EphrinB2 (EphB2) এর রেনো-প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব

যোগাযোগ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ঝিমিন হুয়াং, সিমেং লিউ, আনা তাং, লাইথ আল-রাবাদি, মার্ক হেনকেমেয়ার, প্যাট্রিস এন মিমচে এবং ইউফেং হুয়াং

ভূমিকা

ক্রনিক কিডনি ডিজিজ (CKD) ক্রমাগত প্রদাহ এবং গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস এবং টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস সহ ফাইব্রোসিসের ক্রমান্বয়ে বৃদ্ধি দ্বারা চিহ্নিত করা হয়, যা শেষ পর্যন্ত নেতৃত্ব দেয়শেষ পর্যায়ে কিডনি রোগ(ESRD) অন্তর্নিহিত ব্যাধি নির্বিশেষে|1]। এটি ESRD-এর জন্য একটি চূড়ান্ত সাধারণ পথ নির্দেশ করে। এই সাধারণ পথের মূল মধ্যস্থতাকারীদের আরও ভালভাবে বোঝার ফলে CKD-এর অগ্রগতি রোধ বা বিপরীত করার জন্য আরও লক্ষ্যযুক্ত থেরাপির নকশা সম্ভব হবে।

এরিথ্রোপয়েটিন উৎপাদনকারী হেপাটোসেলুলার (Eph) রিসেপ্টর টাইরোসিন কাইনেস এবং তাদের সংশ্লিষ্ট Eph রিসেপ্টর-ইন্টার্যাক্টিং (Ephrin) লিগ্যান্ডগুলি অত্যন্ত সংরক্ষিত মেমব্রেন-অ্যাঙ্করড সিগন্যালিং প্রোটিনের একটি বৃহৎ পরিবার গঠন করে যা বিকাশ এবং প্রাপ্তবয়স্ক জীবনে বিভিন্ন কোষ-কোষের মিথস্ক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করে [2]। কোষ-কোষের সংস্পর্শে, EphB-EphrinB মিথস্ক্রিয়া বিশেষভাবে ডাইমার, টেট্রামার এবং উচ্চ-ক্রম প্রোটিন ক্লাস্টারে পরিণত হয়, যার ফলে দ্বিমুখী সংকেত ক্যাসকেড সক্রিয় হয় যা রিসেপ্টর-প্রকাশকারী কোষে (ফরোয়ার্ড সিগন্যালিং) এবং লিগ্যান্ড-এ প্রচারিত হয়। কোষ প্রকাশ করা (বিপরীত সংকেত)[3-5]। প্রদত্ত যে Eph-Ephrin দ্বিমুখী সংকেত ভ্রূণের বিকাশের সময় এবং শারীরবৃত্তীয় টিস্যু মেরামত 2,6-10] উভয় সময়ে কোষ-কোষের মিথস্ক্রিয়া, স্থানান্তর এবং আনুগত্যের ঘটনাগুলির একটি বিস্তৃত অ্যারেতে অংশগ্রহণ করে বলে মনে করা হয়, এটি আশ্চর্যজনক নয় যে dysregulation এই অণুগুলি টিস্যু ফাইব্রোসিসে জড়িত। প্রকৃতপক্ষে, টিস্যু ফাইব্রোজেনেসিসে EphB-EphrinB সিগন্যালিংয়ের ভূমিকাগুলি ভাস্কুলার [11], কার্ডিয়াক [12], ত্বক [13], ফুসফুস [14], এবং লিভার ফাইব্রোসিস [15,16] এর একাধিক মাউস মডেলে উন্মোচিত হয়েছে। যাইহোক, কিডনির প্যাথোফিজিওলজির ক্ষেত্রে এই রিসেপ্টর এবং লিগ্যান্ডগুলির সম্ভাব্য কার্যকারিতা অনেকাংশে অজানা।

প্রাপ্তবয়স্ক রেনাল গ্লোমেরুলিতে, EphrinB1 গ্লোমেরুলিতে পডোসাইটের স্লিট ডায়াফ্রামে স্থানীয়করণ করা হয়[17], EphrinB2 প্রধানত গ্লোমেরুলার এন্ডোথেলিয়াল কোষ (ECs) এবং ধমনী মসৃণ পেশীতে প্রকাশ করা হয় [18], যেখানে EphrinB3 খুব কমই সনাক্ত করা যায়19]। গ্লোমেরুলার এক্সপ্রেশন বা Eph রিসেপ্টরগুলির বিতরণ এখনও অস্পষ্ট যদিও কিছু গবেষণায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে একটি বিরল কোষ পরিপক্ক গ্লোমেরুলিতে EphB4 প্রকাশ করে [18]। রেনাল টিউবুলে, ইফ্রিনবি 1 পুরো নেফ্রন জুড়ে সনাক্ত করা হয় এবং টিউবুলার এপিথেলিয়াল কোষগুলির সাইটোআর্কিটেকচারকে প্রভাবিত করতে পারে [19]। ধমনী মসৃণ পেশী কোষ এবং ইসি-তে প্রকাশের পাশাপাশি, EphrinB2 উন্নয়নশীল এবং প্রাপ্তবয়স্ক কিডনির সংযোগকারী টিউবুল এবং কর্টিকাল এবং মেডুলারি সংগ্রহ নালীগুলিতে প্রচুর পরিমাণে পাওয়া গেছে [18]।ইফ্রিন বি2 (EphB2) রিসেপ্টরটি অভ্যন্তরীণ এবং বাইরের মেডুলার টিউবুলে প্রচুর পরিমাণে প্রকাশ পাওয়া গেছে, যার মধ্যে দূরবর্তী সোজা টিউবুল এবং হেনলের লুপের পাতলা অঙ্গ রয়েছে যেখানে এটি কোষের বেসাল দিকে ঘনীভূত হয়। EphB4 এক্সপ্রেশন মেডুলার কৈশিকগুলির মধ্যে সীমাবদ্ধ। EphB6 অগ্রাধিকারমূলকভাবে প্রক্সিমাল এবং দূরবর্তী টিউবুল সহ কর্টেক্স এবং বাইরের মেডুলা উভয়ের রেনাল কর্পাসকেল এবং টিউবুলে প্রকাশ করা হয়। যাইহোক, EphB6 এর নিজেই অনুঘটক কার্যকলাপের অভাব রয়েছে এবং এটি একটি স্বাধীন রিসেপ্টর হিসাবে কাজ করার সম্ভাবনা নেই বরং ভিভোতে অন্যান্য EphB রিসেপ্টরগুলির সাথে একটি হেটেরো-অলিগোমেরিক সিগন্যালিং কমপ্লেক্সের অংশ হিসাবে সংকেত দেয় [20]।

পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছিল যে EphrinB2 রিভার্স সিগন্যালিং একতরফা ইউরেটারাল অবস্ট্রাকশন (UUO) বা ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন (IR) আঘাত দ্বারা প্ররোচিত কিডনি আঘাতের পরে কৈশিক বিরলতা এবং ফাইব্রোসিস থেকে রক্ষা করে কারণ ইঁদুরের EphrinB এর অভাব ছিল2-PDZ-নির্ভর সংকেত আরও গুরুতর ছিল কিডনির আঘাতের পরে ভাস্কুলার ইনজুরি এবং বর্ধিত ফাইব্রোসিস [২১]। যাইহোক, এটাও সম্ভব যে PDZ-মৃত EphrinB2 প্রোটিন EphB ফরোয়ার্ড সিগন্যালিংকে উদ্দীপিত করার জন্য একটি শক্তিশালী লিগ্যান্ড হিসাবে কাজ করে এবং এটি উপরের গবেষণায় পরিলক্ষিত অত্যধিক কিডনি ফাইব্রোসিসের কারণ হতে পারে। আরও, উপরোক্ত অধ্যয়নটি নির্ধারণ করেনি যে কোনটি, যদি থাকে, EphB রিসেপ্টর আঘাতের পরে কিডনি প্যাথলজিতে অংশগ্রহণ করে। EphB2 এর গুরুত্বপূর্ণ profibrotic ভূমিকা দেওয়া (EphB2)লিভার ফাইব্রোসিস [15,16] এবং EphB2 এর সর্বাধিক প্রচুর অভিব্যক্তিতে সম্প্রতি পরিলক্ষিত সংকেত (EphB2)কিডনি টিউবুলার কোষে [19], আমরা অনুমান করি যে EphB2 (EphB2)সম্ভবত জড়িতরেনালফাইব্রোসিস. বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা EphB2 উন্নত কিনা তা তদন্ত করেছি (EphB2)এছাড়াও বিভিন্ন কিডনি রোগ এবং EphB2 এর প্রকাশ এবং সংকেত পরিলক্ষিত হয় (EphB2)এর উন্নয়নে জড়িতরেনালEphB2 বাস করছে (EphB2)নকআউট(KO) এবং লিটারমেট নিয়ন্ত্রণ ইঁদুর একতরফা গ্রহণ করতেরেনালআইআর আঘাত. আমরা দেখিয়েছি যে EphB2 (EphB2)এক্সপ্রেশন এবং সিগন্যালিং ক্ষমতা উল্লেখযোগ্যভাবে আপ-নিয়ন্ত্রিত হয় মাউস মডেলে এবং কিডনিতে পরীক্ষামূলক হাইপারটেনসিভ এবং ডায়াবেটিক CKD মাউস মডেল এবং CKD-তে আক্রান্ত রোগীদের থেকে IR আঘাতের পরে। তাছাড়া, EphB2 এর জেনেটিক ক্ষতি (EphB2)KO ইঁদুরে শক্তিশালীভাবে কিডনিকে IR আঘাত-প্ররোচিত থেকে রক্ষা করেরেনালক্ষতি, কর্মহীনতা, এবং ফাইব্রোসিস, এইভাবে রোগের অগ্রগতির সময় কিডনিকে প্রভাবিত করে এমন প্রতিকূল সেলুলার ঘটনাগুলির মধ্যস্থতায় এই রিসেপ্টরের জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা চিহ্নিত করে।

cistanche পুরুষ সুবিধাজন্যকিডনি

ফলাফল

EphB2 (EphB2)আঘাতের পরে কিডনিতে আপ-নিয়ন্ত্রিত এবং সক্রিয় হয়

সাধারণ প্রাপ্তবয়স্ক মাউস কিডনিতে সমস্ত EphB এবং Ephrin-B অণুর ট্রান্সক্রিপ্টগুলি RT-PCR (পরিপূরক চিত্র S1A) দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়েছিল, যা প্রকাশ করে যে সর্বাধিক বিশিষ্ট পরিবর্ধন পণ্যগুলি ছিল EphB2 (EphB2), EphB4, EphrinB1, এবং EphrinB2। এটি দেখানো হয়েছে যে EphB4 প্রধানত ভাস্কুলার ইসিতে প্রকাশ করা হয় এবং রক্তনালীগুলির কাঠামোগত অখণ্ডতার জন্য প্রয়োজনীয়, এবং ফাইব্রোসিসে জড়িত প্রধান কিডনি কোষগুলিতে সনাক্ত করা হয় না [21,26]। তদ্ব্যতীত, আমাদের ডেটা প্রকাশ করেছে যে কিডনি টিউবুলার এপিথেলিয়াল কোষ এবং টিউবুলার ফাইব্রোব্লাস্টগুলি EphB2 প্রকাশ করে (EphB2)রিসেপ্টর এবং কগনেট EphrinB1 এবং EphrinB2ligands (পরিপূরক চিত্র S1B দেখুন)। তারপরে আমরা আইআর আঘাতের পরে অভিব্যক্তিতে সম্ভাব্য পরিবর্তনগুলি তদন্ত করেছি এবং পেয়েছি যে EphB2 (EphB2)এমআরএনএ এবং প্রোটিন স্তরগুলি WT IR-আহত কিডনিতে অনিয়ন্ত্রিত নিয়ন্ত্রণ কিডনি (CTL) (চিত্র 1A-C) এর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে আপ-নিয়ন্ত্রিত ছিল। এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, ইমিউনোব্লটগুলি EphB1/EphB2 এর জন্য একটি ফসফো-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে (EphB2)যা টাইরোসিন কাইনেজের জন্য একটি রিডআউট প্রদান করে অনুঘটকভাবে সক্রিয় রিসেপ্টর (p-EphB1/2) IR-আহত WT মাউস কিডনিতে উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি সনাক্ত করেছে (EphB2)অ্যান্টিবডিগুলি WT IR-আহত কিডনিতে রিসেপ্টর প্রোটিন এক্সপ্রেশনের বৃদ্ধি নিশ্চিত করেছে, বিশেষ করে টিউবুলার এপিথেলিয়াল কোষ এবং টিউবুলোইনটারস্টিশিয়াল কোষে (চিত্র 1E)। গুরুত্বপূর্ণভাবে, কোন EphB2 নেই (EphB2)EphB2 থেকে কিডনিতে ইমিউনোব্লট বা IF-তে সংকেত সনাক্ত করা হয়েছিল (EphB2)KO ইঁদুর (EphB2-/)অ্যান্টিবডি রিএজেন্টের নির্দিষ্টতা প্রদর্শন করে। অবশেষে, WT ইঁদুর থেকে IR-আহত কিডনিতে EphrinB2 প্রোটিন এক্সপ্রেশনের একটি উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধিও সনাক্ত করা হয়েছিল, যদিও মজার বিষয় হল EphB2 থেকে আহত কিডনিতে এই বৃদ্ধি সনাক্ত করা যায়নি। (EphB2)KO ইঁদুর (চিত্র 1B, F)।

চিত্র 1.EphB2 (EphB2)2 সপ্তাহের জন্য IR আঘাতের পরে ইঁদুরের কিডনিতে অভিব্যক্তি বৃদ্ধি পায়

(A) EphB2 রিসেপ্টর, EphrinB1, EphrinB2 mRNA স্তরগুলি রিয়েল-টাইম RT-PCR ব্যবহার করে ইঁদুরের কিডনিতে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। কনট্রাল্যাটারাল কিডনি (CTL) এর তুলনায় ভাঁজ পরিবর্তন হিসাবে ফলাফল দেখানো হয়েছে। ত্রুটি বারগুলি গড় ± SD, n=5 প্রাণীর প্রতিনিধিত্ব করে৷

(B) EphB2 প্লাস/প্লাস (WT এবং EphB2-/(KO) ইঁদুরের কিডনি থেকে EphB2, phosphor-EphB2 (pEphB21594), EphrinB2, এবং GAPDH-এর পশ্চিমী দাগ। ডানদিকে আণবিক ওজন লেবেল করা হয়েছিল।

গ্রাফগুলি EphB2(C), p-EphB2(D), এবং EphrinB2 (F) এর জন্য ব্যান্ড ঘনত্ব পরিমাপের ফলাফলগুলিকে সংক্ষিপ্ত করে।*P<0.05 vs.ephb2+/+="">

(E) EphB2 প্লাস / প্লাস এবং EphB2-/- থেকে হিমায়িত কিডনি বিভাগগুলি IR আঘাতের পরে ইঁদুরগুলি EphB2 (লাল) এবং DAPI/DNA (নীল) দিয়ে দাগযুক্ত ছিল। ম্যাগনিফিকেশন,×200. EphB2 KO ইঁদুরের কিডনিতে ইমিউনোব্লট বা IF স্টেনিং-এ কোনো EphB2 শনাক্ত হয়নি।

cistanche herbaচিকিৎসা করতে পারেকিডনিরোগউন্নতিরেনাল ফাংশন

EphB2 এক্সপ্রেশন আপ-নিয়ন্ত্রিত কিনা তা নিশ্চিত করতে (EphB2)এবং EphrinB জিনগুলি কিডনি রোগের অন্যান্য প্রাণীর মডেলগুলিতেও লক্ষ্য করা যেতে পারে, আমরা টাইপ 2 ডায়াবেটিক db/db ইঁদুর [27] এবং ডিঅক্সিকোর্টিকোস্টেরন অ্যাসিটেট (DOCA) লবণ এবং এনজিওটেনসিন (Ang) II-ইনফিউজড হাইপারটেনসিভ ইঁদুর [22] থেকে কিডনিকে সাবজেক্ট করেছি। RT-PCR বিশ্লেষণ। তথ্য নির্দেশ করে যে EphB2 (EphB2), EphrinB1, এবং EphrinB2 ট্রান্সক্রিপ্টগুলি উভয় মডেলের কিডনিতে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (পরিপূরক চিত্র S2)। তারপরে আমরা EphB2 এর জন্য IF স্টেনিং করি (EphB2)PAS স্টেনিং (চিত্র 2A) দ্বারা নির্ধারিত গ্লোমেরুলোস্ক্লেরোসিস, টিউবুলার অ্যাট্রোফি এবং ইন্টারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস সহ lgA নেফ্রোপ্যাথি (IgAN) নির্ণয়ের সাথে CKD রোগীদের কিডনি বায়োপসিতে। স্বাভাবিক বিষয়ের সাথে তুলনা করে, উন্নত EphB2 এর একটি আকর্ষণীয় প্যাটার্ন (EphB2)প্রোটিন এবং ফর-ওয়ার্ড সিগন্যালিং (p-EphB1/2 অ্যান্টিবডিগুলির সাথে দাগ) শুধুমাত্র রোগাক্রান্ত গ্লোমেরুলিতেই নয়, এই IgAN রোগীদের থেকে কিডনির রোগ-সংশ্লিষ্ট টিউবুলার এলাকায়ও সনাক্ত করা হয়েছিল, (চিত্র 2B, C)। IF স্টেনিংয়ের জন্য ব্যবহৃত একই অ্যান্টি-p-EphB2 অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি স্টেইনিং আরও প্রকাশ করেছে যে শক্তিশালী p-EphB2 স্টেনিং প্রধানত টিউবুলার কোষে এবং কিছু টিউবুলোইনটারস্টিশিয়াল কোষে এই IgAN রোগীদের (চিত্র 2D) দেখা গেছে। বিপরীতে, সাধারণ কিডনিতে (চিত্র 2D) p-EphB2 এর জন্য শুধুমাত্র কয়েকটি টিউবুলার কোষ দুর্বলভাবে দাগযুক্ত হয়েছিল। EphB2-এর জন্য আধা-পরিমাণযুক্ত সমন্বিত ঘনত্বের মাত্রা (EphB2)বা ইমেজজে দ্বারা নির্ধারিত রেনাল টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল এলাকায় p-EphB2 স্টেনিং যথাক্রমে ডানদিকে দেখানো হয়েছিল। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে EphB2 এর আপ-নিয়ন্ত্রিত অভিব্যক্তি এবং ফরওয়ার্ডিং সিগন্যালিং এর সম্ভাব্য সক্রিয়করণ এর একটি বিশিষ্ট বৈশিষ্ট্যরেনালফাইব্রোসিস.

চিত্র 2. EphB2 (EphB2)মানুষের কিডনি বায়োপসি টিস্যুতে প্রকাশ বৃদ্ধি পায়সাধারণ বিষয়ের তুলনায় CKD সহ নানজিং মেডিকেল বিশ্ববিদ্যালয় থেকে কিডনির স্বাভাবিক অংশ (NC, n=3) এবং lgAN রোগীদের (অক্সফোর্ড প্যাথলজিকাল টাইপ T=1 [38]) (n=7) থেকে কিডনি বায়োপসি বিভাগ PAS (A), EphB2 (লাল)(B), এবং phosphor-EphB2 (p-EphB2) (লাল) (C) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল। ম্যাগনিফিকেশন, ×200. DAPI-দাগযুক্ত DNA(নীল) IF স্টেনিংয়ের জন্য নিউক্লিয়াস স্টেইনিং কন্ট্রোল হিসাবে কাজ করে (IF স্টেনিং মাউস টিস্যুর জন্য বর্ণিত হিসাবে বাহিত হয়েছিল)। মানব উপাদানের ব্যবহার স্থানীয় নৈতিক পর্যালোচনা বোর্ড দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল। বিবর্ধন ×200. তীরগুলি গ্লোমেরুলাস এবং টিউবুলোইনটারস্টিশিয়াল এলাকায় ফাইব্রোসিস নির্দেশ করে। (D) p-EphB2 এর জন্য ইমিউনোকেমিস্ট্রি স্টেনিং (বাদামী রঙে দাগযুক্ত) (আইএফ স্টেনিংয়ের জন্য ব্যবহৃত প্রাথমিক অ্যান্টিবডি হিসাবে একই অ্যান্টি-pEphB2 অ্যান্টিবডি ব্যবহার করা এবং সেকেন্ডারি হিসাবে পারক্সিডেস-কনজুগেটেড অ্যান্টি-র্যাবিট এলজিজি (জ্যাকসন ইমিউনো রিসার্চ ল্যাবরেটরিজ ইনক।) 3,3'-ডায়ামিনোবেনজিডিন ব্যবহার করে অ্যান্টিবডি এবং ইতিবাচক স্টেনিং তৈরি করা হয়েছিল) আরও এই lgAN কিডনি বায়োপসি টিস্যুতে প্যারাফিন-এম্বেড করা 3-μm অংশগুলিতে করা হয়েছিল এবং হেমাটোক্সিলিনের সাথে প্রতিরোধ করা হয়েছিল। নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, প্রাথমিক অ্যান্টিবডিটি প্রাক-ইমিউন এলজিজি দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল এবং কোনও নির্দিষ্ট দাগ লক্ষ্য করা যায়নি। বিবর্ধন × 400। EphB2 বা p-EphB2 এর দাগের আপেক্ষিক সমন্বিত পিক্সেল ঘনত্ব, বিশেষত রেনাল টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল এলাকায়, যেমন ImageJ দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছে, প্রতিটি স্টেনিং ফটোর ডানদিকে দেখানো হয়েছে।*p<0.05 vs.="" normal="" kidney="">

চিত্র 3.EphB2 (EphB2)-KO ইঁদুরগুলি উন্নত রেনাল ফাংশন এবং অ্যাট্রোফি প্রদর্শন করে এবং IR আঘাতের পরে টিউবুলার ইনজুরি এবং টিউবুলোইনটারস্টিশিয়াল ফাইব্রোসিস হ্রাস করে (AC) সিরাম BUN (A), Cr মাত্রা (B), এবং কিডনির ওজন (C) (n=5/গ্রুপ)।*P<0.05 vs.ephb2+/+="" mice.="" (d,="" e)representative="" microscopic="" images="" showing="" pas="" staining="" (d)="" and="" masson's="" trichrome="" staining="" (e)="" of="" the="" kidney="" sections="" were="" used="" to="" detect="" tubular="" injury,="" inflammation,="" and="" collagen="" deposition="" (stained="" blue).="" magnification,×200.(f,="" g).="" the="" graphs="" summarized="" the="" results="" of="" tubular="" injury="" (f="" and="" collagen="" deposition="" (g)="" quantified="" by="" imagej.(h,="" d)="" mrna="" expression="" of="" tubular="" injury="" markers,="" ngal(h)="" and="" kim-1="" ()="" in="" the="" kidney="" following="" ir=""><0.05 vs.ephb2+/="" contralateral="" kidney=""><0.05 vs.ephb2+/+="" ir-injured="">

EphB2 (EphB2)KO কিডনিকে IR-প্ররোচিত আঘাত এবং ফাইব্রোসিস থেকে রক্ষা করে

কিডনি ইনজুরি এবং ফাইব্রোসিসের আইআর মডেলে, WT ইঁদুরের একটি 35-মিনিট ইস্কেমিয়া প্রোটোকল 2 সপ্তাহের পরে সাধারণ গুরুতর দীর্ঘস্থায়ী একতরফা কিডনি ক্ষতিকে প্ররোচিত করে, যার মধ্যে প্রতিবন্ধী কিডনির কার্যকারিতা রয়েছে যা সিরাম BUN এবং Cr মাত্রা বৃদ্ধির দ্বারা প্রমাণিত হয়েছে (চিত্র 3A, B)(যদিও এখানে BUN বা Cr-এর সিরাম স্তর পরিমাপ করা হয়েছে শুধুমাত্র IR-আহত কিডনির প্রতিবন্ধী কার্যকারিতাকে আংশিকভাবে প্রতিফলিত করে, WT ইঁদুরের সিরাম BUN এবং Cr উভয়ই একতরফা সহরেনাল আইআর আঘাতকোন আঘাত ছাড়াই WT সাধারণ ইঁদুরের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (BUNvs. নরমাল:26.81±4.25 vs.17.3±0.37 mg/dl; Cr:0.3{{1{{12} }}}1±0.029 vs.0.158±0.064 mg/dl)) এবং কিডনি অ্যাট্রোফি কম হওয়া কিডনি ওজন সূচক দ্বারা স্পষ্ট (আইআর-আহত কিডনির ওজন নিয়ন্ত্রণের উপর অনুপাত, অক্ষত কিডনি ওজন) (চিত্র 3C ) হিস্টোলজিক্যালভাবে, ডব্লিউটি ইঁদুরের আইআর-আহত কিডনিতে সাধারণ টিউবুলোইন্টারস্টিশিয়াল মনোনিউক্লিয়ার কোষের অনুপ্রবেশ এবং জমে থাকা কোলাজেন জমা দেখায় যা PAS স্টেনিং এবং ম্যাসনের ট্রাইক্রোম স্টেনিং (চিত্র 3D-G) দ্বারা নির্ধারিত হয়। IR-আহত EphB2-/-ইঁদুরগুলি WT আহত ইঁদুরের তুলনায় BUN এবং Cr স্তরে একটি শক্তিশালী হ্রাস দেখায় এবং উল্লেখযোগ্যভাবে কম কিডনি অ্যাট্রোফি, টিউবুলার ইনজুরি এবং টিউবুলোইনটারসটিশিয়াল ফাইব্রোসিস দেখায়। নিউট্রোফিল জেলটিনেস-সম্পর্কিত লাইপোক্যালিন (এনজিএএল) এবং কিডনি ইনজুরি অণু-1(KIM-1) mRNA-এর জন্য রেনাল ট্রান্সক্রিপ্টগুলিও মূল্যায়ন করা হয়েছিল কারণ উভয়ই রেনাল টিউবুলার ইনজুরির প্রাথমিক পূর্বাভাসসূচক চিহ্নিতকারী হিসাবে বৈধ। ডেটা ইঙ্গিত করে যে যখন NGAL এবং KIM-1 WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে খুব বেশি প্রকাশ পেয়েছে, EphB থেকে আহত কিডনিতে তাদের অভিব্যক্তি যথাক্রমে 77.2 এবং 88.5 শতাংশ দ্বারা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে{{33} }/ মিউট্যান্ট ইঁদুর (চিত্র 3H-I)। এটি ইঙ্গিত দেয় যে IR আঘাতের পরে টিউবুলার ক্ষতি দৃঢ়ভাবে হ্রাস করা হয়েছিল ইঁদুরগুলিতে যেগুলিতে EphB2 প্রকাশের অভাব ছিল। (EphB2)রিসেপ্টর

চিত্র 4.EphB2 (EphB2)-KO ইঁদুরগুলি টিউবুলার -এসএমএ স্টেনিং এবং IR ইনজুরির পরে ফাইব্রোটিক মার্কারগুলির রেনাল প্রোটিনের মাত্রা হ্রাস করেছে

(A) EphB2 প্লাস / প্লাস t এবং EphB2-/- আইআর আঘাতের পরে ইঁদুরের হিমায়িত কিডনি বিভাগগুলি -SMA (লাল) এবং DAPI/DNA (নীল) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। ম্যাগনিফিকেশন,×200।

(বি) গ্রাফগুলি ইমেজজে দ্বারা পরিমাপকৃত -এসএমএ জমার ফলাফলের সংক্ষিপ্তসার।*P<0.05 vs.ephb2+/t="" contralateral="" kidney="">

(C) CTL থেকে FN, -SMA, N-cadherin, এবং GAPDH এর ওয়েস্টার্ন ব্লট এবং EphB2 প্লাস / প্লাস এবং EphB2-/7- ইঁদুরের IR-আহত কিডনি। আণবিক ওজন ডানদিকে লেবেল করা হয়েছে।=5 প্রাণী/গোষ্ঠী।

(DF) গ্রাফগুলি FN (D), -SMA (E), এবং N-cadherin (F) এর জন্য ব্যান্ড ঘনত্ব পরিমাপের ফলাফলগুলিকে সংক্ষিপ্ত করে।*P<0.05 vs.="" ephb2+/+=""><0.05 vs.="" ephb2+/+="" ir-injured="">

মরুভূমি cistanche সুবিধাচালুকিডনি

-SMA সাধারণত টিউবুলার কোষের ফাইব্রোব্লাস্টে পার্থক্য করার সময় বা ফাইব্রোব্লাস্ট থেকে মায়োফাইব্রোব্লাস্ট বা ভাস্কুলার রিমডেলিং করার সময় বৃদ্ধি পায়। কিডনি বিভাগের IF বিশ্লেষণ ব্যবহার করে, আমরা WT ইঁদুর থেকে IR-আহত কিডনিতে টিউবুলার কোষে -SMA দাগের একটি উল্লেখযোগ্য বৃদ্ধি সনাক্ত করেছি, একটি প্রতিক্রিয়া যা নাটকীয়ভাবে EphB2 তে বাতিল করা হয়েছিল। (EphB2)-/- ইঁদুর (চিত্র 4A, B)। এই পর্যবেক্ষণটি ইমিউনোব্লট বিশ্লেষণের দ্বারা আরও সমর্থিত হয়েছিল যা -এসএমএ-এর উচ্চতর প্রোটিন স্তরে একটি আকর্ষণীয় হ্রাস দেখায় সেইসাথে মেসেনকাইমাল/ফাইব্রোটিক ফেনোটাইপ যা EphB2 থেকে IR-আহত কিডনিতে N-cadherin এবং FN এর অভিব্যক্তি দ্বারা চিহ্নিত করা হয়েছে। (EphB2)-/-ইঁদুর WT নিয়ন্ত্রণের সাথে তুলনা করে (চিত্র 4C-F)। আরও বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে IR-আহত কিডনিতে কোলাজেন টাইপ Iol(Col-Io1), Col-II 1, Col-IVcl, এবং FN সহ ফাইব্রোটিক মার্কারগুলির mRNA স্তরগুলিও EphB2-তে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। (EphB2)-/-মিউট্যান্টস (চিত্র 5)। এই তথ্যগুলি নির্দেশ করে যে EphB2 (EphB2)KO কিডনিকে IR-প্ররোচিত টিউবুলার EMT এবং ফাইব্রোসিস থেকে রক্ষা করে।

চিত্র 5. প্রোফাইব্রোটিক এবং প্রদাহজনক মার্কারগুলির জিনের প্রকাশ বিশ্লেষণের জন্য পরিমাণগত RT-PCR

মোট আরএনএ কনট্রাল্যাটারাল (সিটিএল) বা আইআর-আহত কিডনি থেকে প্রস্তুত করা হয়েছিলEphB2প্লাস প্লাস এবংEphB2-/- ইঁদুর। ডেটা হল গড় ± SD, n=5টি দল প্রতি প্রাণী।*P<0.05>EphB2প্লাস / প্লাস CTL, #P<0.05>EphB2প্লাস / প্লাস আইআর-আহত কিডনি।

EphB2 (EphB2)KO শক্তিশালী রেনাল প্রদাহ, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, এবং IR আঘাতের পরে প্রসারিত প্রতিক্রিয়া প্রশমিত করে

টিস্যু ফাইব্রোসিসের মূল মডুলেটর হিসেবে, TGF 1, প্লাজমিনোজেন-অ্যাক্টিভেটর ইনহিবিটর টাইপ 1(PAI-1), প্লেটলেট-ডিরাইভড গ্রোথ ফ্যাক্টর রিসেপ্টর- (PDGFR), এবং মেটালোপ্রোটিনেসের টিস্যু ইনহিবিটর (TIMP1) গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করে।রেনালফাইব্রোসিস. প্রত্যাশিত হিসাবে, TGF 1, PAI-1, PDGFR- , এবং TIMP1 এর রেনাল mRNA মাত্রাগুলি তাদের অভ্যন্তরীণ CTL অক্ষত কিডনির তুলনায়, WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 5)। যাইহোক, এই প্রোফাইব্রোটিক মডুলেটরগুলির mRNA এক্সপ্রেশনটি EphB2-7- ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে দৃঢ়ভাবে ভোঁতা হয়েছিল। এই ফলাফল হ্রাস সঙ্গে সামঞ্জস্যপূর্ণরেনালফাইব্রোসিসআমরা IR আঘাতের পর EphB2-7ইঁদুরে পর্যবেক্ষণ করেছি।

EphB2 এর প্রভাব আরও যাচাই করতে (EphB2)সম্পর্কিত সেলুলার ডাউনস্ট্রিম সিগন্যালিং পাথওয়েতে KO, আমরা দেখেছি যে NF-kB-p65, মনোসাইট কেমোঅ্যাট্র্যাক্ট্যান্ট প্রোটিন-1(MCP-1), ইন্টারলিউকিন (IL)-1B, এবং এর জন্য রেনাল RNA ট্রান্সক্রিপ্ট ডব্লিউটি ইঁদুরের আইআর-আহত কিডনিতে নক্স 2 সবই বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 5)। অধিকন্তু, NF-KB-p65, Nox2, এবং এর cofactor, p47Phox-এর রেনাল প্রোটিন উত্পাদন WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে CTLkidney-এর তুলনায় অনেক বেশি ছিল, যা NF-kB- মধ্যস্থতাকারী প্রদাহজনক পথ এবং IR-তে Nox2 সক্রিয়করণ নির্দেশ করে। আহত কিডনি। যাইহোক, এই মধ্যস্থতাকারীদের মাত্রা EphB2 অনুপস্থিত KO ইঁদুরগুলিতে স্বাভাবিক স্তরের কাছাকাছি উন্নত বা বিপরীত করা হয়েছিল (EphB2)অভিব্যক্তি (চিত্র 6A-D)। ডব্লিউটি ইঁদুরের আইআর-আহত কিডনিতে সেরিন/থ্রোনাইন কিনেস (এক্ট) এবং এমএপিকে/ইআরকে পথের ফসফোরিলেশন এবং সংকেত বৃদ্ধি করা হয়েছিল, যা নাটকীয়ভাবে হ্রাস পেয়েছে, স্বাভাবিক মাত্রায় পৌঁছেছে, ইপিএইচবি2-/-ইঁদুরে (চিত্র 6A, E, F)। F4/80 অ্যান্টিবডি, ম্যাক্রোফেজ লেবেল হিসাবে পরিচিত, WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল এলাকায় F4/80 প্লাস কোষের পরম সংখ্যায় যথেষ্ট বৃদ্ধি দেখায়, যখন F4/80 প্লাস কোষগুলি রেনাল ভেসেলগুলিতে বিরল ছিল। CTL কিডনি, ক্ষতিগ্রস্থ কিডনিতে ম্যাক্রোফেজ এবং প্রদাহের সঞ্চয়কে নির্দেশ করে। যাইহোক, EphB2-7-ইঁদুরে F4/80 প্লাস কোষের সংখ্যা অনেকাংশে কমে গিয়েছিল, যা অক্ষত কিডনিতে পরিলক্ষিত স্বাভাবিক মাত্রার কাছাকাছি পৌঁছেছিল (চিত্র 7A, B)। তাছাড়া, আমরা কি-67 পরীক্ষা করেছি, একটি পারমাণবিক প্রোটিন যা প্রসারণের সেলুলার মার্কার হিসেবে কাজ করে। WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে Akt এবং ERK1/2 সক্রিয়করণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, IF স্টেনিং টিউবুলোইনটার্স্টিশিয়াল এলাকায় Ki{21}পজিটিভ সেল সংখ্যার একটি নাটকীয় বৃদ্ধি সনাক্ত করেছে। বিপরীতে, EphB2-7-ইঁদুরগুলি IR-আহত কিডনিতে অনেক কম সংখ্যায় এবং কম দাগের তীব্রতা প্রদর্শন করে-67 যা স্বাভাবিক ক্ষতবিহীন কিডনির (চিত্র 7C, D) অনুরূপ। এই ডেটা ইঙ্গিত করে যে EphB2 মুছে ফেলা হয়েছে (EphB2)NF-kB-মধ্যস্থতা প্রদাহ, NADPH অক্সিডেস-মধ্যস্থ অক্সিডেস জেনারেশন এবং সক্রিয়করণ, এবং Akt-এবং ERK1/2-ইঁদুরের IR-আহত কিডনিতে মধ্যস্থতাকারী কোষের বিস্তারকে বাধা দেয়। সুতরাং, EphB2 (EphB2)সারগর্ভ জন্য প্রয়োজন হতে পারেরেনালপ্রদাহজনকএবং প্রসারিত প্রতিক্রিয়া যা ফাইব্রোসিসে অবদান রাখে।

চিত্র 6. প্রদাহজনক, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং প্রলিফারেটিভ মার্কারগুলির রেনাল প্রোটিনের মাত্রা

(A) NF-kBp65, Nox2,p47phox, p-Akt, perK1/2,t-ERK1/2, এবং GAPDH-এর ওয়েস্টার্ন ব্লট কনট্রাল্যাটারাল (CTL) এবং IR-আহত কিডনি থেকেEphB2 (EphB2)/ এবংEphB2-/-ইঁদুর। আণবিক ওজন ডানদিকে লেবেল করা হয়েছিল। n=5 প্রাণী/গোষ্ঠী।

(BF) গ্রাফগুলি NF-kB-p65 (B), Nox2 (C), p47Phox(D), p-Akt (E), perK1/2/t-ERK1/2 (F) এর জন্য ব্যান্ড ঘনত্ব পরিমাপের ফলাফলগুলিকে সংক্ষিপ্ত করেছে ), যথাক্রমে। *পি<0.05 vs.="">EphB2প্লাস / প্লাস CTL.#P<0.05 vs.="">EphB2*/ প্লাস আইআর-আহত কিডনি।

EphB2 এর কিডনিতে অ্যাপোপটোসিস হ্রাস পেয়েছে (EphB2)-/-আইআর আঘাতের পরে ইঁদুর

IR আঘাতের শিকার কিডনিগুলিও ব্যাপক রেনাল টিউবুলার এপিথেলিয়াল সেল অ্যাপোপটোসিস দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। CTL কিডনি (চিত্র 8A, B) এর তুলনায় WT ইঁদুরের IR-আহত কিডনি বিভাগে অ্যাপোপটোসিসের ক্ষেত্রে TUNEL স্টেনিং একটি উল্লেখযোগ্য উচ্চতা প্রদর্শন করেছে, যা EphB2-7মাউসে নাটকীয়ভাবে হ্রাস পেয়েছে। এই ফলাফল EphB2 ভূমিকা সমর্থন করে (EphB2)রেনাল ইনজুরিতে অ্যাপোপটোসিস এবং মেরামতের প্রক্রিয়া দমনে KO। EphB2 যেমন অতিরিক্ত প্রভাব (EphB2)IR-প্ররোচিত দীর্ঘস্থায়ী আঘাতের পরে EphB2-7-ইঁদুরের মধ্যে যে সীমিত ফাইব্রোসিস ঘটে তাও ব্যাখ্যা করতে পারে।

কিডনি উপর costanche

EphB2 (EphB2)সংকেত সম্পর্কিত profibrotic পথ

NanoString জিন এক্সপ্রেশন দ্বারা পরীক্ষিত 760 টি জিনের মধ্যে (চিত্র 9A, একটি জিন এক্সপ্রেশন হিটম্যাপ দেখানো হয়েছে), ডিফারেনশিয়াল জিন এক্সপ্রেশনের প্রমাণ ছিল (সামঞ্জস্য করা P<0.05)in the="" ir-injured="" kidney="" of="" wt="" mice="" relative="" to="" the="" wt="" ctl="" kidney="" (wt-ir="" vs.="" wt-ctl)="" for="" 506="" genes(356genes="" were="" up-regulated="" and="" 150="" genes="" were="" down-regulated)with="" an="" estimated="" false="" discovery="" rate="" of="" 5%.="" the="" up-regulated="" 356="" genes="" include="" all="" molecules="" that="" we="" have="" observed="" in="" their="" rna="" expression="" or="" protein="" production="" using="" real-time="" rt-pcr="" or="" western="" blot="" assay="" described="" above="" and="" these="" genes="" encode="" for="" fibrotic="" markers="" such="" as="" col-iol,="" col-iiol,="" col-ivαl,="" and="" fn;="" emt="" markers="" such="" as="" α-sma="" and="" vimentin;="" inflammatory="" factors="" and="" oxidative="" enzymes="" such="" as="" nf-kb,="" mcp-1,="" il-1β,="" and="" nox2;="" growth="" factors="" and="" proliferation="" markers="" such="" as="" tgfβ1,="" pai-1,="" pgdfrβ1,="" timp-1,="" mek="" kinase,="" akt-1="" and="" ki-67,="" and="" caspase-3,="" -4,="" and-12="" that="" regulate="" inflammation="" and="" apoptosis.="" however,="" all="" those="" increased="" markers="" that="" were="" significantly="" attenuated="" in="" the="" ir-injured="" kidney="" of=""> (EphB2)রিয়েল-টাইম RT-PCR বা উপরে বর্ণিত ওয়েস্টার্ন ব্লট অ্যাস দ্বারা নির্ধারিত WT ইঁদুর (KO-IR বনাম WT-IR) এর সাথে তুলনা KO ইঁদুরগুলিও NanoString জিন এক্সপ্রেশন অ্যাস দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছে। ডাউন-নিয়ন্ত্রিত জিনের মধ্যে রয়েছে সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ 1(SOD1)[28], হিম অক্সিজেনেস 1(Hmox1)[29], এবং থিওরেডক্সিন 1,2(Txn1,2)[30] যা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পরিবারে রয়েছে বলে মনে হয়। এই জিনগুলির হ্রাস আইআর-আহত WT কিডনিতে পরিলক্ষিত বর্ধিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে সম্পর্কিত। যাইহোক, SOD1 এবং Txn1, 2-তে এই ধরনের হ্রাস IR-আহত EphB2-তে ঘটেনি। (EphB2)KO কিডনি। স্পষ্টতই, ন্যানোস্ট্রিং জিন এক্সপ্রেশন অ্যাস একই সাথে একাধিক প্রার্থী জিন উন্মোচন করেছে যা IR-প্ররোচিতরেনালআঘাতএবং ফাইব্রোসিস। উল্লেখযোগ্যভাবে, 356টি আপ-নিয়ন্ত্রিত জিনের মধ্যে 230টি হ্রাস পেয়েছে (মোট 64.6 শতাংশ, সামঞ্জস্যপূর্ণ পি সহ<0.05)and 129="" of="" 150="" down-regulated="" genes="" were="" reversed="" to="" varying="" degrees（total="" 86%个,="" with="" adjusted=""><0.05）in the="" ir-injured="" kidney="" of="" ephb2-/-mice="" compared="" with="" wt="" mice(ko-ir="" vs.="" wt-ir).="" all="" those="" ameliorated="" molecules="" are="" involved="" in="" 50="" ameliorated="" annotated="" pathways="" (shown="" in="" figure="" 9b,="" a="" heatmap="" of="" pathway="" scores).="" among="" those,="" the="" common="" profibrotic="" pathways,="" shown="" in="" figure="" 9c,="" that="" will="" contribute="" to="" the="" development="" of="">রেনালফাইব্রোসিস, যেমন EMT এবং প্রদাহজনক এবং প্রসারিত পথগুলি, IR-আহত কিডনিতে লক্ষণীয়ভাবে সক্রিয় বা আপ-নিয়ন্ত্রিত হয়, কিন্তু IR-আহত EphB2-তে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত হয় (EphB2)KO কিডনি। আশ্চর্যজনকভাবে, এই বিশ্লেষণটি আরও প্রকাশ করেছে যে রেনাল টিউবুলার কোষের শক্তি বিপাক যেমন ডি নভো লাইপোজেনেসিস, গ্লুকোনিওজেনেসিস, কোলেস্টেরল বিপাক, পেরোক্সিসোম প্রলিফেরেটর-অ্যাক্টিভেটেড রিসেপ্টর (পিপিএআর) সিগন্যালিং, এবং বিশেষত ফ্যাটি অ্যাসিড বিপাক এবং এমআরএনএ অ্যান্টিঅক্সিডেন্টস (এমআরএনএ) হ্রাস পাওয়ার পাশাপাশি। হিটম্যাপে অক্সিডেটিভ স্ট্রেস পাথওয়ে হিসাবে তালিকাভুক্ত, চিত্র 9B), IR-আহত কিডনিতে ব্যাপকভাবে ধ্বংস হয়ে গেছে, IR-আহত EphB2-তে নাটকীয়ভাবে অধ্যবসায় করা হয়েছিল (EphB2)KO কিডনি (চিত্র 9D তে দেখানো হয়েছে)। এই ফলাফলগুলি আরও পরামর্শ দেয় যে বেশিরভাগ অণু জড়িত থাকেরেনালআঘাতএবং ফাইব্রোসিস EphB2 দ্বারা নিয়ন্ত্রিত বা সম্পর্কিত (EphB2)সংকেত উল্লেখযোগ্যভাবে, EphB2 (EphB2)সিগন্যালিং কিডনি রোগে মাইটোকন্ড্রিয়াল ফ্যাটি অ্যাসিড অক্সিডেশন এবং লিপোটক্সিসিটির মতো রেনাল টিউবুলার সেল মাইটোকন্ড্রিয়াল শক্তি বিপাকের সাথে জড়িত বা মধ্যস্থতা করতে পারে।

চিত্র 7.EphB2 (EphB2)KO IR আঘাতের পরে কিডনিতে ম্যাক্রোফেজ অনুপ্রবেশ এবং টিউবুলার কোষের বিস্তার হ্রাস করে IR ইনজুরির পর EphB2 প্লাস / প্লাস এবং EphB2-7ইঁদুরের (n=5/প্রতিটি) কিডনি বিভাগগুলি F4/80 (লাল)(A), Ki-67 (লাল) দিয়ে দাগযুক্ত ছিল (C), এবং DAPI/DNA (নীল) এবং কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছে। ম্যাগনিফিকেশন,×200. গ্রাফগুলি F4/80 প্লাস (B) এবং Ki-67 প্লাস সেল (D) এর ইমেজজে দ্বারা পরিমাপ করা ফলাফলের সংক্ষিপ্তসার।*P<0.05 vs.ephb2+/+="" contralateral="" kidney=""><0.05 vs.ephb2+/+="" ir-injured="">

চিত্র 8.EphB2 (EphB2)KO ইসকেমিয়া-রিপারফিউশন (IR) আঘাতের পরে কিডনিতে টিউবুলার সেল অ্যাপোপটোসিস হ্রাস করে (A) IR আঘাতের পর EphB2 plus/plus এবং EphB2-7- ইঁদুরের (n=5/প্রত্যেক) কিডনি বিভাগগুলিকে TUNEL(সবুজ), এবং DAPI/DNA(নীল) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং এটি ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল কনফোকাল মাইক্রোস্কোপি। ম্যাগনিফিকেশন, × 200। (বি) গ্রাফগুলি ইমেজজে দ্বারা পরিমাপকৃত TUNEL প্লাস কোষের ফলাফলের সংক্ষিপ্তসার।*P<0.05 vs.ephb2++="" contralateral="" kidney=""><0.05 vs.="" ephb2+="" ir-injured="">

পার্ট Ⅰ Ⅱ করতে এখানে ক্লিক করুন