বিমূর্ত

উদ্দেশ্য:Cistanche-ভিত্তিক হাইপোগ্লাইসেমিক-লিপিড-নিয়ন্ত্রক সূত্র (HLF) গ্লুকোজ এবং লিপিড বিপাকের ব্যাধিগুলির উন্নতিতে উল্লেখযোগ্য কার্যকারিতা দেখিয়েছে। যাইহোক, এর কর্মের নির্দিষ্ট প্রক্রিয়া অস্পষ্ট থেকে যায়। নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি, আণবিক ডকিং, আণবিক গতিবিদ্যা (MD) সিমুলেশন এবং পরীক্ষামূলক বৈধতার মাধ্যমে গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধিগুলির উন্নতিতে HLF-এর সম্ভাব্য লক্ষ্য এবং প্রক্রিয়াগুলি অন্বেষণ করা এই গবেষণার লক্ষ্য।

পদ্ধতি:
গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধিগুলির সাথে সম্পর্কিত লক্ষ্যগুলি জিনকার্ডস ডাটাবেস থেকে পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল। HLF এর প্রধান সক্রিয় উপাদানগুলির কর্ম লক্ষ্যগুলি CTD এবং SwissTargetPrediction ডাটাবেস থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। STRING ডাটাবেস এবং সাইটোস্কেপ সফ্টওয়্যার প্রোটিন-প্রোটিন ইন্টারঅ্যাকশন (PPI) নেটওয়ার্ক তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। সম্ভাব্য মূল লক্ষ্যগুলি শনাক্ত করার পর, জিন অন্টোলজি (জিও) এবং কিয়োটো এনসাইক্লোপিডিয়া অফ জিনস অ্যান্ড জিনোম (কেইজিজি) সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণগুলি মেটাস্কেপ ডাটাবেসের মাধ্যমে সম্পাদিত হয়েছিল এবং একটি "কম্পাউন্ড-টার্গেট-পাথওয়ে" নেটওয়ার্ক তৈরি করা হয়েছিল। প্রধান উপাদান এবং মূল লক্ষ্যগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়া যাচাই করতে AutoDock এবং PyMOL ব্যবহার করে আণবিক ডকিং পরিচালিত হয়েছিল। এমডি সিমুলেশনগুলি তখন ডকিং থেকে চিহ্নিত সেরা প্রোটিন-লিগ্যান্ড কমপ্লেক্সগুলিতে সঞ্চালিত হয়েছিল। গ্লুকোলিপিড মেটাবলিক ডিসঅর্ডারের জন্য একটি মাউস মডেল প্রতিষ্ঠিত হয়েছিলভিভোতেনেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি ফলাফলের বৈধতা।

ফলাফল:
পিপিআই নেটওয়ার্কের টপোলজিক্যাল বিশ্লেষণে 10টি মূল লক্ষ্য চিহ্নিত করা হয়েছে: TNF, CTNNB1, AKT1, NF-κB1, ESR1, FN1, TP53, IL-1 , IL-6, এবং EGFR। জিও সমৃদ্ধকরণ দেখায় যে এই লক্ষ্যগুলি মূলত সংকেত ট্রান্সডাকশন এবং ট্রান্সক্রিপশনাল রেগুলেশনের সাথে জড়িত ছিল। কেইজিজি পাথওয়ে বিশ্লেষণ লিপিড এবং এথেরোস্ক্লেরোসিস পথের সাথে উল্লেখযোগ্য সম্পর্ক প্রকাশ করেছে। আণবিক ডকিং এইচএলএফ-এর মূল উপাদানগুলির (যেমন, লোভাস্ট্যাটিন, কপ্টিসিন, সালভিয়ানোলিক অ্যাসিড বি) এবং AKT1, FN1, এবং IL-6 এর মতো লক্ষ্যগুলির মধ্যে অনুকূল বাঁধাইয়ের সম্পর্ক নিশ্চিত করেছে। MD সিমুলেশনগুলি আরও স্থিতিশীল মিথস্ক্রিয়া প্রদর্শন করেছে, বিশেষ করে AKT1 এবং যৌগগুলির মধ্যে যেমন lovastatin, coptisine, এবং salvianolic acid B. প্রাণী পরীক্ষাগুলি নির্দেশ করে যে HLF AKT1, TP53, FN1, এবং EGFR-এর অভিব্যক্তিকে হ্রাস করে থেরাপিউটিক প্রভাব প্রয়োগ করতে পারে, যেমন IL-6 এবং ইনফ্ল্যামারেটরি ফ্যাক্টরগুলিকে দমন করে। এবং CTNNB1 এবং ESR1 আপ রেগুলেট করা। এই পরিবর্তনগুলি মডেল ইঁদুরগুলিতে রক্তের গ্লুকোজ এবং লিপিডের মাত্রার উন্নতি ঘটায়।

উপসংহার:
এইচএলএফ গ্লুকোজ এবং লিপিড বিপাক নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং লিপিড এবং এথেরোস্ক্লেরোসিস-সম্পর্কিত পথগুলিকে লক্ষ্য করে এথেরোস্ক্লেরোটিক ক্ষতগুলিকে উন্নত করতে পারে। এটি বিপাকীয় ব্যাধি এবং সম্পর্কিত জটিলতা প্রতিরোধ ও চিকিত্সার জন্য একটি ব্যাপক থেরাপিউটিক কৌশল অফার করে।

কীওয়ার্ড:
Cistanche-ভিত্তিক সূত্র; গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধি; নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি; আণবিক ডকিং; আণবিক গতিবিদ্যা সিমুলেশন;লিপিড এবং এথেরোস্ক্লেরোসিস পথ

 

 

 

গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধি চিকিত্সার জন্য সিস্টানচে এক্সট্র্যাক্ট অ্যাক্টিওসাইড উপাদান

cistanche সুবিধা সম্পর্কে আরও জানুন, আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন

এখনই যোগাযোগ করুন

 

 

 

1. ভূমিকা

গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধি বিশ্বব্যাপী একটি বিশিষ্ট জনস্বাস্থ্য উদ্বেগ হয়ে উঠেছে। 2021 সালে, ডায়াবেটিসের বৈশ্বিক প্রকোপ প্রায় 529 মিলিয়নে পৌঁছেছে, অনুমান অনুযায়ী 2050 সালের মধ্যে 1.31 বিলিয়নেরও বেশি কেস ইঙ্গিত করে। চীনে, সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে 2013 সালে 10.9% থেকে 2013 সালে ডায়াবেটিসের প্রাদুর্ভাব 12.4% বেড়েছে। উল্লেখযোগ্যভাবে ডিসলিপিডমিয়া বৃদ্ধি পাচ্ছে। কার্ডিওভাসকুলার এবং সেরিব্রোভাসকুলার ঘটনা, মৃত্যুহার এবং অক্ষমতার ঝুঁকি।

চীনের 20টি তৃতীয় হাসপাতালের মহামারী সংক্রান্ত জরিপ দেখায় যে 67.1% টাইপ 2 ডায়াবেটিস (T2DM) রোগীদের ডিসলিপিডেমিয়া আছে। CCMR-3B সমীক্ষায় রিপোর্ট করা হয়েছে যে 72% T2DM রোগীদেরও ডিসলিপিডেমিয়া এবং/অথবা উচ্চ রক্তচাপ ছিল, শুধুমাত্র ডায়াবেটিস রোগীদের তুলনায় তাদের ম্যাক্রোভাসকুলার এবং মাইক্রোভাসকুলার জটিলতার ঝুঁকি দ্বিগুণ।

গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধিগুলির জটিল প্যাথোজেনেসিস এবং ব্যাপক বিপাকীয় নিয়ন্ত্রণ অর্জনের কম হারের কারণে, কার্যকর চিকিত্সা সীমিত। Cistanche-ভিত্তিক হাইপোগ্লাইসেমিক-লিপিড-নিয়ন্ত্রক সূত্র (HLF), "কফের টার্বিডিটি" তত্ত্বের অধীনে বিকশিত হয়েছে, যার লক্ষ্য তাপ পরিষ্কার করা, অস্বচ্ছলতা দূর করা এবং ভারসাম্য পুনরুদ্ধার করা। সহ আটটি ভেষজ নিয়ে গঠিতসিস্তানচে, Momordica charantia, ঘৃতকুমারী, স্কুটেলারিয়া বাইকালেন্সিস, শিসান্দ্রা চিনেনসিস, জিঙ্গিবার অফিসিয়াল, সালভিয়া মিলটিওরিজা, এবংঅ্যাট্র্যাটাইলোডস ম্যাক্রোসেফালা, HLF বিপাকীয় ব্যাধিগুলির মূল প্রক্রিয়াগুলিকে লক্ষ্য করে।

HPLC চিহ্নিত মূল যৌগ ব্যবহার করে আঙুলের ছাপ বিশ্লেষণ:ম্যাঙ্গিফেরিন, কপ্টিসিন, জ্যাট্রোরিজাইন, সালভিয়েনোলিক অ্যাসিড বি, অ্যালোইন, বারবেরিন, পালমাটাইন,এবংlovastatin. পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি গ্লুকোজ এবং লিপিড মাত্রা কমাতে, কার্ডিওভাসকুলার ঝুঁকি হ্রাস এবং ইনসুলিন প্রতিরোধের উন্নতিতে HLF এর কার্যকারিতা নিশ্চিত করেছে। স্থূলতা-সম্পর্কিত T2DM এবং ডিসলিপিডেমিয়ায় আক্রান্ত 450 জন রোগীকে জড়িত একটি মাল্টিসেন্টার, এলোমেলো, ওপেন-লেবেল ক্লিনিকাল ট্রায়ালে পাওয়া গেছে যে HLF কার্যকরভাবে রক্তের গ্লুকোজ, নিয়ন্ত্রিত লিপিড, শরীরের ওজন কমিয়েছে এবং ইনসুলিন সংবেদনশীলতা উন্নত করেছে।

আরও গবেষণায় পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে এইচএলএফ অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা সংশোধন করতে পারে (যেমন,ফ্যাকালিব্যাকটেরিয়াম, ব্লাউটিয়া) এবং ফ্যাটি অ্যাসিডের অবক্ষয় এবং গ্লাইকোলাইসিস/গ্লুকোনোজেনেসিসের মতো বিপাকীয় পথকে প্রভাবিত করে। এর প্রমাণিত ক্লিনিকাল কার্যকারিতা সত্ত্বেও, সুনির্দিষ্ট প্রক্রিয়াগুলি অস্পষ্ট থেকে যায়, বিস্তৃত প্রয়োগকে সীমিত করে।

নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি বায়োইনফরমেটিক্স এবং উচ্চ-থ্রুপুট স্ক্রীনিংকে একীভূত করে রোগের প্রক্রিয়া এবং ওষুধের ক্রিয়াগুলি ব্যাখ্যা করার জন্য একটি সিস্টেম-স্তরের পদ্ধতির প্রস্তাব দেয়। এই গবেষণায় গ্লুকোলিপিড বিপাকীয় ব্যাধিগুলির চিকিৎসায় এইচএলএফ-এর মাল্টি-টার্গেট মেকানিজম উন্মোচন করার জন্য নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি, আণবিক ডকিং, আণবিক গতিবিদ্যা এবং প্রাণী পরীক্ষাগুলি ব্যবহার করা হয়।

2. উপকরণ এবং পদ্ধতি

2.1 যন্ত্র

D3024R হাই-স্পিড রেফ্রিজারেটেড সেন্ট্রিফিউজ (SCILOGEX)

Y300C ইলেক্ট্রোফোরেসিস যন্ত্রপাতি এবং JY300C ইলেক্ট্রোফোরেসিস ট্যাঙ্ক (জুনি ওরিয়েন্টাল, বেইজিং)

চ্যাম্পজেল 5000 ইমেজিং সিস্টেম (সাইঝি ইনোভেশন, বেইজিং)

SMA-1000 স্পেকট্রোফটোমিটার (মেলিন হেংটং, বেইজিং)

স্টেপওয়ান প্লাস কিউআরটি-পিসিআর সিস্টেম (এবিআই)

পাওয়ারপ্যাক ইউনিভার্সাল ইলেক্ট্রোফোরেসিস ইউনিট (বায়ো-র্যাড)

PB-10 pH মিটার (সার্টোরিয়াস)

ট্যানন 5200 কেমিলুমিনেসেন্স বিশ্লেষক (ট্যানন, সাংহাই)

2.2 ভেষজ ওষুধ

HLF সূত্র অন্তর্ভুক্ত:

সিস্তানচে (সিস্তানচেস হারবা)

Momordica charantia

স্কুটেলারিয়া বাইকালেন্সিস

ঘৃতকুমারী

শিসান্দ্রা চিনেনসিস

জিঙ্গিবার অফিসিয়াল

সালভিয়া মিলটিওরিজা

অ্যাট্র্যাটাইলোডস ম্যাক্রোসেফালা
সমস্ত ভেষজ দানাদার ফর্মুলা নির্যাস ছিল (তিয়ানজিয়াং ফার্মাসিউটিক্যাল, জিয়ানজিন)।

ওষুধ নিয়ন্ত্রণ:মেটফর্মিন হাইড্রোক্লোরাইডট্যাবলেট (0.5 গ্রাম প্রতি ট্যাবলেট, ব্রিস্টল-মায়ার্স স্কুইব, সাংহাই)।

2.3 রিএজেন্ট এবং অ্যান্টিবডি

TRIzol বিকারক (ইনভিট্রোজেন)

HiFiScript cDNA সংশ্লেষণ কিট (CW2569)

UltraSYBR মিশ্রণ (High ROX, CW2602)

বিসিএ প্রোটিন অ্যাসে কিট

প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি লক্ষ্য করে p-AKT, p-NF-κB p65, AKT, NF-κB p65, FN1, p53, IL-1, IL-6, EGFR, TNF- , -catenin, ESR1, -actin

সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (এইচআরপি-সংযুক্ত ছাগল অ্যান্টি-রবিট/মাউস আইজিজি)

2.4 পশুর মডেল

পুরুষ C57BL/6J ইঁদুর (7 সপ্তাহের বয়সী) স্ট্যান্ডার্ড SPF শর্তে কেনা এবং রাখা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণী পদ্ধতি গুয়াংআনমেন হাসপাতালের নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল (অনুমোদন নম্বর IACUC-GAMH-2019-002)৷

2.5 লক্ষ্য পূর্বাভাস

HLF থেকে সক্রিয় যৌগগুলি জিজ্ঞাসা করা হয়েছিলসিটিডিএবংসুইস টার্গেট প্রেডিকশন(সম্ভাব্যতা > 0.1)। T2DM এবং ডিসলিপিডেমিয়ার জন্য রোগ-সম্পর্কিত লক্ষ্যগুলি পুনরুদ্ধার করা হয়েছিলজিনকার্ড(প্রাসঙ্গিকতা স্কোর > 1)। ভেন ডায়াগ্রামগুলি আরও পিপিআই বিশ্লেষণের জন্য ওভারল্যাপিং লক্ষ্যগুলি চিহ্নিত করেছে।

2.6 PPI নেটওয়ার্ক নির্মাণ

ওভারল্যাপিং লক্ষ্যগুলি ইনপুট করা হয়েছিলSTRING(https://www.string-db.org), মাঝারি আত্মবিশ্বাসের সাথে (স্কোর 0.4 এর চেয়ে বড় বা সমান)। নেটওয়ার্কটি ভিজ্যুয়ালাইজ এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিলসাইটোস্কেপ, এবং মূল লক্ষ্যগুলি ডিগ্রী কেন্দ্রীয়তা দ্বারা চিহ্নিত।

2.7 GO এবং KEGG সমৃদ্ধকরণ

মূল লক্ষ্য জমা দেওয়া হয়েছেমেটাস্কেপGO (BP, MF, CC) এবং KEGG পাথওয়ে বিশ্লেষণের জন্য (P <0.01)। বুদবুদ প্লট ব্যবহার করে ভিজ্যুয়ালাইজেশন করা হয়েছিল।

2.8 যৌগ-টার্গেট-পাথওয়ে নেটওয়ার্ক

সাইটোস্কেপ ব্যবহার করা হয়েছিল ভেষজ, যৌগ, লক্ষ্য এবং পথ সংযোগকারী নেটওয়ার্ক তৈরি করতে, মাল্টি-টার্গেট, মাল্টি-পাথওয়ে মিথস্ক্রিয়াকে চিত্রিত করে।

2.9 আণবিক ডকিং

যৌগগুলির 2D কাঠামো থেকে প্রাপ্ত হয়েছিলপাবকেম, ব্যবহার করে PDB তে রূপান্তরিতবাবেল খুলুন. প্রোটিন গঠন থেকে ডাউনলোড করা হয়েছেআরসিএসবি পিডিবি, মধ্যে প্রস্তুতAutoDockTools, এবং ডক ব্যবহার করেসেলভিনা. বাইন্ডিং অ্যাফিনিটি −4.25 kcal/mol এর কম বা সমান তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল। ডকিং ফলাফল সঙ্গে visualized ছিলপাইমল.

2.10 আণবিক গতিবিদ্যা সিমুলেশন

এমডি সিমুলেশনগুলি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিলAmber18নির্বাচিত শীর্ষ কমপ্লেক্সের জন্য। প্রোটিন: amber14SB; ligand: gaff; জল: OPC মডেল। RMSD এবং RMSF 20 ns NPT সিমুলেশন থেকে গণনা করা হয়েছিল।

2.11 প্রাণীদের গ্রুপিং এবং হস্তক্ষেপ

ইঁদুরগুলিকে 4 টি গ্রুপে এলোমেলো করা হয়েছিল: সাধারণ (এন), মডেল (এম), মেটফর্মিন (এমইটি) এবং এইচএলএফ। গ্রুপ N ব্যতীত, সমস্ত ইঁদুরকে 6 সপ্তাহের জন্য একটি উচ্চ-চর্বিযুক্ত খাদ্য (HFD) খাওয়ানো হয়েছিল। HLF 14 g/kg (অশোধিত ভেষজ সমতুল্য), MET 250 mg/kg এ পরিচালিত হয়েছিল। 8 সপ্তাহের হস্তক্ষেপের পরে, বিশ্লেষণের জন্য রক্ত ​​এবং লিভারের টিস্যু সংগ্রহ করা হয়েছিল।

2.12 কিউআরটি-পিসিআর

TRIzol ব্যবহার করে মোট আরএনএ বের করা হয়েছিল। হাইফাইস্ক্রিপ্ট ব্যবহার করে সিডিএনএ সংশ্লেষিত হয়েছিল। qPCR UltraSYBR এবং StepOne Plus ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। আপেক্ষিক অভিব্যক্তি 2^−ΔΔCt এর মাধ্যমে গণনা করা হয়েছিল।

2.13 ওয়েস্টার্ন ব্লট

প্রোটিনগুলি যকৃতের টিস্যু থেকে বের করা হয়েছিল, পরিমাপ করা হয়েছিল, SDS-PAGE দ্বারা পৃথক করা হয়েছিল এবং PVDF ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। প্রাথমিক এবং মাধ্যমিক অ্যান্টিবডিগুলির সাথে ব্লক এবং ইনকিউবেশনের পরে, ইসিএল দ্বারা সংকেতগুলি কল্পনা করা হয়েছিল এবং ইমেজজে. - অ্যাক্টিন ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল স্বাভাবিককরণের জন্য।

2.14 পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ

ডেটা ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিলSPSS 23.0এবংগ্রাফপ্যাড প্রিজম 10.1.2. একমুখী আনোভা এবং টি-পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছিল, P <0.05 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল।