত করা হয়েছে [৩১-৩৩], কিন্তু নয়কিডনিটিস্যু একইভাবে, যদিও CKD পশুর মডেল ব্যবহার করে লিপিডোমিক্সের রিপোর্ট কম [৩৪-৩৬], এই সমস্ত গবেষণায় সিকেডি পশুর মডেল থেকে প্লাজমা নমুনাগুলিতে লিপিডোমিক্স করা হয়েছে; যাইহোক, কোন ব্যাপক lipidomics চালুকিডনিCKD মডেল থেকে টিস্যু এখনও রিপোর্ট করা হয়েছে. টিস্যুতে সরাসরি লিপিডোমিক্স কার্যকরী, পাশাপাশি প্লাজমা নমুনাগুলি কার্যকরী বিপাক সনাক্তকরণে। তদুপরি, টিস্যুতে বিপাকীয় পরিবর্তন, সেইসাথে রক্তের নমুনাগুলি অঙ্গ দ্বারা যথেষ্ট আলাদা [20]। বর্তমান গবেষণায়, আমরা PUFA-প্রাপ্ত লিপিড মধ্যস্থতাকারীদের প্রোফাইল পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে বিশ্লেষণ করেছিকিডনিএকটি CKD প্রাণী মডেলের টিস্যু।
এই অধ্যয়নটি ALOX15 এর উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে, যা PUFAs বিপাককারী প্রধান এনজাইমগুলির মধ্যে একটি। এই গবেষণায়, CKD-তে ALOX15-এর প্রোটিন এবং mRNA প্রকাশের মাত্রা স্পষ্টভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে।কিডনি. আমরা CKD-তে ALOX15 এক্সপ্রেশনের জন্য দায়ী কোষের ধরনগুলিকে সম্বোধন করেছিকিডনি,এবং সিটু হাইব্রিডাইজেশনের মাধ্যমে, আমরা ALOX15 mRNA এর একটি বর্ধিত প্রকাশ পেয়েছিরেনাল5/6 Nx মডেলের টিউবুলার কোষ।
ALOX15 দীর্ঘস্থায়ী রোগের সাথে জড়িত, যেমন এথেরোস্ক্লেরোসিস, এবং পশু রোগের মডেলগুলিতে এটি মুছে ফেলা এই রোগগুলিকে উন্নত করে [5]। ALOX15 এর সাথে অ্যাসোসিয়েশন সম্পর্কেমূত্রাশয় - সম্বন্ধীয় ব্যাধি, স্ট্রেপ্টোজোটোসিন-প্ররোচিত ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথি মডেল [৩৭] দ্বারা গ্লোমেরুলার আঘাতের অধীনে অ্যালোক্স15-/- ইঁদুরের মধ্যে প্রোটিনুরিয়া হ্রাস পায়। যাইহোক, এই ডায়াবেটিস মেলিটাস মাউস মডেল কোন হ্রাস দেখায় নাকিডনি ফাংশন; এইভাবে, কিভাবে ALOX15 প্রতিবন্ধীদের সাথে যুক্ত তার প্রক্রিয়াকিডনি ফাংশনCKD মডেল অস্পষ্ট রয়ে গেছে. বর্তমান গবেষণায়, 5/6 Nx মাউস মডেল ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে ALOX15 মুছে ফেলার উন্নতি হয়েছেকিডনিকর্মহীনতা এবংরেনালএকটি CKD মডেলে ফাইব্রোসিস। আজ অবধি, মনোসাইটের শুধুমাত্র IL-4 এবং IL-13ই নিয়ন্ত্রক কারণ হিসাবে পরিচিত যা সরাসরি ALOX15 [5]-এর অভিব্যক্তি বাড়ায়। যাইহোক, ALOX15 এর মধ্যে কী বাড়ে তা এখনও স্পষ্ট নয়রেনালনলাকার কোষ। সিকেডি [৩৮, ৩৯] প্লাজমা এবং কিডনিতে বিভিন্ন ধরণের সাইটোকাইন এবং ইউরেমিক টক্সিন বৃদ্ধি পেয়েছে বলে জানা যায়। তাদের মধ্যে, ALOX15 এর অভিনব নিয়ন্ত্রক থাকতে পারে। CKD-এ ALOX15-এর প্রধান নিয়ন্ত্রক কারণগুলি ব্যাখ্যা করার জন্য আরও অধ্যয়নের প্রয়োজন। 5/6 এনএক্স মডেলে অ্যালোক্স 15 অপসারণকে এর পুনর্নবীকরণ প্রভাবের সাথে যুক্ত করে এমন নির্দিষ্ট হস্তক্ষেপকারী অক্সিলিপিন সনাক্ত করার জন্য আমাদের গবেষণায়, আমরা দেখেছি যে PGD2 প্রতিরোধের সাথে জড়িত থাকতে পারেকিডনি ক্ষতিALOX15 মুছে ফেলার কারণে। একটি সাধারণ বোঝাপড়া হিসাবে, PGD2, COX-1 এবং তৈরি করতে
CCOX-2 অ্যারাকিডোনিক অ্যাসিড থেকে PGG2 তৈরি করে, যা পরে PGH2 তে রূপান্তরিত হয়। যখন PGH2 PGD2 synthase (PGDS) দ্বারা বিপাকিত হয়, তখন PGD2 উৎপন্ন হয় [২৮]। পিজিডিএস-এর দুটি জিনগতভাবে স্বতন্ত্র আইসোফর্ম রয়েছে, যথা, লিপোক্যালিনটাইপ পিজিডিএস (এল-পিজিডিএস) এবং হেমাটোপয়েটিক-টাইপ পিজিডিএস (এইচ-পিজিডিএস) [২৮]। যদিও PGD2 Alox15−/− CKD মাউসে বাড়ানো হয়েছিলকিডনি, এল-পিজিডিএস বা এইচ-পিজিডিএস অ্যালোক্স15-/- CKD মাউসে বাড়ানো হয়নিকিডনি, WT CKD মাউসে PGDS বড় বৃদ্ধি সত্ত্বেওকিডনি(চিত্র 8a)। তদ্ব্যতীত, আমরা এটাও প্রকাশ করেছি যে Alox15−/− CKD মাউস কিডনিতে COX-1 বা COX-2 কোনটাই বৃদ্ধি পায়নি (চিত্র 8b)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে Alox15-/- CKD মাউস কিডনিতে PGD 2 বৃদ্ধি সংশ্লেষের বৃদ্ধির কারণে নয় বরং বর্ধিত স্তরের প্রাপ্যতা বা অবক্ষয় প্রতিরোধের কারণে হয়েছে, এবং প্রকৃতপক্ষে, আমরা {{তে একটি হ্রাস প্রকাশ করেছি। 7} PGDH, Alox15−/− CKD মাউস কিডনিতে (চিত্র 8b) প্রধান PGD2 বিপাককারী এনজাইমগুলির মধ্যে একটি [29]। Alox15 মুছে ফেলার ফলে 15-PGDH কমে যাওয়ার কারণ ব্যাখ্যা করার জন্য আরও তদন্ত প্রয়োজন।
উপরে উল্লিখিত হিসাবে, PGD2 এর প্রতিরোধের সাথে জড়িত হতে পারেকিডনি আঘাতALOX15 ক্ষতির কারণে। এই গবেষণায়, PGD2 এনআরকে-52ই এবং এইচকে-2 কোষে TGF- 1 দ্বারা EMTকে বাধা দেয়, যা প্রক্সিমাল টিউবুলার কোষের প্রতিনিধিত্ব করে। PGD2 দুটি ভিন্ন জি প্রোটিন-কাপলড রিসেপ্টরের সাথে আবদ্ধ হয়, যথা, DP1 এবং DP2, যার কাজগুলি ভিন্ন [২৮]। যাইহোক, আমাদের ইন ভিট্রো পরীক্ষায়, PGD2 4 থেকে 32 μM পর্যন্ত ঘনত্বে কার্যকর ছিল, যা তুলনামূলকভাবে বেশি, বিবেচনা করে যে DP1 এবং DP2 এর কি মানগুলি যথাক্রমে 1.7 nM এবং 2.4 nM [২৮]। এই ফলাফল ইঙ্গিত করে যে PGD2 জি প্রোটিন-সংযুক্ত রিসেপ্টরগুলির মাধ্যমে নয় বরং PPAR-এর মতো অন্যান্য পথের মাধ্যমে অ্যান্টিফাইব্রোটিক প্রভাব প্রয়োগ করতে পারে, যার মাধ্যমে 15-d-PGJ2, একটি নিম্নধারার PGD2 বিপাক, এটির প্রভাব প্রয়োগ করতে পরিচিত [২৮]। এই গবেষণায়, যা লিপিড বিপাকীয় এনজাইম এবং তাদের বিপাকের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে, ALOX15 বাধা এবং/অথবা PGD2 প্রশাসন CKD-এর জন্য একটি প্রতিশ্রুতিবদ্ধ থেরাপিউটিক লক্ষ্য হতে পারে। দুর্ভাগ্যবশত, ক্লিনিকাল অনুশীলনে ব্যবহার করা যেতে পারে এমন কোনও ALOX15 নির্দিষ্ট ইনহিবিটার তৈরি করা হয়নি [40, 41]। ফ্যাটি অ্যাসিড মেটাবোলাইজিং এনজাইম, যা বিভিন্ন বিপাককে প্রভাবিত করে, বাধা দেওয়ার পরিবর্তে PGD2-এর মতো ডাউনস্ট্রিম ফাংশনাল মেটাবোলাইটগুলির থেরাপিউটিক লক্ষ্যমাত্রা একটি অভিনব আদর্শ CKD থেরাপি হতে পারে।
CISTANCHE কিডনি/রেনাল ডায়ালাইসিস উন্নত করবে