প্রদাহ এবং কিডনি রোগের চিকিত্সার জন্য সিস্টানচে: সিস্টিনোপ্যাথিতে রেনাল জড়িত প্রদাহের প্যাথোজেনিক ভূমিকার কারণ কী?

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com

গ্যালেক্টিন-3 এবং সিস্টিনোসিনের মধ্যে মিথস্ক্রিয়া সিস্টিনোসিসের কিডনি জড়িত হওয়ার ক্ষেত্রে প্রদাহের একটি প্যাথোজেনিক ভূমিকা উন্মোচন করে

তাতিয়ানা লবরি^1,2 ইত্যাদি

প্রদাহঅনেক ব্যাধির প্যাথোজেনেসিসের সাথে জড়িত। যাইহোক, অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া প্রায়ই অজানা. এখানে, আমরা কিনা পরীক্ষাসিস্টিনোসিস, প্রোটিন জড়িতসিস্টিনোসিস, গ্যালেক্টিনের একটি গুরুত্বপূর্ণ নিয়ন্ত্রক^-3, b-galactosidase বাইন্ডিং প্রোটিন পরিবারের সদস্য, সময়প্রদাহ. সিস্টিনোসিসএটি একটি লাইসোসোমাল স্টোরেজ ডিসঅর্ডার এবং সিস্টিনোসিসের সর্বব্যাপী প্রকাশ সত্ত্বেও,কিডনিরোগ দ্বারা প্রভাবিত প্রাথমিক অঙ্গ.সিস্টিনোসিসলাইসোসোমাল স্থানীয়করণ এবং গ্যালেক্টিনের অবক্ষয়-3 উন্নত করতে পাওয়া গেছে। Ctns এ^–/–ইঁদুর, এর একটি মাউস মডেলসিস্টিনোসিস, গ্যালেক্টিন-3 এর মধ্যে অতিমাত্রায় প্রকাশ করা হয়কিডনি. সিস্টিনোটিক ইঁদুরে গ্যালেক্টিন-3 এর অনুপস্থিতি প্যাথলজিক রেনাল ফাংশন এবং গঠনকে প্রশমিত করে এবং Ctns-এর কিডনিতে ম্যাক্রোফেজ/মনোসাইট অনুপ্রবেশ হ্রাস করে^–/–Gal3^–/–Ctns এর তুলনায় ইঁদুর^–/– ইঁদুর এই ডেটা দৃঢ়ভাবে পরামর্শ দেয় যে গ্যালেক্টিন-3 মধ্যস্থতা করেপ্রদাহসংযুক্তকিডনিসিস্টিনোসিসে রোগের অগ্রগতি। তদ্ব্যতীত, গ্যালেক্টিন-3 প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন মনোসাইট কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্ট প্রোটিন-1 এর সাথে মিথস্ক্রিয়া করতে পাওয়া গেছে, যা মনোসাইট/ম্যাক্রোফেজ নিয়োগকে উদ্দীপিত করে এবং Ctns–/– ইঁদুরের সিরামে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে বলে প্রমাণিত হয়েছে। এবং সঙ্গে রোগীদেরসিস্টিনোসিস. এইভাবে, আমাদের অনুসন্ধানগুলি প্রদাহে সিস্টিনোসিস এবং গ্যালেক্টিন{0}} মিথস্ক্রিয়ার জন্য একটি নতুন ভূমিকা তুলে ধরে এবং এর জন্য একটি অতিরিক্ত যান্ত্রিক ব্যাখ্যা প্রদান করেকিডনিসিস্টিনোসিস রোগ। এর ফলে নতুন ওষুধের লক্ষ্য চিহ্নিত করতে বিলম্ব হতে পারেসিস্টিনোসিসঅগ্রগতি

কীওয়ার্ড:দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ; সিস্টিনোসিস; গ্যালেক্টিন-3;প্রদাহ; মনোসাইট কেমোট্র্যাক্ট্যান্ট প্রোটিন-1

cistanche দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ এবং cystinosis চিকিত্সা করতে পারে

প্রদাহের মূল কারণ হল নাইট্রিক অক্সাইড প্রদাহজনক কোষ তৈরি করতে পারে।সিস্তানচেএকটি মূল্যবান চীনা ভেষজ ঔষধ. এর সক্রিয় উপাদানগুলি নাইট্রিক অক্সাইডের নিঃসরণকে বাধা দিতে পারে এবং প্রদাহ এবং কিডনি রোগ প্রতিরোধ ও চিকিত্সায় ভূমিকা পালন করতে পারে।

অনুবাদমূলক বিবৃতি

চিকিত্সা সত্ত্বেও, রোগীরা এখনও শেষ পর্যায়ে কিডনি ব্যর্থতার দিকে অগ্রসর হয়। এই গবেষণায়, আমরা দেখিয়েছি যে এর অনুপস্থিতিসিস্টিনোসিসপ্রতিবন্ধী গ্যালেক্টিন-3 (গাল-3) লাইসোসোমাল অবক্ষয় ঘটায়, যার ফলেপ্রদাহএবং এর অগ্রগতিদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগভিতরেসিস্টিনোসিস. এই ফলাফলগুলি সম্ভাব্য থেরাপিউটিক লক্ষ্যগুলির উপর নতুন দৃষ্টিভঙ্গি উন্মুক্ত করে যা রোগীদের কিডনির অবক্ষয় সীমিত বা বিলম্বিত করতে পারেসিস্টিনোসিস. যেমন, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি ড্রাগ এবং গ্যাল-3 এর ইনহিবিটর যেমন ননস্টেরয়েডাল অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি ড্রাগস বা ইন্ডোমেথাসিন সিস্টিনোসিসে রেনাল প্যাথোজেনেসিসকে উন্নত করতে পারে।

প্রদাহআঘাত বা সংক্রমণের জন্য একটি জীবের স্বাভাবিক তীব্র প্রতিক্রিয়া,¹কিন্তু দীর্ঘস্থায়ীপ্রদাহটিস্যু ক্ষতির সাথে যুক্ত। দীর্ঘস্থায়ী রোগের ক্ষেত্রে, যেমন ডায়াবেটিস, ক্ষতিগ্রস্ত টিস্যুগুলি ইমিউন সিস্টেমকে সক্রিয় করে, যা ক্রমাগত প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়ার দিকে পরিচালিত করে এবং অবশেষে, টিস্যুর অবক্ষয় ঘটে।² সাইটোকাইনগুলি এর মূল মডুলেটরপ্রদাহএবং সক্রিয় বা সমাধান করতে সক্ষমপ্রদাহপ্রক্রিয়া.3 রোগীদের মধ্যেদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ(CKD), সাইটোকাইনগুলির উচ্চতর প্লাজমা ঘনত্ব (ইন্টারলিউকিন [IL]-6 এবং টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর-এ) এবংপ্রদাহমার্কারগুলি (সি-রিঅ্যাকটিভ প্রোটিন, IL-6, হায়ালুরোনান, এবং নিওপ্টেরিন) শেষ পর্যায়ে কিডনি রোগের অগ্রগতির সাথে যুক্ত৷ 4 নির্দিষ্ট মধ্যস্থতাকারীদের বোঝা যা প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াগুলিকে ট্রিগার করে অবক্ষয়জনিত ক্ষতি প্রতিরোধ করার জন্য উপযুক্ত ওষুধের লক্ষ্যগুলি আবিষ্কার করতে সহায়তা করে৷ .

সিস্টিনোসিসএটি একটি অটোসোমাল-রিসেসিভ বিপাকীয় রোগ যা লাইসোসোমাল স্টোরেজ ডিসঅর্ডার পরিবারের অন্তর্গত এবং সমস্ত অঙ্গের মধ্যে সিস্টাইন জমা হওয়ার দ্বারা চিহ্নিত করা হয়।⁵ জিন ত্রুটিপূর্ণসিস্টিনোসিস, CTNS, লাইসোসোমাল সিস্টাইন/প্রোটন সহ-পরিবহনকারী, সিস্টিনোসিসকে এনকোড করে।^6,7 যদিও CTNS সর্বব্যাপী প্রকাশ করা হয়,কিডনিআক্রান্ত ব্যক্তিদের মধ্যে প্রথম অঙ্গসিস্টিনোসিস. রোগীরা সাধারণত তাদের জীবনের প্রথম বছরে ফ্যানকোনি সিনড্রোমে উপস্থিত থাকে, যা গুরুতর তরল এবং ইলেক্ট্রোলাইট ব্যাঘাত, দুর্বল বৃদ্ধি এবং রিকেট দ্বারা চিহ্নিত করা হয়।⁸CKD পরবর্তীকালে বিকশিত হয়, যা কিডনি রোগের শেষ পর্যায়ে অগ্রসর হয় এবং প্রয়োজন হয়কিডনিপ্রতিস্থাপন সমস্ত টিস্যুতে সিস্টাইন জমে অবশেষে বহু অঙ্গের কর্মহীনতার দিকে পরিচালিত করে; রোগীরা ফটোফোবিয়া এবং অন্ধত্ব, হাইপোথাইরয়েডিজম, হাইপোগোনাডিজম, ডায়াবেটিস, মায়োপ্যাথি এবং কেন্দ্রীয় স্নায়ুতন্ত্রের অবনতি অনুভব করে।⁹ C57BL/6 পটভূমিতে, একটি নকআউট মাউস মডেল (Ctns^–/–) 10 সিস্টিনোটিক রোগীদের কিডনি ফেনোটাইপ প্রতিলিপি করে,¹¹ পাশাপাশি কর্নিয়াতে সিস্টাইন স্ফটিক জমা হয়¹²এবং থাইরয়েডের কর্মহীনতা।¹³

বর্তমান গবেষণায়, আমরা একটি নতুন ভূমিকা প্রকাশ করিসিস্টিনোসিসভিতরেপ্রদাহগ্যাল-3 এর সাথে এর মিথস্ক্রিয়া মাধ্যমে। গ্যাল-3 লেকটিন এবং বি-গ্যালাকটোসাইড-বাইন্ডিং প্রোটিন পরিবারের সদস্য ²¹ এবং একাধিক জৈবিক ফাংশনের সাথে জড়িত, সহপ্রদাহ.²²এর প্রেক্ষাপটেকিডনিরোগ, গ্যাল-3 নিষেধাজ্ঞা প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি মার্কার এক্সপ্রেশন এবং রেনাল ফাইব্রোসিস কমাতে এবং হাইপারালডোস্টেরনিজম, হাইপারটেনশন, বা স্থূলতা মডেলগুলিতে গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ হারের হ্রাস রোধ করতে দেখানো হয়েছিল।^23–26এখানে আমরা প্রমাণ প্রদান করি যে, মধ্যেসিস্টিনোসিস, অভাবেসিস্টিনোসিসএর মধ্যে গ্যাল-3 অতিরিক্ত এক্সপ্রেশনের দিকে নিয়ে যায়কিডনি, ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ এবং CKD অগ্রগতি বৃদ্ধি। উপরন্তু, আমরা মোনোসাইট কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্ট প্রোটিন-1 (MCP-1) একটি সম্ভাব্য মধ্যস্থতাকারী হিসাবে চিহ্নিত করি, ড্রাগ থেরাপির জন্য নতুন জিন লক্ষ্য প্রকাশ করে৷ ফলাফল গ্যাল-3 তার কার্বোহাইড্রেট স্বীকৃতি ডোমেনের মাধ্যমে সিস্টিনোসিসের সাথে ইন্টারঅ্যাক্ট করে নির্দিষ্ট মিথস্ক্রিয়া সনাক্ত করতে অংশীদাররা পরিমাণগত ভর স্পেকট্রোমেট্রি ব্যবহার করে, ম্যাডিন-ডার্বি ক্যানাইনকিডনি(MDCK) কোষগুলিকে স্থিরভাবে সিস্টিনোসিস-সবুজ এফএল ফ্লুরোসেন্ট প্রোটিন (GFP) ফিউশন প্রোটিন প্রকাশ করার জন্য একটি লেন্টিভাইরাল গঠনের সাথে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল। পূর্বে প্রকাশিত ভ্যাক্যুলার-টাইপ Hþ অ্যাডেনোসিন ট্রাইফসফেটেসের 9টি সাবইউনিট ছাড়াও,¹⁹গ্যাল-3 এর সাথে মিথস্ক্রিয়াকারী প্রোটিনগুলির মধ্যে একটি হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিলসিস্টিনোসিস(চিত্র 1a)। এই মিথস্ক্রিয়াটি সহ-ইমিউনোপ্রেসিপিটেশন দ্বারা এবং ওয়েস্টার্ন ব্লটিং (চিত্র 1 বি এবং সি) দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। উপরন্তু, আমরা গ্যাল-3 এবং এর মধ্যে মিথস্ক্রিয়া দেখিয়েছিসিস্টিনোসিসপ্রোটিনের সি-টার্মিনাল টেইলে স্থানীয়কৃত গ্যাল-3 কার্বোহাইড্রেট রিকগনিশন ডোমেন (CRD) দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়েছিল। মিথস্ক্রিয়াটি গ্যালেক্টিন-কার্বোহাইড্রেট মিথস্ক্রিয়াগুলির একটি শক্তিশালী প্রতিরোধক (চিত্র 1 ডি) থায়োডিগালাক্টোসাইড দ্বারা বাধা দেওয়া হয়েছিল। সমস্ত গ্যালেকটিনের মতো, গ্যাল-3-এর গ্লাইকোসিলেটেড প্রোটিনের সাথে সম্পর্ক রয়েছে, 21 তাই সম্ভবত গ্যাল-3-এর সাথে মিথস্ক্রিয়া প্রোটিনের ইন্ট্রালাইসোসোমাল এন-টার্মিনাল লেজে অবস্থিত সিস্টিনোসিস গ্লাইকোসিলেটেড ময়েটির মাধ্যমে ঘটে।²⁷

সিস্টিনোসিন গ্যাল-3 লাইসোসোমাল স্থানীয়করণ এবং অবক্ষয় বাড়ায়

সাথে ইন্টারঅ্যাক্ট করার সময় গ্যাল-3 এর সম্ভাব্য লাইসোসোমাল স্থানীয়করণ যাচাই করতেসিস্টিনোসিস, আমরা দেখিয়েছি যে গ্যাল-3, যেমন ক্যাথেপসিন ডি (একটি ইন্ট্রালাইসোসোমাল প্রোটিস), প্রোটিনেস কে দ্বারা হজম থেকে সুরক্ষিত ছিল, যেখানে লাইসোসোমগুলি ট্রাইটন এক্স- 100 (চিত্র 2a এবং পরিপূরক চিত্র S1)। অনুরূপ তথ্য মাউস লিভার থেকে বিচ্ছিন্ন লাইসোসোমে প্রাপ্ত হয়েছিল, যা ভিভোতে গ্যাল-3 এর লাইসোসোমাল স্থানীয়করণ নিশ্চিত করে (চিত্র 2b এবং c)। কারণ সনাক্ত করার জন্য একটি নির্ভরযোগ্য অ্যান্টিবডির অনুপস্থিতিসিস্টিনোসিস, ইমিউনোস্টেইনিং করা হয়েছিলসিস্টিনোসিস-GFP–এন্টি-গাল-3 অ্যান্টিবডি সহ MDCK সেল লাইন প্রকাশ করা। এটি লাইসোসোমের লুমেনে গ্যাল-3 এর উপস্থিতি নিশ্চিত করেছে, যেখানে সিস্টিনোসিস-জিএফপি এবং ল্যাম্প-2 (একটি লাইসোসোমাল ট্রান্সমেমব্রেন প্রোটিন) শুধুমাত্র ভেসিকলের ঝিল্লিতে পাওয়া গেছে (চিত্র 2d)।

যদি তদন্ত করতেসিস্টিনোসিনগাল-3 ট্র্যাফিকিংয়ে জড়িত ছিল, আমরা উভয়ের গতিশীলতা বিশ্লেষণ করেছিসিস্টিনোসিসএবং গ্যাল-3–ওয়াইল্ড-টাইপ (WT) এবং Ctns থেকে মাউস ভ্রূণীয় ফাইব্রোব্লাস্ট (MEFs)-এ ডুয়াল-কালার লাইভ-সেলের মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন FL ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে ইতিবাচক ভেসিকেল^–/–ইঁদুর CTNS-DsRed এবং Gal-3–GFP উভয়ই প্রকাশ করে। আমাদের বিশ্লেষণ তা নিশ্চিত করেছেসিস্টিনোসিসএবং গ্যাল-3 মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন FL ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি জোনে (চিত্র 2e) এই অণুগুলির অনুরূপ স্থানিক বিতরন দ্বারা যাচাইকৃত Ctns–/– MEF-তে সত্যিকারের সমষ্টিকরণের মধ্য দিয়ে যায়। WT MEF-তে ডেটা একই রকম ছিল (ডেটা দেখানো হয়নি)। অধিকন্তু, যখন শুধুমাত্র Gal- 3–GFP দিয়ে স্থানান্তরিত এমইএফগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, তখন সাইটোপ্লাজমে গ্যাল-3–জিএফপি পাওয়া গিয়েছিল এবং CTNS-DsRed-এর সাথে সহ-ট্রান্সফেকশনের বিপরীতে কোনও স্বতন্ত্র ভেসিকুলার গঠন পরিলক্ষিত হয়নি। উপাত্ত দেখাচ্ছে না).

এই তথ্যগুলি 293T কোষে নিশ্চিত করা হয়েছিল, যেখানে সাইটোপ্লাজমের একটি শক্তিশালী GFP সংকেত পরিলক্ষিত হয়েছিল শুধুমাত্র Gal-3–GFP প্রকাশ করে, যেখানে কোষগুলিতে Gal-3–GFP এবং উভয়ই প্রকাশ করেসিস্টিনোসিন-DsRed, Gal-3–GFP প্রধানত cystinosis-DsRed-এক্সপ্রেসিং লাইসোসোমের মধ্যে স্থানীয়করণ করা হয়েছিল (চিত্র 3a)। অধিকন্তু, গ্যাল-3-Gal-3–GFP একা বা Gal- 3–GFP এবং CTNS-DsRed, এবং Gal-3–GFP এবং DsRed দ্বারা স্থানান্তরিত কোষগুলিতে গ্যাল-3 প্রোটিন এক্সপ্রেশনের পরিমাণ নির্ধারণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, Gal-3–GFP একা বা DsRed (চিত্র 3b) দিয়ে স্থানান্তরিত কোষের তুলনায় CTNS-DsRed এর সাথে সহ-স্থানান্তরিত কোষে উল্লেখযোগ্যভাবে কম Gal-3–GFP প্রোটিন দেখায়। সব মিলিয়ে, এই ফলাফলগুলি যে ইঙ্গিত করেসিস্টিনোসিনগ্যাল-3 এর লাইসোসোমাল স্থানীয়করণ এবং অবনতি বাড়ায়। সিস্টিনোসিনকে CMA-তে জড়িত দেখানো হয়েছে। 28 হিট শক 70 kDa প্রোটিন (Hsc70) LAMP2A-নির্ভর পদ্ধতিতে লাইসোসোমাল লুমেনে মেমব্রেন জুড়ে সাবস্ট্রেট প্রোটিনকে উন্মোচন ও স্থানান্তরিত করতে সাহায্য করে CMA-তে অংশগ্রহণ করে। 29,30 কারণ গ্যাল{ {8}}-কে CMA দ্বারা অবনমিত করার প্রস্তাব করা হয়েছিল, 31 আমরা সিস্টিনোটিক MEF-তে Hsc70-এর সাথে Gal{10}}-এর স্থানীয়করণের তদন্ত করেছি। কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি বিশ্লেষণ WT (ডেটা দেখানো হয়নি) এবং Ctns উভয় ক্ষেত্রেই Hsc70- ইতিবাচক কাঠামোতে Gal-3–GFP-এর সমষ্টিকরণ নিশ্চিত করেছে^–/–কোষ (চিত্র 3c), Hsc70 এর সাথে Gal-3-এর সহ-পরিবহনকে সমর্থন করে এবং পরামর্শ দেয় যে লাইসোসোমাল অভ্যন্তরীণকরণ কিন্তু চ্যাপেরোন দ্বারা গ্যাল-3 সনাক্তকরণে ত্রুটিপূর্ণসিস্টিনোসিস.

গ্যাল-3 Ctns-এ কিডনি প্রদাহের সাথে জড়িত^–/–ইঁদুর

গ্যাল-3 এর ভূমিকা অধ্যয়ন করতেসিস্টিনোসিসভিভোতে, আমরা উভয় ক্ষেত্রেই একটি ডবল নকআউট মাউস মডেল তৈরি করেছিসিস্টিনোসিনএবং গাল-3 (Ctns^–/–গাল-3^–/–ইঁদুর)। WT, Ctns^–/–, এবং গাল-3^–/–ইঁদুর নিয়ন্ত্রণ বিষয় হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। C57BL/6 Ctns-এ^–/–ইঁদুর, বৃক্কের অসামঞ্জস্যগুলি প্রায় 10 মাস বয়সে দেখা দেয়। তাই, 8 থেকে 9 মাস বয়সে গবেষণা করা হয়েছিল, যখনকিডনিঅসঙ্গতিগুলি সনাক্ত করা শুরু হয় এবং 12 থেকে 15 মাসের মধ্যে যখন কিডনির অসঙ্গতিগুলি অগ্রসর হয়। কারণ সিস্টাইন কন্টেন্ট পুরুষ এবং মহিলা Ctns ভিন্ন পাওয়া গেছে^–/– কিডনি, তারা পৃথকভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছে. উভয় জিনোটাইপে বয়সের সাথে সাথে সিস্টাইনের পরিমাণ বৃদ্ধি পেলে, Ctns–/– Gal-3–/– ইঁদুর এবং Ctns-এর মধ্যে পুরুষ ও মহিলা কিডনিতে কোনও উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি^–/– 8 থেকে 9 মাস এবং 12 থেকে 15 মাস বয়সে ইঁদুর (চিত্র 4a)।

সিরাম এবং প্রস্রাবে রেনাল ফাংশন মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং WT এবং Ctns এর মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি^–/–ইঁদুর 8 থেকে 9 মাসে (ডেটা দেখানো হয়নি), কিন্তু 12 থেকে 15 মাসে, Ctns^–/–ইঁদুরগুলি WT ইঁদুরের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর সিরাম ক্রিয়েটিনিন এবং ইউরিয়া মাত্রা দেখিয়েছে। মজার ব্যাপার হল, Ctns^–/–গাল-3^–/–Ctns এর তুলনায় ইঁদুরের রেনাল ফাংশন উন্নত হয়েছে^–/–কম সিরাম ক্রিয়েটিনিন (P < 0.05) এবং ইউরিয়া (P <0.05; টেবিল 1) সহ 12 থেকে 15 মাস বয়সে ইঁদুর।

8- থেকে 9-মাস বয়সী এবং 12- থেকে 15-মাস বয়সী ইঁদুরের হিস্টোলজিক স্টাডিজকিডনিবিভাগগুলি Ctns-এ গুরুতর অসঙ্গতির উপস্থিতি প্রকাশ করেছে^–/– কিডনিটিউবুলার অ্যাট্রোফি, প্রত্যাহার করা গ্লোমেরুলি এবং মনোনিউক্লিয়ার ইনফিলট্রেট সহ। কিডনির অংশগুলির অন্ধ বিশ্লেষণে কর্টিকাল ক্ষতির পরিমাণ 1 (সংরক্ষিত টিস্যু কাঠামো) থেকে 6 পর্যন্ত ছিল। Ctns-এর গড় স্কোর^–/–ইঁদুর ছিল 2৷{1}}.36 9 মাস বয়সে (n ¼ 7) এবং 4.12 0.37 12 থেকে 15 মাস বয়সে (n ¼ 16) Ctns এর কিডনিতে^–/–গাল-3^–/–একই বয়সে ইঁদুর, এই অসামঞ্জস্যগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে কম বিস্তৃত ছিল: 1। পরীক্ষা) এবং 3। তদুপরি, প্রতিটি টিস্যুতে নলাকার অ্যাট্রোফির শতাংশ নির্ধারণ করা হয়েছিল এবং Ctns-এর গড়^–/–ইঁদুর এবং Ctns^–/–গাল-3^–/–12 থেকে 15 মাসে ইঁদুর ছিল যথাক্রমে 66 শতাংশ এবং 42 শতাংশ (P ¼ 0.01)। উপরন্তু, Ctns মধ্যে একটি আকর্ষণীয় পার্থক্য^–/–এবং Ctns^–/– গাল-3^–/– কিডনিবিভাগগুলি Ctns-এ কয়েকটি মনোনিউক্লিয়ার অনুপ্রবেশের উপস্থিতি ছিল^–/–গাল-3^–/–বিভাগ, যেখানে Ctns-এ ধারাবাহিকভাবে ভারী অনুপ্রবেশ লক্ষ্য করা গেছে^–/– কিডনি(চিত্র 4b)।

আমরা 8- থেকে 9-মাস বয়সী Ctns-তে হিস্টোলজিক পরীক্ষার দ্বারা পর্যবেক্ষণ করা মনোনিউক্লিয়ার ইনফিলট্রেটগুলি চিহ্নিত করেছি^–/– কিডনিCD68 এবং CD45 এর সাথে এবং CD68 এবং মেজর হিস্টোকম্প্যাটিবিলিটি ক্লাস II (পরিপূরক চিত্র S3) এর সাথে সহ-ইমিউনোস্টেইন করে ম্যাক্রোফেজ/মনোসাইট হিসাবে, কিন্তু CD68 এবং CD163 এর সাথে নয়, এই ম্যাক্রোফেজগুলির প্রোইনফ্ল্যামেটরি প্রোফাইলের মতো একটি M1- আছে। ,33 CD68- পজিটিভ কোষের পরিমাণে WT, Gal-3-এ উল্লেখযোগ্যভাবে কম ম্যাক্রোফেজ/মনোসাইট পাওয়া গেছে^–/–, এবং Ctns^–/–গাল-3^–/– কিডনিCtns এর সাথে তুলনা করে^–/– কিডনি(চিত্র 4 সি), হিস্টোলজিক ডেটা নিশ্চিত করে (চিত্র 4 বি)।

সব মিলিয়ে, এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে গ্যাল-3 সিস্টিনোটিক ম্যাক্রোফেজ/মনোসাইট নিয়োগের সাথে জড়িতকিডনিএবং এটির অনুপস্থিতি কিডনি রোগকে কমিয়ে দেয়^–/–ইঁদুর তাই এটা যে প্রস্তাবপ্রদাহCtns-এ কিডনির অবনতির জন্য দায়ী, অন্তত আংশিকভাবে^–/– ইঁদুর

Ctns-স্বল্পতাপূর্ণ কিডনি গ্যাল-3 অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন প্রদর্শন করে

ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে গ্যাল-3 অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে৷কিডনিএর 12-মাস-পুরাতন Ctn^s–/–WT ইঁদুরের সাথে তুলনা করা ইঁদুর (চিত্র 5a এবং b)। Gal-3-এর এই বর্ধিত অভিব্যক্তি Ctns-এর জন্য নির্দিষ্ট কিনা তা তদন্ত করতে^–/– কিডনি, আমরা ট্রান্সক্রিপ্ট এবং প্রোটিন স্তরে গ্যাল-3 এক্সপ্রেশনের পরিমাণ নির্ধারণ করেছিকিডনিস্ট্যান্ডার্ড সাবটোটাল 2- ধাপে নেফ্রেক্টমি অপারেশন দ্বারা প্ররোচিত CKD সহ ইঁদুর থেকে এবং একটি ছলনা অপারেশন করা প্রাণীদের থেকে। WT এবং Ctns^–/–ইঁদুর নিয়ন্ত্রণ বিষয় হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। Ctns–/– এবং শ্যাম কিডনিতে গ্যাল-3 ট্রান্সক্রিপ্টগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে কিন্তু CKD-তে অত্যন্ত বৃদ্ধি পেয়েছেকিডনিWT ইঁদুরের সাথে তুলনা (চিত্র 5c)। বিপরীতে, প্রোটিন স্তরে, গ্যাল-3 শুধুমাত্র Ctns-তে সনাক্ত করা হয়েছিল^–/–কিডনি, দৃঢ়ভাবে পরামর্শ দেয় যে শুধুমাত্র Ctns^–/–কিডনি গ্যাল-3 প্রোটিন হ্রাস করতে অক্ষম ছিল (চিত্র 5d)। মুরিনে গ্যাল-3 এর ইমিউনোফ্লুরোসেন্ট দাগকিডনি8 থেকে 9 মাসেও Ctns-এ Gal-3-এর অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন দেখায়^–/– কিডনিWT এর সাথে তুলনা করেকিডনি(চিত্র 5e)। তাছাড়া, গ্যাল-3কে CD68þ ম্যাক্রোফেজ, সেইসাথে Ctns-এ রেনাল কোষ দ্বারা প্রকাশ করা হয়েছিল^–/– কিডনি8 থেকে 9 মাসে (পরিপূরক চিত্র S4)। সামগ্রিকভাবে, এই ডেটাগুলি এর অনুপস্থিতিতে গ্যাল-3 হ্রাসের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণসিস্টিনোসিসভিট্রোতে প্রদর্শিত (চিত্র 3a এবং b), যার ফলে Ctns-এ গ্যাল-3 প্রোটিন জমা হয়^–/– কিডনি.

সিস্টিনোসিনের অনুপস্থিতি গ্যাল-3 আপগ্র্যুলেশনের মাধ্যমে সিরাম এমসিপি-1 বৃদ্ধির দিকে পরিচালিত করে

গ্যাল-3 নিয়ন্ত্রণ করেপ্রদাহবিভিন্ন মেকানিজমের মাধ্যমে। ৩৪ এইভাবে, মেকানিজমের আরও অন্তর্দৃষ্টি লাভ করতেসিস্টিনোসিস, আমরা 12- থেকে 15- মাস বয়সী WT, Ctns-এর সিরামে বিভিন্ন প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি বা অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি সাইটোকাইনের অভিব্যক্তি তদন্ত করেছি^–/–, গাল-3^–/–, এবং Ctns^–/–গাল- 3^–/–ইঁদুর ছয়টি সাইটোকাইন স্তর মাউস সাইটোমেট্রিক বিড অ্যারে, এমসিপি-1, ইন্টারফেরন-জি, টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর এবং IL-10, IL-6, এবং IL-12p70 দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। WT এবং Gal-3–/– ইঁদুর এবং Ctns-এর তুলনায় Ctns–/– ইঁদুরের সিরামে শুধুমাত্র MCP-1 এক্সপ্রেশন উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে^–/–গাল-3^–/–ইঁদুর, যাদের MCP-1 সিরামের মাত্রা WT ইঁদুরের সাথে তুলনীয় ছিল (চিত্র 6a)। MCP-1 বিভিন্ন ধরনের কোষ দ্বারা উত্পাদিত হয়, MCP-1-এর প্রধান উৎস হল ম্যাক্রোফেজ এবং মনোসাইট, 35 এবং তাদের স্থানান্তর এবং অনুপ্রবেশ নিয়ন্ত্রণ করে মনোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজের জন্য কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্ট হিসাবে কাজ করে। বিপরীতে, একই বয়সে, Ctns–/– ইঁদুরের সিরামে (44.33 9.81 ng/ml; n ¼ 5) এবং WT ইঁদুর (40৷{12} }.41 ng/ml; n ¼ 7)।

Gal-3 এবং MCP-1-এর মধ্যে সম্পর্ক Gal-3–GFP এবং MCP-1–DsRed– বা Gal-3– ব্যবহার করে সহ-ইমিউনোপ্রিসিপিটেশন দ্বারা আরও তদন্ত করা হয়েছিল GFP এবং CTNS-DsRed- (একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে) 293T কোষ প্রকাশ করে। Gal-3 এবং MCP-1-এর মধ্যে মিথস্ক্রিয়া পরিলক্ষিত হয়েছে (চিত্র 6b), গ্যাল-3 দ্বারা MCP-1-এর প্রত্যক্ষ আনয়নের পরামর্শ দিচ্ছে৷ N-Acetyl-D-lactosamine (LacNAc) দিয়ে ইনকিউবেশন, গ্যাল-3 CRD-এর একটি প্রতিরোধক, দেখায় যে, এর বিপরীতেসিস্টিনোসিনমিথস্ক্রিয়া, CRD Gal-3 এবং MCP-1 (চিত্র 6c) এর মধ্যে মিথস্ক্রিয়ায় জড়িত নয়।

এই অনুসন্ধানটি মানুষের ক্ষেত্রে প্রাসঙ্গিক কিনা তা মূল্যায়ন করতে, আমরা রোগীদের মধ্যে গ্যাল-3 এবং MCP-1 মাত্রা পরিমাপ করেছিসিস্টিনোসিসযারা ইমিউনোসপ্রেসিভ থেরাপি নিচ্ছিলেন না বা প্রদাহ-বিরোধী ওষুধ গ্রহণ করছেন না। যদিও সুস্থ দাতাদের তুলনায় সিস্টিনোসিসে আক্রান্ত রোগীদের সিরামে গ্যাল-3 মাত্রা সামান্য বৃদ্ধি পাওয়া গেছে, তবে পার্থক্যটি উল্লেখযোগ্য ছিল না (চিত্র 6e), যা Ctns-এ প্রাপ্ত আমাদের ফলাফল নিশ্চিত করে^–/–ইঁদুর শুধুমাত্র 2 রোগীর উচ্চ গ্যাল-3 মাত্রা ছিল (25.34 এবং 39.54 ng/ml); তারা বহিরাগত হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল এবং এইভাবে চিত্র 6e-এ অন্তর্ভুক্ত ছিল না। বিপরীতে, মানব MCP-1 (চিত্র 6d) এর বিরুদ্ধে নির্দেশিত একটি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস ব্যবহার করে, রোগীদের মধ্যে সিরাম MCP-1 মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পাওয়া গেছেসিস্টিনোসিস(252. 0; বয়সসীমা 8-63 বছর) (P <0.001)। উভয়="" রোগীর="" বয়স="" এবং="" mcp{14}}="" স্তরের="" মধ্যে="" কোনো="" সম্পর্ক="" খুঁজে="" পাওয়া="">সিস্টিনোসিসএবং সুস্থ দাতা (ডেটা দেখানো হয়নি)।

সিস্তানচেআছেপ্রদাহ বিরোধীবৈশিষ্ট্য

আলোচনা

সিস্টাইন আক্রান্ত রোগীদের সমস্ত টিস্যুতে জমা হওয়া সত্ত্বেওসিস্টিনোসিস, কিডনি হল এমন অঙ্গ যা ক্ষতির জন্য সবচেয়ে বেশি ঝুঁকিপূর্ণ। সুতরাং আমরা বিশ্বাস করি সিস্টাইন জমা হওয়া কিডনির অবক্ষয়ের জন্য একমাত্র দায়ী নয়। এখানে, আমরা জন্য একটি নতুন ভূমিকা বর্ণনাসিস্টিনোসিনএর নিয়ন্ত্রণেপ্রদাহদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগের অগ্রগতির সাথে জড়িতসিস্টিনোসিস. এই অধ্যয়নটি ব্যাখ্যা করতে পারে কেন রোগীরা সিস্টেমাইন থেরাপির মধ্য দিয়ে শেষ পর্যায়ে রেনাল ব্যর্থতার দিকে বিকশিত হয়।

সিস্টিনোসিস আণবিক অংশীদারদের অধ্যয়ন গ্যাল-3 এর সাথে একটি সরাসরি মিথস্ক্রিয়া প্রকাশ করেছে, যা গ্যাল-3 CRD-এর ইনহিবিটরদের দ্বারা বাধা দেওয়া যেতে পারে। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে গ্যাল-3 স্ফটিক বিল্ডআপের মতো লাইসোসোমাল ক্ষতির পরে লাইসোসোমাল লুমেনে অবস্থিত গ্লাইক্যানগুলির সাথে যোগাযোগ করতে পারে।36 আমাদের গবেষণায়, গ্যাল-3 এবং এর মধ্যে মিথস্ক্রিয়াসিস্টিনোসিনপ্রকাশ করা সুস্থ কোষে অধ্যয়ন করা হয়েছিলসিস্টিনোসিনএবং, তাই, সিস্টাইন বা সিস্টাইন স্ফটিক জমা হয় না। এছাড়াও, স্বাস্থ্যকর কোষে গ্যাল-3 এবং সিস্টিনোসিন উভয়ের অত্যধিক এক্সপ্রেশন গ্যাল-3-এর উপকোষীয় স্থানীয়করণকে পরিবর্তন করে, যা তখন লাইসোসোমে স্থানীয়করণ করা হয়েছিল, শুধুমাত্র গ্যাল-3-এর অতিরিক্ত এক্সপ্রেশনের তুলনায়, যা সাইটোপ্লাজমে অবস্থিত ছিল। এই ফলাফলগুলি দৃঢ়ভাবে পরামর্শ দেয় যে গ্যাল-3 এবং সিস্টিনোসিনের মধ্যে মিথস্ক্রিয়া লাইসোসোমাল ক্ষতি থেকে স্বাধীনভাবে ঘটছে এবং সিস্টিনোসিন গ্যাল-3 লাইসোসোমাল স্থানীয়করণের জন্য সক্রিয়ভাবে দায়ী। পূর্বে গ্যাল-3 Abl এবং Arg, 2 টি টাইরোসিন কাইনেসের অনুপস্থিতিতে লাইসোসোমাল-নির্ভর প্রোটিওলাইসিসের মাধ্যমে অবনমিত হতে দেখা গেছে।³¹

উপরন্তু, আমরা তা দেখিয়েছিসিস্টিনোসিসএবং গ্যাল-3 গতিশীল ভেসিকুলার স্ট্রাকচারে সহ-স্থানীয়করণ করে এবং একত্রে একটি স্প্যাটিওটেম্পোরাল পদ্ধতিতে একত্রিত হয়।সিস্টিনোসিনপূর্বে লাইসোসোমাল LAMP2A এর পাচার প্রক্রিয়ার সাথে যুক্ত ছিল, একমাত্র পরিচিত CMA রিসেপ্টর, যা ভুল স্থানীয়করণ করা হয়েছেসিস্টিনোসিস.²⁸গ্যাল-3 অবক্ষয় পূর্বে CMA দ্বারা মধ্যস্থতা দেখানো হয়েছে৷³¹কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি বিশ্লেষণ উভয় Ctns-এ Hsc70-পজিটিভ স্ট্রাকচারে গ্যাল-3 এর সমষ্টিকরণ নিশ্চিত করেছে^–/– এবং WT কোষ, লাইসোসোমে উপস্থাপনের জন্য Hsc70-এর সাথে Gal-3-এর সহ-পরিবহন সমর্থন করে এবং CMA দ্বারা অবক্ষয় করে কারণ Hsc70 লাইসোসোমাল লুমেনে ঝিল্লি জুড়ে সাবস্ট্রেট প্রোটিনের স্থানান্তরকে সহায়তা করে।^29,30আমাদের ফলাফল একটি সম্ভাব্য ব্যাখ্যা যেসিস্টিনোসিনঅবক্ষয়ের জন্য CMA-সক্রিয় লাইসোসোমে গ্যাল-3 এর পাচার এবং বিতরণ নিয়ন্ত্রণ করে।

এই অভিনব পথসিস্টিনোসিন-নির্ভর গ্যাল-3 লাইসোসোমাল স্থানীয়করণ এবং অবক্ষয় ভিভোতে সমর্থিত কারণ সিটিএনএস-ঘাটতি ইঁদুরের মধ্যে গ্যাল-3 এর অত্যধিক এক্সপ্রেশন প্রদর্শন করেকিডনি. অধিকন্তু, যেখানে বর্ধিত গ্যাল-3 mRNA Ctns-এ সীমিত ছিল^–/–CKD-এর অন্য মডেলের সাথে কিডনির তুলনা, প্রচুর পরিমাণে গ্যাল-3 প্রোটিন শনাক্ত করা হয়েছিল শুধুমাত্র Ctns^–/– কিডনি. এই তথ্য দৃঢ়ভাবে যে উপসংহার সমর্থনসিস্টিনোসিনগ্যাল-3 প্রোটিনের অবক্ষয়ের সাথে জড়িত, যা CKD-এর মতো স্ট্রেস পরিস্থিতিতে গ্যাল-3 mRNA-এর অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন নিয়ন্ত্রণ করতে পারে।

গ্যাল-3 এর বিভিন্ন জৈবিক ভূমিকা রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে তীব্র এবং দীর্ঘস্থায়ী ভূমিকাপ্রদাহমনোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজ আকর্ষণ করে।^37,38Ctns এ^–/– ইঁদুর, আমরা প্রধানত মধ্যে ভারী mononuclear অনুপ্রবেশ পর্যবেক্ষণকিডনিপূর্বে বর্ণিত হিসাবে,^11,39যা মনোসাইট/ম্যাক্রোফেজ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল। বিপরীতে, ডাবল নকআউট থেকে কিডনি Ctns^–/–গাল-3^–/–ইঁদুর খুব কম মনোসাইট/ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ প্রদর্শন করে, দৃঢ়ভাবে পরামর্শ দেয় যে গ্যাল-3 জড়িতপ্রদাহCtns এর কিডনিতে^–/–ইঁদুর পুনরাবৃত্তিমূলক টিস্যু আঘাতের প্রেক্ষাপটে, গ্যাল-3 দীর্ঘস্থায়ী রূপান্তরকে ট্রিগার করতে পারেপ্রদাহএবং ফাইব্রোসিস।³⁴এই ফলাফলগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, আমাদের ডেটা CKD এর অগ্রগতিতে গ্যাল-3 এর জড়িত থাকার প্রমাণ দেয়সিস্টিনোসিস. প্রকৃতপক্ষে, ডাবল নকআউট Ctns^–/– গাল-3^–/–ইঁদুর আরও ভাল প্রদর্শিতকিডনিCtns এর সাথে তুলনা করে ফাংশন এবং গঠন^–/–ইঁদুর একইভাবে, গ্যাল-3–ঘাটতি ইঁদুর কম রেনাল ফাইব্রোসিস প্রদর্শন করেকিডনিএকতরফা ureteric বাধা পরে WT ইঁদুর সঙ্গে তুলনা,⁴⁰ এবং গ্যাল-3 নকআউট ইঁদুরের ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন আঘাতের শিকার WT ইঁদুরের তুলনায় ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন আঘাতের শিকার হওয়া ইঁদুরের রেনাল ফাংশন আরও ভাল ছিল।⁴¹

যদিও প্লাজমাতে গ্যাল-3 মাত্রা এবং CKD-এর বিকাশের মধ্যে একটি সম্পর্ক পাওয়া গেছে, 42 দ্বারা প্রভাবিত ইঁদুর এবং মানুষের সিরামে গ্যাল-3 অভিব্যক্তির কোন পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নিসিস্টিনোসিসএবং সুস্থ নিয়ন্ত্রণ বিষয়. সিরামে বিভিন্ন সাইটোকাইনের মাত্রা পরিমাপ করে, আমরা Ctns-এ MCP-1 এর উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি পেয়েছি^–/–ইঁদুর, যেখানে Ctns^–/–গাল-3^–/–ইঁদুরের মাত্রা WT ইঁদুরের সাথে তুলনীয় ছিল। এমসিপি-1 হল একটি সাইটোকাইন যা সিরামে মুক্তি পেতে পারে এবং আঘাতের জায়গায় মনোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজগুলিকে আকর্ষণ করার জন্য একটি গ্রেডিয়েন্ট গঠন করে৷ 35 সিটিএনএসের সেরাতে MCP-1 এর বৃদ্ধি^–/–Ctns এর সাথে তুলনা করা ইঁদুর^–/–গাল-3^–/–ইঁদুর সিস্টাইন জমে স্বাধীন ছিল কারণকিডনিউভয় জিনোটাইপে সিস্টাইন সামগ্রী একই ছিল। তদ্ব্যতীত, সিস্টেমাইন চিকিত্সা সত্ত্বেও যা সিস্টাইনকে লাইসোসোমগুলি থেকে বেরিয়ে যাওয়ার অনুমতি দেয়, এমসিপি-1 রোগীদের সেরাতে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পাওয়া গেছেসিস্টিনোসিসসুস্থ দাতাদের সাথে তুলনা করা হয়। এই তথ্য দৃঢ়ভাবে অনুপস্থিতি যে সুপারিশসিস্টিনোসিন, সিস্টাইন জমা হওয়ার পরিবর্তে, সিরামের MCP-1 বৃদ্ধির জন্য দায়ী। উপরন্তু, আমরা Gal-3 এবং MCP-1-এর মধ্যে একটি সরাসরি মিথস্ক্রিয়া দেখিয়েছি, যেটি সম্প্রতি Gordon-Alonso et al.43 দ্বারা প্রস্তাবিত হয়েছিল কিন্তু আর অধ্যয়ন করা হয়নি। গ্যাল-3–মধ্যস্থ MCP-1 সক্রিয়করণের প্রক্রিয়া এখানে অধ্যয়ন করা হয়নি। একটি অনুমান হল মানুষের MCP-1-এ একটি সংকেত পেপটাইডের উপস্থিতি, যা এর ক্ষরণ বাড়ানোর জন্য ক্লিভ করা যেতে পারে৷44 তাছাড়া, প্লাজমিন এমসিপি-1-এর সি-টার্মিনাসকে ক্লিভ করতে পারে, যা এর কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্টকে বাড়িয়ে দেয় ক্ষমতা।সিস্টিনোসিস, আমাদের তথ্য দৃঢ়ভাবে অনুপস্থিতি যে সুপারিশসিস্টিনোসিনগ্যাল-3 বৃদ্ধির দিকে নিয়ে যায়, যা MCP-1 রক্তের সংবহন সক্রিয় করে, রেনালকে উন্নত করেপ্রদাহএবং এর অগ্রগতিদীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ.

এই ফলাফলগুলি সম্ভাব্য থেরাপিউটিক লক্ষ্যগুলির উপর নতুন দৃষ্টিভঙ্গি উন্মুক্ত করে যা রোগীদের কিডনির অবক্ষয় সীমিত বা বিলম্বিত করতে পারেসিস্টিনোসিস. প্রকৃতপক্ষে, অ্যাসপিরিন এবং ইন্ডোমেথাসিনের মতো ননস্টেরয়েডাল অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি ড্রাগগুলি এর ট্রান্সক্রিপশনকে বাধা দিয়ে গ্যাল-3 প্রকাশকে বাধা দেয়। ৪৮ ইন্ডোমেথাসিন আসলে পলিউরিয়া এবং পলিডিপসিয়া নিয়ন্ত্রণ করতে ব্যবহৃত হয়।সিস্টিনোসিস,49 এবং 307 জন ইউরোপীয় সিস্টিনোসিস রোগীর সাম্প্রতিক গবেষণায় ইন্ডোমেথাসিনের সাথে চিকিত্সা করা রোগীদের মধ্যে একটি উন্নত রেনাল ফলাফল দেখানো হয়েছে।সিস্টিনোসিসরোগীদের পুনর্বিবেচনা করা যেতে পারে।

পদ্ধতি

প্রাণী পরীক্ষা

C57BL/6 Ctns^–/–ইঁদুরগুলি ডাঃ অ্যান্টিগনাক (Inserm U1163, প্যারিস, ফ্রান্স) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। C57BL/6 গ্যালেক্টিন-3 নাল (গাল-3^–/–) ইঁদুরগুলি ড. ফু-টং লিউ (ক্যালিফোর্নিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, ডেভিস) এবং ড. জেরোল্ড এম. ওলেফস্কি (ক্যালিফোর্নিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, সান দিয়েগো) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। WT, Ctns উৎপন্ন করার প্রজনন কৌশল^–/–, গাল-3^–/–, Ctns–/– এবং Gal- 3^–/–ইঁদুরগুলি পরিপূরক পদ্ধতিতে বর্ণনা করা হয়েছে।

সেল লাইন

জগাখিচুড়ি WT এবং Ctns এর নবজাতকের ত্বকের বায়োপসি থেকে তৈরি হয়েছিল^–/–ইঁদুর MEF, 293T, এবং MDCK টাইপ II সেল লাইন (ATCC, Manassas, VA) ডালবেকোর পরিবর্তিত ঈগল মিডিয়ামে জন্মেছিল যার মধ্যে ১0 শতাংশ ভ্রূণ বাছুরের সিরাম বা ভ্রূণের বোভাইন সিরাম, 100 ইউনিট/মিলি পেনিসিলিন, 0.1 মিলিগ্রাম/মিলি স্ট্রেপটোমি , এবং 2 মিমি এল-গ্লুটামিন।

কো-ইমিউনোপ্রেসিপিটেশন এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি বিশ্লেষণ

প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়ন করার জন্য, MDCK কোষগুলিকে স্থিরভাবে প্রকাশ করার জন্য লেন্টিভাইরাল pRRL.SIN.cPPT.PGK/WPRE ভেক্টর ব্যাকবোন ব্যবহার করে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল।সিস্টিনোসিন-জিএফপি।⁵¹সম্পূরক পদ্ধতিতে বর্ণিত হিসাবে সহ-ইমিউনোপ্রেসপিটেশন সঞ্চালিত হয়েছিল। কো-ইমিউনোপ্রিসিপিটেটেড প্রোটিনগুলি সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট-পলিয়াক্রাইলামাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (SDS-PAGE) দ্বারা সমাধান করা হয়েছিল এবং ইতিমধ্যে বর্ণিত হিসাবে গণ স্পেকট্রোমেট্রি, LTQ অরবিট্র্যাপ দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।¹⁹

Gal-3–GFP এবং MCP-1–DsRed বা Gal-3– GFP এবং CTNS-DsRed প্রকাশকারী 293T কোষগুলি সম্পূরক পদ্ধতিতে বর্ণিত সহ-ইমিউনোপ্রিসিপিটেশনের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। কো-ইমিউনোপ্রিসিপিটেটেড প্রোটিনগুলি SDS-PAGE দ্বারা সমাধান করা হয়েছিল, এবং গ্যাল-3–বাইন্ডিং MCP-1 একটি অ্যান্টি-ডিএসরেড অ্যান্টিবডি (ক্লোনটেক ল্যাবরেটরিজ, মাউন্টেন ভিউ, CA) ব্যবহার করে সনাক্ত করা হয়েছিল।

উপকোষীয় ভগ্নাংশ

C57BL/6 ইঁদুর থেকে আটটি লিভার প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত হিসাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল। 52 গ্রেডিয়েন্টের শর্তগুলি মূলত মূল প্রকাশনায় বর্ণিত হিসাবে একই ছিল, 52 মেট্রিজামাইডের পরিবর্তে নাইকোডেঞ্জ ব্যবহার করা হয়েছিল।

গ্যাল-3–ইনহিবিটর এবং প্রোটিনেস কে চিকিত্সা

থেকে Lysatesসিস্টিনোসিন-GFP MDCK কোষ এবং 293T প্রকাশকারী Gal-3–GFP এবং CTNS-DsRed বা Gal-3–GFP এবং MCP-1–DsRed 5 মিমি থায়োডিগালাক্টোসাইড বা 5 মিমি এন এর সাথে বা ছাড়াই ইনকিউবেট করা হয়েছিল -অ্যাসিটাইল-ডি-ল্যাক্টোসামিন, যথাক্রমে, গ্যাল-3 সিআরডি-এর 2 ইনহিবিটার। ধ্রুবক ঝাঁকুনি সহ 4 - সেন্টিগ্রেডে ইনকিউবেশনের 30 মিনিটের পরে, 50 মিলি অ্যান্টি-জিএফপি মাইক্রোবিড দিয়ে লাইসেটগুলি ইনকিউবেট করা হয়েছিল, এবং পূর্বে উল্লিখিত হিসাবে ইমিউনোপ্রিসিপিটেশন সঞ্চালিত হয়েছিল। 10 শতাংশ জেলে SDS-PAGE দ্বারা প্রসিপিটেটেড প্রোটিনগুলি সমাধান করা হয়েছিল।

থেকে Lysatesসিস্টিনোসিন-GFP MDCK কোষ এবং মাউস লিভারের লাইসোসোম-সমৃদ্ধ ভগ্নাংশগুলিকে 2 শতাংশ ট্রাইটন এক্স-100 দিয়ে বা ছাড়াই 10 মিনিটের জন্য 4 - সেন্টিগ্রেডে ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং তারপর 2.5 মিলিগ্রাম/মিলি এবং 25 মিলিগ্রামের সাথে বা ছাড়া 30 মিনিট ইনকিউব করা হয়েছিল। /ml প্রোটিনেস কে, যথাক্রমে। 1 মিমি ফিনাইলমেথাইলসালফোনাইল ফ্লোরাইডের সাথে এনজাইম নিষ্ক্রিয় করার পরে 4 - সেন্টিগ্রেডে 5 মিনিটের জন্য, প্রোটিনগুলি 10 শতাংশ জেলে SDS-PAGE দ্বারা সমাধান করা হয়েছিল।

ইমিউনোফ্লোরেসেন্স বিশ্লেষণ

স্থির MDCK কোষগুলি অ্যান্টি-ল্যাম্প-2 (OriGeneTechnologies, Rockville, MD) এবং অ্যান্টি-গাল-3 অ্যান্টিবডি (CedarlaneLaboratories, Burlington, Ontario, Canada) দিয়ে 2 ঘন্টা ঘরের তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল, তারপরে আলেক্সা ফ্লুর 555 সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (Invitrogen, Carlsbad, CA) ঘরের তাপমাত্রায় 1 ঘন্টার জন্য। কনফোকাল চিত্রগুলি একটি Zeiss LSM 700 মাইক্রোস্কোপ (Carl ZeissMicroscopy, Jena, Germany) ব্যবহার করে নেওয়া হয়েছিল।

293T কোষ ক্ষণস্থায়ীভাবে Gal-3–GFP একা, Gal-3–GFP, এবং DsRed বা Gal-3–GFP এবংসিস্টিনোসিন-DsRed একটি স্লাইডে মাউন্ট করার আগে একটি কভারস্লিপে সংস্কৃতি করা হয়েছিল। কোষগুলি একটি Keyence BZ-X700 যন্ত্র (Keyence Corp., Osaka, Japan) ব্যবহার করে চিত্রিত করা হয়েছিল।

স্থিরকিডনিবিভাগগুলি রাতারাতি অ্যান্টি-CD68 (বায়োলেজেন্ড, সান দিয়েগো, CA) বা অ্যান্টি-গাল-3 অ্যান্টিবডি (বায়োলিজেন্ড) দিয়ে 4 - C-তে incubated ছিল, তারপরে আলেক্সা ফ্লুর 488 সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (ইনভিট্রোজেন), 1 ঘন্টা কক্ষ তাপমাত্রায়. একটি Keyence BZ-X700 যন্ত্র ব্যবহার করে ছবিগুলি অর্জিত হয়েছিল৷ CD68 এক্সপ্রেশনের পরিমাণ পরিপূরক পদ্ধতিতে বর্ণনা করা হয়েছে।

Gal-3–GFP প্রকাশকারী MEFগুলিকে একটি অ্যান্টি-Hsc70 অ্যান্টিবডি (এনজো লাইফ সায়েন্স, ফার্মিংডেল, NY) ব্যবহার করে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত হিসাবে চিত্রিত করা হয়েছিল।⁵³

মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন FL ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি

WT এবং Ctns^–/–MEF এক্সপ্রেসিং Gal-3–GFP, এবং CTNS-DsRed একটি 4-চেম্বার 35- মিমি বোরোসিলিকেট নীচের থালা (সেলভিস, মাউন্টেন ভিউ, CA) এ বীজ করা হয়েছিল। সংস্কৃতিতে 2 দিন পরে, MEF গুলি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে মোট অভ্যন্তরীণ প্রতিফলন FL ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল⁵⁴এবং পরিপূরক পদ্ধতিতে। ইমেজজে সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে চিত্রগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

গাল-3 অভিব্যক্তি বিশ্লেষণ

Gal-3–GFP, Gal-3–GFP, এবং DsRed, অথবা Gal-3–GFP এবং CTNS-DsRed এবং ব্যাখ্যা করা 293T কোষগুলিকিডনিএকটি প্রোটিনেস ইনহিবিটর ককটেল ধারণকারী রেডিওইমিউনোপ্রেসিপিটেশন অ্যাস বাফারে lysed ছিল। প্রোটিনগুলি 4 শতাংশ থেকে 15 শতাংশ জেলে আলাদা করা হয়েছিল এবং অ্যান্টি-গাল-3 (অ্যাবক্যাম, ক্যামব্রিজ, ইউকে) বা অ্যান্টি-গ্লিসারালডিহাইড-3-ফসফেট ডিহাইড্রোজেনেস (সেল সিগন্যালিং টেকনোলজি, ড্যানভার্স, এমএ) অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে প্রকাশ করা হয়েছিল .

কিডনিPrecellys 24 (Bertin Instruments, Montigny-le-Bretonneux, France) ব্যবহার করে B-mercaptoethanol ধারণকারী RLT বাফারে একত্রিত করা হয়েছিল। RNA বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং Gal-3– নির্দিষ্ট ড্রপলেট ডিজিটাল পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া সম্পূরক পদ্ধতিতে বর্ণিত হিসাবে সঞ্চালিত হয়েছিল। গ্যাল-3 ট্রান্সক্রিপ্ট এক্সপ্রেশনটি এন্ডোজেনাস কন্ট্রোল 18S এর সাথে তুলনা করে একটি অনুপাত হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে একটি এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস (অ্যাবক্যাম) ইঁদুর এবং মানুষের সেরাতে গ্যাল-3 স্তর সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

রেনাল ফাংশন

কোয়ান্টিক্রোম ফসফেট অ্যাসে কিট, কোয়ান্টি ক্রোম ক্রিয়েটিনাইন কিট এবং কোয়ান্টিক্রোম ইউরিয়া অ্যাস কিট (বায়োসেসি সিস্টেমস, হেওয়ার্ড, সিএ) ব্যবহার করে সিরাম এবং ইউরিন ফসফেট, সিরাম ক্রিয়েটিনিন এবং ইউরিয়া মাত্রা অনুমান করা হয়েছিল। পিয়ার্স বিসিএ প্রোটিন অ্যাসে কিট (রকফোর্ড, আইএল) ব্যবহার করে প্রস্রাবে প্রোটিনের মাত্রা পরিমাপ করা হয়েছিল।

হিস্টোলজি

ইঁদুর মারার সময়,কিডনিসংগ্রহ করা হয়েছিল, ফরমালিনের মধ্যে স্থির করা হয়েছিল এবং প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল। হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন দ্বারা দাগযুক্ত বিভাগগুলি ডাঃ মেরি ক্লেয়ার গুবলারের দ্বারা পরিপূরক পদ্ধতিতে বর্ণিত একটি অন্ধ ফ্যাশনে পর্যালোচনা করা হয়েছিল।

সিস্টাইন সামগ্রী পরিমাপ

টিস্যু সিস্টাইন পরিমাপ আগে বর্ণিত হিসাবে ভর স্পেকট্রোমেট্রি (এলসি-ইএসআই-এমএস/এমএস) দ্বারা সঞ্চালিত হয়েছিল।³⁹

স্ট্যান্ডার্ড নেফ্রেক্টমি এবং শ্যাম অপারেশন

ইঁদুরের CKD স্ট্যান্ডার্ড সাবটোটাল 2-পর্যায়ের নেফ্রেক্টমি অপারেশন দ্বারা প্ররোচিত হয়েছিল যেমনটি পূর্বে বর্ণিত হয়েছে।^55,56ইঁদুরের শ্যাম গ্রুপ একই পদ্ধতির মধ্য দিয়েছিল কিন্তু কোন কাটা ছাড়াইকিডনিটিস্যু

সিরামে সাইটোকাইন স্তর

মাউস সিরামে সাইটোকাইনের মাত্রা পরিমাপ করতে, একটি মাউসপ্রদাহকিট সাইটোমেট্রিক বিড অ্যারে (বিডি বায়োসায়েন্সেস, সান জোসে, সিএ) প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে MCP-1 (Abcam, Cambridge, UK) এর বিরুদ্ধে নির্দেশিত একটি এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস ব্যবহার করে মানুষের সিরামে MCP-1 ঘনত্ব নির্ধারণ করা হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

মানগুলি গড় হিসাবে প্রকাশ করা হয় - SEM। ফলাফলের তাৎপর্য ওয়েলচের সংশোধনের সাথে জোড়াবিহীন 2-টেইলড টি-টেস্ট বা আনপেয়ারড 2-টেইলড টি-টেস্ট দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। 3টি বা তার বেশি অবস্থার গোষ্ঠীগত তুলনাগুলি বৈচিত্র্যের প্যারামেট্রিক বিশ্লেষণের সাথে তৈরি করা হয়েছিল, তারপরে পেয়ারওয়াইজ তুলনার জন্য Tukey একাধিক তুলনা পরীক্ষা করা হয়েছিল। হিস্টোলজিক স্কোর মান-হুইটনি পরীক্ষা ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল। বিশ্লেষণগুলি প্রিজম 6 সফ্টওয়্যার (গ্রাফপ্যাড, সান দিয়েগো, সিএ) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল। একটি P-মান 0.05 এর কম তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল৷

অধ্যয়নের অনুমোদন

ইঁদুর পরীক্ষাগুলি প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণী ব্যবহার কমিটির প্রোটোকলের সাথে সম্মতিতে পরিচালিত হয়েছিল। এই গবেষণায় মানুষের টিস্যুর ব্যবহার ক্যালিফোর্নিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, সান দিয়েগো, হিউম্যান রিসার্চ প্রোটেকশনস প্রোগ্রাম দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

প্রকাশ

SC একজন বৈজ্ঞানিক বোর্ডের সদস্য এবং বোর্ড অফ ট্রাস্টির সদস্যসিস্টিনোসিসগবেষণা ফাউন্ডেশন। SC একজন সহ-প্রতিষ্ঠাতা, শেয়ারহোল্ডার এবং GenStem TherapeuticsInc-এর বৈজ্ঞানিক বোর্ড এবং পরিচালনা পর্ষদের সদস্য। ইউনিভার্সিটি অফ ক্যালিফোর্নিয়া-সান দিয়েগোর স্বার্থের দ্বন্দ্ব নীতি অনুসারে এই ব্যবস্থার শর্তাবলী পর্যালোচনা এবং অনুমোদিত হয়েছে। অন্যান্য সমস্ত লেখক কোন প্রতিযোগিতামূলক আগ্রহ ঘোষণা করেননি।

গাল প্রদান-3^–/–ইঁদুর আমরা তাদের প্রযুক্তিগত সহায়তার জন্য Lou Devanneaux এবং NicholeFlerchinger এবং পাণ্ডুলিপি পর্যালোচনা করার জন্য এলিজাবেথ সাউটারকে ধন্যবাদ জানাই। আমরা BDBioscience থেকে ক্রিস্টোফার আলফোনসোকে মাউস প্রদানের জন্য স্বীকার করিপ্রদাহসাইটোমেট্রিক গুটিকা অ্যারে এবং ফলাফলের ব্যাখ্যায় তার সাহায্যের জন্য। এই কাজটি ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ হেলথ অনুদান RO1-DK090058 এবং R01-DK110162 দ্বারা সমর্থিত ছিল,সিস্টিনোসিসরিসার্চ ফাউন্ডেশন, এবং ক্যালিফোর্নিয়া ইনস্টিটিউট অফ রিজেনারেটিভ মেডিসিন (CIRM, CLIN-09230)। TL Vaincre Les MaladiesLysosomales থেকে একটি স্নাতক ফেলোশিপ দ্বারা সমর্থিত। AB এবং JZ থেকে একটি ফেলোশিপ দ্বারা সমর্থিত হয়সিস্টিনোসিসগবেষণা ফাউন্ডেশন। UCSD নিউরোসায়েন্স মাইক্রোস্কোপি শেয়ারড সুবিধা ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ নিউরোলজিক্যাল ডিসঅর্ডারস অ্যান্ড স্ট্রোক (NINDS) অনুদান P30-NS047101 দ্বারা অর্থায়ন করা হয়েছিল।

তথ্যসূত্র

1. Medzhitov R. এর উৎপত্তি এবং শারীরবৃত্তীয় ভূমিকাপ্রদাহ. প্রকৃতি। 2008;454:428-435।

2. Donath MY. টার্গেটিংপ্রদাহটাইপ 2 ডায়াবেটিসের চিকিৎসায়। ডায়াবেটিস ওবস মেটাব। 2013;15(সরবরাহ 3):193–196।

3. জাফর ইউ, ওয়েড আরজি, গৌরলে টি। সিস্টেমিক ইনফ্ল্যামেটরি রেসপন্স সিন্ড্রোমে সাইটোকাইনস: একটি পর্যালোচনা। এইচএসআর প্রোক ইনটেনসিভ কেয়ার কার্ডিওভাস্ক অ্যানেসথ। 2010;2:161-175।

4. Pecoits-Filho R, Heimburger O, Barany P, et al. সিআরএফ রোগীদের মধ্যে প্রদাহজনক চিহ্নিতকারী এবং অবশিষ্ট রেনাল ফাংশনের মধ্যে সম্পর্ক। আমি জেকিডনিডিস. 2003;41:1212-1218।

5. গাহল ডাব্লুএ, থোন জেজি, স্নাইডার জেএ।সিস্টিনোসিস. এন ইংলিশ জে মেড। 2002;347: 111-121।

6. Cherqui S, Kalatzis V, Trugnan G, Antignac C. এর লক্ষ্যবস্তুসিস্টিনোসিনলাইসোসোমাল ঝিল্লির জন্য একটি টাইরোসিন-ভিত্তিক সংকেত এবং একটি অভিনব সাজানোর মোটিফ প্রয়োজন। জে বায়োল কেম। 2001;276:13314-13321।

7. কালাতজিস ভি, চেরকুই এস, অ্যান্টিগনাক সি, গ্যাসনিয়ার বি।সিস্টিনোসিন, প্রোটিন ত্রুটিপূর্ণসিস্টিনোসিস, একটি H()-চালিত লাইসোসোমাল সিস্টাইন ট্রান্সপোর্টার। EMBO J. 2001;20:5940–5949.

8. Cherqui S, Courtoy PJ. রেনাল ফ্যানকোনি সিন্ড্রোম ইনসিস্টিনোসিস: প্যাথোজেনিক অন্তর্দৃষ্টি এবং থেরাপিউটিক দৃষ্টিকোণ। ন্যাট রেভ নেফ্রোল। 2017;13:115-131।

9. Nesterova G, Gahl W. Nephropathicসিস্টিনোসিস: একটি মাল্টিসিস্টেমিক রোগের দেরী জটিলতা। পেডিয়াট্রি নেফ্রোল। 2008;23:863–878।

10. Cherqui S, Sevin C, Hamard G, et al. ইঁদুরের অভাবে ইন্ট্রালাইসোসোমাল সিস্টাইন জমেসিস্টিনোসিন, প্রোটিন ত্রুটিপূর্ণসিস্টিনোসিস. মোল সেল বায়োল। 2002;22:7622–7632।

11. Nevo N, Chol M, Bailleux A, et al. এর রেনাল ফেনোটাইপসিস্টিনোসিসমাউস মডেল জেনেটিক ব্যাকগ্রাউন্ডের উপর নির্ভরশীল। নেফ্রোল ডায়াল ট্রান্সপ্লান্ট। 2010;25:1059-1066।

12. Kalatzis V, Serratrice N, Hippert C, et al. একটি মধ্যে চোখের অসঙ্গতিসিস্টিনোসিসপশু মডেল রোগ প্যাথোজেনেসিস অনুকরণ. শিশু বিশেষজ্ঞ রেস. 2007;62:156-162।

13. গাইড Chevronnay HP, Janssens V, Van Der Smissen P, et al. একটি মাউস মডেল শিশুর মধ্যে থাইরয়েড পরিবর্তনের জন্য দুটি প্রক্রিয়ার পরামর্শ দেয়সিস্টিনোসিস: এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম স্ট্রেস/উন্মোচিত প্রোটিন প্রতিক্রিয়া এবং প্রতিবন্ধী লাইসোসোমাল প্রক্রিয়াকরণের কারণে থাইরোগ্লোবুলিন সংশ্লেষণ হ্রাস। এন্ডোক্রিনোলজি। 2015;156:2349–2362।

14. ব্রডিন-সার্টোরিয়াস এ, টেটে এমজে, নিয়াউডেট পি, এট আল। সিস্টামাইন থেরাপি নেফ্রোপ্যাথিকের অগ্রগতি বিলম্বিত করেসিস্টিনোসিসদেরী কৈশোর এবং প্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে।কিডনিint. 2012;81:179-189।

15. Cherqui S. Cysteamine থেরাপি: একটি চিকিত্সাসিস্টিনোসিস, একটি প্রতিকার না.কিডনিint. 2012;81:127-129।

16. Gahl WA, Balog JZ, Kleta R. Nephropathicসিস্টিনোসিসপ্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে: প্রাকৃতিক ইতিহাস এবং মৌখিক সিস্টামাইন থেরাপির প্রভাব। অ্যান ইন্টার্ন মেড. 2007;147:242-250।

17. Cherqui S, Courtoy PJ. রেনাল ফ্যানকোনি সিন্ড্রোম ইনসিস্টিনোসিস: প্যাথোজেনিক অন্তর্দৃষ্টি এবং থেরাপিউটিক দৃষ্টিকোণ। ন্যাট রেভ নেফ্রোল। 2017;13:115-131।

18. Napolitano G, Johnson JL, He J, et al. চ্যাপেরোন-মধ্যস্থ অটোফ্যাজির দুর্বলতা লাইসোসোমাল স্টোরেজ রোগে নির্বাচনী লাইসোসোমাল অবক্ষয় ত্রুটির দিকে পরিচালিত করেসিস্টিনোসিস. EMBO Mol Med. 2015;7:158-174।

19. Andrzejewska Z, Nevo N, Thomas L, et al.সিস্টিনোসিনরেপামাইসিন কমপ্লেক্স 1 সিগন্যালিং এর ভ্যাকুয়ালার এইচ -ATPase-রেগুলেটর-র্যাগ কমপ্লেক্স নিয়ন্ত্রণকারী স্তন্যপায়ী লক্ষ্যের একটি উপাদান। জে এম সোক নেফ্রোল। 2016;27: 1678–1688।

20. রেগা LR, Polishchuk E, Montefusco S, et al. ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর EB সক্রিয়করণ cystinotic মধ্যে lysosomal অস্বাভাবিকতা উদ্ধার করেকিডনিকোষকিডনিint. 2016;89:862–873।

21. Dumic J, Dabelic S, Flogel M. Galectin-3: একটি খোলামেলা গল্প। বায়োচিম বায়োফিস অ্যাক্টা। 2006;1760:616-635।

22. Sciaccitano S, Lavra L, Morgante A, et al. গ্যালেক্টিন-3: রোগের একটি বর্ণমালার জন্য একটি অণু, A থেকে Z পর্যন্ত। Int J Mol Sci। 2018;19(2)।

23. ক্যালভিয়ার এল, মার্টিনেজ-মার্টিনেজ ই, মিয়ানা এম, এট আল। অ্যালডোস্টেরন-প্ররোচিত কার্ডিয়াক এবং রেনাল ইনজুরিতে গ্যালেক্টিন-3 বাধার প্রভাব। JACC হার্ট ফেইল। 2015;3:59–67।

24. Frenay AR, Yu L, van der Velde AR, et al. গ্যালেক্টিনের ফার্মাকোলজিক্যাল ইনহিবিশন-3 হাইপারটেনসিভ নেফ্রোপ্যাথি থেকে রক্ষা করে। অ্যাম জে ফিজিওল রেনাল ফিজিওল। 2015;308:F500–F509।

25. কোলাটসি-জোয়ানউ এম, প্রাইস কেএল, উইনয়ার্ড পিজে, লং ডিএ। পরিবর্তিত সাইট্রাস পেকটিন পরীক্ষামূলক তীব্রতায় গ্যালেক্টিন-3 প্রকাশ এবং রোগের তীব্রতা হ্রাস করেকিডনিআঘাত PloS ওয়ান। 2011;6:e18683।

26. মার্টিনেজ-মার্টিনেজ ই, ইবারোলা জে, ক্ল্যাভিয়ার এল, এট আল। গ্যালেকটিন-3 অবরোধ রেনাল ফাইব্রোসিসকে হ্রাস করে রেনাল ক্ষতির দুটি সাধারণ পরীক্ষামূলক মডেলে। PloS ওয়ান। 2016;11:e0166272।

27. Nevo N, Thomas L, Chhuon C, et al. এর প্রভাবসিস্টিনোসিসকোষ সংস্কৃতিতে অ্যামিনো অ্যাসিড দ্বারা ডিফারেনশিয়াল ডাইনামিক স্থিতিশীল আইসোটোপ লেবেলিং দ্বারা প্রোটিন স্থিতিশীলতার উপর গ্লাইকোসিলেশন (SILAC)। মোল সেল প্রোটিওমিক্স। 2017;16:457–468।

28. Napolitano G, Johnson JL, He J, et al. চ্যাপেরোন-মধ্যস্থ অটোফ্যাজির দুর্বলতা লাইসোসোমাল স্টোরেজ রোগে নির্বাচনী লাইসোসোমাল অবক্ষয় ত্রুটির দিকে পরিচালিত করেসিস্টিনোসিস. EMBO Mol Med. 2015;7:158-174।

29. মাজেস্কি এই, ডাইস জেএফ। চ্যাপেরোন-মধ্যস্থ অটোফ্যাজির প্রক্রিয়া। ইন্টি জে বায়োকেম সেল বায়োল। 2004;36:2435-2444।

30. Xie W, Zhang L, Jiao H, et al. চ্যাপেরোন-মিডিয়াটেড অটোফ্যাজি বিবিসি 3/পিউএমএকে অবনমিত করে অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধ করে। অটোফ্যাজি। 2015;11:1623–1635।

31. লি এক্স, মা কিউ, ওয়াং জে, এট আল। c-Abl এবং Arg tyrosine kinases oncoprotein Galectin-3 এর লাইসোসোমাল অবক্ষয় নিয়ন্ত্রণ করে। কোষের মৃত্যু ভিন্ন। 2010;17:1277-1287।

32. Takeuchi H, Tanaka M, Tanaka A, et al. মূত্রাশয় ক্যান্সারে M2-পোলারাইজড ম্যাক্রোফেজের প্রাধান্য এনজিওজেনেসিস, টিউমার গ্রেড এবং আক্রমণাত্মকতাকে প্রভাবিত করে। অনকল লেট। 2016;11:3403–3408।

33. Chavez-Galan L, Olleros ML, Vesin D, Garcia I. M1 এবং M2 ম্যাক্রোফেজের চেয়ে অনেক বেশি, এছাড়াও CD169( ) এবং TCR( ) ম্যাক্রোফেজ রয়েছে। সামনের ইমিউনল। 2015; 6:263।

34. হেন্ডারসন এনসি, শেঠি টি. দ্য রেগুলেশন অফপ্রদাহগ্যালেক্টিন দ্বারা-3। ইমিউনোলজিক রেভ. 2009; 230:160-171।

35. দেশমানে এসএল, ক্রেমলেভ এস, আমিনি এস, সাওয়ায়া বিই। মনোসাইট কেমোট্র্যাক্ট্যান্ট প্রোটিন-1 (MCP-1): একটি ওভারভিউ। জে ইন্টারফেরন সাইটোকাইন রেস। 2009;29:313-326।

36.Skowyra ML, Schlesinger PH, Naismith TV, Hanson PI। ESCRT যন্ত্রপাতির ট্রিগার নিয়োগ এন্ডোলাইসোসোমাল মেরামতের প্রচার করে। বিজ্ঞান. 2018;360(6384)।

37.MacKinnon AC, Farnworth SL, Hodkinson PS, et al. গ্যালেক্টিন দ্বারা বিকল্প ম্যাক্রোফেজ সক্রিয়করণের নিয়ন্ত্রণ-3। জে ইমিউনল। 2008;180: 2650–2658।

38. Sano H, Hsu DK, Yu L, et al. হিউম্যান গ্যালেক্টিন-3 মনোসাইট এবং ম্যাক্রোফেজের জন্য একটি অভিনব কেমোট্র্যাক্ট্যান্ট। জে ইমিউনল। 2000;165:2156-2164।