Cistanche Tubulosa থেকে Phenylethanol Glycosides এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

শু-পিং ইউ, এট আল

বিমূর্ত

পটভূমি:সিস্তানচেটিউবুলোসাএকটি ঐতিহ্যবাহী চীনা ভেষজ ঔষধ যা ব্যাপকভাবে অনাক্রম্যতা নিয়ন্ত্রণের জন্য ব্যবহৃত হয়।ফেনাইলথানয়েল্ডগ্লাইকোসাইডএই উদ্ভিদ থেকে (CPhGs) প্রাথমিকভাবে কার্যকরী উপকরণ। এই অধ্যয়নের লক্ষ্য ছিল ইঁদুরের BSA-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিস এবং হেপাটিক স্টেলেট কোষের সাথে জড়িত আণবিক প্রক্রিয়াগুলির উপর CPhG-এর প্রতিরোধমূলক এবং থেরাপিউটিক প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করা। আরেকটি ঐতিহ্যবাহী চীনা ভেষজ ওষুধ Biejiarangan (BJRG), একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

পদ্ধতি:ভিভো পরীক্ষায়, 75 টি এসডি ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে 6 টি গ্রুপে ভাগ করা হয়েছিল: স্বাভাবিক (পাসিত জল-চিকিত্সা করা), মডেল (বিএসএ-চিকিত্সা করা), পজিটিভ ড্রাগ (বিএসএ-চিকিত্সা করা প্লাস বিজেআরজি 600 মিলিগ্রাম/কেজি/দিন), এবং বিএসএ-চিকিত্সা করা প্লাস CPhGs (125, 250, এবং 500 mg/kg/day) গ্রুপ। লিভার এবং প্লীহা সূচক, অ্যাসপার্টেট অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (AST), অ্যালানাইন অ্যামিনোট্রান্সফেরেজ (ALT), হেক্সাডেসেনোয়িক অ্যাসিড (HA), ল্যামিনিন (LN), টাইপ III প্রোকোলাজেন (PCIII), টাইপ আইভিকোলাজেন (IV-C), হাইড্রোক্সিপ্রোলিন (হাইপিপি)। ), এবং ট্রান্সফর্মিং গ্রোথ ফ্যাক্টর 1 (TGF- 1) ইঁদুরের লিভারে পরিমাপ করা হয়েছিল৷ H&E এবং ম্যাসনের ট্রাইক্রোম স্টেনিং ব্যবহার করে প্রতিটি গ্রুপের জন্য লিভার ফাইব্রোসিসের জন্য হিস্টোপ্যাথোলজিকাল গ্রেডগুলি মূল্যায়ন করা হয়েছিল৷ TGF- 1, কোলাজেন I (Col-I), এবং কোলাজেন III (Col-III) এর অভিব্যক্তি একটি ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। এই প্রভাবগুলি NF-κB p65 এবং Col-I-এর এক্সপ্রেশন লেভেল নির্ধারণ করে ভিট্রোতে আরও মূল্যায়ন করা হয়েছিল পরিমাণগত রিয়েল-টাইম পিসিআর বিশ্লেষণের মাধ্যমে। কোল-আই প্রোটিন এক্সপ্রেশনও পশ্চিমা ব্লটিং দ্বারা পরীক্ষা করা হয়েছিল।

ফলাফল: সমস্ত ডোজ গ্রুপ (125, 250, এবং 500 mg/kg/day) CPhGs উল্লেখযোগ্যভাবে লিভার এবং প্লীহা সূচক হ্রাস করেছে, ALT, AST, HA, LN হ্রাস করেছে , PCIII, IV-C সিরাম স্তর, TGF- 1 সামগ্রী (P < 0।{14}}1,="" p="">< 0.01,="" এবং="" p=""><0.01), এবং="" হাইপ="" বিষয়বস্তু="" এছাড়াও="" cphgs="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" লিভার="" কোষের="" ফোলাভাব="" কমিয়েছে="" এবং="" কার্যকরভাবে="" হেপাটোসাইট="" নেক্রোসিস="" এবং="" প্রদাহজনক="" কোষের="" অনুপ্রবেশ="" রোধ="" করেছে।="" ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল="" ফলাফলগুলি="" দেখিয়েছে="" যে="" cphgs="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" tgf-="" 1="" (p=""><0.01, p=""><0.01, এবং="" p=""><0.01), col-="" i,="" এবং="" col-iii-এর="" অভিব্যক্তিকে="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" করেছে।="" hsc-t6-তে="" cphgs-এর="" (100,="" 75,="" 50,="" এবং="" 25="" ug/ml)="" ইন="" ভিট্রো="" প্রভাবগুলি="" দেখিয়েছে="" যে="" cphgগুলি="" nf-κb="" p65="" এবং="" col-i-এর="" mrna="" অভিব্যক্তিকে="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" করেছে="" এবং="" cphgs="" col-i="" প্রোটিনের="" অভিব্যক্তিকেও="">

উপসংহার:CPhG-এর একটি উল্লেখযোগ্য অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস প্রভাব রয়েছে এবং হেপাটিক ফাইব্রোসিসের চিকিত্সার জন্য হেপাটোপ্রোটেকটিভ এজেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

কীওয়ার্ড:হেপাটিক ফাইব্রোসিস,সিস্তানচে টিউবুলোসা,ফেনাইলথানয়েল্ডগ্লাইকোসাইড,কেমোকাইন বিএসএ, প্রতিরোধ এবং থেরাপি

ফেনাইলথানয়েল্ডগ্লাইকোসাইডভিতরেসিস্তানচেটিউবুলোসা

পটভূমি

হেপাটিক ফাইব্রোসিস হল লিভারের গুরুতর আঘাতের জন্য একটি ক্ষত নিরাময় প্রতিক্রিয়া যা বিভিন্ন কারণের দ্বারা প্ররোচিত ক্রনিচেপাটাইটিসের প্যাথোজেনেসিসে ঘটে। এই কারণগুলি হল ভাইরাল সংক্রমণ, অ্যালকোহল অপব্যবহার, কোলেস্টেসিস এবং বিপাকীয় এবং অটোইমিউন রোগ [1-3]। এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্স (ECM) এর প্রগতিশীল সঞ্চয় এবং হ্রাসকৃত পুনর্নির্মাণ লিভারের স্বাভাবিক স্থাপত্যকে ব্যাহত করে, যার ফলে হেপাটিক ফাইব্রোসিস হয় [৪]। হেপাটিক ফাইব্রোসিস হল ক্রনিক লিভার ডিজিজ এবং প্রায়ই অপরিবর্তনীয় সিরোসিস এবং কার্সিনোজেনেসিসে পরিণত হয়। বর্তমানে, হেপাটিক ফাইব্রোসিসের চিকিত্সার জন্য কোন পদ্ধতি বা কার্যকর ওষুধ নেই। অতএব, একটি অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস ড্রাগ খুঁজে বের করা জরুরি যা ফাইব্রোসিস এবং ক্যান্সারে লিভারের আঘাতের অগ্রগতি হ্রাস করবে।

সিস্তানচেটিউবুলোসাW (Orobanchaceae পরিবারের) একটি পরজীবী উদ্ভিদ যা চীনের জিনজিয়াংয়ের দক্ষিণাঞ্চলে ব্যাপকভাবে জন্মায় [৫]। লোকেরা সাধারণত কিডনিকে শক্তিশালী করতে, রক্তকে পুষ্ট করতে, অন্ত্রকে শিথিল করতে এবং বার্ধক্য বিলম্বিত করতে এটি ব্যবহার করে। এটি আনুষ্ঠানিকভাবে চীনা ফার্মাকোপিয়াতে তালিকাভুক্ত করা হয়েছে [6]।সিস্তানচেটিউবুলোসাবিভিন্ন সক্রিয় উপাদান রয়েছে। এই অন্তর্ভুক্তফেনাইলথানয়েল্ডগ্লাইকোসাইড(CPhGs), iridoids, এবং polysaccharides. অনেক সক্রিয় উপাদানের মধ্যে একটিসিস্তানচেটিউবুলোসা, CPhGshave ভিভো এবং ভিট্রো স্টাডিজ উভয় ক্ষেত্রেই প্রত্যয়ী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ক্লান্তি, নিউরোপ্রোটেক্টিভ এবং অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি প্রভাব প্রদর্শন করেছে [7]। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে CPhG-এর হেপাটোপ্রোটেকটিভ প্রভাব রয়েছে। এই প্রভাবগুলির অন্তর্নিহিত সম্ভাব্য প্রক্রিয়াগুলি হল ফ্রি র‌্যাডিকেলগুলির স্ক্যাভেঞ্জিং, হেপাটিক ঝিল্লির সুরক্ষা, ইমিউনোরেগুলেশন, অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধ, HBsAg এবং HBeAg-এর প্রকাশের বাধা, এবং HBV DNA প্রতিলিপি এবং অন্যান্য [8-11]। যাইহোক, সাহিত্যের কিছু অধ্যয়ন জিপিএইচসি-এর অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস প্রভাবকে সম্বোধন করে। অতএব, এই অধ্যয়নের লক্ষ্য ইঁদুরগুলিতে বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (বিএসএ) প্ররোচিত হেপাটিকফাইব্রোসিসের অ্যামোডেল ব্যবহার করে জিপিএইচসি-এর অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস প্রভাব তদন্ত করা। HSC-T6 কোষগুলিতে সম্পর্কিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করা হয়েছিল।

পদ্ধতি

রাসায়নিক এবং বিকারক

একটি হাইড্রক্সিপ্রোলিন কিট (ক্ষারীয় হাইড্রোলাইসিস) (লট:20140616) নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। Rat TGF- 1 স্যান্ডউইচেলিসা কিটগুলি (লট: 238240615) লিয়াঙ্কে বায়োটেক কোং, লিমিটেড (চীন) থেকে কেনা হয়েছিল। খরগোশ অ্যান্টি-কোলাজেনআই অ্যান্টিবডি (লট: 140619), খরগোশ অ্যান্টি-কোলাজেন III অ্যান্টিবডি (লট: 980788 ওয়াট), এবং খরগোশ অ্যান্টি-টিজিএফ- 1 অ্যান্টিবডি (লট: 140619) বেইজিং বায়োসিন্থেসিস বায়োটেকনোলজি কোং, এলটিডি (এলটিডি) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল চীন)। নরমালশীপ সিরাম (ওয়ার্কিং ফ্লুইড) (লট: WP141214), PV-6000(লট: WK141225), এবং DAB কিট (লট: K136621D) দিয়ে ঘেরা Zhongshan Golden Bridge BiotechCo., Ltd. (China) থেকে কেনা হয়েছে। প্রাথমিক অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ 2. অ্যান্টিবডি দ্রবণ (Alk-Phos. কনজুগেটেড, অ্যান্টি-র্যাবিট) এবং 2. অ্যান্টিবডি সলিউশন (Alk-Phos. কনজুগেটেড, অ্যান্টি-মাউস) (লট: 272387) ইনভিট্রোজেন কোম্পানি (USA) থেকে কেনা .

বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন (BSA) (লট: SLBG8239V) সিগমা (মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে কেনা হয়েছিল। ব্যবহারের আগে, BSA 18 g/L স্বাভাবিক স্যালাইনে প্রস্তুত করা হয়েছিল, ব্যাকটেরিয়া পরিস্রাবণ দ্বারা অপসারণ করা হয়েছিল এবং BSA 4 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। ভেড়ার চুল থেকে 1 গ্রাম লিপিডযুক্ত ফ্রুন্ডের অসম্পূর্ণ সহায়ক (লট: AF0220LA14, সাংহাই ইউয়ান ই বায়ো-টেকনোলজি কো., লিমিটেড (চীন,) 2 গ্রাম তরল প্যারাফিনের সাথে মেশানো হয়েছিল (লট: 20130815, Tianjinuyu, Finejinical Co. লিমিটেড। 600 মিলিগ্রাম/কেজি ঘনত্বে পাতিত জল।

ফেনাইলথানয়েল্ড গ্লাইকোসাইডভিতরেসিস্তানচেপ্রতিরোধমূলক প্রভাব আছে

উদ্ভিদ উপকরণ

সিস্তানচে টিউবুলোসা(Orobanchaceae family) চীনের জিনজিয়াং এর মিনফেং অঞ্চল থেকে কেনা হয়েছিল। উপাদানটি গবেষক জুন ঝাও, উইঘুর মেডিসিনের জন্য কী ল্যাবরেটরি, জিনজিয়াংয়ের মেটেরিয়া মেডিকা ইনস্টিটিউট দ্বারা প্রমাণীকৃত হয়েছে। ভাউচারের নমুনাগুলি জিনজিয়াংয়ের মেটেরিয়া মেডিকা ইনস্টিটিউটে জমা করা হয়েছিল।

CPhGs এর প্রস্তুতি

এর শুকনো এবং কাটা rhizomesসিস্তানচেটিউবুলোসা(6.{1}} কেজি) পরপর তিনবার রিফ্লাক্সের নিচে 70 শতাংশ ইথানল দিয়ে বের করা হয়েছিল এবং থিথানল নির্যাস পাওয়ার জন্য দ্রাবকটি সরানো হয়েছিল। প্রাপ্ত করার জন্য AB-8 রজন ব্যবহার করে ইথানলের নির্যাস বিশুদ্ধ করা হয়েছিলphenylethanoidগ্লাইকোসাইড(CPhGs)। প্রাণী অধ্যয়নের বিভিন্ন ডোজ গ্রুপের জন্য ব্যবহৃত CPhG-এর স্টক সলিউশন (500 mg/kg, 250 mg/kg, এবং 125 mg/kg, যথাক্রমে) 0.5 শতাংশ (5 g/L) কার্বোক্সিমিথাইল সেলুলোজে দ্রবীভূত হয়েছিল ( সোডিয়াম লবণ)।

CPhG-এর পরিমাণ নির্ধারণ

CPhG-তে দুটি উপাদানের (ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাকটিওসাইড) বিষয়বস্তু HPLC দ্বারা পূর্বে রিপোর্ট করা পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারিত হয়েছিল (ঝাং এট আল। 2004)[12]। HPLC একটি UV ডিটেক্টর দিয়ে সজ্জিত একটি Shimadzu LC-10AHPLC ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল৷ এইচপিএলসি কলামটি একটি ফেনোমেনেক্স জেমিনি ওডিএস কলাম ছিল (250 × 4.6 মিমি, 5 μm)। আইসোক্র্যাটিক মোবাইল ফেজে মিথানল-অ্যাসিটোনিট্রিল-1 শতাংশ অ্যাসিটিক অ্যাসিড (15:10:75, v/v/v) থাকে। ইলিউশন 40 মিনিটের জন্য ছিল এবং প্রবাহের হার 0.6 মিলি/মিনিট রাখা হয়েছিল। কলামের তাপমাত্রা 30 ডিগ্রিতে স্থির রাখা হয়েছিল। UV সনাক্তকরণ 334 এনএম এ ছিল।

প্রাণী এবং HSC-T6 সেল লাইন

[গ্রেড এসপিএফ] সুস্থ প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ স্প্রাগ-ডাউলি (এসডি) ইঁদুর (180-220 গ্রাম) জিনজিয়াং মেডিকেল ইউনিভার্সিটি অ্যানিমেল সেন্টার, লাইসেন্স নং: SCXK (নতুন) 2011-0004 থেকে কেনা হয়েছিল। ইঁদুরকে নির্দিষ্ট-প্যাথোজেন-মুক্ত (এসপিএফ) চা খাওয়ানো হয়েছিল। জিনজিয়াং মেডিক্যাল ইউনিভার্সিটির ফার্স্ট অ্যাফিলিয়েটেড হাসপাতালের অ্যানিমেল এথিক্স কমিটি দ্বারা প্রাণী পরীক্ষা সংক্রান্ত সমস্ত পদ্ধতি অনুমোদিত হয়েছিল। ইঁদুরগুলিকে নিয়ন্ত্রিত পরিবেশগত অবস্থার অধীনে খাঁচায় রাখা হয়েছিল (25 ডিগ্রি এবং একটি 12 ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্র) এবং স্ট্যান্ডার্ড ইঁদুরের ছোলার খাবার এবং ট্যাপ ওয়াটারে বিনামূল্যে অ্যাক্সেস ছিল। ইঁদুরগুলি চিকিত্সার আগে অভ্যস্ত ছিল।

একটি অমরকৃত ইঁদুরের হেপাটিক স্টেলেট সেল লাইন, HSC-T6, উহান Procell Gene BiotechnologyCo., LTD থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। (উহান, চীন)। HSC-T6 কোষগুলি Dulbecco's Modified Eagles Medium (High Glucose) (DMEM, Beijing, China) দ্বারা 10 শতাংশ ফেটালবোভাইন সিরাম (Gibco, দক্ষিণ আমেরিকা), 100 IU/ml পেনিসিলিন, এবং 100 ug/ml স্ট্রেপটোমাইসিন (চীন) দ্বারা পরিপূরক ছিল। ) 5 শতাংশ CO2 সহ 37 ডিগ্রীতে আর্দ্রিত ইনকিউবেটরে।

বিএসএ-প্ররোচিত লিভারের আঘাত এবং চিকিত্সা

পঁচাত্তরটি এসডি ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে ছয়টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল: সাধারণ (পাসিত জল-চিকিত্সা), মডেল (বিএসএ চিকিত্সা), পজিটিভ ড্রাগ (বিএসএ-চিকিত্সা করা প্লাস বিজেআরজি 600 মিগ্রা/কেজি/দিন) , এবং BSA-চিকিৎসাকৃত প্লাস CPhGs (125, 250, 500 mg/kg/day) গ্রুপ। BSA-চিকিৎসাকৃত প্লাস CPhGs (125, 250, 500 mg/kg/day) গ্রুপের প্রতিটি গ্রুপে 13টি ইঁদুর ছিল, এবং অন্য গ্রুপের প্রতিটি গ্রুপে 12টি ইঁদুর ছিল। বিএসএ-প্ররোচিত লিভারিনজুরি মডেলটিকে প্রাথমিক সংবেদনশীলতায় ভাগ করা হয়েছে এবং তারপরে একটি ইমিউনোলজিকাল আক্রমণ) [13]। সাধারণ গোষ্ঠী ব্যতীত, অন্যান্য গোষ্ঠীগুলিকে প্রাথমিক সংবেদনশীলতার জন্য 1, দিন 15, দিন 22, দিন 29 এবং 36 দিনে 0.5 মিলি (9 মিলিগ্রাম/মিলি) BSAFreund-এর অসম্পূর্ণ সহায়ক সহ একাধিক সাবকুটেনিয়াস ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। পঞ্চম ইনজেকশনের সাত দিন পর, র্যাট্রেটিনাল ভেইন প্লেক্সাসের মাধ্যমে রক্ত ​​প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং সিরাম অ্যালবুমিন অ্যান্টিবডিগুলির জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল। ইঁদুরের সিরামে বিএসএ অ্যান্টিবডি অ্যাডবল আগর ডিফিউশন পদ্ধতি দ্বারা সনাক্ত করা হয়েছিল। বিএসএ অ্যান্টিবডি-পজিটিভ ইঁদুরের ক্যাডাল ভেইন দিয়ে নরমালস্যালাইনে ০.৪ মিলি বিএসএ দিয়ে সপ্তাহে দুবার দশবার অ্যাটাক ইনজেকশন দেওয়া হয়েছিল। ইনজেকশনের ঘনত্ব এবং সময় ছিল 5৷{36}}, 5.50, 6৷{42}}, 6.50,7৷{46}}, 7.50, 8.50, 9.00, 9.50 এবং 10.00 g/L দিনে 46 , দিন 50, দিন 53, দিন 57, দিন 60, দিন 64, দিন 67, দিন 71, দিন 74 এবং দিন 78। সাধারণ গোষ্ঠীতে, সাধারণ স্যালাইন বিএসএর পরিবর্তে ইমিউনোলজিক্যাল প্রাথমিক (সংবেদনশীলতা) এবং মাধ্যমিক (আক্রমণ) ইনজেকশনের জন্য ব্যবহৃত হত এবং অন্যান্য শর্তগুলি মডেল গ্রুপের মতোই ছিল।

সাধারণ গোষ্ঠীকে মৌখিকভাবে 10 মিলি/কেজি/দিনের ডোজ দিয়ে পাতিত জল দেওয়া হয়েছিল। মডেল গ্রুপকে মৌখিকভাবে 10 মিলি/কেজি/দিন 0.5 শতাংশ সিএমসি-না দ্রবণ দেওয়া হয়েছিল। পজিটিভ ড্রাগ গ্রুপকে মৌখিকভাবে 600 মিলিগ্রাম/কেজি/দিন বিজেআরজি দেওয়া হয়েছিল। BSA-চিকিত্সা করা প্লাস CPhGs (125,250, এবং 500 mg/kg/day) গোষ্ঠীগুলিকে যথাক্রমে 125, 250, এবং 500 mg/kg/day CPhGs দেওয়া হয়েছিল৷ ইঁদুরের দৈনিক ডোজ শেষ ইনজেকশনের পর দুই সপ্তাহ ধরে চলতে থাকে৷

পরীক্ষামূলক সময়ের পরে, 10 শতাংশ ক্লোরাল হাইড্রেটের আগে ইঁদুরগুলিকে 12 ঘন্টার জন্য উপোস করা হয়েছিল এবং তারপরে অবিলম্বে অঘোষিত করা হয়েছিল। অবিলম্বে ব্যবহৃত প্রতিটি রাতান্ড থেকে সিরাম নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। লিভার দুটি উদ্দেশ্যের জন্য সংগ্রহ করা হয়েছিল: (1) হাইপ কিটস্যান্ডের জন্য তরল নাইট্রোজেন সংরক্ষণ (2) হিস্টোলজিক্যাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল পরীক্ষার জন্য 10 শতাংশ ফর্মালডিহাইডে ফিক্সেশন। প্রাণী অধ্যয়নের সম্পূর্ণ সময়কাল ছিল 93 দিন।

ফেনাইলথানয়েল্ড গ্লাইকোসাইডভিতরেসিস্তানচেপ্রতিরোধমূলক প্রভাব আছে

লিভার এবং প্লীহা সূচক

লিভার এবং প্লীহা ল্যাপারোটোমিয়া দ্বারা বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল এবং 4 ডিগ্রি সাধারণ স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। ফিল্টার পেপার দিয়ে অতিরিক্ত জল শোষণ করার পর, সংশ্লিষ্ট সূচকগুলি গণনা করার জন্য লিভার এবং প্লীহাকে ওজন করা হয়েছিল: আপেক্ষিক অঙ্গ ওজন=অঙ্গ ভর (g)/স্বতন্ত্র দেহের ভর (g) × 100 শতাংশ [14]।

লিভার ফাইব্রোসিসের চিহ্নিতকারীর বিশ্লেষণ

ALT এবং AST (মাইন্ড রে স্বয়ংক্রিয় জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষক, A086A0182) পরিমাপ করে BSA-প্ররোচিত লিভারিনজুরির বিরুদ্ধে CPhG-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছিল। লিভার ফাইব্রোসিসের বিকাশ এবং চিকিত্সার প্রভাবগুলি HA, LN, PC III, এবং IV-C (কেমিলুমিনেসেন্স বিশ্লেষক, TaiGeKeXin, MP2808) পরীক্ষা করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

হাইপ কন্টেন্ট এবং TGF- 1 বিশ্লেষণ

লিভারের টিস্যুতে হাইপের মাত্রা কিটের নির্দেশাবলী অনুসারে একটি স্পেকট্রোফটোমেট্রিক পদ্ধতির দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল৷ হাইপের স্তরটিকে Hyp (ug)/প্রোটিন (mg) হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল৷ Hyp (ug/mg)=(মাপা OD) - ফাঁকা OD)/(স্ট্যান্ডার্ড OD ফাঁকা OD)×5 (ug/ml) × 10/টিস্যু ভেজা ওজন (ml/mg)। TGF- 1-এর হেপাটিক ঘনত্ব নির্মাতার নির্দেশাবলী অনুযায়ী ELISA কিট ব্যবহার করে সনাক্ত করা হয়েছিল। ফাইব্রোসিসের উপর CPhG-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব TGF- 1-এর অভিব্যক্তি স্তর দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল।

হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরীক্ষা

বাম লোবের একই অংশে থাকা যকৃতের টিস্যুকে 10 শতাংশ ফর্মালডিহাইড দ্রবণে ছিন্ন করে স্থির করা হয়েছিল। একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের নিচে হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করার জন্য টিস্যুগুলিকে প্রচলিত H&E এবং ম্যাসন'স্ট্রিক্রোম স্টেনিং দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। লিভার টিস্যুতে কোলাজেন টাইপ I, কোলাজেন টাইপ III, এবং TGF- 1 এর অভিব্যক্তি ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং [15] দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

আধা-পরিমাণগত ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি রিপোর্ট করা পদ্ধতি [16, 17] অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। নিম্নলিখিত শ্রেণীবিভাগগুলি টিজিএফ- 1 পজিটিভ সেলগুলির জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল: "-" প্রায় কোনও অভিব্যক্তি নির্দেশ করে না, 20=l; " প্লাস " ইঙ্গিত করে ধনাত্মক কোষগুলি পৃথকভাবে ক্ষতক্ষেত্রে জড়ো হয়েছে, 21=2; " প্লাস প্লাস " ক্ষত এলাকার চারপাশে জড়ো হওয়া ছোট গোষ্ঠীতে ইতিবাচক কোষ নির্দেশ করে, 22=4; " প্লাস প্লাস প্লাস " বিচ্ছুরিত ধনাত্মক কোষকে 23=8 হিসাবে প্রকাশ করে। ফলাফল একটি অনুক্রমিক একীকরণ প্রতিনিধিত্ব করে। কোলাজেন প্রকার Iand কোলাজেন প্রকার III ক্রোমোজেনিক ডিগ্রি এবং স্কোপকে পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য CRI-তে রূপান্তরিত করা হয়েছিল (ক্রোমোজেনিক ডিগ্রি × ক্রোমোজেনিক পরিসর)। ক্রোমোজেনিক ডিগ্রি দুর্বল " প্লাস ", মাঝারি " প্লাস প্লাস " এবং শক্তিশালী " প্লাস প্লাস প্লাস " এ বিভক্ত। ক্রোমোজেনিক পরিসরটি " প্লাস " এ বিভক্ত, এর ক্রোমোজেনিক পরিসর < ভিউ="" 1/4;="" "="" প্লাস="" প্লাস="" ",="" এর="" ক্রোমোজেনিক="" রেঞ্জ="" অফ="" ভিশন/4-2/4;="" "="" প্লাস="" প্লাস="" প্লাস",="" এর="" ক্রোমোজেনিক="" পরিসর="" দৃষ্টি="" 2/4-3/4;="" "="" প্লাস="" প্লাস="" প্লাস="" প্লাস",="" এর="" ক্রোমোজেনিক="" রেঞ্জ=""> 3/4। ব্লাইন্ডেডস্কোরিং দুই ব্যক্তি দ্বারা সম্পাদিত হয়েছিল যেখানে " প্লাস " হল 1; " প্লাস প্লাস " হল 2, " প্লাস প্লাস প্লাস " হল 3, এবং " প্লাস প্লাস প্লাস প্লাস " হল 4। তিনটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র পর্যবেক্ষণমূলক ক্ষেত্র (বিবর্ধন × 200) প্রতিটি বিভাগের জন্য এলোমেলোভাবে নির্বাচন করা হয়েছে, নমুনার গড় স্তর হিসাবে ব্যবহৃত আধা-পরিমাণগত স্তর।

কোষ পরীক্ষা

HSC-T6 কোষগুলি একটি 96- ভাল প্লেটে প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল৷ প্রাথমিকভাবে, কোষগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য 10 শতাংশ FBS ধারণকারী DMEM দিয়ে সংষ্কৃত করা হয়েছিল। 12 ঘন্টার জন্য কোষগুলিকে অনাহারে রাখার জন্য FBS ছাড়াই মাধ্যমটিকে ডিএমইএম দিয়ে প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল। কোষগুলিকে DMEM দিয়ে সংষ্কৃত করা হয় যাতে 24 ঘন্টার জন্য 5.0 ng/mLTGF- 1 (FBS ছাড়া) থাকে। অবশেষে, CPhGs এর বিভিন্ন ঘনত্ব (100ug/ml, 50ug/ml, এবং 25ug/ml), অ্যাক্টিওসাইড (6 ug/ml, 3 ug/ml, এবং 1.5 ug/ml), andechinacoside (500ug/ml, 250ug/ml, এবং 125ug/ml) চতুর্মুখী কূপে প্লেটে বের করে 48 ঘন্টার জন্য incubated করা হয়।

রিয়েল-টাইম পিসিআর বিশ্লেষণ

NF-κB, p65, এবং collagenI এর mRNA এক্সপ্রেশন লেভেল রিয়েল-টাইম পিসিআর দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। HSC-T6 কোষে এমআরএনএ এক্সপ্রেশন নির্ধারণ করতে, কোষগুলিকে (4 × 105 কোষ) 3 মিলি ডিএমইএম সহ 10 শতাংশ FBS সহ ছয়-কূপ প্লেটে বীজ দেওয়া হয়েছিল এবং 37 ডিগ্রি এবং 5 শতাংশ CO2 এ রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল, তারপরে সেল কালচার মিডিয়াকে পরিবর্তিত করা হয়েছিল টুসেরাম-মুক্ত ডিএমইএম। এরপরে, CPhGs (100 ug/ml, 50 ug/ml, এবং 25 ug/ml), Acteoside (6 ug/ml, 3 ug/ml, এবং 1.5 ug/ml), এবং echinacoside (500 ug/ml, 250 ug /ml, এবং 125ug/ml) কূপে যোগ করা হয়েছে। CPhGs বা মনোমেরিক কম্পোজিশনের সাথে 48 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পর, TRIzol রিএজেন্ট (Invitrogen, USA) ব্যবহার করে মোট RNA বের করা হয়েছিল এবং 15 সেকেন্ড ধরে ক্লোরোফর্ম দিয়ে জোরে জোরে আন্দোলিত হয়েছিল। ঘরের তাপমাত্রায় ৩ মিনিট বসার পর, লাইসেটকে 12,000 × g 15 মিনিটের জন্য 4 ডিগ্রিতে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়। জলীয় পর্যায়ের আরএনএকে আইসোপ্রোপ্যানল দিয়ে প্ররোচিত করা হয়েছিল, এবং উপরের জলীয় পর্যায়টি একটি নতুন মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউবে স্থানান্তরিত হয়েছিল। আরএনএ 0.75 শতাংশ ইথানল যোগ করে প্ররোচিত হয়েছিল, তারপরে মাইক্রোসেন্ট্রিফিউজ টিউবটি 12,000 × g 4 ডিগ্রিতে 5 মিনিটের বেশি নয়। সুপারনাট্যান্ট সরানো হয়েছিল এবং আরএনএ 5-10 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় শুকানো হয়েছিল। প্রাইমারের নির্দিষ্ট সেট (সাংগন, সাংহাই, চীন) যেগুলি ইঁদুর-অ্যাক্টিনের পরিবর্ধনের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল [জেনব্যাঙ্ক: এনএম_031144.3], কোলাজেন আই [জেনব্যাঙ্ক: এনএম_ 053304.1], এবং এনএফ- κB p65[GenBank: NM_199267.2] জিনগুলি ব্যাচ প্রাইমার 3 ব্যবহার করে ডিজাইন করা হয়েছিল। ফরোয়ার্ড (FW) এবং বিপরীত (RV) প্রাইমারগুলি নিম্নরূপ ছিল: কোলাজেন I (FW: GGA GAGAGC ATG ACC GAT GG, RV: GGG ACT TCT TGAGGT TGC CA), NF-κB p65 (FW: CAT ACG CTG ACCCTA GCC TG, RV: TTT CTT CAA TCC GGT GGCGA), -actin (FW: TAA GGC CAA CCG TGA AAA GATG, RV: AGA GCTA CAG GGA CAA CAC A)। ফলাফলগুলি হাউসকিপিংজিনের এমআরএনএ-তে স্বাভাবিক করা হয়েছিল - একটি অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে অ্যাক্টিন এবং সম্পর্কিত এমআরএনএ স্তরগুলি উপস্থাপন করা হয়েছে

8 μL IQ SYBR GreenSupermix, 1 μL 10 pM প্রাইমার পেয়ার, 8.5 μL পাতিত জল, এবং 2.5 μL cDNA দিয়ে প্রতিক্রিয়া সম্পাদিত হয়েছিল। প্রতিটি পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া নিম্নলিখিত অবস্থার অধীনে সঞ্চালিত হয়েছিল: 3 মিনিটের জন্য 95 ডিগ্রী, তারপর 95 ডিগ্রীতে 10 সেকেন্ডের 40 সাইকেল, 55 ডিগ্রীতে 30 সেকেন্ড এবং এক্সটেনশনের জন্য 55 ডিগ্রী - 95 ডিগ্রীতে 10 সেকেন্ড, তারপরে সিঙ্গেলফ্লুরোসেন্স পরিমাপ। চূড়ান্ত ফলাফল আপেক্ষিক মান (2-ΔΔCt) সহ বর্ণনা করা হয়েছিল। iQ5 রিয়েল-টাইম পিসিআর সনাক্তকরণ সিস্টেম দ্বারা গণনা এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ

কোলাজেন I (Abcam, Cambridge, UK, Art No: ab34710) প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরগুলি ওয়েস্টার্নব্লটিং দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল [-অ্যাক্টিন (লট: 60008-1-lg; প্রোটিনটেক, চায়না) একটি হাউসকিপিং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে। সম্পূর্ণ কোষের নির্যাস রেডিওইমিউনোপ্রেসিপিটেশন অ্যাস (RIPA) (থার্মো সায়েন্টিফিক, ইউএসএ) বাফার ব্যবহার করে 1 শতাংশ হাল্টপ্রোটিজ ইনহিবিটর ককটেল (থার্মো সায়েন্টিফিক, ইউএসএ) এবং 1 শতাংশ হাল্ট ফসফেটেস ইনহিবিটর ককটেল (থার্মো সায়েন্টিফিক, ইউএসএ) ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছিল। ব্র্যাডফোর্ড পদ্ধতি দ্বারা প্রোটিনের ঘনত্ব পরিমাপ করা হয়েছিল এবং পরিমাপ করা হয়েছিল [18]। প্রোটিন (10-50 ug) একটি 10 ​​শতাংশ SDS-PAGE জেলে আলাদা করা হয়েছিল এবং PVDF মেমব্রেনে (মিলিপুর, USA) স্থানান্তরিত হয়েছিল। 5 শতাংশ BSA সহ ঘরের তাপমাত্রায় 1 ঘন্টার জন্য ঝিল্লি ব্লক করা হয়েছিল এবং প্রাথমিক অ্যান্টিবডি (অ্যান্টি-কোলা জেন I)। অ্যান্টিবডি, 1:200 ডাইলিউশন বা মাউস mAb-এর -অ্যাক্টিন,1:5000 ডিলিউশন) রাতারাতি 4 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল। সংশ্লিষ্ট Alk-Phos. কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি ঘরের তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করা হয়েছিল। অবশেষে, থিমব্রেনগুলি 1 × Tris–HClsaline দিয়ে 0.1 শতাংশ টুইন 20 দিয়ে তিনবার ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল এবং GEL DOC XR ইমেজিং সিস্টেম (বায়ো-র্যাড) দ্বারা সংকেতগুলি স্ক্যান করা হয়েছিল এবং ভিজ্যুয়ালাইজ করা হয়েছিল। ডেনসিটোমেট্রিক বিশ্লেষণ আগ্রহের প্রোটিনগুলির উপর সঞ্চালিত হয়েছিল এবং GEL DOCImage স্টুডিও সফ্টওয়্যার (বায়ো-র্যাড) দ্বারা অ্যাক্টিনে স্বাভাবিক করা হয়েছিল। অ্যাক্টিন অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

শাপিরো-উইল্ক স্বাভাবিকতা পরীক্ষা এবং লেভেনের বৈকল্পিক সমগোত্রীয়তা পরীক্ষাটি প্রকরণের স্বাভাবিকতা এবং একজাতীয়তা যাচাই করার জন্য প্রয়োগ করা হয়েছিল। Tukey-এর পোস্ট-হক টেস্ট দ্বারা অনুসৃত প্রকরণের বিশ্লেষণ (ANOVA) একজাতীয়, সাধারণত বিতরণ করা ডেটার মধ্যে পরিসংখ্যানগত পার্থক্য সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ক্রুসকাল-ওয়ালিস নন-প্যারামেট্রিক পরীক্ষাটি ডেটা বিশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল যা সাধারণত বিতরণ করা হয় না বা একজাতীয় নয়। ফলাফলগুলি গড় ± SD হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। তাৎপর্য P < 0="" এ="" সেট="" করা="" হয়েছিল৷{6}}৫.="" সমস্ত="" ডেটা="" spss="" 16.0="" সফ্টওয়্যার="" (জিনজিয়াং="" মেডিকেল="" বিশ্ববিদ্যালয়)="" দ্বারা="" বিশ্লেষণ="" করা="">

ফলাফল

CPhGsCPhGs এর পরিমাণগত সংকল্পসিস্তানচেটিউবুলোসাদুটি রয়েছেফেনাইলথানয়েল্ডগ্লাইকোসাইড, echinacoside, এবং acteoside, এবং CPhG-এ তাদের বিষয়বস্তু HPLC বিশ্লেষণ (চিত্র 1) দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল যথাক্রমে 42.71 ± 0.42 শতাংশ এবং 14.27 ± 0.18 শতাংশ।

লিভার এবং প্লীহা সূচক

সারণী 1 হিসাবে দেখানো হয়েছে, মডেল গ্রুপের লিভার এবং প্লীহা সূচকগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয়েছিল [P < 0৷{3}}1,p="">< 0.05]।="" বিভিন্ন="" ডোজ="" গ্রুপে="" পজিটিভ="" ড্রাগ="" bjrg="" এবং="" cphg-এর="" লিভার="" এবং="" প্লীহা="" সূচকগুলি="" মডেল="" গ্রুপের="" তুলনায়="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" পেয়েছে="" পিলিভার="0.005;" pspleen="0.017," pspleen="0.027," pspleen="0.024,PSpleen=0.070," যথাক্রমে]।="" লিভার="" এবং="" প্লীহা="" ইন্ডিসিস="" মডেল="" গ্রুপের="" তুলনায়="" কম="">

ALT, AST কার্যক্রম এবং লিভার ফাইব্রোসিসমার্কারের উপর CPhG-এর প্রভাব

বর্তমান গবেষণায়, মডেল গ্রুপে হেপাটিক এনজাইম AST এবং ALT-এর সিরামের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে, যা BSA প্ররোচিত লিভার ফাইব্রোসিস ইঁদুরে হেপাটোসেলুলার ক্ষতি প্রতিফলিত করে। যাইহোক, পরীক্ষায় দেখা গেছে যে BJRG (600 mg/kg) এবং CPhGs (125, 250, এবং 500 mg/kg) দিয়ে চিকিত্সা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে AST[অতীত < 0.001,="" অতীত="">< 0.001,="" অতীত="">< 0.001,="" অতীত="">< 0.001,="" যথাক্রমে]="" এবং="" alt="" [palt="0.117," palt="0.139," palt="0.189" ,="" palt="0.255," যথাক্রমে]="" হেপাটিক="" ফাইব্রোসিস্যাটের="" মাত্রা।="" (টেবিল="">

মডেল ইঁদুরগুলিতে HA, LN, PC এবং IV-C-এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে [PHA < 0৷{3}}01,="" pln="">< 0৷{39}="" }01,="" ppciii="0৷{45}}02," piv-c=""><0.001, যথাক্রমে]।="" মডেল="" গ্রুপের="" সাথে="" তুলনা="" করে,="" ha="" [pha="0.009," pha="0.007," pha="0.009," pha="0.023," যথাক্রমে],="" ln="" এর="" স্তরগুলি="" [pln="0.011," pln="0.004," p="" ln="0.026," p="" ln="0.069," যথাক্রমে],="" pc="" iii[p="" pciii="" {{26="" }}.006,="" p="" pciii="0.067," p="" pciii="0.136," p="" pciii="0.296," যথাক্রমে],="" এবং="" iv-c="" [p="" iv-c=""><0.001, p="" iv-c=""><0.001,p iv-c=""><0.001, p="" iv-c=""><0.001, যথাক্রমে]="" বিজেআরজি="" (600="" মিলিগ্রাম/কেজি)="" এবং="" সিপিএইচজিগুলি="" বিভিন্ন="" ডোজ="" গ্রুপে="" (125,="" 250,="" এবং="" 500="" মিলিগ্রাম/কেজি)="" দ্বারা="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" পেয়েছে="" )="" (সারণী="">

হাইপ কন্টেন্ট এবং TGF- 1

লিভারের টিস্যুতে হাইপলেভেল পরিমাপ করেও কোলাজেন সামগ্রী সনাক্ত করা হয়েছিল। সারণি 4 এ দেখানো হয়েছে, মডেল গ্রুপে গড় হাইপ স্তর স্বাভাবিক গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, কিন্তু বিজেআরজি গ্রুপ এবং বিভিন্ন সিপিএইচজি ডোজ গ্রুপে এটি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে।

ইঁদুরের মডেলগ্রুপের TGF{{0}} এর হেপাটিক ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে [P < 0৷{8}}01]৷মডেল="" গোষ্ঠীর="" সাথে="" তুলনা="" করে,="" ইতিবাচক="" ওষুধের="" tgf-="" 1="" মাত্রা="" এবং="" বিভিন্ন="" cphgs="" ডোজ="" গ্রুপগুলি="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" হ্রাস="" পেয়েছে="" [p="" tgf-="" 1="">< 0.001,="" p="" tgf-="" 1="">< 0.001,p="" tgf{{10="" }}="">< 0.001,="" ptgf-="" 1="">< 0.001,="" যথাক্রমে]।="" ফলাফলগুলি="" সারণী="" 4="" এ="" সংক্ষিপ্ত="" করা="">

হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরীক্ষা

H&E এবং ম্যাসনের ট্রাইক্রোমের সাথে দাগযুক্ত লিভারের টিস্যু বিভাগের স্বাভাবিক পর্যবেক্ষণগুলি পৃথক হেপাটাইক্লোবুলস এবং হেপাটিক সাইনোসয়েডগুলি প্রদর্শন করে। মডেল ইঁদুরের লিভারের টিস্যুর গঠন বিকল হয়ে গিয়েছিল এবং যকৃতের টিস্যু এবং হেপাটিক সাইনোসয়েডগুলি প্রচুর পরিমাণে সংযোগকারী টিস্যু দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। যাইহোক, মডেল গ্রুপের তুলনায় চিকিত্সা গ্রুপে আরও সাধারণ সাইটোআর্কিটেকচার এবং কম সংযোগকারী টিস্যু সনাক্ত করা হয়েছিল।

H&E স্টেনিং

সাধারণ গ্রুপে, অস্বাভাবিক পোর্টাল এলাকা এবং হেপাটিক সাইনোসয়েড ছাড়া হেপাটিক লোবিউলের গঠনগত অখণ্ডতা পরিলক্ষিত হয়। হেপাটিক কর্ডগুলি একটি সুশৃঙ্খল ফ্যাশনে সাজানো হয়েছিল, মূল গোলাকার এবং পরিষ্কার। নিউক্লিয়াস কোষের কেন্দ্রে অবস্থিত, প্রচুর সাইটোপ্লাজম সহ। শুধুমাত্র পোর্টাল এলাকায় অল্প পরিমাণে আঁশযুক্ত টিস্যু থাকে (চিত্র 2a)।

মডেল গ্রুপে, লোবুলার কাঠামো গুরুতরভাবে ক্ষতিগ্রস্ত হয়েছিল। লিভারের কোষগুলি হালকা জলীয় অবক্ষয় দেখায়, বেশিরভাগ বেলুনিং অবক্ষয় এবং/অথবা চর্বিযুক্ত অবক্ষয়। প্রদাহজনক কোষের অনুপ্রবেশের গঠন, ব্যাপক তন্তুযুক্ত টিস্যু হাইপারপ্লাসিয়া, ফাইবারাস সেপ্টামের বড় সংখ্যক গঠন, বিভক্ত লোবিউল এবং উল্লেখযোগ্য লিভার কোষের বিস্তারও পরিলক্ষিত হয়েছে। এই পর্যবেক্ষণগুলি ইঁদুরের ইমিউন ইনজুরি পশু মডেল প্রতিষ্ঠার সাফল্য নিশ্চিত করেছে। হেপাটিক ফাইব্রোসিস (চিত্র 2বি)।

মডেল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, বিভিন্ন CPhG-তে প্রদাহজনক কোষের অনুপ্রবেশ হ্রাস পেয়েছে। এছাড়াও কম নেক্রোসিস এবং লিভার কোষের ফ্যাটি অবক্ষয় এবং সেইসাথে ফাইব্রোসিস উপশম লক্ষ্য করা গেছে। CPhG ইঁদুরের BSA-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিসের প্যাথলজিকে উল্লেখযোগ্যভাবে প্রশমিত করেছে, লিভারকোষের ফোলাভাব কমিয়েছে এবং হেপাটোসাইট নেক্রোসিস এবং প্রদাহজনক কোষের অনুপ্রবেশকে কার্যকরভাবে প্রতিরোধ করেছে, পরামর্শ দেয় যে CPhGsexert BSA-প্ররোচিত হেপাপ্যাটিক ফাইব্রোসিসের উপর একটি প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব ফেলে। (চিত্র 2c-f)।

ম্যাসনের ট্রাইক্রোম স্টেনিং

সাধারণ গ্রুপে, লিভারের টিস্যু স্বাভাবিক ছিল। হেপাটিক পোর্টাল এলাকায় অল্প সংখ্যক ব্লুকোলাজেন ফাইবার দেখা গেছে এবং লিভারের টিস্যু স্বাভাবিকভাবে গঠন করা হয়েছে (চিত্র 3a)। সাধারণ গ্রুপের লিভার টিস্যুর সাথে তুলনা করে, ফাইব্রাস টিস্যু কেন্দ্রীয় লিফলেট দ্বারা প্রসারিত হয় এবং লিভার প্যারেনকাইমায় প্রসারিত হয়। কোলাজেন ফাইবারগুলি প্রসারিত এবং সংযুক্ত এবং সমগ্র লোবিউলকে আবৃত করে এবং কেন্দ্রীয় শিরাকে ঘিরে রাখে। হেপাটোসাইট ফাইব্রোসিস, লোবুলার স্ট্রাকচারাল ড্যামেজ, পেরিপোর্টাল ফাইব্রোসিস, এবং সিউডোলোবুল গঠন (চিত্র 3বি) সহ এই প্রভাবগুলি প্রমাণ দেয় যে মডেলটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল।

মডেল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, পজিটিভ ড্রাগ কন্ট্রোল গ্রুপের কোলাজেন ফাইবারগুলি পেরিফেরাল পোর্টাল এলাকা (চিত্র 3c) থেকে হালকাভাবে বাইরের দিকে প্রসারিত ছিল। মডেল গোষ্ঠীর সাথে তুলনা করলে, বিভিন্ন CPhGs ডোজ গ্রুপে কোলাজেন ফাইবার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, ফাইবারের বিস্তারকে বাধা দেওয়া হয়েছিল এবং লিভার প্যারেনকাইমার মধ্যে ফাইব্রাস টিস্যুর বিস্তার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে CPhGগুলি BSA-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিস (চিত্র 3d–f) থেকে রক্ষা করে।

ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং

গুরুত্বপূর্ণভাবে, কোলাজেন টাইপ I এবং কোলাজেন টাইপ III এর অভিব্যক্তি হেপাটিক ফাইব্রোসিসের বিকাশে অপরিহার্য ভূমিকা পালন করে এবং লিভারের টিস্যুতে তাদের উত্পাদন এবং জমা হওয়া অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস কার্যকারিতার একটি গুরুত্বপূর্ণ নির্ধারক হিসাবে কাজ করতে পারে। ফলাফলগুলি সারণী 5 এ সংক্ষিপ্ত করা হয়েছে।

কোলাজেন টাইপ আই

সাধারণ গ্রুপ প্রকাশ করে কোলাজেন টাইপ I প্রধানত রক্তবাহী জাহাজ এবং পোর্টাল এলাকায়। মডেল গ্রুপ পোর্টাল এলাকায় কোলাজেন টাইপ I ভাস্কুলার ফাইব্রোসিসকে উচ্চভাবে প্রকাশ করেছে। ডিস-এর স্পেসে, কোলাজেন টাইপ I স্টেনিং একটি স্ট্রিক বা প্যাচি ডিস্ট্রিবিউশন হিসাবে পরিলক্ষিত হয়েছিল। কোলাজেন ফাইব্রোসেপ্টাকে আবদ্ধ করে সিউডোলোবুল গঠন করে। এই পরীক্ষাগুলিতে, BJRJ (600 mg/kg) এবং CPhGs (125, 250, এবং 500 mg/kg) [PCol I= 0.002, PCol I {{6} এর বিভিন্ন ডোজ গ্রুপের জন্য কম ফাইব্রাস সেপ্টা তৈরি হয়েছিল }}.001, PCol I=0.023, এবং PCol I=0.044, যথাক্রমে]। অর্ধ-পরিমাণগত ফলাফলগুলি প্রকাশ করেছে যে তাদের কোলাজেন টাইপ I-এর অভিব্যক্তিটি মডেল গ্রুপের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র 4)।

কোলাজেন প্রকার III

কোলাজেন টাইপ III স্বাভাবিক গোষ্ঠীতে দুর্বলভাবে প্রকাশ করা হয়েছিল এবং পোর্টাল এবং হেপাটিক শিরাগুলির আশেপাশের পেরিফেরাল অঞ্চলগুলি অবিচ্ছিন্ন তন্তুগুলির পরিবর্তে অল্প পরিমাণে সূক্ষ্ম হলুদ প্রদর্শন করেছিল (চিত্র 5a)। মডেল গ্রুপে, কোলাজেন ফাইবারগুলি প্রশস্ত এবং পুরু কর্ডগুলি প্রদর্শন করে, যা দৃঢ় অভিব্যক্তি নির্দেশ করে, প্রধানত পোর্টাল এবং তন্তুযুক্ত টিস্যু এলাকায় অবস্থিত (চিত্র 5বি)।

BJRJ (600 mg/kg) এর কোলাজেন ফাইবার এবং CPhGs-এর বিভিন্ন ডোজগ্রুপ (125, 250, এবং 500 mg/kg) ফিলামেন্টাস এবং কেন্দ্রীয় শিরা এবং পোর্টাল এলাকার চারপাশে বিতরণ করা হয়েছিল। মডেল গ্রুপের সাথে তুলনা করে, কোলাজেন ফাইবারগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, দাগগুলি ফ্যাকাশে এবং পাতলা ছিল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং দুর্বলভাবে পজিটিভ ছিল (চিত্র 5c–f)। এই আধা-পরিমাণগত ফলাফলগুলি দেখায় যে ধনাত্মক এবং বিভিন্ন ডোজ গ্রুপে ইতিবাচকভাবে প্রকাশ করা কোষগুলি [PCol III=0.015, PCol III=0.001, PColIII=0.010, এবং PCol III=0.037, যথাক্রমে] মডেল গ্রুপের থেকে আলাদা ছিল৷

TGF- 1

সাধারণ ইঁদুরের লিভারসেলে TGIF- 1 এর সামান্য প্রকাশ ছিল। অভিব্যক্তি অল্প সংখ্যক ইন্টারস্টিশিয়াল কোষে সীমাবদ্ধ ছিল (চিত্র 6a)। মডেল গ্রুপে, TGF- 1 অভিব্যক্তিটি পোর্টাল এলাকা, ফাইব্রাসস্পেস, হেপাটিক স্টেলেট কোষ, প্রদাহজনক কোষ, সাইনোসয়েডাল প্রাচীর এবং সাইটোপ্লাজমে ব্যাপকভাবে বিতরণ করা হয়েছিল। একটি নির্দিষ্ট পোর্টাল এলাকা বাদামী-হলুদ দাগের সাথে একটি শক্তিশালী ইতিবাচক অভিব্যক্তি প্রদর্শন করেছে (চিত্র 6বি)

বিজেআরজে (600 মিলিগ্রাম/কেজি) এবং সিপিএইচজি (125, 250, এবং 500 মিলিগ্রাম/কেজি) এর বিভিন্ন ডোজ গ্রুপের পোর্টাল এলাকায় এবং ফাইব্রাস সেপ্টায় অল্প পরিমাণে অভিব্যক্তি ছিল। মডেল গ্রুপের তুলনায় এই গোষ্ঠীগুলিতে ইতিবাচক দাগের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। ফাইব্রাস সেপ্টা এবং প্রদাহজনক কোষের সাইটোপ্লাজমের অন্তর্বর্তী কোষগুলিতে দাগ কমে গেছে (চিত্র 6c–f)। আধা-পরিমাণগত ফলাফল প্রকাশ করেছে যে BJRJ এবং CPhGs [P TGF- 1=0.001, P TGF- 1 < 0.001,="" p="" tgf-="" 1="0.009," ptgf-="" 1="0" এর="" বিভিন্ন="" ডোজ="" গ্রুপ।="" 004,="" যথাক্রমে]="" মডেল="" গ্রুপের="" তুলনায়="" উল্লেখযোগ্য="">

নিবন্ধে আগেই উল্লেখ করা হয়েছে, TGF- 1 হল লিভার ফাইব্রোসিসের প্যাথোফিজিওলজিতে গুরুত্বপূর্ণ সাইটোকাইন, এক্সট্রা সেলুলারম্যাট্রিক্সের উৎপাদনকে উদ্দীপিত করে [১৯]। আমরা দেখিয়েছি যে লিভার ফাইব্রোসিসের তীব্রতার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণভাবে মডেল গ্রুপে TGF- 1 এর মাত্রা বৃদ্ধি পেয়েছে। লিভারে TGF- 1 এর এক্সপ্রেশন লেভেলগুলি serumTGF- 1 লেভেলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল। এটি ইঙ্গিত করে যে CPhGs উল্লেখযোগ্যভাবে TGF- 1 অভিব্যক্তির কারণে যকৃতের ফাইব্রোসিস কমাতে পারে ECM এর সংশ্লেষণ এবং অবনতিতে অংশগ্রহণ করে।

কোলাজেন টাইপ I, কোলাজেন টাইপ III এবং TGF- 1 এর অভিব্যক্তি হেপাটিক ফাইব্রোসিসের রোগগত প্রক্রিয়া সনাক্ত করতে পারে। চিকিত্সা গোষ্ঠীতে তাদের প্রকাশের মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে এবং চিত্রিত করা হয়েছে যে CPhGs কোলাজেনেস কার্যকলাপকে উন্নত করতে পারে, লিভার ECM সংশ্লেষণ এবং অবনতির গতিশীল ভারসাম্য বজায় রাখতে পারে, এইভাবে লিভার ফাইব্রোসিস গঠনে বিলম্ব এবং প্রতিরোধ করে।

HSC-T6 কোষে ওষুধের হস্তক্ষেপের পরে NF-κB p65 এবং কোলাজেন I অভিব্যক্তি

হেপাটিক ফাইব্রোসিসের সংকেত চিহ্নিত করার জন্য, লিভারে দুটি মূল নিয়ন্ত্রক জিন RT-PCR অ্যাসের মাধ্যমে নির্ধারণ করা হয়েছিল। তথ্য দেখায় যে কন্ট্রোল গ্রুপের thHSC-T6 কোষগুলিতে NF κB এবং কোলাজেন টাইপ I mRNA এর নিম্ন স্তর রয়েছে। বিপরীতভাবে, TGF- 1 HSC-T6 কোষগুলিকে NF-κB (P < 0।{10}}1)="" এবং="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" এর="" চেয়ে="" বেশি="" মাত্রার="" সাথে="" আপগ্রেগুলেট="" করতে="" প্ররোচিত="" করে।="" যারা="" কন্ট্রোল="" গ্রুপে="" আছে।="" cphg-এর="" বিভিন্ন="" ঘনত্বের="" উপস্থিতিতে,="" 100="" ug/ml-এর="" জন্য="" nf-κb="" p65="" [p="" nf-κb="0.001," 75="" ug/ml-এর="" জন্য="" p="" nf-κb="0.002-এর" ফলাফল="" ,="" p="" nf-κb="0.007" 50="" ug/ml-এর="" জন্য,="" এবং="" p="" nf-κb="0.012" 25="" ug/ml-এর="" জন্য="" যথাক্রমে]="" এবং="" col-i="" [p="" col-i="" {{32="" }}.006,="" p="" col-i="0.009," p="" col-i="0.014," p="" col-i="0.019," যথাক্রমে]="" এই="" mrnaগুলির="" হ্রাসকৃত="" অভিব্যক্তি="" দেখিয়েছে="" (="" চিত্র="">

HSC-T6 কোষে ওষুধের হস্তক্ষেপের পরে কোলাজেন I স্তরের ওয়েস্টার্ন ব্লট বিশ্লেষণ

চিত্র 8 বিভিন্ন পরীক্ষামূলক গ্রুপের HSC-T6 কোষে কোলাজেন I প্রোটিন এক্সপ্রেশনের মাত্রা দেখায়। CPhG-এর বিভিন্ন ডোজ গ্রুপে কোলাজেন I প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml, এবং 25 ug/ml) TGF- 1 গ্রুপের সাথে তুলনা করে।

আলোচনা

CPhGs হল একটি ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড বিচ্ছিন্ন এবং সিস্টাঞ্চের রাইজোম থেকে বিশুদ্ধ, যা একটি ঐতিহ্যবাহী চীনা ভেষজ ওষুধ হিসাবে ব্যবহৃত হয়। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, CPhGshad কে লিভারের আঘাত [20] প্রতিরোধ করার একটি শক্তিশালী ক্ষমতার অধিকারী দেখানো হয়েছে। অতএব, আমরা ইঁদুরের বিএসএ-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিস দ্বারা হেপাটাইটিস ফাইব্রোসিসে CPhG-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব রয়েছে কিনা তা তদন্ত করার লক্ষ্য রেখেছি। BJRG সাধারণত চীনে হেপাটিক ফাইব্রোসিসের জন্য একটি থেরাপিউটিক ড্রাগ হিসাবে ব্যবহৃত হয়। এটি কচ্ছপের খোলস থেকে তৈরি। Radix PaeoniaRubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, ইত্যাদির রয়েছে কিউই এবং রক্ত ​​পূরন, ক্লান্তি উপশম, নোড নরম করার প্রভাব। উপরন্তু, পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি দেখায় যে এটি প্রারম্ভিক লিভার ফাইব্রোসিসকে ব্লক করে, চর্বি-সঞ্চয়কারী কোষের বিস্তারকে বাধা দেয় এবং কোলাজেন সংশ্লেষণ [২১] হ্রাস করে। অতএব, BJRG এই গবেষণায় একটি ইতিবাচক ওষুধ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

বিএসএ ইনজেকশন দ্বারা প্ররোচিত ইঁদুরের হেপাটিক ফাইব্রোসিসের প্যাথলজিকাল পরিবর্তনগুলি হিউম্যানপোর্টাল সিরোসিসের মতো [২২]। CPhGs ডোজ-নির্ভরশীলভাবে লিভারের ফাইব্রোসিসের মাত্রা হ্রাস করে এবং মায়োফাইব্রোব্লাস্ট-সদৃশ কোষে এইচএসসি রূপান্তরকে বাধা দেয়, সিরাম ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1, এবং লিভারের সূচকের উচ্চ স্তরকে হ্রাস করে এবং স্পষ্টতই কোলাজেনের প্রকাশকে দমন করে। I, কোলাজেন III, এবং লিভার টিস্যুতে TGF- 1।

হেপাটিক ফাইব্রোসিসের পর্যায়গুলি HA, LN এবং IV-C-এর থিসরাম স্তরের সাথে সম্পর্কযুক্ত, যা মার্কার হিসাবে হেপাটিক ফাইব্রোসিসের ডিগ্রি সনাক্ত করতে ভূমিকা পালন করতে পারে [23]। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে HA হল এক্সট্রা সেলুলার ম্যাট্রিক্সের প্রধান সম্পদ। বেসমেন্ট মেমব্রেনের অপরিহার্য উপাদান হিসাবে IV-C প্রচুর পরিমাণে সংশ্লেষিত হবে এবং লিভারসিরোসিসের আগের পর্যায়ে প্রচুর পরিমাণে জমা হবে। LN এবং IV-C-এর সিরাম স্তরগুলি হল বেসমেন্ট মেমব্রেনের টার্নওভার হারের সূচক এবং পোর্টাল এলাকায় ফাইব্রোসিস এবং সাইনোসয়েডাল কৈশিকগুলি দেখায় [24]। পিসি III হেপাটিক ফাইব্রোসিস এবং প্রাথমিক সিরোসিস নির্ণয়ের একটি চিহ্নিতকারী, তবে এর সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা বেশি নয়, এবং অনেক রেফারেন্সে বিভিন্ন পর্যায়ে অফফাইব্রোসিসের মধ্যে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নেই [24, 25]। এই গবেষণা একই ফলাফল প্রাপ্ত.

এছাড়াও, এইচএন্ডই এবং ম্যাসনের ট্রাইক্রোম-স্টেইনডসেকশন পর্যবেক্ষণগুলি স্বতন্ত্র হেপাটিক লোবিউল এবং হেপাটিক সাইনোসয়েড সহ স্বাভাবিক লিভার টিস্যু প্রদর্শন করে। মডেল গ্রুপে লিভারটিস্যু গঠন বিকৃত ছিল, এবং যকৃতের টিস্যু এবং হেপাটিক সাইনোসয়েডগুলি প্রচুর পরিমাণে সংযোগকারী টিস্যু দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। যাইহোক, মডেল গ্রুপের তুলনায় চিকিত্সা গ্রুপগুলিতে উল্লেখযোগ্য উন্নতি লক্ষ্য করা গেছে।

গুরুত্বপূর্ণভাবে, কোলাজেন টাইপ I এবং কোলাজেন টাইপ III এক্সপ্রেশন হেপাটিক ফাইব্রোসিসের বিকাশে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে, যার ব্লকিং হেপাটিক ফাইব্রোসিস প্রতিরোধ এবং চিকিত্সা করতে পারে। সুতরাং, কোলাজেন টাইপ I এবং কোলাজেন টাইপ III এর লিভার টিস্যুতে প্রজন্ম এবং জমা হওয়া অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস কার্যকারিতার একটি গুরুত্বপূর্ণ নির্ধারক হিসাবে কাজ করতে পারে। TGF- 1 এছাড়াও লিভারের আঘাতের ক্ষেত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রোফাইব্রোজেনিক সাইটোকাইন এবং এটি একাধিক ফার্মাকোলজিক্যাল অ্যাকশনের সাথে জৈবিকভাবে সক্রিয়[26]। টিস্যু হোমিওস্টেসিস বজায় রাখার জন্য এই ক্রিয়াগুলির মধ্যে একটি ভারসাম্য প্রয়োজন। TGF 1 এর বিভ্রান্তিকর অভিব্যক্তি লিভার রোগের প্যাথোজেনেসিসের সাথে জড়িত [27, 28]। এটা জানা যায় যে TGF- 1 একটি গুরুত্বপূর্ণ সাইটোকাইন যা লিভার ফাইব্রোসিসের প্রাথমিক পর্যায়ে জড়িত। অক্সিডেটিভ স্ট্রেস TGF- 1কে ট্রিগার করে, যার ফলে পরবর্তীতে উদ্দীপক ECM উত্পাদন এবং জমা হয় [২৯]। অতএব, অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস ড্রাগ তৈরির কার্যকরী কৌশলগুলির মধ্যে একটি হল অ্যান্টি-টিজিএফ- 1 এজেন্ট সনাক্ত করা। ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে কোলাজেন টাইপ I, কোলাজেন টাইপ III এবং TGF- 1 এর অভিব্যক্তিগুলি হেপাটিক ফাইব্রোসিসের রোগগত প্রক্রিয়া সনাক্ত করতে পারে। ট্রিটমেন্ট গ্রুপে কোলাজেন্টাইপ I, কোলাজেন টাইপ III, এবং TGF- 1 এর এক্সপ্রেশনগুলি হ্রাস পেয়েছে, যা বিশেষ করে উচ্চ ডোজ CPhGs চিকিত্সা গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল, এবং প্রস্তাবিত যে CPhGs হল একটি কার্যকর কোলাজেন টাইপ I, কোলাজেন টাইপ III , এবং TGF- 1 ইনহিবিটার। সম্ভবত, CPhGscan কোলাজেনেস ক্রিয়াকলাপকে উন্নত করে, ECM সংশ্লেষণ এবং অবক্ষয়ের গতিশীল ভারসাম্য বজায় রাখে, এইভাবে লিভার ফাইব্রোসিস গঠনে বিলম্ব করে এবং প্রতিরোধ করে।

CPhGs শুধুমাত্র ইঁদুরের মধ্যে BSA-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিসকে উন্নত করতে পারে না কিন্তু ভিট্রোতে HSC সক্রিয়করণকে বাধা দেওয়ার সাথেও যুক্ত হতে পারে। এইচএসসি অ্যাক্টিভেশন ফাইব্রোজেনেসিসের গুরুত্বপূর্ণ পদক্ষেপের প্রতিনিধিত্ব করে। এই সমীক্ষায়, ফলাফলগুলি চিত্রিত করেছে যে 25 থেকে 100 ug/ml পর্যন্ত CPhG-এর প্রশাসন এইচএসসিতে NF-κB p65, কোলাজেন I mRNA এক্সপ্রেশন, এবং কোলাজেন I প্রোটিনের প্রকাশকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে।

NF-κB সংক্রমণ বা উদ্দীপনা [30] প্রতিরোধের প্রতিক্রিয়া সংশোধন করতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। যকৃতের কোষে NF-κB এর বিল্ডআপের ফলে প্রদাহজনক সাইটোকাইন/মধ্যস্থতাকারী নিয়োগ হতে পারে, এইভাবে ফাইব্রোসিস বিকাশকে প্ররোচিত করে [31, 32]। অধিকন্তু, কোলাজেন একটি সংবেদনশীল সূচক যা ফাইব্রোসিস স্তরকে প্রতিফলিত করে এবং ফাইব্রাস লিভারের মোট প্রোটিনের প্রায় 50 শতাংশের জন্য অ্যাকাউন্ট করে [33]। ফলস্বরূপ, আমরা অনুমান করেছি যে হেপাটিক ফাইব্রোসিসের বিরুদ্ধে আণবিক প্রক্রিয়া NF-κB এক্সপ্রেশনের CPhGs-মধ্যস্থ নিষ্ক্রিয়করণের সাথে যুক্ত, যেখানে সুবিধাটি BSA-ক্ষত লিভারটিস্যুতে ইমিউনোটক্সিসিটি এবং প্রদাহ স্ট্রেস কমানোর সিনারজিস্টিক ভূমিকাতে অবদান রাখে, যা আরও সঠিকভাবে কাজ করে।

উপসংহার

উপসংহারে, আমাদের অধ্যয়নগুলি ইঙ্গিত করে যে CPhGs ইঁদুরের মধ্যে BSA দ্বারা প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিসের পরিমাণ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে। এর প্রক্রিয়াটি অন্তত আংশিকভাবে ইসিএম-এর সংমিশ্রণে CPhG-এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব এবং ECM-এর অবক্ষয়ের উদ্দীপনার কারণে এবং/অথবা কোলাজেন টাইপআই, কোলাজেন টাইপ III, এবং TGF-এর অভিব্যক্তির সংশ্লেষণের সরাসরি বাধার কারণে হতে পারে{{0 }} সেখানে আগে, আমরা আশা করেছিলাম যে সিপিএইচজিগুলি স্বাস্থ্যসেবা পণ্যে বা ক্লিনিকাল ওষুধে মানব লিভার ফাইব্রোসিস প্রতিরোধের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। একটি শক্তিশালী অ্যান্টি-হেপাটিক ফাইব্রোসিস ড্রাগ হিসাবে CPhG-এর কার্যকারিতা প্রতিষ্ঠার জন্য ভবিষ্যতের অধ্যয়নের প্রয়োজন।

শব্দ সংক্ষেপ

CPhGs: cistanche থেকে anol glycosides;

BSA: বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন;

HSC-T6: হেপাটিক স্টেলেট কোষ;

হাইপ: হাইড্রক্সিপ্রোলিন;

BJRG: যৌগিক বিজিয়ারাঙ্গন ট্যাবলেট;

TGF- 1: ট্রান্সফর্মিং গ্রোথ ফ্যাক্টর 1;

ALT: Alanineaminotransferase;

AST: Aspartate aminotransferase;

HA: হায়ালুরোনিক অ্যাসিড;

এলএন: ল্যামিনিন; পিসি III: টাইপ III প্রোকোলাজেন;

IV-C: টাইপ IV কোলাজেন;

NF-κB: নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর কাপ্পা-লাইট-চেইন-অ্যাক্টিভেটেড বি কোষের বৃদ্ধিকারী;

RT-PCR: রিভার্সট্রান্সক্রিপ্টেজ-পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া;

এসডিএস-পৃষ্ঠা: সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট-পলিঅ্যাক্রিলামাইড জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস।

প্রতিদ্বন্দ্বী স্বার্থ

লেখকরা ঘোষণা করেছেন যে, তাদের প্রতিদ্বন্দ্বীতার আগ্রহ নেই

লেখকদের অবদান

TL, JZ, SPY, LM, MT, এবং SLZ ধারনা করেছে এবং পরীক্ষাগুলি ডিজাইন করেছে৷ SPY, TL, এবং JZ ডেটা বিশ্লেষণ করেছে৷ SPY এবং JZ পাণ্ডুলিপি লিখেছেন। TL, LM এবং JZ পাণ্ডুলিপি পর্যালোচনা. সব লেখক পড়া এবং চূড়ান্ত পাণ্ডুলিপি অনুমোদিত.

স্বীকৃতি

এই গবেষণাটি চীনের ন্যাশনাল ন্যাচারাল সায়েন্স ফাউন্ডেশন (81260624) দ্বারা সমর্থিত ছিল। লেখকরা এই গবেষণাপত্রের লেখার জন্য তার প্রস্তাবিত উন্নতির জন্য অধ্যাপক তাও লিউকে আন্তরিক ধন্যবাদ জানাতে চান।

লেখক বিস্তারিত

1 টক্সিকোলজি বিভাগ, স্কুল অফ পাবলিক হেলথ, জিনজিয়াং মেডিকেল ইউনিভার্সিটি, নং 393 জিনি রোড, উরুমকি 830011 জিনজিয়াং উইঘুর স্বায়ত্তশাসিত অঞ্চল, চীন। 2কি ল্যাবরেটরি ফর উইঘুর মেডিসিন, ইনস্টিটিউট অফ মেটেরিয়ামেডিকা অফ জিনজিয়াং, উরুমকি 830004, চীন। 3 না। 140 সিনহুয়া সাউথ রোড, তিয়ানশান জেলা, উরুমকি 830000জিনজিয়াং উইঘুর স্বায়ত্তশাসিত অঞ্চল, চীন।

চেক করতে এখানে ক্লিক করুনসিস্তানচেটিউবুলোসাপণ্য

তথ্যসূত্র
1. কোহেন-নাফটালি এম, ফ্রিডম্যান এসএল। দীর্ঘস্থায়ী লিভার রোগে আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে নতুন অ্যান্টিফাইব্রোটিক থেরাপির বর্তমান অবস্থা। সেখানে অ্যাডভ গ্যাস্ট্রোএন্টেরল। 2011;4(6):391–417।
2. পুচে জেই, সাইমান ওয়াই, ফ্রিডম্যান এসএল। হেপাটিক স্টেলেট কোষ এবং লিভার ফাইব্রোসিস। Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92।
3. হার্নান্দেজ-গিয়া ভি, ফ্রিডম্যান এসএল। লিভার ফাইব্রোসিসের প্যাথোজেনেসিস। আন্নু রেভ পাঠোল। 2011;6:425-56।
4. সোহরাবপুর এএ, মোহাম্মাদনেজাদ এম, মালেকজাদেহ আর. পর্যালোচনা নিবন্ধ: সিরোসিসের বিপরীততা। অ্যালিমেন্ট ফার্মাকোল থার। 2012;36(9):824–32।
5. Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. চাইনিজ একাডেমি অফ সায়েন্সেস। 23তম সংস্করণ। চীন: চীনের ফ্লোরার সম্পাদকীয় কমিটি; 2013. পি. 1-16।
6. গণপ্রজাতন্ত্রী চীনের স্যানিটারি মন্ত্রণালয়ের চীনা ফার্মাকোপিয়া কমিশন। চাইনিজ ফার্মাকোপিয়া, পার্ট 1। চীন: কেমিক্যাল ইন্ডাস্ট্রি পাবলিশিং হাউস; 2010. পি. 126।
7. ইয়ান জিএইচ, তিয়ান জেএইচ, লং বিডব্লিউ, লি এন। গবেষণার অগ্রগতিphenylethanoidগ্লাইকোসাইডথেকেসিস্তানচেটিউবুলোসা. সেন্ট্রাল সাউথ ফার্ম। 2012;10:692-5।
8. Li J, Huang D, He L. Leigongteng এর গ্লাইকোসাইড দ্বারা প্ররোচিত ইঁদুরের প্রজনন বিষাক্ততার উপর Rou Cong Rong (Herba Cistanches Deserticolae) এর প্রভাব (Radix et Rhizoma Tripterygii)। জে ট্রেডিট চিন মেড। 2014;34(3):324–32।
9. Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. Tamarix hohenackeri Bunge থেকে ACE, এবং প্লেটলেট অ্যাগ্রিগেশন ইনহিবিটার (এর হোস্ট প্লান্টহারবাসিস্তানচ) জিনজিয়াংয়ে বেড়ে উঠছে। ফার্মাকগন ম্যাগ। 2014;10(38):111–7।
10. জিয়া ওয়াই, গুয়ান কিউ, জিয়াং ওয়াই, সালহ বি, গুও ওয়াই, তু পি, এট আল। ইচিনাকোসাইড-সমৃদ্ধ নির্যাস দ্বারা ইঁদুরের মধ্যে ডেক্সট্রান সালফেট সোডিয়াম-প্ররোচিত কোলাইটিসের উন্নতিসিস্তানচেটিউবুলোসা. Phytother Res. 2014;28(1):110-9।
11. ওং এইচএস, কো কেএম। Herba Cistanches H9c2 কার্ডিওমায়োসাইটের মাইটোকন্ড্রিয়াল শ্বসন থেকে উৎপন্ন প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির দ্বারা সেলুলার গ্লুটাথিয়ন রেডক্স সাইক্লিংকে উদ্দীপিত করে। ফার্ম বায়োল। 2013;51(1):64–73।
12. ঝাং এসজে, লিউ এল, ইউ জেওয়াই। ARP: হারবি সিস্টাঞ্চেসে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাকটিওসাইডের একযোগে নির্ধারণের জন্য একটি RP-HPLC পদ্ধতি। চিন ফার্ম জে 2004; 39(10): 740-741।
13. ঝু কিউজি, ফ্যাং বিডব্লিউ, ঝু কিউএন, উ এইচএস, ফু কিউএল। অনাক্রম্যতা লিভার ফাইব্রোসিস পশু মডেল অধ্যয়ন বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিন দ্বারা প্ররোচিত. চিন জে পথোল। 1993; 22:121-2।
14. কিন ডিএম, ওয়েন জেডপি, নিই ওয়াইআর, ইয়াও জিএম। CCl4-জনিত হেপাটিক ফাইব্রোসিসে সিকোরিয়াম গ্ল্যান্ডুলোসাম নির্যাসের প্রভাব। ইরান রেড ক্রিসেন্ট মেড জে. 2013;15, e10908।
15. Niu HM, Zeng DQ, Long CL, Peng YH, Wang YH, Luo JF, et al. Dodonaea viscosa থেকে Clerodane diterpenoids এবং prenylated flavonoids। জে এশিয়ান ন্যাট প্রোড রেস. 2010;12(1):7-14।
16. Li WW, Song XW, Wang HW, Shen BS, Wang QC. দীর্ঘস্থায়ী হেপাটাইটিস বি চিন জে ইমিউনল রোগীদের মধ্যে NF-κB এবং লিভার ফাইব্রোসিসের প্যাথলজিকাল স্টেজিং এর পারস্পরিক সম্পর্ক। 2013;29(3):251–4।
17. Zhang GL, Shi XF, Ran CQ, Xu M, Zhu ZJ. ইঁদুরের লিভার ফাইব্রোসিসের বিরুদ্ধে প্যানাক্স নোটোজিনসেং-এর মোট স্যাপোনিনের প্রভাব। Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiary. 2007;29:2212-4।
18. Rossi O, Maggiore L, Necci F, Koberling O, MacLennan CA, et al. মেমব্রেন অ্যান্টিজেন (GMMA) এর জন্য সাধারণীকৃত মডিউলগুলির প্রোটিনের পরিমাণ নির্ধারণের জন্য পরিমাণগত অ্যামিনো অ্যাসিড বিশ্লেষণের সাথে কালারমিট্রিক অ্যাসেসের তুলনা। মোল বায়োটেকনোল। 2015;57(1):84–93।
19. ডাং এসএস, লি ওয়াইপি। লিভার ফাইব্রোসিসের প্যাথোজেনেসিসে বৃদ্ধির ফ্যাক্টর- 1 রূপান্তরের ভূমিকা বোঝার অগ্রগতি। শিজি হুয়ারেন জিয়াওহুয়া জাঝি। 2010;18:1631-6.
20. ঝাও জে, লিউ টি, মা এল, ইয়ান এম, ঝাও ওয়াই, গু জেড, এট আল। ব্যাসিলাস ক্যালমেট-গুয়েরিন প্লাস লিপোপলিস্যাকারাইড দ্বারা প্ররোচিত ইমিউনোলজিক্যাল লিভারের আঘাতের উপর অ্যাক্টিওসাইডের প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব। প্লান্টা মেড। 2009;75(14):1463–9।
21. ইয়াং এফআর, ফ্যাং বিডব্লিউ, লু জেএস। ভিভো এবং ইন ভিট্রোতে হেপাটিক ফাইব্রোসিসের উপর ফুফাং বেজিয়া রুয়ানগান পিলের প্রভাব। ওয়ার্ল্ড জে গ্যাস্ট্রোএন্টেরল। 2013;19(32):5326–33।

22. Liu P, Fang BW, Liu C. ইঁদুরের ইমিউনোলজিক্যাল ইনডিউসড লিভার ফাইব্রোজেনেসিসে গ্রোথ ফ্যাক্টর 1 এবং এর রিসেপ্টরকে রূপান্তরিত করার ভূমিকা এবং তাদের উপর কর্ডিসেপস পলিস্যাকারাইডের প্রভাব৷ চিন জে হেপটল। 1998;6:232-3.

23. Xu GG, Luo CY, Wu SM, Wang CL. হেপাটিক স্টেজিং মধ্যে সম্পর্কফাইব্রোসিস এবং সিরাম বায়োকেমিস্ট্রির মাত্রা। HBPD INT. 2002; 1:246-8।আপনি এবং অন্যান্য. DARU জার্নাল অফ ফার্মাসিউটিক্যাল সায়েন্সেস (2015) 23:52 পৃষ্ঠা 12 এর 13

24. লিউ জে, ওয়াং জেওয়াই, লু ওয়াই। লিভার ফাইব্রোসিস নির্ণয়ের ক্ষেত্রে সিরাম ফাইব্রোসিস মার্কার। থুতনিজে ইন্টার্ন মেড. 2006;145:475-7।

25. Li CZ, Wan MB, Zeng MD, Mao YM, Fan ZP, Cao AP, et al. লিভার ফাইব্রোসিস নির্ণয়ের ক্ষেত্রে নন-ইনভেসিভ প্যারামিটারগুলির সংমিশ্রণের একটি প্রাথমিক গবেষণা। চিন জে হেপটল। 2001;9:261-3.

26. চেন ওয়াইএল, লি জেডওয়াই। ফাইব্রোসিসের সাথে TGF- 1, PDGF-BB, CTGF এবং দীর্ঘস্থায়ী হেপাটাইটিস বি-এর মধ্যে সম্পর্ক। চিন জে ডিফিক কমপ্লেক্স ক্যাস। 2010; 9:19-20।

27. Sferra R, Vetuschi A, Catitti V, Ammanniti S, Pompili S, Melideo D, et al. Boswellia serrata এবং Salvia miltiorrhiza নির্যাস TGF-beta1 ডাউনরেগুলেশন দ্বারা ইঁদুরের DMN-প্ররোচিত হেপাটিক ফাইব্রোসিস কমায়। Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2012;16(11):1484–98।
28. Liu L, Li XM, Chen L, Feng Q, Xu LL, Hu YY, et al. ইঁদুরের কার্বন টেট্রাক্লোরাইড দ্বারা প্ররোচিত লিভার ফাইব্রোসিসে TGF- 1/Smad পথের উপর Gypenosides এর প্রভাব। ইন্টার্ন জে ইন্টিগ্র মেড। 2013;1:1-6।
29. ঝাং বিজে, জু ডি, গুও ওয়াই, পিং জে, চেন এলবি, ওয়াং এইচ. একাধিক হেপাটোটক্সিক কারণ দ্বারা প্ররোচিত ইঁদুরের লিভার ফাইব্রোসিসের বিরুদ্ধে বারবেরিনের একটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রক্রিয়া দ্বারা সুরক্ষা। Clin Exp Pharmacol Physiol. 2008;35(3):303–9।
30. টর্নাটোর এল, থোটাকুরা একে, বেনেট জে, মোরেটি এম, ফ্রাঞ্জোসো জি। পারমাণবিক ফ্যাক্টর কাপ্পা বি সংকেত পথ: প্রদাহের সাথে বিপাককে একীভূত করা। ট্রেন্ডস সেল বায়োল। 2012;22(11):557–66।
31. Luedde T, Schwabe RF. NF-κB লিভার-লিংকিং ইনজুরি, ফাইব্রোসিস এবং হেপাটোসেলুলার কার্সিনোমা। ন্যাট রেভ গ্যাস্ট্রোএন্টেরল হেপাটোল। 2011;8(2):108-18।
32. Petrasek J, Csak T, Szabo G. যকৃতের রোগে টোলের মতো রিসেপ্টর। অ্যাডভ ক্লিন কেম। 2013;59:155–201।
33. ওয়াং ওয়াই, চেং এম, ঝাং বি, নিই এফ, জিয়াং এইচ। ব্লুবেরির রসের খাদ্যতালিকাগত পরিপূরক মেটালোথিওনিনের হেপাটিক এক্সপ্রেশন বাড়ায় এবং ইঁদুরের লিভার ফাইব্রোসিস কমায়। পিএলওএস ওয়ান। 2013;8, e58659।