ফিনিক্স ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাস অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রভাব প্রদর্শন করে এবং মেলানোজেনেসিসকে কমিয়ে দেয়

হুয়ে-চুন হুয়াং1 , শ্রী-শিউয়ান ওয়াং2, সাং-চি সাই3, ওয়াং-পিং কো3 এবং সোং-মিন চ্যাং2,*

বিমূর্ত:পটভূমি: ত্বকের যত্নে ফিনিক্স ড্যাক্টিলিফেরা বীজের নির্যাসের ক্রিয়াকলাপের মোড কখনও অন্বেষণ করা হয়নি। পদ্ধতি: P. dactylifera L. বীজ অতিস্বনক নিষ্কাশন দ্বারা নিষ্কাশন করা হয়েছিল। নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্যগুলি 2,2-ডিফেনাইল-1-পিক্রিলহাইড্রাজিল (DPPH) এবং 2,2′-অ্যাজিনো-ডি-(3-ইথাইলবেনজথিয়াজোলিন সালফোনিক অ্যাসিড) (ABTS প্লাস) দ্বারা নির্ধারিত হয়েছিল assays এবং scavenging পদ্ধতি. মোট ফেনোলিক সামগ্রী, ক্ষমতা হ্রাস, আয়রন (II) আয়ন-চেলেশন এবং অন্তঃকোষীয় প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS)- স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতাও তদন্ত করা হয়েছিল। মেলানোজেনেসিসের উপর P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের প্রভাবগুলি মাশরুম টাইরোসিনেজ অ্যাকটিভিটি অ্যাস, ইন্ট্রাসেলুলার টাইরোসিনেজ অ্যাক্টিভিটি নির্ধারণ, এবং মেলানিন কন্টেন্ট দ্বারা স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত প্রোটিনের অভিব্যক্তি স্তরগুলি ওয়েস্টার্ন ব্লটিং দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ফলাফল: ফলাফল প্রকাশ করেছে যে পি.ডাক্টিলিফেরা এল।বীজের নির্যাস আপাত অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা প্রয়োগ করে এবং {{0}}.245 এবং 0.49 (mg/mL) ঘনত্বে আন্তঃকোষীয় ROS সামগ্রী উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায়। অধিকন্তু, নির্যাস মেলানোকর্টিন 1 রিসেপ্টর (MC1R), মাইক্রোফথালমিয়া-সম্পর্কিত ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর (MITF), টাইরোসিনেজ, টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিন-1 (TRP1), এবং টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিনের প্রকাশকে হ্রাস করেছে-2 ( TRP2), এবং B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিস বাধা দেয়। উপসংহার: আমাদের ফলাফলগুলি প্রকাশ করেছে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস প্রোটিন কাইনেজ A (PKA) সংকেত পথগুলিকে হ্রাস করে B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিস হ্রাস করে। অতএব, নির্যাসটি ত্বকের যত্নের পণ্যগুলিতে এক ধরণের ত্বক-সাদাকারী এজেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

মূলশব্দ: Phoenix dactylifera;টাইরোসিনেজ; মেলানিন; ROS; পিকেএ

cistanche ফার্মা বিশেষএক ধরনের ত্বক সাদা করার এজেন্ট।

1। পরিচিতি

প্রসাধনী এবং চর্মরোগ সংক্রান্ত ক্ষেত্রে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস-সম্পর্কিত ব্যাধি প্রতিরোধ বা চিকিত্সা করার জন্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে। গত কয়েক দশক ধরে, ত্বকের বার্ধক্য প্রতিরোধ বা বিলম্বিত করতে প্রসাধনী শিল্পেও অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ব্যবহার করা হয়েছে। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে ফ্রি র্যাডিকেল এবং প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি (ROS) বিভিন্ন রোগের সাথে যুক্ত, যেমন বার্ধক্য এবং বয়স-সম্পর্কিত রোগ [1]। মজার বিষয় হল, UV-বিকিরণ স্ট্রেস এবং ROS দ্বারা সৃষ্ট ত্বকের ফ্রি র‌্যাডিক্যাল ক্ষতি ত্বকের ফটোজিং প্রক্রিয়ায় গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [2,3]। অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি ফ্রি র‌্যাডিকেল এবং ROS স্ক্যাভেঞ্জিং বা অক্সিডেশন-অনুঘটক ধাতুগুলিকে চেলেট করে অক্সিডেশন প্রক্রিয়াতে হস্তক্ষেপ করে বলে জানা গেছে [4]। তাই, শরীরে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস বা অক্সিডেটিভ স্ট্রেস-প্ররোচিত ক্ষতি কমাতে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পুষ্টির পরিপূরকগুলির প্রয়োগের সংখ্যায় নাটকীয়ভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে [5,6]। যাইহোক, কিছু রাসায়নিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, যার মধ্যে রয়েছে সোডিয়াম অ্যাসকরবেট, টারট-বুটাইল হাইড্রোক্সিয়ানিসোল (বিএইচএ), সোডিয়াম এরিথরবেট এবং টারট-বুটাইল হাইড্রোক্সিটোলুইন (বিএইচটি), মানব স্বাস্থ্যের উপর কার্সিনোজেনিক প্রভাবকে উন্নীত করতে দেখা গেছে [৭]। অতএব, গত কয়েক দশক ধরে উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলির উপর গবেষণার দ্রুত বৃদ্ধি ঘটেছে। গুরুত্বপূর্ণভাবে, এটি পাওয়া গেছে যে ROS এর মাত্রা বৃদ্ধি ত্বকের পিগমেন্টেশনকে ত্বরান্বিত করতে পারে। মেলানোসাইট এবং কেরাটিনোসাইট থেকে প্রাপ্ত ROS-এর মধ্যে নাইট্রিক অক্সাইড, NO, টাইরোসিনেজ এবং টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিন 1 (TRP1) [8,9] এর প্রোটিন এক্সপ্রেশনের মাত্রা বাড়িয়ে মেলানিন সংশ্লেষণকে উদ্দীপিত করে। মেলানিন উৎপাদনের উপর ROS-এর প্রভাব UVB-প্ররোচিত -মেলানোসাইট-স্টিমুলেটিং হরমোন ( -MSH) [10] এর ক্রিয়া বাতিল করতে বিভিন্ন অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, যেমন N-acetyl cysteine ​​ব্যবহার করে অধ্যয়ন করা হয়েছে।

মেলানিন মেলানোসাইট দ্বারা উত্পাদিত এবং নিঃসৃত হয় যা ত্বকের এপিডার্মিসের বেসাল স্তরে বিতরণ করা হয় [১১]। মানুষের মেলানোজেনেসিস পথের প্রথম দুটি ধাপ হল এল-টাইরোসিনের হাইড্রক্সিলেশন থেকে 3-4-ডাইহাইড্রক্সি ফেনিল্যালানিন (এল-ডিওপিএ) এবং এল-ডোপা থেকে ও-ডোপাকুইনোনের অক্সিডেশন। টাইরোসিনেজ (EC 1.14.18.1) হল একটি হার-সীমিত এনজাইম যা মেলানোজেনেসিসের সময় প্রথম দুটি প্রতিক্রিয়া উভয়কেই অনুঘটক করে [12]। মেলানিন সূর্যালোকের অতিবেগুনী (UV) ক্ষতির বিরুদ্ধে ত্বককে রক্ষা করতে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে এবং চুল, ত্বক এবং চোখ রঙ করার জন্যও দায়ী। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে বিভিন্ন চর্মরোগ সংক্রান্ত ব্যাধি, যেমন বয়সের দাগ, মেলাজমা, পোস্ট-ইনফ্ল্যামেটরি মেলানোডার্মা, ফ্রেকলস এবং অ্যাক্টিনিক ক্ষতির সাইটগুলি, এপিডার্মাল মেলানিনের অত্যধিক স্তরের জমা হওয়ার ফলে [১৩]। মেলানিন সংশ্লেষণের ইনহিবিটারগুলি ত্বকের হাইপারপিগমেন্টযুক্ত ব্যাধিগুলির চিকিত্সা বা প্রতিরোধের জন্য ত্বকের যত্ন পণ্যগুলিতে ক্রমবর্ধমানভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে [14,15]। উপরন্তু, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, যেমন আরবুটিন বা কোজিক অ্যাসিড [১৬], হাইপারপিগমেন্টেশনের চিকিৎসায় ব্যবহার করা হয়েছে [১৭]। সম্প্রতি, ত্বককে সাদা করার প্রসাধনী প্রসাধনী পণ্যগুলির একটি বড় অনুপাতের জন্য দায়ী। শুধুমাত্র কালো ত্বকের মহিলারাই নয়, যারা অতিবেগুনী রশ্মি, গর্ভাবস্থা বা বাড়তি বয়সের কারণে তাদের ত্বকের কালো দাগগুলি মোকাবেলা করার চেষ্টা করছেন তারাও এই ত্বককে সাদা করার পণ্যগুলি ব্যাপকভাবে ব্যবহার করেন।

মেলানোজেনেসিস একাধিক কারণ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। উদাহরণস্বরূপ, টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিন-1 (TRP1), মাইক্রোফথালমিয়া-সম্পর্কিত ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর (MITF), এবং টাইরোসিনেজ-সম্পর্কিত প্রোটিন-2 (TRP2) মেলানিনের উৎপাদন নিয়ন্ত্রণ করার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল [18-20 ]। মেলানোকোর্টিন 1 রিসেপ্টর (MC1R) এছাড়াও -এমএসএইচ-প্ররোচিত মেলানিন সংশ্লেষণে বিশিষ্টভাবে বৈশিষ্ট্যযুক্ত। মেলানিন উৎপাদনে জড়িত বেশ কয়েকটি সংকেত পথ রয়েছে। মেলানিন উৎপাদন নিয়ন্ত্রণকারী বিভিন্ন সংকেত পথের মধ্যে, সাইক্লিক এএমপি (সিএএমপি)-মধ্যস্থ প্রোটিন কিনেস এ (পিকেএ) অ্যাক্টিভেশন মেলানোজেনেসিস নিয়ন্ত্রণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে [২২]। সিএএম-পিকেএ সিগন্যালিং পাথওয়েতে, সিএএমপি পিকেএ [২৩] এর সক্রিয়করণকে প্ররোচিত করে, যা সিএএমপি প্রতিক্রিয়া উপাদান-বাইন্ডিং প্রোটিন (সিআরইবি) এর ফসফোরিলেশন দ্বারা অনুসরণ করে। CREB হল একটি অন্তঃকোষীয় ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর যা মাইক্রোফথালমিয়া ফ্যাক্টর (MITF) জিনের প্রকাশকে উদ্দীপিত করে, যা মেলানোজেনেসিসে গুরুত্বপূর্ণ। এমআইটিএফ হল একটি ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর যা মেলানোজেনিক জিন টাইরোসিনেজ, টিআরপি 1 এবং টিআরপি 2 এর প্রবর্তক অঞ্চলের সাথে আবদ্ধ হয়, তাদের অভিব্যক্তি [24,25] আপরেগুলেট করে। পরবর্তীতে, অন্তঃকোষীয় মেলানিনের পরিমাণ বৃদ্ধি পায় [26]। এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে -এমএসএইচ সিএএমপি মাত্রা বাড়ায় এবং সাধারণত সিআরইবি-এর ফসফোরিলেশন সক্রিয় করতে এবং তারপর এমআইটিএফ প্রোটিন মাত্রা বাড়াতে প্রয়োগ করা হয় [27]।

MITF এক্সপ্রেশন বিভিন্ন সিগন্যালিং পথ দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। সি-জুন এন-টার্মিনাল কিনেস (জেএনকে) এবং পি৩৮ মাইটোজেন-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস (এমএপিকে) এমআইটিএফ এক্সপ্রেশনের সক্রিয়করণের সাথে জড়িত এবং এর ফলে টাইরোসিনেজ এক্সপ্রেশন বৃদ্ধি পায়। এক্সট্রাসেলুলার রেসপন্সিভ কিনেস (ইআরকে) অ্যাক্টিভেশন সিগন্যালগুলিও সিআরইবি ফসফোরিলেশন এবং পরবর্তী এমআইটিএফ এক্সপ্রেশন বাড়ায়, যা মেলানিন সংশ্লেষণকে মডিউল করে [২৮,২৯]। সুতরাং, বেশ কয়েকটি ত্বক-সাদাকারী এজেন্টরা p38MAPK-মধ্যস্থতামূলক MITF ফসফোরিলেশনের ডাউনরেগুলেশনের মাধ্যমে টাইরোসিনেজ, TRP1 এবং TRP2 এর প্রোটিন এক্সপ্রেশনের মাত্রা হ্রাস করে MITF ট্রান্সক্রিপশনাল কার্যকলাপকে বাধা দেয় বলে জানা গেছে। এছাড়াও, ERK পাথওয়েকে মেলানোজেনেসিস [30,31] এর সময় MITF নিয়ন্ত্রণে জড়িত বলে বর্ণনা করা হয়েছে। ERK ফসফরিলেটস MITF সক্রিয়করণ, MITF এর অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে, যার ফলে মেলানিন সামগ্রী [32,33] হ্রাস পায়।

অক্সিডেটিভ স্ট্রেস ROS অতিরিক্ত উত্পাদন বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রতিরক্ষা হ্রাসের ফলাফল হতে পারে [1]। প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্টের অনুসন্ধান এবং প্রয়োগ সারা বিশ্বে অসংখ্য গবেষণা দলের ফোকাসে থাকে। সম্প্রতি, বিভিন্ন প্রাকৃতিক উত্স থেকে প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং ফেনোলিক যৌগগুলির মতো ফাইটোকেমিক্যালগুলির গবেষণা এবং বিকাশে আগ্রহ বাড়ছে, যা নিউট্রাসিউটিক্যালস, অ্যান্টি-এজিং প্রসাধনী এবং ঔষধি পণ্য হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে [৩৪]। Phoenix dactylifera L. মধ্যপ্রাচ্য এবং উত্তর আফ্রিকায় উৎপাদিত প্রধান ফল ফসলের মধ্যে একটি [৩৫,৩৬]। পূর্ববর্তী গবেষণায় রিপোর্ট করা হয়েছে যে পি. ড্যাকটিলিফেরা এল. ফলগুলি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, ফ্রি র‌্যাডিক্যাল-স্ক্যাভেঞ্জিং, অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি কার্যকলাপ প্রদর্শন করে [37,38]। P. dactylifera L. এর কার্যকরী প্রভাব শুধুমাত্র ফলের মধ্যেই সীমাবদ্ধ নয় বরং তাদের বীজের মধ্যেও রয়েছে, যা ফলের এক ধরনের উপজাত [39,40]। এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্যের কারণে, P. dactylifera L. বীজের নির্যাসগুলি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পদার্থের উত্স হিসাবে কাজ করতে পারে যা অক্সিডেটিভ স্ট্রেস [41-43] এর বিরুদ্ধে কাজ করে। যাইহোক, কসমেসিউটিক্যাল পণ্যের বিকাশের জন্য P. dactylifera L. বীজের প্রয়োগের উপর কিছু গবেষণা করা হয়েছে। এই বীজগুলি সাধারণত বর্জ্য হিসাবে ফেলে দেওয়া হয়, তবে একটি কার্যকরী প্রসাধনী উপাদান হিসাবে তাদের তাত্পর্য এখানে হাইলাইট করা হয়েছে। আজ অবধি, ত্বকের যত্নের প্রসাধনীর ক্ষেত্রে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের কার্যপ্রণালী বা মেলানিন উৎপাদনে বীজের নির্যাসের প্রভাব সম্পর্কে কোন রিপোর্ট পাওয়া যায়নি। বর্তমান অধ্যয়নের ফোকাস ছিল প্রসাধনী শিল্পের জন্য মেলানোজেনেসিস ইনহিবিটর হিসাবে P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের সম্ভাব্যতা নির্ধারণ করা।

মেলানোজেনেসিসের উপর P. dactylifera L. বীজের নির্যাস এর নিরোধক প্রভাবের অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াগুলি এখনও তদন্ত করা হয়নি। বর্তমান অধ্যয়নের লক্ষ্য ছিল এমআইটিএফ ট্রান্সক্রিপশন নিয়ন্ত্রক এবং এমএপিকে এবং পিকেএ সংকেত পথের নিয়ন্ত্রকদের ফসফোরিলেশন পরীক্ষা করে মেলানোজেনেসিসে পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য এবং ক্রিয়াকলাপের সম্ভাব্য প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করা।

তাজা cistanche

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। রাসায়নিক এবং বিকারক

গবেষণায় ব্যবহৃত রাসায়নিক বিকারকগুলি সিগমা-অলড্রিচ কেমিক্যাল কোং (সেন্ট লুইস, এমএস, ইউএসএ) থেকে কেনা হয়েছিল। অ্যান্টিবডিগুলি সান্তা ক্রুজ বায়োটেক (সান্তা ক্রুজ, সিএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে এবং ইসিএল বিকারকটি মিলিপুর (বিলেরিকা, এমএ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) থেকে ছিল।

2.2। P. dactylifera বীজ নির্যাস প্রস্তুত ও নিষ্কাশন

শুকনো পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. ফল 2019 সালে সৌদি আরবের মদিনা সিটিতে অবস্থিত ঐতিহ্যবাহী দোকান থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। P. dactylifera L. বীজ সম্পূর্ণরূপে ধুয়ে, সূর্যালোকের সংস্পর্শে, এক দিনের জন্য বাতাসে শুকানো হয়, এবং তারপর একটি চুলায় 2 ঘন্টার জন্য 80 ◦C তাপমাত্রায় শুকানো হয়। ডিহাইড্রেটেড বীজগুলিকে একটি প্রতিশ্রুতিবদ্ধ মিল (Retsch Ultra Centrifugal Mill and Sieving Machine, Type ZM1, Haan, Germany) দিয়ে একটি সূক্ষ্ম পাউডার (#50 জাল) তৈরি করা হয়েছিল। পাউডারটি একটি সিল করা কাঁচের বোতলে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত 25 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। পাল্ভারাইজড ডেসিকেটেড পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের গুঁড়া (2 গ্রাম) একটি নিষ্কাশন বিকারে স্থাপন করা হয়েছিল যাতে 10 মিলি পাতিত জল থাকে। পরবর্তী, অতিস্বনক নিষ্কাশন ULTRAsonikTM 57H মডেলের (250 W, C, এবং A Sales Industrial Supplies, Yucaipa, CA, USA) দিয়ে করা হয়েছিল। কাজের ফ্রিকোয়েন্সি 30 মিনিটের জন্য 45 kHz ছিল। নিষ্কাশনের পরে, নমুনাগুলিকে এপেনডর্ফ সেন্ট্রিফিউজ 5810 R (হামবুর্গ, জার্মানি) দিয়ে 25 ◦C তাপমাত্রায় 50 মিনিটের জন্য 4500 rpm-এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টগুলি সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং একটি নাইলন ফিল্টার (ছিদ্র আকার: 0.45 μm) দিয়ে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং ফিল্টারটি 9.8 mg/mL এ ঘনীভূত হয়েছিল।

2.3। আল্ট্রা-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (UPLC) P. dactylifera বীজ নির্যাস এবং ফেরুলিক অ্যাসিড বিশ্লেষণ

P. dactylifera বীজের নির্যাস একটি ফটোডিওড অ্যারে ডিটেক্টর (Waters, Milford, MA, USA) সহ একটি ACQUITY UPLC H ক্লাস ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। কলামটি ছিল একটি ACQUITY UPLC BEH C18 কলাম, 130 Å, 1.7 μm, 2.1 মিমি × 100 মিমি। মোবাইল ফেজ A ছিল 0.5 শতাংশ অ্যাসিটিক অ্যাসিড, এবং মোবাইল ফেজ B ছিল অ্যাসিটোনিট্রাইল। সময় পয়েন্ট 0 এবং 5 মিনিটের জন্য, A/B এর শতাংশ অনুপাত ছিল 95/5; 20 মিনিটের জন্য, A/B এর শতাংশ অনুপাত ছিল 5/95; সময় পয়েন্ট 21 এবং 25 মিনিটের জন্য, A/B এর শতাংশ অনুপাত ছিল 95/5। ফেরুলিক অ্যাসিড (1 পিপিএম) ইতিবাচক মান হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল।

2.4। DPPH স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাকটিভিটি অ্যাস

এই পরীক্ষায়, ভিটামিন C ({{0}}.5 mg/mL) এবং BHA (0.1 mg/mL) অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট মান হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। P. dactylifera L. বীজের নির্যাস বিভিন্ন ঘনত্বে (0.0049, 0.0245, এবং 0.049 mg/mL) 2.9 mL DPPH (60 μM) দ্রবণে যোগ করা হয়েছিল। বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট উপাদানগুলি DPPH-এ হাইড্রোজেন দান করতে পারে এবং DPPH-কে হ্রাসকৃত আকারে রূপান্তর করতে পারে। একটি UV-Vis স্পেকট্রোফোটোমিটার ব্যবহার করে 517 এনএম-এ শোষণের ফলস্বরূপ হ্রাস রেকর্ড করা হয়েছিল [44]।

2.5। ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং ক্যাপাসিটি অ্যাস

P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা ভিটামিন C ({{0}.9 mg/mL) এবং BHA ({{10}} এর সাথে তুলনা করা হয়েছিল। 9 mg/mL)। এই পরীক্ষার জন্য, ABTS প্লাস ব্যবহার করা হয়েছিল। পটাসিয়াম পারসালফেট (2.45 মিমি) এর সাথে ABTS (7 mM) এর দ্রবণকে বিক্রিয়া করে প্রথমে Cation তৈরি করা হয়েছিল, এবং মিশ্রণটিকে ব্যবহারের আগে কমপক্ষে 6 ঘন্টা অন্ধকারে দাঁড়াতে দেওয়া হয়েছিল। বীজের নির্যাসের বিভিন্ন ঘনত্ব (0.0098, 0.049, এবং 0.098 mg/mL) ABTS প্লাস দ্রবণ [45] এর সাথে 1 মিলি মিশ্রিত করার 10 মিনিট পরে 734 nm-এ শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.6। মোট ফেনোলিক বিষয়বস্তু নির্ধারণ

ফোলিন-সিওকালটিউ রিএজেন্ট ব্যবহার করে মোট ফেনোলিক সামগ্রী নির্ধারণ করা হয়েছিল [46], এবং গ্যালিক অ্যাসিড (2 ug/mL) একটি ইতিবাচক মান হিসাবে নিযুক্ত করা হয়েছিল। P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের বিভিন্ন ঘনত্ব (0৷{4}}196, 0৷{10}}98, এবং 0.196 mg/mL) 80 শতাংশ মিথানলে প্রস্তুত করা হয়েছিল; 100 μL নির্যাস একটি টেস্ট টিউবে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল এবং 0.5 mL Folin–Ciocalteu রিএজেন্ট (পূর্বে ডিওনাইজড জল দিয়ে মিশ্রিত 10-ভাঁজ) যোগ করা হয়েছিল এবং মিশ্রিত করা হয়েছিল। মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় দাঁড়াতে দেওয়া হয়েছিল; 1.5 এমএল 20 শতাংশ সোডিয়াম কার্বনেট যোগ করা হয়েছিল। ঘরের তাপমাত্রায় 2 ঘন্টা দাঁড়িয়ে থাকার পরে, একটি UV-Vis স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করে শোষণটি 760 nm এ পড়া হয়েছিল।

2.7। ক্ষমতা হ্রাস নির্ধারণ

ভিটামিন সি ({{0}}৷{7}}0৮ মিলিগ্রাম/মিলি) বা বিএইচএ (৪.৮ মিলিগ্রাম/মিলি) এই পরীক্ষায় ইতিবাচক মান হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল৷ ওয়াইজু [47] দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে বীজ নির্যাসের হ্রাস ক্ষমতা নির্ধারণ করা হয়েছিল। P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের বিভিন্ন ঘনত্ব (0.0073, 0.036, 0.073 mg/mL) ফসফেট বাফারের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল (2.5 mL, 0.2 M, pH 6.6) ) এবং পটাসিয়াম ফেরিসিয়ানাইড [K3Fe (CN)6] (2.5 মিলি, 1 শতাংশ w/v)। মিশ্রণটি 50 ◦C তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করা হয়েছিল। ট্রাইক্লোরোএসেটিক অ্যাসিড (2.5 মিলি, 10 শতাংশ w/v) মিশ্রণে যোগ করা হয়েছিল, যা 10 মিনিটের জন্য 1000×g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। দ্রবণের উপরের স্তর (2.5 mL) পাতিত জল (2.5 mL) এবং FeCl3 (0.5 mL, 0.1 শতাংশ w/v) এর সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 700 nm-এ শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.8। আয়রন পরিমাপ (II) আয়ন চেলেটিং ক্ষমতা

P. dactylifera L. বীজের নির্যাস, EDTA (0৷{4}}2, 0৷{8}}4, এবং {এর Fe2 প্লাস -আয়ন চেলেটিং ক্ষমতা পরিমাপের জন্য {10}}৷{15}}8 mg/mL) একটি ইতিবাচক মান হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল৷ বীজের নির্যাসের বিভিন্ন ঘনত্ব (0.0196, 0.098, এবং 0.196 mg/mL) FeCl2 দ্রবণে (0.05 mL, 1 mM) যোগ করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়ার মিশ্রণটি ফেরোজাইন (0.1 মিলি, 1 মিমি) দিয়ে বিক্রিয়া করা হয়েছিল, তারপর মিথানল দিয়ে মিশ্রণটি 1 মিলিতে পরিমাপ করা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য 25 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের শোষণ 562 এনএম [48] এ পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.9। কোষের কার্যকারিতা পরীক্ষা

MTT পদ্ধতি [49] ব্যবহার করে কোষের কার্যকারিতা পরীক্ষা করা হয়েছিল। কোষগুলি 37 ◦C তাপমাত্রায় 24 ঘন্টার জন্য P. dactylifera L. বীজের নির্যাস (0৷{3}}49, 0.245, এবং 0.49 mg/mL) এর বিভিন্ন ঘনত্বের সংস্পর্শে এসেছিল এবং একটি আর্দ্র ইনকিউবেটরে 5 শতাংশ CO2 এবং MTT দ্রবণ কূপে যোগ করা হয়েছিল। এমটিটি-এর অদ্রবণীয় ডেরিভেটিভ ইথানল-ডিএমএসও (1:1 মিশ্রণ দ্রবণ) দিয়ে দ্রবণীয় করা হয়েছিল। 570 এনএম এ কূপগুলির শোষণ একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। B16F10 কোষ (BCRC60031) বায়োরিসোর্স কালেকশন অ্যান্ড রিসার্চ সেন্টার (BCRC), সিনচু শহর, তাইওয়ান থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। কোষগুলিকে DMEM (Hyclone, Logan, UT, USA) 10 শতাংশ ভ্রূণের বোভাইন সিরাম এবং 1 শতাংশ অ্যান্টিবায়োটিক দিয়ে পরিপূরক রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল। এছাড়াও, B16F10 কোষের কার্যক্ষমতার উপর P. dactylifera L. বীজের প্রভাবও ট্রিপ্যান ব্লু এক্সক্লুশন অ্যাস পদ্ধতি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। বীজের নির্যাস দিয়ে চিকিত্সার পরে, কোষগুলিকে ট্রিপসিনাইজ করা হয়েছিল এবং পেলেট সংগ্রহের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সেল পেলেটটি 300 μL ডিএমইএম সেল কালচার মিডিয়াতে পুনরায় স্থগিত করা হয়েছিল। সেল সাসপেনশনের একটি ছোট অ্যালিকোট (20 μL) 10 μL ট্রিপ্যান ব্লু (পিবিএস-এ 4 শতাংশ) এর সাথে আলতোভাবে মিশ্রিত হয়েছিল। মাইক্রোস্কোপের নীচে একটি হিমোসাইটোমিটার ব্যবহার করে কোষের সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল (অযোগ্য কোষগুলি ছিল নীল এবং কার্যকর কোষগুলি দাগহীন)।

2.10। মাশরুম টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ পরিমাপ

মাশরুম টাইরোসিনেজ দ্রবণ (10 μL, 200 ইউনিট) একটি 96-ওয়েল মাইক্রোপ্লেটে যোগ করা হয়েছিল। বিক্রিয়া মিশ্রণে ফসফেট-বাফার স্যালাইন (PBS) (50 mM, pH 6.8), এবং P. dactylifera L. বীজের নির্যাস (0.049, 0.245) এ দ্রবীভূত 5 মিমি এল-ডিওপিএ রয়েছে , এবং 0.49 mg/mL), কোজিক অ্যাসিড (200 mM; 0.03 mg/mL), অথবা arbutin (2 mM; 0.54 mg/mL)। অ্যাস মিশ্রণটি 37 ◦C তাপমাত্রায় 30 মিনিটের জন্য incubated ছিল এবং উত্পাদিত ডোপাক্রোমের শোষণ 490 nm এ পরিমাপ করা হয়েছিল। মাশরুম টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের পরিমাপ পূর্বে বর্ণিত হিসাবে পরিচালিত হয়েছিল [50]।

2.11। মেলানিন বিষয়বস্তু নির্ধারণ

B16F10 কোষগুলিকে -MSH (100 nM) দিয়ে 24 ঘন্টার জন্য চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং তারপর P. dactylifera L. বীজের নির্যাস (0.0245–0.147 mg/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। বা আরবুটিন (0.54 mg/mL) অতিরিক্ত 24 ঘন্টার জন্য। চিকিত্সার পরে, কোষের বৃক্ষগুলি 60 মিনিটের জন্য 60 ◦C তাপমাত্রায় NaOH দ্রবণে (1 N) দ্রবীভূত করা হয়েছিল। মেলানিন সামগ্রী 405 এনএম এ সনাক্ত করা হয়েছিল, যেমনটি পূর্বে সুবোই [51] দ্বারা বর্ণিত হয়েছিল।

সিস্টানচে মেলানিন উৎপাদনে বাধা দেয়।

2.12। অন্তঃকোষীয় টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ পরিমাপ

আন্তঃকোষীয় টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ পূর্বে বর্ণিত হিসাবে নির্ধারিত হয়েছিল [52]। কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য -MSH (100 nM) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং তারপরে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস (0৷{13}}245–0.147 মিগ্রা /mL) বা আরবুটিন (0.54 mg/mL) 24 ঘন্টার জন্য। চিকিত্সার পরে, কোষের নির্যাসগুলি (100 μL) সদ্য প্রস্তুত এল-ডোপা দ্রবণে (পিবিএস-এ 0.1 শতাংশ) মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 37 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল এবং 490 এনএম-এ শোষণ পরিমাপ করা হয়েছিল।

2.13। ওয়েস্টার্ন ব্লটিং পরীক্ষা

কোষগুলিকে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল ({{0}}৷{4}}245, 0৷{8}}368, 0৷ {14}}49, এবং 0.147 mg/mL) বা আরবুটিন (0.54 mg/mL) এবং তারপর ননডায়েট P—40 (1 শতাংশ), সোডিয়াম ডিঅক্সিকোলেট (0.5 শতাংশ), সোডিয়াম ডোডেসিল ধারণকারী পিবিএস-এ লাইজ করা হয় সালফেট (SDS, 0.1 শতাংশ), এপ্রোটিনিন (5 ug/mL), ফেনাইলমেথাইলসালফোনাইল ফ্লোরাইড (100 ug/mL), পেপস্ট্যাটিন A (1 ug/mL), এবং EDTA (1 mM) 4 ◦C তাপমাত্রায় 20 মিনিটের জন্য। একটি মাইক্রো বিসিএ কিট (থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, ওয়ালথাম, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে মোট লাইসেটগুলি পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রোটিন (30 ug) SDS-polyacrylamide জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা সমাধান করা হয়েছিল এবং ইলেক্ট্রোফোরেটিক্যালি একটি পলিভিনাইলাইডিন ফ্লোরাইড ঝিল্লিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল। পিবিএসটি (0.05 শতাংশ টুইন-20 সহ পিবিএস) 5 শতাংশ ফ্যাট-মুক্ত দুধে ঝিল্লি ব্লক করা হয়েছিল এবং পিবিএসটি-তে নিম্নলিখিত প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি মিশ্রিত করে রাতারাতি 4 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল: MITF Ab (1:1000), TRP1 Ab (1:6000), TRP2 Ab (1:1000), MC1R Ab (1:500), GAPDH Ab (1:1500), tyrosinase Ab (1:2000), p-p38 Ab (1:500), p38 Ab (1:500), p-JNK Ab (1:500), JNK Ab (1:500), p-ERK Ab (1:500), ERK Ab (1:500), p-CERB Ab (1: 500), এবং CERB Ab (1:200), সবগুলোই সান্তা ক্রুজ বায়োটেক (ডালাস, TX, USA) থেকে। আবদ্ধ অ্যান্টিবডি হর্সরাডিশ পারক্সিডেস-কনজুগেটেড সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডি (আমেরশাম কর্পোরেশন) দ্বারা সনাক্ত করা হয়েছিল এবং নির্মাতার নির্দেশ অনুসারে ইসিএল সনাক্তকরণ সিস্টেম (আমেরশাম) দ্বারা অনুসরণ করা হয়েছিল।

2.14। পিকেএ ইনহিবিটার অ্যাস

কোষগুলিকে 24 ঘন্টার জন্য -MSH (100 nM) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল এবং তারপরে PKA নিয়ন্ত্রক H89 এর 10 μM এর 1 ঘন্টা যোগ করা হয়েছিল। চিকিত্সার পরে, P. dactylifera L. বীজের নির্যাস (0.147 mg/mL) এবং H89 কোষে যোগ করা হয় এবং অতিরিক্ত 23 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়। মেলানিন সামগ্রী উপরে বর্ণিত হিসাবে নির্ধারিত হয়েছিল।

2.15। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ Tukey-এর পোস্ট-হক পরীক্ষা ব্যবহার করে করা হয়েছিল, যা পরিমাপ করা ডেটার তুলনা করার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল, স্ট্যাটিস্টিক্যাল প্যাকেজ ফর দ্য সোশ্যাল সায়েন্সেস (SPSS) সংস্করণ 22 ব্যবহার করে৷{1}} পরিসংখ্যানগত সফ্টওয়্যার (SPSS Inc., Chicago, IL, আমেরিকা). * p < 0৷{4}}5="" তাৎপর্যপূর্ণ="" বলে="" বিবেচিত="" হয়েছিল,="" **="" p="">< 0.01,="" ***="" p=""><>

3। ফলাফল

3.1। P. dactylifera L. বীজ নির্যাস এর UPLC বিশ্লেষণ

UPLC বিশ্লেষণের ফলাফল চিত্র 1A, B-তে দেখানো হয়েছে। চিত্র 1A 330 nm এ P. dactylifera L. বীজের নির্যাস এবং ফেরুলিক অ্যাসিডের ওভারল্যাপড শিখর চিত্রিত করেছে। চিত্র 1B P. dactylifera L. বীজের নির্যাস এবং ফেরুলিক অ্যাসিডের জন্য 220 এবং 500 nm এর মধ্যে অনুরূপ স্ক্যান স্পেকট্রা দেখায়।

3.2। P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্য

ভিট্রোতে P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাবনার উপস্থিতি প্রকাশ করে। ডিপিপিএইচ পরীক্ষায়, ভিটামিন সি ({{0}}।{5}}5 মিলিমিটার; 0.53 মিলিগ্রাম/মিলি) এবং টার্ট-বাটিল হাইড্রোক্সিয়ানিসোল (বিএইচএ) (0 .1 mg/mL) ইতিবাচক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট মান হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। নির্যাসের DPPH স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা ছিল 49.97 ± 2.9 শতাংশ, 81.36 ± 0.56 শতাংশ, এবং 78.53 ± 3.83 শতাংশ নিষ্কাশনের ঘনত্ব 0৷{27}}{{ 31}} যথাক্রমে 49, 0.0245 এবং 0.049 (mg/mL), তুলনামূলকভাবে, ভিটামিন C এবং BHA এর স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা ছিল যথাক্রমে 90.12 ± 0.31 শতাংশ এবং 90.44 ± 0.49 শতাংশ (চিত্র 2A)।

এই ABTS র্যাডিকাল ক্যাটেশন নীল রঙের এবং বেশিরভাগ অ্যান্টিঅক্সিডেন্টের প্রতি প্রতিক্রিয়াশীল। এই প্রতিক্রিয়ার সময়, নীল ABTS র্যাডিকাল ক্যাটান তার বর্ণহীন নিরপেক্ষ আকারে রূপান্তরিত হয়। প্রতিক্রিয়া স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে নিরীক্ষণ করা হয়েছিল। নির্যাসের ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা ছিল 5.69 ± 1.36 শতাংশ, 18.81 ± 0.68 শতাংশ, এবং 0 এর ঘনত্বে নিয়ন্ত্রণের 66.82 ± 8.51 শতাংশ৷{14}}{{16} }}98, 0৷{20}49, এবং 0.098 মিগ্রা/মিলি, যথাক্রমে৷ বিপরীতে, ভিটামিন C (0.9 mg/mL) এবং BHA (0.9 mg/mL) এর ABTS প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা যথাক্রমে 95.52 ± 0.12 শতাংশ এবং 40.3 ± 0.83 শতাংশ। চিত্র 2B-এর ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে বীজের নির্যাসটি উল্লেখযোগ্য পরিমাণে ABTS প্লাস র্যাডিকেল মেরে ফেলে।

P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের মোট ফেনোলিক বিষয়বস্তু নির্ধারণ করতে, গ্যালিক অ্যাসিড (2 ug/mL) একটি ইতিবাচক মান হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল। চিত্র 2C-এর ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে 0৷{4}}১৯৬, 0৷{20}}৯৮, এবং 0-এ মোট ফেনোলিক সামগ্রী৷ 196 (mg/mL) নির্যাস ছিল যথাক্রমে 33.43 ± 2.33 শতাংশ, 117.22 ± 7.81 শতাংশ, এবং 195.4 ± 10.91 শতাংশ। বীজের নির্যাসের উপরোক্ত ঘনত্বের গ্যালিক অ্যাসিড সমতুল্য (GAE) ছিল যথাক্রমে 0।

3.3। মেলানোজেনেসিসের উপর পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজ নির্যাসের প্রতিরোধক প্রভাব

চিত্র 4A তে দেখানো ফলাফলগুলি দেখায় যে P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের 0.049 mg/mLমাশরুম টাইরোসিনেজ ক্রিয়াকলাপে কোনও বাধা প্রভাব ফেলেনি। অন্যদিকে, 0.245 এবং 0.49 mg/mL এর জন্য এনজাইম প্রতিরোধের শতাংশ ছিল 8.34 ± 2.67 শতাংশ এবং 33 ± 2.36 শতাংশ নিয়ন্ত্রণP. dactylifera L. বীজ নির্যাস চিকিত্সা, যথাক্রমে. এছাড়াও, কোজিক অ্যাসিড (200 μM; 0৷03 mg/mL) এবং arbutin (2 mM; 0.54 mg/mL) এর টাইরোসিনেজ প্রতিরোধের শতাংশ ) ছিল যথাক্রমে 56.26 ± 5.06 শতাংশ এবং 64.56 ± 2.88 শতাংশ নিয়ন্ত্রণ (চিত্র 4A)। এইভাবে, P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের উচ্চতর ঘনত্ব (0.245 এবং 0.49 mg/mL) মাশরুম টাইরোসিনেজের প্রতিরোধমূলক স্তরের প্রতিনিধিত্ব করতে পারে।

চিত্র 4B-তে, ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে শুধুমাত্র 0.147 mg/mL P. dactylifera L. বীজের নির্যাস B16F10 মেলানোমা কোষে মেলানিনের উপাদান উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে। চিকিত্সার পরে, B16F10 কোষে মেলানিনের পরিমাণ ছিল 80.66 ± 5.43 শতাংশ নিয়ন্ত্রণের। পজিটিভ স্ট্যান্ডার্ডের জন্য, আরবুটিন (0.54 mg/mL), অবশিষ্ট অন্তঃকোষীয় মেলানিনের পরিমাণ ছিল নিয়ন্ত্রণের 61.19 ± 8.17 শতাংশ। ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের 0.147 mg/mL আরবুটিনের তুলনায় কম প্রভাব দেখায়। অবশিষ্ট অন্তঃকোষীয় টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের মানগুলি যথাক্রমে P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের 0.098 এবং 0.147 mg/mL এর জন্য 85.1 ± 8.1 শতাংশ এবং 73.7 ± 11.9 শতাংশ। কোষগুলিকে আরবুটিন (চিত্র 4C) দিয়ে চিকিত্সা করার পরে অবশিষ্ট অন্তঃকোষীয় টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ ছিল 64.3 ± 14.9 শতাংশ নিয়ন্ত্রণ। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের উচ্চতর ঘনত্ব এখনও আরবুটিনের তুলনায় B16F10 কোষে -MSH-প্ররোচিত টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের উপর একটি ছোট প্রতিরোধমূলক প্রভাব প্রদর্শন করে।

3.4। P. dactylifera L. বীজের নির্যাস মেলানিনোজেনেসিসে জড়িত প্রোটিনের এক্সপ্রেশন স্তরকে বাধা দেয়

B16F10 কোষে (চিত্র 5A) মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত প্রোটিনের প্রকাশের মাত্রা পরীক্ষা করার জন্য ওয়েস্টার্ন ব্লট ব্যবহার করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের বিভিন্ন ঘনত্বের সাথে চিকিত্সার ফলে MC1R, MITF, টাইরোসিনেজ, TRP1 এবং TRP2 এর মাত্রা কমে যায়। প্রোটিন এক্সপ্রেশনের উপর নির্যাসের প্রতিষেধক প্রভাবগুলি {{10}}.147 mg/mL এর ঘনত্বে স্পষ্ট ছিল। MC1R-এর জন্য প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরে ভাঁজ পরিবর্তন ছিল 0.74 ± 0৷{18}}2; MITF এর জন্য এটি ছিল {{20}}.51 ± 0৷{28}}3; টাইরোসিনেজের জন্য এটি ছিল 0.54 ± 0.26; টিআরপি-1 এর জন্য এটি ছিল 0.57 ± 0.15; এবং TRP-2 এর জন্য এটি ছিল 0.49 ± 0.1 (চিত্র 5B)।

মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত সিগন্যালিং প্রোটিনগুলির অভিব্যক্তি স্তরগুলি পশ্চিমী ব্লটগুলি (চিত্র 5C) ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে P. dactylifera L. বীজ নির্যাস চিকিত্সার 0.147 mg/mL স্পষ্টতই p-p38, p-JNK, p-ERK, এবং p-CREB এর মাত্রা হ্রাস করেছে। p-p38 এর জন্য প্রোটিন এক্সপ্রেশন স্তরের ভাঁজ পরিবর্তন ছিল 0.88 ± 0.15; p-JNK এর জন্য এটি ছিল 0.68 ± 0.39; p-ERK এর জন্য এটি ছিল 0.65 ± 0.23; এবং p-CREB এর জন্য এটি ছিল 0.44 ± 0.07 (চিত্র 5D)।

3.5। P. dactylifera L. বীজের নির্যাস টাইরোসিনেজ, TRP1, TRP2, বা MITF জিন এক্সপ্রেশনকে প্রভাবিত করে না

মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত প্রোটিনের জিনের প্রকাশের মাত্রা যেমন টাইরোসিনেজ, TRP1, TRP2 এবং MITF পরিমাণগত রিয়েল-টাইম পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া (RT-PCR) দ্বারা পরীক্ষা করা হয়েছিল। 0 এর জন্য টাইরোসিনেজ/GAPDH এর আপেক্ষিক স্বাভাবিক প্রকাশের মাত্রা।{7}}৩৬৭, 0। ডাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাস চিকিত্সা ছিল যথাক্রমে 3.51 ± 0.52, 2.38 ± 0.24, এবং 1.64 ± 0.55। TRP-1/GAPDH-এর জন্য, 0-এর আপেক্ষিক স্বাভাবিক প্রকাশের মাত্রা৷{32}}367, 0৷{38}}49, এবং {{4{{43} }}}.147 mg/mL এর P. dactylifera L. বীজ নির্যাস চিকিত্সা ছিল 1.64 ± 0.2, 1.15 ± 0৷{51}}2, এবং 0৷ ৮৯ ± 0৷{57}}৭, যথাক্রমে৷ TRP-2/GAPDH-এর আপেক্ষিক স্বাভাবিক প্রকাশের মাত্রা 0৷{61}}367, 0৷{65}}49, এবং 0.147 মিগ্রা P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের /mL ছিল যথাক্রমে 1৷{73}}8 ± 0.13, 0.85 ± 0.01, এবং 0.7 ± 0.05, যথাক্রমে৷ MITF/GAPDH-এর জন্য, P. dactylifera L. বীজ নির্যাস চিকিত্সার 0.0367, 0.049, এবং 0.147 mg/mL-এর আপেক্ষিক স্বাভাবিক প্রকাশের মাত্রা ছিল 1.48 ± 0.19, 1.03 ± 0.02, এবং 0.6 ± 0.74 (সাম্মানিকভাবে)।

4। আলোচনা

জানা গেছে যে মেলানোজেনেসিস সেলুলার অক্সিডেটিভ স্ট্রেস বাড়ায়। এছাড়াও, বেশ কিছু অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, ROS স্ক্যাভেঞ্জার, ইনহিবিটর স্ক্যাভেঞ্জার এবং ইনহিবিটররা UV-মধ্যস্থ মেলানিন সংশ্লেষণ [54] বাধা দিতে পারে। অতএব, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, আরওএস স্ক্যাভেঞ্জার এবং মেলানোজেনেসিসের ইনহিবিটারগুলি ত্বক-সাদা করার প্রসাধনীগুলিতে অবাঞ্ছিত ত্বকের হাইপারপিগমেন্টেশন প্রতিরোধের জন্য ক্রমবর্ধমানভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে [14]। এটিও পাওয়া গেছে যে মেটালোথিওনিনের উদ্দীপনা, একটি অন্তঃসত্ত্বা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট মেলানোসাইটের মেলানোজেনেসিসকে দমন করতে পারে [55]। মানুষের ত্বক ঘন ঘন পরিবেশগত অক্সিডাইজিং দূষণকারী বা UV আলোর সংস্পর্শে আসে এবং বহিরাগত পরিবেশগত কারণগুলির দ্বারা ক্ষতিগ্রস্ত হয়। বিশেষ করে, UV বিকিরণ ত্বকে ROS এর প্রজন্মকে প্ররোচিত করে এবং কোষের ঝিল্লির লিপিড পারক্সিডেশন [56] প্রচার করে বলে জানা গেছে। অক্সিডেটিভ স্ট্রেস প্রতিরোধ করার জন্য, ত্বক বিশেষ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সিস্টেম [57] দিয়ে সজ্জিত।

P. dactylifera L. বীজের নির্যাস, DPPH এবং ABTS প্লাস র্যাডিকাল স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাক্টিভিটি, মোট ফেনোলিক কন্টেন্ট, ক্ষমতা হ্রাস এবং নির্যাসের ধাতব আয়ন-চেলেটিং ক্ষমতা পূর্বে বর্ণিত হিসাবে নির্ধারণ করা হয়েছিল [47,48] এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপকে ব্যাখ্যা করার জন্য। পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাসটি পূর্বোক্ত সমস্ত বিশ্লেষণাত্মক গবেষণায় যথেষ্ট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যক্রম চালিয়েছে। ফলাফলগুলি স্বতন্ত্র দক্ষতার সাথে বিভিন্ন পরিসরে পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট সম্ভাব্যতা দেখিয়েছে। বীজের নির্যাসের DPPH- স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ চিত্র 2A-তে দেখানো হয়েছে চিত্র 2B-তে দেখানো ABTS প্লাসের থেকে ভিন্ন, যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট-র্যাডিকাল মিথস্ক্রিয়াগুলির বিভিন্ন প্রক্রিয়ার ফলে হতে পারে। এছাড়াও, বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট উপাদানগুলির মধ্যে প্রতিক্রিয়াগুলির স্টোইচিওমেট্রি পরিবর্তিত হতে পারে, যার ফলে মুক্ত র্যাডিকাল-স্কেভেঞ্জিং ক্ষমতা [58] এর মধ্যে পার্থক্য দেখা যায়। P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের সম্ভাব্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি Fe3 plus/ferricyanide কমপ্লেক্সকে লৌহঘটিত আকারে রূপান্তর করতে পারে, এবং চিত্র 2D-এ দেখানো বীজ নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপের সূচক হিসাবে হ্রাস করার ক্ষমতা কাজ করে। এটি পাওয়া গেছে যে কোজিক অ্যাসিড [৫৯] একটি টাইরোসিনেজ ইনহিবিটর হিসাবে কাজ করে কারণ কোজিক অ্যাসিড তামার আয়নগুলিকে চেলেট করার জন্য ধাতব চেলেটর হিসাবে কাজ করে এবং সেই আয়নগুলিকে টাইরোসিনেজের সক্রিয় সাইটে প্রবেশ করতে বাধা দেয়। তাই, বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্টগুলি লৌহঘটিত আয়নগুলির সাথে অদ্রবণীয় ধাতব কমপ্লেক্স গঠন করতে পারে এবং তারপরে ধাতব আয়ন এবং লিপিডগুলির মধ্যে মিথস্ক্রিয়াকে বাধা দেয়। বীজের নির্যাসের উচ্চতর ধাতব আয়ন-চেলেটিং ক্ষমতা এর সম্ভাব্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ এবং টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের উপর সম্ভাব্য প্রতিরোধক প্রভাব নির্দেশ করে (চিত্র 2E)।

অন্তঃকোষীয় ROS-এর অ্যাসের নীতি হল যে DCFH-DA কোষের ঝিল্লির মাধ্যমে ছড়িয়ে পড়ে এবং এনজাইম্যাটিকভাবে DCFH-এ এস্টেরেজ দ্বারা হাইড্রোলাইজ করা হয়; তারপর DCFH ROS এর সাথে বিক্রিয়া করে (যেমন H2O2) DCF প্রদান করে। DCF-তে দ্রুত বৃদ্ধি অন্তঃকোষীয় র্যাডিকেল দ্বারা DCFH এর অক্সিডেশন নির্দেশ করে [60]। ত্বক-সাদা করার ক্রিয়াকলাপের জন্য অভিনব অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট অনুসন্ধানের পিছনে ধারণাটি এই অনুমানের মধ্যে নিহিত যে UV বিকিরণের ফলে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস মেলানিন সংশ্লেষণের উদ্দীপনায় অবদান রাখতে পারে। অতিবেগুনী বিকিরণ ত্বকের টিস্যুতে ROS তৈরি করে যা টাইরোসিনেজ সক্রিয় করে মেলানিন উত্পাদনকে প্ররোচিত করতে পারে বলে জানা গেছে [61]। অধিকন্তু, এটি রিপোর্ট করা হয়েছিল যে বেশ কয়েকটি ত্বক-সাদাকারী এজেন্ট মেলানিন সিন্থেটিক পাথওয়েতে মধ্যবর্তীগুলির পলিমারাইজেশনকে ব্লক করতে টাইরোসিনেজের সক্রিয় সাইটে বা ও-কুইনোনের সাথে কপার আয়নগুলির সাথে মিথস্ক্রিয়া করে মেলানোজেনেসিসকে বাধা দিতে পারে [62]। উপরন্তু, ভিটামিন সি বা ভিটামিন ই আগে থেকে বিদ্যমান মেলানিন কণার অক্সিডেশন কমাতে পারে। অতএব, এই ভিটামিনগুলি ত্বক-সাদা করার পণ্যগুলিতে ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা হয়েছে [63]। মজার বিষয় হল, আমাদের ফলাফলগুলি P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট বৈশিষ্ট্যগুলি প্রদর্শন করেছে, যা নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. এর বীজের নির্যাস প্রসাধনীতে ত্বক-সাদা করার উপাদান হিসেবে কাজ করতে পারে।

এমটিটি অ্যাস হল একটি সুপরিচিত কালোরিমেট্রিক অ্যাস যা সেলুলার এনএডিএইচ/এনএডিপিএইচ-নির্ভর অক্সিডোরেডাক্টেস এনজাইমের কার্যকলাপ পরিমাপ করে যা এমটিটিকে বেগুনি রঙের ফরমাজান রঞ্জক থেকে কমিয়ে দেয়। এই অ্যাসটি ঔষধি এজেন্ট এবং বিষাক্ত পদার্থের সম্ভাব্য সাইটোটক্সিসিটি পরীক্ষা করার জন্য প্রয়োগ করা যেতে পারে, কারণ এই এজেন্টগুলি কোষের কার্যক্ষমতা বাড়ায় বা বাধা দেয়। চিত্র 3A-তে দেখানো ফলাফলগুলি চিত্র 3B-তে ট্রাইপ্যান ব্লু এক্সক্লুশন অ্যাস-এর সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল, যা নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস B16F10 মেলানোমা কোষের কার্যক্ষমতার উপর সাইটোটক্সিক প্রভাব ফেলেনি।

মাশরুম টাইরোসিনেজ সাধারণত মেলানোজেনেসিসের সম্ভাব্য ইনহিবিটর স্ক্রীন করার জন্য লক্ষ্য এনজাইম হিসাবে ব্যবহৃত হয়। এটি প্রথম পাওয়া গেছে যে ডোজ পরিসীমা ({{0}}। চিত্র 4A-এ দেখানো ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে বীজের নির্যাস মাশরুম টাইরোসিনেজ কার্যকলাপের উপর কোজিক অ্যাসিডের তুলনায় কম প্রতিরোধমূলক প্রভাব প্রদর্শন করেছে। মেলানোজেনেসিস পথের প্রথম দুটি ধাপে টাইরোসিনেজ একটি প্রধান ভূমিকা পালন করে। মেলানিন উৎপাদনের উপর P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের প্রকৃত প্রতিরোধক প্রভাব ব্যাখ্যা করার জন্য, B16F10 মেলানিনের উপাদান এবং অন্তঃকোষীয় টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ নির্ধারণ করা হয়েছিল। চিত্র 4B-তে উপস্থাপিত ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের একটি উচ্চ ঘনত্ব মেলানিন গঠনে একটি আপাত প্রতিরোধক প্রভাব ফেলে। তথ্য দেখায় যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস সত্যিই মেলানোমা কোষে মেলানোজেনেসিসকে ব্লক করে। এর সাথে, চিত্র 4C-তে প্রদর্শিত ফলাফলগুলি চিত্র 4B-তে দেখানো ফলাফলের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল। পূর্বোক্ত সেলুলার পরীক্ষায়, -এমএসএইচ মেলানিন সংশ্লেষণকে উদ্দীপিত করার জন্য একটি প্রবর্তক হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। -এমএসএইচকে মেলানোকোর্টিন 1 রিসেপ্টর (MC1R) আবদ্ধ করার এবং অন্তঃকোষীয় অ্যাডিনাইলেট সাইক্লেস সক্রিয় করার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছিল, যা ফলস্বরূপ এটিপিকে সিএএমপিতে অনুঘটক করে এবং সিএএমপি-নির্ভর পিকেএ সক্রিয় করে। চিত্র 5A-এর ফলাফলগুলি প্রকাশ করেছে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস MC1R-এর প্রকাশকে বাধা দেয়, যার ফলে -MSH মধ্যস্থতাকারী অন্তঃকোষীয় সিএএমপি আপগ্র্যুলেশন দ্বারা প্ররোচিত মেলানিন উৎপাদনকে বাধা দেয়। তদ্ব্যতীত, সিএএমপি-মধ্যস্থিত পিকেএ সিগন্যালিং পথটি নিষ্ক্রিয় করা হয়েছিল এবং মেলানোজেনেসিসকে বাধা দেওয়া হয়েছিল। অনুমান নিশ্চিত করার জন্য, আমরা পিকেএ ইনহিবিটর পরীক্ষা চালিয়েছি, এবং চিত্র 4D তে দেখানো ডেটা B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিসের উপর P. dactylifera L. বীজ নির্যাস (0.147 mg/mL) এর প্রতিরোধমূলক প্রভাব নির্দেশ করে H{{ 24}} চিকিৎসা। H89 (N-[2-p-bromocinnamylamino-ethyl]-5-isoquinolinesulphonamide) হল PKA এর একটি নির্বাচনী এবং শক্তিশালী প্রতিরোধক। ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে সিএএমপি-মধ্যস্থিত পিকেএ সংকেত পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজ নির্যাস দ্বারা প্রভাবিত হয়েছিল।

Tyrosinase, TRP1, এবং TRP2 হল তিনটি প্রধান এনজাইম যা স্তন্যপায়ী কোষে মেলানিন সংশ্লেষণ নিয়ন্ত্রণ করে [64]। অধিকন্তু, MITF হল টাইরোসিনেজ, TRP1 এবং TRP2 এর প্রধান ট্রান্সক্রিপশনাল নিয়ন্ত্রক এবং মেলানোসাইট পিগমেন্টেশনের সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ নিয়ামক [65]। চিত্র 5A এর ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস এই মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত প্রোটিনগুলির প্রোটিন প্রকাশের মাত্রা হ্রাস করে, টাইরোসিনেজ কার্যকলাপকে বাধা দেয় এবং B16F10 কোষে মেলানিনের পরিমাণ হ্রাস করে।

এই গবেষণায়, P. dactylifera L. বীজের নির্যাস CREB ফসফোরিলেশন এবং PKA সক্রিয়করণকে দমন করে। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দেয় যে সিএএমপি-পিকেএ পথটি পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাস-প্ররোচিত অ্যান্টি-মেলানোজেনেসিস (চিত্র 5C) এর জন্য দায়ী হতে পারে।

MAPK গুলি মেলানোজেনেসিস [66] সংশোধন করার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে। এমএপিকে পরিবারে তিন ধরনের প্রোটিন কাইনেস রয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে এক্সট্রা সেলুলার রেসপন্সিভ কাইনেস (ইআরকে), সি-জুন এন-টার্মিনাল কিনেস (জেএনকে), এবং পি৩৮ এমএপিকে। p38 MAPK cAMP রেসপন্স এলিমেন্ট-বাইন্ডিং প্রোটিন সক্রিয় করতে পারে (CREB এবং CREB MITF এক্সপ্রেশন সক্রিয় করে, যা ইতিবাচকভাবে মেলানিন সংশ্লেষণে অবদান রাখে [67]। চিত্র 5C এর ফলাফল প্রমাণ দেয় যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস CREB নিষ্ক্রিয় করতে পারে, JNK, এবং p38, MITF এক্সপ্রেশনকে বাধা দেয় (চিত্র 5A)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাস-প্ররোচিত অ্যান্টিমেলানোজেনিক প্রভাব PKA পথের নিম্ন নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করা যেতে পারে। তাছাড়া, অতিবেগুনী রশ্মি বিকিরণ খেলার জন্য রিপোর্ট করা হয়েছে। স্কেলিং, কুঁচকানো, এবং হাইপারপিগমেন্টেশন সহ বিভিন্ন ত্বকের রোগের সূচনাতে বিশিষ্টভাবে বৈশিষ্ট্য। ফলাফলগুলি পরামর্শ দিয়েছে যে পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজের নির্যাস মেলানিন উত্পাদন হ্রাস করেছে, যা অন্তঃকোষীয় ROS হ্রাসের জন্য দায়ী করা যেতে পারে।

সেলুলার মেলানিন উৎপাদনে P. dactylifera L. বীজের নির্যাসের প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য, আমরা B16F10 কোষে mRNA মাত্রা নির্ধারণ করেছি -MSH এবং P. dactylifera L. বীজের নির্যাস দিয়ে। -এমএসএইচ-চিকিত্সা করা কোষগুলি প্রত্যাশিত হিসাবে MITF, টাইরোসিনেজ, টিআরপি-1, এবং টিআরপি-2 এর মাত্রা বৃদ্ধি করেছে। মজার বিষয় হল, P. dactylifera L. বীজের নির্যাস-চিকিত্সা করা কোষগুলি এই মেলানোজেনেসিস-সম্পর্কিত জিনের mRNA অভিব্যক্তিতে একটি হ্রাস দেখিয়েছে। যাইহোক, কলামগুলির মধ্যে কোন পরিসংখ্যানগতভাবে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য বিদ্যমান ছিল না, যা নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস MITF, tyrosinase, TRP1, এবং TRP2 এর জিনের প্রকাশের মাত্রাকে প্রভাবিত করে না।

এটি আমাদের পণ্য।

আরো তথ্যের জন্য, এখানে ক্লিক করুন।

এটি রিপোর্ট করা হয়েছে যে P. dactylifera L. বীজে পাওয়া প্রধান ফেনোলিক অ্যাসিড হল ফেরুলিক অ্যাসিড [69]। ফেরুলিক অ্যাসিড ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে টাইরোসিনেজের কেসিন কিনেস 2-প্ররোচিত ফসফোরিলেশনকে বাধা দিয়ে B16 মেলানোমা কোষে মেলানিন সংশ্লেষণকে কার্যকরভাবে বাধা দিতে দেখানো হয়েছে [70]। এই প্রতিবেদনগুলি চিত্র 1-এ দেখানো আমাদের ফলাফলগুলিকে সমর্থন করে — P. dactylifera L. বীজের জলের নির্যাসে ফেরুলিক অ্যাসিড B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিস প্রতিরোধে অবদান রাখে। অবশ্যই, বীজ নির্যাসের অন্যান্য কার্যকরী উপাদান অদূর ভবিষ্যতে তদন্ত করা উচিত।

আমাদের ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস PKA সিগন্যালিং পথগুলিকে হ্রাস করে B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিসকে বাধা দেয়। তাই, P. dactylifera L. বীজের নির্যাস একটি কার্যকর ত্বক সাদা করার এজেন্ট হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

5। উপসংহার

মেলানিন সংশ্লেষণে পি. ড্যাক্টিলিফেরা এল. বীজ জলের নির্যাসের কার্যপ্রণালীর প্রথম প্রতিবেদন। বর্তমান সমীক্ষায় P. dactylifera L. বীজ নির্যাসের depigmenting প্রভাবে CAMP/PKA/CREB পথের সম্পৃক্ততা প্রদর্শন করা হয়েছে। আমাদের ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে P. dactylifera L. বীজের নির্যাস PKA সিগন্যালিং পথগুলিকে হ্রাস করে B16F10 কোষে মেলানোজেনেসিসকে বাধা দেয়। তাই, P. dactylifera L. বীজের নির্যাস একটি নতুন ডার্মাটোলজিক্যাল অ্যান্টিমেলানোজেনেসিস এজেন্ট এবং একটি কার্যকর ত্বক-সাদা করার এজেন্ট হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে।