নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি এবং PI3K/AKT পাথওয়ে মডুলেশনের মাধ্যমে বেনাইন প্রোস্ট্যাটিক হাইপারপ্লাসিয়ার চিকিৎসায় সিস্টানচে-ভিত্তিক যৌগের পরীক্ষামূলক বৈধতা

বিমূর্ত

উদ্দেশ্য:
অন্বেষণ করতেCistanche-ভিত্তিক যৌগ কণিকাগুলির প্রতিরোধমূলক এবং থেরাপিউটিক প্রভাবঅনসৌম্য প্রোস্ট্যাটিক হাইপারপ্লাসিয়া (BPH)এবং মাধ্যমে অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়া ব্যাখ্যানেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি ভবিষ্যদ্বাণীসঙ্গে মিলিতভিভো প্রাণী পরীক্ষায়.

 

 

 

উচ্চ সক্রিয় উপাদান সহ Cistanche-ভিত্তিক ভেষজ বড়ি

যান পণ্য তালিকা আরো বিস্তারিত পেতে

---

 

 

 

পদ্ধতি:
(1) সক্রিয় উপাদানএরCistanche deserticolaএবং অন্যান্য সহায়ক ভেষজ এর মাধ্যমে স্ক্রীন করা হয়েছিলTCMSP ডাটাবেস, সাহিত্য খনির দ্বারা পরিপূরক. এই ফাইটোকেমিক্যালগুলির লক্ষ্যগুলি ব্যবহার করে পূর্বাভাস দেওয়া হয়েছিলপাবকেম, সুইস টার্গেট পূর্বাভাস, এবংতুলনামূলক টক্সিকোজেনোমিক্স ডেটাবেস (CTD). বিপিএইচ-সম্পর্কিত লক্ষ্যগুলি থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিলজিনকার্ড, সিটিডি, ড্রাগব্যাঙ্ক, এবংডিজেনেট. ছেদ বিশ্লেষণ চিহ্নিত125 সম্ভাব্য থেরাপিউটিক লক্ষ্যBPH চিকিত্সার মধ্যে Cistanche. কপ্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া (পিপিআই) নেটওয়ার্কব্যবহার করে নির্মিত হয়েছিলSTRING, এবংGO এবং KEGG পাথওয়ে সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণমাধ্যমে সঞ্চালিত হয়মেটাস্কেপ. একটি ব্যাপক"হার্ব-কম্পাউন্ড-টার্গেট-পাথওয়ে" নেটওয়ার্কব্যবহার করে কল্পনা করা হয়েছিলসাইটোস্কেপ, এবং মূল লক্ষ্যগুলির মাধ্যমে যাচাই করা হয়েছিলআণবিক ডকিংব্যবহার করেঅটোডক ভিনা.

(2) ষাটটি পুরুষ ইঁদুর এলোমেলোভাবে ছয়টি গ্রুপে বিভক্ত ছিল: নিয়ন্ত্রণ, মডেল, ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (কিয়ানলি শুটংক্যাপসুল, 0.324 গ্রাম/কেজি), এবং তিনটি ডোজ গ্রুপCistanche যৌগিক দানা(উচ্চ: 3.24 গ্রাম/কেজি, মাঝারি: 1.62 গ্রাম/কেজি, কম: 0.81 গ্রাম/কেজি)। BPH দ্বারা প্ররোচিত হয়কাস্ট্রেশন এবং টেস্টোস্টেরন প্রোপিওনেট ইনজেকশন. ইঁদুর 30 দিনের জন্য প্রতিদিন মৌখিক চিকিত্সা গ্রহণ করে। প্রোস্টেট ভেজা ওজন এবং সূচক গণনা করা হয়েছিল। এর সিরাম মাত্রাCOX-2, ভিইজিএফ, এবংPGE2ELISA এর মাধ্যমে পরিমাপ করা হয়েছিল।হিস্টোপ্যাথলজিকাল পরিবর্তনHE staining দ্বারা পরিলক্ষিত হয়, এবংপ্রোটিন অভিব্যক্তিএরAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, এবংভিইজিএফওয়েস্টার্ন ব্লটের মাধ্যমে মূল্যায়ন করা হয়েছিল।

 

ফলাফল:
(1) মোট260 যৌগ লক্ষ্য, 1,584 বিপিএইচ-সম্পর্কিত লক্ষ্যমাত্রা, এবং125 ওভারল্যাপিং থেরাপিউটিক লক্ষ্যচিহ্নিত করা হয়েছিল। মূল লক্ষ্য অন্তর্ভুক্তAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3, এবংPTGS2. সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণ ইঙ্গিত যেIL-17, HIF-1, TNF, এবংPI3K-AKT সিগন্যালিং পথগুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করুন। কোর সক্রিয় উপাদান যেমনluteolin, এপিজেনিন, প্লান্টেন গ্লাইকোসাইড, ম্যাঙ্গিফেরিন, এবংআইসোভিটেক্সিনমত লক্ষ্যের সাথে দৃঢ় বাঁধাই সম্বন্ধ প্রদর্শন করেছেAKT1, PTGS2, CASP3, এবংIL6, বাঁধাই শক্তি সহ -6 kcal/mol এর কম বা সমান।

(2) ভিভোর ফলাফলে তা দেখা গেছেCistanche granules উল্লেখযোগ্যভাবে প্রস্টেট ওজন এবং সূচক হ্রাস(P <0.05 বা P <0.01), উন্নতগ্রন্থি গঠনএবং উপশমএপিথেলিয়াল হাইপারপ্লাসিয়া. এর সিরাম মাত্রাCOX-2, PGE2, এবংভিইজিএফউল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। এর অভিব্যক্তিp-AKT1, p-PI3K, COX-2, এবংভিইজিএফপ্রোস্টেট টিস্যুতে উল্লেখযোগ্যভাবে নিয়ন্ত্রিত ছিল (P <0.05 বা P <0.01)।

উপসংহার:
এই গবেষণা প্রাথমিক প্রমাণ প্রদান করে যেCistanche-ভিত্তিক ভেষজ থেরাপিexertsBPH এর বিরুদ্ধে প্রতিরোধমূলক এবং থেরাপিউটিক প্রভাব, প্রাথমিকভাবে এর মড্যুলেশনের মাধ্যমেPI3K/AKT সিগন্যালিং পাথওয়ে, বাধাCOX-2 এবং PGE2, এবং দমনভিইজিএফ-মধ্যস্থ প্রোস্ট্যাটিক কোষের বিস্তার. মূল বায়োঅ্যাকটিভ উপাদান যেমনপ্লান্টেন গ্লাইকোসাইড, ম্যাঙ্গিফেরিন, এবংluteolinপ্রধান ফার্মাকোলজিক্যাল এজেন্ট হিসেবে কাজ করতে পারে। এই ফলাফল সম্ভাব্য সমর্থনCistanche নির্যাসএকটি হিসাবেপ্রোস্টেট স্বাস্থ্যের জন্য প্রাকৃতিক প্রতিকার.

 

 

কীওয়ার্ড:

Cistanche deserticola; Cistanche নির্যাস; সৌম্য prostatic hyperplasia (BPH); নেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি; PI3K/AKT পথ; VEGF; COX-2; PGE2; প্রোস্টেট প্রদাহ; প্রাকৃতিক প্রোস্টেট প্রতিকার; BPH জন্য ভেষজ চিকিত্সা; ঐতিহ্যগত চীনা ঔষধ; ফাইটোথেরাপি; আণবিক ডকিং; ইঁদুর মডেল

পটভূমি

বেনাইন প্রোস্ট্যাটিক হাইপারপ্লাসিয়া (BPH)মধ্যবয়সী এবং বয়স্ক পুরুষদের মধ্যে একটি সাধারণ ইউরোলজিক্যাল ব্যাধি। প্রাথমিক পর্যায়ে, BPH প্রস্রাবের ফ্রিকোয়েন্সি, জরুরিতা, দ্বিধা এবং অসম্পূর্ণ শূন্যতা দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। রোগের বিকাশের সাথে সাথে আরও গুরুতর লক্ষণ যেমন হেমাটুরিয়া, বেদনাদায়ক প্রস্রাব, মূত্রাশয় পাথর এবং এমনকি কিডনি কার্যকারিতা দেখা দিতে পারে [1-2]। অধ্যয়নগুলি [৩] দেখিয়েছে যে বয়সের সাথে সাথে BPH এর প্রকোপ বৃদ্ধি পায়, 50 বছরের বেশি বয়সী 50% পুরুষদের প্রভাবিত করে, এইভাবে উল্লেখযোগ্যভাবে জীবনযাত্রার মান নষ্ট করে।

বর্তমান BPH চিকিত্সা প্রধানত অন্তর্ভুক্তফার্মাসিউটিক্যালস এবং অস্ত্রোপচারের হস্তক্ষেপ, যা হতে পারেপার্শ্ব প্রতিক্রিয়া, জটিলতা এবং দীর্ঘমেয়াদী ফলাফল[৪-৭]। অতএব,ট্র্যাডিশনাল চাইনিজ মেডিসিন (TCM)ফর্মুলেশন যে হয়কম পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া সহ ক্লিনিক্যালি কার্যকরBPH-এর বিকল্প থেরাপি হিসাবে ক্রমবর্ধমান মনোযোগ অর্জন করেছে।

Cistanche-ভিত্তিক ভেষজ দানাপ্রস্রাবের অবস্থার মধ্যে প্রদাহ বিরোধী, মূত্রবর্ধক, এবং টিস্যু-প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব প্রদর্শন করেছে। পূর্ববর্তী গবেষণা [9-10] দেখিয়েছে যে ভেষজ প্রেসক্রিপশন প্রাথমিকভাবে এর উপর ভিত্তি করেCistanche deserticolaপ্রয়োগপ্রতিরক্ষামূলক প্রভাবপশু মডেলে BPH এর বিরুদ্ধে। আমাদের গ্রুপের প্রাথমিক গবেষণা [১১] পরামর্শ দেয় যে এই সূত্রটি প্রোস্ট্যাটিক প্রদাহ কমাতে পারেপ্রদাহজনক মধ্যস্থতাকারীদের বাধা দেয়যেমনCOX-2, PGE2, IL-6, এবংTNF-. যেহেতুপ্রোস্টাটাইটিস প্রায়ই একটি কমরবিড অবস্থা যা BPH বাড়িয়ে তোলে, এই গবেষণা মূল্যায়ন লক্ষ্যকর্মের প্রক্রিয়া এবং থেরাপিউটিক সম্ভাবনাএর aCistanche-ভিত্তিক যৌগব্যবহার করেনেটওয়ার্ক ফার্মাকোলজি এবং ভিভো ভ্যালিডেশনেBPH এর একটি ইঁদুর মডেলে।

Wecistanche-এর সহায়ক পরিষেবা- পাইকারি মূল্য পেতে আমাদের সাথে যোগাযোগ করুন
ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/টেল:+86 15292862950

 

1. উপকরণ এবং পদ্ধতি

1.1 পরীক্ষামূলক প্রাণী

গুয়াংজি মেডিকেল ইউনিভার্সিটির ল্যাবরেটরি অ্যানিমাল সেন্টার (লাইসেন্স: SCXK [গুই] 2020-0003) দ্বারা মোট 70 টি এসপিএফ-গ্রেডের পুরুষ এসডি ইঁদুর (180-220 গ্রাম) সরবরাহ করা হয়েছিল। প্রাণী প্রোটোকলগুলি প্রাতিষ্ঠানিক প্রাণী নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা অনুমোদিত হয়েছিল (অনুমোদন নম্বর: GXBGMP20220602)। নিয়ন্ত্রিত তাপমাত্রা (23 ± 2 ডিগ্রী), আর্দ্রতা (60 ± 5%), এবং একটি 12-ঘন্টা আলো/অন্ধকার চক্র সহ স্ট্যান্ডার্ড অবস্থায় ইঁদুরদের রাখা হয়েছিল।

1.2 ওষুধ এবং বিকারক

Cistanche যৌগিক দানা (ট্রায়াল ফর্মুলেশন)

ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ: Qianlie Shutong ক্যাপসুল (0.324 গ্রাম/কেজি)

টেস্টোস্টেরন প্রোপিওনেট ইনজেকশন (15 মিলিগ্রাম/কেজি)

COX-2, PGE2, VEGF-এর জন্য ELISA কিট

অ্যান্টিবডি: অ্যান্টি-AKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, VEGF, GAPDH

ওয়েস্টার্ন ব্লট রিএজেন্ট, এসডিএস-পেজ জেল এবং ইমেজিং সিস্টেম

সমস্ত রিএজেন্ট নির্ভরযোগ্য দেশীয় এবং আন্তর্জাতিক সরবরাহকারীদের কাছ থেকে কেনা হয়েছিল

1.3 সরঞ্জাম

বিশ্লেষণাত্মক ভারসাম্য (0.0001g নির্ভুলতা)

উল্টানো জৈবিক মাইক্রোস্কোপ (অলিম্পাস IX73)

মাইক্রোপ্লেট রিডার (Tecan M200)

ওয়েস্টার্ন ব্লট সিস্টেম (বায়ো-র্যাড)

ইমেজিং স্টেশন (GE Imager 680)

1.4 Cistanche সক্রিয় যৌগগুলির জন্য লক্ষ্য পূর্বাভাস

এর সক্রিয় উপাদানCistanche deserticolaএবং অন্যান্য পরিপূরক ভেষজ থেকে পুনরুদ্ধার করা হয়েছেTCMSP ডাটাবেস, দ্বারা ফিল্টার করা হয়েছেমৌখিক জৈব উপলভ্যতা (OB 30% এর চেয়ে বেশি বা সমান)এবংড্রাগ-সদৃশতা (ডিএল 0.18 এর চেয়ে বড় বা সমান). এই থ্রেশহোল্ডগুলি পূরণ করে না এমন সাহিত্য-যাচাই করা বায়োঅ্যাকটিভ যৌগগুলিও অন্তর্ভুক্ত ছিল। সম্ভাব্য লক্ষ্যমাত্রা ভবিষ্যদ্বাণী করা হয়েছিলপাবকেম, সুইস টার্গেট প্রেডিকশন, এবংসিটিডি, উচ্চ GI শোষণ এবং অনুকূল ADME বৈশিষ্ট্যের জন্য ফিল্টার ব্যবহার করে।

1.5 বিপিএইচ-সম্পর্কিত লক্ষ্যগুলির সনাক্তকরণ

"BPH" সহ একাধিক ডাটাবেসে অনুসন্ধান করা হয়েছিলডিজেনেট, সিটিডি, জিনকার্ড, এবংড্রাগব্যাঙ্করোগ-সম্পর্কিত লক্ষ্য সংগ্রহ করতে। শুধুমাত্র মধ্যম মানের উপরে প্রাসঙ্গিক স্কোর সহ লক্ষ্যগুলি বজায় রাখা হয়েছিল, এবং একটি উচ্চ-বিশ্বাস BPH লক্ষ্য সেট পেতে সদৃশগুলি সরানো হয়েছিল৷

1.6 সম্ভাব্য থেরাপিউটিক লক্ষ্যগুলির জন্য ছেদ বিশ্লেষণ

ছেদ করেCistanche যৌগ লক্ষ্যবস্তুপরিচিত সঙ্গেBPH- সম্পর্কিত জিন, আমরা সম্ভাব্য শনাক্ত করেছিবিপিএইচ-বিরোধী থেরাপিউটিক লক্ষ্য, এর মাধ্যমে ভিজ্যুয়ালাইজ করা হয়েছেভেন ডায়াগ্রামR সফটওয়্যার ব্যবহার করে।

1.7 প্রোটিন-প্রোটিন ইন্টারঅ্যাকশন (PPI) নেটওয়ার্ক নির্মাণ

সম্ভাব্য লক্ষ্য আপলোড করা হয়েছেSTRING v11.5একটি পিপিআই নেটওয়ার্ক তৈরি করার জন্য ডাটাবেস। ভিজ্যুয়ালাইজেশন এবং টপোলজিকাল বিশ্লেষণ (ডিগ্রী কেন্দ্রীয়তা) ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিলসাইটোস্কেপ 3.9.1.

1.8 GO এবং KEGG সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণ

জন্য সমৃদ্ধকরণ বিশ্লেষণজিন অনটোলজি (GO)ফাংশন এবংKEGG পথব্যবহার করে পরিচালিত হয়মেটাস্কেপ, তাৎপর্য সেট এপি < 0.01.

1.9 "হার্ব-কম্পাউন্ড-টার্গেট-পাথওয়ে" নেটওয়ার্ক নির্মাণ

BPH এর সাথে প্রাসঙ্গিক মূল পথগুলি কেইজিজি সমৃদ্ধকরণ ফলাফল থেকে নির্বাচন করা হয়েছিল। কমাল্টি-লেয়ার নেটওয়ার্কসাইটোস্কেপে ভেষজ, সক্রিয় যৌগ, লক্ষ্য এবং পথের সংযোগ স্থাপন করা হয়েছিল এবং মূল নোডগুলি ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিলনেটওয়ার্ক বিশ্লেষকপ্লাগইন

1.10 আণবিক ডকিং যাচাইকরণ

ছয়টি মূল লক্ষ্য প্রোটিন (PTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, AKT1) এবং শীর্ষস্থানীয় যৌগগুলি (লুটিওলিন, এপিজেনিন, আইসোভিটেক্সিন, ম্যাঙ্গিফেরিন, প্লান্টেন গ্লাইকোসাইড) জন্য নির্বাচিত হয়েছিলআণবিক ডকিং. প্রোটিন স্ফটিক কাঠামো থেকে ডাউনলোড করা হয়েছেRCSB প্রোটিন ডেটা ব্যাংক(https://www.rcsb.org), এবং ডকিং ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিলঅটোডক ভিনা. বাঁধাই শক্তি ব্যবহার করে কল্পনা এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিলপাইমল.

1.11 পশুর মডেল এবং গ্রুপিং

7 দিনের উপযোগী হওয়ার পর, 60টি পুরুষ ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে 6টি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল (n=10): নিয়ন্ত্রণ, মডেল, ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, এবং নিম্ন-, মাঝারি-, উচ্চ-ডোজCistanche যৌগিক গ্রুপ(0.81, 1.62, 3.24 গ্রাম/কেজি)। BPH মাধ্যমে প্ররোচিত হয়orchiectomyদ্বারা অনুসরণ করাটেস্টোস্টেরন প্রোপিওনেট ইনজেকশন(15 মিলিগ্রাম/কেজি) 28 দিনের জন্য। ওষুধ প্রশাসন 29 তারিখ থেকে শুরু হয় এবং 30 দিন ধরে চলতে থাকে।

1.12 নমুনা সংগ্রহ

চূড়ান্ত চিকিত্সার পরে, ইঁদুরকে চেতনানাশক করা হয়েছিল এবং পেটের মহাধমনী থেকে রক্ত ​​সংগ্রহ করা হয়েছিল। প্রোস্টেট বিচ্ছিন্ন, ওজন, এবংপ্রোস্টেট সূচক (mg/g)গণনা করা হয়েছিল। বিশ্লেষণের জন্য নমুনাগুলি -80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

1.13 সিরাম প্রদাহজনক মার্কার জন্য ELISA

এর সিরাম মাত্রাCOX-2, PGE2, এবংভিইজিএফপ্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুসারে ELISA কিট ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল।

1.14 হিস্টোলজিক্যাল অ্যানালাইসিস (H&E স্টেনিং)

প্রোস্ট্যাটিক টিস্যুগুলি স্থির, প্যারাফিন-এম্বেডেড, বিভাগযুক্ত এবং দাগযুক্ত ছিলহেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E). প্যাথলজিকাল পরিবর্তনগুলি হালকা মাইক্রোস্কোপির অধীনে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।

1.15 ওয়েস্টার্ন ব্লটিং

এর প্রোটিন প্রকাশের মাত্রাAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, এবংভিইজিএফদ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিলপশ্চিমী দাগ. ব্যান্ডের তীব্রতা ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিলইমেজজে, সঙ্গেGAPDHঅভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ হিসাবে।

1.16 পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ

ডেটা ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিলSPSS 22.0. ফলাফল হিসাবে উপস্থাপন করা হয়গড় ± SD. একমুখী ANOVA এবংএলএসডি-টি পরীক্ষাগ্রুপ তুলনার জন্য ব্যবহার করা হয়েছে, সঙ্গেপি < 0.05পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত।