গ্লুকোকোর্টিকয়েড-প্ররোচিত ইঁদুর মডেলে সিস্টানচে ডেজার্টিকোলা এবং এর রাইস ওয়াইন স্টিমিং পণ্যের নিউরোএন্ডোক্রাইন-ইমিউন ফাংশন নিয়ে অধ্যয়ন-Ⅱ

3.2.4। ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি

নিউরোনাল অ্যাপোপটোসিস অনেক অ্যাপোপটোটিক এবং অ্যান্টিঅ্যাপপ্টোটিক জিন দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়, প্রধানত অ্যাপোপটোসিস-প্রোমোটিং জিন ব্যাক্স এবং Bcl-2 জিন পরিবারের অ্যান্টিঅ্যাপপ্টোটিক জিন। Bcl-2 প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন-উৎপাদনকারী অর্গানেল যেমন মাইটোকন্ড্রিয়া, এন্ডোপ্লাজমিক রেটিকুলাম এবং পারমাণবিক ঝিল্লিতে স্থানীয়করণ করা হয়। Bcl-2 অক্সিজেন মুক্ত র্যাডিকেলের উপর সামান্য প্রভাব ফেলে কিন্তু পারেকোষে অক্সিডেটিভ ক্ষতি প্রতিরোধ. ব্যাক্স সাইটোপ্লাজম থেকে মাইটোকন্ড্রিয়াল মেমব্রেনে পরিবহণ করে, মাইটোকন্ড্রিয়াল মেমব্রেনের গঠন পরিবর্তন করে এবং সাইটোক্রোম সি-এর মুক্তি এবং অ্যাপোপটোসিস আনয়নকে উৎসাহিত করে।

PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ব্যাক্স এবং বিসিএল-2 প্রোটিনের অ্যাড্রিনাল সাইটোপ্লাজমে একটি অভিব্যক্তি ছিল। দাগ সব হলুদ কণা দেখিয়েছেন. বিসি গ্রুপের তুলনায়, এমসি গ্রুপে ব্যাক্স প্রোটিনের গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).

চিত্র 5(b) দেখায় যে BC গ্রুপের তুলনায়, MC গ্রুপে Bcl-2 প্রোটিনের গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).

ক্যাসপেস-3 প্রোটিনটি মূলত সাইটোপ্লাজমে তার আসল আকারে স্বাভাবিক টিস্যুতে স্থানীয়করণ করা হয় এবং এর প্রকাশ কম। ইতিবাচক সংকেত হল ফ্যাকাশে হলুদ বা বাদামী হলুদ। বিসি গ্রুপের তুলনায়, এমসি গ্রুপে ক্যাসপেসের অভিব্যক্তি-3 উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).

স্বাভাবিক টিস্যুতে, ফাস জিনের অভিব্যক্তি হ্রাস পেয়েছিল এবং সিটু হাইব্রিডাইজেশনের জন্য ইতিবাচক সংকেত ছিল বাদামী হলুদ। চিত্র 5(d) তে দেখানো হয়েছে, BC গ্রুপের তুলনায়, MC গ্রুপে Fas প্রোটিনের গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব বেড়েছে (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).

FasL প্রোটিন প্রধানত কোষের ঝিল্লি বা সাইটোপ্লাজমে অবস্থিত এবং এর ইতিবাচক সংকেতগুলি বাদামী। BC গ্রুপের তুলনায়, MC গ্রুপে FasL জিনের গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).

ফলাফল প্রমাণ করেছে যে সিডি এবং ডাব্লুসিডি পারেপ্রদাহজনক কোষে অ্যাপোপটোসিস প্ররোচিত করেএবং FasL প্রোটিনের অভিব্যক্তি প্রচার করে এবং Fas প্রোটিনের সাথে আবদ্ধ করে, ক্যাসপেস-3 প্রোটিন সক্রিয় করে এবং একটি ক্যাসপেস ক্যাসকেড ট্রিগার করে অ্যাড্রিনাল ক্ষতি কমায়। WCD-HD গ্রুপের প্রভাব ছিল সেরা।

3.3। ইমিউন ফাংশন নির্ধারণ

3.3.1। ইমিউন অর্গান সূচক

বিসি গ্রুপের তুলনায়, এমসি গ্রুপের থাইমাস সহগ এবং প্লীহা সূচক উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (P< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better.

PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.3.2। পেরিফেরাল রক্তে টি লিম্ফোসাইট উপসেট সনাক্তকরণ

BC-এ উপরের বাম চতুর্ভুজায় CD4+ কোষ এবং ডান নীচের চতুর্ভুজে CD8+ কোষের শতাংশ এবং প্রতিটি ওষুধের গ্রুপ MC গ্রুপের তুলনায় বেশি ছিল। BC গ্রুপের তুলনায়, MC গ্রুপে CD4+ThCD8+ এর অনুপাত উল্লেখযোগ্যভাবে কমে গেছে (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).

3.3.3। সিরামে IL-10, IL-6, IL-2, TNF-Α, এবং IFN-C-এর স্তর নির্ধারণ

চিত্র 8 দেখায় যে BC গ্রুপের তুলনায়, IL-6, TNF- , এবং IFN-c এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.

3.3.4। লাইমাস টিস্যু মাইক্রোস্কোপ পর্যবেক্ষণ পরীক্ষার ফলাফল

চিত্র 9 দেখায় যে বিসি গ্রুপে, প্রচুর পরিমাণে লিম্ফোসাইট উপস্থিত ছিল। লিম্ফোসাইট এবং রেটিকুলোসাইটগুলি ছড়িয়ে ছিটিয়ে গোলাকার বা ডিম্বাকৃতি থাইমোসাইট দিয়ে কেন্দ্রে আলগাভাবে সাজানো ছিল। কোন নেক্রোসিস ছিল না, কোন প্রদাহজনক কোষের অনুপ্রবেশ ছিল না এবং কোন অস্বাভাবিক পরিবর্তন ছিল না।

এমসি গ্রুপটি কেন্দ্রে লিম্ফোসাইট এবং রেটিকুলোসাইটের একটি বিকৃত ব্যবস্থা সহ প্রচুর পরিমাণে লিম্ফয়েড নেক্রোসিস টিস্যু দেখায়। গোলাকার বা ডিম্বাকৃতির থাইমোসাইটগুলি অদৃশ্য হয়ে গেছে, কোষের ব্যাপক অবক্ষয় বা নেক্রোসিস স্পষ্ট ছিল এবং অস্বাভাবিক রোগগত পরিবর্তনের সাথে প্রদাহজনক কোষের অনুপ্রবেশ ছিল।

সিডি গ্রুপে, লিম্ফোসাইটের আকারগত বৈশিষ্ট্য স্বাভাবিক অবস্থায় ফিরে এসেছিল এবং কেন্দ্রীয় লিম্ফোসাইট এবং রেটিকুলোসাইটের বিন্যাস প্রায় স্বাভাবিক ছিল। গোলাকার বা ডিম্বাকৃতির থাইমোসাইটগুলি পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল, তবে অল্প সংখ্যক অবক্ষয়কারী বা নেক্রোটিক লিম্ফোসাইট এবং অনুপ্রবেশকারী প্রদাহজনক কোষগুলি রয়ে গেছে।

ডাব্লুসিডি গ্রুপ এবং পিসি গ্রুপে, লিম্ফোসাইটের আকারগত বৈশিষ্ট্যগুলি আরও ভাল মেরামত করা হয়েছিল। কেন্দ্রের লিম্ফোসাইট এবং রেটিকুলোসাইটগুলি ভালভাবে সারিবদ্ধ ছিল, গোলাকার বা ডিম্বাকৃতি থাইমোসাইটগুলি প্রায় স্বাভাবিক ছিল, তবে অল্প সংখ্যক অনুপ্রবেশকারী এবং অবক্ষয়কারী লিম্ফোসাইট রয়ে গেছে।

3.4। CaM প্রোটিন জিন এক্সপ্রেশন

RQ মান (CaM mRNA -actin mRNA) CaM mRNA এর অভিব্যক্তি পরীক্ষা করার জন্য বিবেচনা করা হয়েছিল। বিসি গ্রুপের আরকিউ ছিল 1। এমসি গ্রুপে হাইপোথ্যালামাসে CaM mRNA এর অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.

4. আলোচনা

চাইনিজ ফার্মাকোপিয়া [২] রেকর্ড করে যে ক্লিনিকে সিডি এবং ডাব্লুসিডি প্রধান ধরনের ডিকোকটিং টুকরা হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে। ভাত ওয়াইন সঙ্গে steamed হচ্ছে পরে,কিডনি-ইয়াং প্রভাব প্রতিরোধী এবং টোনিফাইংউন্নত করা হয়েছিল। UPLC-QqQ-MS-এর মাধ্যমে, আমরা রাইস ওয়াইন স্টিমিং প্রক্রিয়ার সময় রাসায়নিক উপাদানের ভিত্তির পরিমাণগত পরিবর্তন সনাক্ত করেছি। ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি অস্থির ছিল এবং এই গ্লাইকোসাইডগুলির বিষয়বস্তু হ্রাস পেয়েছে, এমনকি সনাক্ত করা যায় না। ফেনিলেথানল গ্লাইকোসাইডের বিষয়বস্তুও পরিবর্তিত হয়েছে, যা ফার্মাকোডাইনামিক্স এবং ক্লিনিকাল প্রভাবে পরিবর্তন আনতে পারে।

PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ক্লাসিক কিডনি-ইয়াং ঘাটতি মডেলটি কর্টিকোস্টেরনের সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দ্বারা প্রতিলিপি করা হয়েছিল [19]। ওভারডোজ কর্টিকোস্টেরন হাইপোথ্যালামাসে সিআরএইচের গোপনীয়তাকে বাধা দিতে পারে। এদিকে, ACTH এর গোপনীয়তাও বাধাগ্রস্ত হয়েছিল। অ্যাড্রিনাল কর্টেক্স হরমোনের মাত্রা হ্রাস পেয়েছে এবং এইভাবে, এইচপিএ অক্ষের কার্যকারিতা হ্রাস পেয়েছে। এইচপিএ অক্ষের হাইপোফাংশন কিডনি-ইয়াং ঘাটতির একটি সাধারণ বৈশিষ্ট্য [20]। তারপর ইঁদুরগুলি "ক্ষয়" ঘটনা দেখায় এবং লক্ষণগুলি ক্লিনিকে কিডনি-ইয়াং ঘাটতির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।

এমসি গ্রুপে, ইঁদুরের সিরামে CRH, ACTH, T, এবং CORT এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (P< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.

Bcl-2 পরিবারের সদস্যদের অনুপাত মডিউল করা হল একটি মূল প্রক্রিয়া যার দ্বারা FasThFasL মৃত্যু রিসেপ্টর পথের মধ্যস্থতা করে, এবং Bcl-2 পরিবার মাইটোকন্ড্রিয়াল পাথওয়েকে নিয়ন্ত্রণ করে [২১]। অ্যাপোপটোসিস-ইনহিবিটিং ফ্যাক্টর Bcl-2 এবং অ্যাপোপটোসিস-ইনডিউকিং ফ্যাক্টর, যেমন Bax, সবই Bcl-2 পরিবারের অন্তর্গত [22]। সেল অ্যাপোপটোসিস অ্যাপোপটোসিস-ইনহিবিটিং ফ্যাক্টর এবং অ্যাপোপটোসিস-ইনডুসিং ফ্যাক্টরগুলির আপেক্ষিক অনুপাত দ্বারা নির্ধারিত হতে পারে [২৩]। মাইটোকন্ড্রিয়াতে অনেক ধরণের অ্যাপোপটোসিসের জন্য কেন্দ্রীয় চেকপয়েন্টের কাজ রয়েছে [24]। বর্তমান সমীক্ষায় দেখা গেছে যে CD-MD এবং WCDs Bax-এর অভিব্যক্তি নির্ণয় করতে পারে এবং Bcl-2 বাড়িয়েকিডনি-ইয়াং ঘাটতি উন্নত. ফাস হল প্রধান ডেথ রিসেপ্টর যা ফাস লিগ্যান্ড (FasL) [25] এর সাথে বন্ধন দ্বারা অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করে। MC গ্রুপে Fas এবং FasL এর অভিব্যক্তি বৃদ্ধি পেয়েছে, যখন এই অভিব্যক্তিটি WCD-MD গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).

ইমিউন ফাংশনের ঘাটতি কিডনি-ইয়াং ঘাটতির একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রকাশ [২৮]। এই গবেষণায়, আমরা দেখতে পেয়েছি যে WCD-MD গ্রুপের প্লীহা এবং থাইমাসের সূচক উল্লেখযোগ্যভাবে পুনরুদ্ধার হয়েছে (P< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).

এইচপিএ অক্ষ হল সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ নিয়ন্ত্রক ব্যবস্থা কারণ এটি অ্যাড্রিনাল কর্টেক্সের সিক্রেটরি ফাংশন বজায় রাখতে গ্লুকোকোর্টিকয়েড নিঃসরণ এবং এন্ডোক্রাইন সিস্টেমকে নিয়ন্ত্রণ করে [৩২]। হাইপোথ্যালামাস টিস্যুতে CaM mRNA এর অত্যধিক এক্সপ্রেশন কিডনি ইয়াং এর ঘাটতির সাথে সম্পর্কিত ছিল। CD এবং WCD ক্যালসিয়াম চ্যানেলগুলিকে ব্লক করতে পারে, হাইপোথ্যালামাসে CaM mRNA প্রকাশকে বাধা দিতে পারে এবং ক্যালসিয়ামের প্রবাহ হ্রাস করতে পারে, এইভাবে Ca2+·CaM জটিল কার্যকলাপ হ্রাস করে।

কিডনি-ইয়াং ঘাটতি গঠন একটি দীর্ঘস্থায়ী রোগের বিকাশ প্রক্রিয়া। কিডনি আর সম্পূর্ণরূপে শারীরবৃত্তীয় ধারণা নয়, এবং এটি নিউরোএন্ডোক্রাইন-অনাক্রম্যতা এবং জিনিটোরিনারি সিস্টেমের জন্য একটি সাধারণ শব্দ। নিউরোএন্ডোক্রাইন-ইমিউন (এনইআই) নেটওয়ার্ক একটি গুরুত্বপূর্ণ সমন্বিত নিয়ন্ত্রক ব্যবস্থা [৩৩]। CD এবং WCD HPAT অক্ষের কাজ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং কিডনি-ইয়াং ঘাটতি পুনরুদ্ধারের উন্নতি করতে পারে। এই ফলাফল কিডনি-ইয়াং ঘাটতির ক্লিনিকাল প্রতিরোধ এবং চিকিত্সার জন্য পরীক্ষামূলক ভিত্তি প্রদান করে।