আর. ভেসিকারিয়াস এল. সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে নেফ্রোপ্রোটেক্টিভ প্রভাব প্রয়োগ করে

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

মোঃ মাহমুদুল হাসান¹, বেশিরভাগ। সায়লা তাসমিন², আহমেদ এম. এল-শেহাভি³, মোনা এম এলসেহি⁴, মোঃ আবু রেজা¹এবং আরিফুল হক^2*

বিমূর্ত

পটভূমি:সিসপ্ল্যাটিন একটি অসামান্য অ্যান্টিক্যান্সার ড্রাগ, তবে গুরুতর নেফ্রোটক্সিসিটির কারণে এর ব্যবহার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। R. vicarious L. হল একটি শাক যা অ্যান্টি-এনজিওজেনিক, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি, অ্যান্টি-প্রলিফারেটিভ, হেপাটোপ্রোটেকটিভ এবং নেফ্রোপ্রোটেক্টিভ সম্ভাবনার সাথে স্পষ্ট। অতএব, এই গবেষণাটি সম্ভাব্য নেফ্রোপ্রোটেক্টিভ প্রভাবের জন্য এর মিথানল নির্যাস (RVE) পরিদর্শন করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছিল।

পদ্ধতি:প্রাথমিকভাবে, ভিট্রোতে, RVE-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ 2, 2-ডিফেনাইল-1-পিক্রিলহাইড্রাজিল (DPPH) ফ্রি র‌্যাডিক্যাল স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাপটিটিউডের ভিত্তিতে নিশ্চিত করা হয়েছিল। তারপরে, সুইস অ্যালবিনো পুরুষ ইঁদুরকে নেফ্রোটক্সিসিটি প্ররোচিত করার জন্য ধারাবাহিকভাবে 5 দিন ধরে সিসপ্ল্যাটিন (2.5 মিলিগ্রাম/কেজি) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। পরের 5 দিনের জন্য RVE (25, 50, এবং 100 mg/kg) intraperitoneally (ip) দিয়ে প্রাণীদের চিকিত্সা করে নেফ্রোটক্সিসিটি থেকে পুনরুদ্ধারের পরীক্ষা করা হয়েছিল। চিকিৎসা শেষে ইঁদুর বলি এবং কিডনি সংগ্রহ করা হয়। ম্যালন্ডিয়ালডিহাইড (MDA) স্তরের মূল্যায়নের জন্য এর কিছু অংশ সোডিয়াম ফসফেট বাফারে একজাত করা হয়েছিল, আরেকটি অংশ জিন (NQO1, p53, এবং Bcl-2) অভিব্যক্তি মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। তাছাড়া, হাইড্রোজেন পারক্সাইড (H2O2) RVE-এর নিরপেক্ষ করার ক্ষমতা HK-2 কোষে ভিট্রোতে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। অবশেষে, RVE-তে বায়োঅ্যাকটিভ ফাইটোকেমিক্যালগুলি গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি-মাস স্পেকট্রোমেট্রি (GC-MS) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

ফলাফল:RVE 37.39 ± 1.89 ug/mL IC50 মান সহ ডোজ-নির্ভর ফ্যাশনে ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ দেখায়।

RVE এর সাথে চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে (p < {{0}}৷{7}}5)="" কিডনি="" টিস্যুতে="" mda="" সামগ্রী="" হ্রাস="" করেছে।="" এছাড়াও,="" nqo,="" p53,="" এবং="" bcl-2="" জিনের="" অভিব্যক্তি="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" (p=""><0.05) rve-এর="" প্রশাসনের="" কারণে="" ডোজ-নির্ভর="" পদ্ধতিতে="" প্রশমিত="" হয়েছিল।="" rve="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" (p=""><0.05) hk-2="" কোষে="" h2o2="" স্তরকে="" প্রায়="" স্বাভাবিক="" অবস্থায়="" ফিরিয়ে="" দিয়েছে।="" gc-ms="" থেকে,="" তিনটি="" পরিচিত="" অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট="" "4h-pyran-4-one,="" 2,="" 3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-"="" সহ="" দশটি="" যৌগ="" ,="" "hexadecanoic="" acid",="" এবং="" "squalene"="" সনাক্ত="" করা="" হয়েছে।="" নির্যাসটি="" একটি="" অ্যালকালয়েড="" "13-ডোকোসেনামাইড"="" সমৃদ্ধ="">

উপসংহার:সামগ্রিকভাবে, আরভিই সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত কিডনির ক্ষতির বিরুদ্ধে একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব রাখে।

কীওয়ার্ড:সিসপ্ল্যাটিন, আর. ভিকারিয়াস, ইঁদুর, কিডনি, HK-2 কোষ, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, NQO1 জিন

Cistanche deserticola কিডনি রোগ প্রতিরোধ করে, নমুনা পেতে এখানে ক্লিক করুন

ভূমিকা

অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হল প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) এবং নিয়মিত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থা [1] গঠনের মধ্যে অসমতার ফলাফল। নিয়মিত জৈব রাসায়নিক বিক্রিয়া, প্রতিকূল পরিবেশে ঘন ঘন এক্সপোজার, এবং জেনোবায়োটিকের উচ্চতর গ্রহণের ফলে ROS উৎপাদন হয় [1]। ROS ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর, প্রোটিন টাইরোসিন ফসফেটেস এবং প্রোটিন কাইনেস সহ রেডক্স-সংবেদনশীল সিগন্যালিং অণুর সিস্টাইন অবশিষ্টাংশের সাথে যোগাযোগ করে; ফলস্বরূপ, এই অবশিষ্টাংশগুলিতে থিওল গোষ্ঠীর অক্সিডেশন লক্ষ্যযুক্ত প্রোটিনের পরিবর্তন, জৈবিক ক্রিয়া, সংকেত ক্ষমতা, অনাক্রম্যতা, এবং সম্পূরক কোষের জীবিত/মৃত দৃষ্টান্তগুলিকে নির্দেশ করে [2]। অক্সিজেন-ধারণকারী রাসায়নিক প্রজাতির প্রতিক্রিয়াশীল বৈশিষ্ট্যগুলিকে ROS বলা হয় যার মধ্যে যথাক্রমে সুপার অক্সাইড এবং H2O2 এর মতো মুক্ত র্যাডিকাল এবং অ-র্যাডিকাল অণু রয়েছে [3]। ROS দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস ক্যান্সার সহ অসংখ্য রোগের ইটিওলজির সাথে যুক্ত। অ্যাকিউট মাইলয়েড লিউকেমিয়া (এএমএল) হল অস্থি মজ্জার মধ্যে রক্তের কোষের একটি ক্যান্সারজনিত বৃদ্ধি। AML এর অন্তর্নিহিত সেলুলার এবং আণবিক ঘটনাগুলির মধ্যে রয়েছে ডিএনএ ক্ষতি, ক্লোনাল প্রচার, কোষের মৃত্যু বৃদ্ধি এবং আরও জেনেটিক অস্থিরতা, যা ROS-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের ফলাফল [4]। মানব শারীরবিদ্যাকে অসংখ্য প্রক্রিয়ার সাথে উপহার দেওয়া হয়েছে যা অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে সুরক্ষা প্রদানের জন্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট তৈরি করতে পারে যা কোষকে বিষাক্ত প্রভাব থেকে রক্ষা করে এবং রোগ প্রতিরোধে কাজ করে [৫]। যাইহোক, কোষগুলি অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিরোধ করতে এবং প্রয়োজনীয় ROS [6] সংরক্ষণের জন্য অন্তঃসত্ত্বা প্রক্রিয়া বিকাশ করে।

NAD(P)H: কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস 1 (NQO1) হল একটি ফ্ল্যাভোএনজাইম [7] যা দুই বা চার-ইলেক্ট্রন রিডাকশনকে অনুঘটক করতে পারে এবং কুইনাইনগুলিকে ডিটক্সিফাই করার জন্য এই বৈশিষ্ট্যটি ব্যবহার করে [8]। এটি রেডক্স সাইক্লিংকে একপাশে রেখে এবং ফ্রি র‌্যাডিক্যালের উৎপাদন কমিয়ে অক্সিডেটিভ ক্ষতি থেকে কোষকে রক্ষা করতে পারে [৮]। জেনোবায়োটিক ডিটক্সিফিকেশন ছাড়াও, NQO1 সুপারঅক্সাইড নিরপেক্ষকরণ, p53 প্রোটিসোমাল অবক্ষয়ের মডুলেশন [9], Bcl-2 বাধা [10], এবং কোষের আঘাতের [11] বর্ধিত সংবেদনশীলতার সাথে জড়িত।

সিসপ্ল্যাটিন হল প্রথম ফুড অ্যান্ড ড্রাগ অ্যাডমিনিস্ট্রেশন (এফডিএ)-অনুমোদিত প্ল্যাটিনাম-ভিত্তিক অ্যান্টিক্যান্সার ড্রাগ [১২]। সিসপ্ল্যাটিন অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং টিউমার দমনকারী জিন p53 [12] এর অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন প্ররোচিত করে অ্যাপোপটোসিস প্রয়োগ করে। নেফ্রোটক্সিসিটি, হেপাটো-টক্সিসিটি, গ্যাস্ট্রোটক্সিসিটি, ওটোটক্সিসিটি, মাইলোসপ্রেশন এবং নিউরোটক্সিসিটি সহ বেশ কয়েকটি প্রতিকূল প্রভাব সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের ফলাফল [12]। এই পার্শ্বপ্রতিক্রিয়াগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে সিসপ্ল্যাটিনের ব্যবহার হ্রাস করেছে যদিও এর অসামান্য অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপ রয়েছে। সিসপ্ল্যাটিন অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্ররোচিত করতে এবং ইঁদুরের কিডনিতে NQO1 জিনকে দমন করতে সুপরিচিত [13]। অতএব, অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলির কার্যকর প্রাকৃতিক উত্সগুলির জন্য অনুসন্ধান এবং বৈধতা সচেতনতার একটি ক্ষেত্র হয়ে উঠছে। উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত খাদ্যতালিকাগত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট যেমন ফ্ল্যাভোনয়েডস, ক্যারোটিনয়েডস এবং ফেনোলিক যৌগগুলি গ্রহণ করলে কার্ডিওভাসকুলার রোগ, ছানি এবং ক্যান্সারের বিরুদ্ধে সুরক্ষা হতে পারে [১৪]।

R. vicarious (Polygonaceae) বাংলায় "Takpalong/ Chukapalong/ Amlabetom" নামে পরিচিত [15]। এটি এশিয়া, অস্ট্রেলিয়া এবং উত্তর আফ্রিকার মরুভূমি এবং আধা-মরুভূমিতে জন্মায় [16]। এটি বাংলাদেশের একটি সামান্য অধ্যয়ন করা বিপন্ন উদ্ভিদ। বাংলাদেশে, লোকেরা লবণ, বিভিন্ন মশলা এবং তেল দিয়ে রান্না করার পরে পুরো উদ্ভিদটিকে সবজি হিসাবে গ্রহণ করে। কখনও কখনও, লোকেরা লেটুসের বিকল্প হিসাবে মিশ্র সালাদে শুধুমাত্র তাজা পাতা ব্যবহার করে। কাঁচা পাতা সামান্য টক, তবে রান্নার পরে এটি অত্যন্ত টক হয়ে যায়। তাছাড়া রান্নার সময় মাছের খাবারে অল্প সংখ্যক পাতা মেশানো হয় যাতে হালকা অম্লীয় স্বাদ থাকে।

এই উদ্ভিদটি বিশ্বব্যাপী একটি উদ্ভিজ্জ এবং ঔষধি হিসাবে ব্যবহৃত হচ্ছে [17]। পাতা এবং বীজ যথাক্রমে সাপ এবং বিচ্ছুর বিষের প্রতিষেধক হিসাবে ব্যবহৃত হয় [১৭]। লোক চিকিৎসায়, R. vicarious দীর্ঘকাল ধরে হেপাটিক রোগ, বদ হজম, কোষ্ঠকাঠিন্য, পাইলস, বমি, পেট ফাঁপা, হৃদযন্ত্রের সমস্যা, ব্যথা, প্লীহার ব্যাধি, ডিসপেপসিয়া, দাঁতের ব্যথা, ব্রঙ্কাইটিস, হাঁপানি, স্ক্যাবিস, লিউকোডর্মার চিকিৎসায় ব্যবহৃত হয়ে আসছে। রেচক, পাকস্থলী, ক্ষুধাদায়ক, টনিক, মূত্রবর্ধক, এবং ব্যথানাশক [18]। এই উদ্ভিদটিতে ফ্ল্যাভোনয়েডস, অ্যানথ্রাকুইনোনস, ক্যারোটিনয়েডস, ভিটামিন, লিপিড এবং জৈব অ্যাসিড সহ অসংখ্য জৈবিকভাবে গুরুত্বপূর্ণ যৌগ রয়েছে, যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল এবং অ্যান্টিক্যান্সার এজেন্ট হিসাবে পরিচিত [১৯]। এই উদ্ভিদের প্রতিটি অংশে উচ্চ পরিমাণে কোয়ারসেটিন (ফ্ল্যাভোনয়েড) রয়েছে [১৫]। এই উদ্ভিদে প্রতি 100 গ্রাম শুষ্ক ওজনে 0.25 মিলিগ্রাম ভিটামিন এ, 1.33 মিলিগ্রাম ভিটামিন সি, 2.37 মিলিগ্রাম ভিটামিন ই [15], 3.38 মিলিগ্রাম ফ্ল্যাভোনয়েড এবং 5.66 মিলিগ্রাম পলিফেনল [20] রয়েছে।

শাহাত এবং সহকর্মীরা [২১] একটি ইঁদুরের মডেলে হেপাটোসেলুলার কার্সিনোমার বিরুদ্ধে R. vicarious বায়বীয় অংশের মিথানল (80 শতাংশ) নির্যাসের অ্যান্টি-এনজিওজেনিক এবং অ্যান্টি-প্রলিফারেটিভ প্রভাব দেখিয়েছেন। আরেকটি গবেষণায় R. vicarious নির্যাস [22] এর ভিট্রো অ্যান্টি-এনজিওজেনিক সম্ভাবনা দেখায়। পুরো R এর মিথানল নির্যাস। ভিকারিয়াস ভিভোতে কার্বন টেট্রাক্লোরাইড-প্ররোচিত হেপাটোটক্সিসিটির বিরুদ্ধে সুরক্ষা দেয় [23]। R. vicarious [24] এর মিথানোলিক পাতার নির্যাস দ্বারা খরগোশের মধ্যে প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব স্পষ্ট হয়েছে। একটি সাম্প্রতিক গবেষণা [২৫] জেন্টামাইসিন এবং পটাসিয়াম ডাইক্রোমেট বিষাক্ততার বিরুদ্ধে ভগ্নাংশ ইথানোলিক আর ভিকারিয়াস নির্যাসের ভিভো নেফ্রোপ্রোটেক্টিভ প্রভাবে রিপোর্ট করেছে।

উপরের তথ্যগুলি বিবেচনায় রেখে, আমরা প্রাণীর মডেলে NQO1 জিনের প্রকাশ বজায় রাখার মাধ্যমে সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত নেফ্রোটক্সিসিটি থেকে পুনরুদ্ধারের পরিপ্রেক্ষিতে R. vicarious extracts (RVE) এর প্রভাব পরিদর্শন করার লক্ষ্য রেখেছিলাম।

cistanche স্বাস্থ্য সুবিধা: কিডনি রোগের চিকিৎসা

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

রাসায়নিক এবং বিকারক

সিসপ্ল্যাটিন এবং 2, 2-ডিফেনাইল-1-পিক্রিলহাইড্রাজিল (ডিপিপিএইচ) সিগমা-আলড্রিক (মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে কেনা হয়েছিল।

ক্রিয়েটিনাইন কালোরিমেট্রিক অ্যাসে কিট (পণ্য আইডি - 700,460) কেম্যান কেমিক্যাল (ইউএসএ) থেকে কেনা হয়েছিল। Dulbecco's Modified Eagles Medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS), এবং অ্যান্টিবায়োটিক (10,000 U/mL পেনিসিলিন এবং 10,000 ug/mL streptomycin) Gibco (Gibco ল্যাবরেটরিজ,) থেকে কেনা হয়েছিল আমেরিকা). ROS-Glo™ H2O2 অ্যাসে কিট এবং GoTaq® qPCR মাস্টার মিক্স প্রোমেগা (ইউএসএ) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। রিভার্স-ট্রান্সক্রিপশন কিট টিআইএএন- স্ক্রিপ্ট এম-এমএলভি টিআইএনজেন (চীন) থেকে এবং আইডিটি (ইন্টিগ্রেটেড ডিএনএ টেকনোলজিস, মালয়েশিয়া) থেকে প্রাইমার কেনা হয়েছিল। এই পরীক্ষায় ব্যবহৃত অন্যান্য সমস্ত রাসায়নিক এবং বিকারক বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল।

উদ্ভিদ নমুনা সংগ্রহ এবং নির্যাস প্রস্তুতি

তাজা R. vicarious উদ্ভিদ সোনাদীঘি, রাজশাহী, বাংলাদেশের একটি স্থানীয় বাজার থেকে কেনা হয়েছিল। উদ্ভিদের নমুনা ড. আহমদ হুমায়ন কবির, রাজশাহী বিশ্ববিদ্যালয়ের উদ্ভিদবিদ্যা বিভাগ, বাংলাদেশ কর্তৃক শনাক্ত ও প্রমাণীকৃত। ভাউচার নং অধীনে একটি নমুনা. 00095 রাজশাহী বিশ্ববিদ্যালয়ের উদ্ভিদবিদ্যা বিভাগের হার্বেরিয়ামে সংরক্ষিত ছিল। প্ল্যান্টের বায়বীয় অংশগুলি পরিষ্কার করা হয়েছিল, 37 ডিগ্রিতে শুকানো হয়েছিল, একটি ইলেকট্রনিক ড্রায়ার ব্যবহার করে একটি মোটা পাউডারে মাটিতে তৈরি করা হয়েছিল এবং 4 ডিগ্রিতে একটি সিল করা পাত্রে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। সূক্ষ্ম পাউডার (10 গ্রাম) মিথানলে (500 মিলি) দ্রবীভূত হয়েছিল। বিষয়বস্তু 10 মিনিটের জন্য 20 kHz এ sonicated (Soni-prep 150, China) ছিল। DURAN ফিল্টারিং যন্ত্রপাতি (জার্মান) সহ গ্লাস ফাইবার ফিল্টার পেপার (মাচেরি নাগেল, জিএমবিএইচ, জার্মান) ব্যবহার করে নির্যাসের পরিস্রাবণ করা হয়েছিল। অবশেষে, একটি ফ্রিজ ড্রায়ার (VirTis Benchtop Pro, SP SCIENTIFIC, USA) ব্যবহার করে পরিস্রুত করা হয়েছিল। নির্যাস অবশেষে RVE নামকরণ করা হয়.

ইন-ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ পরীক্ষা

RVE-এর ইন-ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা ডিপিপিএইচ-এর স্ক্যাভেঞ্জিং-এর উপর ভিত্তি করে করা হয়েছিল যেমনটি পূর্বে বর্ণিত হয়েছে [২৬] সামান্য পরিবর্তনের সাথে। DPPH এর বেগুনি রঙকে হলুদ রঙে রূপান্তর করার উপর ভিত্তি করে RVE-এর DPPH র্যাডিকাল স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। প্রতিটি মাইক্রো-সেন্ট্রিফিউজ টিউব (2 মিলি) প্রতিক্রিয়া মিশ্রণে DPPH র‌্যাডিকেলের 950 μL মিথানোলিক দ্রবণ (0.1 মিমি) এবং 50 μL RVE পাঁচটি ভিন্ন ঘনত্ব (200, 500, 1000, 2000 এবং 4000ug) থেকে থাকে। /mL মিথানল) 10, 25, 50, 100 এবং 200 ug/mL চূড়ান্ত ঘনত্ব তৈরি করতে। 50 μL মিথানল এবং DPPH এর 950 μL মিথানলিক দ্রবণ ধারণকারী আরেকটি টিউব নিয়ন্ত্রণ হিসাবে রাখা হয়েছিল। টেস্টটিউবগুলি অন্ধকার জায়গায় 30 মিনিটের জন্য রেখে দেওয়া হয়েছিল। GENESYS 10S UV-VIS স্পেকট্রোফোটোমিটার (Thermo Scientific, USA) ব্যবহার করে মিশ্রণের শোষণ 517 এনএম নেওয়া হয়েছিল। অবশেষে, র্যাডিকাল স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাক্টিভিটি (RSA) শতাংশ গণনা করা হয়েছিল DPPH-এর বিবর্ণতার উপর ভিত্তি করে নিম্নলিখিত সূত্রটি ব্যবহার করে শতাংশ RSA=[(ADPPH − ARVE)/ADPPH] × 100 যেখানে ADPPH হল DPPH দ্রবণের শোষণ (নিয়ন্ত্রণ) এবং ARVE হল RVE সমাধানের শোষণ। যে ঘনত্বে RVE এর ফলে 50 শতাংশ RSA হয়েছিল তাকে IC50 মান হিসাবে আখ্যায়িত করা হয়েছিল এবং ব্যবহৃত বিভিন্ন RVE ঘনত্বের বিপরীতে শতাংশ RSA বসানো গ্রাফ ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল।

পরীক্ষামূলক প্রাণী এবং পরীক্ষামূলক নকশা

42 দিন বয়সী পুরুষ সুইস অ্যালবিনো ইঁদুর (30-32 গ্রাম দৈহিক ওজন) একটি ঘরে পরীক্ষা শুরু করার আগে 1 সপ্তাহের জন্য অভ্যস্ত ছিল (তাপমাত্রা 25 ± 2 ডিগ্রি এবং ~ 50 শতাংশ আর্দ্রতা, 12 ঘন্টা অন্ধকার/আলো চক্র)। পানীয় জল এবং খাবারের অবাধ ব্যবস্থা করা হয়েছিল।

ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে আটটি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল (n {{0}})। প্রথম (নিয়ন্ত্রণ) গ্রুপটিকে 0.9 শতাংশ NaCl এর 0.2 mL দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। পরবর্তী চারটি গ্রুপকে 24 ঘন্টার ব্যবধানে 5 দিনের জন্য 2.5 মিলিগ্রাম/কেজি সিসপ্ল্যাটিন দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। সিসপ্ল্যাটিন প্রশাসনের পরে, একটি গ্রুপকে (দ্বিতীয় গ্রুপ) আর কোনও চিকিত্সা ছাড়াই ছেড়ে দেওয়া হয়েছিল এবং চাপযুক্ত নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ হিসাবে নিয়োগ করা হয়েছিল। তৃতীয়, চতুর্থ এবং পঞ্চম গ্রুপগুলিকে 5 দিনের জন্য যথাক্রমে 25, 50 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজিতে RVE দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। আরও তিনটি গ্রুপকে 5 দিনের জন্য যথাক্রমে 25, 50 এবং 100 মিলিগ্রাম/কেজি RVE দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। সিসপ্ল্যাটিন এবং আরভিই পাতিত জলে দ্রবীভূত হয়েছিল। সমস্ত চিকিত্সা intraperitoneally দেওয়া হয়েছিল। শেষ চিকিত্সার 24 ঘন্টা পরে, জরায়ুর স্থানচ্যুতি [25] এর পরে প্রাণীগুলিকে euthanized করা হয়েছিল। তারপরে কাঁচি দিয়ে পেরিটোনিয়াম খোলা হয়েছিল, হার্ট পাঞ্চারের পরে রক্ত ​​সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ফরসেপস ব্যবহার করে কিডনি সংগ্রহ করা হয়েছিল। সিরামে ক্রিয়েটিনিনের মাত্রা পরীক্ষা করার জন্য রক্ত ​​পরীক্ষা করা হয়েছিল। কিডনিগুলি ম্যালন্ডিয়ালডিহাইড স্তর এবং জিনের অভিব্যক্তি মূল্যায়নের বিষয় ছিল।

সিরাম ক্রিয়েটিনিনের পরিমাপ

ক্রিয়েটিনাইন কালোরিমেট্রিক অ্যাসে কিট-700,460 (কেম্যান কেমিক্যাল, ইউএসএ) ব্যবহার করে সিরাম ক্রিয়েটিনিন পরিমাপ করা হয়েছিল কিটটির সাথে প্রদত্ত প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুসরণ করে।

রেনাল লিপিড পারক্সিডেশন পরিমাপ

ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (MDA) হল কিডনি টিস্যুতে লিপিড পার-অক্সিডেশনের একটি শেষ পণ্য এবং সাধারণত ROS উৎপাদনের সূচক হিসাবে পরিমাপ করা হয়। যাইহোক, এমডিএ স্তরটি পূর্ববর্তী গবেষণা অনুসারে রেনাল টিস্যুতে পরিমাপ করা হয়েছিল [27]। প্রথমে, রেনাল টিস্যু সোডিয়াম ফসফেট বাফার (0.1 M, pH 7.4) এ একজাত করা হয়েছিল। 0.8 শতাংশ থিওবারবিটুরিক অ্যাসিড (1.5 মিলি), 8.1 শতাংশ SDS (200 μL), 20 শতাংশ (pH 3.5) অ্যাসিটিক অ্যাসিড (1.5 মিলি), এবং dH2O (600 μL) সমন্বিত একটি প্রতিক্রিয়া সমাধান 100 এ যোগ করা হয়েছিল সমজাতীয় টিস্যুর μL, এবং মিশ্রণটি তখন 1 ঘন্টার জন্য 95 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। ঠাণ্ডা হওয়ার পরে, মিশ্রণগুলিকে 10,{24}g এ 10 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং সুপারনাট্যান্টের শোষণ মান 1, 1, 3, 3- টেট্রা মেথক্সি প্রোপেন দিয়ে 532 nm এ পরিমাপ করা হয়েছিল। ব্র্যাডফোর্ড প্রোটিন অ্যাসে কিট (BIO-RAD, USA) ব্যবহার করে এবং স্ট্যান্ডার্ড বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (BSA) এর সাথে তুলনা করে মোট প্রোটিনের পরিমাণ পরিমাপ করা হয়েছিল। লিপিড পারক্সাইডের তীব্রতা প্রতি মিলিগ্রাম (মিলিগ্রাম) প্রোটিনের এমডিএর ন্যানোমোলস (এনএম) হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল।

রিয়েল-টাইম পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (রিয়েল-টাইম পিসিআর)

পূর্বে বর্ণিত হিসাবে রিয়েল-টাইম পিসিআর সঞ্চালিত হয়েছিল [28, 29]। প্রস্তুতকারকের সরবরাহকৃত প্রোটোকল অনুসারে কিডনি টিস্যু থেকে মোট আরএনএ TRIzol® রিএজেন্ট (ইনভিট্রোজেন) ব্যবহার করে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। বিচ্ছিন্ন আরএনএ (1 ইউজি) তখন সিডিএনএতে রূপান্তরিত হয়েছিল। প্রথমত, 2 μL র্যান্ডম হেক্সামার (10 μM), 2 μL dNTPs (10 mM), 1 ug RNA, এবং 15 μL পর্যন্ত নিউক্লিজ-মুক্ত HO নেওয়া হয়েছিল এবং 70 ডিগ্রিতে 5 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। মিশ্রণটি তাত্ক্ষণিকভাবে 2 মিনিটের জন্য বরফের উপর স্থাপন করা হয়েছিল। তারপরে 1ম স্ট্র্যান্ড বাফারের 4 μL (5x) এবং 1 μL M-MLV বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেস প্রতিটি টিউবে যোগ করা হয়েছিল এবং 10 মিনিট এবং 50 জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল

যথাক্রমে 25 ডিগ্রী এবং 42 ডিগ্রীতে মিনিট। অবশেষে, এম-এমএলভি রিভার্স-ট্রান্সক্রিপ্টেজ এনজাইমটি 5 মিনিটের জন্য 95 ডিগ্রিতে মিশ্রণটি ইনকিউব করে নিষ্ক্রিয় করা হয়েছিল। সংশ্লেষিত সিডিএনএ পণ্যগুলি নির্দিষ্ট প্রাইমার ব্যবহার করে NQO1, p53 এবং Bcl-2 জিনের অভিব্যক্তির পরিমাণ নির্ধারণের জন্য রিয়েল-টাইম পিসিআরের অধীন ছিল (সারণী 1)। প্রতিটি প্রতিক্রিয়া (10 μL) 5 μL GoTaq qPCR মাস্টার মিক্স (2x) (প্রোমেগা, ইউএসএ), প্রতিটি প্রাইমারের 0.5 μL (10 মিমি), 3 μL নিউক্লিজ-মুক্ত জল এবং 1 μL cDNA 48-ওয়েল রিঅ্যাকশন প্লেটে। থার্মাল সাইক্লিং একটি রিয়েল-টাইম পিসিআর মেশিন (Eco™ রিয়েল-টাইম PCR সিস্টেম, Illumine®, USA) ব্যবহার করে নিম্নলিখিত সাইক্লিং শর্তাবলীর সাথে সঞ্চালিত হয়েছিল: 10 মিনিটের জন্য 95 ডিগ্রি, তারপর 30 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রির 40টি চক্র, 30 সেকেন্ডের জন্য 50 ডিগ্রী এবং 25 সেকেন্ডের জন্য 72 ডিগ্রী। 15 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রী, 15 সেকেন্ডের জন্য 45 ডিগ্রী এবং 15 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রীতে গলিত বক্ররেখা বিশ্লেষণ করে পিসিআর প্রতিক্রিয়ার নির্দিষ্টতা নিশ্চিত করা হয়েছে। 15 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রী, 15 সেকেন্ডের জন্য 45 ডিগ্রী এবং 15 সেকেন্ডের জন্য 95 ডিগ্রীতে গলিত বক্ররেখা বিশ্লেষণ করে পিসিআর প্রতিক্রিয়ার নির্দিষ্টতা নিশ্চিত করা হয়েছে। জিন এক্সপ্রেশনের আপেক্ষিক পরিমাণ নির্ধারণ ΔΔCq পদ্ধতির উপর ভিত্তি করে নিয়ন্ত্রণ হিসাবে অন্তঃসত্ত্বা GAPDH জিন ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল।

কোষ সংস্কৃতি এবং চিকিত্সা

মানব রেনাল প্রক্সিমাল টিউবুল এপিথেলিয়াল সেল লাইন, এইচকে{0}} কোষ, 5 শতাংশ CO2 এবং 95 সহ একটি ইনকিউবেটরে 10 শতাংশ FBS এবং অ্যান্টিবায়োটিক (50 U/mL পেনিসিলিন এবং 50 ug/mL স্ট্রেপ্টোমাইসিন) দিয়ে পরিপূরক DMEM-এ রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল। শতকরা 37 ডিগ্রি আর্দ্রতা।

H2O2 পরিমাপ অ্যাস

HK-2 কোষে H2O2 স্তরটি কিট প্রস্তুতকারকের দেওয়া প্রোটোকল অনুসারে ROS- Glo™ H2O2 অ্যাসে কিট (প্রোমেগা, ইউএসএ) ব্যবহার করে অনুমান করা হয়েছিল। 70 μL DMEM-এ HK-2 কোষ (1000 কোষ) 96-ওয়েল মাইক্রোটাইটার প্লেটের কূপে স্থাপন করা হয়েছিল। প্রাচীর পৃষ্ঠে কোষগুলির সংযুক্তির অনুমতি দেওয়ার পরে, মাইক্রোটাইটার প্লেটের কূপ থেকে 10 μL DMEM 10 μL সিসপ্ল্যাটিন (DMEM-এ 25 μM) দিয়ে প্রতিস্থাপিত হয়েছিল এবং 12 ঘন্টার জন্য একটি ইনকিউবেটরে রাখা হয়েছিল। তারপর, ডিএমইএম-এ চূড়ান্ত ঘনত্ব 125, 250 এবং 500 ug/mL করার জন্য 10 μL RVE যোগ করা হয়েছিল এবং আরও 12 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। এর পরে, প্রতিটি কূপে 20 μL H2O2 সাবস্ট্রেট সলিউশন এবং 100 μL ROS-Glo™ সনাক্তকরণ সমাধান যোগ করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়াটি ঘরের তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য incubated ছিল। অবশেষে, গ্লোম্যাক্স লুমিনোমিটার (প্রোমেগা, ইউএসএ) ব্যবহার করে লুমিনেসেন্স পরিমাপ করা হয়েছিল।

জিসি-এমএস বিশ্লেষণ

GCMS-QP2020 (SHIMADZU) ব্যবহার করে একটি স্বয়ংক্রিয়-স্যাম্পলার (AOC{ {5}}s), একটি অটো-ইনজেক্টর (AOC-20i), এবং একটি গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফ (GC-2010 প্লাস) একটি SH-Rxi দিয়ে সজ্জিত একটি ভর স্পেকট্রোমিটারের সাথে ইন্টারফেস করা হয়েছে{{1{{ 37}}}}Sil MS কৈশিক কলাম (30 m × 0.25 μm ID × 0.25 μm DF)। বাহক গ্যাস হিলিয়ামকে 1.72 মিলি/মিনিটের একটি ধ্রুবক প্রবাহ হারে রাখা হয়েছিল, এবং 5 μL এর একটি ইনজেকশন ভলিউম 10:1 বিভক্ত অনুপাতের সাথে সাবজেক্ট করা হয়েছিল। ইনজেক্টরের তাপমাত্রা 220 ডিগ্রীতে রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল, আয়ন-উৎস তাপমাত্রা ছিল 280 ডিগ্রী, ওভেনের তাপমাত্রা 80 ডিগ্রী থেকে প্রোগ্রাম করা হয়েছিল (2 মিনিট ধরে রাখুন), 5 ডিগ্রী / মিনিটে 150 ডিগ্রী বৃদ্ধির সাথে (হোল্ড টাইম 5.0) মিনিট), তারপর 5 ডিগ্রী/মিনিট থেকে 280 ডিগ্রী, 280 ডিগ্রীতে 8 মিনিট আইসোথার্মাল দিয়ে শেষ হয়। ভর স্পেকট্রা 0.5 সেকেন্ডের স্ক্যান-ব্যবধানে 1.5 কেভিতে নেওয়া হয়েছিল এবং নমুনাটি 45-350 m/z পরিসরে চালানো হয়েছিল। দ্রাবক বিলম্ব ছিল 0 থেকে 3 মিনিট, এবং মোট GC-MS চলমান সময় ছিল 55 মিনিট। শনাক্ত যৌগগুলির আপেক্ষিক ঘনত্ব মোট এলাকার সাথে গড় শিখর এলাকা তুলনা করে পরিমাপ করা হয়েছিল। GC-MS-এ ভর-স্পেকট্রামের ব্যাখ্যা NIST08, NIST08s, এবং NIST14 সহ ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট স্ট্যান্ডার্ড অ্যান্ড টেকনোলজি (NIST) ডাটাবেস ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

IBM SPPS (সংস্করণ 20) সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে Dunnett এর T3 পরীক্ষা অনুসরণ করে ANOVA দ্বারা পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ডেটা মানে ± স্ট্যান্ডার্ড ডেভিয়েশন (SD) হিসাবে বর্ণনা করা হয়। উল্লেখযোগ্য তুলনা p এ বিবেচনা করা হয়েছিল<0.05. all="" of="" the="" graphs="" were="" prepared="" using="" microsoft="" excel="" (version="">

ফলাফল

ইন-ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ পরীক্ষা

যদিও পূর্বে RVE-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপের জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল, আমরা DPPH ফ্রি র‌্যাডিক্যাল স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা ব্যবহার করে আমাদের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ পুনরায় পরীক্ষা করেছি। RVE নিরপেক্ষ DPPH ডোজ-নির্ভর (চিত্র 1)। RVE ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রকাশ করেছে এবং RVE-এর গণনাকৃত IC50 মান ছিল 37.39 ± 1.89 ug/mL।

সিরাম ক্রিয়েটিনিনের পরিমাপ

ইঁদুরের সিরাম ক্রিয়েটিনিনের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে (p < {{0}}.05)="" সিসপ্ল্যাটিন="" প্রশাসনের="" পরে="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে="" (সারণী="" 2)।="" rve="" এর="" সাথে="" চিকিত্সা="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" (p=""><0.05) একটি="" ডোজ-নির্ভর="" ফ্যাশনে="" ক্রিয়েটিনিনের="" স্তরকে="" উন্নত="" করেছে="" (সারণী="">

রেনাল লিপিড পারক্সিডেশন পরিমাপ

নিয়ন্ত্রণের তুলনায়, সিসপ্ল্যাটিন যথেষ্ট পরিমাণে (p < {{0}}.05)="" ইঁদুরের="" রেনাল="" টিস্যুতে="" এমডিএ="" সামগ্রী="" বৃদ্ধি="" করে="" (সারণী="" 3)।="" বিপরীতে,="" rve="" চিকিত্সা="" যথেষ্ট="" পরিমাণে="" (p=""><0.05) এমডিএকে="" ডোজ-নির্ভর="" ফ্যাশনে="" প্রায়="" স্বাভাবিক="" অবস্থায়="" ফিরিয়ে="" এনেছে="" (সারণী="">

রিয়েল-টাইম পিসিআর

সিসপ্ল্যাটিন উল্লেখযোগ্যভাবে (p < {{0}}।{11}}5)="" nqo1="" mrna="" এক্সপ্রেশন="" 0="" কমিয়েছে।{4}}ভাঁজ="" করেছে="" এবং="" p53="" এবং="" bcl-2="" mrna="" বাড়িয়েছে।="" 24="" এবং="" 4="" দ্বারা="" অভিব্যক্তি।{9}}ভাঁজ,="" যথাক্রমে="" (চিত্র="" 2)।="" rve="" যথেষ্ট="" পরিমাণে="" (p="">< 0৷{35}}5)="" ডোজ-নির্ভর="" ফ্যাশনে="" nqo1,="" p53,="" এবং="" bcl-2="" mrna="" অভিব্যক্তি="" প্রশমিত="" করেছে="" (চিত্র="" 2)।="" শুধুমাত্র="" সিসপ্ল্যাটিন-চিকিত্সা="" করা="" গ্রুপের="" তুলনায়,="" nqo1="" mrna="" এক্সপ্রেশন="" 3.57,="" 6.36,="" এবং="" 9="" দ্বারা="" বৃদ্ধি="" পেয়েছে।="" mg/kg="" rve,="" যথাক্রমে="" (চিত্র="" 2a)।="" আবার,="" p53="" mrna="" এক্সপ্রেশন="" 0.63,="" 0.46,="" এবং="" 0="" দ্বারা="" হ্রাস="" পেয়েছে।="" bcl-2="" mrna="" এক্সপ্রেশনও="" 0.71,="" 0.40,="" এবং="" 0="" দ্বারা="" হ্রাস="" পেয়েছে।="" কিন্তু,="" rve="" (চিত্র="" 3)="" এর="" সাথে="" চিকিত্সার="" কারণে="" nqo1,="" p53="" এবং="" bcl-2="" জিনের="" অভিব্যক্তি="" স্তরে="" কোনও="" উল্লেখযোগ্য="" (p=""> 0.05) পরিবর্তন পাওয়া যায়নি।

H₂O₂পরিমাপ পরীক্ষা

H2O2 পরিমাপ অ্যাসে, H₂O₂স্তর luminescence সমানুপাতিক বিবেচনা করা হয়. সিসপ্ল্যাটিনের প্রশাসন উল্লেখযোগ্যভাবে (p < {{0}}৷{11}}5)="" h2o2="" স্তর="" 2="" দ্বারা="" বৃদ্ধি="" করেছে৷="" rve="" এর="" সাথে="" চিকিত্সা="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" পেয়েছে="" (p="">< 0৷{15}}5)="" h2o2="" স্তর="" 0.25,="" 0.38,="" এবং="" 0৷{16}}সঙ্গতভাবে="" 125,="" 250,="" এবং="" 500="" ug/ml="" এ="">

জিসি-এমএস বিশ্লেষণ

"Isoborneol, pentamethyldisilanyl ether (sesquiterpene অ্যালকোহল)", "Thymine (pyrimidine nucleobase)", "4H-Py-ran-4-এক, 2,{{ সহ মোট 10টি যৌগ (সারণী 4 এবং চিত্র 5) 8}}ডাইহাইড্রো-3,5-ডাইহাইড্রক্সি-6-মিথাইল- (স্যাপোনিন)", "হেক্সাডেকানোয়িক অ্যাসিড, মিথাইল এস্টার (ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার)", "9,12- অক্টাডেক্যাডিয়েনয়িক অ্যাসিড, মিথাইল এস্টার (ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার)", "9-অক্টাডেসেনোয়িক অ্যাসিড (জেড)-, মিথাইল এস্টার (ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার)", "মিথাইল স্টিয়ারেট (ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার)", "ডিসোকটাইল থ্যালেট (এস্টার)", "13-ডোকোসেনামাইড, (জেড)- (ক্ষারক)", এবং "স্ক্যালিন (ট্রাই-টারপেন)" RVE-তে শনাক্ত হয়েছে৷

cistanche tubolosa উপকারিতা: রক্তের লিপিড কমায়

আলোচনা

প্রাকৃতিক এবং সিন্থেটিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি বিস্তৃতভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে এবং প্রাণীর শারীরবৃত্তিতে বিষাক্ততার প্রতিরোধ বা উন্নতির জন্য কার্যকরী বলে প্রকাশ করা হয়েছে [31]। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্পূরকগুলি হল রাসায়নিক সংশ্লেষণের মাধ্যমে বা প্রাকৃতিক খাবার থেকে নিষ্কাশনের মাধ্যমে বিকাশিত উপাদান তবে এগুলি খাদ্যে উপলব্ধ অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলির মতো গঠনে অভিন্ন নয় [5]। অতএব, কৃত্রিম অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলির মতো একই স্বাস্থ্য সুবিধা দেয় কিনা [৩২] সময়ের সাথে সাথে মতামতগুলি আলাদা করা হয়। সিন্থেটিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্পূরকগুলির ব্যবহার হ্রাস করার জন্য এবং কার্যকর প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলির বিকল্প, সস্তা, পুনর্নবীকরণযোগ্য, প্রাকৃতিক এবং সম্ভবত নিরাপদ উত্সগুলি সন্ধান করার জন্য তাগিদ আসছে৷

সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়াগুলির মধ্যে একটি হল নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর এরিথ্রয়েড-2 সম্পর্কিত ফ্যাক্টর-2 (Nrf2) পথ যা সাধারণত বহিরাগত বা অন্তঃসত্ত্বা চাপ দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে কোষগুলিকে রক্ষা করে [২৭]। কার্যকরী অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি Nrf2 এর অভিব্যক্তিকে প্ররোচিত করে, যা আরও নিউক্লিয়াসে চলে যায় এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিক্রিয়া উপাদান (ARE) এর সাথে আবদ্ধ হয় যা ফেজ II ডিটক্সিফাইং এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট জিন NQO1 [33, 34] এর অভিব্যক্তিকে উস্কে দেয়। NQO1 টিস্যু-নির্দিষ্ট পদ্ধতিতে ব্যাপকভাবে এবং ভিন্নভাবে প্রকাশ করা হয়। NQO1 হল একটি সাইটোসোলিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ফ্ল্যাভোপ্রোটিন যা হাইড্রোকুইননে কুইনোনের ইলেকট্রন হ্রাসকে 2- অনুঘটক করে, যার ফলে ইলেক্ট্রোফাইলসের ডিটক্সিফিকেশন হয় এবং রেডক্স সাইক্লিং [35] এর প্রত্যাশা। পূর্ববর্তী একটি গবেষণা অনুসারে [৩৬], -ল্যাপাচোন NQO1 সক্রিয় করে, যা অন্তঃকোষীয় NAD প্লাস স্তরকে আরও বৃদ্ধি করে এবং কিডনিকে সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত তীব্র আঘাত থেকে রক্ষা করে।

সিসপ্ল্যাটিন অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, প্রদাহ এবং অ্যাপোপটোসিসের মাধ্যমে গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ ঝিল্লিতে প্ররোচিত ক্ষতি হিসাবে পরিচিত যা সম্পূর্ণরূপে গ্লোমেরুলার পরিস্রাবণ হার হ্রাস করে এবং স্বাভাবিক ঝিল্লি ব্যাপ্তিযোগ্যতা হ্রাস করে [৩৭]। অতএব, সিরাম ক্রিয়েটিনিন স্তর বৃদ্ধি করা হয়েছিল। সিরাম ক্রিয়েটিনিন একটি সম্ভাব্য রেনাল কার্যকারিতা চিহ্নিতকারী। সিসপ্ল্যাটিন চিকিত্সা কিডনি টিস্যুতে এমডিএ সামগ্রী বাড়িয়েছে যা লিপিড পারক্সিডেশনের একটি গৌণ পণ্য এবং এই প্রতিবেদনটি পূর্ববর্তী গবেষণাগুলির সাথে ধ্রুবক রয়েছে [27, 35, 37, 38]। RVE এর সাথে চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে কিডনি টিস্যুতে MDA সামগ্রী হ্রাস করে। একই সময়ে, ক্রিয়েটিনিন স্তরও হ্রাস পেয়েছিল যা RVE এর উন্নত প্রভাব নির্দেশ করে।

এছাড়াও, NQO1 এক্সপ্রেশন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, এবং p53 এবং Bcl-2 এক্সপ্রেশন সিসপ্ল্যাটিনের সংস্পর্শে আসার পরে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। ভিভোতে NQO1 এবং p53 এক্সপ্রেশনের পরিপ্রেক্ষিতে, আমাদের ফলাফল পূর্ববর্তী অধ্যয়নের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ [13]। একটি সাম্প্রতিক গবেষণা [৩৯] দেখিয়েছে যে সিসপ্ল্যাটিন ইঁদুরের কিডনিতে Bcl-2 এর প্রকাশকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে, কিন্তু আশ্চর্যজনকভাবে আমরা উন্নত অভিব্যক্তি খুঁজে পেয়েছি। এই পার্থক্য ডোজ পার্থক্যের ফলাফল হতে পারে [৪০] কারণ মোহাম্মদ এবং সহকর্মীরা [৩৯] 12 দিনের জন্য 8 মিলিগ্রাম/কেজি ব্যবহার করেছেন, যেখানে আমরা 2.5 মিলিগ্রাম/কেজি মাত্র 5 দিনের জন্য ব্যবহার করেছি। অন্য একটি গবেষণায় [৪১] বলা হয়েছে যে সিসপ্ল্যাটিন অ-সাইটোটক্সিক হলে একটি ডোজে Bcl-2 এর অভিব্যক্তি বৃদ্ধি করতে পারে। আবার, বর্ধিত Bcl-2 অভিব্যক্তি কোষগুলিকে অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের প্রতি সংবেদনশীল করে [৪০]।

যাইহোক, p53-এর প্রকাশ স্বাভাবিক শারীরবৃত্তীয় পরিস্থিতিতে কম কিন্তু সিসপ্ল্যাটিন দিয়ে চিকিত্সা করার পরে এটি আপ-নিয়ন্ত্রিত হবে বলে আশা করা হচ্ছে কারণ এই প্ল্যাটিনাম-ভিত্তিক কেমোথেরাপিউটিক এজেন্ট p53 নির্ভর অ্যাপোপটোটিক পথকে সক্রিয় করে। একবার আমরা সিসপ্ল্যাটিন দিয়ে ইঁদুরের চিকিত্সা করার পরে, নিয়ন্ত্রণের তুলনায় ইঁদুরের কিডনিতে p53 উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছিল। আরেকটি প্রোটো-অনকোজিন Bcl-2ও NQO1 এক্সপ্রেশন লেভেলের সাথে সম্পর্কযুক্ত। p53 অভিব্যক্তির অনুকরণ করে, আমরা আরও দেখতে পেলাম যে সিসপ্ল্যাটিন চিকিত্সার মাধ্যমে Bcl- 2 মাত্রা বৃদ্ধি করা হয়েছিল, কিন্তু RVE-এর সাথে চিকিত্সার পরে উল্লেখযোগ্যভাবে পুনঃআচ্ছন্ন হয়েছে। এটি সম্ভব, অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের প্রতিক্রিয়ায়, p53 জিন সক্রিয় হয়ে যায় এবং এর ফলে কোষ চক্র, বার্ধক্য বা অ্যাপোপটোসিসকে আটকে দেয় [6]। ডিটক্সিফিকেশনের সাথে, NQO1 অত্যধিক এক্সপ্রেশনকে প্রায়শই ক্যান্সার কোষে অ্যাপোপটোসিসের সাথে সম্পর্কযুক্ত বলে মনে করা হয় [10], যদিও অ্যাপোপটোসিসের অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া এবং NQO1 এর অতিরিক্ত এক্সপ্রেশন এখনও বিতর্কিত। অধিকন্তু, হেপাটোসেলুলার কার্সিনোমাতে, NQO1 ওভার এক্সপ্রেশন Bcl-2 এক্সপ্রেশনকে হ্রাস করে [10]। প্রোটো-অনকোজিন Bcl- 2-এরও p53 আছে যেমন NQO1 এক্সপ্রেশনের সাথে পারস্পরিক সম্পর্ক। p53 হল একটি ক্রম-নির্দিষ্ট ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর যা অসংখ্য ধরনের সেলুলার স্ট্রেস দ্বারা সক্রিয় হয় [42], যেখানে Bcl-2 ওভার এক্সপ্রেশন অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের উপর সাইটোক্রোম-সি মুক্তির সুবিধার্থে মাইটোকন্ড্রিয়াল পোর-স্ট্যাবিলাইজার হিসাবে কাজ করে [12]। আমাদের ক্ষেত্রে, আমরা সাধারণ কিডনি টিস্যুতে সিসপ্ল্যাটিন চিকিত্সার মাধ্যমে উভয় জিনের প্রতিক্রিয়া পরীক্ষা করেছি এবং তাদের বর্ধিত অভিব্যক্তি খুঁজে পেয়েছি। RVE চিকিত্সা ডোজ-নির্ভর ফ্যাশনে p53 এবং Bcl-2 এর অভিব্যক্তিকে প্রায় স্বাভাবিক অবস্থায় ফিরিয়ে এনেছে। এই ধরনের Bcl-2 এক্সপ্রেশন রহিতকরণও ROS স্ক্যাভেঞ্জার ট্রলক্স ব্যবহার করে দেখানো হয়েছিল [43]। অধিকন্তু, ভিট্রোতে সিসপ্ল্যাটিন দিয়ে চিকিত্সার কারণে HK-2 কোষগুলিতে H2O2 স্তরও উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। RVE এর সাথে চিকিত্সার পরে, H2O2 স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে স্বাভাবিকের কাছাকাছি পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল। এটি RVE চিকিত্সার প্রভাবের কারণে হতে পারে যা NQO1 এক্সপ্রেশন [44] বৃদ্ধি করেছে, যা অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিরুদ্ধে সুরক্ষা প্রয়োগ করে [6]।

GC-MS ক্রোমাটোগ্রাম RVE-তে দশটি যৌগের অস্তিত্ব নিশ্চিত করেছে। এর মধ্যে, "4H-Pyran- 4-one, 2, 3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-", "Hexadecanoic acid", এবং " স্কোয়ালিন" হল সুপরিচিত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট[45-47]। এই তিনটি যৌগ সম্পূর্ণভাবে সম্ভবত একটি synergistic nephroprotective প্রভাব প্রয়োগ করেছে। পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি ভিটামিন A [48], ভিটামিন C [49], ভিটামিন E [50], ফ্ল্যাভোনয়েড [51] এবং পলিফেনল [50] দ্বারা NQO1 অভিব্যক্তির আবেশ সম্পর্কেও রিপোর্ট করেছে। অতএব, এই প্রতিবেদনটি ব্যাখ্যা করে যে এই বিশেষ নির্যাসে ভিটামিন এ, ভিটামিন সি, ভিটামিন ই, ফ্ল্যাভোনয়েড এবং পলিফেনলের মধ্যে কিছু আছে কি না।

উপসংহার

সামগ্রিক অনুসন্ধান পরামর্শ দেয় যে RVE কিডনিকে সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত ক্ষতি থেকে রক্ষা করতে শারীরবৃত্তীয়ভাবে কার্যকর। অতএব, সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত নেফ্রোটক্সিসিটি প্রশমিত করার জন্য দায়ী সঠিক যৌগগুলি ব্যাখ্যা করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ যা মানুষের প্রয়োগের জন্য উপকারী হতে পারে।

cistanche tubolosa নির্যাস

স্বীকৃতি

লেখকরা RNA পরিমাপ করার জন্য পরীক্ষাগার সহায়তা প্রদানের জন্য বাংলাদেশ বৈজ্ঞানিক ও শিল্প গবেষণা কাউন্সিল (বিসিএসআইআর), রাজশাহী শাখার কাছে কৃতজ্ঞ।

লেখকদের অবদান

MMH পরীক্ষামূলক নকশা, পরীক্ষা, তথ্য বিশ্লেষণ এবং প্রস্তুতি, পাণ্ডুলিপি লেখা এবং সম্পাদনা, পাণ্ডুলিপি সংশোধন এবং খসড়া সম্পাদন করে; MST এবং MME পরীক্ষা এবং ডেটা বিশ্লেষণ সম্পন্ন করেছে; AME & MAR তত্ত্বাবধান এবং সম্পদে অবদান রেখেছে; এএইচ ধারণা, তত্ত্বাবধান, সম্পদ এবং পাণ্ডুলিপি সম্পাদনার জন্য দায়ী ছিলেন। সব লেখক

পাণ্ডুলিপি পর্যালোচনা. লেখকরা চূড়ান্ত পাণ্ডুলিপি পড়েন এবং অনুমোদন করেন।

অর্থায়ন

বর্তমান কাজটি Taif University Researchers Supporting Project number (TURSP - 2020/75), Taif University, Taif, সৌদি আরব দ্বারা অর্থায়ন করা হয়েছে।

তথ্য ও উপকরণের প্রাপ্যতা।

সমস্ত প্রাসঙ্গিক ডেটা উপলব্ধ এবং সংশ্লিষ্ট লেখকের অনুরোধের ভিত্তিতে প্রদান করা যেতে পারে।

ঘোষণাপত্র

নৈতিকতার অনুমোদন এবং অংশগ্রহণের সম্মতি

এই পরীক্ষাটি করার নীতিগুলি ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল, মেডিকেল এথিক্স, বায়োসেফটি, এবং বায়োসিকিউরিটি কমিটি (IAMEBBC), ইনস্টিটিউট অফ বায়োলজিক্যাল সায়েন্সেস (IBSc), রাজশাহী বিশ্ববিদ্যালয় দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল এবং মেমো নম্বর 31/{{1} এর অধীনে প্রদান করা হয়েছিল }IAMEBBC/IBSc। সমস্ত পদ্ধতি উপরে উল্লিখিত নৈতিক কমিটি দ্বারা প্রদত্ত নির্দেশিকা এবং প্রবিধান অনুযায়ী সম্পাদিত হয়েছিল। এই অধ্যয়নটি ARRIVE (প্রাণী গবেষণা: Reporting of In Vivo Experiments) নির্দেশিকা মেনে করা হয়েছিল। "অংশগ্রহণের সম্মতি" এই গবেষণার জন্য প্রযোজ্য নয়।

লেখকের বিবরণ

1আণবিক জীববিজ্ঞান এবং প্রোটিন সায়েন্স ল্যাবরেটরি, জেনেটিক ইঞ্জিনিয়ারিং এবং বায়োটেকনোলজি বিভাগ, জীবন ও আর্থ সায়েন্সেস অনুষদ, রাজশাহী বিশ্ববিদ্যালয়, রাজশাহী 6205, বাংলাদেশ। 2আণবিক প্যাথলজি ল্যাবরেটরি, জীববিজ্ঞান ইনস্টিটিউট, রাজশাহী বিশ্ববিদ্যালয়, রাজশাহী 6205, বাংলাদেশ। 3 ডিপার্টমেন্ট অফ বায়োটেকনোলজি, কলেজ অফ সায়েন্স, তায়েফ ইউনিভার্সিটি, পিও বক্স 11099, তায়েফ 21944, সৌদি আরব। 4জেনেটিক্স বিভাগ, কৃষি অনুষদ, আলেকজান্দ্রিয়া বিশ্ববিদ্যালয়, আলেকজান্দ্রিয়া 21545, মিশর।

তথ্যসূত্র

1. বাগচি কে, পুরি এস। স্বাস্থ্য ও রোগে ফ্রি র‌্যাডিক্যাল এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট: একটি পর্যালোচনা। ইস্ট মেডিটার হেলথ জে. 1998; 4:350-60।

2. Koh EM, Lee EK, Song CH, Song J, Chung HY, Chae CH, et al. Ferulate, গমের জীবাণুর একটি সক্রিয় উপাদান, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস-প্ররোচিত PTK/ PTP ভারসাম্যহীনতা এবং PP2A নিষ্ক্রিয়তা কমায়। টক্সিকোল রেস. 2018;34(4):333–41।

3. হাসান এআই, ইব্রাহিম আরওয়াই। এহরলিচের লিভারের কিছু জেনেটিক প্রোফাইল ইরেডিয়েশনের চাপে টিউমার বহনকারী ইঁদুরকে জলোচ্ছাস করে। J Radiat Res Appl Sci. 2014;7(2):188-97।

4. Zhou FL, Zhang WG, Wei YC, Meng S, Bai GG, Wang BY, et al. তীব্র মাইলয়েড লিউকেমিয়ার রিল্যাপসে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস জড়িত। জে বায়োল কেম। 2010;285(20):15010–5।

5. Pham-Huy LA, He H, Pham-Huy C. ফ্রি র‌্যাডিকেল, রোগ ও স্বাস্থ্যে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট। Int J Biomed Sci. 2008; 4:89-96।

6. শ্রীজিওয়াংসা পি, না-বাংচ্যাং কে। ক্যান্সারের অগ্রগতি এবং কেমোরেসিস্ট্যান্সের উপর NAD (P) H-quinone oxidoreductase 1 (NQO1) এর ভূমিকা। জে ক্লিন এক্সপ অনকল। 2017;6:1-6।

7. সিগেল ডি, ইয়ান সি, রস ডি. এনএডি (পি) এইচ: কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস 1 (NQO1) অ্যান্টিটিউমার কুইনোনগুলির সংবেদনশীলতা এবং প্রতিরোধে। বায়োকেম ফার্মাকোল। 2012;83(8):1033–40।

8. Dinkova-Kostova AT, Talalay P. NAD (P) H: কুইনোন গ্রহণকারী oxidoreductase 1 (NQO1), একটি বহুমুখী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম এবং ব্যতিক্রমী বহুমুখী সাইটোপ্রোটেকশন। আর্চ বায়োকেম বায়োফিস। 2010;501(1):116–23।

9. কুলেন জেজে, হিঙ্কহাউস এমএম, গ্র্যাডি এম, গাট এডব্লিউ, লিউ জে, ঝাং ওয়াইপি, এট আল। এনএডিপিএইচ-এর ডিকুমারোল বাধা: কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস একটি সুপারঅক্সাইড-মধ্যস্থতা প্রক্রিয়ার মাধ্যমে অগ্ন্যাশয়ের ক্যান্সারের বৃদ্ধি বাধা দেয়। ক্যান্সার রেস. 2003;63(17):5513–20।

10. ঝাং এক্স, হান কে, ইউয়ান ডিএইচ, মেং সিওয়াই। এনএডি (পি) এইচ-এর অত্যধিক এক্সপ্রেশন: কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস 1 হেপাটোসেলুলার কার্সিনোমা কোষের বিস্তারকে বাধা দেয় এবং AMPK/PGC-1 পথকে সক্রিয় করে প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিস। ডিএনএ সেল বায়োল। 2017;36(4):256–63।

11. Zeekpudsa P, Kukongviriyapan V, Senggunprai L, Sripa B, Prawan A. NAD (P) H-quinone oxidoreductase 1 এর দমন কেমোথেরাপিউটিক এজেন্টের প্রতি কোলাঞ্জিওকার্সিনোমা কোষের সংবেদনশীলতা বৃদ্ধি করেছে। J Exp Clin Cancer Res. 2014;33(1):1-13।

12. দাসারি এস, চৌনউউ পিবি। ক্যান্সার থেরাপিতে সিসপ্ল্যাটিন: কর্মের আণবিক প্রক্রিয়া। ইউর জে ফার্মাকল। 2014;740:364–78।

13. ঝু এক্স, জিয়াং এক্স, লি এ, ঝাও জেড, লি এস. এস-অ্যালিলমারক্যাপ্টোসিস্টাইন অ্যাপোপটোসিস, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং প্রদাহ দমনের মাধ্যমে সিসপ্ল্যাটিন-প্ররোচিত নেফ্রোটক্সিসিটি হ্রাস করে। পুষ্টি উপাদান. 2017;9(2):166।

14. Matkowski A. অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট উৎপাদনের জন্য ভিট্রো সংস্কৃতিতে উদ্ভিদ-একটি পর্যালোচনা। বায়োটেকনোল অ্যাড. 2008;26(6):548-60।

15. এল-বাকরি এএ, মোস্তফা হাম, আলম ইএ। বৃদ্ধির উদ্ভিজ্জ পর্যায়ে Rumex vicarious L. এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ। এশিয়ান জে ফার্ম ক্লিন রেস. 2012;5:111–7।

16. Rechinger KH. অস্ট্রেলিয়ায় রুমেক্স (পলিগোনাসি): একটি পুনর্বিবেচনা। নুইটসিয়া। 1984; 5:75- 122।

17. শাহাত এএ, আলসাইদ এমএস, আল্যাহ্যা এমএ, হিগিন্স এম, ডিনকোভা-কোস্তোভা এটি। এনএডি (পি) এইচ: সৌদি আরবের কিছু ঔষধি গাছের কুইনোন অক্সিডোরেডাক্টেস 1 প্রবর্তক কার্যকলাপ। প্লান্টা মেড। 2013;79(06):459–64।

18. এল-হাওয়ারি এসএ, সোক্কার এনএম, আলী জেডওয়াই, ইয়েহিয়া এমএম। Rumex vicarious L. J Food Sci এর বায়োঅ্যাকটিভ যৌগের একটি প্রোফাইল। 2011;76(8): C1195–202।

19. Barbosa-Filho JM, Alencar AA, Nunes XP, Tomaz AC, Sena-Filho JG, Athayde- Filho PF, et al. আলফা-, বিটা-, গামা-, ডেল্টা-এবং এপসিলন-ক্যারোটিনের উত্স: একটি বিংশ শতাব্দীর পর্যালোচনা। রেভ ব্রাস। 2008;18(1):135-54।

20. Laouini SE, Ouahrani MR. ফাইটোকেমিক্যাল স্ক্রীনিং, ইন ভিট্রো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং রুমেক্স ভিকারিয়াস এল. নির্যাসের অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল কার্যকলাপ। সায়েন্স স্টাডি রেস: Chem Chem Engi Biotech Food Ind. 2017;18:367–76.