ইকুয়েডরে অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণে SARS-CoV-2-এর আগে থেকে বিদ্যমান টি-সেল অনাক্রম্যতা, যেমন একটি COVID-19 ইন্টারফেরন-গামা রিলিজ অ্যাসে সনাক্ত করা হয়েছে

বিমূর্ত

পটভূমি: SARS-CoV-2 এর বিরুদ্ধে টি-সেলের ইমিউন প্রতিক্রিয়ার অধ্যয়ন ব্যক্তি বা জনসংখ্যার রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বোঝার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। এখানে, আমরা একটি সহজ, সস্তা, এবং দ্রুত সম্পূর্ণ রক্তের উদ্দীপনা পরীক্ষা ব্যবহার করি - একটি ইন্টারফেরন-গামা রিলিজ অ্যাস (IGRA) - সুস্থ কোভিড-19 রোগীদের SARS-CoV-2-এর টি-সেলের প্রতিরোধ ক্ষমতা অধ্যয়ন করতে এবং কুইটো, ইকুয়েডর থেকে অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর যোগাযোগ। পদ্ধতি: ইন্টারফেরন-গামা (INF-g) উৎপাদন SARS-CoV-2 স্পাইক S1 প্রোটিন, রিসেপ্টর বাইন্ডিং ডোমেন (RBD) প্রোটিন বা রিসেপ্টর বাইন্ডিং ডোমেন (RBD) প্রোটিনের সাথে 24 ঘন্টা উদ্দীপনার পরে সুস্থ এবং অপ্রকাশিত বিষয়গুলির হেপারিনাইজড রক্তে পরিমাপ করা হয়েছিল। নিউক্লিওক্যাপসিড (NP) প্রোটিন, যথাক্রমে। উভয় অধ্যয়ন গোষ্ঠীতে IgG-RBD প্রোটিন অ্যান্টিবডিগুলির উপস্থিতি একটি "ইন-হাউস" ELISA দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল। ফলাফল: INF-g উৎপাদনের সাথে পরিমাপ করা হয়েছে, 80 শতাংশ সুস্থ COVID{20} রোগী, সমস্ত IgG-RBD সেরোপজিটিভ, একটি শক্তিশালী টি-সেল প্রতিক্রিয়া ছিল।

যাইহোক, অপ্রত্যাশিতভাবে, অপ্রত্যাশিত স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণের 44 শতাংশ, সমস্ত IgG-RBD সেরোনেগেটিভ, কোভিড-19 IGRA-এর সাথে একটি শক্তিশালী ভাইরাস-নির্দিষ্ট টি-সেল প্রতিক্রিয়া ছিল, সম্ভবত সাধারণ সর্দি-সৃষ্টিকারী করোনাভাইরাস বা অন্যান্য সংক্রমণের পূর্বে এক্সপোজারের কারণে ভাইরাল বা মাইক্রোবিয়াল অ্যান্টিজেন। উপসংহার এবং আলোচনা: পূর্ব থেকে বিদ্যমান অনাক্রম্যতা সহ অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর বিষয়গুলির উচ্চ শতাংশ ইঙ্গিত দেয় যে ইকুয়েডরের জনসংখ্যার একটি অংশে SARS-CoV-2 প্রতিক্রিয়াশীল টি-কোষ থাকতে পারে। প্রদত্ত যে IGRA কৌশলটি সহজ এবং যেখানে বেশি সংখ্যক রোগীর প্রয়োজন হয় সেখানে তদন্তের জন্য সহজেই স্কেল করা যায়, এই COVID{10}} IGRA শুধুমাত্র T-cell-এর প্রতিক্রিয়া SARS-CoV-এর প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতার প্রতিনিধিত্ব করে কিনা তা নির্ধারণ করতে পারে জনসংখ্যা-ভিত্তিক গবেষণায় -2 সংক্রমণ। © 2021 লেখক. ইন্টারন্যাশনাল সোসাইটি ফর ইনফেকশাস ডিজিজেসের পক্ষে এলসেভিয়ার লিমিটেড দ্বারা প্রকাশিত।

একই সময়ে, যখন আমাদের রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা কম থাকে, তখন অনাক্রম্যতা উন্নত করার অনেক উপায় রয়েছে, রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়াতে পারে এমন খাবার খাওয়া, যেমন সিস্টানচে, পলিস্যাকারাইড, প্রোটিন, অ্যামিনো অ্যাসিড এবং অন্যান্য পদার্থগুলি প্রায়শই শরীরের নিয়ন্ত্রণ করতে পারে।iইমিউন সিস্টেম।

cistanche tubulosa নির্যাস পাউডার পণ্য ক্লিক করুন

ভূমিকা

SARS-CoV-2 সংক্রমণের প্রতিরক্ষামূলক প্রতিক্রিয়া শুধুমাত্র অ্যান্টিবডি উৎপাদনের সাথে জড়িত নয়, তবে সংক্রমণটি রোগীদের মধ্যে একটি টি-সেল প্রতিক্রিয়াও ট্রিগার করে (Lipsitch et al., 2020, Ni et al., 2020)। সাধারণভাবে, এই করোনভাইরাস সংক্রমণের একটি নির্দিষ্ট মেমরি টি-সেলের প্রতিক্রিয়ার উপস্থিতি এবং মাত্রা নির্ধারণ একটি ELISPOT অ্যাস দিয়ে সঞ্চালিত হয় লিম্ফোসাইটের সংখ্যা স্থাপন করে যা রোগ-নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেন বা পেপটাইড (Ni) দ্বারা উদ্দীপনার পরে IFN-g তৈরি করে। et al., 2020, Pai et al., 2014, Abate et al., 2013, Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al., 2020, Sekine et al., 2020)।

এই কৌশলের জন্য, পেরিফেরাল ব্লাড মনোনিউক্লিয়ার সেল (PBMCs) কে ঘনত্ব-গ্রেডিয়েন্ট সেন্ট্রিফিউগেশনের মাধ্যমে তাজা হেপারিনাইজড রক্ত ​​থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়; পৃথক টি-কোষ দ্বারা সাইটোকাইনের নিঃসরণ মাইক্রোস্কোপ বা একটি বিশেষ যন্ত্রের সাহায্যে পরিমাপ করা হয়- ELISPOT প্লেট রিডার। ELISPOT পরীক্ষা হল একটি "শুধুমাত্র গবেষণাগারের জন্য" কৌশল যা অত্যন্ত শ্রমসাধ্য, প্রযুক্তিগতভাবে চাহিদাপূর্ণ, তুলনামূলকভাবে ব্যয়বহুল এবং সহজে ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারে ব্যবহার করা যায় না বা জনসংখ্যা-ভিত্তিক গবেষণায় প্রয়োগ করা যায় না। মূল্য, অবকাঠামো, এবং পরীক্ষাগারের প্রয়োজনীয়তার কারণে পরীক্ষাটি সম্পাদন করার জন্য, ইকুয়েডরের মতো সংস্থান-সীমিত সেটিংসে এর ব্যবহার ন্যূনতম হতে পারে।

সেলুলার ইমিউন রেসপন্স আরও সহজবোধ্য অ্যাস দিয়েও নির্ধারণ করা যেতে পারে: একটি ইন্টারফেরন-গামা রিলিজ অ্যাস (আইজিআরএ)। এই অ্যাস, একটি ইন ভিট্রো রক্ত ​​পরীক্ষা, টি-সেল নিঃসৃত সাইটোকাইনের পরিমাণ নির্ধারণ করে (অর্থাৎ, গামা ইন্টারফেরন (IFN-g); তবে, TNF বা IL-2-এর মতো অন্যান্য সাইটোকাইনগুলিও পরিমাপ করা যেতে পারে) পুরো রক্তের উদ্দীপনার উপর। (শুধু বিচ্ছিন্ন লিম্ফোসাইট নয়) নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেন সহ (Pai et al., 2014, Abate et al., 2013)। নিঃসৃত সাইটোকাইন IFN-g একটি ELISA অ্যাস দিয়ে পরিমাপ করা হয়, এটি বেশিরভাগ পরীক্ষাগারে সহজলভ্য একটি কৌশল এবং ফলাফলগুলি একটি ELISA প্লেট রিডার দিয়ে পড়া হয়। IGRAs ক্লিনিকাল ল্যাবরেটরিতে একটি অ্যাপ্লিকেশন খুঁজে পেয়েছে এবং মাইকোব্যাকটেরিয়াম টিউবারকুলোসিস (MTB) এর সাথে একটি সুপ্ত সংক্রমণ নির্ণয় করতে এবং সেইসাথে সাইটোমেগালোভাইরাস (CMV)- নির্দিষ্ট কোষ-মধ্যস্থ প্রতিরোধ ক্ষমতা পরিমাপ করতে এবং ট্রান্সপ্ল্যান্ট প্রাপকদের মধ্যে CMV সংক্রমণের পূর্বাভাস দিতে ব্যবহৃত হয় (পাই এট আল। , 2014, Abate et al., 2013)। এই IGRA পরীক্ষাগুলি ব্যাপকভাবে মূল্যায়ন করা হয়েছে এবং, ELISPOT পরীক্ষার সাথে তুলনা করে, MTB বা CMV সংক্রমণের পূর্বাভাস দেওয়ার জন্য অনুরূপ ক্ষমতা প্রদর্শন করতে দেখা গেছে। অধিকন্তু, টিবি বা সিএমভির বিরুদ্ধে প্রতিরোধ ক্ষমতা সনাক্ত করার জন্য বেশ কয়েকটি বাণিজ্যিক এবং এফডিএ বা সিই-চিহ্নিত অ্যাসে পাওয়া যায় এবং ব্যাপকভাবে সম্পাদিত হয়।

বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা একটি COVID-19 IGRA-এর ব্যবহার অন্বেষণ করি এবং সুস্থ কোভিড-19 রোগীদের এবং সুস্থ COVID-19 নিরীহ নিয়ন্ত্রণের ক্ষেত্রে IFN-g প্রকাশের মাত্রা মূল্যায়ন করি SARS-CoV-2 ভাইরাসের অ্যান্টিজেন: RBD প্রোটিন; স্পাইক প্রোটিনের S1 অংশ; বা নিউক্লিওক্যাপসিড (এন) প্রোটিন। উপরন্তু, আমরা "ইন-হাউস" এলিসা (আমানত এট আল।, 2020, গুয়েভারা এট আল।, 2021) সহ অংশগ্রহণকারীদের মধ্যে SARS-CoV-2 নির্দিষ্ট IgG অ্যান্টিবডিগুলির উপস্থিতি নির্ধারণ করি। আমরা দেখাই যে অপ্রকাশিত দাতাদের একটি উল্লেখযোগ্য শতাংশে SARS-CoV-2 প্রতিক্রিয়াশীল টি-কোষ রয়েছে এবং আমরা এই ফলাফলগুলি নিয়ে আলোচনা করি।

উপাদান এবং পদ্ধতি

সুস্থ হওয়া COVID-19 রোগী, স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণ, এবং সেটিং

এই সমীক্ষাটি ইকুয়েডরের কুইটোতে 2020 সালের সেপ্টেম্বরে পরিচালিত হয়েছিল। নমুনার আকার পূর্বনির্ধারিত করার জন্য কোন পরিসংখ্যানগত পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়নি। সারণী 1 এই গবেষণায় 32 জন রোগীর বৈশিষ্ট্যগুলি দেখায়: তেরোটি সুস্থ কোভিড-19 রোগী, যাদের মধ্যে অ-গুরুতর COVID-19 লক্ষণ/লক্ষণ এবং জুন 2020 সালে একটি ইতিবাচক RT-PCR নির্ণয়; এবং 17টি অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণ। এই স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণগুলি মহামারী চলাকালীন অত্যন্ত সতর্ক ছিল, অন্য লোকেদের সংস্পর্শ এড়িয়ে চলছিল এবং মহামারীর সময়কালের জন্য COVID{10} এর সাধারণ লক্ষণ ও উপসর্গগুলির কোনোটিই স্ব-প্রতিবেদন করেনি, যেমন জ্বর, একটানা কাশি, বা গন্ধ বা স্বাদের ক্ষতি। এছাড়াও, দুটি উপসর্গবিহীন SARS-CoV-2 বাহক এই গবেষণায় অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল। এই দুটি বিষয় কখনই কোভিড-19 রোগের কোনো লক্ষণ বা লক্ষণ দেখায়নি; যাইহোক, RT-PCR কৌশলটি 2020 সালের জুনে ওয়ার্ক পারমিটের প্রয়োজন হিসাবে তাদের উপর চালানো হয়েছিল এবং এর ফলে ইতিবাচক রোগ নির্ণয় হয়েছিল।

সেরোলজি

সুস্থ হওয়া রোগীদের RT-PCR নির্ণয়ের তিন মাস পর, 2020 সালের সেপ্টেম্বরের শেষ দুই সপ্তাহে সমস্ত রোগীর জন্য সেরোলজি এবং আইজিআরএ এবং নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল। আমাদের স্টাডি গ্রুপে করোনাভাইরাস-নির্দিষ্ট IgG অ্যান্টিবডিগুলির উপস্থিতি নির্ধারণ করতে, একটি "ইন-হাউস" SARS-CoV-2 রিসেপ্টর বাইন্ডিং ডোমেন (RBD) IgG ELISA (9, 10) ব্যবহার করা হয়েছিল৷

ইন্টারফেরন গামা রিলিজ অ্যাস (IGRA)

IGRA-এর জন্য, একটি হেপারিনাইজড রক্তের নমুনা নেওয়া হয়েছিল (4 mL) এবং 250 mL এর অ্যালিকোটগুলিতে ভাগ করা হয়েছিল এবং যথাক্রমে 2 mg/mL RBD প্রোটিন (রেফারেন্স 9 থেকে বিচ্ছিন্নকরণ পদ্ধতি) বা বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ নিউক্লিওক্যাপসিডের 2 mg/mL দিয়ে উদ্দীপিত হয়েছিল। (N) প্রোটিন বা স্পাইক (S1) প্রোটিন (ভিরোজেন, ক্যাটালগ সংখ্যা: যথাক্রমে 00,221-V এবং 00,226-V)। IGRA-তে উদ্দীপনার জন্য অ্যান্টিজেনগুলির সর্বোত্তম ঘনত্ব নির্ধারণ করতে IGRA-পজিটিভ এবং IGRA-নেগেটিভ রোগীদের রক্তের সাথে একটি ডোজ ঘনত্ব-প্রতিক্রিয়া বক্ররেখা ব্যবহার করা হয়েছিল। 2 ug/mL এ, অসংক্রমিত নিয়ন্ত্রণে উদ্দীপনা ছাড়াই COVID-19 বিষয়ের রক্তে সর্বাধিক IFN-g প্রতিক্রিয়া পাওয়া গেছে। প্রতিটি অংশগ্রহণকারীর জন্য, একটি আনস্টিমুলেটেড কন্ট্রোল (NIL) অন্তর্ভুক্ত করা হয়েছিল, এবং আমরা মাইটোজেন ফাইটোহেম্যাগ্লুটিনিন (PHA) সহ একটি 250 মিলি রক্তের নমুনা পরীক্ষা করেছি, যা রক্তের নমুনার সাইটোকাইন প্রতিক্রিয়া হারের মূল্যায়ন করার জন্য একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ। উদ্দীপনাটি 24 ঘন্টার জন্য 37 সেন্টিগ্রেডে একটি 96-কূপ সমতল-নীচের ELISA প্লেটে উপলব্ধি করা হয়েছিল। প্লাজমা সংগ্রহ করা হয়েছিল, এবং IFN-g উৎপাদন একটি হিউম্যান IFN-g ELISA (MaxTM স্ট্যান্ডার্ড সেট বায়োলেজেন্ড বিড়াল নং 430,101) দিয়ে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

ফলাফল

RBD IgG ELISA দেখিয়েছে যে সমস্ত COVID{{0}} লক্ষণযুক্ত রোগী (RT-PCR পজিটিভ) RT-PCR নির্ণয়ের তিন মাস পরে RBD প্রোটিনের বিরুদ্ধে IgG অ্যান্টিবডির জন্য ইতিবাচক ছিল। দুটি উপসর্গবিহীন RT-PCR পজিটিভ রোগী এবং সমস্ত সুস্থ অপ্রকাশিত নিয়ন্ত্রণ রোগী এই ELISA (সারণী 1 দেখুন) দিয়ে সেরোনেগেটিভ ছিল। কোভিড-19 আইজিআরএ পরীক্ষায় সম্পূর্ণ রক্তের উদ্দীপনার ফলাফল চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে। IFN-জি উৎপাদনের শক্তিশালী আনয়ন পাওয়া গেছে 80 শতাংশ কোভিড-19 লক্ষণযুক্ত রোগীদের মধ্যে তিনটি অ্যান্টিজেনই, কিন্তু এন প্রোটিন এবং এস প্রোটিন ছিল IFN-g প্রতিক্রিয়ার সবচেয়ে শক্তিশালী উদ্দীপক (চিত্র 1 A, B, C)। দুটি উপসর্গবিহীন কিন্তু RT-PCR-পজিটিভ রোগী (রোগী 14 এবং 15), উভয়ই নির্দিষ্ট SAR-CoV-2 অ্যান্টিবডি ছাড়াই একটি শক্তিশালী ইনডিউসিবল টি-সেল অনাক্রম্যতা প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছে। কোভিড{19}} নিষ্পাপ রোগীদের মধ্যে, 45 শতাংশ ইন্ডুসিবল টি-সেল অনাক্রম্যতা দেখিয়েছেন। টি-সেল প্রতিক্রিয়া সহ এই স্বাস্থ্যকর অপ্রকাশিত নিয়ন্ত্রণগুলির প্রতিক্রিয়া পরিসংখ্যানগতভাবে কোনও উত্তেজক অ্যান্টিজেনের জন্য সুস্থ কোভিড-19 রোগীদের থেকে মাত্রায় উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা ছিল না (p-মান=0.271, 0.437, এবং যথাক্রমে RBD, N, এবং S1 প্রোটিনের জন্য 0.719)।

চিত্র 1. সুস্থ কোভিড-19 রোগীদের সম্পূর্ণ রক্তকে উদ্দীপিত করার পরে এবং RBD, N, বা S1 প্রোটিনের সাথে সুস্থ অপ্রকাশিত নিয়ন্ত্রণের পরে IFN-g উত্পাদন।

সুস্থ রোগীদের উদ্দীপনার ফলাফল এবং যথাক্রমে, RBD, N, বা S1 প্রোটিনের সাথে নিয়ন্ত্রণের ফলাফল চিত্র 1A, B, এবং C এ দেখানো হয়েছে। চিত্র 1D-এ, প্রতিটি রোগীর এবং তিনজনের INF-g প্রতিক্রিয়া। অ্যান্টিজেন গ্রুপ করা হয়। নিশ্চিত হওয়া COVID-19 সংক্রমণের রোগীদের সংখ্যা 1-15, যার মধ্যে 14 এবং 15 রোগী উপসর্গবিহীন ছিল। বিষয় 16-33 কোভিড{11}} নিষ্পাপ রোগী।

উদ্দীপনার 24 ঘন্টা পরে, প্লাজমাতে IFN-g ঘনত্ব একটি বাণিজ্যিকভাবে উপলব্ধ মানব IFN-g এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনোসর্বেন্ট অ্যাস-ভিত্তিক কিট (বায়োলজেন্ড বিড়াল নং 430,101) ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। উদ্দীপনার মাত্রাকে 450 nm (OD450) অ্যান্টিজেন দ্বারা উদ্দীপিত রক্তের জন্য OD450 বিয়োগ অ্যান্টিজেন উদ্দীপনা ছাড়াই রক্তের জন্য অপটিক্যাল ঘনত্ব হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। 1.0-এর একটি OD আনুমানিক 400 pg/mL IFN-g-এর সাথে সঙ্গতিপূর্ণ। ফাইটোহেম্যাগ্লুটিনিন (PHA) রক্তের গুণমান এবং প্রতিক্রিয়া ক্ষমতা মূল্যায়নের জন্য IGRA-তে 5 mg/mL এর চূড়ান্ত ঘনত্বে মাইটোজেন হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। সমস্ত রোগী এবং নিয়ন্ত্রণ এই মাইটোজেনের সাথে 2.54 (SD=0.13) এর গড় অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD450) সহ সাইটোকাইনের সর্বাধিক উত্পাদন দেখায়, যা IFN-g-এর প্রায় 1000 pg/mL প্রতিনিধিত্ব করে। সুস্থ হওয়া রোগীদের উদ্দীপিত রক্ত ​​এবং সুস্থ নিয়ন্ত্রণের মধ্যকার IFN-g স্তরে কোনো পার্থক্য ছিল না (OD450=0.38, SD=0.14 বনাম OD450=0.32. SD=0.16)। এই ফলাফল দেখানো হয় না. উদ্দীপনার জন্য কাট-অফ মান উপস্থাপন করতে প্রতিটি গ্রাফে একটি অনুভূমিক রেখা আঁকা হয়েছে। উদ্দীপনার পরে সর্বনিম্ন INF–g উত্পাদন সহ নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর নয়টি বিষয়ের (রোগী 16, 18, 19, 22, 27-31) প্রতিক্রিয়ার গড় প্লাস দুটি স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি গণনা করে এই মান নির্ধারণ করা হয়েছিল।

আলোচনা এবং উপসংহার

টি-সেল প্রতিক্রিয়াগুলি মূল্যায়ন করে এমন একটি সহজ-সঞ্চালনযোগ্য সম্পূর্ণ রক্ত ​​পরীক্ষা ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে বেশিরভাগ সুস্থ রোগী এবং স্বাস্থ্যকর অপ্রকাশিত ব্যক্তিদের উল্লেখযোগ্য অনুপাতের একটি নির্দিষ্ট এবং শক্তিশালী টি-সেল প্রতিক্রিয়া উদ্দীপনার পরে INF-g উত্পাদনের সাথে নির্ধারিত ছিল। SARS-CoV-2 নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেন সহ (চিত্র 1)। বেশ কিছু গবেষণা, সবগুলোই ELISPOT অ্যাস ব্যবহার করে, বেশিরভাগ বা সমস্ত সুস্থ কোভিড-19 রোগীদের মধ্যে একটি টি-সেলের প্রতিক্রিয়ার উপস্থিতি রিপোর্ট করেছে (Braun et al., 2020, Grifono et al., 2020, LeBert et al. , 2020, Sekine et al., 2020, Moderbacher et al., 2020, Mateus et al., 2020, Peng et al., 2020)।

যাইহোক, স্বাস্থ্যকর অপ্রকাশিত নিয়ন্ত্রণে টি-সেলের প্রতিক্রিয়া সম্পর্কে, 28 থেকে 50 শতাংশের মধ্যে প্রতিক্রিয়ার হার রিপোর্ট করা হয়েছে (দোশি, 2020, ডি ভ্রিস, 2020, লিপসিচ এট আল।, 2020, সাগর এট আল।, 2020), এবং বেশ কয়েকটি গবেষণায় কোভিড-19 নিষ্পাপ নিয়ন্ত্রণকারী রোগীদের মধ্যে টি-সেলের প্রতিক্রিয়া নেই বলে রিপোর্ট করা হয়েছে (de Vries, 2020, Moderbacher et al., 2020, Schwarzkopf et al., 2021)। এই অধ্যয়নের বেশিরভাগই ELISPOT অ্যাস দিয়ে করা হয়েছিল, কিন্তু ইতালি এবং মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে, SARS-CoV-2 টি-সেল প্রতিক্রিয়া সনাক্ত করতে একটি IGRAও ব্যবহার করা হয়েছে (পেট্রোন এট আল।, 2020, মুরুগেসান এট আল ., 2020)। উভয় গবেষণায়, সুস্থ রোগীদের মধ্যে একটি নির্দিষ্ট টি-সেল প্রতিক্রিয়া সনাক্ত করা হয়েছিল; যাইহোক, IGRA সুস্থ অপ্রকাশিত বিষয়গুলিতে একটি INF-g প্রতিক্রিয়া সনাক্ত করতে পারেনি।

কোভিড-19 নির্বোধ বিষয়গুলিতে SARS-CoV-2-এর পূর্ব-বিদ্যমান টি-সেল অনাক্রম্যতা বিভিন্ন প্রকাশনায় পর্যালোচনা করা হয়েছে (Altmann and Boyton, 2020, Dosho et al., 2020, de Vries, 2020, সেট এবং ক্রোটি, 2020)। একটি সুস্থ অপ্রকাশিত বিষয়ের মধ্যে কেন একটি নির্দিষ্ট COVID-19 টি-সেল প্রতিক্রিয়া সনাক্ত করা যেতে পারে তা এখনও স্পষ্ট নয় এবং এটি অনুমানের বিষয়। 2019 সালে SARS-CoV{13}} ভাইরাস আবিষ্কৃত হওয়ার আগে কোভিড-19 নিষ্পাপ বিষয় নিয়ে বেশির ভাগ ELISPOT গবেষণায় মানুষের রক্তের নমুনা ব্যবহার করা হয়েছিল, এইভাবে এক্সপোজারের কোনো সম্ভাবনার আগে। এই কারণে, এই ELISPOT গবেষণাগুলি এই সিদ্ধান্তে পৌঁছেছে যে অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর বিষয়গুলিতে টি-সেলের প্রতিক্রিয়া সম্ভবত "সাধারণ সর্দি" করোনাভাইরাস (গ্রিফোনি এট আল।, 2020, ম্যাথিউস এট আল।, 2020) বা ফ্লুর পূর্বের সংস্পর্শে আসার পূর্বে সংস্পর্শ থেকে আসে। এবং/অথবা CMV ভাইরাস (Mahajan et al., 2020) বা অন্যান্য ভাইরাল বা মাইক্রোবিয়াল অ্যান্টিজেন (Tan et al., 2020)। আমাদের গবেষণায় মহামারী চলাকালীন স্বেচ্ছাসেবকদের কাছ থেকে নেওয়া রক্ত ​​ব্যবহার করা হয়েছে যারা স্ব-প্রতিবেদন শূন্য যোগাযোগের জন্য, COVID{21}} অ্যান্টিজেন RBD-এর জন্য সেরোনেগেটিভ ছিল এবং কখনও COVID-19 এর কোনো লক্ষণ বা উপসর্গ দেখায়নি।

তাই আমরা বাদ দিতে পারি না যে আমাদের কিছু COVID-19 "নিষ্পাপ" স্বাস্থ্যকর নিয়ন্ত্রণে টি-সেল প্রতিক্রিয়া অ্যাসিম্পটমেটিক SARS-CoV-2 ভাইরাস সংক্রমণ থেকে আসে। আমাদের অধ্যয়নের 14 এবং 15 রোগীরা এর একটি উদাহরণ। ইতিবাচক RT-PCR-এর কারণে এই ব্যক্তিদের COVID-19 রোগী হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছিল; যাইহোক, তারা উপসর্গহীন ছিল এবং RBD প্রোটিনের বিরুদ্ধে একটি অ্যান্টিবডি প্রতিক্রিয়া তৈরি করেনি, তবে উভয়ই একটি শক্তিশালী টি-সেল প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছিল।

এটা সম্ভব যে, SARS-CoV-2 nasopharynx এর উপনিবেশের পরে, এই দুটি উপসর্গবিহীন রোগীর ইমিউন সিস্টেম তাদের কেবলমাত্র Tcells-এর মেমরির প্রতিক্রিয়া দিয়ে ফেলেছিল এবং কোনো SARS-CoV-2 নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি ছিল না। প্ররোচিত আরেকটি ব্যাখ্যা হল যে টি-সেল প্রতিক্রিয়া পূর্ববর্তী করোনার মতো সংক্রমণ থেকে আসে এবং পূর্বে বিদ্যমান টি-সেল ইমিউন প্রতিক্রিয়া এই দুই রোগীকে আরও আক্রমণাত্মক রোগের প্যাটার্নের বিকাশ থেকে রক্ষা করেছিল। প্রাক-বিদ্যমান ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীল টি-কোষগুলি সংক্রমণের হার বা প্যাথলজির কিছু পার্থক্য ব্যাখ্যা করার ক্ষেত্রে তাৎপর্যপূর্ণ হতে পারে (Le Bert et al., 2020, Sagar et al., 2020)। নিরীহ নিয়ন্ত্রণের সমষ্টির বিষয়ে, আমরা বাদ দিয়েছি যে এই গোষ্ঠীতে উল্লেখযোগ্য সংখ্যক SARSCoV-2 সংক্রামিত ব্যক্তি রয়েছে যাদের শনাক্ত করা হয়নি উপসর্গবিহীন সংক্রমণ, মূলত কারণ নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর সমস্ত ইন্টিগ্র্যান্ডগুলি RBD অ্যান্টিজেনের জন্য IgG সেরোনেগেটিভ।

আরেকটি কারণ হল ইকুয়েডরে সংক্রমণের প্রকোপ তুলনামূলকভাবে কম। এই সমীক্ষার সময়, 2020 সালের সেপ্টেম্বরে, ইকুয়েডর প্রায় 200টি রিপোর্ট করেছিল,000 নিশ্চিত COVID-19 কেস (জনসংখ্যার প্রায় 1.1 শতাংশ)। অবশ্যই, প্রকৃত সংক্রমণের প্রাদুর্ভাব কয়েকগুণ বেশি হতে পারত, কিন্তু তবুও, এটা অসম্ভব যে এই নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর 45 শতাংশ সংক্রামিত হয়েছে, এবং এইভাবে আমরা একটি SARS-CoV-এর জন্য নির্দিষ্ট একটি টি-সেল প্রতিক্রিয়া খুঁজছি{ {9}} সংক্রমণ।

উপসংহারে, ইকুয়েডরের কুইটোতে প্রাক-বিদ্যমান অনাক্রম্যতা সহ অপ্রকাশিত স্বাস্থ্যকর বিষয়গুলির একটি উচ্চ শতাংশের সন্ধান এই প্রত্যাশা বাড়ায় যে আমাদের জনসংখ্যার একটি উল্লেখযোগ্য অংশে SARS-CoV-2 প্রতিক্রিয়াশীল টি-কোষ থাকতে পারে কারণ ফ্লু, CMV ভাইরাস, বা সাধারণ সর্দি-সৃষ্টিকারী করোনাভাইরাসের সংস্পর্শে আসার আগে। ভবিষ্যত তদন্তের লক্ষ্য নির্ধারণ করা উচিত যে আগে থেকে বিদ্যমান ইমিউন প্রতিক্রিয়া প্রতিরক্ষামূলক এবং/অথবা আরও গুরুতর COVID-19 রোগকে কাটিয়ে উঠতে পারে বা দ্রুত পুনরুদ্ধারের ক্ষেত্রে অবদান রাখতে পারে।

এই অধ্যয়নের গুরুত্ব এবং সীমাবদ্ধতা

আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে COVID-19 IGRA হল একটি দরকারী এবং সংবেদনশীল নতুন টুল যা ভাইরাস-নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেনগুলির সাথে উদ্দীপনার পরে IFN-g নিঃসরণ নির্ধারণ করে করোনাভাইরাস বা অনুরূপ ভাইরাসগুলির ক্রস-প্রতিক্রিয়াশীলতার এক্সপোজার মূল্যায়ন করতে পারে। কৌশলটি সহজ, তুলনামূলকভাবে সস্তা এবং একটি ক্লিনিকাল পরীক্ষাগারে ব্যবহার করা যেতে পারে। এটি অবশ্যই ELISPOT পরীক্ষার ক্ষেত্রে নয়। অধিকন্তু, জনসংখ্যা-ভিত্তিক অধ্যয়ন এবং তদন্তের জন্য IGRA অ্যাস সহজে স্কেল করা যেতে পারে যেখানে উচ্চ সংখ্যক রোগীর প্রয়োজন হয়। সেরোলজির সাথে, আইজিআরএটি জনসংখ্যা-স্তরের অনাক্রম্যতা আরও ভালভাবে বুঝতে এবং সেরোনেগেটিভ ব্যক্তিদের মধ্যে প্রাক-বিদ্যমান অনাক্রম্যতা নির্ধারণ করতে পৃথক রোগীদের অ্যান্টিবডি এবং টি-সেল উভয় প্রতিক্রিয়া স্ক্রীন করতে ব্যবহার করা যেতে পারে।

আমাদের অধ্যয়নের একটি গুরুত্বপূর্ণ সীমাবদ্ধতা হল অধ্যয়নের নমুনা জনসংখ্যার প্রতিনিধি নয়। নমুনার আকার পূর্বনির্ধারিত করার জন্য কোন পরিসংখ্যানগত পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়নি। তদ্ব্যতীত, আমাদের অ্যাস CD4 প্লাস বা CD8 প্লাস কোষের IFN-g উত্পাদনের মধ্যে পার্থক্য করেনি, তবে সংজ্ঞায়িত CD8( প্লাস) এবং CD4 ( প্লাস ) পেপটাইডগুলির সাথে উদ্দীপনা বিবেচনা করা যেতে পারে (গ্রিফোনি এট আল।, 2020, পেং এট আল। , 2020) এবং পেট্রোন এট আল।, 2020 এবং মুরুগেসান এট আল।, 2020-এ বর্ণিত IGRA-তে ব্যবহার করা হয়েছে)। এছাড়াও, অন্যান্য সাইটোকাইনের আনয়ন এই IGRA (Petrone et al., 2020) দিয়ে পরিমাপ করা যেতে পারে। একইভাবে, টিকা দেওয়া ব্যক্তিদের মধ্যে টি-সেলের প্রতিক্রিয়ার বিকাশ নির্ধারণের জন্য টিকাদানের ফলো-আপের জন্য IGRA-কে নিযুক্ত করা যেতে পারে বা ক্রস-রিঅ্যাকটিভ মেমরি টি-কোষের উপস্থিতি প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতার সাথে সম্পর্কিত কিনা তা নির্ধারণ করতে ব্যবহার করা যেতে পারে SARS-CoV-2 সংক্রমণ থেকে রোগের প্রকাশ হ্রাস করুন (সাগর এট আল।, 2020)।

নৈতিকতা অনুমোদন এবং অংশগ্রহণের সম্মতি

লিখিত সম্মতির পরে রক্ত ​​সংগ্রহ করা হয়েছিল। ইকুয়েডরের স্বাস্থ্য মন্ত্রণালয়ের নীতিশাস্ত্র কমিটি 004-2020 অধ্যয়ন প্রোটোকল অনুমোদন করেছে।

স্বার্থ দ্বন্দ্ব

লেখকরা ঘোষণা করেছেন যে, তাদের প্রতিদ্বন্দ্বীতার আগ্রহ নেই।

লেখক অবদান

গবেষণা নকশা; JHW এবং GE; তথ্য সংগ্রহ এবং পরীক্ষাগার পরীক্ষা: GE, AG, JC, AMR, এবং MMV; তথ্য বিশ্লেষণ; JHW, GE, এবং ET; লেখা: JHW, GE, এবং ET.

স্বীকৃতি

নমুনা সংগ্রহে সহায়তার জন্য আমরা এই কাজের সাথে জড়িত সকল দাতা এবং স্বাস্থ্যসেবা কর্মীদের, বিশেষ করে সান্দ্রা ভিভেরো এবং সান্দ্রা ফনসেকাকে আমাদের কৃতজ্ঞতা জানাই। এই গবেষণাটি ইউনিভার্সিডাদ দে লাস আমেরিকার একটি গবেষণা তহবিল দ্বারা সমর্থিত হয়েছিল। টেকসই বিজ্ঞান ইনস্টিটিউট, সান ফ্রান্সিসকো, ক্যালিফোর্নিয়া, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র এবং ইকুয়েডরের "পোর টোডোস" ফাউন্ডেশন RBD প্রোটিন এবং "ইন-হাউস" ELISA প্রদান করেছে। হাওয়ার্ড ই. টাকিফ এবং ফ্লোর পুজল (IVIC, ভেনিজুয়েলা), Paulina E. Andrade (USFQ, Ecuador), এবং Lilly Verhagen (UMC, নেদারল্যান্ডস) কে তাদের ফলপ্রসূ আলোচনার জন্য ধন্যবাদ৷

তথ্যসূত্র

Abate D, Saldan A, Mengoli C, Fiscon M, Silvestre C, Fallico L, et al. কিডনি ট্রান্সপ্ল্যান্ট প্রাপকদের মধ্যে CMV সংক্রমণের ঝুঁকি মূল্যায়নে সাইটোমেগালোভাইরাস (CMV) এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসর্বেন্ট স্পট এবং CMV কোয়ান্টিফায়ার গামা ইন্টারফেরন-রিলিজিং অ্যাসেসের তুলনা। জে ক্লিন মাইক্রোবায়োল 2013;51(8):2501–7।

অল্টম্যান ডিএম, বয়টন আরজে। SARS-CoV-2 T কোষের অনাক্রম্যতা: নির্দিষ্টতা, কার্যকারিতা, স্থায়িত্ব এবং সুরক্ষায় ভূমিকা। Sci Immunol 2020;5(49)eabd6160.

আমানত F, Stadlbauer D, Strohmeier S, Nguyen THO, Chromikova V, McMahon M, et al. মানুষের মধ্যে SARS-CoV-2 সেরোকনভারশন শনাক্ত করার জন্য একটি সেরোলজিক্যাল পরীক্ষা। ন্যাট মেড 2020; 26:1033–6।

Braun J, Loyal L, Frentsch M, Wendisch D, Georg P, Kurth F, et al. SARS-CoV-2- সুস্থ দাতা এবং COVID-19 রোগীদের প্রতিক্রিয়াশীল টি কোষ। প্রকৃতি 2020;587:270–4।

ডি Vries RD. অপ্রকাশিত মানুষের মধ্যে SARS-CoV-2-নির্দিষ্ট টি-কোষ: ক্রস-রিঅ্যাকটিভ মেমরি কোষের উপস্থিতি প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতার সমান নয়। সিগ ট্রান্সডাক্ট টার্গেট 2020;5:224।

দোশি পি. কোভিড-19: অনেকের কি আগে থেকে বিদ্যমান রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা আছে? BMJ 2020;370: m3563।

গ্রিফোনি এ, ওয়েইসকোফ ডি, রামিরেজ এসআই, মাতেউস জে, ড্যান জেএম, মডারবাচার সিআর, এট আল। SARS-CoV-2 করোনভাইরাস-এর প্রতি Tcell প্রতিক্রিয়ার লক্ষ্যগুলি কোভিড-19 রোগে আক্রান্ত এবং অপ্রকাশিত ব্যক্তিদের মধ্যে। সেল 2020;181(7)1489–501।

গুয়েভারা A, Vivero S, Nipaz V, Guaraca V, Coloma J. একটি কম খরচের SARS-CoV-2 rRBD ELISA ইকুয়েডরের জনসংখ্যার মধ্যে কোভিড-19 এর সাথে সেরোস্ট্যাটাস সনাক্ত করতে। অ্যাম জে ট্রপ মেড হাইগ [39_TD$DIFF]2021।

Le Bert N, Tan AT, Kunasegaran K, Tham CYL, Hafezi M, Chia A, et al. SARS-CoV-2- COVID-19 এবং SARS-এর ক্ষেত্রে নির্দিষ্ট Tcell অনাক্রম্যতা এবং অসংক্রমিত নিয়ন্ত্রণ। প্রকৃতি 2020;584(7821):457–62।

Lipsitch M, Grad YH, Sette A, Crotty S. ক্রস-রিঅ্যাকটিভ মেমরি টি কোষ এবং SARS-CoV-2 এর প্রতি পশুর অনাক্রম্যতা। ন্যাট রেভ ইমিউনল 2020।

মহাজন এস, কোড ভি, ভোজক কে, ম্যাগডালিন সিএম, লি কে, মনোহরন এম, এবং অন্যান্য। SARS-CoV-2 স্পাইক অ্যান্টিজেন থেকে ইমিউনোডোমিন্যান্ট টি-সেল এপিটোপগুলি অপ্রকাশিত ব্যক্তিদের মধ্যে শক্তিশালী পূর্ব-বিদ্যমান টি-সেল অনাক্রম্যতা প্রকাশ করে। bioRxiv 2020।

Mateus J, Grifoni A, Tarke A, Sidney J, Ramirez SI, Dan JM, et al. অপ্রকাশিত মানুষের মধ্যে নির্বাচনী এবং ক্রস-রিঅ্যাকটিভ SARS-CoV-2 টি সেল এপিটোপস। বিজ্ঞান 2020;370 (6512):89–94।

Moderbacher RC, Ramirez SI, Dan JM, Grifoni A, Hastie KM, Weiskopf D, et al. অ্যান্টিজেন-নির্দিষ্ট অভিযোজিত প্রতিরোধ ক্ষমতা SARS-CoV-2 তীব্র COVID-19 এবং বয়স এবং রোগের তীব্রতার সাথে সম্পর্কিত। সেল 2020; S0092-8674(20):31235–6.

মুরুগেসান কে, জগন্নাথান পি, ফাম টিডি, পান্ডে এস, বনিলা এইচএফ, জ্যাকবসন কে, এট আল। SARS-CoV-2 টি কোষের প্রতিক্রিয়া সঠিকভাবে সনাক্ত করার জন্য ইন্টারফেরন-গামা রিলিজ অ্যাস। ক্লিন ইনফেক্ট ডিস 2020; ciaa1537।

Ni L, Ye F, Cheng ML, Feng Y, Deng YQ, Zhao H, et al. কোভিড-19 সুস্থ ব্যক্তিদের মধ্যে SARS-CoV-2- নির্দিষ্ট হিউমারাল এবং সেলুলার ইমিউনিটি সনাক্তকরণ। অনাক্রম্যতা 2020;52(6)971–7।

Pai M, Denkinger CM, Kik SV, Rangaka MX, Zwerling A, Oxlade O, et al. মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা সংক্রমণ সনাক্তকরণের জন্য গামা ইন্টারফেরন রিলিজ অ্যাস। ক্লিন মাইক্রোবায়োল রেভ 2014;27(1):3–20।

Peng Y, Mentzer AJ, Liu G, Yao X, Yin Z, Dong D, et al. বিস্তৃত এবং শক্তিশালী মেমরি CD4 প্লাস এবং CD8 প্লাস T কোষগুলি SARS-CoV-2 দ্বারা প্ররোচিত ইউকে যারা COVID-19 অনুসরণ করে সুস্থ হয়েছেন। NatImmunol 2020।

Petrone L, Petruccioli E, Vanini V, Cuzzi G, Fard SN, Alonzi T, et al. SARS-CoV-2-COVID-19 রোগীদের নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়া পরিমাপ করার জন্য একটি সম্পূর্ণ রক্ত ​​পরীক্ষা। ক্লিন মাইক্রোবায়োল ইনফেক্ট 2020।

সাগর এম, রিফ্লার কে, রসি এম, মিলার এনএস, সিনহা পি, হোয়াইট এল, এট আল। সাম্প্রতিক স্থানীয় করোনাভাইরাস সংক্রমণ কম গুরুতর COVID-19 এর সাথে যুক্ত। জে ক্লিন ইনভেস্ট 2020।

শোয়ার্জকফ এস, ক্রাকজিক এ, নপ ডি, ক্লাম্প এইচ, হেইনল্ড এ, হেইনম্যান এফএম, এট আল। কোভিডের কোষীয় রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা ইমার্জ ইনফেক্ট ডিস। 2021;27(1)।

Sekine T, Perez-Potti A, Rivera-Ballesteros O, Strålin K, Gorin JB, Olsson A, et al. উপসর্গবিহীন বা হালকা COVID-19 সহ সুস্থ ব্যক্তিদের মধ্যে শক্তিশালী টি কোষ প্রতিরোধ ক্ষমতা। সেল 2020;183(1)158–68।

Sette A, Crotty S. SARS-CoV-2 এর পূর্বে বিদ্যমান অনাক্রম্যতা: পরিচিত এবং অজানা। ন্যাট রেভ ইমিউনল। 2020;20(8)457–8।

Tan CCS, Owen CJ, Tham CYL, Bertoletti A, van Dorp L, Balloux F. SARS-CoV-2-এর প্রাক-বিদ্যমান T কোষ-মধ্যস্থ ক্রস-রিঅ্যাকটিভিটি শুধুমাত্র স্থানীয় মানব করোনাভাইরাসের পূর্বে সংস্পর্শে আসার দ্বারা ব্যাখ্যা করা যায় না। bioRxiv 2020;2020।

For more information:1950477648nn@gmail.com