সিসঞ্চে ডেজার্টিকোলা পলিস্যাকারাইডের কাঠামোগত বৈশিষ্ট্য এবং উচ্চ গ্লুকোজ-প্ররোচিত এইচকে -2 কোষের আঘাতের উপর এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব

1.2.5.8 মাইটোকন্ড্রিয়াল ঝিল্লি সম্ভাবনা সনাক্তকরণ

এইচকে -2 কোষগুলি 6- ভাল প্লেট এবং সংস্কৃতিতে ইনোকুলেটেড করা হয়েছিল। সংশ্লিষ্ট উদ্দীপনার পরে, 6- ভাল প্লেটগুলিতে সংস্কৃতি মাধ্যমটি উচ্চাকাঙ্ক্ষী ছিল এবং "1.2.5.6" এর অধীনে গ্রুপে একটি শক্তিশালী ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ (পিওএস) যুক্ত করা হয়েছিল। পিবিএস দিয়ে একবার ধুয়ে ফেলুন, 1 মিলি সেল সংস্কৃতি মাধ্যম এবং 1 মিলি জেসি -1 স্টেইনিং ওয়ার্কিং সলিউশনটি পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 20 মিনিটের জন্য অন্ধকারে একটি সেল সংস্কৃতি ইনকিউবেটারে স্থাপন করা হয়েছিল। কোষগুলি জেসি -1 স্টেইনিং বাফার (1 ×) দিয়ে দু'বার ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল এবং একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে চিত্রগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল।

 

 

 

 

সিসঞ্চে সুবিধা

 

1.2.5.9 Hoechst33258 সেল অ্যাপোপটোসিস সনাক্তকরণের জন্য পদ্ধতি

সেল স্লাইডগুলি 6- ভাল প্লেটে স্থাপন করা হয়েছিল, এবং লোগারিদমিক বৃদ্ধির পর্যায়ে এইচকে -2 কোষগুলি 1 × 105 কোষ/ভাল একটি কোষের ঘনত্বের ভাল প্লেটগুলিতে 6- ভাল প্লেটগুলিতে বীজযুক্ত ছিল। সংশ্লিষ্ট ওষুধের হস্তক্ষেপের পরে, Hoechst33258 স্টেনিং কিটটি দাগের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। সেল অ্যাপোপটোসিস সনাক্ত করা হয়েছিল এবং ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে চিত্রগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল।

 

1.2.5.10 ওয়েস্টার্ন ব্লটিং সনাক্ত করতে

টিএলআর 4/এনএফ- κ বি সিগন্যালিং পথের সাথে সম্পর্কিত প্রোটিনগুলির অভিব্যক্তি "1.2.5.6" এর অধীন পদ্ধতি অনুসারে কোষগুলিকে গ্রুপিং এবং চিকিত্সা করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। এর পরে, কোষগুলিতে মোট প্রোটিন প্রোটিন নিষ্কাশন কিটের নির্দেশাবলী অনুসারে বের করা হয়েছিল। প্রোটিন কোয়ান্টিফিকেশন বাইকিনচোনিনিক অ্যাসিড (বিসিএ) প্রোটিন কোয়ান্টিফিকেশন পদ্ধতি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল এবং প্রোটিনটি একটি -20} ডিগ্রি রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করা হয়েছিল এবং সংরক্ষণ করা হয়েছিল।
10% সোডিয়াম ডোডিসিল সালফেট পলিয়াক্রাইমাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস (এসডিএস-পৃষ্ঠা), পলিভিনাইলিডিন ফ্লোরাইড (পিভিডিএফ) ঝিল্লি স্থানান্তর, ঝিল্লিটিকে ট্রিসযুক্ত টিউন-এর মধ্যে tw -20}}} বাফারে রাখুন
কোষগুলি একটি ট্রিস বাফার্ড স্যালাইনে টিউন -20 (টিবিএসটি) চেম্বারের সাথে স্যালাইনে সজ্জিত করা হয়েছিল এবং ঘরের তাপমাত্রায় অবরুদ্ধ ছিল। টিএলআর 4, এনএফ- κ বি পি 65, পি-এনএফ- κ বি পি 65, এবং -অ্যাক্টিন থেকে প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি ব্যবহৃত হতরেনাল টিস্যু সনাক্ত করুন(অ্যান্টিবডিগুলি টিবিএসটি দ্রবণে 1: 2000 এর ভলিউম অনুপাতের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল) রাতারাতি 4 ডিগ্রীতে। টিবিএসটি
ঝিল্লিটি গৌণ অ্যান্টিবডি (অ্যান্টিবডি এবং টিবিএসটি দ্রবণটি 1: 2000 এর ভলিউম অনুপাতের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল) দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 1 ঘন্টা জন্য ঘরের তাপমাত্রায় সজ্জিত করা হয়েছিল। টিবিএসটি দিয়ে 3 বার ঝিল্লি ধুয়ে দেওয়ার পরে, সনাক্তকরণের জন্য ইসিএল লুমিনসেন্ট রিএজেন্ট যুক্ত করা হয়েছিল এবং জেল ইমেজিং দ্বারা প্রোটিনের এক্সপ্রেশন সনাক্ত করা হয়েছিল। চিত্র জে সফ্টওয়্যারটি অভ্যন্তরীণ রেফারেন্স হিসাবে -অ্যাকটিন সহ প্রোটিন গ্রেস্কেল মান বিশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

1.3 ডেটা প্রসেসিং

এসপিএসএস 23। 0 এবং গ্রাফপ্যাড প্রিজম 6.01 সফ্টওয়্যার ডেটা বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। শাপিরো-উইলক পরীক্ষাটি নমুনা ডেটার স্বাভাবিকতা পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল, এবং ব্রাউন-ফোর্সিথ বা বার্টলেটের পরীক্ষাটি নমুনা ডেটার বৈচিত্র্যের একজাতীয়তা পরীক্ষা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। সাধারণ বিতরণ এবং বৈকল্পিকতার সাথে পরিমাপের ডেটা গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। (x ± গুলি) বর্ণনা নির্দেশ করে, একমুখী আনোভা পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল এবং পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ হলে ডান্নেটের পদ্ধতিটি জোড়ের তুলনার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল।
অসম বৈকল্পিকগুলির পোস্ট হক জোড়াযুক্ত তুলনাগুলির জন্য, ডাননেটের টি 3 পদ্ধতিটি পি <0।

2 ফলাফল এবং বিশ্লেষণ

২.১ সিডিপিগুলির মোট চিনি, ইউরোনিক অ্যাসিড এবং প্রোটিন সামগ্রী নির্ধারণ

পলিস্যাকারাইড সামগ্রীর লিনিয়ার রিগ্রেশন সমীকরণটি ছিল: y=5। 7628x - 0। 0004, আর=0। 999। পরীক্ষায় দেখা গেছে যে 7 থেকে 70 µg/এমএল এর মধ্যে স্ট্যান্ডার্ড গ্লুকোজ ঘনত্ব (এক্স) এবং শোষণ মান (y) এর মধ্যে একটি ভাল লিনিয়ার সম্পর্ক ছিল। নমুনায় পলিস্যাকারাইড সামগ্রীর গণনা করা শতাংশ হ'ল: 81.02%।
স্ট্যান্ডার্ড ইউরোনিক অ্যাসিডের লিনিয়ার রিগ্রেশন সমীকরণটি হ'ল: y=1। 1571x + 0। 0015, আর=0। 9968। পরীক্ষায় দেখা গেছে যে 20 থেকে 100 µg/এমএল এর মধ্যে স্ট্যান্ডার্ড ইউরোনিক অ্যাসিড ঘনত্ব (এক্স) এবং শোষণের মান (y) এর মধ্যে একটি ভাল লিনিয়ার সম্পর্ক ছিল। নমুনায় ইউরোনিক অ্যাসিডের সামগ্রীটি হ'ল: 4.43%।
স্ট্যান্ডার্ড প্রোটিন লিনিয়ার রিগ্রেশন সমীকরণটি হ'ল: y=1। 2671x + 0। 2145, আর=0। 9969। পরীক্ষায় দেখা গেছে যে 20 এবং 1 00 µg/এমএল এর মধ্যে, স্ট্যান্ডার্ড প্রোটিন ঘনত্ব (এক্স) এবং শোষণের মান (ওয়াই) এর মধ্যে একটি ভাল লিনিয়ার সম্পর্ক ছিল। নমুনায় প্রোটিনের সামগ্রীটি হ'ল: 4.00%।

 

২.২ সিডিপিগুলির আণবিক ওজন বিতরণ

সিডিপিগুলির আণবিক ওজন উচ্চ পারফরম্যান্স জেল পারমেশন ক্রোমাটোগ্রাফি টেন্ডেম কলাম সনাক্তকরণ দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। আরটি এএস (এক্স) এবং এলজিএমপি এএস (ওয়াই) এর সাথে, এলজিএমপি-আরটি ক্যালিব্রেশন বক্ররেখার সমীকরণটি গণনা করা হয়েছিল: y=-0। আরটি আইএস (এক্স), এলজিএমডাব্লু আইএস (ওয়াই), এলজিএমডাব্লু-আরটি ক্যালিব্রেশন কার্ভ সমীকরণটি হ'ল: ওয়াই=-0। 1973x + 11। 738, আর ² {12}}। 9956; আরটি আইএস (এক্স), এলজিএমএন আইএস (ওয়াই), এলজিএমএন-আরটি ক্যালিব্রেশন বক্ররেখা সমীকরণটি: y=-0। 1964x + 11। 7, r² {19}}। 9955; স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার উপর ভিত্তি করে, প্রতিটি নমুনার আণবিক ওজন গণনা করার জন্য গণনা সূত্রটি প্রাপ্ত হয়। নমুনার আণবিক ওজন বর্ণালী নিম্নরূপ, এবং গণনার ফলাফলগুলি সারণি 2 এ দেখানো হয়েছে। ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে সিডিপির একাধিক এলিউশন শিখর ছিল এবং পলিস্যাকারাইডগুলির আণবিক ওজন মূলত 3 এবং 8 কেডিএর মধ্যে বিতরণ করা হয়েছিল, যা একটি ভিন্নজাতীয় ছোট আণবিক ওজন হেটেরোপোলিস্যাকচারাইড ছিল। চিত্র 1 এ দেখানো হয়েছে।

 

 

2.3 সিডিপিএস মনোস্যাকচারাইড রচনা

সিডিপিগুলি আয়ন ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, এবং ক্রোমাটোগ্রাম চিত্র 2 এ দেখানো হয়েছে। ফলাফলগুলি দেখিয়েছে যে 16 মনোস্যাকচারাইড স্ট্যান্ডার্ডের ধরে রাখার সময়ের সাথে তুলনা করে, সিডিপিগুলিতে 5 মনোস্যাকারাইডগুলি সনাক্ত করা হয়েছিল। মনোস্যাকারাইড স্ট্যান্ডার্ডগুলির সাথে বর্ণালীটির তুলনা করে, সিডিপিগুলি মূলত গ্লুকোজ, গ্যালাকটোজ, রামনোজ, মান্নোজ এবং সুক্রোজ দ্বারা গঠিত ছিল। , আরবিনোজ। মোলার অনুপাতটি হ'ল 0। 734 0 5: 0। মোলার অনুপাত থেকে, এটি দেখা যায় যে সিডিপিগুলি মূলত গ্লুকোজ, গ্যালাকটোজ এবং রামনোজ দ্বারা গঠিত। এর মধ্যে গ্লুকোজ 73.405%, গ্যালাকটোজ 5.381%এবং রামনোজ 5.02%এর জন্য অ্যাকাউন্টে রয়েছে।

 

দ্রষ্টব্য: ম্যান.মানোজ, গ্লাক এন। আরবিনোজ, ফুক.ফুকোজ।

2.4 সিডিপিএস ফুরিয়ার ইনফ্রারেড বিশ্লেষণ

3246 সেমি {{1} ofারের নিকটে শীর্ষটি হাইড্রোক্সিল গ্রুপের ওএইচ প্রসারিত কম্পনের কারণে ঘটে, 2900 সেমি -1 এর কাছাকাছি শোষণ শিখরটি -সিএইচ 3 এর সিএইচ স্ট্রেচিং কম্পন শিখর, এবং 1594 সেমি -1 এর শোষণ শিখরটি হ'ল {{{{}} 1374.31 সেমি -1: এই শোষণ শিখরটি সিএইচ বন্ডগুলির বিকৃতি কম্পনের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, বিশেষত মিথাইল (-সিএইচ 3) বা মিথাইলিন (-এইচ 2-) পলিস্যাকারাইডগুলির গ্রুপগুলিতে। 1018.38 সেমি -1 এ শোষণ শিখরটি সিও বন্ডের প্রসারিত কম্পনের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে, যা সাধারণত পলিস্যাকারাইডগুলির ইথার বন্ড বা এসটার বন্ডগুলিতে পাওয়া যায়। 1200-1000 সেমি -1 এর পরিসীমাতে তিনটি দুর্বল শোষণ শৃঙ্গগুলি সিডিপিগুলিতে পাইরানোজের উপস্থিতি নির্দেশ করে। 870 এবং 930 সেমি -1 এ শোষণটি শিখরগুলি নির্দেশ করে যে -টাইপ গ্লাইকোসিডিক বন্ডগুলি সিডিপিগুলিতে থাকতে পারে। চিত্র 3 দেখুন।

 

2.5 সাধারণ এইচকে -2 কোষগুলিতে সিডিপিগুলির বিষাক্ত প্রভাব

কন এর সাথে তুলনা করে, প্রশাসনের 24 ঘন্টা পরে, সিডিপিএস ঘনত্ব 1000 ug/এমএল পৌঁছানোর পরে কোষের কার্যকারিতা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেতে শুরু করে (পি<0.05); at 48 h after administration, the cell viability decreased when the CDPs concentration reached 800 μg/mL and did not exceed 80 %; after 1000 µg/mL, the cell viability began to decline significantly (P<0.05); this may be related to the imbalance of cell osmotic pressure and cell membrane damage caused by the high concentration of polysaccharides. There was no significant difference in cell viability when compared with the concentrations of 25, 50, 100, 200, and 400 µg/mL, so the concentrations of CDPs of 100, 200, and 400 µg/mL when cell viability did not decrease significantly were selected as the drug intervention concentrations. See Table 3.

 

3 আলোচনা এবং উপসংহার

পলিস্যাকারাইডস10 টিরও বেশি মনোস্যাকচারাইড দ্বারা গঠিত উচ্চ আণবিক ওজন পলিমার। জানা গেছে যে পলিস্যাকারাইডস রয়েছেইমিউনোমোডুলেটরি, অ্যান্টিঅক্সিড্যান্ট, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি এবং হাইপোগ্লাইসেমিক প্রভাব[15]। সিসঞ্চে ডেজার্টিকোলার অন্যতম প্রধান ফার্মাকোলজিক্যালি সক্রিয় পদার্থ হিসাবে, সিডিপিগুলির উল্লেখযোগ্য medic ষধি মান রয়েছে। এই গবেষণাটি সিডিপিগুলির কাঠামোর প্রাথমিকভাবে চিহ্নিত করেছে এবং দেখা গেছে যে তারা উচ্চ চিনির পরিবেশ দ্বারা প্ররোচিত এইচকে -2} কোষের ক্ষতির উন্নতি করতে পারে।

 

পলিস্যাকারাইডগুলির জটিল কাঠামোটি তাদের জৈবিক ক্রিয়াকলাপের সাথে নিবিড়ভাবে সম্পর্কিত, যার মধ্যে মনোস্যাকচারাইডগুলির ধরণ এবং অনুপাত, পলিস্যাকারাইডগুলির আপেক্ষিক আণবিক ভর এবং গ্লাইকোসিডিক বন্ডগুলির ধরণগুলি মূল প্রভাবক কারণ [16]। মাঝারি আপেক্ষিক আণবিক ভর পলিস্যাকারাইডগুলিকে আরও সক্রিয় সাইট দেয় এবং আরও শক্তিশালী জৈবিক ক্রিয়াকলাপ প্রদর্শন করতে পারে।
যাইহোক, বৃহত আণবিক ওজন ট্রান্সমেম্ব্রেন প্রতিরোধের বৃদ্ধি করবে, পলিস্যাকারাইড শোষণকে বাধা দেবে এবং ক্রিয়াকলাপকে প্রভাবিত করবে। বিপরীতে, ছোট আণবিক ওজন পলিস্যাকারাইডগুলি কার্যকর সক্রিয় কাঠামো তৈরি করতে সক্ষম হতে পারে না, যার ফলে ক্রিয়াকলাপ হ্রাস পায় [17]। পলিস্যাকারাইডগুলির জৈবিক ক্রিয়াকলাপটি অন্বেষণ করার সময়, মনোস্যাকারাইড রচনা, আপেক্ষিক আণবিক ভর এবং গ্লাইকোসিডিক বন্ডের ধরণ [18] এর ব্যাপকভাবে বিবেচনা করা প্রয়োজন। এই সমীক্ষায়, আয়ন ক্রোমাটোগ্রাফি নির্ধারণ করেছিল যে সিডিপিগুলি মূলত গ্লুকোজ, গ্যালাকটোজ এবং রামনোজ সমন্বয়ে গঠিত, যা জু এট আল -এর প্রতিবেদনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। [19]। উচ্চ কার্যকারিতা তরল জেল ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা পরিমাপ করা সিডিপিগুলির ওজন-গড় আণবিক ওজন যথাক্রমে 3444, 4198 এবং 8031 ​​কেডিএ ছিল। ইয়াং এট আল দ্বারা পরিমাপ করা চারটি সিসঞ্চে ধরণের medic ষধি উপকরণ থেকে তিনটি সিসঞ্চে পলিস্যাকারাইডগুলির আণবিক ওজন। [20] একই রকম ছিল। সিডিপিতে -টাইপ গ্লাইকোসিডিক বন্ড থাকতে পারে এবং এতে -গ্লুকোজ বা -ম্যাননোজ থাকতে পারে। -গ্লুকোজ বা -ম্যাননোজ সমন্বিত পলিস্যাকারাইডগুলি আরও সহজেই টোলের মতো রিসেপ্টর 4 (টিএলআর 4) বা টিএলআর 2 [21] দ্বারা স্বীকৃত হয়।
ডিএন হ'ল ডায়াবেটিসের অন্যতম গুরুতর মাইক্রোভাস্কুলার জটিলতা এবং এর প্যাথোজেনেসিস অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, মাইটোকন্ড্রিয়াল কর্মহীনতা এবং সেল অ্যাপোপটোসিস [22] এর সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত। এই গবেষণাটি টিএলআর 4/এনএফ- κ বি সিগন্যালিং পাথওয়ে এবং এর আণবিক প্রক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করে উচ্চ গ্লুকোজ-প্ররোচিত এইচকে -2 কোষগুলিতে সিডিপিগুলির প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব অনুসন্ধান করেছে।

উচ্চ গ্লুকোজ অবস্থার অধীনে, এইচকে -2 কোষগুলি উল্লেখযোগ্য অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রদর্শন করে [23]। গবেষণায় দেখা গেছে যে উচ্চ চিনির মাত্রা আন্তঃকোষীয় আরওএসের উত্পাদন উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করে। এই অত্যধিক পরিমাণে আরওএস সরাসরি কোষের ঝিল্লি লিপিডগুলিকে ক্ষতি করতে পারে, যার ফলে লিপিড পারক্সিডেশন পণ্য এমডিএ [24] এর সামগ্রী বৃদ্ধি পেতে পারে। একই সময়ে, এসওডি এবং জিএসএইচ-পিএক্স, গুরুত্বপূর্ণ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাগুলির ক্রিয়াকলাপগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল, এটি ইঙ্গিত করে যে কোষগুলির অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা মারাত্মকভাবে ক্ষতিগ্রস্থ হয়েছিল [25]। অক্সিডেশন-অ্যান্টিঅক্সিডেশন সিস্টেমে এই ভারসাম্যহীনতা টিএলআর 4 [26] এর অভিব্যক্তি এবং সক্রিয়করণকে আরও প্রচার করে। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে অতিরিক্ত আরওএস টিএলআর 4 দ্বারা বিপদ-সম্পর্কিত আণবিক নিদর্শন (ড্যাম্পস) হিসাবে স্বীকৃত হতে পারে, এটি একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া লুপ গঠন করে [২ 27]। এই গবেষণায়, সিডিপিএস প্রিট্রেটমেন্ট উল্লেখযোগ্যভাবে আরওএসের মাত্রা হ্রাস করেছে, এসওডি এবং জিএসএইচ-পিএক্স ক্রিয়াকলাপ বৃদ্ধি করেছে এবং এমডিএ সামগ্রী হ্রাস করেছে। এই বিস্তৃত অ্যান্টিঅক্সিড্যান্ট প্রভাবটি পরামর্শ দেয় যে সিডিপিগুলি একাধিক লক্ষ্যগুলির মাধ্যমে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিক্রিয়াগুলি নিয়ন্ত্রণ করতে পারে।
টিএলআর 4/এনএফ- κ বি সিগন্যালিং পাথওয়েতে, সক্রিয় টিএলআর 4 ডাউন স্ট্রিম অ্যাডাপ্টার প্রোটিনগুলি নিয়োগের মাধ্যমে আইকেকে কমপ্লেক্সের সক্রিয়করণকে উত্সাহ দেয়, যার ফলে ফসফোরিলেশন এবং আইইবি [২৮] এর অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে। বর্তমান সমীক্ষায় দেখা গেছে যে উচ্চ গ্লুকোজ আইবিবি এর ফসফরিলেশন স্তরকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে, যার ফলে সাইটোপ্লাজম থেকে নিউক্লিয়াসে এনএফ- κ বি পি 65 এর ট্রান্সলোকেশন ঘটে। গবেষণায় দেখা গেছে যে পি 65 এর পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশন কেবল অক্সিডেটিভ স্ট্রেসকে বাড়িয়ে তোলে না তবে মাইটোকন্ড্রিয়াল ফাংশনকেও প্রভাবিত করে [২৯]।
এটি জেসি -1 দ্বারা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল যে উচ্চ গ্লুকোজ চিকিত্সা মাইটোকন্ড্রিয়াল ঝিল্লি সম্ভাবনার উল্লেখযোগ্য হ্রাস ঘটায়, লাল প্রতিপ্রভ থেকে সবুজ প্রতিপ্রভাতে স্থানান্তরিত করে, এটি ইঙ্গিত করে যে মাইটোকন্ড্রিয়ার অভ্যন্তরীণ এবং বাইরের ঝিল্লির মধ্যে প্রোটন গ্রেডিয়েন্টটি ব্যাহত হয়েছিল। মাইটোকন্ড্রিয়াল কর্মহীনতা আরও আরওএসের উত্পাদনকে আরও বাড়িয়ে তোলে, একটি দুষ্টচক্র তৈরি করে [30]। সিডিপিএস প্রিট্রেটমেন্ট মাইটোকন্ড্রিয়াল ঝিল্লি সম্ভাবনার স্থায়িত্ব বজায় রাখতে পারে এবং টিএলআর 4 এর অভিব্যক্তি এবং এনএফ- κ বি সক্রিয়করণকে বাধা দিয়ে এই প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব অর্জন করা যেতে পারে।
মাইটোকন্ড্রিয়াল ডিসঅংশানশন এবং অবিরাম অক্সিডেটিভ স্ট্রেস শেষ পর্যন্ত কোষের অ্যাপোপটোসিস [31] বাড়ে। হোচস্ট স্টেইনিং থেকে জানা গেছে যে উচ্চ গ্লুকোজ চিকিত্সা গোষ্ঠীর কোষ নিউক্লিয়াস স্পষ্টভাবে সাধারণ অ্যাপোপোটিক মরফোলজিকাল পরিবর্তনগুলি যেমন ঘনীভবন, ঘনীভবন এবং খণ্ডন [32] দেখিয়েছিল। এই পরিবর্তনগুলি মাইটোকন্ড্রিয়াল-মধ্যস্থতাযুক্ত আন্তঃসংশ্লিষ্ট অ্যাপোপটোসিস পথের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত: মাইটোকন্ড্রিয়াল ঝিল্লি সম্ভাবনার ক্ষতি সাইটোক্রোম সি প্রকাশের দিকে পরিচালিত করে, ক্যাসপেস ক্যাসকেডের সক্রিয়করণ এবং শেষ পর্যন্ত সেল অ্যাপোপটোসিস [33]। সিডিপিএস প্রিট্রেটমেন্ট গ্রুপে কোষগুলির পারমাণবিক রূপচর্চা মূলত স্বাভাবিক ছিল এবং দাগটি অভিন্ন ছিল, যা সিডিপিগুলি মাইটোকন্ড্রিয়াল ফাংশন বজায় রেখে এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেসকে বাধা দিয়ে সেল অ্যাপোপটোসিসকে প্রতিরোধ করেছিল।
সংক্ষেপে, এই অধ্যয়নটি পদ্ধতিগতভাবে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস সূচকগুলি (আরওএস, এমডিএ, এসওডি, জিএসএইচ-পিএক্স), মাইটোকন্ড্রিয়াল ফাংশন (জেসি -1) এবং সেল অ্যাপোপটোসিস (Hoechst) সনাক্ত করেছে, টিএলআর 4/এনএফ- κ বি সিগন্যালিং পাথওয়ে কী অণুগুলির সাথে মিলিত হয়েছে যা সিডিপিএসের সাথে মিলিত হয়েছে যা সিগন্যালিং প্যাথওয়ে কী অণুগুলিকে উন্নত করে তোলে:
প্রথমত, কোষগুলির অ্যান্টিঅক্সিড্যান্ট ক্ষমতা উন্নত করে, আরওএসের স্তর হ্রাস করে এবং টিএলআর 4 এর সক্রিয়করণ হ্রাস করে; দ্বিতীয়ত, টিএলআর 4 এর অভিব্যক্তি এবং আইবিবি এর ফসফোরিলেশনকে বাধা দিয়ে, এনএফ- κ বি এর পারমাণবিক ট্রান্সলোকেশনকে অবরুদ্ধ করে; অবশেষে, মাইটোকন্ড্রিয়াল ফাংশন উন্নত করে সেল অ্যাপোপটোসিসকে বাধা দেয়। মৃত্যু, এভাবে ডিএন এর বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষামূলক ভূমিকা পালন করে। এই মাল্টি-টার্গেট সিনারজিস্টিক প্রভাব সিডিপিগুলিকে ডিএন এর চিকিত্সায় ভাল অ্যাপ্লিকেশন সম্ভাবনা দেখায়। পরবর্তী গবেষণায়, পলিস্যাকারাইড কাঠামোটি আরও এক্স-রে বিচ্ছুরণ, পারমাণবিক চৌম্বকীয় অনুরণন বর্ণালী এবং গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি-ভর স্পেকট্রোম্যাট্রি দ্বারা নির্ধারিত হবে। এছাড়াও, গড় আণবিক ওজনের ফলাফলগুলি দেখায় যে সিডিপিগুলি ভিন্ন ভিন্ন পলিস্যাকারাইডস। এরপরে, আমরা সমজাতীয় পলিস্যাকারাইডগুলি পৃথক এবং শুদ্ধ করব, পলিস্যাকারাইড কাঠামো এবং জৈবিক ক্রিয়াকলাপ সনাক্ত করব এবং কাঠামো-ক্রিয়াকলাপের সম্পর্কটি স্পষ্ট করব।