ব্লুমিয়া ল্যাসিনিয়াটা থেকে পলিফেনল ইনসুলিন সিগন্যালিং পাথওয়ের মাধ্যমে ক্যানোরহ্যাবডিটিস এলিগ্যান্সে স্ট্রেসের জন্য আয়ু বাড়ায় এবং বর্ধিত প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায়

অনুগ্রহ করে যোগাযোগ করুনoscar.xiao@wecistanche.comআরও তথ্যের জন্য

বিমূর্ত: Blumea laciniata এশিয়ায় একটি লোক ঔষধ হিসাবে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, কিন্তু এর উপর প্রাসঙ্গিক সাহিত্য খুব কমই রিপোর্ট করা হয়। আমরা নিশ্চিত করেছি যে B. laciniata(EBL) থেকে পলিফেনল নির্যাস (ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড, রুটিন, এবং লুটিওলিন-4-ও-গ্লুকোসাইড ধারণকারী) ভিট্রোতে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা দেখিয়েছে। তাই, এই কাজে, আমরা ভিভোতে EBL-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-এজিং ক্ষমতাগুলি আরও তদন্ত করতে Caenorhabditis elegans প্রয়োগ করেছি। ফলাফলগুলি দেখায় যে EBL তাপীয় চাপে C.elegans-এর বেঁচে থাকাকে 12.62 শতাংশ বাড়িয়েছে এবং প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির স্তরের পাশাপাশি ম্যালোনালডিহাইডের বিষয়বস্তুকে তীব্রভাবে হ্রাস করেছে। তদুপরি, ইবিএল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমের কার্যকলাপ যেমন ক্যাটালেস এবং সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ বৃদ্ধি করে। উপরন্তু, EBL DAF-16, একটি ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর, নিউক্লিয়াসে উন্নীত করেছে। এছাড়াও, C.elegans-এর আয়ুষ্কাল 17.39 শতাংশ বাড়িয়েছে, যা একটি অ্যান্টি-বার্ধক্য প্রভাব দেখাচ্ছে। বিভিন্ন মিউট্যান্ট ইঙ্গিত করেছে যে ইনসুলিন/আইজিএফ-1 সিগন্যালিং পাথওয়ে সি. এলিগানসে ইবিএল-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-এজিং প্রভাবে অংশগ্রহণ করেছে।

আরো জানতে এখানে ক্লিক করুন

কীওয়ার্ড: Blumea laciniata; অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা; বিরোধী বার্ধক্য প্রভাব; Caenorhabditis elegans

1। পরিচিতি

বার্ধক্য এবং তারুণ্যের সাধনা সর্বদা বৈজ্ঞানিক সম্প্রদায়গুলি থেকে ব্যাপক আগ্রহ প্রকাশ করেছে [1,2। বিপাক প্রক্রিয়ায়, মুক্ত র্যাডিকেল, যেমন প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS), একটি বিশেষ অবস্থায় জোড়াবিহীন ইলেকট্রন ধারণ করে এনজাইমেটিক বা নন-এনজাইমেটিক বিক্রিয়ায় অংশগ্রহণের জন্য উত্পাদিত হয় [3,4]। ROS সিগন্যাল ট্রান্সডাকশন এবং বিভিন্ন ধরনের বিপাক প্রক্রিয়ায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে। সাধারণত, ROS এর প্রজন্ম এবং নির্মূলের মধ্যে একটি সূক্ষ্ম ভারসাম্য রয়েছে। যাইহোক, এই ভারসাম্য সহজেই বাহ্যিক উদ্দীপনা দ্বারা বিরক্ত হয়। যখন ভারসাম্য ভেঙ্গে যায়, ROS এর ক্রমবর্ধমান সংখ্যা আরও অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করবে; তারপরে, আরও ROS বায়োম্যাক্রোমোলিকুলে আক্রমণ করে যেমন ডিএনএ, প্রোটিন এবং লিপিড, এইভাবে কোষের গঠন এবং কার্যকারিতার ক্ষতি করে, যার ফলে কোষের কার্যকারিতা, জিন মিউটেশন, বার্ধক্য, রোগ এবং এমনকি কোষের মৃত্যু ঘটে [৫]। উদাহরণস্বরূপ, ROS-এর খুব বেশি মাত্রা সুস্থ মস্তিষ্কের ক্ষতি করবে এবং আলঝেইমার রোগের লক্ষণগুলিকে ত্বরান্বিত করবে [6]। এদিকে, কোষের ভিতরে আরও ROS বার্ধক্যের দিকে পরিচালিত করবে []। কিছু তত্ত্ব উল্লেখ করেছে যে অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে রক্ষা করার জন্য জীবের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা বাড়াতে পারে এবং কিছু উপায়ে তারা বার্ধক্য [8-11] কমাতেও সক্ষম। অতএব, অক্সিডেশন পুনরায় হ্রাস করার জন্য উপযুক্ত অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি সন্ধান করার আহ্বান জানানো হয়। তাই, প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি সর্বদা মূল জাতির ইতিহাস জুড়ে বার্ধক্য বিলম্বিত করার জন্য অনুসন্ধান করা হয়েছে[11]। প্রাকৃতিক উদ্ভিদ থেকে পলিফেনলগুলি সর্বদাই প্রতিশ্রুতিশীল অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি খুঁজে বের করার জন্য গবেষণার একটি সাইট, যেহেতু পলিফেনলগুলিকে স্বাস্থ্যকর বার্ধক্যের জন্য একটি সম্ভাব্য প্রতিকারের হাতিয়ার হিসাবে বিবেচনা করা হয়, হয় খাদ্যের অংশ হিসাবে বা পৃথক যৌগ (যেমন সম্পূরক) হিসাবে [12]।

বর্তমানে, ক্যানোরহ্যাবডিটিস এলিগানস প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ওষুধের স্ক্রীন করার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল মডেল জীব, যেহেতু নেমাটোডের পুরো জিনোমটি সিকোয়েন্স করা হয়েছে এবং মানুষের জিনের সাথে সমতাত্ব 40 শতাংশের বেশি [13-15] পৌঁছেছে। C.elegans আজকাল এর সম্ভাব্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা এবং বিশেষত, এর বার্ধক্য বিরোধী প্রভাব [8,16] এর জন্য প্রতিশ্রুতিশীল ভেষজ ওষুধের তদন্তের জন্য প্রয়োগ করা হয়। ব্লুবেরি থেকে প্রাপ্ত ফেনোলিক্স সমৃদ্ধ নির্যাস, তাপ, অতিবেগুনী-বি বিকিরণ এবং প্যারাকোয়াটের মতো চাপের প্রতি সিলেগ্যানের প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়াতে প্রমাণিত হয়েছে; অধিকন্তু, এটি C.elegans-এর আয়ুষ্কাল 22.2~44.4 শতাংশ বাড়িয়েছে [17]। Caesalpinia Mimosoideae-এর পাতা থেকে পাওয়া ফেনোলিক নির্যাস অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায় এবং DAF-16/FOXO পাথওয়ের মাধ্যমে ক্যানোরহ্যাবডিটিস এলিগানের জীবনকাল দীর্ঘায়িত করে [১৮]।cistanche แอม เวย์জলপাইয়ের পলিফেনল সি. এলিগানের স্বাস্থ্যের মেয়াদ বাড়িয়েছে এবং ক্যাটেচিন অ্যাসিড, একটি প্রাকৃতিক পলিফেনল যৌগ, মাইটোফ্যাজি পথের মাধ্যমে ক্যানোরহাবডিটিস এলিগানের জীবনকাল বাড়িয়েছে। [১৯,২০]। খাদ্যতালিকাগত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট যেমন ভিটামিন এবং উদ্ভিদ-ভিত্তিক বিপাক, যেমন পলিফেনলস (রেসভেরাট্রোল, অ্যান্থোসায়ানিন, ফ্ল্যাভানোনস, এবং আইসোফ্লাভোনস, বিশেষ করে), কোষে ROS জেনারেশন হ্রাস করে ধীর বার্ধক্য, এইভাবে জীবন্ত প্রাণীর জীবনকাল উন্নত করে [২১]।

Cistanche বিরোধী বার্ধক্য করতে পারেন

Blumea laciniata এশিয়ার একটি বহুল ব্যবহৃত ভেষজ লোক ঔষধ। আমাদের পূর্ববর্তী কাজে, B. laciniata-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা পলিফেনলের বিষয়বস্তুর সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল। উপরন্তু, B.laciniata(EBL) থেকে পলিফেনল নির্যাস চমৎকারভাবে মুক্ত র্যাডিকেল এবং হেলা কোষগুলিকে H2O2 দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস থেকে সুরক্ষিত করে, ভিট্রোতে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা দেখায় [22]। যদিও ইবিএল ভিট্রোতে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা দেখিয়েছে, তবে অভ্যন্তরীণ পরিবেশ জটিল, এবং ইবিএল এখনও একটি চমৎকার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা প্রয়োগ করে কিনা তা অজানা। অতএব, এই বর্তমান কাজে, আমরা ভিভোতে EBL-এর অ্যান্টি-অক্সিডেন্ট সম্ভাবনা এবং অ্যান্টি-এজিং প্রভাবকে আরও মূল্যায়ন করতে C.elegans প্রয়োগ করেছি।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। উপকরণ এবং রাসায়নিক

ব্লুমিয়া ল্যাসিনিয়াটা চীনের সিচুয়ান প্রদেশের জিগং থেকে 29 ডিগ্রী 18'41"N, 104 ডিগ্রী 47'31" ই এ প্রাপ্ত হয়েছিল। উদ্ভিদটি সিচুয়ান কৃষি বিশ্ববিদ্যালয়ের কলেজ অফ লাইফ সায়েন্সেসের উদ্ভিদবিদ্যা বিভাগের অধ্যাপক চাও হু দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছিল। . পুরো উদ্ভিদটি 3 বার পাতিত জল দিয়ে ধুয়ে 45 ডিগ্রি তাপমাত্রায় 4 দিনের জন্য শুকানো হয়েছিল। তারপরে, ভূগর্ভস্থ অংশ সহ পুরো ভেষজটি একটি সূক্ষ্ম গুঁড়োতে মাটি করা হয়েছিল।

OXOID Co., Ltd. (Besting Stoke, UK) থেকে পেপটোন, ট্রিপটোন এবং ইস্টের নির্যাস কেনা হয়েছিল।কত cistanche নিতেইথানল, সোডিয়াম ক্লোরাইড, ম্যাগনেসিয়াম সালফেট, ক্যালসিয়াম ক্লোরাইড এবং অন্যান্য চেংডু কেলং কেমিস্ট্রি কোং, লিমিটেড (চেংদু, চীন) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। একটি প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) কিট, সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ কিট (SOD), ক্যাটালেস কিট (CAT), ম্যালোনালডিহাইড কিট (MDA), এবং মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা কিট (T-AOC) সবই নানজিং জিয়ানচেং বায়োইঞ্জিনিয়ারিং ইনস্টিটিউট (নানজিং,) থেকে কেনা হয়েছিল। চীন)।

2.2.Blumea laciniata (EBL) থেকে পলিফেনল নির্যাস তৈরি

আল্ট্রাসাউন্ডের সাহায্যে 40 ডিগ্রি তাপমাত্রায় 45 মিনিটের জন্য 80 শতাংশ ইথানলের সাথে ব্লুমিয়া ল্যাসিনিয়াটার পাউডার মেশানো হয়েছিল। তারপরে, দ্রবণটি ঘূর্ণমান বাষ্পীভবনের দ্বারা ঘনীভূত হয়েছিল এবং ব্লুমিয়া ল্যাসিনিয়াটা (ইবিএল) থেকে পলিফেনল নির্যাস পেতে লাইওফিলাইজড হয়েছিল। ইবিএল-এ পলিফেনলের বিষয়বস্তু ছিল 45 ~ 48 শতাংশ, এবং রাসায়নিক রচনাগুলি উচ্চ-কার্যকারিতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল, যেমন আমাদের পূর্ববর্তী কাজ [22] এ দেখানো হয়েছে। পাঁচটি ফেনোলিক উপাদানকে ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড, আইসোরিয়েন্টিন, রুটিন, লুটিওলিন-4-ও-গ্লুকোসাইড এবং সিনামিক অ্যাসিড হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল।

2.3। C. অরলিন্স স্ট্রেনস এবং রক্ষণাবেক্ষণ

বন্য ধরনের ব্রিস্টল N2, ট্রান্সজেনিক নিমাটোড স্ট্রেন, এবং Escherichia coli OP50 দয়া করে Caenorhabditis Genetics Center দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছে৷ এই কাজে প্রয়োগ করা ট্রান্সজেনিক কৃমিগুলি হল TJ356 daf-16:GFP(zls356), CF1038 daf-16(mu86)I., CB1370 daf-2(e1370)III ., TJ1052 বয়স-1(hx546)II., VC204 at-2(ok393)X., VC345 sgk-1(ok538)X., এবং EU1 স্কিন-1( zu67IV. সমস্ত নেমাটোড একটি নিমাটোড গ্রোথ মিডিয়াম (NGM) প্লেটে 20 ডিগ্রিতে খাদ্য হিসাবে OP50 এর একটি স্তর সহ রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল। EBL কে ডাইমিথাইল সালফক্সাইড (DMSO) এ দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং একটি NGM প্লেটে ঢেলে দেওয়া হয়েছিল যখন তরল মাধ্যম 50 ডিগ্রি ছিল। পর্যায় (DMSO-এর চূড়ান্ত ঘনত্ব 0.1 শতাংশের কম ছিল)। তাপীয় চাপের জন্য ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ ছিল অ্যাসকরবিক অ্যাসিড (Vc), 10 ug/mL এর ঘনত্বে।

2.4। ফুড ক্লিয়ারেন্স অ্যাস

খাদ্য ক্লিয়ারেন্স অ্যাস পূর্ববর্তী কাজ [২৩] অনুসারে পরিচালিত হয়েছিল। সিঙ্ক্রোনাইজড কৃমিগুলি সোডিয়াম হাইপোক্লোরাইট পদ্ধতি দ্বারা প্রাপ্ত হয়েছিল [24]। L4 লার্ভা একটি 96-কূপ প্লেটে EBL এবং 5-ফ্লুরোরাসিল (35 মিমি) সহ স্থাপন করা হয়েছিল। প্লেটের শোষণ প্রতিদিন 600 এনএম এ পড়া হয়েছিল।

2.5। উর্বরতা পরীক্ষা

গর্ভবতী কৃমিকে ডিম পাড়ার জন্য নিমাটোড গ্রোথ মিডিয়াম (এনজিএম) এর উপর 2 ঘন্টা রাখা হয়েছিল এবং এল কৃমি পাওয়ার জন্য 20 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল। তারপরে, ইবিএলের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি সহ কৃমিগুলি একটি নতুন প্লেটে স্থানান্তরিত হয়েছিল। যখন কৃমি ডিম পাড়া শুরু করে, তখন কৃমিগুলোকে একটি নতুন এনজিএম প্লেটে রাখা হয় যতক্ষণ না কৃমিগুলো পাড়া বন্ধ করে। অতিরিক্তভাবে, ডিমগুলি 24 ঘন্টার জন্য 20 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল। তারপর, হ্যাচড কৃমি রেকর্ড করা হয়. প্রতিটি ঘনত্বের জন্য দশটি কীট ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.6.থার্মাল স্ট্রেস অ্যাস

সিঙ্ক্রোনাইজড L1 কৃমিগুলি 48 ঘন্টা চিকিত্সার জন্য প্লেটে স্থাপন করা হয়েছিল। তারপরে, 5 ঘন্টা এক্সপোজারের জন্য কীটগুলি 35 ডিগ্রিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। পরবর্তীকালে, কৃমিগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য 20 ডিগ্রিতে রাখা হয়েছিল এবং জীবিত কীটগুলি গণনা করা হয়েছিল। প্রতিটি স্বাধীন পরীক্ষার জন্য ত্রিশটি কীট ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.7.জীবনকালের মূল্যায়ন

সিঙ্ক্রোনাইজড L1 কৃমিগুলিকে 20 ডিগ্রিতে EBL সম্বলিত NGM প্লেটে রাখা হয়েছিল। প্যানিং সময়কালে, কীটগুলি প্রতিদিন একটি নতুন প্লেটে স্থানান্তরিত হত (প্রতি প্লেটে 60টি কীট)। যখন কৃমি পাড়া বন্ধ করে দেয়, নিমাটোডগুলি প্রতি অন্য দিন একটি নতুন এনজিএম-এ স্থানান্তরিত হয়। মৃত কৃমির সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল এবং জীবিত কৃমি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।

2.8। ROS এর স্তরের মূল্যায়ন

সিঙ্ক্রোনাইজড L1 কৃমিগুলিকে 48 ঘন্টার জন্য 20 ডিগ্রীতে EBL ধারণকারী NGM প্লেটে রাখা হয়েছিল। তারপর, চাপের অবস্থার জন্য, কৃমিগুলি 1.5 ঘন্টার জন্য 35C তাপমাত্রায় স্থাপন করা হয়েছিল; স্বাভাবিক অবস্থার জন্য, কৃমিগুলিকে 1.5 ঘন্টার জন্য 20 ডিগ্রিতে রাখা হয়েছিল। তারপরে, কৃমিগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং OP50 অপসারণের জন্য K মিডিয়াম দিয়ে 5 বার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে C.elegans-এ ROS দাগ দিতে একটি রকেট ব্যবহার করা হয়েছিল। ROS এর ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা 488 এনএম এর উত্তেজনা তরঙ্গদৈর্ঘ্য এবং 525 এনএম এর নির্গমন তরঙ্গদৈর্ঘ্যে পড়া হয়েছিল। অধিকন্তু, কৃমিগুলিকে একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের (অলিম্পাস বিএক্স53) অধীনে ROS-এর স্তর পর্যবেক্ষণ করতে একটি কাচের স্লাইডে রাখা হয়েছিল।

2.9.অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম এবং MDA এর বিষয়বস্তুর কার্যকলাপের মূল্যায়ন

সিঙ্ক্রোনাইজড L1 কৃমিগুলিকে এনজিএম প্লেটে 48 ঘন্টার জন্য EBL সহ এবং ছাড়া 20 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখা হয়েছিল। তারপর, তাপীয় চাপের জন্য, কৃমিগুলিকে 1.5 ঘন্টার জন্য 35 ডিগ্রিতে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল; স্বাভাবিক অবস্থার জন্য, কৃমি 1.5 ঘন্টার জন্য 20C তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল। পরবর্তীকালে, OP50 অপসারণের জন্য কৃমিগুলিকে K মাধ্যম দিয়ে 5 বার ধুয়ে ফেলা হয়। অতিরিক্তভাবে, সমস্ত কৃমিকে 10 মিনিটের জন্য -80 ডিগ্রিতে হিমায়িত করা হয়েছিল এবং তারপর চূর্ণ করা হয়েছিল৷ তারপর, প্রোটিন দ্রবণ পাওয়ার জন্য সুপারনাট্যান্টকে 12,000×g rpm/min 10 মিনিটে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। পরবর্তী অ্যাসেসের জন্য সমাধানটি একটি নতুন টিউবে যুক্ত করা হয়েছিল।একটি cistanche কিপ্রোটিনের বিষয়বস্তু পূর্ববর্তী পদ্ধতি দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল [25], এবং CAT, SOD, এবং T-AOC-এর ক্রিয়াকলাপগুলির পাশাপাশি MDA-এর বিষয়বস্তু কিট নির্দেশাবলী অনুসারে পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.10. DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরের ভিজ্যুয়ালাইজেশন

ট্রান্সজেনিক স্ট্রেন TJ356 DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরে একটি GFP বহন করে, এইভাবে C.elegans-এ স্থানীয়করণ পর্যবেক্ষণ করা সহজ করে তোলে। সিঙ্ক্রোনাইজড L1 লার্ভা 48 ঘন্টার জন্য EBL-এর সংস্পর্শে আসে; সোডিয়াম অ্যাজাইড (35 মিমি) দ্বারা কৃমি অ্যানেস্থেটাইজ করা হয়েছিল এবং DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরের স্থানীয়করণ একটি ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপের (OLYMPUS BX53) অধীনে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। প্রতিটি স্বাধীন পরীক্ষায় 10টি কীট ছিল।

2.11.পরিসংখ্যান

এই কাজে প্রাপ্ত সমস্ত ডেটা গ্রাফপ্যাড প্রিজম 8 ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল৷{1}}৷ আয়ুষ্কাল বক্ররেখার তুলনা লগ-র্যাঙ্ক পরীক্ষা দ্বারা করা হয়েছিল। পরিমাণগত তথ্য বিশ্লেষণ একমুখী ANOVA সঙ্গে মূল্যায়ন করা হয়েছে. উপরন্তু, গড় মানগুলির পরিসংখ্যানগত পার্থক্যগুলি মূল্যায়ন করার জন্য একটি জোড়াবিহীন, দুই-টেইলড টি-পরীক্ষা করা হয়েছিল। সমস্ত ডেটা গড় ± SD হিসাবে দেখানো হয়েছিল। পি<0.05 was="" considered="" to="" be="">

3। ফলাফল

3.1.ইবিএল শোজওয়েড সি. এলিগানসে কোন বিষাক্ততা নেই

A high concentration of drugs may have negative effects on C.elegans. Therefore, a suitable concentration of EBL to use on C.elegans shall be determined. As shown in Figure 1A,0.3 and 0.4mg/mL of EBL slowed down food intake ability, while 0-0.2 mg/mL showed no evident impact on C. elegans. Hence, three concentrations(0.05, 0.10, and 0.20 mg/mL)were adopted to evaluate the effect on reproduction ability. As shown in Figure 1B, the worms in the blank group laid 193.6± 13.46 eggs. Additionally, after treatment with EBL, the numbers of laid eggs were 198.9±36.20,201.2±14.39, and 213.8±6.150, respectively, showing no significant difference compared with the blank group (p>{{0}}৷{4}}৫)। এইভাবে, পরবর্তী অ্যাসের জন্য 0.05, 0.1, এবং 0.2 mg/mL EBL নির্বাচন করা হয়েছিল৷

3.2। EBL তাপীয় চাপের অধীনে C.elegans-এর বেঁচে থাকার উন্নতি করেছে

Normally, C. elegans lives at 20 °C. When the worms were shifted to a higher temperature they were stressed, the level of ROS will increase, and the survival of C.elegans under thermal stress will decrease [26]. As shown in Figure 2A, the survival in the blank group was 52.94±5.48%, and with 48 h of treatment of 0.05 and 0.1 mg/mL of EBL, the survival rates were significantly enhanced by 17.63%and 12.62%, respectively. However, 0.2 mg/ml of EBL failed to prolong survival (p>{{0}}৷{4}}৫)। অতএব, EBL-এর 0.05 এবং 0.1 mg/mL তাপীয় চাপের বিরুদ্ধে C.elegans-এর প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায়, সুস্পষ্ট সুরক্ষা দেখায়।

3.3.EBL তাপীয় চাপের অধীনে C.elegans-এ ROS এবং MDA-এর বিষয়বস্তু হ্রাস করেছে

স্ট্রেস প্রতিরোধের এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতার মধ্যে একটি ঘনিষ্ঠ সম্পর্ক রয়েছে [27]। তাপীয় চাপের অধীনে, ROS-এর ক্রমবর্ধমান স্তর কোষের বায়োম্যাক্রোমোলিকুলে আক্রমণ করবে, যেমন ডিএনএ এবং প্রোটিন [২৮]। প্রাকৃতিক উদ্ভিদের নির্যাস তারপরে সি. এলিগ্যানে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাকে উন্নত করে, এইভাবে ROS দূর করে এবং সি. এলিগ্যানের স্ট্রেসের প্রতিরোধ ক্ষমতা উন্নত করে, যেমন তাপীয় চাপ এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস [২৯,৩০]। অতএব, আমরা C.elegans-এ ROS-এর স্তরে EBL-এর প্রভাব নির্ধারণ করেছি। চিত্র 2C-তে দেখানো হয়েছে, বিভিন্ন গ্রুপে ROS-এর মাত্রা ভিন্ন ছিল। EBL এর সাথে প্রিট্রিট করা কৃমিতে ROS-এর মাত্রা উল্লেখযোগ্যভাবে কমে গিয়েছিল, 31.60 শতাংশ (চিত্র 2D), যার অর্থ EBL-এর সাথে চিকিত্সা করা C.elegans-এর শক্তিশালী প্রতিরোধ ক্ষমতা ROS-এ স্ক্যাভেঞ্জিং-এর সাথে যুক্ত ছিল।

একটি বায়োমার্কার হিসাবে, এমডিএ ফ্রি র‌্যাডিক্যাল আক্রমণ এবং লিপিড পারক্সিডেশনের মাত্রা প্রতিফলিত করতে পারে; অতএব, MDA-এর বিষয়বস্তু বার্ধক্য এবং বিপাক প্রক্রিয়ায় অক্সিডেটিভ ক্ষতির জন্য প্রধান প্রতীক হিসাবে বিবেচিত হয় [31]। চিত্র 2B-তে দেখানো হয়েছে, ফাঁকা গোষ্ঠীতে MDA-এর বিষয়বস্তু যথেষ্ট পরিমাণে বেশি ছিল। উপরন্তু, EBL-এর চিকিত্সার সাথে, কৃমিতে MDA-এর মাত্রা 41.46 শতাংশ তীব্রভাবে হ্রাস পেয়েছে। এই ফলাফলটি নির্দেশ করে যে EBL লিপিড পারক্সিডেশন হ্রাস করেছে এবং তাপীয় চাপ দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ ক্ষতি থেকে মুক্তি দিয়েছে।

3.4.EBL তাপীয় চাপের অধীনে C.elegans-এ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেছে

অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থা অক্সিডেশন দ্বারা প্ররোচিত ক্ষতিতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [32]। EBL-এর সাথে চিকিত্সার পরে, অক্সিডেটিভ ক্ষতির মাত্রা হ্রাস পেয়েছে, যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থার নিয়ন্ত্রণের সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। অতএব, আমরা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির ক্রিয়াকলাপগুলি আরও মূল্যায়ন করেছি।cistanche কিনুনচিত্র 3A-তে দেখানো হয়েছে, ফাঁকা গোষ্ঠীর তুলনায় CAT-এর কার্যকলাপ উল্লেখযোগ্যভাবে 46.73 শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে। অতিরিক্তভাবে, SOD-এর কার্যকলাপও 43.84 শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 3B)।bioflavonoidsC.elegans-এ দুটি প্রধান অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমের কার্যকলাপ উভয়ই উন্নত হয়েছিল, এইভাবে মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতাকে শক্তিশালী করে তোলে (চিত্র 3C)। অতএব, EBL অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থা সক্রিয়; অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলি তখন ক্রমবর্ধমান ROS দূর করে, তাপের চাপে বেঁচে থাকার উন্নতি করে এবং ভিভোতে চমৎকার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা দেখায়।

3.5। EBL নিউক্লিয়াসে DAF-16-এর স্থানীয়করণ প্রচার করেছে

C.elegans-এর উপর EBL-এর প্রভাব ড্যাফ-16, বিপাক, স্ট্রেস প্রতিক্রিয়া এবং জীবনচক্রের একটি প্রধান নিয়ন্ত্রক কেন্দ্র [33,34] এর সাথে যুক্ত কিনা তা আরও অন্বেষণ করতে, একটি TJ356 ট্রান্সজেনিক কৃমি পর্যবেক্ষণের জন্য প্রয়োগ করা হয়েছিল C.elegans-এ DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরের অবস্থান। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমের জিনগুলি ডাফ-16 এর নিচের দিকে অবস্থিত। চিত্র 3D-তে দেখানো হয়েছে, EBL-এর সাথে চিকিত্সার 48 ঘন্টা পরে, নিউক্লিয়াসে অবস্থিত DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরের ফ্রিকোয়েন্সি উল্লেখযোগ্যভাবে 40.30 শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে, যার অর্থ EBL সক্রিয় DAF-16।

3.6। ইবিএল মিউট্যান্টদের বেঁচে থাকা বাড়াতে ব্যর্থ হয়েছে

ইবিএল তাপীয় চাপের অধীনে বন্য-টাইপ সি. এলিগানের বেঁচে থাকার উন্নতি করেছে (চিত্র)। সুতরাং, আমরা প্রক্রিয়াটি মূল্যায়ন করতে ছয় ধরণের মিউট্যান্ট ব্যবহার করেছি। চিত্র 4A তে দেখানো হয়েছে, বয়স-1 জিনটি অনুপস্থিত TJ1052 স্ট্রেনের বেঁচে থাকা, EBL এর সাথে চিকিত্সা করার পরে বাড়ানো হয়নি, যার অর্থ হল বয়স-1 প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ানোর প্রক্রিয়ার একটি মূল জিন , EBL দ্বারা প্ররোচিত। একইভাবে, EBL CF1038 (চিত্র 4B), CB1370 (চিত্র 4C), VC204 (চিত্র 4E), এবং VC345 (চিত্র 4F) এর বেঁচে থাকাকে উন্নত করতে ব্যর্থ হয়েছে। অতএব, daf-16. daf-2, at-2, এবং sgk-1, চারটি জিন, তাপীয় চাপে C.elegans-এর প্রতিরোধকে শক্তিশালী করার জন্য EBL-এর জন্য প্রয়োজনীয় ছিল। এছাড়াও, EBL উল্লেখযোগ্যভাবে EU1 নেমাটোডের বেঁচে থাকা 5.01 শতাংশ বৃদ্ধি করেছে (চিত্র 4D)। যাইহোক, EBL বন্য ধরনের কৃমির বেঁচে থাকার হার 12.62 শতাংশ বাড়িয়েছে, যা EU1 স্ট্রেনের প্রভাব থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল।

তাই, EBL সম্পূর্ণরূপে EU1 কৃমিতে প্রতিরোধ ক্ষমতা পুনরুদ্ধার করতে পারেনি, ইঙ্গিত করে যে ত্বক-1 EBL প্রক্রিয়ায় আংশিকভাবে অংশগ্রহণ করছে।

3.8। EBL মিউট্যান্টদের আয়ু বাড়াতে ব্যর্থ হয়েছে

To further explore the mechanism, three mutants were applied to evaluate the anti-aging effect of EBL. As shown in Figure 5B, the lifespans of TJ1052 between the blank group and the EBL group were not significantly changed (p >0.05). As the results show in Figure 5C, the mean lifespan of CF1038 was 12.67 ±0.58 days, and with the treatment of EBL the survival time was not prolonged (p>0.05)। অতিরিক্তভাবে, EBL CB1370 কৃমি (চিত্র 5D) এর জীবনকাল প্রসারিত করেনি। তাই, বয়স-1 এবং daf-2 EBL-এর জীবনকাল বাড়ানোর জন্য প্রয়োজনীয় ছিল C.elegans.daf-16 বয়সের নিচের দিকে অবস্থিত ছিল-1 এবং daf{{8} } EBL-এর দীর্ঘায়ু নিয়ন্ত্রণে daf{10}} এর ভূমিকা মূল্যায়ন করতে আমরা CF1038 স্ট্রেন ব্যবহার করেছি৷ তাই, Daf-2, বয়স-1, এবং daf-16 তিনটি জিন EBL-এর জন্য একটি চমৎকার অ্যান্টি-বার্ধক্য প্রভাব প্রয়োগ করার জন্য অপরিহার্য ছিল।

3.9.EBL সাধারণ অবস্থার অধীনে C.elegans-এ ROS এবং MDA-এর একটি সাধারণ স্তর রাখে

যেহেতু ইবিএল ভিভোতে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতার অধিকারী ছিল, তাই আমরা ধরে নিয়েছিলাম যে ইবিএল সি.এলিগানের জীবনকাল বাড়ানোর জন্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাকে নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। সুতরাং, আমরা স্বাভাবিক চাপের অধীনে ROS এর স্তর এবং MDA এর বিষয়বস্তু নির্ধারণ করেছি। চিত্র 6A তে দেখানো হয়েছে, ROS এর স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়নি। এদিকে, MDA-এর বিষয়বস্তুও পরিবর্তন করা হয়নি (চিত্র 6B)। এই ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে EBL সি. এলিগানের উপর কোন উদ্দীপক প্রভাব দেখায়নি এবং কৃমিগুলিকে একটি স্বাভাবিক শারীরবৃত্তীয় স্তরে রাখে।

3.10.EBL স্বাভাবিক অবস্থায় C.elegans-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা বৃদ্ধি করেছে

আমাদের অনুসন্ধানগুলি আরও যাচাই করার জন্য, C.elegans এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা স্বাভাবিক চাপের অধীনে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। চিত্র 6C-তে দেখানো হয়েছে, CAT-এর কার্যকলাপ ব্যাপকভাবে 175.71 শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে। উপরন্তু, EBL-এর সাথে চিকিত্সা করার পরে, SOD-এর কার্যকলাপও উল্লেখযোগ্যভাবে 131.57 শতাংশ (চিত্র 6D) দ্বারা উন্নত হয়েছিল। এই দুটি এনজাইম ছিল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থার প্রধান রক্ষক। এইভাবে, C.elegans-এর মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা 57.46 শতাংশ বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 6E)। অতএব, EBL C.elegans-এ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থা সক্রিয় করেছে যাতে ROS এবং MDA-এর স্বাভাবিক মাত্রা বজায় থাকে, যার ফলে দীর্ঘ জীবন হয়।

4। আলোচনা

EBL H2O2 দ্বারা প্ররোচিত অক্সিডেটিভ ক্ষতির বিরুদ্ধে HeLa কোষগুলিকে রক্ষা করতে প্রমাণিত হয়েছিল, একইভাবে উদ্ভিদ থেকে অন্যান্য ফেনল নির্যাস [22]। যাইহোক, অভ্যন্তরীণ পরিবেশগুলি যথেষ্ট জটিল, এবং কোষের পরীক্ষাগুলির জন্য শরীরের জটিল পরিবেশগুলির মধ্যে নিয়ন্ত্রণ প্রতিফলিত করা কঠিন। অতএব, এই কাজে, আমরা ভিভোতে EBL এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা ব্যাপকভাবে মূল্যায়ন করতে C.elegans ব্যবহার করেছি। তাপের চাপে, আরও ROS তৈরি হয়েছিল এবং তারা শরীরে আক্রমণ করেছিল, যার ফলে বেঁচে থাকার হার কম হয় [36]। শেষ পর্যন্ত ফলাফল দ্বারা দেখানো হয়েছে (চিত্র 2A), EBL তাপীয় চাপের মধ্যে C.elegans-এর বেঁচে থাকা বৃদ্ধি করেছে, যা ইঙ্গিত করে যে C.elegans-এ একটি নির্দিষ্ট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা EBLexerts। শরীরে, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থা হল প্রধান রক্ষক, এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম যেমন CAT এবং SOD বিশেষ করে ক্রমবর্ধমান মুক্ত র্যাডিকেলগুলি দূর করতে ব্যবহৃত প্রধান এজেন্ট [৩৭]। EBL তাপীয় চাপের অধীনে CAT এবং SOD-এর কার্যক্রমকে উন্নীত করেছে। এইভাবে, C.elegans-এর মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা বাড়ানো হয়েছিল (চিত্র 3A-C)। তদুপরি, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলিকে উদ্দীপিত করায়, ROS-এর মাত্রা তীব্রভাবে হ্রাস করা হয়েছিল, এবং MDA-এর বিষয়বস্তু হ্রাস পাওয়ার কারণে লিপিড পারক্সিডেশন ছাড়াও অক্সিডেটিভ ক্ষতি হ্রাস পাবে বলে অনুমান করা হয়েছিল। এই প্রক্রিয়াটি সাধারণত C.elegans-এ অভিনয় করা অন্যান্য প্রাকৃতিক পণ্যগুলির মধ্যে পরিলক্ষিত হয়। জলপাই পাতা থেকে ফেনোলিক নির্যাস CAT, SOD, এবং glutathione peroxidase (GSH-Px) এর কার্যকলাপকে সক্রিয় করতে প্রমাণিত হয়েছে, যা পরে ROS-এর মাত্রা কমিয়ে দেয় এবং C.elegans-এর তাপীয় চাপের প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায় [23]। অ্যানাকার্ডিয়াম অক্সিডেন্টেল থেকে পলিফেনলিক নির্যাস SOD-3 এবং GST-4-এর মতো স্ট্রেস রেসপন্স জিনের প্রকাশকে উদ্দীপিত করেছিল, যা পরে ROS-এর স্তরকে হ্রাস করে এবং চাপের পরিস্থিতিতে C.elegans-এর বেঁচে থাকা বৃদ্ধি করে [38]। অতএব, আমরা অনুমান করেছি যে EBL C.elegans-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাকে কঠোর পরিবেশের বিরুদ্ধে সক্রিয় করেছে, যেমন ROS-এর ক্রমবর্ধমান স্তর, যার ফলে কৃমি রক্ষা করা হয়।

ইনসুলিন/IGF-1 সিগন্যালিং পাথওয়ে (IIS) হল বার্ধক্য, বিকাশ এবং মানসিক চাপ নিয়ন্ত্রণ করার অন্যতম গুরুত্বপূর্ণ পথ। DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর, উচ্চতর প্রাণীদের মধ্যে FOXO-এর একটি হোমোলগ হল IIS পথের একটি মূল কারণ, এবং daf-16-এর অভিব্যক্তি C.elegans-এর তাপ, অক্সিডেশনের প্রতিরোধের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে জড়িত। , এবং ধাতু [33,34]। তাই, আমরা ভাবছিলাম যে EBL তাপীয় পরিস্থিতিতে C.elegans-এর প্রতিরোধকে শক্তিশালী করতে IS পথকে নিয়ন্ত্রিত করেছে কিনা। পরবর্তীকালে, DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরের অবস্থানের উপর EBL-এর প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছিল, এবং যে ফ্রিকোয়েন্সির সাথে DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর নিউক্লিয়াসে অবস্থিত ছিল তা EBL ছাড়া চিকিত্সা করা থেকে বেশি ছিল(চিত্র 3D)। সুতরাং, এই ফলাফলটি আমাদের অনুমানকে সমর্থন করেছে। অন্যান্য প্রাকৃতিকভাবে ফেনোলিক নির্যাসের মতো, এগ্রিমোনিয়া প্রসেরা ওয়ালার। নির্যাসটি DAF-16 কে নিউক্লিয়াসে উন্নীত করে তাপীয় চাপের বিরুদ্ধে C.elegans-এর প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়িয়েছে [39]। ইতিমধ্যে, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির জিনগুলি ডাফ-16 এর নিচের দিকে অবস্থিত৷ ডিএএফ-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর নিউক্লিয়াসে উদ্দীপিত হয়, ড্যাফ-16 জিনের অভিব্যক্তি সক্রিয় হয়, এবং সোড-3 এবং সিটিএল-1 এর মতো নিম্নধারার জিনের অভিব্যক্তি তারপর উন্নীত করা হয়, যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম |33,34] এর ক্রিয়াকলাপ বাড়াতে দেখানো হয়। যাইহোক, IIS পাথওয়ে হল একটি জটিল সিগন্যাল ট্রান্সডাকশন পাথওয়ে। ডাফ-16 এর কার্যকলাপ আপস্ট্রিম বয়স-1 এবং ড্যাফ-2 জিন, সেইসাথে AKT-1, AKT-2 এর ফসফোরিলেশন দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়, SGK-1, JNK-1, এবং CST-1 [40]। আরও অনুসন্ধানের পর, মিউট্যান্টদের বেঁচে থাকা যেমন TJ1052 বয়স-1(hx546), CF1038 daf-16(mu86), CB1370 daf-2(e1370), VC204 -2(ok393), এবং VC345 sgk-1(ok538) উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়নি, যার অর্থ হল IIS পাথওয়ে EBL দ্বারা প্ররোচিত প্রতিরোধকে বাড়ানোর সাথে জড়িত ছিল। অতএব, এক কথায়, EBL-এর সাথে চিকিত্সা করার পরে, CAT এবং SOD-এর কার্যকলাপগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হওয়ার ঘটনাটি আইআইএস পথের নিয়ন্ত্রণের সাথে যুক্ত ছিল এবং নিউক্লিয়াসে আরও বেশি DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর, প্ররোচিত হয়েছিল। EBL দ্বারা, এইভাবে কৃমির উচ্চ স্তরের ROS হ্রাস করে, ভিভোতে একটি চমৎকার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা প্রদর্শন করে।

আরেকটি স্ট্রেন, EU1 স্কিন-1(zu67), IIS পাথওয়েতে অন্তর্ভুক্ত নয়, এটি একটি অত্যাবশ্যক জিন যা স্ট্রেসের প্রতিরোধকে নিয়ন্ত্রণ করে। অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করতে p38 MAPK পাথওয়েতে SKN-1 কাজ করে, এবং DAF-16/FOXO-এর সমান্তরালে DAF-2-মধ্যস্থিত ইনসুলিন/IGF-1-যেমন সিগন্যালিং প্রাপ্তবয়স্কদের জীবনকাল নিয়ন্ত্রণ করার পথ [৪১]। উপরন্তু, অন্যান্য গবেষণায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে SKN-1 AKT-1, AKT-2, এবং SGK-1 কাইনেসগুলি দ্বারা সরাসরি ফসফরিলেট করা যেতে পারে যেগুলি DAF{{13} } ইনসুলিন সিগন্যালিং পাথওয়েতে [40A42]। অতএব, আমরা ত্বকের অংশগ্রহণের মূল্যায়ন করেছি-1। EBL EU1 স্ট্রেনের বেঁচে থাকা 5.01 শতাংশ বৃদ্ধি করেছে, যা বন্য-টাইপ C.elegans (12.62 শতাংশ) এর প্রভাবের তুলনায় তুলনামূলকভাবে কম ছিল। এই ফলাফলটি নির্দেশ করে যে ত্বক-1 জিনটি আংশিকভাবে সি, এলিগানের প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ানোর প্রক্রিয়ায় অংশ নিয়েছিল। পূর্ববর্তী গবেষণায়, অন্যান্য প্রাকৃতিক গাছপালাও সি. এলিগ্যানের প্রতিরোধকে নিয়ন্ত্রণ করার জন্য IIS পথকে নিয়ন্ত্রিত করেছিল। ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড এইচআইএফ-1, এইচএসএফ-1, এবং অটোফ্যাজি [43] এর মাধ্যমে তাপীয় চাপের বিরুদ্ধে C.elegansকে সুরক্ষিত করে। DAF-16/FoxO এবং SKN-1/Nrf-2 সিগন্যালিং পাথওয়ের মাধ্যমে অ্যানাকার্ডিয়াম অক্সিডেন্টাল অ্যাটেনুয়েটেড ইন্ট্রাসেলুলার রিঅ্যাকটিভ অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) থেকে ফেনোলিক নির্যাস [৩৮]। একটি চীনা ঐতিহ্যবাহী ভেষজ চা, যার মধ্যে আঠারোটি ফেনোলিক কম্পোজিশন রয়েছে, C.elegans-এ বর্ধিত স্ট্রেস রেজিস্ট্যান্স (অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং হিট স্ট্রেস) এবং এই প্রতিরক্ষামূলক প্রক্রিয়াটি ইতিবাচকভাবে ইনসুলিন/ইনসুলিনের মতো গ্রোথ ফ্যাক্টর সিগন্যালিং (IS-)-নির্ভরতার সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল। পদ্ধতি [44]। সব মিলিয়ে, EBL আইআইএস পাথওয়ের মাধ্যমে সি. এলিগানের তাপীয় চাপের প্রতিরোধকে বাড়িয়েছে, অন্যান্য পথের সাথে, যেমন ত্বক-1, সেইসাথে গাছপালা থেকে অন্যান্য প্রাকৃতিক ফেনল।

সাধারণত, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা একটি অ্যান্টি-বার্ধক্য প্রভাবের সাথে যুক্ত থাকে |45-47]। রোসা রুগোসা চা থেকে পলিফেনল নির্যাস সি.এলিগ্যানস [৪৮] এর জীবনকাল দীর্ঘায়িত করার পাশাপাশি অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের থার্মোটোলারেন্স এবং প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায়। আঙুরের পোমাসের নির্যাস চাপের পরিস্থিতিতে সি.এলেগানদের বেঁচে থাকার ক্ষমতা বাড়িয়েছে এবং তাদের আয়ু বৃদ্ধি করেছে [৩৬। যেহেতু ইবিএল ভিট্রো এবং ভিভোতে একটি শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা দেখিয়েছে, তাই আমরা ভাবছিলাম যে EBL C.elegans-এর জীবনকাল দীর্ঘায়িত করতে পারে কিনা। ফলাফলে দেখা যায়, EBL উল্লেখযোগ্যভাবে C.elegans-এর গড় আয়ুষ্কাল শূন্য গ্রুপের তুলনায় 17.31 শতাংশ বাড়িয়েছে, চমৎকার অ্যান্টি-এজিং ক্ষমতা দেখায়। অতএব, আমরা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাবনা এবং অ্যান্টি-এজিং ক্ষমতার মধ্যে যোগসূত্র খুঁজে পেতে সাধারণ চাপে C.elegans-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা আরও অন্বেষণ করেছি। ROS এবং MDA, বার্ধক্যের প্রধান চিহ্নিতকারী হিসাবে, উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়নি। ফলাফলে দেখা গেছে, CAT এবং SOD-এর কার্যক্রম আশ্চর্যজনকভাবে প্রচার করা হয়েছে। C.elegans-এর মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতাও বাড়ানো হয়েছিল (চিত্র 6C-E)। তাই, আমরা ধরে নিয়েছিলাম যে EBL অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা ব্যবস্থাকে সক্রিয় করেছে সি. এলিগানকে স্বাভাবিক শারীরবৃত্তীয় স্তরে রাখতে; এইভাবে, অক্সিডেটিভ ক্ষতি এড়ানো, RO-এর ক্রমবর্ধমান স্তর সময়মতো স্ক্যাভেঞ্জ করা যেতে পারে। C.elegans এর জীবনচক্র বিভিন্ন প্রধান পথ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়, বিশেষ করে IIS পাথওয়ে। আমাদের অনুসন্ধানগুলি আরও প্রমাণ করেছে যে বয়স{10}},daf-16, এবং daf-2 EBL-এর জন্য দীর্ঘায়ু প্রভাব প্রদর্শনের জন্য প্রয়োজনীয় ছিল, যার অর্থ হল IIS পাথওয়ে প্রক্রিয়াটিতে অংশগ্রহণ করেছিল। IIS পাথওয়েতে, daf-2 এবং বয়স-1 জিনগুলি daf-16-এর প্রকাশকে বাধা দেয়, যা C.elegans-এর প্রজনন এবং জীবনচক্র নিয়ন্ত্রণ করে এমন প্রধান কারণ। যেহেতু EBL নিউক্লিয়াসে DAF-16-এর ট্রান্সক্রিপশন সক্রিয় করেছে, তাই আমরা ধরে নিয়েছিলাম যে C.elegans-এর জীবনকালকে উন্নীত করার জন্য EBL IIS পথকে দমন করতে পারে। EBL এর রাসায়নিক রচনাগুলি আগে চিহ্নিত করা হয়েছিল [22]। ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড ছিল প্রধান উপাদান। তদুপরি, ক্লোরোজেনিক অ্যাসিড C.elegans-এর বার্ধক্যের উপর প্রভাব প্রদর্শন করতে প্রমাণিত হয়েছে, প্রধানত ইনসুলিন/IGF-1 সিগন্যালিং পাথওয়েতে DAF-16 এর মাধ্যমে [49]। একটি প্রাকৃতিক পলিফেনল যৌগ, ক্যাটেচিন অ্যাসিড মাইটোফ্যাজি পথের মাধ্যমে ক্যানোরহ্যাবডাইটিস এলিগানের জীবনকাল বাড়িয়েছে [20]। অতএব, এই কাজে, ইবিএল আইআইএস পথের মাধ্যমে চমৎকার অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা এবং অ্যান্টি-এজিং প্রভাব প্রদর্শন করেছে।

সাধারণত, ধাতু এবং অন্যান্য বিপজ্জনক পদার্থ দ্বারা প্ররোচিত প্রধান ক্ষতি হল অঙ্গের তীব্র বা দীর্ঘস্থায়ী অক্সিডেটিভ ক্ষতি [50]। ধাতব আয়ন হোমিওস্টেসিসের ব্যাঘাত ঘটতে পারে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, ROS এর মাত্রা বৃদ্ধি করে এবং পরবর্তীতে ডিএনএ ক্ষতি, লিপিড পারক্সিডেশন, প্রোটিন পরিবর্তন, এবং ক্যান্সার, কার্ডিওভাসকুলার ডিজিজ, ডায়াবেটিস এবং অন্যান্য [৫১] সহ অন্যান্য প্রভাব সৃষ্টি করতে পারে। একইভাবে, রেসভেরাট্রল C.elegans [52]-এ আয়রন-প্ররোচিত বিষাক্ততা কমিয়েছে। একটি ঐতিহ্যগত চীনা ওষুধ, Tetrastigma hemsleyanum, ROS [53] এর মাত্রা কমিয়ে অ্যাক্রিলামাইড দ্বারা উদ্ভূত বিষাক্ততা থেকে C.elegansকে রক্ষা করে। অতএব, আমরা সন্দেহ করেছি যে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতার অধিকারী EBL, অঙ্গটিকে অক্সিডেটিভ ক্ষতি থেকে রক্ষা করতে পারে, যা একটি প্রতিশ্রুতিশীল দৃষ্টিকোণ হবে।

5। উপসংহার

এই কাজে, আমরা ভিভোতে EBL এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা আরও মূল্যায়ন করতে C.elegans ব্যবহার করেছি। ফলাফলের দ্বারা শেষ পর্যন্ত দেখানো হয়েছে, EBL নিউক্লিয়াসে আরও বেশি DAF-16 ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টরকে উন্নীত করেছে এবং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম যেমন SOD এবং CAT-এর কার্যকলাপকে উন্নত করেছে। তারপরে, ROS এর অভ্যন্তরীণ স্তর এবং MDA-এর বিষয়বস্তু তীব্রভাবে হ্রাস পেয়েছে, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস পরিস্থিতিতে বেঁচে থাকার হার বাড়িয়েছে। ইতিমধ্যে, ইবিএল আইআইএস পাথওয়ের মাধ্যমে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা বাড়িয়ে C.elegans-এর জীবনকালও দীর্ঘায়িত করেছে। এছাড়া, EBL TJ1052, CF1038, এবং CB1370-এর মতো মিউট্যান্টদের আয়ুষ্কাল এবং বেঁচে থাকার হার বাড়াতে ব্যর্থ হয়েছে, যার অর্থ EBL C.elegans-এর স্বাস্থ্য উন্নত করতে ইনসুলিন সংকেত পথকে নিয়ন্ত্রণ করতে পারে। এই ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে ইবিএল ভিভোতে শক্তিশালী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতার অধিকারী এবং ইবিএল আরও অ্যান্টি-এজিং ফার্মাকোলজিক্যাল গবেষণার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল সম্ভাব্য এজেন্ট হতে পারে।

এই নিবন্ধটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট 2021, 10, 1744 থেকে নেওয়া হয়েছে। https://doi.org/10.3390/antiox10111744 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants