ক্যাটেচিনের সাহায্যে ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেজ A কে লক্ষ্য করে SNU620/5FU গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার কোষগুলিকে 5-ফ্লুরোরাসিল পার্ট 1তে সংবেদনশীল করে তোলে

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত:অ্যান্টিক্যান্সার থেরাপিউটিকসের প্রতিরোধ কার্যত প্রতিটি ধরণের ক্যান্সারে ঘটে এবং ক্যান্সার চিকিত্সার ক্ষেত্রে একটি বড় অসুবিধা হয়ে দাঁড়ায়। যদিও 5-ফ্লুরোরাসিল (5FU) হল গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সারের জন্য অ্যান্টিক্যান্সার থেরাপির প্রথম সারির পছন্দ, ওষুধ প্রতিরোধের কারণে এর কার্যকারিতা সীমিত। সম্প্রতি, পরিবর্তিত ক্যান্সার বিপাক, ওয়ারবার্গ প্রভাব সহ, শক্তি উৎপাদনের জন্য অক্সিডেটিভ ফসফোরিলেশনের পরিবর্তে গ্লাইকোলাইসিসের জন্য একটি অগ্রাধিকার, কেমোথেরাপির প্রতিরোধকে নিয়ন্ত্রণকারী একটি প্রধান প্রক্রিয়া হিসাবে গৃহীত হয়েছে। এইভাবে, আমরা প্রতিষ্ঠিত গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার সেল লাইন, SNU620 এবং SNU620/5FU.SNU620/5FU ব্যবহার করে 5FU প্রতিরোধ ক্ষমতা কমানোর জন্য অ্যান্টিগ্লাইকোলাইটিক এজেন্টগুলির বিস্তারিত প্রক্রিয়া এবং সম্ভাব্য উপযোগিতা তদন্ত করেছি, যা একটি গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার কোষকে আশ্রয় দেয়, যা অনেক বেশি উচ্চতর প্রতিরোধ ক্ষমতা প্রদর্শন করে। এরগ্লাইকোলাইসিস-সম্পর্কিত এনজাইম, যেমন ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেজ A(LDHA), প্যারেন্ট SNU620 কোষের তুলনায়। গ্লাইকোলাইসিস সীমিত করার জন্য, আমরা ক্যাটিচিন এবং এর ডেরিভেটিভগুলি পরীক্ষা করেছি, যা পরিচিতপ্রদাহ বিরোধীএবং অ্যান্টিক্যান্সার প্রাকৃতিক পণ্য কারণ এপিগ্যালোকাটেচিন গ্যালেট আগে LDHA এক্সপ্রেশনের দমনকারী হিসাবে রিপোর্ট করা হয়েছে। ক্যাটেচিন, তাদের মধ্যে সবচেয়ে সহজ যৌগ, ল্যাকটেট উৎপাদন এবং এলডিএইচএ কার্যকলাপের উপর সর্বোচ্চ প্রতিরোধমূলক প্রভাব ফেলেছিল। উপরন্তু, 5FU এবং catechin এর সংমিশ্রণ SNU620/5FU কোষে অতিরিক্ত সাইটোটক্সিসিটি এবং প্ররোচিত প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS)-মধ্যস্থ অ্যাপোপটোসিস দেখিয়েছে। এইভাবে, এই ফলাফলগুলির উপর ভিত্তি করে, আমরা একটি অভিনব সহায়ক ওষুধের বিকাশের জন্য প্রার্থী হিসাবে ক্যাটিচিনকে পরামর্শ দিই যা LDHA সীমাবদ্ধ করে 5FU-তে কেমোরেসিস্ট্যান্স হ্রাস করে।

কীওয়ার্ড:5-ফ্লুরোরাসিল;রসায়ন প্রতিরোধক; গ্লাইকোলাইসিস; ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেজ; catechin

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

1। পরিচিতি

প্রাথমিক টিউমার এবং 5-ফ্লুরোরাসিল (5FU)-ভিত্তিক কম্বিনেশনাল কেমোথেরাপি, যেমন এপিরুবিসিন, সিসপ্ল্যাটিন, এবং ফ্লুরোরাসিল এবং ডসেট্যাক্সেল, অক্সালিপ্ল্যাটিন, এবং 5FU[1] এর অস্ত্রোপচারের মাধ্যমে গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সারের চিকিৎসায় উল্লেখযোগ্য অগ্রগতি সাধিত হয়েছে। ,21 আজ অবধি, 5FU, ইউরাসিলের একটি অ্যানালগ যা থাইমিডাইলেট সিন্থেস [3] বাধা দিয়ে ডিএনএ সংশ্লেষণকে অবরুদ্ধ করে, গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সারের চিকিত্সার জন্য সাধারণভাবে ব্যবহৃত কেমোথেরাপির ওষুধ হিসাবে রয়ে গেছে [1, A4]। যাইহোক, কেমোথেরাপির ক্লিনিকাল কার্যকারিতা ড্রাগ প্রতিরোধের সাথে সম্পর্কিত প্রাথমিক বা মেটাস্ট্যাটিক ক্যান্সারের পুনরুত্থানের কারণে অসন্তোষজনক হয়েছে [1,5]।

Cistanche রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা উন্নত করতে পারে

বেশ কয়েকটি সেলুলার প্রক্রিয়াগুলিকে কেমোরেসিস্ট্যান্সের অন্তর্নিহিত মূল প্রক্রিয়া হিসাবে বিবেচনা করা হয়, যার মধ্যে ড্রাগ অ্যাক্টিভেশন বা নিষ্ক্রিয়করণ, ডিএনএ ক্ষতির মেরামত যন্ত্রপাতি, ওষুধের লক্ষ্যে পরিবর্তন, অ্যাপোপটোটিক পাথওয়ের নিষ্ক্রিয়তা এবং অটোফ্যাজি বৃদ্ধি [6,7]। ক্যান্সার ভিন্ন ভিন্ন এবং বিভিন্ন ক্যান্সার শক্তি বিপাকের জন্য গ্লাইকোলাইসিস এবং অক্সিডেটিভ ফসফোরিলেশন উভয়ই ব্যবহার করে [৮]। যাইহোক, বিপাকীয় রিপ্রোগ্রামিং, বিশেষত অস্বাভাবিক অ্যারোবিক গ্লাইকোলাইসিস, গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সারে 5FU সহ কেমোথেরাপিউটিক ওষুধের প্রতিরোধের বিকাশে একটি মূল খেলোয়াড় হিসাবে রিপোর্ট করা হয়েছে [9]। ল্যাকটেট ডিহাইড্রোজেনেজ এ (এলডিএইচএ) এবং পাইরুভেট ডিহাইড্রোজেনেজ কিনেসেস (পিডিকে) এ্যারোবিক গ্লাইকোলাইসিসের মূল নিয়ন্ত্রক হিসাবে পরিচিত যা পাইরুভেট থেকে ল্যাকটেট তৈরি করে[10,11]। ডিক্লোরোসেটেটের সংমিশ্রণ, PDK-এর একটি প্রতিষ্ঠিত প্রতিরোধক, 5FU [12] এর দিকে সংবেদনশীলতা পুনরুদ্ধার করে। এছাড়াও, এলডিএইচএ, একটি মূল এনজাইম যা পাইরুভেট থেকে ল্যাকটেট রূপান্তরকে অনুঘটক করে, গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সারের চিকিত্সার জন্য একটি সম্ভাব্য লক্ষ্য হিসাবে রিপোর্ট করা হয়েছে [13,14]। ক্যান্সার কোষে LDHA এক্সপ্রেশনের নকডাউন মাইটোকন্ড্রিয়াল শ্বাস-প্রশ্বাস বৃদ্ধি এবং কোষের কার্যক্ষমতা হ্রাস করার মাধ্যমে টিউমারজিনিসিটিকে বাধা দেয় [15]। FX11, PSTMB, এবং GSK 2837808A এর মতো বেশ কিছু LDHA ইনহিবিটর, ATP মাত্রা হ্রাস করে এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস তৈরি করে এবং অবশেষে অ্যাপোপটোটিক কোষের মৃত্যু ঘটায় [16-18]। যদিও একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে মাইক্রোআরএনএ{15}}এর দ্বারা এলডিএইচএ-এর বাধা কোলন ক্যান্সারে 5FU-এর প্রতিরোধকে পুনরুদ্ধার করেছে [19], পূর্ববর্তী কোনো গবেষণায় কেমোরেসিস্ট্যান্সের উপর জেনেটিক বা ফার্মাকোলজিক্যাল এলডিএইচএ ইনহিবিটারগুলির প্রভাবের কথা বলা হয়নি।

গ্রিন টি পলিফেনল, ক্যাটেচিন (সিএ), এপিকাটেচিন (ইসি), গ্যালোকেটেচিন (জিসি), এপিগালোকাটেচিন (ইজিসি), এপিকাটেচিন-3-গ্যালেট (ইসিজি), এবং এপিগ্যালোকাটেচিন-3-গ্যালেট (ইজিসিজি) সহ, মানুষের প্রচার করে প্রদাহ, ডায়াবেটিস, কার্ডিওভাসকুলার ডিজিজ এবং ম্যালিগন্যান্ট ক্যান্সার সহ বেশ কয়েকটি রোগ প্রতিরোধ ও চিকিত্সার মাধ্যমে স্বাস্থ্য [20,21] পলিফেনলের মধ্যে, EGCG কোলোরেক্টাল ক্যান্সার এবং হেপাটোসেলুলার কার্সিনোমা কোষগুলিতে 5FU কেমোসেনসিটিভিটি বাড়ায় AMPK পথগুলি সক্রিয় করে এবং ক্যান্সারের স্টেমনেস [22,23] সীমাবদ্ধ করে। উপরন্তু, EGCG স্তন এবং অগ্ন্যাশয় ক্যান্সার কোষে [24,25] এর অভিব্যক্তিগুলিকে দমন করে এলডিএইচএকে বাধা দেওয়ার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে।

এই সমীক্ষায়, আমরা অনুমান করেছি যে CA গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার কোষে 5FU এর প্রতিরোধ কমানোর জন্য একটি সহায়ক ওষুধের প্রার্থী হতে পারে। এটি পরীক্ষা করা হয়েছিল যে CA এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব, এবং/অথবা 5FU-এর সাথে এর সংমিশ্রণ, LDHA কার্যকলাপের উপর যার ফলে 5FU-প্রতিরোধী কোষগুলিতে মাইটোকন্ড্রিয়াল প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) এবং অ্যাপোপটোটিক কোষের মৃত্যু প্ররোচিত হয়।

2. ফলাফল

2.1। 5FU-প্রতিরোধী কোষের গ্লাইকোলাইটিক বৈশিষ্ট্য

বর্ধিত বিস্তার হল 5FU-প্রতিরোধী ক্যান্সার কোষ [26,27] সহ কেমোরেসিস্ট্যান্সের একটি বৈশিষ্ট্য। প্রথমত, আমরা 5FU এর প্রতিরোধ এবং SNU620 এবং SNU620/5FU কোষের দীর্ঘমেয়াদী বৃদ্ধির হার নিশ্চিত করেছি। যখন এই কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য 5FU এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে সংষ্কৃত করা হয়েছিল, তখন SNU620/5FU কোষে (100.63 uM) 50 শতাংশ বৃদ্ধি বাধা (Gl50) ঘটাচ্ছে আনুমানিক ডোজ তার পিতামাতার SNU620 কোষে GIso ঘটানোর চেয়ে অনেক বেশি। 8μ8. ) (চিত্র 1A এবং পরিপূরক চিত্র S1)। অতিরিক্তভাবে, SNU620/5FU কোষগুলির বৃদ্ধির হার SNU620 কোষগুলির তুলনায় দ্রুত ছিল (চিত্র 1B এবং পরিপূরক চিত্র S2)। যেহেতু কেমোরেসিস্ট্যান্স এবং দ্রুত বর্ধনশীল বৈশিষ্ট্যগুলি গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার কোষে উন্নত গ্লাইকোলাইটিক বৈশিষ্ট্যগুলির সাথে সম্পর্কিত হতে পারে [২৮], এক্সট্রাসেলুলার অ্যাসিডিফিকেশন রেট (ECAR) এবং অক্সিজেন খরচের হার (OCR) উভয় কোষেই অক্সামেটের উপস্থিতিতে পরিমাপ করা হয়েছিল, একটি সুপরিচিত। গ্লাইকোলাইসিস ইনহিবিটার, বা না। ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে SNU620/5FU কোষগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে SNU620 কোষ দ্বারা নিঃসৃত ল্যাকটেটের চেয়ে বেশি ক্ষরণ করে এবং পরবর্তীকালে সংস্কৃতির মাধ্যমকে অম্লীয় করে তোলে (চিত্র 1C এবং পরিপূরক চিত্র S3)। যাইহোক, এই কোষগুলির মধ্যে OCR-তে কোন উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন পরিলক্ষিত হয়নি (চিত্র 1D)। LDHA এর mRNA এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশন মাত্রা পরিমাপ করা হয়েছিল। LDHA এক্সপ্রেশন SNU620/5FU কোষে SNU620 কোষের তুলনায় বেশি ছিল (চিত্র 1E, F)। আরও, আমরা পিডিকে আইসোটাইপগুলির এমআরএনএ এবং প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরগুলি পরীক্ষা করে দেখেছি যে PDK2 এবং PDK3 এরগুলি SNU620/5FU কোষে SNU620 কোষের তুলনায় বেশি ছিল (পরিপূরক চিত্র S4A, B)। পাইরুভেট ডিহাইড্রোজেনেস (PDHA1) এর E1 সাবইউনিটের ফসফোরিলেশন, যা PDKs দ্বারা বৃদ্ধি পেয়েছিল, সেটিও মূল্যায়ন করা হয়েছিল, এবং এটি SNU620 কোষের (পরিপূরক চিত্র S4C) তুলনায় SNU620/5FU কোষে বেশি বলে পাওয়া গেছে। উপরন্তু, আমরা ব্যবহার করেছি। SNU620/5FU কোষে 5FU প্রতিরোধকে কাটিয়ে উঠতে LDHA ইনহিবিটর হিসাবে অক্সামেট। এই যৌগটি SNU620 এবং SNU620/5FU কোষে (পরিপূরক চিত্র S5) উভয় কোষের বৃদ্ধিকে বাধা দেয়। আরও, অক্সামেট বা 5FUin SNU620/5FU কোষের (চিত্র 1G) সাথে পৃথক চিকিত্সার তুলনায় অক্সামেট এবং 5FU দমন কোষের বৃদ্ধি দমন করে। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দেয় যে SNU620/5FU কোষগুলি LDHAকে উচ্চভাবে প্রকাশ করে এবং LDHA কার্যকলাপের বাধা 5FU-তে SNU/5FU কোষগুলির প্রতিরোধকে অতিক্রম করতে পারে।

চিত্র 1. ফলাফল অনুসারে,5-ফ্লুরোরাসিল (5FU)-প্রতিরোধী কোষগুলির একটি উন্নত গ্লাইকোলাইটিক বৈশিষ্ট্য রয়েছে:(A)SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য 5FU এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। এই কোষগুলির কার্যকারিতা MTT অ্যাসের মাধ্যমে মূল্যায়ন করা হয়েছিল; (B) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলির বৃদ্ধির মাত্রাগুলি MTT অ্যাস দিয়ে 4 দিনের জন্য প্রতিদিন পরিমাপ করা হয়েছিল; (C, D) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলি অক্সামেট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল ( 5mM) বা 24 ঘন্টার জন্য নয়, এবং ECAR এবং OCR মানগুলি Seahorse XF বিশ্লেষক দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল;(E, F) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষে LDHA এর অভিব্যক্তিগুলি qRT-PCR এবং ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণের মাধ্যমে সনাক্ত করা হয়েছিল; (G) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য অক্সামেট (25 মিমি) এবং/অথবা 5FU（10μM） দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল৷ ফলাফলগুলি গড় ± SEM হিসাবে দেখানো হয়েছে৷**p<0.01><><><0.01,and ##=""><0.001, compared="" with="" the="" respective="" control.="" ecar,="" extracellular="" acidification="" rates;="" ocr,="" oxygen="" consumption="" rates;="" ldha,="" lactate="" dehydrogenase="" a.="" the="" experiments="" were="" independently="" performed="" in="">

2.2। CA LDHA কার্যকলাপকে দমন করে

SNU620/5FU কোষে EC, GC, EGC এবং EGCG সহ CA এবং এর ডেরিভেটিভগুলির সাথে ল্যাকটেট উত্পাদন বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এই ডেরিভেটিভগুলির সাথে তুলনা করে, CA আরও কার্যকরভাবে ল্যাকটেট উত্পাদন হ্রাস করেছে (চিত্র 2A)। আরও, ভিট্রোতে, এলডিএইচএ কার্যকলাপ যেমন বলা হয়েছে তা নিশ্চিত করা হয়েছিল, এবং CA এর ডেরিভেটিভগুলির (চিত্র 2B) তুলনায় LDHA কার্যকলাপের উপর একটি শক্তিশালী প্রতিরোধমূলক প্রভাব দেখিয়েছে। ইন ভিট্রো LDHA এবং LDHB ক্রিয়াকলাপগুলিতে CA এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবগুলি ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে পরিমাপ করা হয়েছিল। CA LDHB কার্যকলাপকে প্রভাবিত না করে LDHA কার্যকলাপকে বাধা দেয় (চিত্র 2C, D)। অতিরিক্তভাবে, এলডিএইচএ এবং এলডিএইচবি ক্রিয়াকলাপগুলি ইজিসিজি দিয়ে পরিমাপ করা হয়েছিল, যা এলডিএইচএ কার্যকলাপকে বাধা দেওয়ার জন্য পরিচিত, এবং ডোজ-নির্ভরশীলভাবে হ্রাস পেয়েছে (পরিপূরক চিত্র S6A, B)। তদুপরি, আন্তঃকোষীয় LDHA এবং LDHB ক্রিয়াকলাপগুলি SNU620/5FU কোষগুলিতে CA এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। CA ভিট্রো ফলাফলে ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে LDHA কার্যকলাপকে বাধা দেয় কিন্তু LDHB কার্যকলাপ নয় (চিত্র 2E, F)। P-PDHA1, PDK2, PDK3, এবং LDHA এর প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরগুলিও CA চিকিত্সার পরে SNU620/5FU কোষগুলিতে পরিমাপ করা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র S7), এবং আমরা লক্ষ্য করেছি যে সেগুলি এই চিকিত্সার দ্বারা প্রভাবিত হয়নি। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে CA এর অভিব্যক্তিকে প্রভাবিত না করে LDHA কার্যকলাপ নিয়ন্ত্রণ করে।

2.3। CA দ্বারা এলডিএইচএ ইনহিবিশনের কর্মের মোড

CA এবং এর ডেরিভেটিভের উপর LDHA কার্যকলাপের বাধা প্রক্রিয়া বিশ্লেষণ করতে, আমরা মানব রিকম্বিন্যান্ট LDHA এবং CA (চিত্র 3A,B) এর মধ্যে বাঁধাই মিথস্ক্রিয়াটির আণবিক মডেলিং পরিচালনা করেছি। ফলাফলগুলি দেখায় যে CA LDHA এর T94, A95, Q99, R105, S136, R168, H192 এবং T247 এর অবশিষ্টাংশের সাথে যোগাযোগ করতে পারে। তাদের মধ্যে, R105, S136, এবং R168 সাবস্ট্রেট (পাইরুভেট) বাঁধাইয়ের জন্য গুরুত্বপূর্ণ। এইভাবে, আমরা ধরে নিয়েছিলাম যে CA সাবস্ট্রেট-বাইন্ডিং সাইটগুলিতে হস্তক্ষেপ করতে পারে। বিপরীতে, EGCG একটি ভিন্ন সাইটের মাধ্যমে LDHA এর সাথে আবদ্ধ। CA দ্বারা LDHA নিষেধাজ্ঞার কর্মের মোড যাচাই করার জন্য, মাইকেলিস-মেন্টেন এবং লাইনওয়েভার-বার্ক প্লটগুলি পাইরুভেট এবং CA-এর বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে নিশ্চিত করা হয়েছিল। LDHA কার্যকলাপ একটি পাইরুভেট ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে বৃদ্ধি করা হয়েছিল। তবে সিএ বৃদ্ধির ফলে তা উল্টে যায়। এইভাবে, Michaelis-Menten এবং Lineweaver-Burk প্লটের ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে CA হল LDHA (চিত্র 3C, D) এর জন্য একটি অ-প্রতিযোগীতামূলক বাধা। উপরন্তু, আইসোথার্মাল টাইট্রেশন ক্যালোরিমিট্রি (ITC) ডেটা দেখায় যে CA শারীরিকভাবে LDHA-এর সাথে একটি Kd দ্বারা আবদ্ধ। 197 uM এর মান (পরিপূরক চিত্র S8)। এই ফলাফলগুলি অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে যে CA LDHA-এর সাবস্ট্রেট-বাইন্ডিং সাইটকে আবদ্ধ করার মাধ্যমে LDHA কার্যকলাপকে দমন করে৷

2.4। CA LDHA কার্যকলাপ হ্রাস করার মাধ্যমে 5FU প্রতিরোধকে পুনরায় সংবেদনশীল করে

আমরা SNU620 এবং SNU620/5FU কোষে CA এর সাইটোটক্সিক প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করেছি এবং দেখতে পেয়েছি যে CA কোষের উভয় গ্রুপের বৃদ্ধিকে দমন করেছে (চিত্র 4A)। LDHA ক্রিয়াকলাপের দমনের সাথে বৃদ্ধির বাধা ছিল তা যাচাই করার জন্য, LDHA (shLDHA) এর জন্য ছোট হেয়ারপিন রাইবোনিউক্লিক অ্যাসিড (shRNA) দ্বারা LDHA-এর অভিব্যক্তি বিলুপ্ত করা হয়েছিল এবং এর অভিব্যক্তি LDHA এক্সপ্রেসিং প্লাজমিড (পরিপূরক চিত্র S9A, B) ট্রান্সফেকশন দ্বারা পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল। ) shLDHA- স্থানান্তরিত SNU620/5FU কোষে, ল্যাকটেট উৎপাদন এবং কোষের কার্যকারিতা CA চিকিত্সার দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়নি, এইসব মক-ট্রান্সফেক্ট কোষগুলির তুলনায় (চিত্র 4B, C)। উপরন্তু, CA-এর বৃদ্ধির প্রতিরোধক প্রভাব ছিল। LDHA-নকডাউন SNU620/5FU কোষে LDHA এক্সপ্রেশন পুনরুদ্ধারের দ্বারা বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 4D)। আরও, SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলি পৃথকভাবে CA এবং 5FU এর চিকিত্সা বা উভয়ের সংমিশ্রণের পরে পরীক্ষা করা হয়েছিল। CA এবং 5FU এর সাথে চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে SNU620/5FU কোষের বৃদ্ধিকে বাধা দেয় (চিত্র 4E)। অতিরিক্তভাবে, CA এবং 5FU-এর সংমিশ্রণ প্রভাবগুলি অন্যান্য কোষ লাইনে পরীক্ষা করা হয়েছে, যেমন মানুষের গ্যাস্ট্রিক ক্যান্সার AGS, অগ্ন্যাশয় ক্যান্সার প্যানিক-1, MIA PaCa-2, এবং কোলন ক্যান্সার LS174T এবং RKO কোষের তুলনায় SNU620 এবং SNU620/5FUcells। ল্যাকটেট উত্পাদন এবং LDHA এক্সপ্রেশন একে অপরের সাথে একটি ভাল সম্পর্ক দেখিয়েছে এবং এই গ্লাইকোলাইটিক বৈশিষ্ট্যগুলি SNU620/5FU, AGS এবং RKO (পরিপূরক চিত্র S10A, B) এ তুলনামূলকভাবে বেশি। অধিকন্তু, AGS এবং RKO (পরিপূরক চিত্র S10C) সহ গ্লাইকোলাইটিক কোষগুলিতে 5FU-এর একক চিকিত্সার তুলনায় CA এবং 5FU-এর সংমিশ্রণ চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে কোষগুলির কার্যকারিতা হ্রাস করেছে। যাইহোক, CA এবং 5FU এর সাথে চিকিত্সা SNU620, প্যানিক-1, MIA PaCa-2, এবং LS174T কোষগুলির বৃদ্ধিকে উল্লেখযোগ্যভাবে বাধা দেয়নি, যা কম LDHA এক্সপ্রেশন দেখায়। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে 5এফইউ-প্রতিরোধী কোষে CA-এর সংবেদনশীল প্রভাব LDHA কার্যকলাপে এর প্রতিরোধমূলক প্রভাবের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে।

চিত্র 2. Catechin(CA) LDHA কার্যকলাপকে বাধা দেয় কিন্তু এর প্রকাশ নয়:(A)SNU620/5FU-এর ল্যাকটেট উৎপাদন 24 ঘন্টার জন্য CA ডেরিভেটিভস (10 μM) দিয়ে চিকিত্সার পর পরিমাপ করা হয়েছিল; CA ডেরিভেটিভস (10 uM) এবং oxamate (20 mM); (C, D) ইন ভিট্রো, LDHA এবং LDHB কার্যকলাপগুলি CA এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে অনুমান করা হয়েছিল; (E, F) কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য CA এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। অন্তঃকোষীয় এলডিএইচএ এবং এলডিএইচবি ক্রিয়াকলাপগুলি সেল লাইসেটগুলিকে এনজাইম উত্স হিসাবে ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি গড় ± SEM হিসাবে দেখানো হয়। **পি<0.01><0.001, compared="" to="" the="" control="" (1st=""><><0.01,and><0.001,compared to="" the="" negative="" control="" (second="" column).ldha,="" lactate="" dehydrogenase="" a;="" ldhb,="" lactate="" dehydrogenase="" b.="" the="" experiments="" were="" independently="" performed="" in="">

চিত্র 4. 5FU-প্রতিরোধী কোষগুলিতে ক্যাটিচিন (CA) এবং 5-ফ্লুরোরাসিল (5FU) সহ চিকিত্সার দ্বারা কোষের কার্যকারিতা বাধাপ্রাপ্ত হয়েছিল: (A) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলির কার্যকারিতা নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে চিকিত্সার পরে মূল্যায়ন করা হয়েছিল 48 ঘন্টার জন্য CA; (B）SNU620/5FU-pLKO.1 এবং SNU620/5FU-shLDHA কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য CA（10 μM） দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। ল্যাকটেট উৎপাদন SNU620/5FU-pLKO.1 এবং SNU620/5FU-shLDHA কোষের কালচার মিডিয়াতে পরিমাপ করা হয়েছিল;(C, D)SNU620/5FU-pLKO.1, SNU620/5FU-shLDHA, SNU620/5FU-shLDHA কোষ , এবং SNU620/5FU-shLDHA প্লাস LDHA#2 কোষ 48 ঘন্টার জন্য CA এর নির্দেশিত ঘনত্বের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছিল। কোষের কার্যকারিতা একটি MTT অ্যাস ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল; (E) SNU620 এবং SNU620/5FU কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য CA （10 μM） এবং/বা 5FU（10μM） দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। এই কোষগুলির কার্যকারিতা MTT অ্যাস এর মাধ্যমে পরিমাপ করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি গড় ± SEM হিসাবে দেখানো হয়।*p<><0.01,and**><><0.05, ##=""><0.01, and="" ##t=""><0.001, compared="" with="" the="" respective="" control.="" the="" experiments="" were="" independently="" performed="" in="">

এই নিবন্ধটি Int থেকে নেওয়া হয়েছে। জে. মো. বিজ্ঞান 2021, 22, 5406। https://doi.org/10.3390/ijms22105406 https://www.mdpi.com/journal/ijms