পর্ব 1|হার্বা সিস্টানচে এক্সট্র্যাক্ট ইঁদুরের হৃদপিণ্ড এবং H9c2 কোষে মাইটোকন্ড্রিয়াল ATP জেনারেশন বাড়ায়

যোগাযোগ: emily.li@wecistanche.com

হোই ইয়ান লিউং এবং কাম মিং কো

বায়োকেমিস্ট্রি বিভাগ, হংকং ইউনিভার্সিটি অফ সায়েন্স অ্যান্ড টেকনোলজি, ক্লিয়ার ওয়াটার বে, হংকং এসএআর, চীন

কীওয়ার্ড: ATP,Cistanche deserticola, H9c2 কোষ, হৃদয়, মাইটোকন্ড্রিয়া

বিমূর্ত

এর ফার্মাকোলজিকাল ভিত্তি তদন্ত করতে "ইয়াং- উদ্দীপকভেষজ সিস্তানচে এর ক্রিয়া [এর শুকনো পুরো উদ্ভিদCistanche deserticolaYC Ma (Orobanchaceae)], চাইনিজ মেডিসিনে, মাইটোকন্ড্রিয়াল ATP উৎপাদন ক্ষমতার উপর Herba Cistanche এর মিথানল নির্যাসের প্রভাব একটি প্রাক্তন ভিভো ইঁদুরের হার্ট মডেল এবং একটি ইন সিটু H9c2 সেল অ্যাস ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়েছিল। হার্বা সিস্তানচে নির্যাস দিয়ে চিকিত্সা ইঁদুরের ক্ষেত্রে ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে মায়োকার্ডিয়াল মাইটোকন্ড্রিয়াল ATP উৎপাদন ক্ষমতা বৃদ্ধি করে, যেমন ভিট্রো পরিমাপের দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়। এটিপি উৎপাদন ক্ষমতার উদ্দীপনাটি পাইরুভেট দ্বারা সমর্থিত মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন পরিবহনে সমান্তরাল বর্ধনের সাথে যুক্ত ছিল কিন্তু সাক্সিনেট নয়। হার্বা সিস্তানচে চিকিৎসা মায়োকার্ডিয়াল মাইটোকন্ড্রিয়াল কমপ্লেক্স I এবং জটিল III ক্রিয়াকলাপগুলিকেও বাড়িয়েছে, জটিল I কার্যকলাপে উদ্দীপনার পরিমাণ আরও বড়। Herba Cistanche চিকিত্সা H9c2 কোষে মাইটোকন্ড্রিয়াল ATP উৎপাদন ক্ষমতা একটি ডোজ- এবং সময়-নির্ভর বৃদ্ধি করেছে। ফলাফল নির্দেশ করে যে Herba Cistanche চিকিৎসা করতে পারেমাইটোকন্ড্রিয়াল এটিপি প্রজন্ম বৃদ্ধিইঁদুরের হার্টে প্রাক্তন ভিভো এবং H9c2 কোষে সিটুতে, সম্ভবত এর মাধ্যমেঅক্সিডেটিভ ফসফোরিলেশন বাড়ানো.

Cistanche হৃদযন্ত্রের কার্যকারিতা উন্নত করতে পারে, রক্তচাপ কমাতে পারে এবং রক্তের লিপিড কমাতে পারে

ভূমিকা

"ইয়াং ইনভাইগোরেশন", যা চীনা ওষুধে শরীরের কার্যকারিতার সাধারণ বর্ধনকে মূর্ত করে, বিভিন্ন জৈব রাসায়নিক প্রক্রিয়া চালানোর জন্য শক্তির ব্যবহার জড়িত।

এই বিষয়ে, এটিপি, যা সেলুলার ফাংশন জ্বালানীতে শক্তির সার্বজনীন মুদ্রা, মূলত মাইটোকন্ড্রিয়ায় অক্সিডেটিভ ফসফোরিলেশনের মাধ্যমে উত্পন্ন হয়। আমরা অনুমান করেছি যে "ইয়াং উদ্দীপক" ভেষজমাইটোকন্ড্রিয়াল ATP উৎপাদন ক্ষমতা বাড়ানোর ক্ষমতা আছে(কো এট আল।, 2004)। এটি আমাদের সাম্প্রতিক অনুসন্ধান দ্বারা সমর্থিত যে "ইয়াং-উদ্দীপক" কিন্তু "ইয়িন-পুষ্টিকর" চাইনিজ টোনিফাইং ভেষজ মাউস হার্ট এক্স ভিভোতে মায়োকার্ডিয়াল এটিপি উৎপাদন ক্ষমতা বাড়াতে পারে (কো এট আল।, 2006)। Herba Cistanche, Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae) এর শুকনো সম্পূর্ণ পরজীবী উদ্ভিদ (ফুল ব্যতীত), একটি হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়'ঐতিহ্যবাহী চীনা ওষুধে ইয়াং-ইনভাইগোরেটিং' টোনিফাইং হার্ব (চেন, 1998), এবং এটি ইয়াং-ইনভিগোরেশনের জন্য ব্যবহৃত বেশ কয়েকটি চীনা পেটেন্ট ফর্মুলেশনে সবচেয়ে জনপ্রিয় উপাদান হিসাবে উপস্থিত হয়। চীন এবং জাপানে, হার্বা সিস্তানচে ইয়াং এর অভাবজনিত লক্ষণগুলির চিকিত্সার জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়। ফার্মাকোলজিকাল গবেষণায় ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছে যে হারবা সিস্তানচে পারেমুক্ত র্যাডিকেলগুলিকে মেরে ফেলুন(জিওং এট আল।, 1996),উপশমকারী উত্পাদন(লু, 1998),বিরোধী পক্বতা(লি এট আল।, 1990),antinociceptive এবং বিরোধী প্রদাহজনক প্রভাব(লিন এট আল।, 2002), এবংরোগ প্রতিরোধ ক্ষমতা বাড়ায়(উ এট আল।, 2005)। Herba Cistanche এর প্রধান সক্রিয় উপাদান হলphenylethanoid glycosides(Ouyang et al., 2003), যা পাওয়া গেছেঅ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল, অ্যান্টিস্ট্রেস এবং অ্যান্টিঅক্সিডেটিভবৈশিষ্ট্য (Xiong et al., 1998), সেইসাথে সংস্কৃতিযুক্ত নিউরনের উপর অ্যান্টি-অ্যাপোপ্টোটিক প্রভাব (Tian & Pu, 2005)। বর্তমান গবেষণায়, হার্বা সিস্তানচে-এর ইয়াং-উদ্দীপক ক্রিয়াকলাপের ফার্মাকোলজিক্যাল ভিত্তি তদন্ত করার জন্য, ইঁদুরের হার্ট এক্স ভিভো থেকে বিচ্ছিন্ন মাইটোকন্ড্রিয়াতে এটিপি উৎপাদন ক্ষমতার উপর হার্বা সিস্তানচে চিকিত্সার প্রভাব এবং সিটুতে সংস্কৃত H9c2 কার্ডিওমায়োসাইটগুলি পরীক্ষা করা হয়েছিল। এটিপি প্রজন্মের অন্তর্নিহিত জৈব রাসায়নিক প্রক্রিয়াটি অন্বেষণ করতে-বর্ধক ক্রিয়া, মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেকট্রন পরিবহনের উপর হারবা সিস্তানচে চিকিত্সার প্রভাব এবং ইঁদুরের হৃদয়ে জটিল I-IV কার্যকলাপগুলিও পরীক্ষা করা হয়েছিল।

Cistanche এর কার্যকরী উপাদান বিভিন্ন সক্রিয় অক্সিজেন মুক্ত র‌্যাডিকেলকে ধ্বংস করতে পারে

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

রাসায়নিক, কোষ সংস্কৃতি এবং ভেষজ পদার্থ

ATP, ADP, এবং 3-[4,5-dimethylthiozol-2-yl]-2,5-ডিফেনাইল-টেট্রাজোলিয়াম ব্রোমাইড (MTT) সিগমা কেমিক্যাল কোম্পানি থেকে কেনা হয়েছিল (সেন্ট লুইস, MO, USA)। Luciferase সমাধান (ATPlite) PerkinElmer (বোস্টন, MA, USA) থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। Dulbecco-এর পরিবর্তিত ঈগলের মাধ্যম (DMEM) এবং ভ্রূণের বোভাইন সিরাম (FBS) GIBCO BRL Life Technologies (Grand Island, NY, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। H9c2 সেল লাইনটি ATTC (রকভিল, MD, USA) থেকে কেনা হয়েছিল। Herba Cistanche একজন স্থানীয় ভেষজ ব্যবসায়ী (Lee Hoong Kee) সরবরাহ করেছিলেন। ভেষজটি সরবরাহকারী দ্বারা প্রমাণিত হয়েছিল, এবং একটি ভাউচার নমুনা (HKUSTY00301) জৈব রসায়ন বিভাগে জমা করা হয়েছিল, হংকং ইউনিভার্সিটি অফ সায়েন্স অ্যান্ড টেকনোলজি (HKUST)-এ।

ভেষজ নিষ্কাশন

Herba Cistanche (100g) ছোট ছোট টুকরো করে কেটে তারপর রিফ্লাক্সের নিচে 300 মিলি মিথানলে 65◦C তাপমাত্রায় ২ ঘণ্টার জন্য গরম করে বের করা হয়। পদ্ধতিটি দুবার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল। পুল করা নির্যাসটি কম চাপে দ্রাবককে বাষ্পীভূত করে শুকানো হয়েছিল, এবং হার্বা সিস্তানচে-এর মিথানল নির্যাস 39 শতাংশ (w/w) ফলনে প্রাপ্ত হয়েছিল। রাসায়নিক বিশ্লেষণে ইঙ্গিত করা হয়েছে যে হার্বা সিস্তানচে-এর মিথানল নির্যাসটিতে যথাক্রমে 1.62 শতাংশ (w/w), 0.08 শতাংশ, 0.15 শতাংশ এবং 75.6 শতাংশ ঘনত্বে মোট স্যাপোনিন, মোট ফ্ল্যাভোনয়েড, মোট লিগনান এবং পলিস্যাকারাইড রয়েছে।

পশু যত্ন

প্রাপ্তবয়স্ক পুরুষ Sprague-Dawley ইঁদুর (8-10 সপ্তাহ; 250-300g) একটি 12-ঘণ্টা অন্ধকার/আলো চক্রের অধীনে একটি বায়ু/আর্দ্রতা-নিয়ন্ত্রিত ঘরে প্রায় 22◦C তাপমাত্রায় রক্ষণাবেক্ষণ করা হয়েছিল এবং খাদ্য ও জলের অনুমতি দেওয়া হয়েছিল HKUST এ পশুর যত্নের সুবিধাগুলিতে। পরীক্ষামূলক প্রোটোকল HKUST এ গবেষণা অনুশীলন কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল।

ওষুধের চিকিৎসা

প্রাণীদের এলোমেলোভাবে দলে বিভক্ত করা হয়েছিল, প্রতিটিতে পাঁচ থেকে ছয়টি প্রাণী ছিল। চিকিত্সা গোষ্ঠীগুলিতে, ইঁদুরগুলিকে 3 দিনের জন্য প্রতিদিনের ডোজ ({{0}}.031–0.5 গ্রাম/কেজি) বৃদ্ধিতে হার্বা সিস্তানচে (জলে দ্রবীভূত/ঝুলিয়ে দেওয়া) মিথানল নির্যাস দিয়ে ইন্ট্রাগাস্ট্রিকভাবে পরিচালিত হয়েছিল। নিয়ন্ত্রিত প্রাণী শুধুমাত্র জল পেয়েছি. শেষ ডোজ দেওয়ার চব্বিশ ঘন্টা পরে, হার্ট ফেনোবারবিটাল-অ্যানেথেসাইজ করা প্রাণী থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণের শিকার হয়েছিল।

মাইটোকন্ড্রিয়াল ভগ্নাংশের প্রস্তুতি এবং এটিপি উৎপাদন ক্ষমতা (এটিপি-জিসি) এক্স ভিভোর পরিমাপ

হার্টের বাম ভেন্ট্রিকুলার টিস্যুর নমুনাগুলিকে বরফ-ঠাণ্ডা আইসোটোনিক বাফার (0.32 এম সুক্রোজ, 1 মিমি ইডিটিএ, 50 মিমি ট্রিস/এইচসিএল, পিএইচ 7.4) দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। কার্ডিয়াক মাইটোকন্ড্রিয়াল ভগ্নাংশগুলি 4◦C তাপমাত্রায় আইসোটোনিক বাফারে ডিফারেনশিয়াল সেন্ট্রিফিউগেশন দ্বারা প্রস্তুত করা হয়েছিল। একটি 10 ​​শতাংশ (w/v) কার্ডিয়াক হোমোজেনেট 20-30 সম্পূর্ণ স্ট্রোকের জন্য 4000 rpm-এ টেফলন-গ্লাস হোমোজেনাইজার দিয়ে কিমা করা ভেন্ট্রিকুলার টিস্যুকে একত্রিত করে প্রস্তুত করা হয়েছিল। নিউক্লিয়াস এবং কোষের ধ্বংসাবশেষ অপসারণের জন্য হোমোজেনেটকে 10 মিনিটের জন্য 600 × g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। মাইটোকন্ড্রিয়া (ইভান, 1992) পলল করার জন্য 30 মিনিটের জন্য সুপারনাট্যান্টকে 8000 × g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। পেলেটগুলি আইসোটোনিক বাফারের 1 এমএল-এ পুনরায় স্থগিত করা হয়েছিল এবং মাইটোকন্ড্রিয়াল ভগ্নাংশগুলিকে পুনর্গঠন করা হয়েছিল। চিকিত্সাবিহীন প্রাণীদের মাইটোকন্ড্রিয়াল এটিপি-জিসি লেউং এট আল এর পদ্ধতি দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। (2005)

সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডগুলি অঙ্গগুলির শারীরবৃত্তীয় অবক্ষয় এবং কোষের মরফোলজির অবক্ষয়কে বিলম্বিত করতে পারে

মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন পরিবহনের পরিমাপ

বিচ্ছিন্ন মাইটোকন্ড্রিয়ায় ইলেক্ট্রন পরিবহনের পরিমাপ, যা কোহেন এট আল দ্বারা বর্ণিত [1] অনুসারে এমটিটি হ্রাসের উপর ভিত্তি করে। (1997)। মাইটোকন্ড্রিয়া একটি ইনকিউবেশন বাফার (250 mM সুক্রোজ, 50 mM HEPES, 10 mM KH2PO4, 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA, pH 7.4) সহ 1 mg/mL প্রোটিন ঘনত্বে প্রস্তুত করা হয়েছিল . মাইটোকন্ড্রিয়ার একটি অ্যালিকোট (40 µL) 100 µL প্রতিটি 15 mM পাইরুভেট বা 0.5 mM সাকিনেট এবং 0.42 mg/mL MTT এর সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি 37◦C তাপমাত্রায় 10 মিনিটের জন্য মৃদু ঝাঁকুনি দিয়ে সেদ্ধ করা হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, 100 μL লাইসিস বাফার (10 শতাংশ, w/v, সোডিয়াম ডোডেসিল সালফেট, এবং 45 শতাংশ ডাইমেথাইলফর্মাইড, গ্লাসিয়াল অ্যাসিটিক অ্যাসিডের সাথে pH 4.7 এ সামঞ্জস্য করা) যোগ করে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি বন্ধ করা হয়েছিল। 5 মিনিটের জন্য দাঁড়িয়ে থাকার পরে, প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের শোষণ রিডিং একটি মাইক্রোটাইটার প্লেট রিডার (বায়ো-র্যাড, হারকিউলিস, সিএ, ইউএসএ) দিয়ে নেওয়া হয়েছিল এবং 570 এনএম এবং 630 এনএমের মধ্যে পার্থক্য হিসাবে রিপোর্ট করা হয়েছিল। ডেটা নিয়ন্ত্রণের গড় মানের শতাংশ হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল (অর্থাৎ, হারবা সিস্তানচে-অচিকিৎসা করা) গ্রুপ।

সেল সংস্কৃতি

H9c2 কোষ, কার্ডিয়াক মায়োব্লাস্ট (Hescheler et al., 1991) থেকে প্রাপ্ত একটি স্থায়ী কোষ রেখা, DMEM-এ 10 শতাংশ (v/v) FBS এর সাথে সম্পূরক হিসাবে মনোলেয়ার হিসাবে সংস্কৃতি করা হয়েছিল। মাধ্যমটিতে রয়েছে গ্লুকোজ (4.5 g/L) এবং গ্লুটামিন (4.5 mM), NaHCO3 (17 mM), পেনিসিলিন (100 IU/mL), এবং স্ট্রেপ্টোমাইসিন (100µg/mL) এর সাথে সম্পূরক। সমস্ত কোষ 37◦C তাপমাত্রায় বাতাসে 5 শতাংশ (v/v) CO2 এর বায়ুমণ্ডলে জন্মেছিল। মাধ্যমটি প্রতি 2 বা 3 দিনে তাজা মাধ্যম দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল। কোষের একটি স্টক একটি 75 সেমি 2 কালচার ফ্লাস্কে জন্মানো হয়েছিল এবং 1:10 এর উপচাষ অনুপাতে সঙ্গমের আগে বিভক্ত হয়েছিল। ATP-GC পরীক্ষার জন্য, H9c2 কোষগুলিকে 2.5 × 104 কোষের ঘনত্বে/কূপে একটি 24-কূপ প্লেটে বসানো হয়েছিল। কোষ সংযুক্তির পরে, হার্বা সিস্টানচে নির্যাস (ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইনে দ্রবীভূত; পিবিএস) মাঝারিভাবে প্রয়োগ করা হয়েছিল, এবং কোষগুলি ক্রমবর্ধমান সময়ের জন্য (2-16 ঘন্টা) সময়ের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। নিয়ন্ত্রণ (চিকিত্সাহীন) কোষগুলিকে কেবল পিবিএস দেওয়া হয়েছিল।

ATP-GC-এর পরিমাপ

ক্রমবর্ধমান ঘনত্ব (5{{10}}–300µg/mL) হার্বাসিস্টানচে নির্যাস দিয়ে ইনকিউবেশনের নির্দেশিত সময়কালের পরে, এটিপি-জিসি পরীক্ষা করা হয়েছিল। মাধ্যমটি উচ্চাকাঙ্খিত ছিল এবং কোষগুলিকে একটি ইনকিউবেশন বাফারে ডিজিটোনিন (50µg/mL) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল (120 mM KCl, 5 mMKH2PO4, 2 mM EGTA, 10 mM HEPES, 0.1 mM MgCl2,0.5 শতাংশ BSA, pH37 মিনিটে)। ◦C. ডিজিটোনিনকে উচ্চাকাঙ্ক্ষা করার পরে, গ্লুটামেট (5 মিমি), ম্যালেট (5 মিমি), এবং এডিপি (60µM) মাইটোকন্ড্রিয়াল এটিপি তৈরির জন্য কোষগুলিতে যুক্ত করা হয়েছিল, যা 0 থেকে 15 মিনিটের মধ্যে বর্ধিত সময়ের ব্যবধানে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। 60 μL পার্ক্লোরিক অ্যাসিড (30 শতাংশ , w/v) যোগ করার মাধ্যমে প্রতিক্রিয়াটি বন্ধ করা হয়েছিল এবং প্রতিক্রিয়া মিশ্রণগুলিকে 4◦C তাপমাত্রায় 10 মিনিটের জন্য 600 × g সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। নিরপেক্ষকরণের জন্য 1.4 M KHCO3 এর 90 μL এর সাথে সুপারনাট্যান্টের একটি অ্যালিকোট (120 µL) মিশ্রিত করা হয়েছিল। মিশ্রণগুলিকে আবার 600 × g 4◦C তাপমাত্রায় কেন্দ্রীভূত করা হয়েছিল এবং পূর্বে বর্ণিত ATP বিষয়বস্তুর জন্য সুপারনাট্যান্টগুলি পরিমাপ করা হয়েছিল। অপরিশোধিত কোষগুলির ATP-GC অনুমান করা হয়েছিল গ্রাফ (AUC1) এর বক্ররেখার নীচের এলাকা গণনা করে ATP উৎপন্ন (nmol/mg প্রোটিন) সময়ের বিপরীতে (0-15 মিনিট) এবং নির্বিচারে এককে প্রকাশ করে। HerbaCistanche-চিকিত্সা করা কোষগুলির জন্য, ক্রমবর্ধমান ইনকিউবেশন সময়ের (3, 5, 7, 10, এবং 15 মিনিট) AUC1 মানগুলি চিকিত্সা না করা নমুনা থেকে একটি স্বতন্ত্র গড় নিয়ন্ত্রণ মানতে স্বাভাবিক করা হয়েছিল এবং শতাংশ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। তারপরে, ইনকিউবেশন সময়ের (3-15 মিনিট) বিপরীতে গ্রাফ প্লটিং শতাংশ নিয়ন্ত্রণের মানগুলির কার্ভ (AUC2) এর অধীনে এলাকা গণনা করা হয়েছিল এবং নির্বিচারে এককগুলিতে প্রকাশ করা হয়েছিল। হারবা সিস্তানচে-চিকিত্সা করা গোষ্ঠীগুলির ডেটা সমীকরণ থেকে নিয়ন্ত্রণের শতাংশ হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল:

[AUC2(HerbaCistanche - চিকিত্সা করা)/AUC2(অচিকিৎসিত)]×100 শতাংশ

জটিল I–IV এবং সাইট্রেট সিন্থেস অ্যাক্টিভিটিগুলির পরিমাপ

মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন ট্রান্সপোর্ট চেইন (ETC) কমপ্লেক্স I–III ক্রিয়াকলাপগুলি বর্ণালী-নির্দিষ্ট সাবস্ট্রেট ব্যবহার করে স্পেকট্রোফটোমেট্রিক পদ্ধতি দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল (complexI-এর জন্য NADH, কমপ্লেক্স II-এর জন্য succinate, এবং complexIII-এর জন্য decylubiquinol) বর্ণনা করা হয়েছে (Grad & Lemire, 2004; Hsu et al. , 2005; মার্ক এট আল।, 2001)। সিগমা থেকে সাইটোক্রোম সি অক্সিডেস অ্যাস কিট ব্যবহার করে জটিল IV কার্যকলাপ পরিমাপ করা হয়েছিল। মাইটোকন্ড্রিয়াল সাইট্রেট সিন্থেস কার্যকলাপ Srere (1969) পদ্ধতি দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল।

প্রোটিন পরীক্ষা

মাইটোকন্ড্রিয়াল ভগ্নাংশ এবং সেলিসেটগুলির প্রোটিনের ঘনত্ব একটি বায়োরাড প্রোটিন অ্যাসেকিট ব্যবহার করে বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিনকে স্ট্যান্ডার্ড হিসাবে ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল ({{0}}.038–0.600mg/mL)৷

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

সমস্ত ডেটা থিম (SEM) এর গড় ± স্ট্যান্ডার্ড ত্রুটি হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। এগুলি একমুখী বিশ্লেষণের (ANOVA) দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। পোস্ট-হক একাধিক তুলনা এলএসডির সাথে করা হয়েছিল। পি মান<0.05 were="" regarded="" as="" statistically="">

ফলাফল

ইঁদুরের মায়োকার্ডিয়ালমিটোকন্ড্রিয়াল এটিপি-জিসি-তে হার্বা সিস্টানচে চিকিত্সার প্রভাব

চিত্র 1-এ দেখানো হয়েছে, হার্বা সিস্টানচে নির্যাস দিয়ে 0.5 গ্রাম/কেজি পর্যন্ত মাত্রায় চিকিত্সা ইঁদুরের ক্ষেত্রে ডোজ-নির্ভর পদ্ধতিতে মায়োকার্ডিয়াল মাইটোকন্ড্রিয়াল ATP-GC বৃদ্ধি করে, একটি ডোজে উদ্দীপনার মাত্রা 89 শতাংশ। 0.5 গ্রাম/কেজি।

ইঁদুরের হৃদয়ে মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন পরিবহনে হারবা সিস্টানচে চিকিত্সার প্রভাব

বিচ্ছিন্ন মাইটোকন্ড্রিয়াতে ইলেকট্রন পরিবহনের পরিমাণ MTT হ্রাস পর্যবেক্ষণ করে পরিমাপ করা হয়। পরীক্ষার জন্য ব্যবহৃত সাবস্ট্রেটটি হয় পাইরুভেট বা সাক্সিনেট ছিল।

চিত্র 1. ইঁদুরের হৃৎপিণ্ডে মাইটোকন্ড্রিয়াল এটিপি উৎপাদন ক্ষমতার উপর হার্বা সিস্তানচে চিকিত্সার প্রভাব এক্স ভিভো

প্রতিটি বার এন {{0}} সহ থিম ± SEM প্রতিনিধিত্ব করে। পশুদের মৌখিকভাবে 3 দিনের জন্য নির্দেশিত দৈনিক ডোজে HerbaCistanche দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। ATP উৎপাদন ক্ষমতা "উপাদান এবং পদ্ধতি" এ বর্ণিত হিসাবে পরিমাপ করা হয়েছিল। ডেটা সংশ্লিষ্ট অচিকিৎসাহীন নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর মান (AUC2) সম্পর্কিত শতাংশ নিয়ন্ত্রণে প্রকাশ করা হয়েছিল। ∗ সংশ্লিষ্ট অচিকিৎসাহীন নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন; 0.5 গ্রাম/কেজি হার্বা সিস্টানচে-চিকিত্সা করা গ্রুপ থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে আলাদা।

চিত্র 2. ইঁদুরের হৃদয়ে মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন পরিবহনে হার্বা সিস্টানচে চিকিত্সার প্রভাব

প্রতিটি বার n {{0}} সহ গড় ± SEM প্রতিনিধিত্ব করে। (a) Pyruvate-সমর্থিত (b) succinate-সমর্থিত মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেক্ট্রন পরিবহন MTT হ্রাস দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল, যেমন "উপাদান এবং পদ্ধতি" বর্ণনা করা হয়েছে। ডেটা চিকিত্সা না করা নিয়ন্ত্রণ মানগুলির শতাংশে প্রকাশ করা হয়েছিল [পাইরুভেট-সমর্থিত: OD570nm− OD630nm =0৷{17}}206 ± 0.0001 (SEM), n {{ 10}}; succinate-সমর্থিত: পুরুষ, 0.255 ±0.015, n=5]। ∗ সংশ্লিষ্ট অপরিশোধিত নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন; 0.5 গ্রাম/কেজি গ্রুপ থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন।

চিত্র 2a তে দেখানো হয়েছে, হার্বা সিস্তানচে চিকিত্সা ডোজ-নির্ভরভাবে ইঁদুরের হৃদয়ে পাইরুভেট দ্বারা সমর্থিত মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেকট্রনট্রান্সপোর্টের পরিমাণ বাড়িয়েছে, সর্বোত্তম উদ্দীপনা 0.5 গ্রাম/কেজি ডোজগুলিতে পর্যবেক্ষণযোগ্য। যাইহোক, হারবা সিস্তানচে-চিকিত্সা করা ইঁদুরের হার্টে (চিত্র 2b) সাক্সিনেট দ্বারা সমর্থিত মাইটোকন্ড্রিয়াল ইলেকট্রন পরিবহনের পরিমাণে কোনও উল্লেখযোগ্য পরিবর্তন সনাক্ত করা যায়নি।

পার্ট 2 এর জন্য,এখানে ক্লিক করুন.