ডায়াবেটিক কিডনির আঘাত কমানোর জন্য টেলমিসার্টনের জন্য পডোসাইটসের অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোসিস এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষের প্রো-অ্যাপোপ্টোসিস

বিমূর্ত

পডোসাইট ক্ষতি এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষের প্রসারণ প্রাথমিক ডায়াবেটিসে গ্লোমেরুলার আঘাতের দুটি গুরুত্বপূর্ণ প্যাথলজিকাল প্রকাশ। টেলমিসার্টান, একটি এনজিওটেনসিন টাইপ 1 (AT1) রিসেপ্টর ইনহিবিটর হিসাবে, উন্নত গ্লাইকেশন এন্ড (AGE) পণ্য বা এনজিওটেনসিন Ⅱ (Ang Ⅱ)-প্ররোচিত পডোসাইট ইনজুরি সহ বিচ্ছিন্নতা বা অ্যাপোপটোসিসকে উন্নত করতে পারে। এই বর্তমান কাগজে, আমরা প্রথমে টাইপ 1 ডায়াবেটিক ইঁদুরের প্রাথমিক ডায়াবেটিক কিডনি আঘাতের উপর টেলমিসার্টনের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব নিশ্চিত করেছি। টেলমিসার্টন পডোসিনের ক্ষতি হ্রাস করে এবং -এসএমএ-এর প্রকাশকে বাধা দেয়, যথাক্রমে পডোসাইটের আঘাত এবং মেসাঞ্জিয়াল বিস্তারের উপর এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রতিফলিত করে। আরও মজার বিষয় হল আমরা ভিট্রোতে উচ্চ-গ্লুকোজ পরিবেশে কোষের কার্যক্ষমতা এবং পডোসাইট এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলির অ্যাপোপটোসিসের উপর টেলমিসার্টনের বিপরীত প্রভাব লক্ষ্য করেছি। পডোসাইটের উপর টেলমিসার্টনের অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোটিক প্রভাব এটির সুইপ্রোসিন-1 (একটি প্রোটিন যা উচ্চ গ্লুকোজ-প্ররোচিত পডোসাইট অ্যাপোপটোসিসকে মধ্যস্থতা করতে পারে) প্রকাশের বাধার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। যদিও টেলমিসার্টান মেসাঞ্জিয়াল কোষে PPAR-এর উচ্চ প্রকাশ ঘটায় এবং GW9662 (একজন PPAR বিরোধী) টেলমিসার্টান-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিসকে আংশিকভাবে বাধা দেয় এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস করে। উপরন্তু, মেসাঞ্জিয়াল কোষে উচ্চ গ্লুকোজ-প্ররোচিত PKC 1/TGF 1 এক্সপ্রেশন টেলমিসার্টান দ্বারা ব্লক করা যেতে পারে। এই তথ্যগুলি ডায়াবেটিক কিডনির আঘাতে টেলমিসার্টনের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রকাশের জন্য আরও সুনির্দিষ্ট সেলুলার প্রক্রিয়া সরবরাহ করে।

কীওয়ার্ড

ডায়াবেটিক কিডনি রোগ, পডোসাইটস (MeSH: D050199), মেসাঞ্জিয়াল কোষ, টেলমিসার্টান (পাবকেম সিআইডি: 65, অ্যাপোপটোসিস

Cistanche পণ্য কিনতে এখানে ক্লিক করুন

ভূমিকা

ডায়াবেটিক কিডনি ডিজিজ (DKD), যা ডায়াবেটিস মেলিটাস (DM) টাইপ 1 বা 2 (Podgórski et al., 2019) দ্বারা প্ররোচিত একটি দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ হিসাবে পরিচিত, গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ হার (GFR) ক্রমান্বয়ে হ্রাস পেতে পারে, তারপরে শেষ পর্যন্ত বিকশিত হতে পারে -স্টেজ রেনাল ডিজিজ (Hou et al., 2018; Ruiz-Ortega et al., 2020; Expert Group of Chinese Society of Nephrology, 2021)। দুটি প্রক্রিয়া আছে যে হাইপারগ্লাইসেমিয়া কিডনি পডোসাইটের আঘাত এবং গ্লোমেরুলার বেসমেন্ট মেমব্রেনের (GBM) পরিবর্তনের মাধ্যমে মেসাঞ্জিয়াল কোষের প্রসারণ বা বিস্তারের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করে (Anders et al., 2018)।

পডোসাইট হল বিশেষায়িত ভিসারাল এপিথেলিয়াল কোষ, যা GBM-এর বাহ্যিক স্তরকে আস্তরণ করে, যা পায়ের প্রসেস ইন্টারডিজিটেট করে মূত্রনালীর প্রোটিন ক্ষয় রোধে চূড়ান্ত বাধা তৈরি করে (Podgórski et al., 2019)। প্রতিটি গ্লোমেরুলাসের সংখ্যা এবং/অথবা ঘনত্ব DM রোগীদের মধ্যে অধ্যয়ন করা হয়েছে (Papadopoulou-Marketou et al., 2017)। পডোসাইটের আঘাত তাদের আঠালো বৈশিষ্ট্য হারাতে অবদান রাখে এবং এটি DKD বিকাশের একটি প্রধান কারণ (Podgórski et al., 2019)। পডোসাইটের আরেকটি উল্লেখযোগ্য বৈশিষ্ট্য হল পরিপক্ক পডোসাইট হল সীমিত প্রসারিত কোষ (Podgórski et al., 2019), (Griffin et al., 2003)। পডোসাইটের ক্ষতি মেসাঞ্জিয়াল কোষের বিস্তার ঘটায়, তা সত্ত্বেও, আরও উল্লেখযোগ্য ক্ষতি গ্লোমেরুলার ফাইব্রোসিসের দিকে পরিচালিত করে এবং পরবর্তীতে জিবিএম-এর বিলুপ্তি হিসাবে প্রোটিনুরিয়া বৃদ্ধি পায় (ফুকুদা এট আল।, 2012)। দুর্বল গ্লাইসেমিক নিয়ন্ত্রণের ফলে পডোসাইটোপ্যাথি (অ্যান্ডার্স এট আল।, 2018), পডোসাইট হাইপারট্রফি দ্বারা চিহ্নিত অঙ্গসংস্থানগত পরিবর্তন, পডোসাইট এপিথেলিয়াল-মেসেনকাইমাল ট্রান্সডিফারেন্টিয়েশন (চ্যাং এট আল।, 2017), পডোসাইট বিচ্ছিন্নতা (ঝাং এট আল।, 2018), পডোসাইটস বিচ্ছিন্নতা Wang et al., 2018a) এবং পডোসাইট ক্ষয়, যা প্রগতিশীল পডোসাইট বিপর্যয়ের দিকে পরিচালিত করে ফলস্বরূপ গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস সহ GBM-এর বিচ্ছিন্নতা।

মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলি শুধুমাত্র গ্লোমেরুলার এবং ইন্ট্রাগ্লোমেরুলার সঞ্চালনের সামঞ্জস্য নয় বরং গ্লোমেরুলার সংরক্ষণের ক্ষেত্রেও উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলে, যেমন গ্লোমেরুলার এন্ডোথেলিয়াল কোষের প্রতিরক্ষা এবং সিরাম এবং মাইক্রোভেসেল থেকে তরল থেকে পদার্থের বহিঃপ্রবাহ (ওয়াকিসাকা এট আল।, 2021)। ঘন জিবিএম এবং প্রসারিত মেসাঞ্জিয়াল ডায়াবেটিসে লক্ষণীয় গ্লোমেরুলার বৈকল্য (পাপাডোপোলু-মার্কেটো এট আল।, 2017)। জিবিএম পুরুকরণ হল ডিকেডি-তে একটি প্রাথমিক হিস্টোপ্যাথলজিকাল এবং এন্ডোথেলিয়াল কোষ এবং পডোসাইট দ্বারা নিঃসৃত বহির্কোষীয় ম্যাট্রিক্সের বিরূপ আয় এবং তারতম্য দ্বারা প্রভাবিত হয় (অ্যান্ডার্স এট আল।, 2018)। হাইপারগ্লাইসেমিয়া ট্রান্সফর্মিং গ্রোথ ফ্যাক্টর- (TGF) সক্রিয়করণের মাধ্যমে ম্যাট্রিক্স (Kriz et al., 2017) প্রসারিত এবং তৈরি করতে মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিকে উত্তেজিত করে, যা সরাসরি ম্যাট্রিক্স কোলাজেনগুলির ট্রান্সক্রিপশনাল অ্যাক্টিভেশন ঘটায় (জিয়াদেহ এট আল।, 2000) ম্যাট্রিক্স

হাইপোগ্লাইসেমিক এবং অ্যান্টিহাইপারটেনসিভ চিকিত্সার সাথে প্রাথমিক হস্তক্ষেপ ডিকেডি (মার্টিনস এবং নরিস, 2001) এর সংঘটন এবং বিকাশকে বিলম্বিত করতে উপকারী। ডিএম এবং অ্যালবুমিনুরিয়া সহ সাধারণ রক্তচাপ প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য বিশেষভাবে সুপারিশ করা হল একটি অ্যাঞ্জিওটেনসিন-কনভার্টিং এনজাইম ইনহিবিটর (ACEI) বা অ্যাঞ্জিওটেনসিন রিসেপ্টর ব্লকার (ARB) (Liew et al., 2020)। রেনিন-এনজিওটেনসিন সিস্টেমের অবরোধ ANGPTL2 এবং ইন্টিগ্রিনের অভিব্যক্তিকে প্রশমিত করে যা গ্লোমেরুলার বাধা বজায় রাখে (তৌফিক এট আল।, 2021)। টেলমিসার্টনকে বেছে নেওয়ার কারণ হল যে এটি প্রোটিনুরিয়া প্রশমিত করার জন্য অন্যান্য ARB ওষুধের চেয়ে বেশি কার্যকরী হিসাবে বর্ণনা করা হয়েছে (Naruse et al., 2019; Guo et al., 2020)। অধিকন্তু, টেলমিসার্টন সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত নেফ্রোটক্সিসিটি যেমন পডোসাইট অ্যাপোপটোসিস এবং অটোফ্যাজি-সম্পর্কিত প্রোটিন এক্সপ্রেশনের মাত্রা হ্রাস করতে পারে (মালিক এট আল।, 2015)। চমকপ্রদভাবে, টেলমিসার্টনের এমন বৈশিষ্ট্য রয়েছে যা এটি 1 রিসেপ্টর ব্লকিং অ্যাকশন এবং পারক্সিসোম প্রলিফেরেটর-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর গামা (পিপিএআর) আংশিক অ্যাগোনিস্টিক সম্পত্তি (বালাকুমার এট আল।, 2012) এর জোড়া ভূমিকা বিবেচনা করে। এই কাগজের লক্ষ্য ছিল যথাক্রমে টাইপ 1 ডিএম-এর প্রাথমিক পর্যায়ে পডোসাইটের আঘাত এবং মেসাঞ্জিয়াল প্রসারণের উপর টেলমিসার্টনের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব পরীক্ষা করা।

সিস্তানচে পাউডার

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

1. প্রাণী

এসডি পুরুষ ইঁদুরগুলি এসএলআরসি ল্যাবরেটরি অ্যানিমাল লিমিটেড (সাংহাই, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে 22 ± 2 ডিগ্রি সেলসিয়াসের একটি নিয়ন্ত্রিত তাপমাত্রা, 50-60 শতাংশ আপেক্ষিক আর্দ্রতা, 12-ঘণ্টা আলো এবং 12-ঘণ্টা অন্ধকার চক্রে রাখা হয়েছিল (আলো, 08:00–20) :00, অন্ধকার, 20: 00–08:00), এবং স্ট্যান্ডার্ড শুষ্ক খাদ্য এবং কলের জলে বিনামূল্যে অ্যাক্সেসের অনুমতি দেওয়া হয়েছে। সমস্ত প্রাণী মানবিক যত্ন পেয়েছে, এবং পরীক্ষামূলক প্রোটোকলগুলি নেভাল মেডিকেল ইউনিভার্সিটির অ্যানিমাল কেয়ার কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

2. ডায়াবেটিক মডেল এবং চিকিত্সা

Weight 180–200 g male rats were treated with STZ (Sigma, Deisenhofen, Germany) to induce type 1 diabetes. STZ was dissolved in sterile citrate buffer (pH 4.5) and injected intraperitoneally (65 mg/kg body weight) within 10 min of preparation. The non-diabetic rats initially injected with STZ vehicles served as controls (group Con, n = 10). Diabetes mellitus was confirmed by measuring glucose levels in tail venous blood using a B-glucose analyzer (HemoCue, Angelholm, Sweden) 7 days later. Rats with random blood glucose levels>16.7 mmol/L পরীক্ষায় অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল।

ডায়াবেটিক ইঁদুরেরা তখন টেলমিসার্টান (Merck, PHR 1855, 10 mg kg−1 ·d−1 po, গ্রুপ DM প্লাস Tel, n=10) বা যান (গ্রুপ DM, n=10) পান 4 সপ্তাহের জন্য। এই কাগজে ব্যবহৃত টেলমিসার্টন সিগমা-অলড্রিচ জার্মানি, Inc. থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল, যার বিশুদ্ধতা 98 শতাংশ প্লাস (HPLC)। পর্যায়ক্রমে, রক্তের গ্লুকোজ এবং শরীরের ওজন পরিমাপ করা হয়েছিল, এবং অ্যালবুমিনুরিয়ার পরিমাণগত পরিমাপের জন্য প্রস্রাবের নমুনাগুলি বিপাকীয় খাঁচায় সংগ্রহ করা হয়েছিল। 4 সপ্তাহ পরে অ্যানেস্থেশিয়ার অধীনে ইঁদুরকে বলি দেওয়া হয়েছিল, কিডনিগুলি সরানো হয়েছিল এবং হিস্টোলজিকাল বিশ্লেষণ এবং প্রোটিন নিষ্কাশনের জন্য ওজন করা হয়েছিল।

3. ইউরিনারি অ্যালবুমিন

অদ্রবণীয় পদার্থ অপসারণের জন্য 5 মিনিটের জন্য 10,{1}} rpm-এ প্রস্রাবের নমুনাগুলিকে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল৷ ব্যবহার না করা পর্যন্ত সুপারনাট্যান্টকে −80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অ্যালিকোট করা হয়েছিল এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল। Chondrex (Redmond, WA) থেকে ইঁদুরের প্রস্রাব অ্যালবুমিনের জন্য ELISA কিট প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে ব্যবহার করা হয়েছিল।

4. ক্রিয়েটিনাইন ক্লিয়ারেন্স রেট

ক্রিয়েটিনাইন অ্যাসে কিট (নানজিং জিয়ানচেং, সি011-2-1) রক্ত ​​এবং প্রস্রাবে ক্রিয়েটিনিন নির্ধারণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। Ccr সূত্র অনুসারে গণনা করা হয়েছিল: Ccr=(প্রস্রাবের ক্রিয়েটিনিন*24 ঘন্টা প্রস্রাবের পরিমাণ)/(রক্তের ক্রিয়েটিনিন*24 ঘন্টা*60 মিনিট/ঘন্টা)/শেষ ওজন (কেজি)।

5. ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল এবং TUNEL স্টেনিং

7-8 μm এ একটি স্লাইসিং মাইক্রোটোমে কিডনি কাটা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য পিবিএস-এ 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে স্থির করা হয়েছিল। 1 ঘন্টার জন্য বাফার (PBS, 2 শতাংশ BSA, 10 শতাংশ FBS) দিয়ে ব্লক করা হয়েছে এবং তারপরে দ্বিতীয় বাফার (PBS, 0.4 শতাংশ ট্রাইটন) দিয়ে 10 মিনিট ইনকিউবেশন করা হয়েছে। -SMA (Servicebio, GB13044) বা NPHS2 (Abcam, ab229037) এর বিরুদ্ধে প্রাথমিক অ্যান্টিবডি একটি আর্দ্র চেম্বারে ঘরের তাপমাত্রায় 3 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছে। ধোয়ার পরে, অংশগুলি Cy3 ছাগল-বিরোধী মাউস আইজিজি (এইচ প্লাস এল) (সার্ভিসবিও, GB21301), এইচআরপি কনজুগেটেড গোট অ্যান্টি-র্যাবিট আইজিজি (এইচ প্লাস এল) (সার্ভিসবিও, GB23303), বা ইমিউনোফ্লুরোসেন্ট TUNEL, GSerbio1 (GSerbio101) দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। ) একটি আর্দ্র চেম্বারে প্রতিক্রিয়া (অন্ধকার, 37 ডিগ্রি , 1 ঘন্টা)। বিভাগগুলি তারপরে নিউক্লিয়াস সনাক্তকরণের জন্য DAPI (Servicebio, G1012) এর সাথে কাউন্টারস্টেন করা হয়েছিল। অবশেষে, দাগযুক্ত বিভাগগুলি ফ্লুরোসেন্স quenching সিলিং তরল প্রতিরোধে এম্বেড করা হয়েছিল এবং একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (NIKON ECLIPSE C1, জাপান) ব্যবহার করে চিত্রিত করা হয়েছিল।

Cistanche নির্যাস

6. কোষ সংস্কৃতি

হিউম্যান রেনাল মেসাঞ্জিয়াল সেল (HRMCs) সায়েন্সেল রিসার্চ ল্যাবরেটরিজ, সান্তিয়াগো, CA থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং মেসাঞ্জিয়াল সেল মিডিয়াম (MsCM, ScienCell রিসার্চ ল্যাবরেটরিজ) এ সংষ্কৃত হয়েছিল। এইচআরএমসিগুলি একটি পলি-এল-লাইসিন প্রলিপ্ত ফ্লাস্কে (2 ug/cm2) প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল, এবং 5 শতাংশ CO2 ধারণকারী আর্দ্র বায়ুমণ্ডলে 37 ডিগ্রিতে বেড়ে ওঠে। এই পরীক্ষার কোষগুলি 3-4 প্যাসেজের মধ্যে ব্যবহার করা হয়েছিল এবং তারা মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলির নির্দিষ্ট বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শন করেছে তা নিশ্চিত করার জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল। মাউস পডোসাইট সেল লাইন MPC-5 ATCC, মেরিল্যান্ড, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল৷ কোষগুলি RPMI 1640 (10 শতাংশ FBS) তে 50 U/ml IFN- সহ 33 ডিগ্রি থেকে 85 শতাংশ সঙ্গমে টাইপ I কোলাজেনের উপর জন্মানো হয়েছিল এবং তারপর পার্থক্যের জন্য 10-14 দিনের জন্য IFN- ছাড়াই 37 ডিগ্রিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল।

7. কোষের কার্যক্ষমতা এবং বিস্তার পরীক্ষা

সেল কাউন্টিং কিট-8 (CCK-8) কোষের বিস্তার এবং কোষের কার্যকারিতা পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। প্রতিটি কূপে 96-ওয়েল কালচার প্লেটের (5 × 103 /ওয়েল) বীজ বপন করা হয়েছিল। চিকিত্সার পরে, 10 ul CCK-8 (বেয়োটাইম, সাংহাই, চীন) যোগ করা হয়েছিল এবং 1 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে সেদ্ধ করা হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার ব্যবহার করে শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) 450 এনএম তরঙ্গদৈর্ঘ্যে।

8. অ্যানেক্সিন V এবং প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড স্টেনিং

60 শতাংশ সঙ্গমে না পৌঁছানো পর্যন্ত কোষগুলিকে প্রলেপ দেওয়া হয় এবং বড় করা হয়, এবং তারপরে উচ্চ গ্লুকোজ (50 mmol/L) বা টেলমিসার্টান দিয়ে চিকিত্সা করা হয়। 96 ঘন্টা পরে, সংগৃহীত কোষগুলি ঠান্ডা পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং একটি বাঁধাই বাফারে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়েছিল। Annexin V-FITC এবং PI (eBioscience, Santiago, CA, United States) কে প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে সেলুলার সাসপেনশনে যোগ করা হয়েছিল এবং FACScan (এফএসিস্ক্যান) দ্বারা পরিচালিত ফ্লো সাইটোমেট্রি দ্বারা 10,000 কোষের নমুনা ফ্লুরোসেন্স বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। বেক্টন, ডিকিনসন, এবং কোম্পানি, ফ্র্যাঙ্কলিন, এনজে, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র)।

9. ওয়েস্টার্ন ব্লটিং

রেনাল কর্টেক্স, এইচআরএমসি, এবং এমপিসি-5 টিস্যু বা সেল প্রোটিন এক্সট্রাকশন রিএজেন্ট (বেয়োটাইম) প্রোটেজ এবং ফসফেটেস ইনহিবিটরস (মার্ক, হোয়াইটহাউস স্টেশন, এনজে, ইউনাইটেড স্টেটস) এর সাথে সম্পূরক একত্রিত করা হয়েছিল। নমুনাগুলি একটি 10 ​​শতাংশ এসডিএস পৃষ্ঠায় পৃথক করা হয়েছিল এবং একটি নাইট্রোসেলুলোজ ঝিল্লিতে (প্যাল ​​কর্পোরেশন, এনওয়াই, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) স্থানান্তরিত হয়েছিল। ঝিল্লিটি 5 শতাংশ বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন দিয়ে ব্লক করা হয়েছিল এবং অ্যান্টিবডি দিয়ে মুছে ফেলা হয়েছিল। অ্যান্টি-পিকেসি 1 (সেল সিগন্যালিং টেকনোলজি, 46,809), অ্যান্টি-সুইপ্রোসিন-1 (Abcam, ab24368), TGF- 1 (Abcam, ab215715), টিউবুলিন (বেয়োটাইম, AT819) এবং GAPDH (বেয়োটাইম, AT819) ) 1:1,000 এর ঘনত্বে ব্যবহার করা হয়েছিল। IRDye-সংযুক্ত অ্যান্টি-মাউস বা অ্যান্টি-র্যাবিট সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (রকল্যান্ড, লিমেরিক, PA, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) 1: 5,000 ব্যবহার করে প্রোটিনগুলিকে কল্পনা করা হয়েছিল। ফলাফল বিশ্লেষণ করতে ODYSSEY ইনফ্রারেড ইমেজিং সিস্টেম (LI-COR) ব্যবহার করে।

10. পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ

অরিজিন 6.1 (OriginLab, Northampton, MA) দ্বারা ডেটা প্রসেসিং বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং কমপক্ষে তিনটি স্বাধীন পরীক্ষার গড় ± SD হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। ANOVA ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য নির্ধারণ করা হয়েছিল। p < 0.05 এর মান পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।

Cistanche tubulosa

আলোচনা

টেলমিসার্টান হল একটি নির্বাচনী AT1 রিসেপ্টর ব্লকার যা উচ্চ রক্তচাপ এবং উচ্চ রক্তচাপ রোগীদের মূত্রনালীর প্রোটিন নিঃসরণ কমাতে চিকিৎসাগতভাবে ব্যবহার করা হয়েছে (Baden et al., 2008; Mann et al., 2009)। বেশ কিছু ক্লিনিকাল ট্রায়ালে পরামর্শ দেওয়া হয়েছে যে ম্যাক্রোঅ্যালবুমিনুরিয়া রোগীদের প্রোটিনুরিয়া কমাতে এবং ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথির সূচনা ও অগ্রগতি বিলম্বিত করতে টেলমিসার্টন কার্যকর (মাকিনো এট আল।, 2005; নাকামুরা এট আল।, 2010; ফুজিতা এট আল।, 2011; ., 2011)। বর্তমান গবেষণায়, এসটিজেড-প্ররোচিত ডায়াবেটিস ইঁদুরের টেলমিসার্টনের সাথে মৌখিক চিকিত্সা শরীরের ওজন, রক্তে গ্লুকোজ এবং প্রস্রাবের প্রোটিন হ্রাস সহ কিডনি এবং সামগ্রিকভাবে প্রাথমিক অস্বাভাবিকতার সূত্রপাত প্রতিরোধ করে। এই ফলাফলগুলি নিশ্চিত করেছে যে প্রাথমিক পর্যায়ে ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথি ইঁদুরগুলিতে টেলমিসার্টনের পুনঃপ্রতিরোধ রয়েছে। আরও গুরুত্বপূর্ণভাবে, এই গবেষণায় দেখা গেছে যে ডায়াবেটিক গ্লোমেরুলির উপর টেলমিসার্টনের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব যথাক্রমে পডোসাইট এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিতে অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোটিক এবং প্রো-অ্যাপোপ্টোটিক প্রভাবে প্রতিফলিত হয়েছিল।

অ্যাডভান্সড গ্লাইকেশন এন্ড প্রোডাক্ট (AGE) আংশিকভাবে Ang II-AT1R অক্ষের উদ্দীপনার মাধ্যমে পডোসাইট ডিএনএ আঘাত এবং বিচ্ছিন্নতা সৃষ্টি করতে পারে, এইভাবে DKD-তে টেলমিসার্টনের একটি উদ্ভাবনী উপকারী বৈশিষ্ট্য সরবরাহ করে (ফুকামি এট আল।, 2013)। নর্মোটেনসিভ, নিম্ন-গ্রেডের প্রোটিনিউরিক গ্লোমেরুলার রোগে, রোগের প্রাথমিক পর্যায়ে টেলমিসার্টান দিয়ে চিকিত্সা গ্লোমেরুলার এবং টিউবুলোইন্টারসটিশিয়াল ক্ষতি হ্রাস করে (ভিলা এট আল।, 2011)। এবং বেশ কয়েকটি পথ সম্ভবত প্লিওট্রপিক পরিণতির সাথে যুক্ত যার মধ্যে রয়েছে গ্রোথ ফ্যাক্টর সিগন্যালিং, রেপামাইসিন সিগন্যালিং এর স্তন্যপায়ী লক্ষ্যবস্তু, প্রোটিন সর্বব্যাপীকরণ, Wnt-বিটা ক্যাটেনিন পাথওয়ে এবং হাইপোক্সিয়া সিগন্যালিং (ভিলা এট আল।, 2011)।

সম্প্রতি, আমরা রিপোর্ট করেছি যে swiprosin-1 (Wang et al., 2018b), 2 (EFhd2) সম্বলিত EF-হ্যান্ড ডোমেনের আরেকটি নাম, যেটি ইনডাকশনের পরে শুরু হওয়া DKD এর অগ্রগতিতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করেছে, যখন এটি অবস্থিত মাউস গ্লোমেরুলাসের পডোসাইটগুলিতে। সুইপ্রোসিন-1 অনুপস্থিতি উন্নত মাইটোকন্ড্রিয়া-নির্ভর পডোসাইট অ্যাপোপটোসিস হাইপারগ্লাইসেমিয়া বা p38 MAPK সিগন্যালিং পথের মাধ্যমে উচ্চ গ্লুকোজ দ্বারা উদ্দীপিত। এখানে, আমরা আরও দেখতে পেলাম যে টেলমিসার্টান হাইপারগ্লাইসেমিয়া বা উচ্চ-গ্লুকোজ-প্রেরিত অভিব্যক্তিকে বাধা দেয় ভিভো এবং ভিট্রো উভয় ক্ষেত্রেই, যা ইঙ্গিত করে যে পডোসাইটগুলিতে টেলমিসার্টনের অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোসিস প্রভাব সুইপ্রোসিনের নিয়ন্ত্রণের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে{10} {12}} অভিব্যক্তি।

মেসাঞ্জিয়াল কোষের বিস্তার এবং এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্স প্রোটিনের অত্যধিক জমা ডিকেডির বিকাশে অবদান হিসাবে নিশ্চিত করা হয়েছে (লি এট আল।, 2004)। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে উচ্চ গ্লুকোজ হাইপারগ্লাইসেমিয়ার অধীনে মেসাঞ্জিয়াল এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্স প্রোটিনের অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করতে পারে (তানিগুচি এট আল।, 2013)। -এসএমএ সাধারণত এসটিজেড-প্ররোচিত ডায়াবেটিস ইঁদুরের অন্যান্য গ্লোমেরুলার কোষ থেকে মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয় এবং বর্ধিত হয় -এসএমএ এক্সপ্রেশন মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলির ফেনোটাইপিক অ-অ্যাক্টিভেটেড ফেজ থেকে প্রলিফারেটিভ, সিক্রেটরি অ্যাক্টিভেটেড ফেজ (Niu) এর চিহ্নিতকারী হতে পারে। এট আল।, 2014)। এখানে, আমরা দেখতে পেলাম যে ডায়াবেটিক গ্লোমেরুলাসে টেলমিসার্টান -এসএমএ এক্সপ্রেশন হ্রাস পেয়েছে। উপরন্তু, এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে মেসাঞ্জিয়াল কোষের বিস্তার ডিকেডি (জেং এট আল।, 2013) এর প্যাথোজেনেসিসের উপর উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলে। এই গবেষণায় আমাদের ফলাফলগুলি প্রোপোপটোটিক বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে সম্পর্কিত মেসাঞ্জিয়াল কোষের বিস্তারের উপর টেলমিসার্টনের সময়- এবং ডোজ-নির্ভর বিষণ্ণ প্রভাবকে প্রতিফলিত করে।

ক্লিনিকাল প্রমাণগুলি সুপারিশ করে যে টেলমিসার্টান ডিকেডি সহ হাইপারটেনসিভ ব্যক্তিদের প্রোটিনুরিয়া কমানোর ক্ষেত্রে লসার্টনের চেয়ে বেশি কার্যকর, যা পিপিএআরকে আংশিকভাবে যন্ত্রণা দেওয়ার ক্ষমতার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে (বিচু এট আল।, 2009)। তদ্ব্যতীত, এই উপকারী পরিবর্তনগুলি যেমন রেনাল অ্যাট্রোফি প্রতিরোধ এবং টেলমিসার্টনের ফাইব্রোসিসগুলি পিপিএআর / এইচজিএফ অ্যাক্টিভেশন (কুসুনোকি এট আল।), 201, 2001 এর মাধ্যমে TGF 1 এবং অন্যান্য প্রোইনফ্ল্যামেটরি এবং প্রোফাইব্রোটিক সাইটোকাইন জিনের প্রকাশে হ্রাসের সাথে যুক্ত ছিল। Ang II টাইপ 1 রিসেপ্টর অবরোধ। এখানে, আমরা মেসাঞ্জিয়াল কোষে টেলমিসার্টন বিশেষভাবে সক্রিয় পিপিএআর জিনের প্রকাশও পেয়েছি এবং টেলমিসার্টান থেকে মেসাঞ্জিয়াল কোষে সৃষ্ট প্রো-অ্যাপোপ্টোটিক প্রভাব পিপিএআর ইনহিবিটর দ্বারা উপশম করা যেতে পারে।

PKC 1 হল সেরিন-থ্রোনাইন কাইনেসের ব্যাপকভাবে প্রকাশ করা পরিবারগুলির মধ্যে একটি যা সাবস্ট্রেট-নির্দিষ্ট ফসফোরিলেশন (নিউটন, 1995) দ্বারা সেলুলার অগ্রগতির একটি বিস্তৃত পরিসরকে স্থানান্তরিত করে। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে শুধুমাত্র PKC ক্রিয়াকলাপই বৃদ্ধি পায় না কিন্তু এর mRNA মাত্রাও মানব ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথি বায়োপসিতে পরিলক্ষিত হয় (ল্যাংহাম এট আল।, 2008)। হাইপারগ্লাইসেমিয়া-প্ররোচিত পিকেসি এক্সপ্রেশন এবং অ্যাক্টিভেশনের মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিতে প্লিওট্রপিক প্রভাব রয়েছে, যার মধ্যে ইসিএম প্রোটিনের অত্যধিক সঞ্চয়কে উন্নীত করা (ব্রাউনলি, 2001)। গবেষণায় দেখা গেছে যে PKC-এর বাধা db/db ইঁদুরে গ্লোমেরুলার হাইপারসেলুলারিটি এবং এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্সের প্রসারণ এবং STZ-ইঁদুরে গ্লোমেরুলার কর্মহীনতা হ্রাস করে (Ishii et al., 1996; Koya et al., 2000)। একইভাবে, পিকেসি ইনহিবিটর অ্যাটেনুয়েটেড প্লেটলেট-ডিরাইভড গ্রোথ ফ্যাক্টর (পিডিজিএফ)-চালিত মেসাঞ্জিয়াল কোষের বিস্তার এবং কোলাজেন উৎপাদন (টোকুয়ামা এট আল।, 2011)। আমাদের গবেষণায়, টেলমিসার্টান হাইপারগ্লাইসেমিয়া-উদ্দীপিত মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিতে পিকেসি 1 এমআরএনএ এবং প্রোটিনের অভিব্যক্তি হ্রাস করেছে। উপরন্তু, উচ্চ গ্লুকোজ দ্বারা প্ররোচিত মেসাঞ্জিয়াল কোষে TGF 1 এক্সপ্রেশনও টেলমিসার্টান দ্বারা বাধা হতে পারে।

AT1 এবং AT2 উভয় রিসেপ্টর, সাতটি ট্রান্সমেমব্রেন-স্প্যানিং জি প্রোটিন-কাপল্ড রিসেপ্টর হিসাবে পরিচিত, ক্লোন করা হয়েছে এবং ফার্মাকোলজিক্যালভাবে চিত্রিত করা হয়েছে (Touyz এবং Berry, 2002)। AT1 রিসেপ্টরগুলিকে বেছে বেছে টেলমিসার্টান দ্বারা বিরোধিতা করা যেতে পারে, যখন AT1 রিসেপ্টর ব্লকারগুলি AT2 রিসেপ্টরগুলির অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করতে পারে (Touyz and Berry, 2002)। গবেষণায় দেখা গেছে যে AT1 রিসেপ্টর কোষের বৃদ্ধি রোধ করে এবং অ্যাপোপটোসিসকে উস্কে দিয়ে তাদের প্রভাব প্রয়োগ করে (Horiuchi et al., 1997; Touyz et al., 1999)। তদুপরি, AT2 রিসেপ্টরগুলি p38 MAPK-মধ্যস্থিত অ্যাপোপটোটিক সিগন্যালিং (মিউরা এবং কার্নিক, 2000) এর মাধ্যমে একটি নির্দিষ্ট কনফর্মেশনে সেল অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করে। আমাদের বর্তমান কাগজে, টেলমিসার্টান বা হাইপারগ্লাইসেমিয়া দ্বারা উদ্দীপিত সংস্কৃত মেসাঞ্জিয়াল কোষগুলিতে AT1 এবং AT2 mRNA-এর অভিব্যক্তি অপরিবর্তিত ছিল। অতএব, টেলমিসার্টান-প্ররোচিত মেসাঞ্জিয়াল সেল অ্যাপোপটোসিস এবং PKC 1 এর হ্রাস হওয়া অভিব্যক্তি AT1 এবং AT2 রিসেপ্টর দ্বারা মধ্যস্থতা নাও হতে পারে।

সিস্টানচে ক্যাপসুল

উপসংহারে, টেলমিসার্টন টাইপ 1 ডায়াবেটিক ইঁদুরের প্রাথমিক গ্লোমেরুলার ইনজুরি কমিয়ে দেয় পডোসাইট অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দিয়ে এবং মেসাঞ্জিয়াল অ্যাপোপটোসিসকে প্রচার করে। পডোসাইটে টেলমিসার্টনের অ্যান্টিঅ্যাপোপ্টোটিক প্রভাব এটির সুইপ্রোসিন-1 অভিব্যক্তির বাধার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, এদিকে, মেসাঞ্জিয়াল কোষের প্রোঅ্যাপোপটোটিক প্রভাব আংশিকভাবে পিপিএআর-এ এর অ্যাগোনিস্টিক প্রভাবের সাথে যুক্ত ছিল। অতিরিক্তভাবে, টেলমিসার্টান বেছে বেছে মেসাঞ্জিয়াল কোষে PKC 1/TGF 1 এর অভিব্যক্তিকে অবরুদ্ধ করেছে কিন্তু পডোসাইটগুলিতে নয়। পডোসাইট এবং মেসাঞ্জিয়াল কোষ এবং অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলির উপর টেলমিসার্টনের বিপরীত কিন্তু উপকারী প্রভাবগুলি ব্যাখ্যা করার জন্য উন্নত অধ্যয়নের প্রয়োজন।

Xin Wei 1, Yabin Ma2, Ya Li 3, Wenzhao Zhang4, Yuting Zhong5, Yue Yu6, Li-Chao Zhang5, Zhibin Wang4 এবং Ye Tu2

1 ক্লিনিক্যাল ফার্মেসি বিভাগ, সিনহুয়া হাসপাতাল, সাংহাই জিয়াওটং ইউনিভার্সিটি স্কুল অফ মেডিসিন, সাংহাই, চীন,

2 ফার্মেসি বিভাগ, সাংহাই ইস্ট হাসপাতাল, টংজি বিশ্ববিদ্যালয়, সাংহাই, চীন,

3 ক্লিনিক্যাল ফার্মেসি বিভাগ, ক্লিনিক্যাল ট্রায়াল সেন্টার, শানডং ফার্স্ট মেডিকেল ইউনিভার্সিটির প্রথম অনুমোদিত হাসপাতাল এবং শানডং প্রাদেশিক কিয়ানফোশান হাসপাতাল, জিনান, চীন,

4 ক্রিটিক্যাল কেয়ার মেডিসিন বিভাগ, অ্যানেস্থেসিওলজি স্কুল, নেভাল মেডিকেল ইউনিভার্সিটি, সাংহাই, চীন,

5 ফার্মেসি বিভাগ, সাংহাই মিউনিসিপাল হসপিটাল অফ ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন, সাংহাই, চায়না,

6 ইনস্টিটিউট অফ ভাস্কুলার ডিজিজ, সাংহাই টিসিএম-ইন্টিগ্রেটেড হাসপাতাল, সাংহাই, চীন