Cistanche Deserticola-এর মোট গ্লাইকোসাইডগুলি এনআরএফ- 2/কিপ-1 এমসিএও/আর ইঁদুর-তে পাথওয়ের মাধ্যমে নিউরোভাসকুলার পুনর্জন্ম প্ররোচিত করে স্নায়বিক ফাংশন পুনরুদ্ধারের প্রচার করে-Ⅰ

ভূমিকা

স্ট্রোক বিশ্বে মৃত্যু ও অক্ষমতার একটি প্রধান কারণ হিসেবে বিবেচিত হয়। সমস্ত স্ট্রোকের ক্ষেত্রে প্রায় 87% ইস্কেমিক স্ট্রোক দ্বারা ট্রিগার হয়। বর্তমানে, সবচেয়ে কার্যকরী এজেন্ট এবং একমাত্র FDA-অনুমোদিত ওষুধের জন্য ব্যবহৃত হয়ইস্কেমিক স্ট্রোক চিকিত্সারিকম্বিন্যান্ট টিস্যু প্লাজমিনোজেন অ্যাক্টিভেটর। যাইহোক, প্রচুর পরিমাণে স্ট্রোক রোগী এই ওষুধের প্রতি সাড়া দিতে ব্যর্থ হয়, কারণ এর সংকীর্ণ থেরাপিউটিক টাইম উইন্ডো এবং রক্তক্ষরণজনিত জটিলতার গুরুতর ঝুঁকির কারণে। থ্রম্বোলাইটিক চিকিত্সার একটি বড় চ্যালেঞ্জ হল ইসকেমিয়া/রিপারফিউশন (আই/আর) আঘাত, যা মস্তিষ্কের আঘাত এবং ফাংশন ধ্বংসের একটি প্রধান কারণ হিসাবে বিবেচিত হয়। সেরিব্রাল ইসকেমিয়ার পরে রিপারফিউশন মস্তিষ্কে রক্তক্ষরণের ঝুঁকি বাড়ায় এবং নিউরোভাসকুলার আঘাতের দিকে পরিচালিত করে এবং অত্যধিক প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) তৈরি করে যা রক্ত-মস্তিষ্কের বাধাকে ক্ষতিগ্রস্ত করে। বেশ কিছু গবেষণায় নিশ্চিত করা হয়েছে যে BBB এর ব্যাঘাত ইস্কেমিক স্ট্রোকের প্যাথোজেনেসিসের একটি প্রধান কারণ।

ইসকেমিক স্ট্রোক PHGS75% ECH 30% ACT 12%

BBB প্রধানত এন্ডোথেলিয়াল কোষ, পেরিসাইট, অ্যাস্ট্রোসাইট, নিউরন এবং বেসমেন্ট মেমব্রেন নিয়ে গঠিত। BBB-এর মূল উপাদানগুলি হল সেরিব্রাল মাইক্রোভাসকুলার এন্ডোথেলিয়াল কোষ যা শক্ত সংযোগ দ্বারা যুক্ত থাকে, এইভাবে মস্তিষ্কে বহিরাগত অণুগুলিকে সীমাবদ্ধ করে। টাইট জংশনের প্যাথলজিকাল পরিবর্তন-বিশেষ করে অক্লুডিন, ক্লাউডিন-5 এবং জোনুলা অক্লুডেনস-1 (ZO-1)- একটি ইস্কেমিক স্ট্রোকের সময় বিবিবি ফাংশনকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রভাবিত করে, বিশেষ করে বাধা ব্যাপ্তিযোগ্যতা। I/R পিরিয়ডের সময়, অত্যধিক ROS হল মস্তিষ্কের নিউরনের প্রত্যক্ষ ক্ষতির প্রধান কারণগুলির মধ্যে একটি। ROS অতিরিক্ত উৎপাদন কিছু জংশনের অবক্ষয় এবং BBB ব্যাঘাতের দিকে পরিচালিত করে, যার ফলে বহিরাগত অণুগুলি BBB এর মাধ্যমে মস্তিষ্কে প্রবেশ করে, যার ফলে মস্তিষ্কের ক্ষতি আরও বেড়ে যায়। তাই, অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট দ্বারা BBB সুরক্ষাকে রিপারফিউশন আঘাত প্রতিরোধের একটি সম্ভাব্য উপায় হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছে।

BBB এর ভাঙ্গন ছাড়াও, I/R এর ফলে নিউরোভাসকুলার ইনজুরি এবং নিউরোনাল মৃত্যু হতে পারে। স্ট্রোকের সময়, অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের ফলে নিউরোনাল কোষের মৃত্যু বৃদ্ধি পেতে পারে এবং অসংখ্য গবেষণায় দেখা গেছে যে ROS স্ট্রোকের তীব্রতা এবং স্নায়বিক ক্ষতিকে বাড়িয়ে তোলে। যদিও ক্লিনিকাল ট্রায়ালগুলি সন্তোষজনক ফলাফল পায়নি, নিউরোপ্রোটেকশন এখনও তীব্র ইস্কেমিক স্ট্রোকের চিকিত্সার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল কৌশল। সুতরাং, স্ট্রোকের চিকিত্সার জন্য কার্যকর নিউরোপ্রোটেকশন ড্রাগগুলি সন্ধান করা স্ট্রোক রোগীদের জন্য একটি সুবিধা।

ঐতিহ্যগত চীনা ঔষধ (TCM) শরীরের অভ্যন্তরীণ ভারসাম্যহীনতার বিরুদ্ধে হস্তক্ষেপ করার ব্যবস্থা নেয়। ইস্কেমিক স্ট্রোকের জটিল প্যাথোজেনেসিসের কারণে, টিসিএম-এর মাল্টিফ্যাক্টোরিয়াল প্রভাব এবং এর সক্রিয় উপাদানগুলি স্ট্রোকের চিকিৎসায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে।সিস্তানচেমঙ্গোলিয়া এবং উত্তর-পশ্চিম চীন জুড়ে শুষ্ক বা আধা-শুষ্ক অঞ্চলে বিস্তৃত deserticola YC Ma, চীনে 1,000 বছরেরও বেশি সময় ধরে ভুলে যাওয়া এবং বিষণ্নতার মতো বিভিন্ন রোগের চিকিত্সার জন্য একটি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত TCM ভেষজ। আধুনিক ফার্মাকোলজিকাল স্টাডিজ ইঙ্গিত দেয় যে সি. ডেসার্টিকোলা থেকে অশোধিত নির্যাস একাধিক ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যকলাপ দেখায়, যেমনশেখার এবং মেমরি ফাংশন, নিউরোপ্রোটেকশন, অনাক্রম্যতা, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-বার্ধক্য, এবং অ্যান্টি-ক্লান্তি প্রভাব বৃদ্ধি করে. C. deserticola এর রাসায়নিক বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে এর প্রধান উপাদান অন্তর্ভুক্তphenylethanoid glycosides, iridoid glycosides, polysaccharides, and oligosaccharides. যাইহোক, মস্তিষ্ক সুরক্ষার জন্য C. deserticola এর সক্রিয় উপাদানগুলি খুব স্পষ্ট নয়।

C. deserticola-এর নিউরোপ্রোটেক্টিভ বৈশিষ্ট্য স্ট্রোক এবং বিষণ্নতার মতো জ্ঞানীয়-সম্পর্কিত অসুস্থতা এবং সেইসাথে আলঝেইমার রোগে এর থেরাপিউটিক সম্ভাবনাকে বোঝায়। যাইহোক, স্ট্রোকের উপর C. deserticola এর প্রভাবের উপর গবেষণা, এর সক্রিয় উপাদান এবং কর্ম প্রক্রিয়া সহ, খুবই সীমিত। বর্তমান কাজে, আমরা সেরিব্রাল I/R আঘাতের উপর C. deserticola, মোট গ্লাইকোসাইডস (TGs, phenylethanoid glycosides, and other glycosides), polysaccharides (PSs), এবং oligosaccharides (OSs) থেকে তিনটি নির্যাসের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব অন্বেষণ করেছি। আমাদের ফলাফল C. deserticola এর সঠিক ক্লিনিকাল প্রয়োগে অবদান রাখতে পারে এবং এর জন্য একজন প্রার্থী এজেন্ট প্রদান করতে পারেইস্কেমিক স্ট্রোক থেরাপি.

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

রাসায়নিক এবং বিকারক

Cistanche deserticola এর ডালপালা আলাশান, অভ্যন্তরীণ মঙ্গোলিয়া থেকে কেনা হয়েছিল এবং একজন লেখক (P.-F. Tu) দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল। টিজি, পিএস এবং ওএসগুলি আমাদের পূর্বে রিপোর্ট করা পদ্ধতি অনুসারে প্রস্তুত করা হয়েছিল। TG-এর পরিমাণগত বিশ্লেষণ পূর্বে বর্ণিত হিসাবে উচ্চ-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) দ্বারা সম্পাদিত হয়েছিল, এবং এর ক্রোমাটোগ্রাম চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে। TG-এর প্রধান উপাদানগুলি হল echinacoside, tubuloside A, acteoside, isoacteoside, এবং 2'-acetylacteoside; তাদের বিষয়বস্তু যথাক্রমে 163.05 mg/g, 4.125 mg/g, 41.66 mg/g, 22.655 mg/g, এবং 12.045 mg/g। PSs এবং OSs-এর বিষয়বস্তু যথাক্রমে 69.42% এবং 65.24%, যথাক্রমে HPLC এবং ফেনল-সালফিউরিক অ্যাসিড বিশ্লেষণ দ্বারা নির্ধারিত।

ইসকেমিক স্ট্রোকের চিকিৎসার জন্য ন্যাচারাল সিস্টানচে টিউবুলোসা PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ইচিনাকোসাইড (A0282), টিউবুলসাইড A (A0942), অ্যাক্টিওসাইড (A0280), আইসোঅ্যাকটিওসাইড (A0281), এবং 2'- অ্যাসিটিল্যাকটিওসাইড (A0943) এর প্রমিত রেফারেন্স চেংডু মাস্ট বায়োটেকনোলজি থেকে কেনা হয়েছিল। সমস্ত মানগুলির বিশুদ্ধতা 98% এর বেশি। Boster থেকে Nissl stain H&E কিটগুলি কেনা হয়েছিল৷ এদারাভোন (T0407-1) ​​টার্গেট মোল (সাংহাই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। খরগোশ বিরোধী এমএপি-2 (ab32454), Nrf-2 (ab31163), PDGFRb (ab32570), Keap-1 (ab66620), এবং মাউস অ্যান্টি-ইঁদুর CD31 (ab24590) কেনা হয়েছিল Abcam Inc. থেকে খরগোশ অ্যান্টি-র‍্যাট Claudin5 (BS1069), ZO-1 (BS9802M), এবং Occludin (BS72035) বায়োওয়ার্ল্ড প্রযুক্তি থেকে কেনা হয়েছে৷ সেল সিগন্যালিং টেকনোলজি ইনক। (বোস্টন, এমএ, ইউএসএ) ছিল খরগোশ বিরোধী ইঁদুর সিনাপসিন-1 (SYN,5297T), PSD95 (3450T), a-মসৃণ পেশী অ্যাক্টিন (a-SMA,19245T) এর উত্স। GAPDH (HRP-60004) প্রোটিনটেক গ্রুপ, Inc থেকে কেনা হয়েছিল। সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি জোংশান গোল্ডেন ব্রিজ বায়োটেকনোলজি (বেইজিং, চীন) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। Hoechst 33258 Beyotime থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল।

প্রাণী

Sprague-Dawley ইঁদুর (পুরুষ, 250-300g ওজনের) ভাইটাল রিভার ল্যাবরেটরি অ্যানিমাল টেকনোলজি থেকে প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং 12 ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্রে রাখা শীতাতপ নিয়ন্ত্রিত ঘরে রাখা হয়েছিল। সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা পশু গবেষণা ARRIVE নির্দেশিকা দ্বারা সঞ্চালিত হয়েছিল এবং পেকিং বিশ্ববিদ্যালয়ের স্বাস্থ্য বিজ্ঞান কেন্দ্রের প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণী যত্ন ও ব্যবহার কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

পশু পরীক্ষামূলক প্রোটোকল

ইঁদুরগুলি MCAO/R-এর অধীন ছিল, যেমন পূর্বে বর্ণিত হয়েছে (ওয়াং এট আল।, 2018)। সংক্ষেপে, বাম সাধারণ ক্যারোটিড ধমনী (সিসিএ), বাহ্যিক ক্যারোটিড ধমনী (ইসিএ), এবং অভ্যন্তরীণ ক্যারোটিড ধমনী (আইসিএ) উন্মুক্ত করা হয়েছিল, এবং মাঝখানে পৌঁছনো পর্যন্ত ইসিএ থেকে একটি 3-0 নাইলন মনোফিলামেন্ট সিউচার ঢোকানো হয়েছিল। সেরিব্রাল আর্টারি (MCA)। এমসিএ অবরোধের 1.5 ঘন্টা পরে, ফিলামেন্টটি সরিয়ে রিপারফিউশন সিমুলেট করা হয়েছিল। অস্ত্রোপচারের সময়, সমস্ত ইঁদুরের শরীরের তাপমাত্রা 37.0 ডিগ্রি বজায় রাখা হয়েছিল। ওষুধ

প্রশাসন

SPSS সফ্টওয়্যার সংস্করণ 22 ব্যবহার করে ইঁদুরগুলিকে এলোমেলোভাবে ছয়টি দলে বিভক্ত করা হয়েছিল৷{1}} যেমন বর্ণনা করা হয়েছে: স্বাভাবিক গোষ্ঠী (NOR); মডেল গ্রুপ (MOD); edaravone গ্রুপ (পজিটিভ ড্রাগ, 6 mL/kg, EDI); TGs গ্রুপ (280 mg/kg, TGs); PSs গ্রুপ (280 mg/kg, PSs), এবং OSs গ্রুপ (280 mg/kg, OSs)। TGs, PSs, এবং OSs 14 দিনের জন্য MCAO/R-এর পরে দিনে একবার পরিচালিত হয়েছিল। NOR এবং MOD গ্রুপগুলিকে সাধারণ স্যালাইন দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। প্রাণীর সংখ্যা সারণী 1 এ দেখানো হয়েছে।

ওজন পরিমাপ এবং পরিবর্তিত স্নায়বিক ঘাটতি স্কোর (mNSS)

একটি ADVENTURE™ ডিজিটাল স্কেল (OHAUS, New Jersey, USA) ব্যবহার করে 14 তম দিনে শরীরের ওজন পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। এফজে ওয়াং (ওয়াং এট আল।, 2018) দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে mNSS মূল্যায়ন করা হয়েছিল, ছোটখাটো সংশোধন সহ।

2, 3, 5-ট্রাইফেনাইলটেট্রাজোলিয়াম ক্লোরাইড (টিটিসি) স্টেনিং

পূর্বে বর্ণিত হিসাবে ইনফার্কের পরিমাণ পরিমাপ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, মস্তিষ্ককে সাতটি সমান ব্যবধানযুক্ত করোনাল ব্লকে (2 মিমি) ভাগ করা হয়েছিল। এই বিভাগগুলি 15 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে 2% TTC দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। ইনফার্কট আয়তন (%)=(ipsilateral ischemic hemisphere volume −contralateral ischemic hemisphere volume)/contralateral ischemic hemisphere volume × 100.

Nissl এবং H&E স্টেনিং

ইঁদুরগুলিকে গভীরভাবে চেতনানাশক করা হয়েছিল, এবং তারপরে প্যারাফিন মোমের মধ্যে এমবেড করা 4% প্যারাফর্মালডিহাইড ব্যবহার করে পুরো মস্তিষ্কটি মাথার খুলি থেকে দ্রুত সরানো হয়েছিল এবং 7 µm পুরুত্বের স্লাইসগুলিতে ভাগ করা হয়েছিল। বিভাগগুলি Nissl এবং H&E দিয়ে দাগযুক্ত ছিল। এই গবেষণায়, প্রতিটি টিস্যুর নমুনায় হালকা মাইক্রোস্কোপ দিয়ে ছয়টি এলোমেলো 200 × 200 µm ক্ষেত্র ক্যাপচার করা হয়েছিল। আইপিপি সফ্টওয়্যার সংস্করণ 6.0 দিয়ে নিসলের মৃতদেহের সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল।

ইভান্স ব্লু অ্যাস

MCAO/R এর পরে ইঁদুরকে 2% EB দিয়ে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। দুই ঘন্টা পরে, ইঁদুরগুলিকে অ্যানেস্থেশিয়া করা হয়েছিল এবং তারপরে পুরো মস্তিষ্ক দ্রুত সরিয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং অ্যাসিটোনে একজাতকরণ করা হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টগুলি 800 টিএস শোষণকারী পাঠক দ্বারা 620 এনএম এ বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ক্যাটালেস (CAT), সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (SOD), ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (MDA), এবং Glutathione Peroxidase (GSH-Px) এর কার্যকলাপের পরিমাপ

সমস্ত সিরাম নমুনা 4,000 × rpm-এ 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং তারপর প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসরণ করে MDA, CAT, SOD, এবং GSH-Px-এর কার্যকলাপ সনাক্ত করতে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ওয়েস্টার্ন ব্লটিং বিশ্লেষণ

প্রতিটি ইঁদুর থেকে সংগৃহীত মস্তিষ্কের টিস্যুগুলি (100 মিলিগ্রাম) একত্রিত করা হয়েছিল এবং RIPA লাইসিস বাফারে লাইজ করা হয়েছিল এবং তারপরে বিসিএ কিট ব্যবহার করে প্রোটিনের ঘনত্ব সনাক্ত করতে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। টিস্যু মোট প্রোটিনগুলি 10% SDS-PAGE জেলগুলিতে লোড করা হয়েছিল এবং একটি নাইট্রোসেলুলোজ ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। ঝিল্লিটি 5% স্কিম মিল্ক ব্যবহার করে ব্লক করা হয়েছিল, তারপর 4 ডিগ্রিতে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল। ঝিল্লি তারপর একটি সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি সঙ্গে incubated ছিল. কোডাক ডিজিটাল ইমেজিং সিস্টেম ব্যবহার করে ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ইমিউনোফ্লোরসেন্ট বিশ্লেষণ

CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2, Nrf-2 এবং Keap-1 এর জন্য ইমিউনোফ্লোরোসেন্স স্টেনিং করা হয়েছিল৷ Nrf-2, CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2 এবং Keap-1-এর বিরুদ্ধে প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি 1 এ পাতলা করা হয়েছিল :200 এবং 1:100, যথাক্রমে। আলেক্সা ফ্লুর 488 মাউস অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি এবং রোডামাইন (টিআরআইটিসি) ছাগল অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি-এর সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি 1:200 এ পাতলা করা হয়েছিল। নিউক্লিয়াসটি Hoechst 33258 দ্বারা দাগযুক্ত ছিল। ছবিগুলি Vectra® Polaris™ অটোমেটেড কোয়ান্টিটেটিভ প্যাথলজি ইমেজিং সিস্টেম (PerkinElmer, USA) ব্যবহার করে ক্যাপচার করা হয়েছিল। প্রোটিন এক্সপ্রেশনটি IPP সফ্টওয়্যার সংস্করণ 6.0 ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

সমস্ত ডেটা গড় ± SD হিসাবে বর্ণনা করা হয়েছিল। SPSS সফ্টওয়্যার সংস্করণ 22৷{1}} পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য সম্পাদিত হয়েছিল৷ বিভিন্ন গোষ্ঠীর তুলনা করার সময় একমুখী আনোভা ব্যবহার করা হয়েছিল। P < 0.05 পরিসংখ্যানগত পার্থক্য হিসাবে বিবেচিত হয়েছিল।

ন্যাচারাল সিস্টানচে টিউবুলোসা ফর অ্যান্টি-ইস্কেমিক ডিজিজ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ফলাফল

TGs শরীরের ওজন বাড়ায় এবং MCAO/R ইঁদুরের মস্তিষ্কের ক্ষতি কমায়

TGs, PSs, Oss এবং EDI দিয়ে নিরাময়ের 14 দিন পর, শরীরের ওজন, স্নায়বিক ঘাটতি এবং I/R ইঁদুরের ইনফার্কের পরিমাণ মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে এমওডি গ্রুপে শরীরের ওজন ব্যাপকভাবে হ্রাস পেয়েছে, যখন টিজি, পিএস এবং ইডিআই গ্রুপের ওজন হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 2এ)। স্নায়বিক ঘাটতির স্কোরগুলি EDI এবং TGs (চিত্র 2B) দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। এনওআর গ্রুপের ইঁদুরের মস্তিষ্কের স্লাইসগুলি গভীর লাল ছিল এবং কোনও ইনফার্কশন ছিল না, যখন এমওডি গ্রুপের ইঁদুরগুলি একটি বড় ipsilateral সেরিব্রাল ইনফার্কশন দেখিয়েছিল। TGs চিকিত্সার পরে, ইনফার্কের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 2C, D)। PSs এবং OSs চিকিত্সা উপরের সূচকগুলিতে কোনও সুস্পষ্ট প্রভাব দেখায়নি। উপরের তথ্যগুলি দেখায় যে TGs লক্ষণীয়ভাবে I/R-প্ররোচিত সেরিব্রাল আঘাতকে উপশম করতে পারে, কিন্তু PSs এবং OSs পারেনি।

এমসিএও/আর ইঁদুরগুলিতে টিজিগুলি হিস্টোপ্যাথলজিকাল ক্ষতি কমিয়ে দেয়

হিস্টোপ্যাথলজিকাল ক্ষতির উপর TGs, PSs এবং OSs চিকিত্সার কিছু প্রভাব নির্ধারণ করতে, প্যাথলজিকাল ক্ষতি প্রকাশ করার জন্য H&E স্টেনিং করা হয়েছিল। এনওআর গ্রুপের মস্তিষ্কের হিস্টোমরফোলজিকাল কাঠামো নিয়মিতভাবে সাজানো হয়েছিল। TGs গোষ্ঠীর আকারবিদ্যা পরিবর্তনগুলি MOD গ্রুপের তুলনায় সামান্য ছিল। যাইহোক, PSs এবং OSs চিকিত্সা গোষ্ঠীগুলি অঙ্গসংস্থানের পরিবর্তনগুলির কোনও উল্লেখযোগ্য উন্নতি দেখায়নি (চিত্র 3)।

আই/আর-প্ররোচিত ইঁদুরের পরে টিজিগুলি নিউরোনাল ইনজুরি কমিয়ে দেয়

নিসল স্টেনিং ইস্কেমিক এলাকার পেনাম্ব্রাতে নিউরনের হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পরিবর্তন দেখিয়েছে। চিত্র 4 এ দেখানো হয়েছে, স্বাভাবিক নিউরনগুলির একটি পরিষ্কার নিউক্লিওলাস এবং অক্ষত গঠন ছিল। এমওডি গ্রুপে, নিউরনগুলি আন্তঃকোষীয় স্থানগুলিকে বর্ধিত করেছিল। নিস্‌ল মৃতদেহগুলি অদৃশ্য, সঙ্কুচিত এবং গভীর দাগযুক্ত। যাইহোক, এই পরিবর্তনগুলি খুব কমই ইডিআই, টিজি এবং পিএস গ্রুপগুলিতে পরিলক্ষিত হয়েছিল। এই ফলাফলগুলি চিত্রিত করেছে যে TGs এবং PSs উল্লেখযোগ্যভাবে পারেঅ্যাটেনুয়েট ইস্কেমিয়া/রিপারফিউশন-প্ররোচিত নিউরোনাল ইনজুরি.

I/R-চিকিত্সা করা ইঁদুরের পরে TGs BBB ব্যাঘাত কমায়

ইভান্স ব্লু অ্যাস হল BBB ব্যাপ্তিযোগ্যতার পরিবর্তন নিয়ে গবেষণা করার জন্য একটি শাস্ত্রীয় পদ্ধতি। পরীক্ষার ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে এমওডি গ্রুপে ইভান্স ব্লু বর্ধিত হয়েছে, যেখানে টিজি এবং ইডিআই-চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে ইভান্স ব্লু উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। অধিকন্তু, PSs এবং OSs থেরাপি গ্রুপগুলির মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না (চিত্র 5)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে TGs উল্লেখযোগ্যভাবে BBB ব্যাঘাত কমাতে পারে।

TGs I/R আহত ইঁদুরের মধ্যে এনজিওজেনেসিস প্রচার করে

আরও সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে অ্যাঞ্জিওজেনেসিস তীব্র ইস্কেমিক স্ট্রোকের পরে স্নায়বিক কার্যকরী পুনরুদ্ধার এবং প্রগনোস্টিক ফলাফলগুলিতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে (ইউয়েন এট আল।, 2015)। এনজিওজেনেসিসে টিজি, পিএস এবং ওএস-এর প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করতে, সিডি 31 এবং এ-এসএমএ কৈশিক সংখ্যাগুলি পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ইমিউনোফ্লোরোসেন্স স্টেনিং দেখায় যে MOD গ্রুপটি সাধারণ ইঁদুরের তুলনায় I/R ইঁদুরের ইস্কেমিক অঞ্চলের পেনাম্ব্রাতে CD31 (চিত্র 6A, B) এবং a-SMA (চিত্র 6C, D) এর অভিব্যক্তিতে একটি উল্লেখযোগ্য হ্রাস ঘটায়। . এই ফলাফলটি চিত্রিত করে যে I/R ইস্কেমিক গোলার্ধের কর্টেক্স পেনাম্ব্রাতে ভাস্কুলার ক্ষতির কারণ হতে পারে। যাইহোক, টিজি এবং ইডিআই চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে কৈশিক ঘনত্ব, এনজিওজেনেসিস এবং আর্টেরিওজেনেসিস বৃদ্ধি করেছে যা CD31 এবং a-SMA এর বর্ধিত অভিব্যক্তি দ্বারা নির্দেশিত। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে TGs I/R ইঁদুরের ইস্কেমিক পেনাম্ব্রাতে এনজিওজেনেসিসকে উন্নীত করতে পারে, কিন্তু পিএস এবং ওএসগুলি পারেনি।

TGs I/R আহত ইঁদুরে টাইট জংশন প্রোটিনের প্রকাশ বাড়ায়

BBB ব্যাঘাত মস্তিষ্কের জলের উপাদান এবং টিস্যু ফুলে যেতে পারে, যা মস্তিষ্কে আঘাতের দিকে পরিচালিত করে। টাইট জংশন প্রোটিন BBB এর গুরুত্বপূর্ণ কাঠামোগত উপাদান। স্ট্রোকের পরে TGs, PSs, এবং OSs চিকিত্সা BBB অখণ্ডতাকে প্রভাবিত করতে পারে কিনা তা পরীক্ষা করার জন্য, ZO-1, claudin-5, এবং occludin-এর অভিব্যক্তিগুলি ইমিউনোফ্লোরোসেন্স বিশ্লেষণ দ্বারা সঞ্চালিত হয়েছিল। ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে MOD গ্রুপে claudin-5, occludin, এবং ZO-1 এর অভিব্যক্তিগুলি দৃশ্যত হ্রাস পেয়েছে৷ যাইহোক, প্রশাসনের 14 দিন পরে তারা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। PSs এবং OSs গোষ্ঠীগুলি এই প্রোটিন এক্সপ্রেশনগুলিতে কোনও উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন দেখায়নি (চিত্র 7)। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে টিজিগুলি টাইট জংশন প্রোটিন এক্সপ্রেশন নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং সম্ভবত I/R আঘাতের পরে BBB অখণ্ডতা বজায় রাখতে পারে।

TGs I/R আহত ইঁদুরের কৈশিকের উপর পেরিসাইট কভারেজ বাড়ায়

কৈশিকগুলির পেরিসাইট কভারেজ বিবিবি অখণ্ডতা বজায় রাখতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। এইভাবে, আমরা পরীক্ষা করেছি যে টিজি, পিএস এবং ওএস চিকিত্সা দ্বারা পেরিসাইট কভারেজ বাড়ানো যায় কিনা। ইমিউনোফ্লোরেসেন্স তীব্রতা বিশ্লেষণের ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে PDGFRb এবং CD31 উভয় অভিব্যক্তিই MOD গ্রুপে নাটকীয়ভাবে হ্রাস পেয়েছে। I/R ইঁদুরগুলিতে TG-এর প্রশাসন উল্লেখযোগ্যভাবে পুনরুদ্ধার করেছে বা PDGFRb এবং CD31 এর অভিব্যক্তির তীব্রতা বাড়িয়েছে, কিন্তু PSs এবং OSs চিকিত্সা গোষ্ঠীগুলিতে কোনও পার্থক্য লক্ষ্য করা যায়নি (চিত্র 8)। এইভাবে, টিজিগুলির চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে পেরিসাইট কভারেজ বৃদ্ধি করতে পারে। এই ফলাফলগুলি আরও নিশ্চিত করেছে যে TGs I/R এর পরে BBB এর অখণ্ডতা বজায় রাখতে পারে।

ইসকেমিক স্ট্রোক প্রতিরোধের জন্য ন্যাচারাল সিস্টানচে টিউবুলোসা PHGS75% ECH 30% ACT 12%