বিমূর্ত

উদ্দেশ্য:আণবিক প্রক্রিয়া তদন্ত করতে যার দ্বারাCistanche-ভিত্তিক বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও সূত্রসাইক্লিক অ্যাডেনোসিন মনোফসফেট (সিএএমপি) সিগন্যালিং পাথওয়ে নিয়ন্ত্রণ করে ডায়াবেটিক কিডনি রোগ (ডিকেডি) সহ ইঁদুরগুলিতে একটি কিডনি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রয়োগ করে।

পদ্ধতি:ত্রিশটি নির্দিষ্ট প্যাথোজেন-মুক্ত (এসপিএফ) পুরুষ ডিবি/ডিবি ইঁদুরকে 3 সপ্তাহের জন্য অভিযোজিতভাবে খাওয়ানো হয়েছিল। এলোমেলো লেজের শিরার রক্তে গ্লুকোজের মাত্রা 11.1 mmol·L⁻¹ এর চেয়ে বেশি বা সমান এবং 30 mg·g⁻¹ এর চেয়ে বেশি বা সমান মূত্রনালীর মাইক্রোঅ্যালবুমিন/ক্রিয়েটিনিন অনুপাত সহ ইঁদুর সফলভাবে মডেল হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল। মডেল করা ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে পাঁচটি গ্রুপে বরাদ্দ করা হয়েছিল (প্রতি গ্রুপ n=6): মডেল গ্রুপ, নিম্ন-, মাঝারি- এবং উচ্চ-ডোজ বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও ফর্মুলা গ্রুপ (7, 14, এবং 28 g·kg⁻¹·d⁻¹), এবং একটি ইরবেসার্টান গ্রুপ (20 mg⁻⁻¹)। ছয়টি ডিবি/মি ইঁদুর ফাঁকা গোষ্ঠী হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

ইন্ট্রাগাস্ট্রিক প্রশাসনের মাধ্যমে চিকিত্সা 12 সপ্তাহ ধরে চলে। সাধারণ অবস্থা, শরীরের ওজন এবং রেনাল ফাংশন সূচকগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। হস্তক্ষেপের পরে, উপবাসের রক্তের গ্লুকোজ (FBG) পরিমাপ করা হয়েছিল। একটি স্বয়ংক্রিয় জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষক সিরাম ক্রিয়েটিনিন (SCr), রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN), মূত্রনালী মাইক্রোঅ্যালবুমিন (uALB), অ্যালবুমিন-ক্রিয়েটিনিন অনুপাত (ACR), অ্যাসপার্টেট অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (AST), অ্যালানাইন অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (ALT), মোট কোলেস্টেরল (ট্রাইজিপিটিসি), লেজেস্টেরল (এলইসিপি), লিমিটেড (এলইজি) নির্ণয় করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। গ্লাইকোসিলেটেড সিরাম প্রোটিন (জিএসপি), এবং ইনসুলিন (আইএনএস)।

রেনাল টিস্যু হিস্টোপ্যাথলজি HE, PAS এবং ম্যাসনের ট্রাইক্রোম স্টেনিং ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (আইএইচসি) প্রোটিন কিনেস এ (পিকেএ) এবং সিএএমপি রেসপন্স এলিমেন্ট-বাইন্ডিং প্রোটিন (সিআরইবি) এর অভিব্যক্তি সনাক্ত করেছে। ওয়েস্টার্ন ব্লট PKA, ফসফরিলেটেড PKA (p-PKA), CREB, phosphorylated CREB (p-CREB), এবং Bcl-2 এর মাত্রা বিশ্লেষণ করেছে। রিয়েল-টাইম পিসিআর PKA, CREB, এবং Bcl-2 এর mRNA এক্সপ্রেশন মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

ফলাফল:ফাঁকা গোষ্ঠীর সাথে তুলনা করে, মডেল গ্রুপটি অলসতা, হ্রাস কার্যকলাপ এবং উল্লেখযোগ্যভাবে শরীরের ওজন বৃদ্ধি করেছে (P<0.01). Biochemical markers such as BUN, uALB, ACR, AST, ALT, TC, TG, FBG, LEP, GSP, and INS were significantly increased (P<0.01), while SCr showed an upward trend without statistical significance.

মডেল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, সূত্র-চিকিত্সা করা গ্রুপগুলি উন্নত সাধারণ অবস্থা এবং শরীরের ওজনে নিম্নগামী প্রবণতা দেখিয়েছে। BUN, uALB, ACR, TC, GSP, এবং INS উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (P<0.05), while SCr, AST, ALT, TG, and LEP decreased without statistical significance.

হিস্টোপ্যাথোলজিকাল বিশ্লেষণে প্রকাশ করা হয়েছে যে মডেল গ্রুপ ক্লাসিক ডিকেডি বৈশিষ্ট্যগুলি যেমন গ্লোমেরুলার বেসমেন্ট মেমব্রেন ঘন করা, মেসাঞ্জিয়াল ম্যাট্রিক্স প্রসারণ এবং টিউবুলোইনটারস্টিটিয়ামে কোলাজেন জমার মতো বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শন করেছে। এই রোগগত পরিবর্তনগুলি সমস্ত চিকিত্সা গ্রুপে উপশম করা হয়েছিল।

আইএইচসি ফলাফলগুলি মডেল গ্রুপে (পি) পি-পিকেএ এবং পি-সিআরইবি এক্সপ্রেশন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে<0.01). Compared with the model group, the medium-dose formula group had significantly increased p-PKA (P<0.01) and a non-significant upward trend in p-CREB.

ওয়েস্টার্ন ব্লট দেখিয়েছে যে p-PKA/PKA, p-CREB/CREB, এবং Bcl-2 স্তরগুলি মডেল গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (P<0.05), but significantly increased in the medium-dose formula group (P<0.01).

রিয়েল-টাইম পিসিআর মডেল গ্রুপে পিকেএ, সিআরইবি, এবং বিসিএল-২ এমআরএনএ-র নিম্ন নিয়ন্ত্রণ নিশ্চিত করেছে (পি<0.05), and significant upregulation in the medium-dose formula group (P<0.05).

উপসংহার:দCistanche-ভিত্তিক বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও সূত্রলিভার এবং কিডনির কার্যকারিতা উন্নত করে, ডিবি/ডিবি ইঁদুরের লিপিড এবং গ্লুকোজ বিপাকীয় ব্যাধি সংশোধন করে। এর রেনাল প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব এর উপশমকরণের সাথে যুক্তcAMP/PKA/CREB সিগন্যালিং পাথওয়ে, যা রেনাল ফাইব্রোসিস এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস করে, যার ফলে রেনাল ফাংশন রক্ষা করে।

 

 

 

 

Cistanche-ভিত্তিক বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও ফর্মুলালিভার এবং কিডনির কার্যকারিতা উন্নত করা

আরো বিস্তারিত জানার জন্য ছবিতে ক্লিক করুন

কীওয়ার্ড

ডায়াবেটিক কিডনি রোগ (DKD);
বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও সূত্র;
সিস্তানচে;
cAMP সংকেত পথ;
ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন (TCM)

 

Cistanche-ভিত্তিক প্রতিকার

 

পটভূমি

ডায়াবেটিক কিডনি রোগ (DKD), ডায়াবেটিসের সবচেয়ে গুরুতর মাইক্রোভাসকুলার জটিলতাগুলির মধ্যে একটি, বিশ্বব্যাপী শেষ পর্যায়ে রেনাল ডিজিজ (ESRD) এর একটি প্রধান কারণ। এর ক্রমবর্ধমান প্রসার জনস্বাস্থ্য ব্যবস্থার জন্য একটি উল্লেখযোগ্য চ্যালেঞ্জ। ডিকেডি বৈশিষ্ট্যগুলির মধ্যে রয়েছে প্রগতিশীল গ্লোমেরুলার মেসাঞ্জিয়াল ম্যাট্রিক্স প্রসারণ, টিউবুলোইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস এবং ক্রমাগত প্রোটিনুরিয়া। প্যাথোজেনেসিসে গ্লুকোজ এবং লিপিড মেটাবলিজম ডিসঅর্ডার, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং বিভিন্ন সিগন্যালিং পাথওয়ের অস্বাভাবিক অ্যাক্টিভেশনের মধ্যে জটিল মিথস্ক্রিয়া জড়িত।

বর্তমান প্রথম সারির চিকিত্সার মধ্যে প্রাথমিকভাবে রেনিন-এনজিওটেনসিন সিস্টেম (আরএএস) ইনহিবিটর রয়েছে, যা গ্লোমেরুলার হাইপারটেনশন কমাতে সাহায্য করে এবং প্রাথমিক প্রোটিনুরিয়া বিলম্বিত করে। যাইহোক, তারা 30-40% ESRD তে অগ্রসর হওয়ার সাথে প্রতিষ্ঠিত টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস রোগীদের ক্ষেত্রে কম কার্যকর।

অতএব, নতুন ডিকেডি প্রক্রিয়াগুলি অন্বেষণ করা এবং কার্যকর, নিরাপদ থেরাপিউটিক লক্ষ্যগুলি সন্ধান করা জরুরি ক্লিনিকাল এবং বৈজ্ঞানিক আগ্রহের বিষয়। প্রথাগত ওষুধ কম পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া সহ বহু-লক্ষ্য নিয়ন্ত্রণের প্রস্তাব দেয়, যা দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগে দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহারের জন্য এটিকে আরও উপযুক্ত করে তোলে। দCistanche-ভিত্তিক বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও সূত্রএটি DKD-এর জন্য একটি পরীক্ষামূলকভাবে বৈধ ভেষজ মিশ্রণ, যা পূর্ববর্তী ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলিতে লক্ষণগুলির উন্নতি এবং রোগের অগ্রগতিতে বিলম্ব করার জন্য দেখানো হয়েছে।

যাইহোক, এর আণবিক প্রক্রিয়া, বিশেষত মূল সংকেত পথের সাথে এর মিথস্ক্রিয়া, খারাপভাবে বোঝা যায় না। প্রমাণ প্রস্তাবCAMP/PKA/CREBপথ রেনাল ফাইব্রোসিস প্রশমিত করতে পারে, কিন্তু সম্পর্কিত গবেষণা সীমিত। এই অধ্যয়ন এই পথের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে কিভাবে এটি ব্যাখ্যা করেCistanche-ভিত্তিক সূত্রDKD উন্নত করে।

 

উপকরণ এবং পদ্ধতি

1. প্রাণী

30 পুরুষ db/db ইঁদুর (7 সপ্তাহ বয়সী, SPF গ্রেড, শরীরের ওজন: 37.58±0.62 গ্রাম)

6 বয়সের সাথে মিলে যাওয়া db/m ইঁদুর (শরীরের ওজন: 24.38±0.35 গ্রাম)

বিক্রেতা: জিয়াংসু হুয়াচুয়াং সিননুও ফার্মাসিউটিক্যাল টেকনোলজি কোং, লিমিটেড।

লাইসেন্স: SCXK (Su) 2020-0009 এবং SYXK (Jing) 2020-0033

নৈতিকতা অনুমোদন: BUCM2024041506-2090

2. ভেষজ রচনা

বুশেন কাইক্সুয়ান টংলুও সূত্রে রয়েছে (গ্রামে):
সিস্তানচে(কাঁচা অ্যাস্ট্রাগালাস প্রতিস্থাপন করে) 45, সালভিয়া মিলটিওরিজা 30, হিরুডো 6, সাপোশনিকোভিয়া 20, বম্বিক্স ব্যাট্রিটিকাটাস 15, সিকাডা স্লফ 15, পলিগোনাটাম সিবিরিকাম 10, রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা 20, লাফিসিনাটাস 20, কর্নুস 20 Euryale ferox (ভাজা) 30, Rubus chingii 30, Cnidium monnieri 20, Achyranthes bidentata 30, Dioscorea opposita 20।

সমস্ত ভেষজ একটি লাইসেন্সপ্রাপ্ত ফার্মাসিস্ট দ্বারা প্রমাণিত হয়েছিল এবং জলের ক্বাথের মাধ্যমে প্রস্তুত করা হয়েছিল, ভ্যাকুয়ামের নীচে হ্রাস করা হয়েছিল এবং একটি পাউডার তৈরি করতে স্প্রে-শুকানো হয়েছিল। চূড়ান্ত ঘনত্ব ছিল 1.43 g·mL⁻¹ কাঁচা ভেষজ।

3. রিএজেন্ট এবং যন্ত্র

(বিস্তারিত তালিকার জন্য মূল পাঠ্য দেখুন।)

 

পরীক্ষামূলক নকশা

মডেল মূল্যায়ন

অভিযোজিত খাওয়ানোর 3 সপ্তাহ পর, 11.1 mmol·L⁻¹ এর থেকে বেশি বা সমান এলোমেলো রক্তে গ্লুকোজ এবং 30 mg·g⁻¹ এর থেকে বেশি বা সমান ACR সহ ইঁদুরকে সফল DKD মডেল হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল।

গ্রুপিং এবং ডোজিং

ফাঁকা গ্রুপ (db/m): জল

মডেল গ্রুপ: জল

কম ডোজ: 7 g·kg⁻¹·d⁻¹

মাঝারি ডোজ: 14 g·kg⁻¹·d⁻¹

উচ্চ-ডোজ: 28 g·kg⁻¹·d⁻¹

ইরবেসার্টান গ্রুপ: 20 mg·kg⁻¹·d⁻¹

সময়কাল: বিনামূল্যে খাওয়ানো এবং পানীয়ের অধীনে 12 সপ্তাহ।

---

নমুনা সংগ্রহ এবং বিশ্লেষণ

প্রস্রাব:24 ঘন্টার বেশি সংগ্রহ করা, সেন্ট্রিফিউজ করা এবং -20 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা

রক্ত:অরবিটাল নিষ্কাশনের মাধ্যমে সংগ্রহ করা হয়, সেন্ট্রিফিউজ করা হয় এবং -80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়

কিডনি:প্যাথলজির জন্য বিভক্ত (ফরমালিন-স্থির), প্রোটিন (তরল নাইট্রোজেন), এবং জিন এক্সপ্রেশন (হিমায়িত)

---

সনাক্তকরণ পদ্ধতি

জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণ:SCr, BUN, AST, ALT, TC, TG, INS, LEP, GSP, এবং uALB

হিস্টোপ্যাথলজি:HE, PAS, Masson staining

আইএইচসি:p-PKA এবং p-CREB প্রোটিন এক্সপ্রেশন

ওয়েস্টার্ন ব্লট:p-PKA, PKA, p-CREB, CREB, Bcl-2, -actin

রিয়েল-টাইম পিসিআর:PKA, CREB, এবং Bcl-2 এর mRNA এক্সপ্রেশন

---

সারণী 1. প্রাইমার সিকোয়েন্স

জিন	ফরোয়ার্ড প্রাইমার (5′–3′)	বিপরীত প্রাইমার (5′–3′)	দৈর্ঘ্য (bp)
পিকেএ	GCTGGAGATGGTGAAACGGGA	CGTCCTGAGTCCTCCACATTC	671
CREB	AGCAGCTCATGACACATCATC	AGTCCTTCAGGAAGACTGAACT	152
বিসিএল-2	GCTACCTGTGGATGACTTCGC	CCCACCCGAACTCAAAGAAGG	147
GAPDH	AGGTCGGTGTGAACGGATTTG	GGGGTCGTTGATGGCAACA	95