প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর 1 ইঁদুরের রেনাল ইস্কিমিয়া-রিপারফিউশন ইনজুরিতে মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা এবং টিউবুলার ক্ষতিতে অবদান রাখে

ইউ গুয়ান,¹দাইসুকে নাকানো,²লেই লি,³হাওফেং ঝেং,³আকিরা নিশিয়ামা,²ইয়ে তিয়ান,¹এবং লেই ঝাং¹

সঙ্গে প্রকৃত ব্যর্থতা উপশম করতেcistanche ঔষধি

1। পরিচিতি

দ্যকিডনিআংশিক নেফ্রেক্টমির সময় ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন (আইআর) আঘাত এড়াতে পারে না এবংকিডনিপ্রতিস্থাপন [১], যার ফলে বিপাকীয় বর্জ্য পদার্থ ধরে রাখা হয় এবং এর ফলে তীব্র হয়কিডনিআঘাত (AKI) এবংAKI- দীর্ঘস্থায়ীকিডনিরোগ (AKI-CKD) [2]। আজ অবধি, AKI এবং AKI-CKD [3] এর জন্য কোনও নির্দিষ্ট ড্রাগ থেরাপি চিকিত্সাগতভাবে উপলব্ধ নেই। AKI-তে বেশ কিছু সাধারণ প্যাথলজিক্যাল পরিবর্তন ঘটে, যেমন মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা [৪], কনজেশন এবং হেমোরেজ সহ, এবং তীব্র টিউবুলার নেক্রোসিস [৫]। অতএব, গবেষণাগুলি সম্ভাব্য থেরাপিউটিক প্রার্থী হিসাবে এই রোগগত পরিবর্তনগুলিকে লক্ষ্য করার উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছে। আমরা আগে দেখিয়েছি যে পরে পেরিটুবুলার কৈশিকগুলি বজায় রাখারেনালIR ইনজুরি কৈশিক কনজেশন কমিয়েছে এবং AKI থেকে CKD ট্রানজিশনকে উন্নত করেছে [6]। তীব্র টিউবুলার নেক্রোসিস চিকিত্সা করা কঠিন হতে পারে; এইভাবে, টিউবুলার কোষের বিস্তারের মাধ্যমে টিউবুলের পুনরুত্থান রেনাল ফাংশনের আরও ক্ষতি রোধ করার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ পদ্ধতি হতে পারে [7]।

প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর-1 (PAR-1) প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর (PAR) পরিবারের অন্তর্গত এবং প্লেটলেট জমাট বাঁধার জন্য থ্রম্বিন দ্বারা উদ্দীপিত বলে পরিচিত। আমরা সম্প্রতি দেখিয়েছি যে PAR-1 তীব্রভাবে প্ররোচিত গ্লোমেরুলার ইনজুরির বিকাশে অবদান রাখে [8]। উপরন্তু, থ্রম্বিন/পিএআর-1 এপিথেলিয়াল কোষের বিস্তার এবং অ্যাপোপটোসিসে ভূমিকা পালন করে বলে জানা গেছে। এই বৈশিষ্ট্যগুলির উপর ভিত্তি করে, আমরা অনুমান করেছি যে PAR-1 পেরিটুবুলার কৈশিক রক্ত ​​জমাট বা টিউবুলার পুনর্জন্ম নিয়ন্ত্রণ করে AKI এর তীব্রতাকে ত্বরান্বিত করেছে। এই গবেষণায়, আমরা মাউসে Q-94, একটি PAR-1-নির্বাচিত নেগেটিভ অ্যালোস্টেরিক মডুলেটর ব্যবহার করে PAR-1 এর ভূমিকা পরীক্ষা করেছিরেনালIR ইনজুরি মডেল এবং থ্রোম্বিন-উদ্দীপিত কালচারড হিউম্যান টিউবুলার সেল।

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। তীব্র কিডনি আইআর মাউস মডেল।

ক্যাপিটাল মেডিকেল ইউনিভার্সিটির ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ইউজ কমিটির পরীক্ষামূলক নির্দেশিকা অনুসারে সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা করা হয়েছিল। দ্যকিডনিপূর্বে বর্ণিত হিসাবে IR মাউস মডেল প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল [8]। সংক্ষেপে, 8-সপ্তাহ-বয়সী C57/BL6 পুরুষ ইঁদুরগুলিকে পেন্টোবারবিটাল সোডিয়াম (50 মিলিগ্রাম/কেজি; আইপি) ইনজেকশন দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং এলোমেলোভাবে নিম্নলিখিত গোষ্ঠীতে বিভক্ত করা হয়েছিল: শাম, আই/আর প্লাস গাড়ি, এবং আই/আর (যানবাহন: স্যালাইন 10 mg/kg iv) প্লাস Q94 (একটি PAR-1 বিরোধী 10 mg/kg iv) গ্রুপ (এন=7–8 প্রতিটি গ্রুপে)। রেনাল ওয়ার্ম আইআর ইনজুরি প্রোটোকলের জন্য, রেনাল ফাংশনের ক্ষতির মূল্যায়ন করার জন্য ইঁদুরগুলি ইউনিফ্রেক্টমি করেছে; এক সপ্তাহ পর, রেনাল পেডিকল 30 মিনিটের জন্য ক্ষতিমুক্ত ভাস্কুলার ক্লিপ দিয়ে আটকে রাখা হয়েছিল। 48 ঘন্টার জন্য প্রতিকারের পরে, ইঁদুর বলি দেওয়া হয়েছিল; তাদের রেনাল টিস্যুর নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং প্যারাফিন ব্লক প্রস্তুত করার জন্য 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল। রক্তের ইউরিয়া নাইট্রোজেন (BUN) এবং ক্রিয়েটিনিন পরিমাপের জন্য প্লাজমা প্রাপ্ত হয়েছিল।

2.2। উপকরণ।

Q94 Tocris Bioscience (Bristol, UK) থেকে কেনা হয়েছিল। অন্যান্য রাসায়নিকগুলি সিগমা অ্যালড্রিচ (সেন্ট লুইস, এমও, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল যদি না অন্যথায় বলা হয়।

2.3। ক্রিয়েটিনাইন এবং BUN জন্য পরীক্ষা.

বাণিজ্যিক অ্যাস কিট (Creatinine Assay Kit ab65340; Abcam, Cambridge, UK) ক্রিয়েটিনিন পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। BUN অ্যাস কিটগুলি ABSBio™ (ইউরিয়া নাইট্রোজেন কিট, সিএনএইচও বায়ো, বেইজিং, চীন) থেকে কেনা হয়েছিল।

2.4। হিস্টোলজি।

প্যারাফিনে এম্বেড করার আগে, কিডনি টিস্যু 4 শতাংশ প্যারাফর্মালডিহাইড দিয়ে স্থির করা হয়েছিল। কিডনির প্যারাফিন ব্লকগুলি 2 μm অংশে কাটা হয়েছিল এবং 25 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেডে রাতারাতি স্লাইডগুলিতে মাউন্ট করা হয়েছিল। ডিপ্যারাফিনাইজেশনের পরে, বিভাগগুলি হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। চিত্রগুলি একটি মাইক্রোস্কোপ (BX-51/DP-72; অলিম্পাস, টোকিও, জাপান) ব্যবহার করে প্রাপ্ত করা হয়েছিল। পূর্বে বর্ণিত [৯] হিসাবে, রেনাল-টিউবুলের ক্ষতি বেশ কয়েকটি হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পরিবর্তনের উপর ভিত্তি করে নির্ণয় করা হয়েছিল, যেমন টিউবুলার প্রসারণ, কনজেশন/হেমোরেজ, ব্রাশ বর্ডার লস, টিউবুলার কাস্ট গঠন এবং টিউবুলার লুমেনে স্লাউড ধ্বংসাবশেষ সহ সেল লাইসিস। টিউবুলার ক্ষতি ক্ষতিগ্রস্থ টিউবুলের শতাংশ অনুসারে স্কোর করা হয়েছিল: 0, কোনও ক্ষতি নেই; 1,<25%; 2,="" 25–50%;="" 3,="" 51–75%;="" and="" 4,="">75 শতাংশ। স্কোরিং অন্ধভাবে সঞ্চালিত হয়েছিল।

2.5। ইমিউনোফ্লোরেসেন্স এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি।

হিস্টোলজি (H&E) পরীক্ষার জন্য বর্ণিত হিসাবে বিভাগগুলি প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং তারপরে জাইলিনের সাথে ডিপ্যারাফিনাইজেশনের পরে অন্তঃসত্ত্বা পারক্সিডেসগুলিকে ব্লক করার জন্য 30 মিনিটের জন্য 0.3 শতাংশ হাইড্রোজেন পারক্সাইড দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধারের জন্য, বিভাগগুলি 10 মিনিটের জন্য প্রোটিনেস কে (ডাকো সাইটোমেশন, গ্লোস্ট্রাপ, ডেনমার্ক) দিয়ে ইনকিউবেট করা হয়েছিল। 10 শতাংশ ছাগলের সিরাম দিয়ে ব্লক করার পরে, বিভাগগুলি রাতারাতি 4 ডিগ্রি সেন্টিগ্রেড তাপমাত্রায় প্রাথমিক অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল (অ্যান্টি-কিম 1 অ্যান্টিবডি, ab47635, Abcam; Anti Ki67 অ্যান্টিবডি, ab15580, Abcam; অ্যান্টি-PAR-1 অ্যান্টিবডি, ab32611 , আবকাম)। প্রাথমিক অ্যান্টিবডির সাথে ইনকিউবেশনের পরে, বিভাগগুলিকে 1 ঘন্টার জন্য 25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি দিয়ে ইনকিউব করা হয়েছিল। ডিএবি সাবস্ট্রেট (ডাকো) ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি (আইএইচসি) স্টেনিং ফলাফলগুলি কল্পনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। অ্যালেক্সা ফ্লুর 594-লেবেলযুক্ত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে ফ্লুরোসেন্স সংকেত সনাক্ত করা হয়েছিল৷ একটি উপযুক্ত ফিল্টার সহ একটি FL ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপ (BX51; অলিম্পাস) ব্যবহার করে চিত্রগুলি ক্যাপচার করা হয়েছিল। ইমেজজে সফ্টওয়্যার (এনআইএইচ, বেথেসডা, এমডি, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) ইতিবাচক ক্ষেত্রগুলি বিশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

2.6। রিয়েল-টাইম পিসিআর।

এই অবস্থার অধীনে এমআরএনএ এক্সপ্রেশনের নিয়ন্ত্রণের মূল্যায়ন করার জন্য, এমআরএনএ কিডনি টিস্যু থেকে বিচ্ছিন্ন ছিল। একটি পিসিআর সিস্টেম (7300 ফাস্ট রিয়েল-টাইম; অ্যাপ্লায়েড বায়োসিস্টেম, ফস্টার সিটি, সিএ, ইউএসএ) এবং লাইট সাইক্লার ফাস্ট স্টার্ট ডিএনএ মাস্টার এসওয়াইবিআর গ্রীন আই কিট (অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম) 18S এবং PAR-1 এর মাত্রা সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল mRNA। প্রাইমারের ক্রমগুলি নিম্নরূপ ছিল: 18S —5′ -GTAACCCGTTGAACCCCATT-3′, 5′-CCATCCAATCG GTAGTAGCG-3′; PAR-1—5′-GTTGATCGTTTCCACG GTCT-3′, 5′-GCTGCCTCTGTACCAGGACT-3′। আপেক্ষিক mRNA স্তরগুলি 2−ΔΔCq পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। ΔΔCq মান নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ থেকে ডেটা ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল।

2.7। অস্ত্রোপচার পদ্ধতি এবং ভিভো মাল্টিফোটন ইমেজিং সেটিংসে।

ইঁদুরগুলিকে 2 শতাংশ আইসোফ্লুরেন (মাইলান, ওসাকা, জাপান) দিয়ে চেতনানাশক করা হয়েছিল। ট্র্যাকিওটমির পরে, ফ্লুরোসেন্ট ডাই ইনজেকশন এবং রক্ষণাবেক্ষণ ফ্লুইডের আধানের জন্য জগুলার শিরাটি ক্যানুলেট করা হয়েছিল, যা ফসফেট-বাফার্ড স্যালাইনে 2 শতাংশ অ্যালবুমিনের μL/মিনিট নিয়ে গঠিত। প্রতিটি ইঁদুরের বাম কিডনিটি একটি ছোট ফ্ল্যাঙ্ক ছেদ দিয়ে বাহ্যিক করা হয়েছিল এবং একটি কভারস্লিপের সাথে সংযুক্ত ছিল। সমস্ত পরীক্ষামূলক পদ্ধতির সময় একটি হিটিং প্যাড ব্যবহার করে মাইক্রোস্কোপ স্টেজ এবং প্রাণীগুলিকে উষ্ণ করা হয়েছিল। ইন্ট্রাভিটাল মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি একটি অলিম্পাস FV1000MPE মাল্টিফোটন কনফোকাল ফ্লুরোসেন্স ইমেজিং সিস্টেম ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল 860nm (Coherent, Inc., Santa Clara, CA, USA) একটি ক্যামেলিয়ন আল্ট্রা-II এমপি লেজার দ্বারা চালিত। মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্য ছিল 1.05 সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার সহ একটি 25x জল নিমজ্জন লেন্স। মাইক্রোস্কোপের জন্য ইমেজিং সেটিংস (তিনটি চ্যানেলের জন্য লাভ এবং অফসেট; নীল, সবুজ এবং লাল) পুরো পরীক্ষা জুড়ে স্থির করা হয়েছিল। 30 মিনিটের পুনরুদ্ধারের সময় পরে, রোডামাইন বি- 70কেডি ডেক্সট্রান শিরায় ইনজেক্ট করা হয়েছিল, এবং 3-ডি জেড-স্ট্যাক চিত্রগুলি কিডনি পৃষ্ঠ থেকে 5-50 μm (2μm দূরে) গভীরতায় নেওয়া হয়েছিল৷

2.8। সেল সংস্কৃতি.

হিউম্যান কিডনি 2 (HK2) কোষগুলি সেল ব্যাংক অফ একাডেমি সায়েন্সেস (সাংহাই, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত [10] হিসাবে সংস্কৃতি করা হয়েছিল। ডালবেকোর পরিবর্তিত ঈগল মিডিয়ামে কোষগুলিকে 10 শতাংশ ভ্রূণের বোভাইন সিরাম এবং 1 শতাংশ পেনিসিলিন-স্ট্রেপ্টোমাইসিনের সাথে 95 শতাংশ বায়ু এবং 37 ডিগ্রিতে 5 শতাংশ CO2 দিয়ে পরিপূরক করা হয়েছিল।

2.9। কোষের বিস্তার মূল্যায়নের জন্য WST-1 অ্যাসেস।

HK2 কোষগুলিকে 6-কূপ প্লেটে 1×104 কোষের ঘনত্বে/- ভালভাবে বীজ দেওয়া হয়েছিল। থ্রম্বিনের সাহায্যে HK2 কোষগুলিকে উদ্দীপিত করার পর, কোষের প্রসারণ ক্ষমতা নির্ধারণের জন্য প্রস্তুতকারকের প্রোটোকল (ক্যাটালগ #C0035; বেয়োটাইম, সাংহাই, চীন) অনুসারে WST- 1 অ্যাসেস করা হয়েছিল। প্রতিটি কূপে 100μL WST-1 রিএজেন্ট দিয়ে 2 ঘণ্টার ইনকিউবেশনের পর, 450nm তরঙ্গদৈর্ঘ্যে একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার ব্যবহার করে নমুনার শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.10। ক্যাসপেস-3 অ্যাস।

ক্যাসপেস-3 কার্যকলাপ একটি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ ক্যাসপেস-3 কার্যকলাপ কিট ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল (ক্যাটালগ #C1116; বেয়োটাইম, সাংহাই, চীন) [১১]। ক্যাসপেস-3 অ্যাক্টিভিটি কিট রিএজেন্টের সাথে ইনকিউবেশনের পরে, প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে 405nm এ মাইক্রোপ্লেট রিডার (স্পেকট্রা- ম্যাক্স M2, মলিকুলার ডিভাইস, সানিভেল, CA, USA) ব্যবহার করে নমুনাগুলির শোষণ সনাক্ত করা হয়েছিল।

2.11। তথ্য এবং পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ.

ভিন্নতার একমুখী বিশ্লেষণ একাধিক গোষ্ঠীর তুলনা করার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল, তারপরে টুকির একাধিক তুলনা পরীক্ষা করা হয়েছিল। দুটি পৃথক গোষ্ঠীর তুলনা করতে, আমরা ছাত্রদের টি-পরীক্ষা ব্যবহার করেছি। p < 0:05="" পরিসংখ্যানগতভাবে="" তাৎপর্যপূর্ণ="" ফলাফল="" নির্দেশ="">

Cistanche tubulosaকিডনি রোগ প্রতিরোধ করে

3। ফলাফল

3.1। IR কিডনিতে PAR-1 এক্সপ্রেশন।

আমরা প্রথমে PAR-1 এর অভিব্যক্তি এবং এর অভিব্যক্তি স্তরে IR এর প্রভাবগুলি নিশ্চিত করেছিকিডনি. আমরা 48 ঘণ্টায় শ্যাম সার্জারি ইঁদুরের তুলনায় PAR-1 mRNA-এর অভিব্যক্তি স্তরে প্রায় 2-গুণ বৃদ্ধি লক্ষ্য করেছি (চিত্র 1(a))৷ আমরা IR এর পরে 48 ঘন্টায় ইমিউনোফ্লোরেসেন্স দ্বারা PAR-1 এর অভিব্যক্তিও পরিমাপ করেছি। PAR-1 টিউবুলার সেল ব্রাশ বর্ডার মেমব্রেনে প্রকাশ করা হয়েছিল। শ্যাম গ্রুপের ইঁদুরের তুলনায় PAR-1 FL ফ্লুরোসেন্সের মাত্রা আপ-রেগুলেটেড ছিল (চিত্র 1(b) এবং 1(c))। এই ডেটাগুলি পরামর্শ দেয় যে টিউবুলার কোষে PAR{10}} এর স্থানীয়করণ এবং এর প্রকাশের স্তর উভয়ই কিডনিতে IR এর পরে নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল।

3.2। রেনাল ফাংশন এবং হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরিবর্তন। আমরা মূল্যায়নকিডনিরক্তরস মধ্যে BUN এবং ক্রিয়েটিনিন মাত্রা সনাক্ত করে ফাংশন. I/R শ্যাম সার্জারির শিকার ইঁদুরের তুলনায় BUN এবং ক্রিয়েটিনিনের মাত্রা বৃদ্ধি করে। অধিকন্তু, Q94-চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে BUN স্তরে IR-প্ররোচিত বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 2(a))৷ শুধুমাত্র IR সার্জারি করা ইঁদুরের তুলনায় Q94-চিকিত্সা করা ইঁদুরে সিরাম ক্রিয়েটিনিন স্তরকে বাধা দেওয়া হয়েছিল (চিত্র 2(b))। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দেয় যে Q94 প্রশাসন রক্ষা করতে পারেকিডনিআইআর আঘাতের পরে ফাংশন।

আমরা H&E স্টেনিং সম্পাদন করে রেনাল হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পরিবর্তনগুলিও মূল্যায়ন করেছি। রেনাল আইআর শ্যাম ইঁদুরের তুলনায় গাড়ির চিকিত্সা করা ইঁদুরগুলিতে কাস্ট গঠন, টিউবুলার প্রসারণ এবং ব্রাশ বর্ডার লস এবং কনজেশন/হেমারেজকে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেছে। Q94 চিকিত্সা IR (চিত্র 2(c) এবং 3(a)) দ্বারা প্ররোচিত এই পরিবর্তনগুলিকে উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করেছে। গ্রুপগুলির মধ্যে এইচএন্ডই স্টেনিং ফলাফলের বিশ্লেষণে প্রতিটি গ্রুপের জন্য কনজেশন/হেমারেজ স্কোর এবং টিউবুলার ড্যামেজ স্কোর প্রকাশ করা হয়েছে। Q94 গ্রুপের ইঁদুর অনেক কম স্কোর প্রদর্শন করেছে (চিত্র 2(e) এবং 3(c))। আমরা কিমকেও দাগ দিয়েছি-1 aকিডনিIHC দ্বারা রেনাল টিউবুলার কোষের আঘাত চিহ্নিতকারী [12]। কিম-1-আইআর অপমান সহ ইঁদুরের রেনাল টিউবুলার এলাকায় ইতিবাচক এলাকা বৃদ্ধি পেয়েছে, যেগুলি Q94 (চিত্র 2(d) এবং 2(f)) দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে দমন করা হয়েছিল। এই ডেটা প্রস্তাব করে যে Q94 দমন করতে পারেকিডনিটিউবুলার ক্ষতি IR আঘাত দ্বারা প্ররোচিত.

3.3। ভিভো ইমেজিং-এ অস্বাভাবিক রক্তের কোষ প্রবাহ।

PAR-1 এবং এর লিগ্যান্ড থ্রম্বিন কনজেশনে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে; Q94 উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত যানজট. অতএব, আমরা মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি দ্বারা ইন্ট্রাভিটাল ইমেজিং করেছি। এটি জীবন্ত ইঁদুরে (চিত্র 3(c)) একটি বাস্তব সময়ের পদ্ধতিতে পেরিটুবুলার কৈশিকের রক্তের কোষের সহকর্মীকে পর্যবেক্ষণ করতে সক্ষম করে। রোডামাইন বি (চিত্র 3(ডি)) এর সাথে সংযুক্ত 70 কেডিএ ডেক্সট্রান দ্বারা প্লাজমাটি কল্পনা করা হয়েছিল। লেজারের প্রতিক্রিয়ায় এফএল ফ্লুরোসেন্স তৈরি করে না এমন রক্তের কোষগুলি রোডামাইন বিকে উত্তেজিত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল এবং ছায়া হিসাবে চিত্রিত করা হয়েছিল। চিত্র 3(ই) এ দেখানো হয়েছে, রেনাল আইআর নিয়মিত রক্তকণিকা অনুসরণে ব্যাঘাত ঘটায় এবং মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা প্ররোচিত করে। Q94 উন্নত পেরিটুবুলার কৈশিক রক্তকণিকা সহকর্মী।

3.4। আইআর আঘাতের পরে টিউবুলার কোষের বিস্তার।

এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে টিউবুলার কোষগুলির প্রসারিত পুনর্জন্ম আইআর আঘাতের পরে টিউবুলার কাঠামো এবং রেনাল ফাংশন পুনরুদ্ধারে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। PAR-1 থ্রম্বিন দ্বারা সক্রিয় হলে এপিথেলিয়াল কোষের বিস্তারকে পরিবর্তন করতে পরিচিত। এইভাবে আমরা কি-67 IHC অ্যাসে রেনাল টিউবুলার কোষের বিস্তার শনাক্ত করেছি। IR এর 48 ঘন্টা পরে, কি-67-পজিটিভ টিউবুলার কোষের বিস্তার ঘটানো হয়েছিল। Q94 শুধুমাত্র IR-চিকিত্সা করা ইঁদুরের তুলনায় IR-এর পরে Ki-67-পজিটিভ টিউবুলার কোষের সংখ্যা বৃদ্ধি করেছে (চিত্র 4(a) এবং 4(b))৷ উপরন্তু, আমরা পরীক্ষা করে দেখেছি যে PAR-1 ইনহিবিশন ইন ভিট্রো এক্সপেরিমেন্টে HK2 কোষ থ্রোম্বিন দিয়ে ইনকিউবেট করা, একটি PAR-1 অ্যাগোনিস্ট ব্যবহার করে কোষের বিস্তারের ক্ষমতা প্রভাবিত হয়েছে কিনা। HK2 কোষের প্রসারিত কার্যকলাপ WST-1 অ্যাস দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। চিত্র 4(c) এ দেখানো হয়েছে, থ্রোমবিনের সাথে চিকিত্সার পরে HK2 কোষের বিস্তার নাটকীয়ভাবে দমন করা হয়েছিল। যাইহোক, এই থ্রম্বিন-প্ররোচিত বাধা Q94 দ্বারা প্রায় বিলুপ্ত করা হয়েছিল। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে PAR-1 রেনাল টিউবুলার কোষের বিস্তারকে নেতিবাচকভাবে নিয়ন্ত্রিত করে, যা Q94 PAR-1 বিরোধী দ্বারা প্রায় বিলুপ্ত হয়েছিল।

দীর্ঘস্থায়ী কিডনি রোগ থেকে মুক্তি দিতেcistanche

3.5। রেনাল টিউবুলার সেল অ্যাপোপটোসিস।

আমরা ক্যাসপেস-3 ব্যবহার করে রেনাল কোষের অ্যাপোপটোসিস পরীক্ষা করেছি, যা সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ নির্বাহক ক্যাসপেস এবং অ্যাপোপটোসিসের সময় অভ্যন্তরীণ এবং বহির্মুখী উভয় পথ দ্বারা সক্রিয় হয় [13]। থ্রম্বিন-ইনকিউবেটেড কালচারড HK2 কোষ ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেলাম যে থ্রম্বিন ক্যাসপেসের কার্যকলাপ বাড়িয়েছে-3। অধিকন্তু, Q94-এর প্রশাসন ক্যাসপেসের কার্যকলাপকে দমন করেছে-3 (চিত্র 4(d))। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে HK2 কোষের থ্রম্বিন-প্ররোচিত অ্যাপোপটোসিস Q94 PAR-1 বিরোধী দ্বারা বাধা দেওয়া হয়েছিল।

4। আলোচনা

কিডনিIR ইনজুরি কনজেশন/হেমারেজ, তীব্র টিউবুলার নেক্রোসিস, প্রদাহ এবং কাস্ট গঠনের জমা দ্বারা চিহ্নিত করা হয় [5]। এখানে, আমরা দেখিয়েছি যে PAR-1-এর বাধা রক্তের সহকর্মী-সম্পর্কিত পরিবর্তন এবং টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল পরিবর্তন উভয়কেই প্রশমিত করেছে। এটা সুপরিচিত যে PAR-1 এবং এর লিগ্যান্ড, থ্রম্বিন, প্লেটলেট জমাট বাঁধতে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে এবং এই সিস্টেমের হস্তক্ষেপ, যেমন থ্রম্বোমোডুলিন [১৪, ১৫], AKI প্রতিরোধ করতে পারে। আমরা দেখিয়েছি যে PAR- 1 নিষেধাজ্ঞার ফলে রেনাল IR ইনজুরি সহ ইঁদুরের পেরিটুবুলার কৈশিকগুলিতে কনজেশন এবং উন্নত রক্ত ​​​​প্রবাহ দমন করা হয়েছে, এটি পরামর্শ দেয় যে PAR-1 সিস্টেমের মাইক্রোসার্কুলেশন খারাপ হয়েছে। এছাড়াও, রেনাল IR আঘাতের পরে PAR-1-এর অভিব্যক্তি স্তরটি টিউবুলে আপ রেগুলেট করা হয়েছিল, যা নির্দেশ করে যে টিউবুলে PAR{10}}নির্ভর সিস্টেমটিও রেনাল IR আঘাতকে অতিরঞ্জিত করে। এটি সুপ্রতিষ্ঠিত যে টিউবুলার কোষগুলির পুনর্জন্ম নলাকার কাঠামো পুনর্নির্মাণ এবং IR আঘাতের পরে রেনাল ফাংশন পুনরুদ্ধারের ক্ষেত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়া [16, 17]। আঘাতের ডিগ্রির উপর নির্ভর করে, এই মেরামতের ক্ষমতা সীমাহীন নয় [18]। অতএব, টিউবুলার কোষের ক্ষতি কমাতে বা তাদের বিস্তারকে ত্বরান্বিত করার জন্য চিকিত্সার বিকল্পগুলি জরুরিভাবে প্রয়োজন। আমাদের ইন ভিট্রো গবেষণায় দেখা গেছে যে PAR- 1/thrombin নেতিবাচকভাবে নলাকার কোষের বিস্তারকে নিয়ন্ত্রিত করে, যা PAR-1-এর বাধার পরে ত্বরান্বিত হয়েছিল। তদ্ব্যতীত, ইঁদুরের IR ইনজুরি 48 ঘন্টায় টিউবুলার প্রসারণ বাড়াতে দেখানো হয়েছে, PAR-1 বাধার পরে আরও বৃদ্ধির সাথে। আমরা দেখতে পেয়েছি যে প্রক্সিমাল টিউবুলের ব্রাশ বর্ডার মেমব্রেনে PAR-1 বৃদ্ধি পেয়েছে৷ যেহেতু এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে রেনাল IR ইনজুরির সময় গ্লোমেরুলার ফিল্টারেশন বাধার কার্যকারিতা হ্রাস পায় [19], গ্লোমেরুলি থেকে ফিল্টার করা থ্রম্বিন বর্ধিত PAR- 1 সক্রিয় করতে পারে, যার ফলে টিউবুলার পুনর্জন্ম ব্যাহত হয়।

আমাদের ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে PAR-1/থ্রম্বিন সিস্টেম টিউবুলার কোষের বিস্তারকে দমন করে এবং অ্যাপোপটোসিস বৃদ্ধি করে। যাইহোক, অন্য একটি গবেষণায় প্রোটিন C [20, 21] দ্বারা সক্রিয় হলে PAR-1 এর বিরোধী প্রভাব দেখায়। PAR-1-এর এই আপাত বিরোধপূর্ণ ভূমিকা এটির সক্রিয়করণের পদ্ধতির উপর নির্ভর করতে পারে। আমাদের গবেষণায়, এর বৈশিষ্ট্যযুক্ত ভূমিকার জন্য একটি সম্ভাব্য ব্যাখ্যা ছিল যে PAR-1 ফিল্টার করা থ্রম্বিন দ্বারা সক্রিয় করা হয়েছিল। প্রোটিন C-এর আকার 60 kDa-এর বেশি, যা অ্যালবুমিনের মতো [22, 23] এবং থ্রম্বিন (36 kDa) এর চেয়ে অনেক বড়। তদ্ব্যতীত, এর প্লাজমা ঘনত্ব (<100 nm)="" is="" less="" than="" 10%="" of="" thrombin="" (="">1 μM), ইঙ্গিত করে যে প্রোটিন সি কম পরিস্রাবণের মধ্য দিয়ে যায় এবং থ্রম্বিনের তুলনায় একটি দুর্বল সংকেত তৈরি করে।

থ্রম্বোটিক পর্বগুলি শেষ পর্যায়ে রেনাল ব্যর্থতার রোগীদের জন্য একটি ঝুঁকির কারণ [24]। একটি সমীক্ষা দেখিয়েছে যে PAR-1 ঘাটতি ডায়াবেটিক CKD [25] থেকে রক্ষা করে। আমাদের গবেষণায়, আমরা IR-এর পরে প্রাথমিক পর্যায়ে কিডনির কার্যকারিতার উপর PAR-1-এর বাধার প্রভাব পর্যবেক্ষণ করেছি। আরও গবেষণায়, আমরা একটি দীর্ঘস্থায়ী বিকাশ করতে চাইকিডনিCKD-এর সাথে PAR-1-এর সম্ভাব্য লিঙ্ক মূল্যায়ন করতে IR-প্ররোচিত রোগের মডেল [2]।

উপসংহারে, আমরা দেখিয়েছি যে PAR-1 মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতাকে বাড়িয়ে তোলে এবং নলাকার কোষের বিস্তারকে নেতিবাচকভাবে নিয়ন্ত্রিত করে। বিপরীতে, PAR-1-এর বাধা মাইক্রোসার্কুলেশন এবং টিউবুলার কোষের বিস্তার এবং IR এর পরে, কিডনি পুনরুদ্ধারের একটি বিশিষ্ট প্রক্রিয়া হিসাবে কাজ করে এবং AKI-এর চিকিত্সার ক্ষেত্রে একটি নতুন কৌশল হিসাবে বিবেচনা করা উচিত।

Cistanche tubulosa কিডনি রোগ প্রতিরোধ করে, নমুনা পেতে এখানে ক্লিক করুন

1 ইউরোলজি বিভাগ, বেইজিং ফ্রেন্ডশিপ হাসপাতাল, ক্যাপিটাল মেডিকেল ইউনিভার্সিটি, বেইজিং, চীন

2 ফার্মাকোলজি বিভাগ, কাগাওয়া বিশ্ববিদ্যালয়, কাগাওয়া, জাপান

কিডনি প্রতিস্থাপনের 3 বিভাগ, সার্জারি বিভাগ, সান ইয়াত-সেন বিশ্ববিদ্যালয়ের তৃতীয় অনুমোদিত হাসপাতাল,

গুয়াংজু, চীন

চিঠিপত্র ইয়ে তিয়ানকে সম্বোধন করা উচিত; kidney@ccmu.edu.cn এবং লেই ঝাং; leizhangkidney@gmail.com 1 জানুয়ারী 2021 প্রাপ্ত; সংশোধিত 25 জানুয়ারী 2021; 8 ফেব্রুয়ারি 2021 গৃহীত; 23 ফেব্রুয়ারি 2021 প্রকাশিত হয়েছে

একাডেমিক সম্পাদক: জুনিয়ান লিউ

কপিরাইট © 2021 Yu Guan et al. এটি একটি ওপেন-অ্যাক্সেস নিবন্ধের অধীনে বিতরণ করা হয়েছে৷ক্রিয়েটিভ কমন্স অ্যাট্রিবিউশন লাইসেন্স, যা কোনো মাধ্যমের অবাধ ব্যবহার, বিতরণ এবং পুনরুত্পাদনের অনুমতি দেয়, যদি মূল কাজটি সঠিকভাবে উদ্ধৃত করা হয়।

ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন- (IR-) প্ররোচিত কিডনি আঘাত কিডনি প্রতিস্থাপন এবং রোবট-সহায়তা আংশিক নেফ্রেক্টমির সময় এড়ানো কঠিন। রেনাল আইআর আঘাত টিউবুলার ক্ষতি, মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা এবং প্রদাহ দ্বারা চিহ্নিত করা হয়, যা সমন্বিতভাবে রেনাল ইনজুরি বাড়ায়; যাইহোক, এই অবস্থার জন্য কোন সুনির্দিষ্ট চিকিৎসা পাওয়া যায় না। প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর-1 (PAR-1) এবং এর লিগ্যান্ড, থ্রম্বিন, জমাট বাঁধার সাথে জড়িত এবং এপিথেলিয়াল কোষের আঘাতের সাথে যুক্ত দেখানো হয়েছে। এখানে, আমরা অনুমান করেছি যে PAR-1 অতিরঞ্জিত রেনাল IR-প্ররোচিত টিউবুলার কোষের ক্ষতি এবং মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা এবং Q94 দ্বারা PAR-1-এর ফার্মাকোলজিক্যাল বাধা এই আঘাতগুলি প্রতিরোধ করতে পারে। রেনাল উষ্ণ IR রেনাল টিউবুলে PAR-1 এর অভিব্যক্তি বাড়িয়েছে। Q94 প্রশমিত রেনাল IR-প্ররোচিত পরিবর্তন এবং হিস্টোপ্যাথোলজিকাল ক্ষতি। মাইক্রোসার্কুলেশন ব্যর্থতা হিস্টোপ্যাথলজিতে কনজেশনের দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং ইনট্রাভিটাল মাল্টিফোটন মাইক্রোস্কোপি দ্বারা পরীক্ষা করা রক্ত ​​​​কোষের প্রবাহ Q94 চিকিত্সা দ্বারা দমন করা হয়েছিল। Q94 কম রেনাল ক্ষতি সত্ত্বেও নাটকীয়ভাবে টিউবুলার কোষের বিস্তার বৃদ্ধি করেছে। থ্রম্বিন কোষের বিস্তারকে দমন করে এবং টিউবুলে অ্যাপোপটোসিসকে প্ররোচিত করে; এই প্রভাবগুলি Q94 চিকিত্সা দ্বারা প্রতিরোধ করা হয়েছিল। একসাথে নেওয়া, PAR-1 রেনাল IR আঘাতের সাথে যুক্ত ছিল। PAR-1 এর বাধা সম্ভবত রেনাল মাইক্রোসার্কুলেশন এবং টিউবুলার কোষের বেঁচে থাকা/প্রসারণের উন্নতি করে আঘাতের উন্নতি ঘটায়।

Data Avaআমি আমি এলability

লেখকরা নিশ্চিত করেছেন যে এই গবেষণার ফলাফলগুলিকে সমর্থনকারী ডেটা নিবন্ধের মধ্যে উপলব্ধ।

Cচালুflicts of Interest

সমস্ত লেখক ঘোষণা করেছেন যে তাদের কোন প্রতিযোগিতামূলক আগ্রহ নেই।

Authors' Cচালুtriবুtiচালুs

ইউ গুয়ান এবং ডাইসুকে নাকানো পাণ্ডুলিপি লিখেছিলেন এবং প্রাণী পরীক্ষা করেছিলেন। লেই লি ভিট্রো পরীক্ষায় সঞ্চালিত। হাওফেং ঝেং পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ করেছেন। আকিরা নিশিয়ামা পাণ্ডুলিপি সংশোধন করেছেন। লেই ঝাং এবং ইয়ে তিয়ান এই গবেষণাটি ডিজাইন করেছেন।

Acknowledgments

এই গবেষণাটি চীনের ন্যাশনাল ন্যাচারাল সায়েন্স ফাউন্ডেশন (নং 82000712) এবং চায়না পোস্টডক্টরাল সায়েন্স ফাউন্ডেশন (নং 2020M670385) দ্বারা সমর্থিত ছিল।

তথ্যসূত্র

[১] এমএন সিমন্স, এমজে শ্রেইবার এবং আইএস গিল, "সার্জিক্যাল রেনাল ইস্কেমিয়া: একটি সমসাময়িক ওভারভিউ," দ্য জার্নাল অফ ইউরোলজি।, ভলিউম। 180, না। 1, পৃ. 19-30, 2008।

[২] ওয়াই গুয়ান, ডি. নাকানো, ওয়াই ঝাং, এল. লি, ওয়াই তিয়ান এবং এ. নিশিয়ামা, "অপারেটরদের মধ্যে ইস্কেমিয়া/রিপারফিউশন ইনজুরির প্রযুক্তিগত পরিবর্তনশীলতা কাটিয়ে উঠতে রেনাল ফাইব্রোসিসের একটি মাউস মডেল," বৈজ্ঞানিক রিপোর্ট, ভলিউম। 9, না। 1, পৃ. 10435, 2019। 7 বায়োমেড রিসার্চ ইন্টারন্যাশনাল

[৩] এম. জোয়ানিডিস এবং পিজিএইচ মেটনিটজ, "আইসিইউতে তীব্র রেনাল ব্যর্থতার মহামারীবিদ্যা এবং প্রাকৃতিক ইতিহাস," ক্রিটিক্যাল কেয়ার ক্লিনিকস, ভলিউম। 21, না। 2, পৃ. 239-249, 2005।

[৪] D. Nakano, K. Doi, H. Kitamura, et al., "ইনট্রাভিটাল ইমেজিং দ্বারা প্রকাশিত এন্ডোটক্সেমিয়ার প্রাথমিক পর্যায়ে অলিগুরিয়ার একটি প্রক্রিয়া হিসাবে টিউবুলার প্রবাহ হার হ্রাস," আমেরি ক্যান সোসাইটি অফ নেফ্রোলজির জার্নাল , ভলিউম। 26, না। 12, পৃ. 3035–3044, 2015।

[৫] ডি. নাকানো এবং এ. নিশিয়ামা, "কিডনি প্যাথোফিজিওলজির মাল্টিফোটন ইমেজিং," ফার্মাকোলজিক্যাল সায়েন্সের জার্নাল, ভলিউম। 132, না। 1, পৃ. 1-5, 2016।

[৬] Y. Zhang, D. Nakano, Y. Guan, et al., "একটি সোডিয়াম-গ্লুকোজ কোট্রান্সপোর্টার 2 ইনহিবিটর একটি ভাস্কুলার এন্ডোথেলিয়াল বৃদ্ধির ফ্যাক্টর-নির্ভর পথ দ্বারা ইঁদুরের আঘাতের পরে রেনাল কৈশিক আঘাত এবং ফাইব্রোসিসকে কমিয়ে দেয়," কিডনি আন্তর্জাতিক, ভলিউম। 94, না। 3, পৃ. 524–535, 2018।

[৭] এস. নিশিওকা, ডি. নাকানো, কে. কিটাদা, এট আল।, "ইঁদুরের রেনাল ইস্কেমিয়া/রিপারফিউশন ইনজুরির উপর রেনাল ইস্কেমিক পূর্ব শর্তের উপকারী প্রভাবের জন্য সাইক্লিন-নির্ভর কিনেস ইনহিবিটর p21 অপরিহার্য," কিডনি ইন্টারন্যাশনাল, ভলিউম 85, না। 4, পৃ. 871–879, 2014।

[৮] Y. Guan, D. Nakano, Y. Zhang, et al., "একটি প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর-1 প্রতিপক্ষ নেফ্রোপ্যাথির মাউস মডেলে পডোসাইটের আঘাত থেকে রক্ষা করে," জার্নাল অফ ফার্মাকোলজিক্যাল সায়েন্সেস, ভলিউম। 135, না। 2, পৃ. 81–88, 2017।

[৯] এম. জিয়াং, কিউ. ওয়েই, জি. ডং, এম. কোমাতসু, ওয়াই. সু, এবং জেড. ডং, "প্রক্সিমাল টিউবুলে অটোফ্যাজি তীব্র কিডনি আঘাত থেকে রক্ষা করে," কিডনি ইন্টারন্যাশনাল, ভলিউম। 82, না। 12, পৃ. 1271–1283, 2012।

[১০] X. Hu, M. Su, J. Lin, et al., "করিন রেনাল ইসকেমিয়া/রিপারফিউশন ইনজুরিতে নিয়ন্ত্রিত হয় এবং কিডনি প্রতিস্থাপনের পরে বিলম্বিত গ্রাফ্ট ফাংশনের সাথে সম্পর্কিত," ডিজিজ মার্কারস, ভলিউম। 2019, আর্টিকেল আইডি 9429323, 8 পৃষ্ঠা, 2019।

[১১] পি. ওয়াং, এইচ. ওয়াং, কিউ. হুয়াং, এট আল 9, না। 6, পৃ. 1714-1727, 2019।

[১২] এল. ইয়াং, সিআর ব্রুকস, এস. জিয়াও, এট আল 125, না। 4, পৃ. 1620-1636, 2015।

[১৩] L. Xu, X. Li, F. Zhang, L. Wu, Z. Dong, এবং D. Zhang, "EGFR HIPK2 ওভার এক্সপ্রেশনের মাধ্যমে AKI থেকে CKD এর অগ্রগতি চালায়," Theranostics., vol. 9, না। 9, পৃ. 2712–2726, 2019।

[১৪] টি. হিফুমি, ডি. নাকানো, জে. চিবা, এট আল " টক্সিকন, ভলিউম। 141, পৃ. 112–117, 2018।

[১৫] এন. হায়াসে, কে. দোই, টি. হিরুমা, এট আল 10, না। 1, পৃ. 289, 2020।

[১৬] ই. ল্যাজেরি, এমএল অ্যাঞ্জেলোটি, এ. পেয়ারড এট আল।, "এন্ডোসাইকেল-সম্পর্কিত টিউবুলার সেল হাইপারট্রফি এবং প্রজেনিটার প্রসারণ তীব্র কিডনি আঘাতের পরে রেনাল ফাংশন পুনরুদ্ধার করে," প্রকৃতি যোগাযোগ, ভলিউম। 9, না। 1, পৃ. 1344, 2018।

[১৭] কে. টাকাওরি, জে. নাকামুরা, এস. ইয়ামামোটো, এট আল 27, না। 8, পৃ. 2393–2406, 2016।

[১৮] বিডি হামফ্রেইস, এমটি ভ্যালেরিয়াস, এ. কোবায়াশি, এট আল।, "ইনট্রিনসিক এপিথেলিয়াল কোষ আঘাতের পরে কিডনি মেরামত করে," সেল স্টেম সেল, ভলিউম। 2, না। 3, পৃ. 284-291, 2008।

[১৯] আর. ওয়াকাসাকি, কে. মাতসুশিতা, কে. গোলগোটিউ, এট আল 4, না। 4, 2019।

[২০] M. Riewald, RJ Petrovan, A. Donner, BM Mueller, এবং W. Ruf, "প্রোটিন সি পাথওয়ে দ্বারা এন্ডোথেলিয়াল সেল প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর 1 এর সক্রিয়করণ," বিজ্ঞান, ভলিউম। 296, না। 5574, পৃ. 1880-1882, 2002।

[২১] MJ Ludeman, H. Kataoka, Y. Srinivasan, NL Esmon, CT Esmon, and SR Coughlin, "PAR1 ক্লিভেজ এবং সিগন্যালিং এর প্রতিক্রিয়ায় সক্রিয় প্রোটিন C এবং থ্রম্বিন∗," The Journal of Biological Chemistry, vol. 280, না। 13, পৃ. 13122-13128,

2005.

[২২] জেএইচ গ্রিফিন, বিভি জ্লোকোভিক, এবং এলও মসনিয়ার, "অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন সি: অনুবাদের জন্য পক্ষপাতদুষ্ট," রক্ত, ভলিউম। 125, না। 19, পৃ. 2898-2907, 2015।

[২৩] R. Essalmani, D. Susan-Resiga, J. Guillemot, et al., "প্রোটিন C-এর থ্রম্বিন সক্রিয়করণের জন্য একটি লিভার প্রোপ্রোটিন কনভার্টেজ দ্বারা পূর্বে প্রক্রিয়াকরণের প্রয়োজন হয়," দ্য জার্নাল অফ বায়োলজিক্যাল কেমিস্ট্রি, ভলিউম। 292, না। 25, পৃ. 10564–10573, 2017।

[২৪] এস. ভ্যান লেকে এবং ডব্লিউ. ভ্যান বাইসেন, "রেনাল থ্রম্বোটিক মাইক্রোএনজিওপ্যাথির সাথে গুরুতর উচ্চ রক্তচাপ: স্বাভাবিক সন্দেহভাজন ব্যক্তির কী ঘটেছে?," কিডনি ইন্টারন্যাশনাল, ভলিউম। 91, না। 6, পৃ. 1271–1274, 2017।

[২৫] এম. ওয়াসডর্প, জে. ডুইটম্যান, এস. ফ্লোরকুইন, এবং সিএ স্পেক, "প্রোটিজ-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর-1 ঘাটতি ইঁদুরের স্ট্রেপ্টোজোটোসিন-প্ররোচিত ডায়াবেটিক নেফ্রোপ্যাথি থেকে রক্ষা করে," বৈজ্ঞানিক রিপোর্ট, ভলিউম। 6, না। 1, পৃ. 33030, 2016।