সাইক্লোস্পোরিন-প্ররোচিত টেসটোস্টেরন সংশ্লেষণ এবং স্পার্মাটোজেনিক অ্যাপোপটোসিসের উপর নিউ ওয়েনশেন শেংজিং ডেকোশনের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব
Mar 03, 2022
যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com
জিয়াওয়ান প্যান , জিয়ান ওয়াং , জুয়েনান ওয়াং , ওয়ানশেং ঝাং 4 , ঝানজুয়ান সান 1 , জুয়ান জুয়ান লিয়াং , জুয়ে ঝাং , ওয়েনজুন লি এবং ঝিক্সিন লি
বিমূর্ত
বর্তমান গবেষণার লক্ষ্য নতুন ওয়েনশেন শেংজিং ডেকোকশন (নতুন WSSJD; কর্নু সার্ভি নিপ্পন পারভুম, প্যানাক্স জিনসেং, সাইনোমোরিয়াম সোলারিয়াম সহ) এর সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবগুলি তদন্ত করা।Cistanche deserticola, Radix Astragali, Epimedium brevicornum, এবং Angelica Sinensis) সাইক্লোস্পোরিন-প্ররোচিত টেসটোস্টেরন সংশ্লেষণ এবং ইঁদুরের স্পার্মাটোজেনিক অ্যাপোপটোসিসের উপর। মোট 90 জন প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ কুনমিং ইঁদুরকে নিম্নলিখিত 6 টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল: নিয়ন্ত্রণ (কোন হস্তক্ষেপ নয়), ডাইমিথাইলসালফক্সাইড (DMSO; শুধুমাত্র DMSO প্রাপ্ত), সাইক্লোস্পোরিন A (CSA), ক্লোমিফেন সাইট্রেট (CC; CsA প্লাস CC, 15 মিলিগ্রাম/কেজি /দিন), WSSJD (CsA প্লাস WSSJD, অপরিশোধিত ওষুধ 12 g/kg/day) এবং নতুন WSSJD (CsA প্লাস নতুন WSSJD, অপরিশোধিত ওষুধ 12 গ্রাম/কেজি/দিন)। সমস্ত ইঁদুরকে মৌখিক গ্যাভেজের মাধ্যমে 30 দিনের জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল। সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়ার বিকাশের মূল্যায়ন করার জন্য অণ্ডকোষগুলিকে পরবর্তীতে হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন দিয়ে স্থির করা হয়েছিল এবং দাগ দেওয়া হয়েছিল। ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল কৌশলগুলি টেস্টিকুলার লেডিগ কোষগুলিতে লুটিনাইজিং হরমোন রিসেপ্টর (এলএইচআর) এবং P450 সাইড-চেইন ক্লিভেজ (P450scc) এর অভিব্যক্তি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। এছাড়াও, অণ্ডকোষে শুক্রাণু কোষের অ্যাপোপটোসিস একটি টার্মিনাল ডিঅক্সিনিউক্লিওটিডিল ট্রান্সফারেজ-মিডিয়াটেড ডিইউটিপি নিক-এন্ড লেবেলিং অ্যাস ব্যবহার করে সনাক্ত করা হয়েছিল এবং এপিডিডাইমিসে শুক্রাণুর প্রাথমিক অ্যাপোপটোসিস বেঁচে থাকার হার বিশ্লেষণ করতে ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করা হয়েছিল। CsA এবং CC গ্রুপের সাথে তুলনা করে, নতুন WSSJD প্রশাসন সিরাম টেস্টোস্টেরনের মাত্রা এবং টেস্টিকুলার লেডিগ কোষে LHR এবং P450scc এর অভিব্যক্তি উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে (P<0.05), while="" the="" apoptosis="" of="" spermatogenic="" cells="" in="" the="" seminiferous="" tubules="" and="" early="" apoptosis="" of="" mature="" sperm="" were="" significantly="" decreased=""><0.05). these="" results="" suggest="" that="" new="" wssjd="" may="" ameliorate="" csa-induced="" spermatogenic="" damage="" in="" male="" mice="" by="" enhancing="" testosterone="" synthesis="" and="" the="" secretion="" of="" testicular="" leydig="" cells,="" and="" by="" reducing="" the="" apoptosis="" of="" spermatogenic="">
ভূমিকা
সাইক্লোস্পোরিন এ (সিএসএ) একটি সাধারণভাবে ব্যবহৃত ইমিউনোসপ্রেসিভ এজেন্ট যা বিশেষভাবে টি কোষকে লক্ষ্য করে এবং ইন্টারলিউকিনের নিঃসরণকে বাধা দেয়-2, এবং নাটকীয়ভাবে লিভার, কিডনি এবং কর্নিয়া প্রতিস্থাপনের সাফল্যের হার, সেইসাথে বেঁচে থাকার হার বৃদ্ধি করে। প্রাপক (1-3)। যাইহোক, দীর্ঘমেয়াদী CsA ব্যবহার দ্বারা প্ররোচিত ইমিউনোসপ্রেশন উল্লেখযোগ্যভাবে কার্ডিওভাসকুলার রোগ, সংক্রমণ এবং ম্যালিগন্যান্ট টিউমারের ঝুঁকি বাড়ায় (4)। Eid et al (5) রিপোর্ট করেছে যে পুরুষ কিডনি প্রতিস্থাপন প্রাপকদের মধ্যে সিরাম CsA-এর ঘনত্বের সাথে শুক্রাণুর ঘনত্ব এবং গতিশীলতা নেতিবাচকভাবে সম্পর্কযুক্ত ছিল, পরামর্শ দেয় যে CsA পুরুষ প্রাপকদের মধ্যে প্রজনন সিস্টেমের কর্মহীনতা প্ররোচিত করতে পারে। অধিকন্তু, এটি নথিভুক্ত করা হয়েছে যে সিএসএ প্রতিবন্ধী শুক্রাণুজনিত এবং পুরুষ প্রজনন সিস্টেমের ক্ষতির জন্য দায়ী হতে পারে (6)।
পূর্ববর্তী গবেষণায় প্রমাণিত হয়েছে যে CsA টেস্টোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণ এবং অণ্ডকোষে নিঃসরণকে প্রভাবিত করে সিরাম টেস্টোস্টেরনের মাত্রা হ্রাস করেছে। তিনি এট আল (7) লক্ষ্য করেছেন যে 40 mg/kg/day CsA দিয়ে চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চ স্তরের লুটিনাইজিং হরমোন (LH) এবং উল্লেখযোগ্যভাবে নিম্ন স্তরের টেসটোসটেরন প্রদর্শন করে, যা অণ্ডকোষের বিকাশকে বাধাগ্রস্ত করে। আলী এট আল (8) রিপোর্ট করেছেন যে CsA এর সাথে চিকিত্সা লেডিগ কোষের ঝিল্লিতে LH রিসেপ্টর (LHR) এর অভিব্যক্তি হ্রাস করে, যা পরবর্তীতে LH- মধ্যস্থতাকারী টেস্টোস্টেরন সংশ্লেষণ এবং লেডিগ কোষ থেকে নিঃসরণ হ্রাস করে। সীতালক্ষ্মী এট আল (9) এর আরেকটি গবেষণায় জানা গেছে যে CsA 17টি আলফা-হাইড্রোক্সিলেসের কার্যকলাপকে অসহযোগিতায় এবং 17 -হাইড্রোক্সিস্টেরয়েড ডিহাইড্রোজেনেস কার্যকলাপকে টেসটোসটেরন বায়োসিন্থেসিস চলাকালীন প্রতিযোগিতামূলকভাবে বাধা দিয়ে টেস্টোস্টেরনের মাত্রা হ্রাস করেছে, এবং CsA বাধার জন্য প্রাথমিক সাইটটি ছিল আন্তঃসম্পর্কিত সাইক্লিডেনস। মনোফসফেট উদ্দীপনা। অধিকন্তু, এই প্রতিবেদনটি ইঙ্গিত দেয় যে লেডিগ কোষে CsA দ্বারা প্ররোচিত টেস্টোস্টেরন নিঃসরণ হ্রাস পুরুষ প্রজনন ব্যবস্থার বিকাশ এবং প্রজনন ক্ষমতা রক্ষণাবেক্ষণকে সরাসরি প্রভাবিত করে। সীতালক্ষ্মী এট আল (10) অন্তঃসত্ত্বা টেস্টোস্টেরনের মাত্রা বাড়ানোর জন্য সিএসএ-চিকিত্সা করা ইঁদুরের মধ্যে এক্সোজেনাস টেস্টোস্টেরন ইনজেকশন দিয়েছেন। এটা দেখা গেছে যে এক্সোজেনাস টেস্টোস্টেরনের উচ্চ মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে প্রজনন অঙ্গের ওজন, ফলিকল-স্টিমুলেটিং হরমোন (এফএসএইচ) এর সিরাম মাত্রা পুনরুদ্ধার করে এবং জীবাণু কোষের সংখ্যা বৃদ্ধি করে, এইভাবে ইঙ্গিত করে যে শুক্রাণুজনিত রোগের CsA-প্ররোচিত দুর্বলতা আংশিকভাবে প্রতিরোধ করা যেতে পারে। টেস্টোস্টেরন প্রশাসন (10)। যাইহোক, এক্সোজেনাস টেস্টোস্টেরন ক্ষতিগ্রস্থ টেস্টিকুলার টিস্যু মেরামত করার জন্য অপর্যাপ্ত বলে প্রমাণিত হয়েছিল, কারণ টেস্টোস্টেরন নিঃসরণ এবং স্পার্মাটোজেনেসিস এখনও CsA দ্বারা প্রভাবিত ছিল এবং শুক্রাণু এবং স্পার্মাটোজেনিক কোষগুলিতে অ্যাপোপটোসিসের উচ্চ হার পরিলক্ষিত হয়েছিল (10)।
ওয়েনশেন শেংজিং ডেকোকশন (ডব্লিউএসএসজেডি) 15টি ভেষজ ওষুধ নিয়ে গঠিত, যার মধ্যে রয়েছে প্রাথমিকভাবে কর্নু সার্ভি নিপ্পন পারভুম, প্যানাক্স জিনসেং, সাইনোমোরিয়াম সোলারিয়াম,Cistanche deserticola, Radix Astragali, Epimedium brevicorneum, এবং Angelica Sinensis (11)। ডাব্লুএসএসজেডি সাইক্লোফসফামাইড-প্ররোচিত স্পার্মাটোজেনিক অ্যাপোপটোসিস (11) উপশম করার জন্য প্রদর্শিত হয়েছে। WSSJD এর থেরাপিউটিক প্রভাবকে আরও উন্নত করার জন্য, বর্তমান গবেষণায় WSSJD উপাদানগুলির ডোজ সামঞ্জস্য করে CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার টিস্যু ক্ষতির প্রক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে একটি নতুন WSSJD তৈরি করা হয়েছে। আধুনিক ফার্মাকোলজিকাল স্টাডিজ প্রমাণ করেছে যে WSSJD-তে antler velvet একটি যৌন হরমোন হিসাবে কাজ করতে পারে (12); রেডিক্স অ্যাস্ট্রাগালি টেস্টিকুলার সার্টোলি কোষের বিস্তার এবং পুষ্টি সরবরাহকে উন্নত করতে পারে (13), এবং প্যানাক্স জিনসেং টেস্টিকুলার হাইপারক্সাইডের মাত্রা হ্রাস করতে পারে এবং স্পার্মাটোজেনিক অ্যাপোপটোসিস (14) প্রতিরোধ করতে পারে। উপরে উল্লিখিত ওষুধগুলি কিডনির কার্যকারিতা বাড়াতে পারে এবং স্পার্মাটোজেনিক কোষগুলির বিকাশকে বাড়িয়ে তুলতে পারে (12-14)। পূর্ববর্তী ক্লিনিকাল গবেষণায় (15,16) পুরুষ বন্ধ্যাত্বের উপর থেরাপিউটিক প্রভাব প্রয়োগ করতে ক্লোমিফেন সাইট্রেট (সিসি) প্রদর্শিত হয়েছে। তদ্ব্যতীত, সিসি উন্নত টেস্টোস্টেরন এবং বীর্যের পরামিতিগুলির সাথে যুক্ত হয়েছে এবং সিসি-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রক্রিয়াগুলি WSSJD (15,16) এর মতো হতে পারে। এছাড়াও, ওয়াং এট আল (17) এর একটি গবেষণায়, ইঁদুরের স্পার্মাটোজেনেসিস ব্যাঘাতের উপর চীনা ওষুধ শেংজিং-এর প্রভাব তদন্ত করতে সিসিকে চিকিত্সা নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। এর উপর ভিত্তি করে, বর্তমান গবেষণায় সিসি একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।
বর্তমান গবেষণায়, টেস্টিকুলার টিস্যুতে নতুন WSSJD-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবের অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াটি পরিবর্তিত ওষুধের থেরাপিউটিক কার্যকারিতা নির্ধারণের জন্য তদন্ত করা হয়েছিল। প্রতিরক্ষামূলক প্রক্রিয়া ব্যাখ্যা করা CsA-প্ররোচিত স্পার্মাটোজেনিক ক্ষতি কমানোর জন্য নতুন WSSJD ব্যবহারের জন্য একটি ভিত্তি প্রদান করতে পারে।
Cistanche deserticola এর প্রভাব: প্রতিরোধস্পার্মাটোজেনিক ক্ষতি
উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ
প্রাণী। চাংচুন ইনস্টিটিউট অফ বায়োলজিক্যাল প্রোডাক্টস কোং লিমিটেড (চাংচুন, চীন) দ্বারা মোট 90টি পুরুষ কুনমিং ইঁদুর (8-সপ্তাহ বয়সী; 35-40 গ্রাম) সরবরাহ করা হয়েছিল। বর্তমান অধ্যয়নটি জিলিন মেডিকেল ইউনিভার্সিটি (চ্যাংচুন, চীন) এর নীতিশাস্ত্র কমিটির অনুমোদন নিয়ে পরিচালিত হয়েছিল। 12 ঘন্টা অন্ধকার-আলো চক্রের অধীনে ইঁদুরগুলিকে 21±3˚C এবং 55‑65 শতাংশ আপেক্ষিক আর্দ্রতায় রাখা হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে একটি স্ট্যান্ডার্ড ল্যাবরেটরি মাউস ডায়েট এবং জীবাণুমুক্ত জলে বিনামূল্যে অ্যাক্সেস দেওয়া হয়েছিল।
WSSJD এর প্রস্তুতি। WSSJD-এর 15টি চীনা ওষুধের উপাদান, যার মধ্যে Cornu Cervi Nippon Parvum, Panax ginseng, Cynomorium solarium,Cistanche deserticola, Radix Astragali, Epimedium brevicornum, এবং Angelica Sinensis (11), Tongrentang (Beijing, China) থেকে কেনা হয়েছিল। এই উপকরণগুলি চীনা ঔষধি ক্বাথ (18) এর ঐতিহ্যগত পদ্ধতি অনুসারে ডিকোকট করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, উপাদানগুলি রেসিপি অনুসারে ওজন করা হয়েছিল, এবং ভেষজগুলিকে নিমজ্জিত করার জন্য মোট 250 মিলি পাতিত জল যোগ করা হয়েছিল। ভেষজগুলি 30 মিনিটের জন্য ভিজিয়ে রাখা হয়েছিল এবং তারপরে গরম করা হয়েছিল। ভেষজগুলি প্রথমে 10 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করা হয়েছিল এবং তারপরে তাপ কমিয়ে 20 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করা হয়েছিল। 30 মিনিট গরম করার পরে, তরল ক্বাথ ভেষজগুলি থেকে আলাদা করা হয়েছিল, যা আরও 30 মিনিটের জন্য 80˚C তাপমাত্রায় 200 মিলি পাতিত জল দিয়ে ডিকোকট করা হয়েছিল। এই প্রক্রিয়াটি পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল এবং গজের 4-5 স্তরগুলির মাধ্যমে ডিকোশন তরলের চূড়ান্ত পরিমাণ ফিল্টার করা হয়েছিল। তরলটিও ভেষজ থেকে ফিল্টার করা ক্বাথের মধ্যে চেপে দেওয়া হয়েছিল। ক্বাথটি পরবর্তীকালে 80˚C তাপমাত্রায় একটি জলের স্নানে 6‑7 ঘন্টার জন্য উত্তপ্ত করা হয় যতক্ষণ না ঘনত্ব 2 গ্রাম অপরিশোধিত ওষুধ/মিলি পৌঁছায় এবং ব্যবহারের আগে ক্বাথটি 4˚C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়। Panax ginseng, Cynomorium solarium, Radix Astragali, এবং Epimedium brevicornum-এর ডোজগুলিতে সামান্য সামঞ্জস্য সহ WSSJD-এর প্রণয়নের ভিত্তিতে নতুন WSSJD তৈরি করা হয়েছিল। ডিকোকটিং পদ্ধতি WSSJD এর মতই ছিল। নতুন WSSJD নিম্নলিখিতগুলি নিয়ে গঠিত: প্যানাক্স জিনসেং, 6 গ্রাম; সাইনোমোরিয়াম সোলারিয়াম, 9 গ্রাম; Radix Astragali, 12 গ্রাম; Epimedium brevicornum, 6 গ্রাম; কর্নু সার্ভি নিপ্পন পারভুম, 1 গ্রাম;Cistanche deserticola, 9 গ্রাম; অ্যাঞ্জেলিকা সিনেনসিস, 6 গ্রাম; ফ্ল্যাটস্টেম মিল্কভেচ বীজ, 9 গ্রাম; Rhizoma Dioscoreae, 15 গ্রাম; বড় মাথা Atractylodes Rhizome, 6 গ্রাম; Ligusticum wallichii, 3 গ্রাম; Radix Paeoniae Alba, 6 গ্রাম; দারুচিনি ক্যাসিয়া, 1 গ্রাম; Costustoot, 1.5 গ্রাম, এবং Fructus Foeniculi, 3 গ্রাম।
অশোধিত ওষুধের নির্যাসের ঘনত্ব নিম্নরূপ নির্ধারণ করা হয়েছিল: অপরিশোধিত উপাদানের ওজন/চূড়ান্ত আয়তন। এই গণনা পদ্ধতিটি ঐতিহ্যগত চীনা ওষুধের (19-21) গবেষণায় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ওষুধ প্রশাসন। ইঁদুরগুলি এলোমেলোভাবে 6 টি গ্রুপে বিভক্ত ছিল (প্রতি গ্রুপে 15 ইঁদুর) এবং ইন্ট্রাগাস্ট্রিকভাবে ওষুধ দিয়ে পরিচালিত হয়েছিল। গ্রুপগুলি নিম্নরূপ ছিল: নিয়ন্ত্রণ (সাধারণ স্যালাইন); ডাইমেথাইলসালফক্সাইড (DMSO); CsA; সিসি; WSSJD; এবং নতুন WSSJD। CsA, CC, WSSJD, এবং নতুন WSSJD গ্রুপের ইঁদুরগুলিকে 15 mg/kg/day CsA (Shanxi Powerdone Pharmaceutics Co., Ltd., Datong, China) দিয়ে 30 দিনের জন্য intraperitoneally (ip) ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল, যেমন পূর্বে বর্ণিত হয়েছে (8) ) নিয়ন্ত্রণে থাকা ইঁদুর এবং DMSO গোষ্ঠীগুলি 30-দিনের পরীক্ষামূলক সময় জুড়ে, যথাক্রমে, সাধারণ স্যালাইন বা DMSO দ্রাবকের সমান পরিমাণে একটি দৈনিক আইপি ইনজেকশন দিয়েছিল। সাধারণ স্যালাইনে মিশ্রিত DMSO এর ঘনত্ব ছিল 3.25 শতাংশ (v/v)। CC গ্রুপটি 21.6 mg/kg/day CC (GKH ফার্মাসিউটিক্যাল, লিমিটেড, গুয়াংঝো, চীন) দিয়ে পরিচালিত হয়েছিল যেমন পূর্বে বর্ণিত হয়েছে (13), যা 3.25 শতাংশ (v/v) DMSO (pH{{14}) তেও মিশ্রিত করা হয়েছিল }.2)। WSSJD এবং নতুন WSSJD গ্রুপের ইঁদুরগুলি যথাক্রমে WSSJD এবং নতুন WSSJD এর 12 গ্রাম অপরিশোধিত ড্রাগ/কেজি/দিনের সাথে পরিচালিত হয়েছিল।হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) দাগ। ইঁদুরের টেস্টগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং অবিলম্বে 24 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড (pH=7.2) এ স্থির করা হয়েছিল, তারপরে ইথানল ডিহাইড্রেশন, ইথানল অপসারণের জন্য জাইলিন চিকিত্সা, মোম এম্বেডিং এবং সেকশনিং। হিস্টোলজিকাল বিভাগগুলি (5 µm) একটি ঘূর্ণমান মাইক্রোটোম ব্যবহার করে প্রাপ্ত হয়েছিল। এগুলি H&E স্টেনিংয়ের জন্য কাচের স্লাইডে লাগানো ছিল৷ সেমিনিফেরাস টিউবুলের বিকাশের মূল্যায়ন করতে এবং হিস্টোমেট্রিক ডেটা প্রাপ্ত করার জন্য হাইলাইট হিস্টোপ্যাথোলজিকাল মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে টেস্টিকুলার বিভাগগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। জনসেন স্কোরিং সিস্টেম (22) ব্যবহার করে সেমিনিফেরাস টিউবুলসের বিকাশ মূল্যায়ন করা হয়েছিল।
এলিসা। চিকিত্সার 30 দিনে, CO2 সহ ইথানেশিয়ার আগে ইঁদুরগুলিকে 10 শতাংশ ক্লোরাল হাইড্রেট (Shanghai Guoyao Chemical Reagent Co., Ltd) 0.004 ml/g দৈহিক ওজন ip দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল৷ ট্রাঙ্কের রক্ত সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং সিরাম আলাদা করে ‑20˚C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, রক্ত 1.5‑ml টিউবে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং রাতারাতি 4˚C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। তারপর টিউবটি 1,300 xg এ 4˚C তাপমাত্রায় 6 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং সিরাম সংগ্রহ করা হয়েছিল। ELISA কিটস (Shanghai Elisa Biotech Co., Ltd., Shanghai, China) টেস্টোস্টেরন (বিড়াল নং EIA-2380) এবং LH (বিড়াল নং EIA-2385) এর সিরাম বিষয়বস্তু নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল ) প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুযায়ী। অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) একটি মডেল 680 মাইক্রোপ্লেট রিডার (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল এবং টেসটোসটেরন এবং LH-এর মাত্রাগুলি স্ট্যান্ডার্ড বক্ররেখার উপর ভিত্তি করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।
ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি। টেস্টিকুলার টিস্যুগুলি 24 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় 4 শতাংশ ফর্মালডিহাইডে স্থির করা হয়েছিল এবং প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল। প্যারাফিন বিভাগগুলি 5 µm বিভাগে কাটা হয়েছিল এবং পরবর্তীকালে ডিওয়াক্স করা হয়েছিল। অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল 0-এ সেকশন ইনকিউবটিং করে। বিভাগগুলি পরবর্তীকালে 1 ঘন্টার জন্য ঘরের তাপমাত্রায় 5 শতাংশ বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (সিগমা-অলড্রিচ; মার্ক কেজিএ, ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি; A3675) দিয়ে ব্লক করা হয়েছিল। ব্লক করার পরে, বিভাগগুলি LHR (বিড়াল নং L6792; সিগমা-অলড্রিচ; মার্ক কেজিএ; 1:200) বা P450 সাইড-চেইন ক্লিভেজ (P450scc; বিড়াল নং ab75497; Abcam, Cambridge) এর বিরুদ্ধে খরগোশের পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। ; 1:200) রাতের অন্ধকারে 4˚C তাপমাত্রায়। স্ট্রেপ্টাভিডিন-বায়োটিন কমপ্লেক্স (SABC) পদ্ধতিটি প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুসারে একটি SABC কিট (SA2010; Boster Biological Technology, Pleasanton, CA, USA) ব্যবহার করে LHR এবং P450scc এর অভিব্যক্তি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ ইঁদুর থেকে বিচ্ছিন্ন টিস্যুগুলির জন্য, প্রাথমিক অ্যান্টিবডি পিবিএস দিয়ে প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। ঝিল্লি বা রক্তরসে হলুদ বা বাদামী দাগযুক্ত লেডিগ কোষগুলিকে এলএইচআর-পজিটিভ কোষ হিসাবে বিবেচনা করা হত। প্রতিটি নমুনা থেকে পাঁচটি স্লাইড প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং লেডিগ টিস্যু অঞ্চলে পাঁচটি ক্ষেত্র এলোমেলোভাবে নির্বাচন করা হয়েছিল এবং একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের অধীনে মূল্যায়ন করা হয়েছিল (বিবর্ধন, x400)। লেডিগ টিস্যু অঞ্চলে ইতিবাচক কোষের গড় ওডি ইমেজ-প্রো প্লাস 6.0 সফ্টওয়্যার (মিডিয়া সাইবারনেটিক্স, ইনক।, রকভিল, এমডি, ইউএসএ) ব্যবহার করে প্রাপ্ত হয়েছিল। LHR এবং P450scc-এর অভিব্যক্তিগুলি OD মানগুলির সমানুপাতিক ছিল, উচ্চতর OD মানগুলি উচ্চ প্রোটিনের অভিব্যক্তিকে প্রতিনিধিত্ব করে।
টার্মিনাল ডিঅক্সিনিউক্লিওটিডিল ট্রান্সফারেজ (TdT)-মধ্যস্থিত dUTP নিক-এন্ড লেবেলিং (TUNEL) অ্যাস। ইঁদুরের অণ্ডকোষ বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল, মোমের মধ্যে এম্বেড করা হয়েছিল এবং বিভাগ করা হয়েছিল। বিভাগগুলি (5-µm পুরু) তারপরে TUNEL অ্যাসে কিট (MK1024; বোস্টার বায়োলজিক্যাল টেকনোলজি) ব্যবহার করে দাগ দেওয়া হয়েছিল, নির্মাতার প্রোটোকল অনুসারে। সংক্ষেপে, নিয়ন্ত্রণ (স্বাভাবিক স্যালাইন), DMSO, CsA, CC, WSSJD এবং নতুন WSSJD গ্রুপগুলি থেকে টেস্টিকুলার টিস্যুগুলি 37˚C তাপমাত্রায় 30 মিনিটের জন্য বায়োটিন-লেবেলযুক্ত ডিগক্সিন অ্যান্টিবডির 1:100 তরল ব্যবহার করে দাগ দেওয়া হয়েছিল। দাগযুক্ত ইঁদুরের ইন্টারস্টিশিয়াল এপিথেলিয়াল টিস্যু (কিটে সরবরাহ করা) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং বায়োটিন-লেবেলযুক্ত ডিগক্সিন অ্যান্টিবডির পরিবর্তে পিবিএস দিয়ে ইনকিউব করা নমুনাগুলি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। সবুজ পারমাণবিক স্টেনিং প্রদর্শনকারী TUNEL-পজিটিভ কোষগুলির ফ্রিকোয়েন্সি একটি লেজার স্ক্যানিং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। মোট 10টি র্যান্ডম ক্ষেত্র উচ্চ বিবর্ধন (x400) এর অধীনে মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং ইতিবাচক কোষগুলি গণনা করা হয়েছিল। প্রতি ক্ষেত্রের ইতিবাচক কোষের গড় সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল।
প্রোপিডিয়াম আয়োডাইড (পিআই) বা অ্যানেক্সিন ভি-ফ্লুরোসেসিন আইসোথিওসায়ানেট (এফআইটিসি) স্টেনিং এবং প্রবাহ সাইটোমেট্রি বিশ্লেষণ। কউডা এপিডিডাইমিসটি নিম্নলিখিত বলিদানে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং এপিডিডাইমিস সাসপেনশন পাওয়ার জন্য এপিডিডাইমিস থেকে 2 মিলি পিবিএস-এ 37˚C তাপমাত্রায় শুক্রাণু নির্গত করার জন্য এপিডার্মিসটি একটি ব্লেড দিয়ে কাটা হয়েছিল। সাসপেনশনগুলি পরবর্তীতে শুক্রাণুকে সাঁতার কাটতে দেওয়ার জন্য 10 মিনিটের জন্য 37˚C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। শুক্রাণুর একত্রীকরণ বাতিল করা হয়েছিল এবং অবশিষ্ট শুক্রাণু নমুনাগুলিকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং 106 কোষ / মিলি ঘনত্ব দেওয়ার জন্য পিবিএস-এ পুনরায় স্থগিত করা হয়েছিল। প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল অনুসারে শুক্রাণু অ্যাপোপটোসিস একটি অ্যানেক্সিন ভি-এফআইটিসি অ্যাপোপটোসিস সনাক্তকরণ কিট (নানজিং কীজেন বায়োটেক কোং, লিমিটেড, নানজিং, চীন) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, 1 মিলি স্পার্ম সাসপেনশন 10 μl PI দিয়ে বা 500 μl বাইন্ডিং বাফার এবং 5 μl অ্যানেক্সিন V-FITC দিয়ে ঘরের তাপমাত্রায় 10 মিনিটের জন্য অন্ধকারে দাগ দেওয়া হয়েছিল। Epics XL ফ্লো সাইটোমেট্রি (Beckman Coulter, Inc.) এবং একটি TetraONE™ সিস্টেম (6915050; Beckman Coulter, Inc.) ব্যবহার করে কোষগুলি অবিলম্বে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। অ্যাপোপটোসিসের প্রাথমিক পর্যায়ে কোষগুলি অ্যানেক্সিন ভি-পজিটিভ স্টেনিং দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং নেক্রোটিক কোষগুলি পিআই-পজিটিভ স্টেনিং দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল।
পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ. SPSS 13 ব্যবহার করে ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। Tukey-এর পোস্ট-হক পরীক্ষা অনুসরণ করে ভিন্নতার এক-তরফা বিশ্লেষণ ব্যবহার করে তাত্পর্যের জন্য গোষ্ঠীর মধ্যে পার্থক্যগুলি মূল্যায়ন করা হয়েছিল। পৃ<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Cistanche deserticola
ফলাফল
টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস টিউবুলসের বিকাশে নতুন WSSJD-এর প্রভাব। মাউস টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস টিউবুলসের বিকাশের উপর নতুন WSSJD-এর সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব তদন্ত করতে, H&E-দাগযুক্ত মাউস টেস্টেসের রূপবিদ্যা হালকা মাইক্রোস্কোপির অধীনে তুলনা করা হয়েছিল। CsA এবং CC গ্রুপের ইঁদুরের সেমিনিফেরাস টিউবিউলগুলি নিয়ন্ত্রণের তুলনায় টিউবিউল ফ্রেঞ্জের সংকোচন, টিউবুলের ব্যাস হ্রাস এবং টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়ামের স্তরগুলি হ্রাস করেছে। এছাড়াও, স্পার্মাটোজেনিক কোষগুলি একটি বিকৃত ব্যবস্থা প্রদর্শন করেছিল, শুক্রাণুজনিত কোষের সংখ্যা হ্রাস পেয়েছিল এবং কিছু পরিপক্ক শুক্রাণু লুমেনে দৃশ্যমান ছিল (চিত্র 1)। DMSO, WSSJD, এবং নতুন WSSJD গোষ্ঠীর ইঁদুরগুলিতে, টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়ার আরও স্তর দৃশ্যমান ছিল এবং সেমিনিফেরাস টিউবুল ফ্রিঞ্জ সংকোচন বা ধস ছাড়াই একত্রিত হয়েছিল (চিত্র 1)। জনসেনের স্কোর DMSO গ্রুপ এবং কন্ট্রোল গ্রুপের মধ্যে বা CC এবং DMSO গ্রুপের মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল না। যাইহোক, কন্ট্রোল গ্রুপের তুলনায় CsA গ্রুপ এবং WSSJD গ্রুপে জনসেনের স্কোর উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে এবং WSSJD এবং নতুন WSSJD গ্রুপের স্কোর CC বা CsA গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (P<0.05; table="" i).="" these="" results="" indicated="" that="" new="" wssjd="" and="" wssjd="" promoted="" the="" development="" of="" seminiferous="" epithelium="" following="" csa="">
সিরাম টেস্টোস্টেরন এবং এলএইচ-এ নতুন WSSJD-এর প্রভাব। সিরামে টেস্টোস্টেরন এবং এলএইচ এর মাত্রা পরবর্তীতে পরিমাপ করা হয়েছিল। DMSO প্রশাসনের পরে টেস্টোস্টেরন এবং LH এর সিরাম স্তরগুলি প্রভাবিত হয়নি। বিপরীতে, সিরাম টেস্টোস্টেরন উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রিত ছিল, এবং নিয়ন্ত্রণের তুলনায় সিএসএ-চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে এলএইচ উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল (পি)<0.05; fig.="" 2),="" and="" new="" wssjd="" administration="" significantly="" restored="" testosterone="" to="" near="" control="" levels=""><0.05; fig.="" 2).="" for="" serum="" lh,="" the="" protective="" effects="" of="" wssjd="" were="" similar="" to="" that="" of="" cc;="" however,="" new="" wssjd="" decreased="" serum="" testosterone="" to="" a="" significantly="" lower="" level="" than="" that="" observed="" with="" cc="" and="" wssjd=""><0.05; fig.="" 2),="" suggesting="" a="" superior="" protective="" effect="" of="" new="" wssjd="" over="" cc="" or="">
LHR এবং P450scc এর অভিব্যক্তিতে নতুন WSSJD এর প্রভাব। P450scc এবং LHR-এর অভিব্যক্তিগুলি ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (ডুমুর 3 এবং 4) দ্বারা টেস্টিকুলার লেডিগ কোষগুলিতে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। কন্ট্রোল গ্রুপে, LHR সেমিনিফেরাস টিউবুলের (চিত্র 3A) মধ্যে লেডিগ কোষের বাইরের ঝিল্লিতে প্রকাশ করা হয়েছিল এবং P450cc টেস্টিকুলার লেডিগ কোষের সাইটোপ্লাজমে (চিত্র 4A) প্রকাশ করা হয়েছিল। LHR এবং P450scc এর অভিব্যক্তিতে DMSO চিকিত্সার কোন উল্লেখযোগ্য প্রভাব ছিল না। বিপরীতে, CsA চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রণ ইঁদুরের তুলনায় LHR এবং P450scc এর অভিব্যক্তি হ্রাস করেছে (P<0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b).="" in="" turn,="" the="" expressions="" of="" lhr="" and="" p450scc="" were="" significantly="" increased="" by="" treatment="" with="" cc,="" wssjd,="" or="" new="" wssjd="" compared="" with="" the="" csa="" group=""><0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b).="" in="" addition,="" levels="" of="" lhr="" and="" p450scc="" in="" testicular="" leydig="" cells="" were="" significantly="" higher="" in="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" mice="" compared="" with="" cc="" mice=""><0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b),="" and="" new="" wssjd="" induced="" a="" significantly="" greater="" upregulation="" than="" wssjd=""><0.05; figs.="" 3b="" and="">
স্পার্মাটোজেনিক সেল অ্যাপোপটোসিসে নতুন WSSJD এর প্রভাব। মাউস টেস্টে স্পার্মাটোজেনিক কোষের অ্যাপোপটোসিস টিউনেল অ্যাস দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। অ্যাপোপটোটিক কোষের নিউক্লিয়াস প্রধানত স্পার্মাটোগোনিয়া এবং প্রাথমিক স্পার্মাটোসাইটগুলিতে (চিত্র 5A) পরিলক্ষিত হয়। স্পার্মাটোগোনিয়া স্পার্মাটোসাইটের চেয়ে বড় এবং বেসমেন্ট মেমব্রেনের কাছাকাছি অবস্থিত (23)। অণ্ডকোষে অ্যাপোপটোটিক স্পার্মাটোজেনিক কোষের সংখ্যার উপর DMSO চিকিত্সার কোনও উল্লেখযোগ্য প্রভাব ছিল না। বিপরীতে, CsA-এর সাথে চিকিত্সা নিয়ন্ত্রণ এবং DMSO গ্রুপের তুলনায় অ্যাপোপটোটিক স্পার্মাটোজেনিক কোষের সংখ্যা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে (P<0.05; fig.="" 5b).="" in="" turn,="" administration="" of="" cc,="" wssjd,="" or="" new="" wssjd="" significantly="" reduced="" csa-induced="" apoptosis=""><0.05; fig.="" 5b).="" furthermore,="" the="" number="" of="" apoptotic="" testicular="" spermatogenic="" cells="" in="" the="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" groups="" was="" significantly="" reduced="" compared="" with="" the="" cc="" group=""><0.05), and="" new="" wssjd="" was="" significantly="" more="" effective="" than="" wssjd=""><0.05; fig.="">
শুক্রাণুর বেঁচে থাকা এবং প্রাথমিক অ্যাপোপটোসিসে নতুন WSSJD এর প্রভাব। CsA-প্ররোচিত শুক্রাণু অ্যাপোপটোসিসের বিরুদ্ধে নতুন WSSJD-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব যাচাই করতে, এপিডিডাইমিসে শুক্রাণুর বেঁচে থাকা এবং প্রাথমিক অ্যাপোপটোসিস নির্ধারণ করা হয়েছিল। এপিডিডাইমাল শুক্রাণু পিআই বা অ্যানেক্সিন ভি দিয়ে দাগযুক্ত ছিল এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি (ডুমুর 6 এবং 7) দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। উল্লিখিত ফলাফলগুলি অনুসরণ করে, CsA চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে জীবিত শুক্রাণুর শতাংশ হ্রাস করেছে এবং প্রাথমিকভাবে অ্যাপোপটোটিক শুক্রাণুর শতাংশকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে (P<0.05; figs.="" 6b="" and="" 7b),="" while="" dmso="" treatment="" had="" no="" effect.="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" significantly="" increased="" the="" percentage="" of="" live="" sperm=""><0.05; fig.="" 6b)="" and="" reduced="" the="" percentage="" of="" early="" apoptosis="" sperm=""><0.05; fig.="" 7b)="" compared="" with="" csa="" treatment.="" the="" percentages="" of="" live="" and="" early="" apoptotic="" sperm="" in="" wssjd="" and="" cc="" mice="" did="" not="" differ="" significantly,="" while="" new="" wssjd="" induced="" a="" significantly="" greater="" increase="" in="" live="" sperm="" percentage="" compared="" with="" the="" cc="" group=""><0.05; fig.="" 6b)="" and="" significantly="" decreased="" the="" percentage="" of="" early="" apoptotic="" sperm="" compared="" with="" the="" cc="" and="" wssjd="" groups=""><0.05; fig.="">
আলোচনা
এটি পূর্বে নথিভুক্ত করা হয়েছে যে একটি ইমিউনোসপ্রেসিভ এজেন্ট হিসাবে CsA এর দীর্ঘমেয়াদী ব্যবহার প্রজনন ক্ষমতাকে প্রভাবিত করে (6)। Xu (24) রিপোর্ট করেছেন যে CsA এর সাথে চিকিত্সা করা রোগীদের মধ্যে শুক্রাণুর আকারবিদ্যা এবং জীবনীশক্তি একটি চিকিত্সা না করা গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল, যেমন 26 জন রেনাল ট্রান্সপ্লান্ট প্রাপকের বীর্যের নমুনায় দেখা গেছে CsA এর বিভিন্ন ডোজ এবং 12 জন সুস্থ স্বেচ্ছাসেবকের সাথে চিকিত্সা করা হয়েছে। এটিও দেখা গেছে যে CsA-চিকিত্সা গ্রহীতাদের (24) মধ্যে শুক্রাণুর মাথার বিকৃতির হার উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে CsA এর বীর্যের পরামিতিগুলির উপর ডোজ-নির্ভর প্রভাব রয়েছে। তাই, CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতি কমাতে এবং অঙ্গ প্রতিস্থাপনের পর পুরুষের প্রজনন ক্ষমতার উন্নতি করতে সক্ষম অভিনব ফার্মাকোলজিক্যাল এজেন্ট সনাক্ত করার জন্য গবেষণার নিশ্চয়তা রয়েছে।
টেস্টিসের নির্দিষ্ট মাইক্রোএনভায়রনমেন্ট স্পার্মাটোজেনেসিসকে উৎসাহিত করে, এবং এইভাবে টেস্টিকুলার গঠন এবং কার্যকারিতার প্রতিবন্ধকতা স্পার্মাটোজেনিক অ্যারেস্ট (25) হতে পারে। Monteiro et al(26) 56 দিনের জন্য প্রতিদিন 15 mg/kg মাত্রায় CsA দিয়ে উইস্টার ইঁদুরের চিকিৎসা করেছেন, এবং CsA-চিকিত্সা করা ইঁদুরের মধ্যে যোজক টিস্যুর একটি বর্ধিত ভলিউম্যাট্রিক অনুপাত এবং লেডিগ কোষের ভলিউমেট্রিক অনুপাত হ্রাস করেছেন। এটাও দেখা গেছে যে CsA সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়ামের অবক্ষয় ঘটায়, যার ফলে সার্টোলি কোষের ভ্যাকুয়ালাইজেশন, অস্বাভাবিক গোলাকার এবং প্রসারিত শুক্রাণু, এবং লুমেন (26) সংলগ্ন এপিথেলিয়ামের সীমানায় অবশিষ্ট সাইটোপ্লাজম জমা হয়। বর্তমান গবেষণায়, কুনমিং ইঁদুরকে 30 দিনের জন্য প্রতিদিন 15 মিলিগ্রাম/কেজি CsA দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল, যা সেমিনিফেরাস টিউবুলের সংকোচন এবং ব্যাস হ্রাস, সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়াম স্তর হ্রাস, সেমিনিফেরাস কোষগুলির বিশৃঙ্খলা, পরিপক্কতা হ্রাসের দিকে পরিচালিত করে। লুমেনে শুক্রাণু এবং জনসেনের স্কোর উল্লেখযোগ্যভাবে কমে গেছে।
উপরন্তু, CsA চিকিৎসার মাধ্যমে অণ্ডকোষের গঠন মারাত্মকভাবে ক্ষতিগ্রস্ত হয়। বর্তমান গবেষণায় CsA-চিকিত্সা করা ইঁদুরের অণ্ডকোষে নতুন চীনা ওষুধ হিসেবে নতুন WSSJD-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবও মূল্যায়ন করা হয়েছে। এটি দেখা গেছে যে টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস এপিথেলিয়াল স্তর এবং সেমিনিফেরাস কোষগুলির বিন্যাস নতুন WSSJD এর সাথে চিকিত্সার পরে পুনরুদ্ধার করা হয়েছিল। এছাড়াও, নতুন WSSJD গ্রুপের ইঁদুরগুলি সংকোচন বা পতন ছাড়াই সমন্বিত সেমিনিফেরাস টিউবুলগুলি প্রদর্শন করেছিল এবং CsA-চিকিত্সা করা ইঁদুরের তুলনায় জনসেনের স্কোর উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে WSSJD উল্লেখযোগ্যভাবে CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতি মেরামত করেছে, যা ইঙ্গিত করে যে এই ভেষজ ওষুধ যৌগটি CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতি প্রতিরোধে কার্যকর চিকিত্সা হতে পারে। এই কোষ মেরামতটি এপিথেলিয়ামের মধ্যে কুলুঙ্গির উপর নির্ভরশীল কিনা তাও একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রশ্ন, যা ভবিষ্যতের গবেষণায় তদন্ত করা উচিত।
হাইপোথ্যালামিক-পিটুইটারি-টেস্টিকুলার অক্ষ যৌনাঙ্গের কার্যকলাপ নিয়ন্ত্রণে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে (27)। পুরুষ যৌনাঙ্গের বিকাশ এবং কার্যকারিতা হাইপোথ্যালামাস এবং পিটুইটারি গ্রন্থি (28) থেকে হরমোন দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। ক্রুগার এট আল (২৯) স্প্রাগ ডাওলি ইঁদুরকে 25 mg/kg/day CsA বা 40 mg/kg/day CsA দিয়ে 6 দিনের জন্য চিকিত্সা করেছেন এবং পর্যবেক্ষণ করেছেন যে LH এবং FSH-এর সিরামের মাত্রা 2-4 গুণ বেড়েছে, যখন P450scc অভিব্যক্তি কন্ট্রোল গ্রুপে এর 30 শতাংশ কমেছে। এছাড়াও, CsA-চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে সিরাম টেস্টোস্টেরনের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, যার ফলে প্রতিবন্ধী শুক্রাণুজনিত (29)। বর্তমান গবেষণায়, এটি প্রদর্শিত হয়েছিল যে CsA চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে লেডিগ কোষগুলিতে LHR এর অভিব্যক্তি হ্রাস করেছে। যদিও সিরাম LH বৃদ্ধি করা হয়েছিল, LHR-এর প্রকাশ হ্রাস টেসটোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণের LH-মধ্যস্থতা পুনরুদ্ধারকে বাধাগ্রস্ত করতে পারে এবং P450scc-এর অভিব্যক্তি হ্রাস করতে পারে, কারণ টেস্টোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণের হার-সীমিত এনজাইম (30), এইভাবে লেডিগ কোষ দ্বারা টেস্টোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণকে প্রভাবিত করে। নতুন WSSJD-তে অভিনব উপাদান, যেমন পাইলোস এন্টলার, যৌন হরমোন (12) এর মতো প্রভাব প্রদর্শন করে, যা সিরাম টেস্টোস্টেরনের মাত্রা উন্নত করতে পারে এবং সিরাম LH মাত্রা হ্রাস করতে পারে, এইভাবে Leydig কোষে LHR এবং p450scc অভিব্যক্তি বৃদ্ধি করে। উল্লেখযোগ্যভাবে, বর্তমান ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে নতুন WSSJD স্পার্মাটোজেনেসিসকে উন্নীত করার জন্য লেডিগ কোষে টেস্টোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণ এবং নিঃসরণকে উদ্দীপিত করেছে।
সিএসএ-প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং টেস্টিসের ক্ষতি শুক্রাণু এবং স্পার্মাটোজেনিক কোষের ডিসপ্লাসিয়াকে প্ররোচিত করে (31)। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে দীর্ঘমেয়াদী CsA চিকিত্সা প্রাণীর টেস্টিকুলার টিস্যুতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সিস্টেমকে ক্ষতিগ্রস্ত করে, যার ফলে গ্লুটাথিয়ন, গ্লুটাথিয়ন পারক্সিডেস এবং হাইড্রোজেন পারক্সাইডের মাত্রা কমে যায় এবং অণ্ডকোষে ম্যালোনিক ডায়ালডিহাইডের মাত্রা বৃদ্ধি পায় (31)। অতএব, টেস্টিকুলার টিস্যুতে প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির অত্যধিক মাত্রা নির্মূল করা যায় না, যার ফলে শুক্রাণু ঝিল্লির লিপিডের পারক্সিডেশন, ডিএনএ ক্ষতি এবং শুক্রাণুর জীবনীশক্তি হ্রাস পায়। বর্তমান সমীক্ষায় দেখা গেছে যে সিএসএ চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে ডিএনএ ভাঙ্গন এবং সেমিনিফেরাস টিউবুলে স্পার্মাটোজেনিক কোষের অ্যাপোপটোটিক হার বাড়িয়েছে। এপিডিডাইমিসে শুক্রাণুর বেঁচে থাকার হারও হ্রাস পেয়েছে, যখন প্রাথমিক অ্যাপোপটোটিক শুক্রাণুর শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে, যা নির্দেশ করে যে অণ্ডকোষের শুক্রাণুজনিত কার্যকলাপ উল্লেখযোগ্যভাবে ক্ষতিগ্রস্ত হয়েছে। Türk et al (32) নথিভুক্ত করেছেন যে CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতির উপর ইলাজিক অ্যাসিডের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব পুরুষ ইঁদুরের অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে যুক্ত ছিল। বর্তমান গবেষণায় ব্যবহৃত নতুন WSSJD-তে ভেষজ ওষুধ জিনসেং সহ বিভিন্ন অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট উপাদান রয়েছে, যা পূর্বে অণ্ডকোষে হাইপারক্সাইডের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করার জন্য প্রদর্শিত হয়েছে (14)।
বর্তমান সমীক্ষায়, টেস্টোস্টেরন সংশ্লেষণ এবং স্পার্মাটোজেনিক অ্যাপোপটোসিসের CsA-প্ররোচিত প্রতিবন্ধকতার উপর নতুন WSSJD-এর প্রভাবগুলি তদন্ত করা হয়েছিল, এবং এটি দেখা গেছে যে নতুন WSSJD স্পার্মাটোজেনিক কোষ এবং শুক্রাণুর অ্যাপোপটোটিক হারকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে এবং এইভাবে টেস্টিকুলার সেমিনিফারের ক্ষতি মেরামত করেছে। এপিথেলিয়াম হিস্টোকেমিস্ট্রি এবং ফ্লো সাইটোমেট্রি ব্যবহার করে টেস্টিকুলার সেমিনিফেরাস টিউবুলসের রূপবিদ্যা এবং স্পার্মাটোজেনিক কোষ এবং শুক্রাণুর অ্যাপোপটোসিস তদন্ত করা হয়েছিল। যদিও কোষ চক্র বন্টন এবং দৈনিক শুক্রাণু উত্পাদন তদন্ত করা হয়নি, তারা আমাদের গ্রুপের ভবিষ্যতের গবেষণার কেন্দ্রবিন্দু হবে।
WSSJD অণ্ডকোষে টেস্টোস্টেরনের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে এবং স্পার্মাটোজেনিক কোষ এবং শুক্রাণুর অ্যাপোপটোসিস হ্রাস করেছে, যা কার্যকরভাবে সিএসএ-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতি মেরামত করেছে। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে নতুন WSSJD CsA-প্ররোচিত টেস্টিকুলার ক্ষতির চিকিত্সা এবং প্রতিরোধে একটি দরকারী ফার্মাকোলজিকাল এজেন্ট হতে পারে।
সিস্তানচে মরুভূমি পুরো রুর্টস
তথ্যসূত্র
1. পেডারসেন এম এবং সীথারাম এ: অর্থোটোপিক লিভার প্রতিস্থাপনের পরে সংক্রমণ। J Clin Exp Hepatol 4: 347-360, 2014।
2. ভোরা জিকে এবং সিওলিনো জেবি: ননোকুলার প্রদাহের সাথে যুক্ত কর্নিয়াল অ্যালোগ্রাফ্ট প্রতিক্রিয়া। ডিজিট J Ophthalmol 20: 29-31, 2014।
3. De Pasquale C, Veroux M, Indelicato L, Sinagra N, Giaquinta A, Fornaro M, Veroux P, এবং Pistorio ML: কিডনি প্রতিস্থাপনের সাইকোপ্যাথলজিকাল দিক: একটি বহুবিভাগীয় দলের কার্যকারিতা। ওয়ার্ল্ড জে ট্রান্সপ্লান্ট 4: 267-275, 2014।
4. এল-গৌভেলি এইচএম এবং এল-মাস এমএম: সাইক্লোস্পোরিন-প্ররোচিত উচ্চ রক্তচাপের কেন্দ্রীয় মড্যুলেশন। Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 388: 351-361, 2015।
5. EidMM, Abdel-Hamid IA, SobhMA এবং el-SaiedMA: কম্পিউটারাইজড বিশ্লেষণ ব্যবহার করে বন্ধ্যা রেনাল ট্রান্সপ্ল্যান্ট প্রাপকদের শুক্রাণুর গতি বৈশিষ্ট্যের মূল্যায়ন। Int J Androl 19: 338-344, 1996.
6. জাহরা এ, গোলামরেজা এন, ফারোখি এফ, এবং শালিজার জালালি এ: ক্র্যাটেগাস মনোগাইনা ফলের জলীয় নির্যাস দ্বারা সাইক্লোস্পোরিন-প্ররোচিত শুক্রাণুর দুর্বলতা এবং ভ্রূণবিষকতা। সেল J 15: 198-205, 2013।
7. He Z, Qiu J, LiJ, Zhao D, Chen G, এবং Chen L: একটি ইঁদুর প্রতিস্থাপন মডেলে টেস্টিকুলার ফাংশন এবং অঙ্গসংস্থানবিদ্যার উপর সাইক্লোস্পোরিন থেকে রেপামাইসিনে রূপান্তরের দীর্ঘমেয়াদী প্রভাব। Transplant Proc 45: 763-769, 2013।
8. AliRB, KlouzA, Boubaker S, LakhalM এবং BelkahiaC: সাইক্লোস্পোরিন দ্বারা টেস্টিকুলার বিষাক্ততার একটি প্রাণীর মডেল: মূল্যায়ন এবং সুরক্ষা। ফান্ডাম ক্লিন ফার্মাকোল 23: 241-246, 2009।
9. সীতালক্ষ্মী এল, ফ্লোরেস সি, মালহোত্রা আরকে, প্যালাস জেডি, থারাকান ডি, খাউলি আরবি এবং মেনন এম: ভিট্রোতে ইঁদুর লেডিগ কোষ দ্বারা টেস্টোস্টেরন জৈব সংশ্লেষণের বাধায় সাইক্লোস্পোরিনের ক্রিয়াকলাপের প্রক্রিয়া। প্রতিস্থাপন 53: 190-195, 1992।
10. সীতালক্ষ্মীএল, ফ্লোরেসসি, কার্বোনিয়াএএ এবং মেনন এম: টেস্টোস্টেরন প্রোপিওনেটের বহিরাগত প্রশাসনের মাধ্যমে সাইক্লোস্পোরিন-চিকিত্সা করা ইঁদুরের শুক্রাণুর পরিমাণগত রক্ষণাবেক্ষণ। J Androl 11: 491-497, 1990।
11. প্যান XY, Wang XY, Wang XN, Sun ZX, Wang D, Wang X, Yang YY এবং Li ZX: সাইক্লোফোসফামাইড-প্ররোচিত স্পার্মাটোজেনিক সেল অ্যাপোপটোসিস এবং হিস্টোন H3K9 ডাইমেথিলেশনের উপর 'ওয়েনশেন শেংজিং ডেকোকশন'-এর প্রভাব। Shanghai Zhong Yi Yao Za Zhi 48: 82-86, 2014 (চীনা ভাষায়)।
12. Xu ZH, Li SF, Wang JY, Zhou R এবং Tian SJ: সুপারক্রিটিকাল CO2 সহ অ্যান্টলার ভেলভেট থেকে যৌন হরমোন নিষ্কাশন। Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 32: 2000-2003, 2007 (চীনা ভাষায়)।
13. Zhao LP, Xu Z, Zhang M, Sun HC এবং Tang F: Fructus Lycii এবং Radix astragali-এর প্রভাব ইঁদুরের অণ্ডকোষে Sertoli কোষের কাজের উপর। Zhonghua Nan Ke Xue 13: 82-86, 2007 (চীনা ভাষায়)।
14. Xu L, Liu XH, এবং Zhang L: NO, NOS এবং মাউসের টেস্টিসে মোট অ্যান্টিঅক্সিজেন ক্ষমতার উপর মোট জিনসেনোসাইডের প্রভাব। Acta Academiae Medicinae CPAPF 5: 507-508, 2006 (চীনা ভাষায়)।
15. প্যাটেল DP, Brant WO, Myers JB, Presson AP, Johnstone EB, Dorais JA, Aston KI, Carrell DT এবং Hotaling JM: Hyperandrogenic এবং subfertile পুরুষদের মধ্যে ক্লোমিফেন সাইট্রেটের নিরাপত্তা এবং কার্যকারিতা। Int J Impot Res 27: 221-224, 2015।
16. এলশেখ এমজি, হোসনি এমবি, এলশেনোফি এ, এলঘামরাউই এইচ, ফায়াদ এ এবং আবদেলরহমান এস: অ্যাজুস্পার্মিয়া হিসাবে ইডিওপ্যাথিক অলিগো রোগীদের চিকিত্সায় ভিটামিন ই এবং ক্লোমিফেন সাইট্রেটের সংমিশ্রণ: একটি সম্ভাব্য, এলোমেলো পরীক্ষা। Andrology 3: 864-867, 2015।
17. Wang R, Xu L, Zhang WX, Wu YF, Shi JH এবং Zhang YX: Shengjing Granule: Effective Chinese medicine for Spermatogenic disturbance in Mice. Zhonghua Nan Ke Xue 14: 1046-1049, 2008 (চীনা ভাষায়)।
18. ফ্যান বিটি: চাইনিজ মেডিসিন ফার্মেসি, সাংহাই বিজ্ঞান ও প্রযুক্তি প্রেস 12: 62-68, 1997 (চীনা ভাষায়)।
19. Zhang J, Li H, Lu L, Yan L, Yang X, Shi Z এবং LiD: Yiqi এবং Yangyin ফর্মুলা শরীরের সম্পূর্ণ বিকিরণ দ্বারা প্ররোচিত হেমাটোপয়েটিক সিস্টেমের আঘাতকে কমিয়ে দেয়। J Radiat Res 58: 1-7, 2017।
20. মিনামি এম, কোনিশি টি, জিয়াং জেড, আরাই টি এবং মাকিনো টি: অনুনাসিক সংবেদনশীলতা দ্বারা প্ররোচিত মুরিনের অ্যালার্জির প্রতিক্রিয়ার উপর শিনইসেইহাইটোর প্রভাব। J Tradit Complement Med 6: 252-256, 2015।
21. Rong R, Li RR, Hou YB, Li J, Ding JX, Zhang CB, এবং Yang Y: Mahuang-xixin-fuzi decoction কিডনি-ইয়াং ডেফিসিয়েন্সি সিন্ড্রোম ইঁদুরের ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের সংক্রমণ কমায়। J Ethnopharmacol 192: 217-224, 2016।
22. জনসেন এসজি: টেস্টিকুলার বায়োপসি স্কোর গণনা-মানুষের টেস্টিসে স্পার্মাটোজেনেসিসের নিবন্ধনের জন্য একটি পদ্ধতি: স্বাভাবিক মান এবং 335 জন হাইপোগোনাডাল পুরুষের ফলাফল। হরমোন 1: 2-25, 1970।
23. মেস-হুপস এলএল, বোলেন জে, রিগস এডি, এবং সিঙ্গার-স্যাম জে: ফ্লুরোসেন্স-অ্যাক্টিভেটেড সেল বাছাই ব্যবহার করে জিন এক্সপ্রেশন বিশ্লেষণের জন্য স্পার্মাটোগোনিয়া, স্পার্মাটোসাইট এবং গোলাকার স্পার্মাটিডের প্রস্তুতি। Biol Reprod 53: 1003-1011, 1995।
24. জু এলজি: কিডনি প্রতিস্থাপনের পরে রোগীদের বীর্যের পরামিতিগুলিতে সাইক্লোস্পোরিন এ-এর প্রভাব। জে ক্লিন ইউরোল 20: 603-605, 2005।
25. Pintus E, Ros-Santaella JL, এবং Garde JJ: টেস্টিসের আকারের বাইরে: একটি মৌসুমী প্রজননকারী স্তন্যপায়ী প্রাণীর শুক্রাণু ও শুক্রাণুর বৈশিষ্ট্যের মধ্যে লিঙ্ক। PLOS One 10: e0139240, 2015।
26. Monteiro JC, Predes FS, Matta SL, এবং Dolder H: Heteropterys aphrodisiaca infusion testis-এ সাইক্লোস্পোরিন A-এর সমান্তরাল প্রভাবকে কমিয়ে দেয়। আনত রেক (হোবোকেন) 291: 809-817, 2008।
27. ওসেকো এফ, নোট এস, মরিকাওয়া কে, এন্ডো জে, তানিগুচি এ, এবং ইমুরা এইচ: সাধারণ পুরুষদের হাইপোথ্যালামো-পিটুইটারি-টেস্টিকুলার অক্ষে সালপিরাইড দ্বারা প্ররোচিত দীর্ঘস্থায়ী হাইপারপ্রোল্যাক্টিনেমিয়ার প্রভাব। ফার্টিল স্টেরিল 44: 106-111, 1985।
28. Wisniewski P, Romano RM, Kizys MM, Oliveira KC, Kasamatsu T, Giannocco G, Chiamolera MI, Dias-da-Silva MR, এবং Romano MA: Wistar ইঁদুরে প্রাপ্তবয়স্কদের বিসফেনল A (BPA) এর সংস্পর্শ ব্যাহত হওয়ার সাথে শুক্রাণুর গুণমান হ্রাস করে হাইপোথ্যালামিক-পিটুইটারি-টেস্টিকুলার অক্ষের। টক্সিকোলজি 329: 1-9, 2015।
29. ক্রুগার BA, Trakshel GM, Sluss PM, এবং Maines MD: সাইক্লোস্পোরিন-মিডিয়াটেড ডিপ্রেশন অফ লুটেইনাইজিং হরমোন রিসেপ্টর এবং ইঁদুরের টেস্টে হেম বায়োসিন্থেসিস: সিরাম টেস্টোস্টেরন হ্রাসের একটি সম্ভাব্য প্রক্রিয়া। এন্ডোক্রিনোলজি 129: 2647-2654, 1991।
30. নোলান সিজে এবং পেইন এএইচ: P450scc লোকাসের জিনোটাইপ মাউস লেডিগ কোষে P450scc প্রোটিনের পরিমাণ এবং সর্বাধিক টেস্টোস্টেরন উৎপাদনের পার্থক্য নির্ধারণ করে। মোল এন্ডোক্রিনোল 4: 1459-1464, 1990।
31. Türk G, Ateşahin A, Sönmez M, Yüce A, এবং Ceribasi AO: লাইকোপেন ইঁদুরের সাইক্লোস্পোরিন A-প্ররোচিত টেস্টিকুলার বিষাক্ততার বিরুদ্ধে রক্ষা করে। Theriogenology 67: 778-785, 2007. 32. Türk G, Sönmez M, Ceribaşi AO, Yüce A, এবং Ateşahin A: সাইক্লোস্পোরিন A-প্ররোচিত টেস্টিকুলার এবং স্পার্মাটোজোয়াল ক্ষতির অ্যাটেন্যুয়েশন অ্যালাজিক অ্যাসিড দ্বারা অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে যুক্ত। Int Immunopharmacol 10: 177-182, 2010।
