উপযুক্ত ব্যায়ামের স্তরটি অন্ত্রের ডিসবায়োসিসকে কমিয়ে দেয় এবং ইঁদুরে অস্ত্রোপচারের পরে নিউরোপ্লাস্টিসিটি এবং জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করতে ভ্যালেরিক অ্যাসিড বৃদ্ধি করে পার্ট 3

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

পরীক্ষামূলক প্রোটোকল এবং পদ্ধতিগুলি ভার্জিনিয়া বিশ্ববিদ্যালয়ের ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটি (শার্লটসভিল, ভিএ, ইউএসএ; প্রোটোকল নম্বর: 3114) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

মেমরি আমাদের দৈনন্দিন জীবনে প্রায়শই ব্যবহার করা প্রয়োজন এমন একটি ক্ষমতা। এটি মানুষকে আরও স্মার্ট, আরও সংবেদনশীল এবং ক্যারিয়ার এবং আন্তঃব্যক্তিক সম্পর্কের জন্য আরও সহায়ক করে তুলতে পারে। অতএব, অনেক মানুষ তাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে চান। পরীক্ষামূলক প্রোটোকল এবং মেমরি মধ্যে একটি সম্পর্ক আছে. এর পরবর্তী এই সমস্যা অন্বেষণ করা যাক.

প্রথমত, পরীক্ষামূলক প্রোটোকল মানুষকে তাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে সাহায্য করতে পারে। পরীক্ষায়, লোকেদের পরীক্ষামূলক ক্রিয়াকলাপ সম্পূর্ণ করার জন্য নির্দিষ্ট পদক্ষেপগুলি অনুসরণ করতে হবে। এই ধাপে ধাপে ক্রিয়াকলাপটি মানুষের মস্তিষ্ককে উচ্চ মনোযোগ এবং ঘনত্বের অবস্থায় রাখতে পারে, এইভাবে মস্তিষ্কের কার্যকারিতাকে উন্নীত করে। একই সময়ে, আপনাকে পরীক্ষার সময় কিছু পরীক্ষামূলক ডেটা এবং পরীক্ষামূলক পদক্ষেপগুলি মনে রাখতে হবে, যা মস্তিষ্কের মেমরি ফাংশনকেও অনুশীলন করবে। এভাবে বারবার অনুশীলন করলে আপনার স্মৃতিশক্তি ধীরে ধীরে উন্নত হবে।

দ্বিতীয়ত, মেমরি প্রক্রিয়ার সময় সংবেদনশীল অভিজ্ঞতাও পরীক্ষামূলক পরিকল্পনার নকশার সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত। পরীক্ষায়, ডিজাইনাররা প্রায়শই পরীক্ষার সময় কিছু নির্দিষ্ট কাজ সেট করেন, যাতে অংশগ্রহণকারীদের একই অপারেশন একাধিকবার পুনরাবৃত্তি করতে হয়, যেমন মেমরি এবং সংখ্যা লেখা, মেমরি এবং রঙ ব্লকের স্বীকৃতি ইত্যাদি। এই পুনরাবৃত্তিমূলক অভিজ্ঞতা মানুষের শক্তিশালী করতে পারে। মনোযোগ এবং মেমরির ক্ষমতা, যা লোকেদের জন্য দীর্ঘমেয়াদী স্মৃতিতে এই তথ্য প্রক্রিয়া করা সহজ করে তোলে।

উপরন্তু, পরীক্ষা-নিরীক্ষায়, প্রতিনিধিত্বমূলক উদ্দীপক উপকরণ (যেমন ছবি, শব্দ, গন্ধ ইত্যাদি) ব্যবহার করলেও ভালো ফল পাওয়া যায়। কারণ এই উদ্দীপনাগুলি মস্তিষ্কের উত্তেজনা এবং স্মৃতি প্রক্রিয়াকে ট্রিগার করতে পারে, যার ফলে মানুষের স্মৃতিশক্তির উন্নতি ঘটে। একই সময়ে, এই উদ্দীপনাগুলি জীবনের পরিবেশ এবং পরিস্থিতির সাথেও মিলিত হতে পারে, যার ফলে ডিকপলিং এর ঘটনা হ্রাস করে এবং তথ্যগুলিকে মনে রাখা সহজ এবং আরও সংহত করে।

সংক্ষেপে, পরীক্ষামূলক পরিকল্পনা মানুষের স্মৃতিশক্তির উন্নতিতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। পরীক্ষা-নিরীক্ষার মাধ্যমে, লোকেরা তাদের জ্ঞানীয় ক্ষমতা অনুশীলন করতে পারে, তাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে এবং একই সাথে মস্তিষ্কের কার্যকারিতা বাড়াতে পারে। অতএব, আমাদের স্মরণশক্তির মাত্রা উন্নত করতে এবং আমাদের ক্যারিয়ার, সম্পর্ক এবং স্বাস্থ্যে আরও বেশি অবদান রাখতে আমাদের নতুন পরীক্ষামূলক পদ্ধতিগুলি শিখতে এবং আরও পরীক্ষায় অংশগ্রহণ করা উচিত। এটি দেখা যায় যে আমাদের স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে হবে, এবং সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা উল্লেখযোগ্যভাবে স্মৃতিশক্তি উন্নত করতে পারে, কারণ সিস্তানচে ডেসার্টিকোলায় অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি এবং অ্যান্টি-এজিং প্রভাব রয়েছে, যা মস্তিষ্কে অক্সিডেশন এবং প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়া কমাতে সাহায্য করতে পারে, যার ফলে মস্তিষ্কের সুরক্ষা। স্নায়ুতন্ত্রের স্বাস্থ্য। এছাড়াও, Cistanche deserticola স্নায়ু কোষের বৃদ্ধি এবং মেরামতকেও প্রচার করতে পারে, এইভাবে নিউরাল নেটওয়ার্কগুলির সংযোগ এবং কার্যকারিতা বৃদ্ধি করে। এই প্রভাবগুলি স্মৃতিশক্তি, শেখার ক্ষমতা এবং চিন্তার গতি উন্নত করতে সাহায্য করতে পারে এবং জ্ঞানীয় কর্মহীনতা এবং নিউরোডিজেনারেটিভ রোগের বিকাশকে প্রতিরোধ করতে পারে।

কিভাবে উন্নতি করতে হয় স্বল্পমেয়াদী মেমরি জানুন ক্লিক করুন

2011 সালে সংশোধিত ল্যাবরেটরি অ্যানিম্যালসের যত্ন ও ব্যবহারের জন্য ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ গাইড (এনআইএইচ প্রকাশনা নম্বর 80-23) দ্বারা সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা করা হয়েছিল৷ মূল উপাদানগুলির উত্সগুলি সম্পূরক উপকরণগুলির মূল সম্পদ সারণীতে তালিকাভুক্ত করা হয়েছিল৷

প্রাণী এবং পরীক্ষামূলক নকশা

19-22 গ্রাম ওজনের আট-সপ্তাহ বয়সী পুরুষ C57BL/6 J ইঁদুরকে স্থির পরিবেশগত অবস্থার (তাপমাত্রা 22-24 ডিগ্রি, একটি 12 ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্র, এবং 50 ± 10% আর্দ্রতা) খাবারের বিনামূল্যে প্রবেশাধিকারের অধীনে রক্ষণাবেক্ষণ করা রুমে রাখা হয়েছিল। এবং জল.

তাদের সবাইকে পরীক্ষার আগে এক সপ্তাহের জন্য মানিয়ে নেওয়ার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। প্রথম পরীক্ষায় তাদের এলোমেলোভাবে নিম্নলিখিত গোষ্ঠীগুলিতে নিয়োগ করা হয়েছিল: (1) নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ (অ্যানেস্থেসিয়া এবং সার্জারির সংস্পর্শে না আসা), (2) ব্যায়াম গ্রুপ (35-40% সর্বাধিক ক্ষমতায় ব্যায়াম করা হয়েছে, কিন্তু অ্যানেস্থেসিয়া এবং অস্ত্রোপচারের সংস্পর্শে আসছে না) , (3) সার্জারি গ্রুপ (2 ঘন্টার জন্য আইসোফ্লুরেন অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে 15 মিনিটের জন্য বাম ক্যারোটিড ধমনী এক্সপোজার), এবং (4) থেকে (6) Exe-l+Sur, Exe-m+Sur এবং Exe-h+Sur গ্রুপগুলি: 35 এ অনুশীলন করা হয়েছে -40%, 55-60% এবং 75-80% সর্বাধিক ক্ষমতা, যথাক্রমে, এবং অ্যানেশেসিয়া এবং অস্ত্রোপচারের অধীন ছিল।

অস্ত্রোপচারের (n=20) 4 দিন পর থেকে শুরু হওয়া প্রাণীগুলি শেখার এবং স্মৃতি পরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল বা অস্ত্রোপচারের 6 ঘন্টা, 24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা, 72 ঘন্টা, 96 ঘন্টা এবং 7 দিন পরে জৈব রাসায়নিক পরীক্ষার জন্য তাদের মস্তিষ্ক সংগ্রহ করা হয়েছিল। (n=9 বা 14), অস্ত্রোপচারের 48 ঘণ্টা এবং 19 দিন পরে ইমিউনোফ্লুরোসেন্ট দাগের জন্য (n=6), এবং সার্জারির 19 দিন পরে গোলগির দাগের জন্য (n=8)।

প্রথম 4টি গ্রুপের ইঁদুর থেকে রক্ত ​​এবং মল অস্ত্রোপচারের 7 দিন পরে SCFAs পরিমাপের জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল (n=7) এবং 16 S বিশ্লেষণের জন্য অস্ত্রোপচারের 3 এবং 7 দিন পরে (n=8) বা 4-সপ্তাহের ব্যায়াম প্রোটোকলের শেষে (n=8) ​​বা প্রথম 2গ্রুপের সংশ্লিষ্ট সময়ে (n=16)। টিস্যু সংগ্রহের জন্য ইঁদুরগুলি ছিল মাইসেটের বিভিন্ন দল যা শেখার এবং স্মৃতি পরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল৷ দ্বিতীয় পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) ট্রান্সকন্ট্রোল + সার গ্রুপ এবং (2) ট্রান্স-এক্সে + সুর গ্রুপে নিয়োগ করা হয়েছিল।

প্রথম গ্রুপের ইঁদুররা গ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজ দ্বারা কন্ট্রোল গ্রুপ থেকে 500 উল মল দ্রবণ এবং 600 উল এনিমা দ্বারা দিনে একবার অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সার পর পরপর 7 দিন ধরে গ্রহণকারীদের মধ্যে স্থানীয় অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দূর করার জন্য গ্রহণ করেছিল। দ্বিতীয় গ্রুপের ইঁদুররা অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সার পর পরপর ৭ দিন ধরে প্রতিদিন একবার ব্যায়াম ইঁদুর বাইগ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজ থেকে 500 উল ফিকাল দ্রবণ এবং 600 উল এনিমা পান। 16 এস বিশ্লেষণের জন্য মল প্রতিস্থাপনের 14 দিন পরে প্রাপকদের মল সংগ্রহ করা হয়েছিল। তারপরে ইঁদুরগুলি অস্ত্রোপচারের শিকার হয়েছিল।

অস্ত্রোপচারের 4 দিন পর (n=15) থেকে শেখা এবং স্মৃতি মূল্যায়ন করা হয়েছিল। প্রথম পরীক্ষায় (n=10) হিসাবে জৈব রাসায়নিক গবেষণার জন্য মস্তিষ্ক সংগ্রহ করা হয়েছিল। তৃতীয় পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) ট্রান্সকন্ট্রোল গ্রুপ এবং (2) ট্রান্স-কন্ট্রোল + সুর গ্রুপে বরাদ্দ করা হয়েছিল। উভয় গ্রুপের ইঁদুর নিয়ন্ত্রণ ইঁদুর থেকে মল প্রতিস্থাপন পেয়েছে। দ্বিতীয় গ্রুপের মল প্রতিস্থাপনের 14 দিন পর অস্ত্রোপচার করা হয়। GDNF (n=10) পরিমাপ করার জন্য অস্ত্রোপচারের 2 দিন পরে হিপ্পোক্যাম্পাস কাটা হয়েছিল। চতুর্থ পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর জন্য বরাদ্দ করা হয়েছিল (নিরাপদ ইঁদুর যেগুলি এই গবেষণায় বর্ণিত কোনও পরীক্ষামূলক অবস্থার সংস্পর্শে আসেনি), (2) অ্যান্টিবায়োটিক গ্রুপ যারা 7 দিনের জন্য অ্যান্টিবায়োটিক গ্রহণ করেছিল এবং (3) ট্রান্স-কন্ট্রোল গ্রুপ যারা নিয়ন্ত্রণ ইঁদুর থেকে মল প্রতিস্থাপন পেয়েছে।

মল প্রতিস্থাপনের 19 দিন পরে (অ্যান্টিবায়োটিক গ্রুপে অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সা শেষ হওয়ার 26 দিন পরে) শেখার এবং স্মৃতিশক্তি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (n=12)। পঞ্চম পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) কন্ট্রোল গ্রুপে নিয়োগ করা হয়েছিল, (2) ট্রান্স-কন্ট্রোল গ্রুপ যারা কন্ট্রোল মাউস থেকে মল প্রতিস্থাপন পেয়েছে এবং (3) ট্রান্স-সার্জারি গ্রুপ যারা সার্জারি ইঁদুর থেকে ট্রান্সপ্লান্টেশন অফিস পেয়েছে। 

দ্বিতীয় পরীক্ষায় বর্ণিত হিসাবে মল প্রতিস্থাপন করা হয়েছিল। 16 S বিশ্লেষণের (n=10) জন্য মল প্রতিস্থাপনের 14 দিন পরে প্রাপকদের মল সংগ্রহ করা হয়েছিল। মল নমুনা সংগ্রহের 4 দিন পরে শেখার এবং স্মৃতিশক্তি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (n=17)। ষষ্ঠ পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) সার্জারি প্লাস নরমাল স্যালাইন গ্রুপে বরাদ্দ করা হয়েছিল যারা একবার ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন দ্বারা 200 μl নরমাল স্যালাইন (NS) পেয়েছিল। 4 সপ্তাহের জন্য এক সপ্তাহ এবং তারপরে অস্ত্রোপচার, (2) ব্যায়াম প্লাস নরমাল স্যালাইন প্লাস সার্জারি গ্রুপ যারা 200 μl NS দ্বারা ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন পেয়েছে সপ্তাহে একবার 4- সপ্তাহে ব্যায়াম 35-40% সর্বাধিক ক্ষমতা এবং তারপরে অস্ত্রোপচার, (3 ) ব্যায়াম প্লাসভ্যালেরিক অ্যাসিড প্লাস সার্জারি গ্রুপ যারা ভ্যালেরিক অ্যাসিড (200 mg/kg in200 μl) পেয়েছে সপ্তাহে একবার 4-সপ্তাহে ব্যায়াম করার সময় 35-40% সর্বোচ্চ ক্ষমতায় এবং তারপরে অস্ত্রোপচারের সময় ইনট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশন দ্বারা।

ইনজেকশনটি সপ্তাহের প্রথম ব্যায়ামের দিন সকালে দেওয়া হয়েছিল৷ অস্ত্রোপচারের দিনে একটি অতিরিক্ত ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল৷ আচরণগত (n=13) এবং জৈব রাসায়নিক (n=10) ফলাফলগুলি এই দ্বিতীয় পরীক্ষার হিসাবে মূল্যায়ন করা হয়েছিল৷ সপ্তম পরীক্ষায়, 13- সপ্তাহ বয়সী (23-27 গ্রাম ওজনের) পুরুষ C57BL/ 6 J ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে বরাদ্দ করা হয়েছিল (1) কন্ট্রোল গ্রুপে, (2) NS গ্রুপ যারা 4 μl এনএস পেয়েছে ইনট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন দ্বারা প্রতিদিন একবার টানা 4 দিন ধরে, এবং (3) ভ্যালেরিক অ্যাসিড গ্রুপ যারা 4 μlby ইন্ট্রাসরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশনে 4 মিগ্রা/কেজি পেয়েছে। একটানা 4 দিনের জন্য প্রতিদিন একবার ইনজেকশন। বাম এবং ডান সেরিব্রোভেন্ট্রিকলগুলি একটি বিকল্প সময়সূচীতে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল৷ ইনজেকশনের 4 দিন পরে শেখা এবং স্মৃতি মূল্যায়ন করা হয়েছিল (n=15)৷

অষ্টম পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) সার্জারি প্লাস ডাইমিথাইল সালফক্সাইড (DMSO) গ্রুপের জন্য বরাদ্দ করা হয়েছিল যারা অস্ত্রোপচারের দিন থেকে শুরু করে টানা 4 দিন ধরে প্রতিদিন একবার ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন দ্বারা DMSO প্রাপ্ত হয়েছিল, (2) সার্জারি প্লাস C3ar বিরোধী গ্রুপ যেগুলি C3ar 2015 পেয়েছে। ) অস্ত্রোপচারের দিন থেকে শুরু করে 4 দিনের জন্য প্রতিদিন একবার ইনট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশনের মাধ্যমে, (3) ব্যায়াম প্লাসডিএমএসও প্লাস সার্জারি গ্রুপ যারা ইনট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশনের মাধ্যমে DMSO প্রাপ্ত করেছে এবং সার্জারির দিন থেকে শুরু করে 35-এ 4-সপ্তাহের ব্যায়াম -40% সর্বাধিক ক্ষমতা, এবং (4) ব্যায়াম প্লাস C3ar অ্যাগোনিস্ট প্লাস সার্জারি গ্রুপ যেটি 35–40% সর্বোচ্চ ক্ষমতায় 4-সপ্তাহের ব্যায়ামের পরে সার্জারির দিন থেকে শুরু করে টানা 4 দিন ধরে প্রতিদিন একবার ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন দ্বারা C3 অ্যারাগোনিস্ট পেয়েছে . উপরে বর্ণিত (n=15) হিসাবে অস্ত্রোপচারের 4 দিন পর থেকে আচরণ পরীক্ষা শুরু করা হয়েছিল।

নবম পরীক্ষায়, ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) কন্ট্রোল গ্রুপ, (2) সার্জারি গ্রুপ, (3) সার্জারি প্লাস জিডিএনএফ গ্রুপের জন্য বরাদ্দ করা হয়েছিল যারা অস্ত্রোপচারের সময় জিডিএনএফবাই ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন পেয়েছিল এবং (4) সার্জারি প্লাস তাপ-নিষ্ক্রিয় জিডিএনএফ। যে গোষ্ঠীটি অস্ত্রোপচারের সময় ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন দ্বারা তাপ-নিষ্ক্রিয় জিডিএনএফ পেয়েছে। ELISA স্টাডির (n=12) জন্য অস্ত্রোপচারের পর 48 ঘণ্টায় হিপ্পোক্যাম্পি সংগ্রহ করা হয়েছিল। এক সপ্তাহের উপযোগী হওয়ার পর, 30-36 গ্রাম ওজনের পুরানো ইঁদুর (18-মাস বয়সী পুরুষ C57BL/6 Jmice) ব্যবহার করা হয়েছিল। তিনটি গবেষণা। প্রথম পরীক্ষায়, পুরানো ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে বরাদ্দ করা হয়েছিল (1) কন্ট্রোল গ্রুপ, (2) ব্যায়াম গ্রুপ যেখানে ইঁদুরের 35-40% সর্বোচ্চ ক্ষমতায় একটি 4- সপ্তাহের ব্যায়াম ছিল, (3) সার্জারি গ্রুপ, এবং (4) Exe+Sur গ্রুপ যেখানে অস্ত্রোপচারের আগে ইঁদুরের 35-40% সর্বোচ্চ ক্ষমতায় 4-সপ্তাহের ব্যায়াম ছিল। অস্ত্রোপচারের (n=12) 4 দিন পর থেকে শুরু হওয়া প্রাণীগুলি শেখার এবং স্মৃতি পরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল বা অস্ত্রোপচারের (n=10 বা 12) পরে 48 ঘণ্টায় ইমিউনোফ্লোরোসেন্টস্টেইনিংয়ের জন্য তাদের মস্তিষ্ক জৈব রাসায়নিক গবেষণার জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল। এবং অস্ত্রোপচারের 19 দিন পরে (n=6), এবং সার্জারির 19 দিন পরে গোলজিস্টেইনিংয়ের জন্য (n=8)।

অস্ত্রোপচারের (n=7) 7 দিন পরে SCFA পরিমাপের জন্য এবং অস্ত্রোপচারের 3 এবং 7 দিন পরে (n=8) বা শেষে 16 টি বিশ্লেষণের জন্য 4 দলের ইঁদুর থেকে রক্ত ​​এবং মল সংগ্রহ করা হয়েছিল। এর 4-সপ্তাহের ব্যায়াম প্রোটোকল বা প্রথম 2টি গ্রুপে সংশ্লিষ্ট সময়ে (n=16)। টিস্যু হারভেস্টিংয়ের জন্য ইঁদুরগুলি ছিল বিভিন্ন দল যা শেখার এবং স্মৃতি পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত হত। দ্বিতীয় পরীক্ষায়, পুরানো ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে (1) ট্রান্স-ওল্ড কন্ট্রোল + সার গ্রুপ এবং (2) ট্রান্স-ওল্ড এক্সি + সার গ্রুপের জন্য বরাদ্দ করা হয়েছিল। তরুণ প্রাপ্তবয়স্ক ইঁদুরের দ্বিতীয় পরীক্ষা। অস্ত্রোপচারের (n =10) 4 দিন পর থেকে শেখার এবং স্মৃতিশক্তি মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

তৃতীয় পরীক্ষায়, পুরানো ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে (1) সার্জারি প্লাস NS গ্রুপে নিয়োগ করা হয়েছিল; (2) ব্যায়াম প্লাস NS প্লাস সার্জারি গ্রুপ; এবং (3) ব্যায়াম প্লাস ভ্যালেরিক অ্যাসিড প্লাস সার্জারি গ্রুপ। তরুণ প্রাপ্তবয়স্ক ইঁদুরের ষষ্ঠ পরীক্ষায় বর্ণিত এই ইঁদুরগুলি ব্যায়াম কন্ডিশনিং এবং ভ্যালেরিক অ্যাসিড পেয়েছে। অস্ত্রোপচারের 4 দিন পর থেকে আচরণগত ফলাফল পরীক্ষা করা হয়েছিল (n=11)। উপরে বর্ণিত নমুনার আকার (n) প্রতিটি গোষ্ঠী/অবস্থায় এলোমেলো করা প্রাণীর সংখ্যা উপস্থাপন করে। এই সংখ্যক প্রাণী ছিল প্রতিটি পরীক্ষার অন্তত 3টি প্রতিলিপির সমষ্টি৷ প্রতিটি পরীক্ষায় কম্পিউটার-উত্পাদিত র্যান্ডমাইজেশন টেবিলের উপর ভিত্তি করে প্রাণীগুলিকে এলোমেলোভাবে গ্রুপে বিতরণ করা হয়েছিল৷

সর্বাধিক ব্যায়াম ক্ষমতা নির্ধারণ এবং ব্যায়াম প্রশিক্ষণ

অস্ত্রোপচারের আগে, {{0}}সপ্তাহ এবং 18-মাস বয়সী ইঁদুরগুলি পৃথক ইঁদুরের সর্বাধিক ব্যায়াম ক্ষমতা নির্ধারণের পরে একটি 4- সপ্তাহের ট্রেডমিল অ্যারোবিক ব্যায়ামের সংস্পর্শে এসেছিল। এই সংকল্পটি পূর্বে বর্ণিত [47, 48] এর অনুরূপভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। সংক্ষেপে, প্রথম দিনে ইঁদুরগুলি ট্রেডমিলের সাথে 25 V, 0.3mA, এবং 2 Hz-এ শক গ্রিডের প্রাথমিক সেটিংস এবং 10 মিনিটের জন্য গতি এবং প্রবণতা শূন্যে অভ্যস্ত হয়েছিল। তারপরে ট্রেডমিলের গতি 10 সেমি/সেকেন্ডে বাড়ানো হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য 50 এ প্রবণতা সেট করা হয়েছিল। এরপরে, ট্রেডমিলের গতি এবং প্রবণতা 5 মিনিটের জন্য 15 সেমি/বালি 100 এ বাড়ানো হয়েছিল।

The speed was then increased by 5 cm/s every 5 min to an average maximal speed of 70 cm/s in young mice and 60 cm/s in old mice (around 65–75 cm/s and 55–65 cm/s, respectively), as they reached the criteria for exercise-induced exhaustion. These criteria were: (1) 10 consecutive seconds on the electric grid; (2) spending >50% সময় দ্যগ্রিডে থাকে; এবং/অথবা (3) ম্যানুয়াল প্রোডিং এর জন্য অনুপ্রেরণার অভাব। একবার এই মানদণ্ডগুলির এক বা একাধিক পূরণ হওয়ার পরে মাউসটিকে সংশ্লিষ্ট লেন থেকে অবিলম্বে সরানো হয়েছিল৷ পরের দিন, ইঁদুরগুলি একই ট্রেডমিলে গড় সর্বোচ্চ গতির অর্ধেক (তরুণ ইঁদুরে 35 সেমি/সেকেন্ড বা বৃদ্ধ ইঁদুরে 30 সেমি/সেকেন্ড) এবং 100 প্রবণতায় দৌড়েছিল যতক্ষণ না তারা আবার ক্লান্তির মাপকাঠিতে পৌঁছায়, এবং এর সময়কাল ক্রমাগত ব্যায়াম প্রতিটি মাউসের সর্বাধিক ব্যায়াম ক্ষমতা হিসাবে রেকর্ড করা হয়েছিল। এই দুটি প্রোটোকলের পরে, অনুশীলনের পরে লক্ষণীয় আক্রমণাত্মক আচরণ এড়াতে ইঁদুরগুলিকে 30 মিনিটের জন্য আলাদাভাবে রাখা হয়েছিল।

After resting for 2 days, mice assigned to exercise training groups were subjected to a 4-week protocol of forced treadmill running at 35–40%, 55–60%, or 75–80% of the maximal capacity, respectively, for 5 days a week. Mice that were shocked for >5% of the total daily exercise time in 2 consecutive days or >টানা 3 দিনে মোট সময়ের 3% বাদ দেওয়া হবে।

ব্যায়াম গোষ্ঠীগুলিকে অনুশীলনের গ্রুপগুলির মতো পরীক্ষাগুলির একই সেটে প্রায় 30-40 মিনিটের জন্য একটি নন-মুভিং ট্রেডমিলে রাখা হয়েছিল। তারা মোট 5 সেকেন্ডের জন্য 10টি শক পেয়েছিল, একটি ব্যায়াম গ্রুপের ইঁদুররা একটি নন-মুভিং ট্রেডমিলে থাকার সময় প্রতিদিন প্রাপ্ত শকগুলির গড় পরিমাণ। যদি পরীক্ষার একটি সেটে একটি ব্যায়াম গ্রুপ না থাকে তবে পরীক্ষার সেটে কোনও ইঁদুর শক পায়নি।

অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সা

প্রতিস্থাপিত মাইক্রোবায়োটার উপনিবেশকে সহজতর করার জন্য, প্রাপকদেরকে আমাদের এবং অন্যান্যদের দ্বারা বর্ণিত তাদের আসল অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা নির্মূল করার জন্য পরপর 7 দিনের জন্য প্রতিদিন একবার অ্যান্টিবায়োটিক চিকিত্সা দেওয়া হয়েছিল [11, 36]। সংক্ষেপে, প্রথম দিনে গ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজ দ্বারা 10% ম্যাগনেসিয়াম সালফেট (200 ul/10 গ্রাম, 3 ঘন্টা ব্যবধানে দুবার) দিয়ে শোধন করার পরে, C57BL/6 J ইঁদুর অ্যামোক্সিসিলিন/ক্লাভুল্যানিক অ্যাসিড (200 mg/kg), মেট্রোনিডাজল (200 mg/kg) পেয়েছে। 200 মিলিগ্রাম/কেজি) এবং সেফাজোলিন (2 গ্রাম/কেজি) গ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজ অ্যান্ডনিমা দ্বারা (গ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজের জন্য 300 উল এবং এনিমার জন্য 400 উল এনএস) দিনে একবার পরপর 7 দিন, এবং অ্যামোক্সিসিলিন/ক্লাভুলানিকেসিড (20 মিলিগ্রাম/কেজি) ), মেট্রোনিডাজল (20 মিলিগ্রাম/কেজি) এবং সেফাজোলিন (300 মিলিগ্রাম/কেজি) 200 উল এনএসে প্রতিদিন ইন্ট্রাপেরিটোনিয়াল ইনজেকশনের মাধ্যমে একই 7 দিনের জন্য (বিকাল 4টা থেকে 5টা পর্যন্ত)। ব্যাকটেরিয়া ক্রস-দূষণ প্রতিরোধ করার জন্য, একটি বায়ুচলাচল হুডে পরিষ্কার গাউন এবং গ্লাভস পরিহিত প্রযুক্তিবিদদের দ্বারা মাউস পরিচালনা এবং প্রতিদিন খাঁচা এবং জলের বোতল পরিবর্তন করা হয়েছিল। প্রভাব নির্ধারণের জন্য 16 S বিশ্লেষণের জন্য শেষ চিকিত্সার 24 ঘন্টা পরে এইমাসের মল সংগ্রহ করা হয়েছিল।

মল প্রতিস্থাপন

নিয়ন্ত্রিত ইঁদুর থেকে মলত্যাগের 30 মিনিটের মধ্যে সংগ্রহ করা তাজা মল ছুরি, 4- সপ্তাহের ব্যায়াম শেষ হওয়ার পরপরই ইঁদুর, অস্ত্রোপচারের 2 থেকে 8 দিন পর 100 মিলিগ্রাম/মিলি জীবাণুমুক্ত স্যালাইন দিয়ে পাতলা করা হয়। প্রতিটি পরীক্ষামূলক অবস্থার সাথে -10 দাতাদের স্যালাইনে একসাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং পুনরায় স্থগিত করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, মল পদার্থটি 5 মিনিটের জন্য ঘূর্ণি-মিশ্রিত ছিল এবং তারপরে হজম না হওয়া খাবার এবং কণা পদার্থগুলি অপসারণের জন্য একটি 70 μm নাইলন কোষের ছাঁকনির মধ্য দিয়ে চলে যায়। গ্রহীতা পরপর 7 দিন ধরে অ্যান্টিবায়োটিকের শেষ ডোজের 24 ঘন্টা থেকে সকালে গ্যাস্ট্রিক গ্যাভেজ দ্বারা 500 ul অনুরূপ মল দ্রবণ এবং বিকালে 600 ul এনিমা দ্বারা প্রাপ্ত করেছিলেন। প্রতিস্থাপিত ইঁদুরগুলি মল প্রতিস্থাপনের পরে 2 সপ্তাহ ধরে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল আগে তারা 16 এস বিশ্লেষণ এবং অস্ত্রোপচারের জন্য মল সংগ্রহের অধীন ছিল।

এনেস্থেশিয়া এবং সার্জারি

অস্ত্রোপচারটি ক্যারোটিড ধমনী এক্সপোজার বাম ছিল যেমন আমরা আগে বর্ণনা করেছি [৬]। সংক্ষেপে, ইঁদুরকে 2% আইসোফ্লুরেন দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং প্রক্রিয়া চলাকালীন 100% অক্সিজেন সরবরাহ করা ফেসমাস্ক দিয়ে স্বতঃস্ফূর্ত শ্বাস-প্রশ্বাস নেওয়া হয়েছিল। একটি গরম কম্বলের সাহায্যে মলদ্বারের তাপমাত্রা 37 ডিগ্রীতে নিরীক্ষণ এবং বজায় রাখা হয়েছিল। একটি 2-সেমি মিডলাইন নেক ছেদ এবং 1-সেমি লম্বা সাধারণ ধমনী এক্সপোজার সহ নরম টিস্যু ব্যবচ্ছেদ করা হয়েছিল ভাগাস স্নায়ুর কোনও ক্ষতি ছাড়াই মাউসটিকে আইসোফ্লুরেন দ্বারা কমপক্ষে 20 মিনিটের জন্য অবেদন দেওয়ার পরে। তারপর ক্ষতটি সেচ করা হয় এবং একটি 4-0 সার্জিক্যাল সিউচার ব্যবহার করে বন্ধ করা হয়। অস্ত্রোপচারের পদ্ধতিটি আন্ডারস্টাইল অবস্থায় সম্পাদিত হয়েছিল এবং প্রায় 15 মিনিট অল্প বয়সী ইঁদুর এবং 12 মিনিট ইনল্ড ইঁদুরে স্থায়ী হয়েছিল। সাধারণ এনেস্থেশিয়ার মোট সময়কাল ছিল 2 ঘন্টা। অস্ত্রোপচারের পরে, সমস্ত প্রাণী 3 মিলিগ্রাম/কেজিবিউপিভাকেনের একটি সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন পেয়েছে। অ্যানেস্থেসিয়ার সময় পায়ের আঙুল চিমটি করার কোনও প্রতিক্রিয়া দেখা যায়নি।

ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন

উপরে বর্ণিত হিসাবে, ইঁদুরের কিছু গ্রুপ ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন পেয়েছে। সংক্ষেপে, এই ইঁদুরগুলি প্রবণ অবস্থানে একটি স্টেরিওট্যাকটিক হেড ফ্রেমে স্থাপন করা হয়েছিল। ইনজেকশন সাইটটি এইভাবে অবস্থিত ছিল: 1।00 মিমি মিডিয়ালেটারাল,−0.3 মিমি অ্যান্টিরোপোস্টেরিয়ার ব্রেগমা থেকে, এবং −2.5 মিমি ডরসোভেন্ট্রাল গভীরতা। সার্জারিতে মাইসেথে প্লাস জিডিএনএফ গ্রুপ 1{{ এর একটি ইন্ট্রাসেরেব্রোভেন্ট্রিকুলার ইনজেকশন পেয়েছে 20}} ug/kg রিকম্বিন্যান্ট মাউস GDNF in 3 ul phosphate-buffered saline(PBS) যেমন পূর্ববর্তী গবেষণায় বর্ণনা করা হয়েছে [6, 26], এবং সার্জারি প্লাসহিট-ইনঅ্যাক্টিভেটেড GDNF গ্রুপের ইঁদুরগুলি তাপ-বিকৃত (5 মিনিট 1000C) ইনজেকশন পেয়েছে ) GDNF সমাধান। অস্ত্রোপচারে ইঁদুর প্লাস C3ar বিরোধী দল 3 ul PBS-এ 10 ug/kg SB290157 পেয়েছে যার মধ্যে 5% DMSO আছে 0 h, 24 h,48 h, এবং 72 h অস্ত্রোপচারের পরে। অনুশীলনে ইঁদুর প্লাস C3ar অ্যাগোনিস্ট এবং সার্জারি গ্রুপ 3 উল পিবিএস-এ 1 ug/kg C3ar অ্যাগোনিস্ট পেয়েছে যার মধ্যে SB290157 এর মতো একই সময়ে 5% DMSO রয়েছে। ষষ্ঠ পরীক্ষায় ভ্যালেরিক অ্যাসিড গ্রুপের ইঁদুররা পরপর 4 দিন ধরে 4 μl এ 4 মিলিগ্রাম/কেজি ভ্যালেরিক অ্যাসিড পেয়েছে।

আচরণগত পরীক্ষা

শেখার এবং স্মৃতির মূল্যায়ন করা হয়েছিল অভিনব বস্তুর স্বীকৃতি এবং বার্নস মেজ পরীক্ষা দ্বারা। সমস্ত আচরণগত পরীক্ষা 10:00 am−5:00pm একটি শব্দ-বিচ্ছিন্ন ঘরে পরিচালিত হয়েছিল৷ শেখার এবং মেমরি পরীক্ষায় ব্যবহৃত ইঁদুরগুলি এই পরীক্ষার প্রভাব এড়াতে কোনও জৈব রসায়ন গবেষণার জন্য ব্যবহার করা হয়নি।

অভিনব বস্তু স্বীকৃতি পরীক্ষা

যেমনটি আমরা এবং অন্যরা [20, 49, 50] এর আগে বর্ণনা করেছি, অস্ত্রোপচারের 4 দিন পরে ইঁদুরগুলিকে 5 মিনিটের জন্য একটি খোলা মাঠের চেম্বারে রাখা হয়েছিল। পরীক্ষাটি নিম্নলিখিত উপায়ে সম্পাদিত হয়েছিল। শেখার দিনে একই বস্তু দুটি চেম্বারের সংলগ্ন কোণে স্থাপন করা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে চেম্বারে রাখা হয়েছিল এবং তাদের পিঠ বস্তুর দিকে ঘুরিয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং 5 মিনিটের জন্য অবাধে চেম্বারটি অন্বেষণ করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। দুটি বস্তুর উপর মোট অনুসন্ধানের সময় হলে প্রাণীটিকে নির্মূল করা হয়েছিল<5 s. One of the objects was replaced by a novel object 30 seconds or 24 hours later. The mouse was put into the chamber with their backs turned toward the objects and allowed to explore for 5 min. Animal behavior was recorded by ANY-maze behavioral tracking software (Stoelting Co., IL). Exploratory time of new (T2) and old (T1) objects within 5 min was recorded and the memorization ability of the mouse was quantified by discrimination index: DI = T2 / (T1 + T2). The DIs at 30 s and 24 hours after the training reflected the instant and long-term memory, respectively. The field was always provided with even light, and the objects and fields were cleaned with 70% ethanol after each test.

বার্নস গোলকধাঁধা

অস্ত্রোপচারের সাত দিন পরে, প্রাণীগুলিকে তাদের স্থানিক শিক্ষা এবং স্মৃতি পরীক্ষা করার জন্য বার্নস গোলকধাঁধায় পরিণত করা হয়েছিল যেমন আমরা পূর্বে বর্ণনা করেছি [6, 49]। বার্নস গোলকধাঁধা হল একটি বৃত্তাকার প্ল্যাটফর্ম যার 20টি সমান দূরত্বের গর্ত (SDInstruments, San Diego, CA)। একটি গর্ত একটি অন্ধকার চেম্বারের সাথে সংযুক্ত ছিল যাকে লক্ষ্য বাক্স বলা হত। বার্নস গোলকধাঁধার মাঝখানে প্রাণী স্থাপন করে পরীক্ষা শুরু হয়েছিল। প্ল্যাটফর্মে বিরূপ শব্দ (85 dB) এবং উজ্জ্বল আলো (200W) শেড ইঁদুরগুলিকে এই বাক্সটি খুঁজে পেতে উত্সাহিত করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল৷ 4 দিনের প্রশিক্ষণের পরে, তাদের রেফারেন্স মেমরিটি 5 ও 12 তারিখে পরীক্ষা করা হয়েছিল৷ এই সময়কালে কোনও পরীক্ষা করা হয়নি৷ দিন 5 থেকে 12 দিন। প্রতিটি ট্রায়ালের সময় টার্গেট বক্সে প্রবেশ করার স্থিরতা একটি ANYMaze ভিডিও ট্র্যাকিং সিস্টেম (SD Instruments) দ্বারা রেকর্ড করা হয়েছিল।

For more information:1950477648nn@gmail.com