দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগের অগ্রগতিতে ফসফেটের প্রোটিন-স্বাধীন ভূমিকা

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

আইরিন ফারিয়া দুয়ার¹ ইত্যাদি

বিমূর্ত:বেশ কয়েকটি কারণ এতে অবদান রাখেরেনাল-ফাংশনCKD রোগীদের মধ্যে হ্রাস, এবং খাদ্যে ফসফেট উপাদানের ভূমিকা এখনও বিতর্কের বিষয়। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য হল সেই প্রক্রিয়াটি বিশ্লেষণ করা যার দ্বারা প্রোটিন থেকে স্বাধীন ফসফেট, CKD এর অগ্রগতির সাথে যুক্ত। প্রাপ্তবয়স্ক মিউনিখ-উইস্টার ইঁদুরগুলিকে 5/6 নেফ্রেক্টমি (এনএক্স) জমা দেওয়া হয়েছিল, কম প্রোটিনযুক্ত খাবার খাওয়ানো হয়েছিল এবং দুটি গ্রুপে বিভক্ত হয়েছিল। শুধুমাত্র ফসফেট উপাদান (নিম্ন ফসফেট, LoP, 0.2 শতাংশ ; উচ্চ ফসফেট, HiP, 0.95 শতাংশ ) ভিন্ন খাদ্য। ষাট দিন পর, জৈব রাসায়নিক পরামিতি এবংকিডনিহিস্টোলজি বিশ্লেষণ করা হয়। HiP গ্রুপ আরও খারাপ রেনাল ফাংশন উপস্থাপন করে, যার উচ্চ স্তরের PTH, FGF-23, এবং ফসফেটের ভগ্নাংশ নিঃসরণ। কিডনি টিস্যুর হিস্টোলজিক্যাল বিশ্লেষণে, তারা ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিসের উচ্চ শতাংশ, অ্যাক্টিন, পিসিএনএ এবংরেনালম্যাক্রোফেজ দ্বারা অনুপ্রবেশ এলওপি গ্রুপ রেনাল টিউবুল কোষে বেক্লিন-1 এর উচ্চতর অভিব্যক্তি উপস্থাপন করে, হাইপি গ্রুপের সাথে তুলনা করার সময় অটোফ্যাজিক প্রবাহের চিহ্নিতকারী। আমাদের অনুসন্ধানগুলি এর আনয়নে ফসফেটের ক্রিয়াকে হাইলাইট করেকিডনিইন্টারস্টিশিয়াল প্রদাহ এবং ফাইব্রোসিস, রেনাল রোগের অগ্রগতিতে অবদান রাখে। রেনাল সেল অটোফ্যাজি মেকানিজমের dysregulation উপর ফসফেট একটি সম্ভাব্য প্রভাব ক্লিনিকাল অধ্যয়ন সঙ্গে আরও তদন্ত প্রয়োজন.

কীওয়ার্ড:ফসফেট;খাদ্য; CKDঅগ্রগতি;রেনালফাইব্রোসিস; অটোফ্যাজি;apoptosis

মূল অবদান:ফসফেট খাদ্য সীমাবদ্ধ করে কিডনি সুরক্ষার প্রক্রিয়াগুলি এখনও নির্ধারণ করা হয়নি। এই গবেষণায়, ফসফেট ওভারলোড CKD এর অগ্রগতিতে প্রদাহজনক পথগুলি সক্রিয় করে এবং এর আনয়নে কাজ করেকিডনিইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস। রেনাল সেল অ্যাপোপটোসিস এবং অটোফ্যাজিক ফেলোতে হাইপারফসফেমিয়ার প্রভাব আরও তদন্তের প্রয়োজন।

Cistanche tubulosa কিডনি রোগ প্রতিরোধ করে, নমুনা পেতে এখানে ক্লিক করুন

1। পরিচিতি

ক্রনিককিডনিরোগ (CKD) একটি জনস্বাস্থ্য সমস্যা হিসাবে বিবেচিত হয়। বয়সের সাথে সাথে এর প্রকোপ বৃদ্ধি পায় এবং বিশ্বব্যাপী 11 থেকে 13 শতাংশের মধ্যে পরিবর্তিত হয় [1]। যদিও CKD সাধারণত একটি অপরিবর্তনীয় অবস্থা, রোগের অগ্রগতিকে ধীর করার জন্য বিভিন্ন পন্থা ব্যবহার করা যেতে পারে, যেমন রক্তচাপ নিয়ন্ত্রণ, ডিসলিপিডেমিয়া এবং হাইপারগ্লাইসেমিয়া, অ্যাঞ্জিওটেনসিন-রূপান্তরকারী এনজাইম ইনহিবিটর ব্যবহার, এবং একটি কম প্রোটিন খাদ্য [2-7] . এই কৌশলগুলির মধ্যে, একটি কম প্রোটিন খাদ্য বিলম্বের জন্য সর্বোচ্চ বিতর্কিত প্রস্তাবকিডনিএর সম্মতি, নিরাপত্তা এবং কার্যকারিতা নিয়ে উদ্বেগের কারণে কার্যকারিতা হ্রাস পায়। খাদ্যে প্রোটিন কমানোর সুবিধার বিষয়ে ঐকমত্যের অভাব খাদ্যে প্রোটিন এবং ফসফেট সামগ্রীর ওভারল্যাপিং ভূমিকার উপর নির্ভর করে। যেহেতু প্রোটিনের উৎস ফসফেটে সমৃদ্ধ, তাই সীমিত ফসফেট গ্রহণের জন্য প্রোটিন গ্রহণ কমানোর পরামর্শ দেওয়া হয়। ফসফেট সীমাবদ্ধ না করে প্রোটিন সীমাবদ্ধ করা সম্ভব, যদিও বিপরীতটি কঠিন।

পরীক্ষামূলক গবেষণায়, একটি কম-প্রোটিন খাদ্যের প্রভাব CKD মডেলগুলিকে গ্লোমেরুলার ক্ষতি এবং প্রোটিনুরিয়া থেকে রক্ষা করে [৮], গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ হারের বৃহত্তর সংরক্ষণের প্রচার করে [৯]। এটি লক্ষ করা উচিত যে খাদ্যের প্রোটিন এবং ফসফেট অত্যন্ত পারস্পরিক সম্পর্কযুক্ত। অতএব, যদিও কিছু পরীক্ষামূলক গবেষণা প্রোটিন সীমাবদ্ধতার বিচ্ছিন্ন প্রভাব মূল্যায়নের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছে, তারা অসাবধানতাবশত ফসফেট সীমাবদ্ধতার কারণে পক্ষপাতদুষ্টও হতে পারে। অন্যদিকে, CKD বিকাশে ফসফেট-সমৃদ্ধ খাদ্যের ব্যক্তিগত অবদান স্পষ্টভাবে প্রদর্শিত হয়েছে [10,11]। একটি উচ্চ-ফসফেট খাদ্য আরও ইন্টারস্টিশিয়াল প্ররোচিত করার জন্য দেখানো হয়েছিলকিডনিফাইব্রোসিস এবং টিউবুলার অ্যাট্রোফি, ন্যূনতম গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস সহ, ইউরেমিক ইঁদুরে। মজার বিষয় হল, ফসফেট সীমাবদ্ধতার পরে ক্ষতিটি ভোঁতা হয়েছিল [12]। উল্লেখ্য, এই গবেষণায় খাদ্যের প্রোটিনের পরিমাণ উল্লেখ করা হয়নি।

ক্লিনিকাল পরিস্থিতিতে, একটি কম-প্রোটিন খাদ্য ইউরেমিক টক্সিনের ঘনত্ব হ্রাস করে এবং অবশিষ্ট রেনাল ফাংশন সংরক্ষণ করে, এমনকি রক্ষণশীল যত্ন থেকে ক্রমবর্ধমান ডায়ালাইসিস পদ্ধতিতে রূপান্তরের মধ্যেও [13]।খাদ্যতালিকাগতপ্রোটিনসাম্প্রতিক মেটা-বিশ্লেষণে সীমাবদ্ধতা CKD অগ্রগতি বিলম্বিত করেছে [14]। যাইহোক, যেহেতু প্রোটিন সীমাবদ্ধতা নিম্ন সিরাম ফসফেট স্তরের সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল, তাই খাদ্যের এই উপকারী প্রভাবটি ফসফেট সীমাবদ্ধতার দ্বারা আংশিকভাবে ব্যাখ্যা করা যেতে পারে। এখন পর্যন্ত সবচেয়ে বড় সম্ভাব্য অধ্যয়ন, MDRD [15], মাঝারি রেনাল অপ্রতুলতা রোগীদের মধ্যে একটি কম প্রোটিন খাদ্যের সামান্য সুবিধা দেখায়, যেখানে গুরুতর রেনাল অপ্রতুলতা রোগীদের ক্ষেত্রে কিডনি রোগের অগ্রগতি প্রভাবিত হয়নি। তা সত্ত্বেও, এই পরীক্ষায় খাদ্যে ফসফেটের বিষয়বস্তু সম্বোধন করা হয়নি এবং ধীরগতিতে এর ব্যক্তিগত অবদানের প্রভাবCKDঅগ্রগতি অজানা রয়ে গেছে।

এটা জানা যায় যে ফসফেট রেনাল এবং সঞ্চালনকারী ক্লোথোকে কম করতে পারে [16], সাইটোপ্রোটেকশন এবং অ্যান্টিফাইব্রোসিসে জড়িত একটি অ্যান্টিজিং প্রোটিন, অ্যান্টিঅক্সিডেটিভ এবং অ্যান্টিঅ্যাপোপ্টোটিক প্রভাব [17]। উপরন্তু, Klotho অভাবের কারণে রেনাল কোষে ত্রুটিপূর্ণ অটোফ্যাজি ইতিমধ্যে প্রদর্শিত হয়েছে [18]। অটোফ্যাজি হল একটি ক্যাটাবলিক প্রক্রিয়া যার মধ্যে সেলুলার হোমিওস্ট্যাসিস বজায় রাখা এবং স্ট্রেসের পরিস্থিতিতে কোষের কার্যকারিতা রক্ষা করা গুরুত্বপূর্ণ। প্রমাণের কিছু অংশ অটোফ্যাজি এবং বিভিন্ন পথের মাধ্যমে CKD-এর অগ্রগতির মধ্যে একটি সম্পর্কের পরামর্শ দেয়, যার মধ্যে রয়েছে TGF- সংকেত [19], রেনাল ফাইব্রোসিসের বিকাশের জন্য একটি শক্তিশালী ফাইব্রোজেনিক ফ্যাক্টর। TGF- বিভিন্ন জৈবিক প্রক্রিয়াকে প্রভাবিত করে, কোষের বিস্তার এবং পার্থক্য, অ্যাপোপটোসিস নিয়ন্ত্রণ করে এবং নির্দিষ্ট ট্রান্সমেমব্রেন রিসেপ্টরগুলির সাথে আবদ্ধ হয়ে কাজ করে যা SMAD প্রোটিন দ্বারা মধ্যস্থতাকারী অন্তঃকোষীয় সংকেত প্ররোচিত করে [20]। অ্যাপোপটোসিস হল প্রোগ্রাম করা কোষের মৃত্যুর একটি প্রক্রিয়া যা নেক্রোসিস থেকে আলাদা। ফসফেটকে এন্ডোথেলিয়াল [২১], অস্টিওব্লাস্টিক [২২] এবং পেরিটোনিয়াল মেসোথেলিয়াল কোষের পরীক্ষামূলক মডেলগুলিতে অ্যাপোপটোসিসের মধ্যস্থতাকারী হিসাবে বর্ণনা করা হয়েছে [২৩]। এর অগ্রগতিতে অ্যাপোপটোটিক কোষের মৃত্যুর অংশগ্রহণের প্রমাণ রয়েছেকিডনিআঘাত [২৪], তবে রেনাল সেল অ্যাপোপটোসিসে ফসফেটের প্রভাব এখনও স্পষ্ট করা হয়নি।

যেহেতু একটি উচ্চ-ফসফেট খাদ্য CKD অগ্রগতি ত্বরান্বিত করে তা এখনও সম্পূর্ণরূপে ব্যাখ্যা করা হয়নি, তাই আমরা অনুমান করেছি যে এটি একটি অকার্যকর অটোফ্যাজিক সহকর্মীর সাথে যুক্ত হতে পারে। অতএব, বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা মিউনিখ-উইস্টার ইঁদুরের দুটি গ্রুপকে তাদের খাদ্যের ফসফেট সামগ্রী অনুসারে মূল্যায়ন করেছি (নিম্ন 0.2 শতাংশ বনাম উচ্চ0.95 শতাংশ) এবং একটি এর প্রভাব পরীক্ষা করেছি কম ফসফেট খাদ্যকিডনিহিস্টোলজিক্যাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি পরিবর্তন, একটি অটোফ্যাজি মার্কার সহ, বেক্লিন-1।

2. ফলাফল

নিম্ন- (LoP) এবং উচ্চ-ফসফেট খাদ্য (HiP) গ্রুপ থেকে প্রাপ্ত হেমোডাইনামিক, অঙ্গসংস্থানগত এবং জৈব রাসায়নিক পরামিতিগুলি সারণি 1 এ দেওয়া হয়েছে। প্রত্যাশিত হিসাবে, 5/6- নেফ্রেক্টমি ক্রিয়েটিনিন ক্লিয়ারেন্স হ্রাস এবং বৃদ্ধিকে প্ররোচিত করেছে। উভয় গ্রুপে সিরাম ইউরিয়া এবং ক্রিয়েটিনিনে। HiP গ্রুপের প্রাণীরা নিম্ন রেনাল ফাংশন উপস্থাপন করে, যেমন উচ্চ ক্রিয়েটিনিন এবং নিম্ন ক্রিয়েটিনিন ক্লিয়ারেন্স দ্বারা প্রমাণিত; তারা কম হেমাটোক্রিট এবং কম চূড়ান্ত ওজন প্রদর্শন করেছে। HiP গ্রুপ সিরাম এবং ফসফেটের ভগ্নাংশের নিঃসরণ, সেইসাথে প্যারাথাইরয়েড হরমোন (PTH) এবং ফাইব্রোব্লাস্ট গ্রোথ ফ্যাক্টর-23 (FGF-23) বৃদ্ধি উপস্থাপন করেছে। লক্ষণীয়, মূত্রথলির চাপ, প্রাথমিক ওজন এবং মূত্রনালীর অ্যালবুমিন নিঃসরণ গ্রুপগুলির মধ্যে একই রকম ছিল।

হিস্টোলজিক্যাল অনুসন্ধানগুলি চিত্র 1-3 এ দেখানো হয়েছে। Glomerulosclerosis (GS) সবেমাত্র উভয় গ্রুপে পাওয়া গেছে। যাইহোক, হিপ গ্রুপের ইঁদুরদের মধ্যে ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিসের শতাংশ উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। তদনুসারে, এই প্রাণীগুলিরও একটি উচ্চ শতাংশ ছিল - মসৃণ পেশী অ্যাক্টিন-দাগযুক্ত এলাকা এবং ম্যাক্রোফেজগুলির দ্বারা উচ্চতর রেনাল অনুপ্রবেশ, ED-1 অভিব্যক্তি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছে, যেমনটি সারণী 2 এ দেখানো হয়েছে। ফসফরিলেটেড SMAD (p-SMAD) অভিব্যক্তি, TGF-বিটা পাথওয়ে অ্যাক্টিভেশনের একটি চিহ্নিতকারী, গ্রুপের মধ্যে আলাদা ছিল না।

প্রলিফারেটিভ সেল নিউক্লিয়ার অ্যান্টিজেন (PCNA)-পজিটিভ কোষগুলি HiP গ্রুপে প্রাধান্য পেয়েছিল, পরামর্শ দেয় যে ফসফেট ওভারলোড আরও তীব্র রেনাল কোষের বিস্তারকে প্রচার করে। বিপরীতভাবে, এলওপি গ্রুপে অ্যাপোপটোটিক কোষের সংখ্যা বেশি থাকে। একইভাবে, বেক্লিন 1-পজিটিভ কোষগুলি এলওপি গ্রুপে টিউবুলোইনটারস্টিশিয়াল ক্ষতগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যা পুনরুত্পাদনশীল অটোফ্যাজিক প্রক্রিয়াকে বাধা দেওয়ার ক্ষেত্রে উচ্চতর ফসফেটের সম্ভাব্য প্রভাব নির্দেশ করেকিডনিটিস্যু

3. আলোচনা

এই পরীক্ষামূলক অধ্যয়নটি তদন্ত করেছে যে খাদ্যতালিকাগত ফসফেট সীমাবদ্ধতা CKD এর অগ্রগতি ধীর করার জন্য একটি কার্যকর পদক্ষেপ কিনা, সহজাত খাদ্য প্রোটিন সীমাবদ্ধতা নির্বিশেষে। আমরা একটি 5/6-নেফ্রেক্টমি প্রাণী মডেলে ফসফেটের বিভিন্ন বিষয়বস্তু ({{0}.2 বনাম 0.95 শতাংশ) সহ খাদ্যের প্রভাব পরীক্ষা করেছি, যেখানে সমস্ত প্রাণী কম-প্রোটিন খাদ্য গ্রহণ করে (12 শতাংশ)। আমাদের অনুসন্ধানে দেখা গেছে যে PTH, FGF-23 এবং ফলস্বরূপ, ফসফেটের ভগ্নাংশ নিঃসরণ বৃদ্ধি সত্ত্বেও একটি উচ্চ-ফসফেট খাদ্য হাইপারফসফেটেমিয়ার সাথে যুক্ত ছিল। উপরন্তু, HiP কিডনি ফাংশন এবং ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস বৃদ্ধি, যা উচ্চ-অ্যাক্টিন অভিব্যক্তি, ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ, এবং সেলুলার বিস্তার, সেইসাথে অটোফ্যাজি প্রতিরোধের সাথে যুক্ত ছিল।

25,546 জন CKD নন-ডায়ালাইসিস রোগীদের জড়িত 12 টি সমগোত্রীয় গবেষণার একটি মেটা-বিশ্লেষণ সিরাম ফসফেট স্তরের মধ্যে একটি স্বাধীন সম্পর্ক প্রদর্শন করেছে,কিডনিব্যর্থতা, এবং মৃত্যুহার [25]। অধিকন্তু, 13,772 ডায়ালাইসিস ঘটনার রোগীদের উপর একটি পূর্ববর্তী সমন্বিত সমীক্ষায় হাইপারফসফেটেমিয়া এবং CKD-খনিজ এবং হাড়ের ব্যাধির অন্যান্য অস্বাভাবিকতার মধ্যে একটি সম্পর্ক প্রকাশ করেছে যা অবশিষ্টাংশের একটি স্থিরভাবে হ্রাস পেয়েছে।কিডনিফাংশন [২৬]। ফসফেট সীমাবদ্ধতা CKD অগ্রগতি বিলম্বিত করার পদ্ধতি এখনও প্রতিষ্ঠিত হয়নি। একটি পরীক্ষামূলক সমীক্ষায়, আমরা দেখিয়েছি যে একটি ফসফেট-সমৃদ্ধ খাদ্য একটি স্থির প্যারাথাইরয়েড ব্যবহার করে প্যারাথাইরয়েডেক্টমি এবং 5/6-নেফ্রেক্টমিতে জমা দেওয়া উইস্টার ইঁদুরের কম-ফসফেট ডায়েটের সাথে তুলনা করলে আরও প্রতিবন্ধী রেনাল ফাংশনের সাথে যুক্ত ছিল। হরমোন (PTH) সম্পূরক [১১]। কুসানো এট আল। [10] দেখিয়েছেন যে রেনাল-ফাংশন সুরক্ষা কম-ফসফেট (0.3 শতাংশ) খাদ্যের সাথে যুক্ত ছিল, ইউরেমিক ইঁদুরের খাদ্যতালিকাগত প্রোটিন উপাদান নির্বিশেষে। স্বাভাবিক ফসফেট (0.5 শতাংশ) ডায়েট সহ ইঁদুররা, তবে, খুব কম প্রোটিন (8.4 শতাংশ) খাবার খাওয়ানো হলেই এই সুবিধাগুলি উপস্থাপন করে। একসাথে নেওয়া, এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে খাদ্যতালিকাগত ফসফেটের ভূমিকা খাদ্যের প্রোটিনের চেয়ে বেশি শক্তিশালী হতে পারে। যাইহোক, উপরের উল্লিখিত গবেষণার কোনটিই সম্ভাব্য পথগুলি তদন্ত করার চেষ্টা করেনি যা ফসফেট-সম্পর্কিত কিডনি ক্ষতিতে জড়িত হতে পারে।

CKD এর অগ্রগতিতে ফসফেট ওভারলোডের ক্রিয়াটি বেশ কয়েকটি গবেষণার বিষয় হয়েছে। লেবেল এবং অন্যান্য. প্রথমে একটি প্রাণীর মডেলে এই সম্ভাবনার পরামর্শ দেওয়া হয়েছিল, কিন্তু খাদ্যতালিকাগত [27] প্রোটিন নিয়ন্ত্রিত ছিল না, যা সম্ভবত ফসফেটের বিচ্ছিন্ন প্রভাবকে মুখোশ দিয়েছিল। CKD পরিস্থিতিতে প্রোটিন নিষেধাজ্ঞার পরিবর্তে ফসফেট-স্বাধীন সীমাবদ্ধতার অনুমিত সুবিধাটি অত্যন্ত আগ্রহের কারণ সীমিত প্রোটিন গ্রহণের সাথে সিরাম ফসফেট নিয়ন্ত্রণের ঝুঁকি অপুষ্টির কারণ হতে পারে এবং উচ্চ মৃত্যুর কারণ হতে পারে।

ফসফেট খাদ্য উপাদান অগত্যা CKD রোগীদের মধ্যে সিরাম ফসফেট ঘনত্ব নির্ধারণ করে না [28], এই উপাদানের সিরাম ঘনত্ব থেকে স্বাধীন খাদ্য সীমাবদ্ধতার গুরুত্ব তুলে ধরে। হাড় এবং কার্ডিওভাসকুলার সিস্টেমের উপর ফসফেটের প্যাথলজিকাল প্রভাব হাইপারফসফেটিমিয়া চিকিত্সার জন্য হস্তক্ষেপকে অনুপ্রাণিত করে। ক্লিনিকাল অনুশীলনে, ফসফেটের মাত্রা কমাতে হস্তক্ষেপের মধ্যে রয়েছে খাদ্যতালিকাগত সীমাবদ্ধতা এবং ফসফেট বাইন্ডার। যদিও ক্লিনিকাল এন্ডপয়েন্টগুলিতে এই পদ্ধতির সুবিধাগুলি একটি ছোট-নমুনা-আকারের গবেষণায় সন্দেহজনক ছিল [২৯], এই জ্ঞানের মুখে যে ফসফেটের আধিক্য PTH এবং FGF এর অতিরিক্ত উত্পাদনের জন্য দায়ী-23, এটি বজায় রাখা যুক্তিসঙ্গত CKD [30] রোগীদের মধ্যে ফসফেটের মাত্রা যতটা সম্ভব কম।

একটি কম প্রোটিন খাদ্য ফসফেটের কম জৈব উপলভ্যতাকে প্ররোচিত করে এবং সিরাম FGF-23 [৩১,৩২] হ্রাস করে, যা রেনাল টিউবুলার কোষে সোডিয়াম-নির্ভর ফসফেট পুনর্শোষণের মধ্যস্থতাকারী। এটি পরামর্শ দেয় যে উন্নত CKD-এ ফসফেট-নিয়ন্ত্রণ প্রক্রিয়া কোনওভাবে প্রোটিন খাদ্য সামগ্রীতে সম্পূর্ণ স্বাধীন উপায়ে ফসফেট গ্রহণের দ্বারা প্রভাবিত হতে পারে। এই কারণে, আমরা একটি 5/6-নেফ্রেক্টমি মডেলে, CKD-এর অগ্রগতির উপর ফসফেট খাদ্য সামগ্রীর প্রভাব মূল্যায়ন করেছি। পূর্ববর্তী একটি পরীক্ষামূলক সমীক্ষা ইতিমধ্যেই প্রমাণ করেছে যে ফসফেট খুব কম প্রোটিনযুক্ত খাদ্যের (0.3 g/kg) প্রতি অ্যান্টিপ্রোটিনিউরিক প্রতিক্রিয়া পরিবর্তন করতে পারে, যা সিরাম ফসফেটের মাত্রা এবং ফসফেটুরিয়াকে অ্যান্টিপ্রোটিনিউরিক প্রতিক্রিয়ার সাথে একটি সম্পর্ক দেখায়। সীমিত প্রোটিন খাদ্য, রেনাল ফাংশন থেকে স্বাধীন [৩৩]। একটি ক্রসওভার স্টাডিতে CKD (eGFR 30-55 mL/min/m2) সহ 11 জন রোগীকে অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল, সিরাম ফসফেটের সার্কাডিয়ান ছন্দ একটি উচ্চ-ফসফেট ডায়েট দিয়ে পরিবর্তিত হয়েছিল, যা প্রস্রাব ফসফেট নিঃসরণ, PTH, বা FGF দ্বারা ব্যাখ্যা করা হয়নি। -23 [৩৪]। এই ফলাফলটি একটি স্বাধীন থেরাপিউটিক লক্ষ্য হিসাবে CKD রোগীদের মধ্যে ফসফেট খাদ্য সীমাবদ্ধতার গুরুত্বকে শক্তিশালী করে।

হিমোডাইনামিক স্ট্যাটাস হিপি গ্রুপে রেনাল ফাংশন খারাপ হওয়ার সাথে জড়িত বলে মনে হয় না, কারণ উভয় গ্রুপেই ধমনী চাপ একই রকম ছিল। উপরন্তু, আমরা আমাদের মডেলে উল্লেখযোগ্য গ্লোমেরুলার ক্ষতি খুঁজে পাইনি, যা প্রোটিন সীমাবদ্ধতা দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে। যাইহোক, আমরা HiP ডায়েট গ্রুপে আরও ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস উল্লেখ করেছি।

ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস মানুষ এবং ইঁদুরের রেনাল ফাংশন ক্ষতির সাথে ভালভাবে সম্পর্কযুক্ত।

পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় পেপ্টিডিল-প্রোলাইল আইসোমারেজ পিন 1 [35] এর মাধ্যমে উচ্চ-ফসফেট ডায়েট দ্বারা প্ররোচিত রেনাল ফাইব্রোসিসের বিকাশের সাথে যুক্ত করা হয়েছে, যেখানে অন্যান্য গবেষণাপত্রগুলি অ্যাক্লোথো ঘাটতির ক্ষতিকারক ভূমিকা নির্দেশ করেছে।কিডনিটিস্যু ফাইব্রোসিস [৩৬,৩৭]। পরীক্ষামূলক মডেলগুলিতে ক্লোথোর জেনেটিক মুছে ফেলার ফলে বার্ধক্য, বৃদ্ধি প্রতিবন্ধকতা এবং ক্যালসিফিকেশনগুলি ঘটে [৩৮]। FGF23-ক্লোথো সিগন্যালিং রেনাল ফসফেট পুনঃশোষণকে বাধা দেয়। CKD সেটিংয়ে, ক্লোথো এক্সপ্রেশন রেনাল টিউবুলে হ্রাস পায় [39]। অধিকন্তু, ফসফেট-সমৃদ্ধ খাদ্য ইস্কেমিয়া-রিপারফিউশন তীব্র কিডনি ইনজুরি মডেলে অ্যাক্লোথো ঘাটতিকে আরও বাড়িয়ে তুলেছে এবং আরও উন্নীত করেছেকিডনিটিস্যু ফাইব্রোসিস, CKD এর অগ্রগতি ত্বরান্বিত করে [18]। ক্লোথোর রেনাল এক্সপ্রেশনে ফসফেট ডায়েটের প্রভাব ইতিমধ্যে মুরিন মডেলগুলিতে প্রদর্শিত হয়েছিল [40]। সম্ভবত, অন্যান্য পথের মধ্যে, ফসফেট ওভারলোড টিউবুলার কোষে ক্লোথো এক্সপ্রেশন মড্যুলেট করে রেনাল ফাংশনকে খারাপ করে দেয়; ভবিষ্যতের গবেষণায় এটি আরও তদন্ত করা উচিত।

অ্যাপোপটোসিস এবং ফাইব্রোসিস সাইটোকাইন দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়, যেমন TGF- [41,42]। আমরা কার্ডিয়াক রিমডেলিং প্রক্রিয়াতে সেকেন্ডারি হাইপারপ্যারাথাইরয়েডিজম এবং ফলস্বরূপ উচ্চতর TGF- অভিব্যক্তির সম্পর্ক বর্ণনা করেছি [43]। অনুমিতভাবে, PTH অ্যাক্টিভেশন এবং TGF- সিগন্যালিংয়ের মধ্যে একটি সম্পর্ক রয়েছে যা ফাইব্রোব্লাস্ট, কোলাজেন সংশ্লেষণ এবং ফাইব্রোসিসের বিস্তারকে উদ্দীপিত করে। এমনকি হাড়ের কোষগুলিতে TGF- এবং PTH রিসেপ্টরগুলির একটি সমন্বিত কর্মের পরীক্ষামূলক প্রমাণ রয়েছে, হাড়-পুনঃনির্মাণ সংকেত নিয়ন্ত্রণ করে [44]। TGF-/Smad সিগন্যালিং এর ভূমিকাকিডনিরোগ ইতিমধ্যে বর্ণনা করা হয়েছে. TGF- একটি ট্রান্সমেমব্রেন রিসেপ্টরকে আবদ্ধ করে, স্মাডস প্রোটিন ফসফোরিলেশনকে ট্রিগার করে এবং ট্রান্সক্রিপশনাল প্রভাবের জন্য নিউক্লিয়াসে তাদের স্থানান্তর প্রচার করে। অতএব, TGF- পরিবারের সদস্যদের সংকেত ট্রান্সডাকশনের জন্য এগুলি অপরিহার্য। প্রকৃতপক্ষে, সিকেডি সহ প্রাণীর মডেলগুলিতে ফাইব্রোটিক কিডনিতে Smad2 এবং Smad3 প্রোটিনের অত্যধিক এক্সপ্রেশন ইতিমধ্যেই প্রদর্শিত হয়েছে [45]। মজার বিষয় হল, TGF- থেকে স্বাধীন অন্যান্য মধ্যস্থতাকারীদের দ্বারা Smads সক্রিয়করণের প্রমাণ রয়েছে, যেমন উন্নত গ্লাইকেশন এন্ড-প্রোডাক্ট [46] এবং এনজিওটেনসিন II [47]। যেহেতু CKD এর অগ্রগতির উপর হাইপারফসফেমিয়ার প্রভাব একটি পরীক্ষামূলক মডেলে PTH প্রতিস্থাপন দ্বারা প্রভাবিত হয়নি [১১], আমরা ভাবছি কিডনি স্মাড সিগন্যালিংয়ে ফসফেটের সরাসরি ভূমিকা থাকবে কিনা। আমাদের মডেলে, রেনাল টিউবুলার কোষে পি-স্ম্যাডের অভিব্যক্তিতে হাইপারফসফেটিমিয়ার কোনও প্রভাব ছিল না।

যাইহোক, এটি Smads ফসফোরিলেশন থেকে স্বাধীন TGF- পাথওয়ে সক্রিয়করণের সম্ভাবনাকে উড়িয়ে দেয় না। এই বিকল্প পথটি তদন্ত করার জন্য আরও গবেষণা প্রয়োজন।

হাড়ের টিস্যুর মূল্যায়নে, ফসফেট ওভারলোড অস্টিওব্লাস্ট-জাতীয় কোষগুলির অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করেছে [22]। রোজাস এট আল। প্রতিস্থাপিত রোগীদের হাড়ের বায়োপসিতে প্রমাণিত হয়েছে যে কম ফসফেট এবং পিটিএইচ যাদের অস্টিওব্লাস্ট বৃদ্ধি এবং অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধে প্রভাব ফেলবে তাদের মধ্যে অ্যাপোপটোটিক কোষের সংখ্যা বেশি ছিল [৪৮]। হাড়ের কোষের অ্যাপোপটোসিসে পিটিএইচের এই প্রতিরোধমূলক প্রভাব পূর্বে প্রদর্শিত হয়েছে [৪৯]। হাড়ের টিস্যুতে প্রভাব ছাড়াও, অ্যাপোপটোটিক পথগুলিও তীব্র রেনাল ব্যর্থতার সাথে সম্পর্কিত [৪৮] এবং CKD-এর অগ্রগতিতে একটি সম্ভাব্য মধ্যস্থতাকারী হতে পারে। আমাদের মডেলে, আমরা পরিসংখ্যানগত প্রাসঙ্গিকতা ছাড়াই এলওপি গ্রুপে অ্যাপোপটোসিসের মধ্য দিয়ে যাওয়া কোষগুলির একটি উচ্চতর অনুপাত পর্যবেক্ষণ করেছি। এই বিবেচনাগুলি হাইপারফসফেটেমিয়া দ্বারা সৃষ্ট একটি প্রতিবন্ধী অ্যাপোপটোসিস প্রক্রিয়ার পরামর্শ দেয়। যাইহোক, আমাদের অবশ্যই মনে রাখতে হবে যে ফসফেটের একচেটিয়া প্রভাব মূল্যায়ন করা সম্ভব ছিল নাকিডনিটিস্যু অ্যাপোপটোসিস একবার প্রাণীদেরও PTH এবং FGF-23 উচ্চতার বিকাশ ঘটে।

বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা একটি উচ্চ-ফসফেট খাদ্যের দ্বারা কিডনি বৈকল্যের আরেকটি সম্ভাব্য প্রক্রিয়াকে সম্বোধন করেছি, অটোফ্যাজি কর্মহীনতা, প্রোটিন বেক্লিন-1, অটোফ্যাগোসোমাল মেমব্রেন নিউক্লিয়েশনের জন্য প্রয়োজনীয় একটি নিয়ন্ত্রক প্রোটিন পরিমাপ করে [50]। অটোফ্যাজি একটি ক্যাটাবলিক পথ যা লাইসোসোমের মাধ্যমে সেলুলার উপাদানগুলির অবক্ষয় জড়িত করে [51,52]। বেক্লিন-1 ফসফোরিলেশনকে ফসফ্যাটিডাইলিনোসিটল-3-ফসফেট কিনেস জটিল সক্রিয়করণ এবং অটোফ্যাগোসোম বায়োজেনেসিস মেমব্রেন সাইটগুলিতে নিয়োগের জন্য অটোফ্যাজি-নির্দিষ্ট সংকেত হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছে [53]। বেকলিনের নকডাউন-1 অটোফ্যাজিকে দমন করে [54] এবং ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন এর মাত্রা বাড়ায় [55]। বেকলিনের হ্রাস- 1 এবং এমটিওআর এর সহযোগে আপগ্রেগুলেশন ম্যালিগন্যান্ট কোষের বৃদ্ধি হ্রাস করে, অটোফ্যাজির প্রো-সারভাইভাল প্রভাবকে হাইলাইট করে [52]।

ক্লোথোর অ্যান্টিফাইব্রোটিক প্রভাবগুলি একটি আপ-রেগুলেটেড অটোফ্যাজি প্রক্রিয়ার সাথেও যুক্ত ছিল, একটি পথ যার মাধ্যমে AKI মডেলে ইস্কেমিক আঘাত কমানো হয়েছিল এবং উচ্চ-ফসফেট স্তর দ্বারা প্রতিবন্ধী হয়েছিল [18]। পরীক্ষামূলক গবেষণায় দেখা গেছে যে অটোফেজিক ফ্লাক্স ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ এবং ফসফেট-প্ররোচিত রেনাল ফাইব্রোসিসকে প্রশমিত করে। এছাড়াও, একটি ফসফেট-সমৃদ্ধ পরিবেশ ভিট্রোতে টিউবুলার কোষগুলিতে মাইটোফ্যাজিকে প্ররোচিত করে [56]। আমাদের ডেটা দেখায় যে খাদ্যের ফসফেট সামগ্রী ভিভোতে রেনাল টিউবুলে বেক্লিন-1 এর অভিব্যক্তিকেও সংশোধন করে। একটি HiP ডায়েট আরও সেলুলার বিস্তারের সাথে যুক্ত ছিল এবং যথাক্রমে PCNA এবং TUNEL বিশ্লেষণ দ্বারা চিত্রিত হিসাবে নিম্ন অ্যাপোপটোটিক হারের দিকে একটি প্রবণতা ছিল। যাইহোক, আমাদের মডেলে, এটি সনাক্ত করা সম্ভব হয়নি যে এটি ফসফেট ওভারলোডের সরাসরি প্রভাব হিসাবে ঘটেছে নাকি হাইপারফসফেমিয়া দ্বারা প্ররোচিত PTH এবং FGF-23 স্তরের অস্বাভাবিকতার কারণে ঘটেছে। এই অনুসন্ধান একটি ক্লিনিকাল পরিস্থিতিতে নিশ্চিত করা প্রয়োজন.

এই গবেষণার একটি মূল সুবিধা ছিল CKD অগ্রগতির উপর একটি কম প্রোটিন খাদ্যে ফসফেট সীমাবদ্ধতার প্রভাব মূল্যায়ন করা, যার মধ্যে হিস্টোলজিকাল প্যাটার্ন এবং আণবিক ফেনোটাইপগুলির উপর এর প্রভাবের তদন্ত অন্তর্ভুক্ত ছিল।কিডনিটিস্যু আমরা যতদূর জানি, ভিভোতে ফসফেট ডায়েটের মাধ্যমে বেকলিন-1 এক্সপ্রেশনের মড্যুলেশন, রেনাল টিউবুলার কোষে একটি অটোফ্যাজি চিহ্নিতকারী এটিই প্রথম গবেষণা। প্রধান সীমাবদ্ধতা ছিল অন্যান্য CKD-MBD-সম্পর্কিত অস্বাভাবিকতা, যেমন PTH এবং FGF-23 এর উচ্চতা থেকে হাইপারফোসফেমিয়ার প্রভাবকে বিচ্ছিন্ন করার অসম্ভবতা। আমরা মধ্যবর্তী ফসফেট সামগ্রী বা রেনাল ক্লোথো এক্সপ্রেশন সহ একটি ডায়েট মূল্যায়ন করতেও অক্ষম ছিলাম। যাইহোক, আমাদের মডেল বাস্তব জীবনের অবস্থার পুনরুত্পাদন করে, যেখানে একটি HiP ডায়েট সাধারণত হাইপারপ্যারাথাইরয়েডিজম এবং FGF এর উচ্চ মাত্রার সাথে যুক্ত থাকে-23।

4। উপসংহার

সংক্ষেপে, এই গবেষণাটি প্রমাণ দিয়েছে যে ফসফেট খাদ্য CKD অগ্রগতিতে ভূমিকা পালন করে, সম্ভবত ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস বৃদ্ধি করে। উপরন্তু, একটি ফসফেট সমৃদ্ধ খাদ্য পরিবর্তন করতে পারেকিডনিঅটোফ্যাজি প্রক্রিয়া। একটি প্রোটিন-স্বাধীন পথের সনাক্তকরণ যার মাধ্যমে ফসফেট রেনাল ফাংশনকে খারাপ করে ক্লিনিকাল সেটিংয়ে CKD অগ্রগতি রোধ বা হ্রাস করার লক্ষ্যে অভিনব পদ্ধতির বিকাশের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ পথ খুলতে পারে।

5. উপকরণ এবং পদ্ধতি

একটি স্থানীয় সুবিধা থেকে প্রাপ্ত প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ মিউনিখ-উইস্টার ইঁদুর এই গবেষণায় অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল। 12:12-ঘন্টা আলো-অন্ধকার চক্রের অধীনে 60 ± 5 শতাংশ বাতাসের আর্দ্রতা সহ 23 ± 1 ◦C তাপমাত্রায় ইঁদুরগুলি বজায় রাখা হয়েছিল৷ সমস্ত প্রাণীর কলের জলে বিনামূল্যে প্রবেশাধিকার ছিল এবং একটি কম প্রোটিন খাদ্য (12 শতাংশ প্রোটিন) খাওয়ানো হয়েছিল। রক্ত, প্রস্রাব এবং রেনাল টিস্যু বিশ্লেষণ করার সময় দুই মাস পরে পশুদের বলি দেওয়া হয়েছিল। লেজ-কাফের চাপ, ক্রিয়েটিনিন ক্লিয়ারেন্স এবং প্রতিদিনের প্রস্রাবের অ্যালবুমিন নিঃসরণ সমস্ত ইঁদুরের মধ্যে নির্ধারিত হয়েছিল। পরীক্ষামূলক নকশা পরিশিষ্ট A (চিত্র A1) এ দেখানো হয়েছে।

5.1। বিশ্লেষণী কৌশল

এনএক্সের ষাট দিন পর, সোডিয়াম থিওপেন্টাল (50 মিলিগ্রাম/কেজি বিডব্লিউ) দিয়ে প্রাণীদের অ্যানেস্থেশিয়া করা হয়েছিল এবং রক্তের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। সিরাম ক্রিয়েটিনিনের ঘনত্ব একটি কালারমিট্রিক পদ্ধতি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। সিরাম অ্যালবুমিন, ফসফেট, ইউরিয়া, ক্যালসিয়াম এবং হেমাটোক্রিট প্রমিত পদ্ধতি দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। PTH পরিমাপ করা হয়েছিল ELISA (Immutopics, San Clemente, CA, USA) দ্বারা। FGF-23 নির্মাতার প্রোটোকল অনুযায়ী একটি ELISA কিট (KAINOS, জাপান) ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। আমরা সিরাম এবং প্রস্রাব ক্রিয়েটিনিন স্তরের উপর ভিত্তি করে ক্রিয়েটিনিন ক্লিয়ারেন্স দ্বারা গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ গণনা করেছি এবং সূত্রের সাথে গণনা করে ml/min এ প্রকাশ করেছি: প্রস্রাব ক্রিয়েটিনিন (mg/dL) × প্রস্রাব ফেলো (mL/min)/serum creatinine (mg/dL)। মূত্রনালীর অ্যালবুমিন রেডিয়াল ইমিউনোডিফিউশন দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল।

- বাম তৃতীয়াংশকিডনিবাম রেনাল ধমনীর দুই বা তিনটি শাখা বন্ধ করে। শাম-চালিত ইঁদুরের রেনাল ভর হ্রাস ছাড়াই রেনাল পেডিকলের অ্যানেস্থেসিয়া এবং ম্যানিপুলেশন করা হয়েছিল। অ্যানেস্থেশিয়া থেকে পুনরুদ্ধার করার পরে, প্রাণীগুলিকে তাদের আসল খাঁচায় ফিরিয়ে দেওয়া হয়েছিল, যা পরবর্তী 24 ঘন্টার মধ্যে উষ্ণ ছিল।

ফসফেটের ভগ্নাংশ নির্গমন (এফইপি) প্রস্রাব এবং সিরামফসফেট (mg/dL), প্রস্রাব এবং সিরাম ক্রিয়েটিনিন (mg/dL) এর মাধ্যমে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং নিম্নলিখিত সূত্রের সাথে শতাংশে প্রকাশ করা হয়েছিল: (প্রস্রাব/সিরাম ফসফেট)/ (প্রস্রাব/সিরাম ক্রিয়েটিনিন) × 100।

5.2। পরীক্ষামূলক গ্রুপ

খাদ্যে ফসফেট বিষয়বস্তু অনুসারে প্রাণীদের দুটি দলে ভাগ করা হয়েছিল, নীচে নির্দিষ্ট করা হয়েছে: নিম্ন-ফসফেট খাদ্য (LoP): n=20; প্রাণীরা TD-90016 পেয়েছে, 12 শতাংশ প্রোটিন খাদ্য, একটি 0.2 শতাংশ ফসফেট ঘনত্বের জন্য পরিবর্তিত৷ উচ্চ-ফসফেট খাদ্য (HiP): n=19; প্রাণীরা TD-90016 পেয়েছে, 12 শতাংশ প্রোটিন খাদ্য, একটি 0.95 শতাংশ ফসফেট ঘনত্বের জন্য পরিবর্তিত হয়েছে৷

5.3। হিস্টোলজিক্যাল টেকনিক

অবশিষ্টাংশকিডনিস্যালাইন দ্রবণ এবং তারপর ফিক্সেশনের জন্য Duboscq-Brasil সলিউশনের সাথে পর্যবেক্ষণ করা MAP-এ সিটুতে পারফিউজ করা হয়েছিল। ওজন করার পর, দুটি মিডকোরোনাল রেনাল স্লাইস 4 শতাংশ ফরমালডিহাইড বাফারে পোস্টফিক্স করা হয়েছিল। রেনাল টিস্যু তারপরে প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল এবং হিস্টোমরফোমেট্রি এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রির জন্য প্রস্তুত করা হয়েছিল যেমন পূর্বে বর্ণিত হয়েছিল [57]।

সমস্ত মরফোমেট্রিক মূল্যায়ন 4-µm-পুরু অংশে একটি একক পর্যবেক্ষক দ্বারা গোষ্ঠীতে অন্ধ হয়ে সম্পাদিত হয়েছিল৷ প্রতিটি ইঁদুরের জন্য, গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস (জিএস) এর তীব্রতা অনুমান করা হয়েছিল, পর্যায়ক্রমিক অ্যাসিড শিফ (পিএএস) দিয়ে দাগযুক্ত অংশে, প্রতিটি গ্লোমেরুলাসকে (প্রতি ইঁদুরে কমপক্ষে 120 পরীক্ষা করা হয়েছিল) একটি স্কোর বরাদ্দ করে টুফ্ট এলাকার স্ক্লেরোসড ভগ্নাংশ অনুমান করা হয়েছিল। , এবং পূর্বে বর্ণিত প্রতিটি ইঁদুরের জন্য একটি GS সূচক (GSI) প্রাপ্ত করা [58]। ইন্টারস্টিশিয়াল প্রসারণের ডিগ্রী মূল্যায়ন করার জন্য, ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস (শতাংশ IF) দ্বারা দখলকৃত রেনাল কর্টিকাল এলাকার শতাংশ একটি পয়েন্ট-গণনা কৌশল দ্বারা ম্যাসন-দাগযুক্ত বিভাগে অনুমান করা হয়েছিল [59]।

5.4। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি

চারটি µm-পুরু, প্যারাফিন-এমবেডেড রেনাল বিভাগগুলি 6 শতাংশ সিলেন দিয়ে প্রলিপ্ত কাচের স্লাইডে মাউন্ট করা হয়েছিল। অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধার বাড়ানোর জন্য বিভাগগুলিকে ডিপারাফিনাইজ করা হয়েছিল, রিহাইড্রেট করা হয়েছিল এবং তারপরে সাইট্রেট বাফারে উত্তপ্ত করা হয়েছিল। ট্রিস-বাফার স্যালাইন (টিবিএস) বা কেসিন-ভিত্তিক প্রোটিন ব্লক সলিউশন (প্রোটিন ব্লক; ড্যাকো কর্পোরেশন, সান্তা ক্লারা, CA, USA (PCNA, pSmad, andBeclin) এর জন্য), অনির্দিষ্ট বাইন্ডিং প্রতিরোধ করতে। প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউবেশন 4 ◦C তাপমাত্রায় রাতারাতি করা হয়েছিল। প্রাথমিক অ্যান্টিবডি বাদ দিয়ে নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল।

নিম্নলিখিত প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল: একটি মনোক্লোনাল মাউস অ্যান্টি-র‍্যাট ED-1 অ্যান্টিবডি (সেরটেক, অক্সফোর্ড, ইউকে), ম্যাক্রোফেজ সনাক্তকরণের জন্য; মাউস মনোক্লোনাল অ্যান্টি-আলফা মসৃণ (সিগমা-অলড্রিচ, সেন্ট লুইস, এমআই, ইউএসএ), অ্যাক্টিন সনাক্তকরণের জন্য; পলিক্লোনাল অ্যান্টি-বেক্লিন 1 অ্যান্টিবডি (বোস্টার, প্লেস্যান্টন, সিএ, ইউএসএ), অটোফ্যাজি বিশ্লেষণের জন্য। ধোয়ার পরে, বিভাগগুলিকে বায়োটিনিলেটেড অ্যান্টি-মাউস আইজিজি (এইচ প্লাস এল), (ভেক্টর, বার্লিংগেম, সিএ, ইউএসএ) দিয়ে 45 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল, তারপরে VECTASTAIN® ABC-AP কিট, Vector® রেড (ভেক্টর, বার্লিংগেম, CA)। , USA) 30 মিনিটের জন্য। তারপরে একটি দ্রুত-লাল রঞ্জক দ্রবণ দিয়ে বিভাগগুলি তৈরি করা হয়েছিল।

মনোক্লোনাল মাউস অ্যান্টি-প্রলিফারেটিং সেল নিউক্লিয়ার অ্যান্টিজেন (ডাকো, ডেনমার্ক) এবং ফসফর-smad2 (Ser465/467) অ্যান্টিবডি (সেল সিগন্যালিং, ড্যানভার্স, এমএ, ইউএসএ) এর জন্য, 3 শতাংশ হাইড্রোজেন পারক্সাইড দ্রবণ এবং মিথেনল দিয়ে অন্তঃসত্ত্বা পারক্সিডেস প্রতিরোধ করা হয়েছিল। মিনিট তারপরে বিভাগগুলিকে 4 ◦C তাপমাত্রায় একটি আর্দ্র চেম্বারে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল। পরের দিন বিভাগগুলিকে বায়োটিনিলেটেড অ্যান্টি-মাউস আইজিজি (এইচ প্লাস এল) বা বায়োটিনিলেটেড অ্যান্টি-র‍্যাট আইজিজি (এইচ প্লাস এল) (ভেক্টর, বার্লিংগেম, সিএ, ইউএসএ) দিয়ে 45 মিনিটের জন্য ইনকিউবেশন করা হয়েছিল, তারপরে VECTASTAIN® ABC- দিয়ে ইনকিউবেশন করা হয়েছিল। HRP কিট (ভেক্টর, বার্লিংগেম, CA, USA) 30 মিনিটের জন্য। তারপরে একটি 3-অ্যামিনো-9-ইথাইল কার্বাজোল সাবস্ট্রেট ক্রোমোজেন (AEC) (সিগমা কেমিক্যাল, সেন্ট লুইস, MO, USA) ব্যবহার করে বিভাগগুলি তৈরি করা হয়েছিল। সমস্ত অংশগুলিকে পাতিত জলে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল, কায়সারের গ্লিসারিন-জেলাটিন (মার্ক, ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি) দিয়ে আবৃত মায়ারের হেমালাম দ্রবণ (মার্ক, ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি) দিয়ে পাল্টা দাগ দেওয়া হয়েছিল।

ED-1, p-Smad, Beclin, এবং PCNA-এর ইন্টারস্টিশিয়াল রেনাল-ঘনত্ব অনুমানের জন্য, ধনাত্মক কোষ/mm2-এর সংখ্যা 400× ম্যাগনিফিকেশনে অন্ধভাবে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। -অ্যাক্টিন মূল্যায়ন করার জন্য আমরা একটি ভিডিও মনিটরের সাথে সংযুক্ত একটি 100-বিন্দু অকুলার সহ একটি মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে একটি বিন্দু গণনা কৌশল ব্যবহার করেছি। আমরা 3200 ম্যাগনিফিকেশনের অধীনে 25টি ক্ষেত্র বিশ্লেষণ করেছি। মোট এলাকা বিবেচনা করে ফলাফলগুলি শতাংশে প্রকাশ করা হয়েছিল।

5.5। অ্যাপোপটোসিস

সিটু অ্যাপোপটোসিস ডিটেকশন কিট (S7101, মিলিপুর সিগমা, MA, USA) এ Apoptag plusPeroxidase দ্বারা প্রদত্ত নির্দেশাবলী ব্যবহার করে TUNEL কৌশল (TdT মধ্যস্থতাকৃত X-dUTP নিক এন্ড লেবেলিং) দ্বারা রেনাল টিউবুলার কোষগুলিতে অ্যাপোপটোসিস নির্ধারণ করা হয়েছিল। কোষ/মিমি 2-তে প্রকাশিত চূড়ান্ত মান পেতে 1000× এর বিবর্ধন সহ 25টি ক্ষেত্রে অ্যাপোপটোটিক কোষগুলি বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

5.6। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

LoP এবং HiP গ্রুপের মধ্যে পার্থক্য একটি স্বাধীন ছাত্র-পরীক্ষা বা মান-হুইটনি পরীক্ষা অনুযায়ী পরীক্ষা করা হয়েছিল। ভেরিয়েবলের মধ্যে সম্পর্ক স্পিয়ারম্যান পারস্পরিক সম্পর্ক সহগ দ্বারা পরীক্ষা করা হয়েছিল। অন্যথায় নির্দেশিত না হলে ডেটা গড় ± SE হিসাবে উপস্থাপন করা হয়। এর একটি পি-মান<0.05 was="" considered="" significant.="" analyses="" were="" performed="" using="" ibm="" spss="" statistics,="" version="" 20.0.1="" (ibm="" corp.,="" armonk,="" ny,="" usa)="" and="" graphpad="" prism9.1.2="" statistical="" software="" (graphpad,="" san="" diego,="" ca,="">

অর্থায়ন:এই গবেষণাটি সাও পাওলো রিসার্চ ফাউন্ডেশন (FAPESP-গ্রান্ট #. 2010/05409-6) দ্বারা সমর্থিত ছিল। Moyses, Jorgetti, Zatz এবং Elias CNPq (Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnol6gico) দ্বারা সমর্থিত, কিন্তু এই কাগজটি লেখার ক্ষেত্রে এই আর্থিক সহায়তার কোন ভূমিকা ছিল না।

প্রাতিষ্ঠানিক পর্যালোচনা বোর্ডের বিবৃতি:স্থানীয় নৈতিক পর্যালোচনা বোর্ডের সুপারিশ অনুসারে এই গবেষণাটি করা হয়েছিল। প্রোটোকলটি Comite detica em Pesquisa do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina da USP (CEUA, প্রক্রিয়া #090/10 এবং অনুমোদনের তারিখ 10 আগস্ট 2010) দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতি পরীক্ষাগার প্রাণীদের ম্যানিপুলেশন এবং যত্নের জন্য কঠোরভাবে আন্তর্জাতিক মান অনুসরণ করে।

ডেটা উপলব্ধতা বিবৃতি:এই গবেষণায় উপস্থাপিত ডেটা সংশ্লিষ্ট লেখকের অনুরোধে উপলব্ধ।

স্বীকৃতি:লেখক তার বিশেষজ্ঞ প্রযুক্তিগত সহায়তার জন্য Wagner Dominguez ধন্যবাদ. স্বার্থের দ্বন্দ্ব: লেখক কোন স্বার্থের দ্বন্দ্ব ঘোষণা করেন না।

তথ্যসূত্র

1. হিল, এনআর; ফতোবা, এসটি; ওকে, জেএল; হার্স্ট, জেএ; O'Callaghan, CA; ল্যাসারসন, ডিএস; হবস, এফডি ক্রনিকের বিশ্বব্যাপী ব্যাপকতাকিডনিরোগ-একটি পদ্ধতিগত পর্যালোচনা এবং মেটা-বিশ্লেষণ। PLOS ONE 2016, 11, e0158765।

2. ওয়েন, সিপি; চ্যাং, সিএইচ; Tsai, MK; লি, জেএইচ; লু, পিজে; Tsai, SP; ওয়েন, সি.; চেন, সিএইচ; কাও, সিডব্লিউ; Tsao, CK; ইত্যাদি তাড়াতাড়ি ডায়াবেটিস সহকিডনিজড়িত থাকার ফলে আয়ু 16 বছর কমতে পারে। কিডনি Int. 2017, 92, 388–396।

3. কাকিনুমা, ওয়াই।; কাওয়ামুরা, টি.; বিল, টি.; ইয়োশিওকা, টি.; ইচিকাওয়া, আই.; ফোগো, এ. দীর্ঘস্থায়ী রেনাল ব্যর্থতার ভাস্কুলার ক্ষতগুলিতে অ্যাঞ্জিওটেনসিন বাধার রক্তচাপ-স্বাধীন প্রভাব।কিডনিint. 1992, 42, 46-55।

4. ভাজা, LF; অরচার্ড, টিজে; ক্যাসিস্কে, বিএল রেনাল ডিজিজের অগ্রগতিতে লিপিড হ্রাসের প্রভাব: একটি মেটা-বিশ্লেষণ।কিডনিint. 2001, 59, 260-269।

5. ইশিদোয়া, এস.; Morrissey, J.; ম্যাকক্র্যাকেন, আর.; রেইস, এ.; Klahr, S. Angiotensin II রিসেপ্টর প্রতিপক্ষ একতরফা মূত্রনালীর বাধার কারণে সৃষ্ট রেনাল টিউবুলোইনটারসটিশিয়াল ফাইব্রোসিস কমিয়ে দেয়।কিডনিint. 1995, 47, 1285-1294।

6. অডিজিয়ার, জেসি; কাঞ্জনবুচ, টি.; মা, এলজে; ব্রাউন, এনজে; ফোগো, এবি অ্যালডোস্টেরন বাধা দিয়ে বিদ্যমান গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিসের রিগ্রেশন। জে. এম. সমাজ নেফ্রোল। 2005, 16, 3306–3314।

7. নাথ, কেএ; ক্রেন, এসএম; হোস্টেটার, ইঁদুরের মধ্যে প্রতিষ্ঠিত রেনাল ইনজুরিতে TH ডায়েটারি প্রোটিন সীমাবদ্ধতা। প্রগতিশীল গ্লোমেরুলার কর্মহীনতায় গ্লোমেরুলার কৈশিক চাপের নির্বাচনী ভূমিকা। জে ক্লিন। তদন্ত. 1986, 78, 1199-1205।

8. ব্রেনার, বিএম; মেয়ার, TW; Hostetter, TH খাদ্যতালিকায় প্রোটিন গ্রহণ এবং প্রগতিশীল প্রকৃতিকিডনিরোগ: বার্ধক্য, রেনাল অ্যাবলেশন এবং অভ্যন্তরীণ রেনাল ডিজিজে প্রগতিশীল গ্লোমেরুলার স্ক্লেরোসিসের প্যাথোজেনেসিসে হেমোডাইনামিক্যালি মধ্যস্থতাকারী গ্লোমেরুলার আঘাতের ভূমিকা। N. ইংরেজি জে মেড 1982, 307, 652-659।

9. বেলিজি, ভি. কম প্রোটিন ডায়েট বা দীর্ঘস্থায়ী রোগে পুষ্টির থেরাপিকিডনিরোগ? রক্ত পরিশোধন। 2013, 36, 41-46।

10. কুসানো, কে.; সেগাওয়া, এইচ.; অহনিশি, আর.; ফুকুশিমা, এন.; মিয়ামোটো, কে. ক্রনিকের অগ্রগতিতে কম প্রোটিন এবং কম ফসফরাস খাদ্যের ভূমিকাকিডনিইউরেমিক ইঁদুরের রোগ। J. Nutr. বিজ্ঞান ভিটাম। 2008, 54, 237-243।

11. নেভেস, কেআর; গ্রাসিওলি, এফজি; ডস রেইস, এলএম; Pasqualucci, CA; ময়েস, আরএম; জরগেটি, ভি. মায়োকার্ডিয়াল হাইপারট্রফি, রেনাল ফাংশন এবং রেনাল ব্যর্থতার সাথে ইঁদুরের হাড়ের উপর হাইপারফসফেটিমিয়ার বিরূপ প্রভাব।কিডনিint. 2004, 66, 2237-2244। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

12. ফিঞ্চ, জেএল; লি, ডিএইচ; লিয়াপিস, এইচ.; রিটার, সি.; ঝাং, এস.; সুয়ারেজ, ই.; ফেরদার, এল.; স্লাটোপোলস্কি, ই. ফসফেট সীমাবদ্ধতা প্রতিষ্ঠিত ভাস্কুলার ক্যালসিফিকেশন সহ ইউরেমিক ইঁদুরের মৃত্যুহার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে। কিডনি Int. 2013, 84, 1145-1153।

13. কুপিস্টি, এ.; ব্লাস্কো, পি.; ডি'আলেসান্দ্রো, সি.; জিয়ানিজ, ডি.; সাবাতিনো, এ.; Fiaccadori, E. অবশিষ্ট রেনাল ফাংশন সুরক্ষা এবং পুষ্টির চিকিত্সা: শেষ পর্যায়ে কিডনি রোগের রোগীদের ইউরেমিক টক্সিন হ্রাসের জন্য প্রথম ধাপের কৌশল। টক্সিন 2021, 13, 289।

14. ইয়ান, বি.; সু, এক্স।; জু, বি.; কিয়াও, এক্স।; ওয়াং, এল. দীর্ঘস্থায়ী অগ্রগতির উপর খাদ্যের প্রোটিন সীমাবদ্ধতার প্রভাবকিডনিরোগ: একটি পদ্ধতিগত পর্যালোচনা এবং মেটা-বিশ্লেষণ। PLOS ONE 2018, 13, e0206134। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]

15. Klahr, S.; লেভি, এএস; বেক, জিজে; Caggiula, AW; হুনসিকার, এল.; কুসেক, জেডব্লিউ; স্ট্রাইকার, জি. দীর্ঘস্থায়ী রেনাল রোগের অগ্রগতিতে খাদ্যতালিকাগত প্রোটিন সীমাবদ্ধতা এবং রক্তচাপ নিয়ন্ত্রণের প্রভাব। রেনাল ডিজিজ স্টাডি গ্রুপে ডায়েটের পরিবর্তন। N. ইংরেজি

জে মেড 1994, 330, 877-884। [ক্রসরেফ]

16. হু, এমসি; শি, এম.; চো, এইচজে; অ্যাডামস-হুয়েট, বি.; পায়েক, জে.; হিল, কে.; শেলটন, জে.; আমারাল, এপি; ফাউল, সি.; তানিগুচি, এম.; ইত্যাদি ক্লোথো এবং ফসফেট হল প্যাথলজিক ইউরেমিক কার্ডিয়াক রিমডেলিং এর মডুলেটর। জে. এম. সমাজ নেফ্রোল। 2015, 26, 1290-1302।

17. হু, এমসি; শি, এম.; চো, এইচজে; ঝাং, জে.; পাভলেনকো, এ.; লিউ, এস.; সিধু, এস.; হুয়াং, এলজে; Moe, OW এরিথ্রোপয়েটিন রিসেপ্টর হল ক্লোথো-প্ররোচিত সাইটোপ্রোটেকশনের একটি ডাউনস্ট্রিম ইফেক্টর। কিডনি Int. 2013, 84, 468–481।

18. শি, এম.; ফ্লোরেস, বি.; গিলিংস, এন.; বিয়ান, এ.; চো, এইচজে; ইয়ান, এস.; লিউ, ওয়াই.; লেভিন, বি.; Moe, OW; হু, এমসি আলফাক্লোথো অটোফ্যাজি সক্রিয় করার মাধ্যমে AKI থেকে CKD এর অগ্রগতি হ্রাস করে। জে. এম. সমাজ নেফ্রোল। 2016, 27, 2331–2345।

19. ডিং, ওয়াই.; কিম, এস.; লি, এসওয়াই; কু, জে কে; ওয়াং, জেড.; Choi, ME Autophagy TGF-বিটা এক্সপ্রেশন নিয়ন্ত্রণ করে এবং দমন করেকিডনিফাইব্রোসিস একতরফা ureteral বাধা দ্বারা প্ররোচিত. জে. এম. সমাজ নেফ্রোল। 2014, 25, 2835-2846।

20. মোস্তাকাস, এ.; Souchelnytskyi, S.; হেল্ডিন, টিজিএফ-বিটা সিগন্যাল ট্রান্সডাকশনে সিএইচ স্মাড রেগুলেশন। জে সেল বিজ্ঞান। 2001, 114, 4359-4369।