মেটফর্মিন অ্যাক্টিভেশন অফএএমপিকে/বিডিএনএফ/পিআই৩কে পাথওয়ের মাধ্যমে বার্ধক্যজনিত স্নায়বিক দুর্বলতা দূর করে পার্ট 1

বয়স-সম্পর্কিত নিউরোকগনিটিভ বৈকল্যকে ধীর করা একটি চ্যালেঞ্জ। আমরা ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যে মেটফর্মিনের থেরাপিউটিক প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করেছি। উপরন্তু, আমরা সম্ভাব্য আণবিক প্রক্রিয়াগুলি অধ্যয়ন করেছি যা মেটফর্মিনের অ্যান্টি-এজিং প্রভাবগুলির জন্য দায়ী হতে পারে। ত্রিশটি পুরুষ ইঁদুর সমানভাবে 1-নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে বিভক্ত ছিল, যারা একটি স্যালাইন দ্রবণ পেয়েছে, 2-ডি-গ্যালাকটোজ (ডি-গাল) গ্রুপ, যারা আট সপ্তাহ ধরে গ্যাস্ট্রিক ল্যাভেজের মাধ্যমে ডি-গ্যালাকটোজ (100 মিলিগ্রাম/কেজি/দিন) পেয়েছে, এবং 3—ডি-গ্যালাকটোজ প্লাস মেটফর্মিন (ডি-গাল প্লাস মেট) চিকিত্সা করা গ্রুপ, যারা আট সপ্তাহ ধরে গ্যাস্ট্রিক ল্যাভেজ করে ডি-গ্যালাকটোজ প্লাস মেটফর্মিন (200 মিলিগ্রাম/কেজি/দিন) পেয়েছে। একটি নিউরোকগনিটিভ মূল্যায়ন করা হয়েছিল। প্রদাহজনক, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস এবং বিডিএনএফ বায়োমার্কারগুলির পরিমাপ করা হয়েছিল। AMPK এবং PI3K জিনের অভিব্যক্তি মূল্যায়ন করা হয়েছিল। হিস্টোপ্যাথোলজিকাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল অধ্যয়নের জন্য হিপ্পোক্যাম্পাল টিস্যুগুলি বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। ডি-গ্যালের ফলে স্নায়বিক বৈকল্য, প্রদাহজনক বায়োমার্কারের উচ্চতা, পরিবর্তিত অক্সিডেটিভ স্ট্রেস মার্কার, BDNF হ্রাস, এবং ক্যাসপেস-3-এর বর্ধিত অভিব্যক্তি সহ সিনাপটোফাইসিন এবং বিসিএল 2-এর প্রকাশ হ্রাস এবং AMPK এবং PI3K জিনের নিম্ন-নিয়ন্ত্রণ। হিপ্পোক্যাম্পাসে নিউরোডিজেনারেটিভ পরিবর্তন উপস্থিত ছিল। মেটফর্মিন উল্লেখযোগ্যভাবে ডি-গাল-প্ররোচিত নিউরোডিজেনারেটিভ পরিবর্তনগুলি পুনরুদ্ধার করে। আমরা উপসংহারে পৌঁছেছি যে মেটফর্মিন নিউরোইনফ্লেমেশন, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস, অ্যাপোপটোসিস হ্রাস, সেইসাথে সিনাপটিক প্লাস্টিসিটি প্রচারের মাধ্যমে বয়স-প্ররোচিত নিউরোকগনিটিভ ঘাটতি দূর করতে পারে। এই প্রক্রিয়াগুলি AMPK/BDNF/PI3K পথের সক্রিয়করণের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করা যেতে পারে।

সিস্টানচে গ্লাইকোসাইড হৃৎপিণ্ড ও যকৃতের টিস্যুতে SOD-এর কার্যকলাপকেও বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং প্রতিটি টিস্যুতে lipofuscin এবং MDA-এর উপাদানকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করতে পারে, কার্যকরভাবে বিভিন্ন প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন র‌্যাডিকেল (OH-, H₂O₂, ইত্যাদি) এবং ডিএনএ-এর ক্ষতি থেকে রক্ষা করে। OH-র্যাডিক্যাল দ্বারা। Cistanche phenylethanoid glycosides মুক্ত র্যাডিকেলগুলির একটি শক্তিশালী স্ক্যাভেঞ্জিং ক্ষমতা, ভিটামিন C-এর তুলনায় উচ্চ হ্রাস করার ক্ষমতা, শুক্রাণু সাসপেনশনে SOD-এর কার্যকলাপকে উন্নত করে, MDA-এর বিষয়বস্তু হ্রাস করে এবং শুক্রাণুর ঝিল্লির কার্যকারিতার উপর একটি নির্দিষ্ট প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব ফেলে। সিস্টানচে পলিস্যাকারাইডগুলি ডি-গ্যালাকটোজ দ্বারা সৃষ্ট পরীক্ষামূলকভাবে সেনসেন্ট ইঁদুরের এরিথ্রোসাইট এবং ফুসফুসের টিস্যুতে এসওডি এবং জিএসএইচ-পিএক্সের কার্যকলাপকে বাড়িয়ে তুলতে পারে, সেইসাথে ফুসফুস এবং প্লাজমাতে এমডিএ এবং কোলাজেনের উপাদান হ্রাস করতে পারে এবং ইলাস্টিনের উপাদান বাড়াতে পারে। ডিপিপিএইচের উপর একটি ভাল স্ক্যাভেঞ্জিং প্রভাব, সেন্সেন্ট ইঁদুরের হাইপোক্সিয়ার সময়কে দীর্ঘায়িত করে, সিরামে এসওডির কার্যকলাপকে উন্নত করে এবং পরীক্ষামূলকভাবে সেন্সেন্ট ইঁদুরের ফুসফুসের শারীরবৃত্তীয় অবক্ষয়কে বিলম্বিত করে সেলুলার মরফোলজিক্যাল অবক্ষয়ের সাথে, পরীক্ষাগুলি দেখিয়েছে যে সিস্টানচে ভাল অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা রয়েছে। এবং ত্বকের বার্ধক্যজনিত রোগ প্রতিরোধ ও চিকিত্সার জন্য একটি ওষুধ হওয়ার সম্ভাবনা রয়েছে। একই সময়ে, সিস্তানচে ইচিনাকোসাইডের DPPH ফ্রি র‌্যাডিকেলগুলিকে স্ক্যাভেঞ্জ করার একটি উল্লেখযোগ্য ক্ষমতা রয়েছে এবং এটি প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতিকে স্ক্যাভেঞ্জ করতে পারে, মুক্ত র‌্যাডিক্যাল-প্ররোচিত কোলাজেনের অবক্ষয় রোধ করতে পারে এবং থাইমিন মুক্ত র‌্যাডিক্যাল অ্যানিয়নের ক্ষতির উপর একটি ভাল মেরামত প্রভাব ফেলে।

ANTI AGING সম্পর্কে উর্দুতে Cistanche এ ক্লিক করুন

【আরো তথ্যের জন্য: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

শব্দ সংক্ষেপ

D-gal d-galactose

ROS প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতি

আইএল-1 ইন্টারলিউকিন-1

আইএল-1 ইন্টারলিউকিন-1

আইএল-6 ইন্টারলিউকিন-6

আইএল-10 ইন্টারলিউকিন-10

TNF- টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর

BDNF মস্তিষ্ক থেকে প্রাপ্ত নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর

এএমপিকে এএমপি-সক্রিয় প্রোটিন কিনেস

PI3K/Akt ফসফ্যাটিডাইলিনোসিটল 3-কাইনেস/প্রোটিন কিনেস বি

RT-PCR বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া

EPM এলিভেটেড প্লাস গোলকধাঁধা

TL ট্রান্সফার লেটেন্সি

এমডিএ ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড

এসওডি সুপারঅক্সাইড বাতিল

MPTP মাইটোকন্ড্রিয়াল ব্যাপ্তিযোগ্যতা ট্রানজিশনাল পোর

H&E হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন

আইএনওএস ইন্ডুসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস

NF-κB নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর-κB

LTP দীর্ঘমেয়াদী ক্ষমতা

শারীরবৃত্তীয় কার্যকারিতা, মানসিক তত্পরতা এবং স্মৃতিশক্তির স্থির ক্ষতি যা বার্ধক্যের সাথে ঘটে তা একটি বহুমুখী প্রক্রিয়া যা নিউরোনাল কোষের মৃত্যুর দ্বারা ট্রিগার হতে পারে। অনেক দেশে 20302 সালের মধ্যে আয়ু 85 বছর অতিক্রম করবে বলে অনুমান করা হয়েছে। বয়স্কদের জীবনযাত্রার মান কমে যাওয়া এবং এর সাথে সম্পর্কিত অর্থনৈতিক ও ব্যক্তিগত ব্যয়ের কারণে, বার্ধক্যজনিত জ্ঞানীয় প্রতিবন্ধকতা একটি উল্লেখযোগ্য সামাজিক সমস্যা হিসাবে আবির্ভূত হয়েছে। উপরন্তু, মস্তিষ্কের বার্ধক্য হল নিউরোডিজেনারেটিভ রোগের বিকাশের প্রাথমিক কারণ যা প্রায়শই অপরিবর্তনীয়ভাবে অগ্রসর হয়3। বার্ধক্যজনিত নিউরোকগনিটিভ ইমপারমেন্ট4 এর জন্য বর্তমানে খুব কম বা কোন কার্যকর চিকিত্সা উপলব্ধ নেই।

d-galactose (D-gal), দুধের পণ্যে প্রচুর পরিমাণে মনোস্যাকারাইড, সাধারণত এনজাইম দ্বারা গ্লুকোজে রূপান্তরিত হয়। যাইহোক, দীর্ঘমেয়াদী পদ্ধতিগত ডি-গাল প্রশাসন যথেষ্ট স্বাস্থ্যের ঝুঁকি তৈরি করতে পারে5। পূর্ববর্তী গবেষণায় পরামর্শ দেওয়া হয়েছিল যে ইঁদুরের ক্রমাগত সিস্টেমিক ডি-গাল ডেলিভারি তাদের বার্ধক্য এবং বয়স-সম্পর্কিত নিউরোডিজেনারেটিভ ডিসঅর্ডারের মডেলে রূপান্তর করতে পারে। প্রাকৃতিক বার্ধক্য মডেলের তুলনায় ডি-গাল এজিং মডেলের বেশ কিছু সুবিধা রয়েছে, যার মধ্যে শুধুমাত্র বার্ধক্য প্রক্রিয়ায় মনোনিবেশ করার ক্ষমতা রয়েছে। প্রাকৃতিক বার্ধক্যের মডেলে, ডায়াবেটিস এবং উচ্চ রক্তচাপ সহ কমোর্বিডিটিগুলি পরিবর্তনশীলকে জটিল করে তুলছে7।

ডি-গাল বার্ধক্যজনিত মানুষের মস্তিষ্কের মতো জৈব রাসায়নিক অসঙ্গতি তৈরি করে বলে মনে করা হয়, যেমন অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইমগুলির হ্রাসকৃত কার্যকলাপ এবং কোলিনার্জিক নিউরনের ক্ষয়। উন্নত গ্লাইকেশন শেষ পণ্য, যা স্বাভাবিক বার্ধক্য এবং অনেক রোগের প্যাথোফিজিওলজি উভয়ের সাথে যুক্ত, প্রোটিন অ্যামিনো গ্রুপের সাথে ডি-গালের মিথস্ক্রিয়া দ্বারা উত্পাদিত হয়। D-gal প্রদান করা প্রাণীর কারণে নিউরোইনফ্লেমেশন, মাইটোকন্ড্রিয়াল ক্ষতি এবং রিঅ্যাকটিভ অক্সিজেন স্পেসিস (ROS) এর বিকাশ থেকে অক্সিডেটিভ ক্ষতির পাশাপাশি অভিনবত্বের অভ্যাস, স্থানিক শিক্ষার ঘাটতি এবং জ্ঞানীয় ফাংশন8।

প্রদাহ বয়স্কদের মধ্যে জ্ঞানীয় অবনতির একটি মূল কারণ হতে পারে। উচ্চ মাত্রার ইন্টারলিউকিন-6, IL-1, টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর- এবং সি-রিঅ্যাকটিভ প্রোটিন বয়স্কদের অসুস্থতা এবং মৃত্যুর ঝুঁকি বাড়ায়9। ইঁদুরের দীর্ঘস্থায়ী ডি-গ্যালাকটোজ চিকিত্সা সেরিব্রাল কর্টেক্স এবং হিপ্পোক্যাম্পাস 1-এ নিউরোনাল অ্যাপোপটোটিক সিগন্যালিং পাথওয়েস অ্যাক্টিভেশন এবং নিউরোইনফ্লেমেশনকে প্ররোচিত করে।

বার্ধক্যের ফলে ব্রেইন-ডিরাইভড নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর (BDNF) কমে যায় যা শেখার এবং স্মৃতির সাথে যুক্ত প্লাস্টিকের পরিবর্তনে নিযুক্ত একটি গুরুত্বপূর্ণ প্রোটিন এবং সেইসাথে নিউরোনাল প্রসারণ এবং অখণ্ডতার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ মধ্যস্থতাকারী।

বার্ধক্য বিলম্বিত এবং জ্ঞানীয় কর্মক্ষমতা সমর্থনকারী অভিনব যৌগগুলির আবিষ্কার সবচেয়ে বড় চ্যালেঞ্জগুলির মধ্যে একটি হয়ে উঠেছে। মেটফর্মিন দ্রুত রক্ত-মস্তিষ্কের বাধা ভেদ করে এবং পিটুইটারি গ্রন্থি এবং হিপ্পোক্যাম্পাস 11 সহ মস্তিষ্কের বিভিন্ন অংশে তৈরি হয়। এটি প্রমাণিত হয়েছে যে দীর্ঘমেয়াদী মেটফর্মিন প্রশাসন বয়স-সম্পর্কিত প্যাথলজিকাল জটিলতার সূচনা হ্রাস করে এবং মানুষের দীর্ঘায়ু বৃদ্ধি করে। তদুপরি, মেটফর্মিন ডায়াবেটিক এবং অ-ডায়াবেটিক উভয় ব্যক্তি এবং নিউরোডিজেনারেটিভ রোগে আক্রান্ত রোগীদের মধ্যে উদ্বেগের মতো জ্ঞানীয় দুর্বলতা এবং আচরণগত ব্যাধিগুলির উন্নতি করতে দেখানো হয়েছে। যাইহোক, বয়স-সম্পর্কিত নিউরোকগনিটিভ বৈকল্যের উন্নতিতে মেটফর্মিনের প্রভাবের অন্তর্নিহিত প্রক্রিয়াগুলি জটিল এবং এখনও সম্পূর্ণরূপে বোঝা যায় না।

মেটফর্মিনের নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাবগুলি প্রাথমিকভাবে এএমপি-অ্যাক্টিভেটেড প্রোটিন কিনেস (এএমপিকে) সিগন্যালিং পাথওয়ে 11 সক্রিয় করার জন্য দায়ী হতে পারে। AMPK অ্যাক্টিভেশন BDNF-এর অভিব্যক্তিকে আপ-নিয়ন্ত্রিত করে, যা সিনাপটিক ট্রান্সমিশন এবং মেমরি একত্রীকরণে গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রাখে। এএমপিকে অ্যাক্টিভেশনের এই সুপ্রতিষ্ঠিত বৈশিষ্ট্য ছাড়াও, পূর্ববর্তী ফলাফলগুলি প্রমাণ করেছে যে মেটফর্মিন অক্সিডেটিভ স্ট্রেস পুনরুদ্ধার, নিউরোইনফ্লেমেশন হ্রাস এবং অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধের মাধ্যমে স্মৃতিশক্তি বাড়াতে পারে, যা নিউরোডিজেনারেটিভ ডিসঅর্ডারের ক্ষেত্রে এর ক্লিনিকাল ইঙ্গিতগুলিকে প্রসারিত করতে পারে। মেটফর্মিন হল ফসফ্যাটিডিলিনোসিটল 3-কাইনেস/প্রোটিন কিনেস বি (PI3K/Akt) পথের একটি শক্তিশালী অ্যাক্টিভেটর যা অ্যাপোপটোসিস প্রতিরোধে এবং কোষের বেঁচে থাকার প্রচারে একটি গুরুত্বপূর্ণ গুরুত্বপূর্ণ সংকেত পথ।

মেটফর্মিনের সুবিধা বিবেচনায় নেওয়া, যার মধ্যে রয়েছে এর নিরাপত্তা, সামর্থ্য এবং ব্যবহারযোগ্যতা; আমরা ইঁদুরের ডি-গ্যালাকটোজ-প্ররোচিত বার্ধক্যজনিত কারণে স্নায়বিক বৈকল্যের বিরুদ্ধে মেটফর্মিন প্রশাসনের নিউরোপ্রোটেক্টিভ প্রভাবগুলি অধ্যয়ন করেছি। অতিরিক্তভাবে, এই প্রতিরক্ষামূলক প্রভাবগুলির অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলি তদন্ত করা হয়েছিল।

উপকরণ এবং পদ্ধতিসমূহ

প্রাণী।200-250 গ্রাম ওজনের টাইর্টি উইস্টার অ্যালবিনো পুরুষ ইঁদুরগুলি মেডিসিন অনুষদ, মেনোফা ইউনিভার্সিটি, মিশরের গবেষণা নৈতিক কমিটির প্রয়োজনীয় অনুমোদন পাওয়ার পর পরীক্ষায় ব্যবহার করা হয়েছিল (রেজিস্ট্রেশন নং 10/2022 PHYS 9)। পরীক্ষামূলক পদ্ধতি ARRIVE নির্দেশিকা অনুসরণ করে। ইঁদুরগুলি তারের জালের খাঁচায় (80×40×30 সেমি) রাখা হয়েছিল। অধ্যয়নের সময়কালে সমস্ত প্রাণীকে স্থির পরিবেশগত পরিস্থিতিতে 2 সপ্তাহ এবং 12:{10}}ঘণ্টার আলো/অন্ধকার চক্রে কন্ডিশনার করার পরে খাদ্য ও জলের সম্পূর্ণ অ্যাক্সেস দেওয়া হয়েছিল।

পরীক্ষামূলক অলঙ্করণ.প্রাণীগুলিকে এলোমেলোভাবে তিনটি দলে বিভক্ত করা হয়েছিল (10/গ্রুপ):

1. কন্ট্রোল গ্রুপ: মৌখিক গ্যাভেজের মাধ্যমে স্যালাইন দ্রবণ গ্রহণ করা হয়েছে।

2. ডি-গ্যালাকটোজ (ডি-গাল) গ্রুপ: প্রাপ্ত ডি-গ্যালাকটোজ (সিগমা-অলড্রিচ সেন্ট লুইস, ইউএসএ) টানা আট সপ্তাহ গ্যাস্ট্রিক ল্যাভেজের মাধ্যমে 100 মিলিগ্রাম/কেজি দৈহিক ওজনের একটি ডোজে লবণাক্ত দ্রবণে দ্রবীভূত করা হয়েছে17

3. ডি-গ্যালাকটোজ প্লাস মেটফর্মিন (ডি-গাল প্লাস মেট) চিকিত্সা করা গ্রুপ: প্রাপ্ত ডি-গ্যালাকটোজ (ডি-গাল গ্রুপে একই ডোজ দ্বারা) প্লাস মেটফর্মিন (সিগমা-অলড্রিচ সেন্ট লুইস, ইউএসএ) লবণাক্ত দ্রবণে দ্রবীভূত টানা আট সপ্তাহ গ্যাস্ট্রিক ল্যাভেজের মাধ্যমে 200 মিলিগ্রাম/কেজি/দিনের ডোজ 16

আট সপ্তাহ পূর্ণ হওয়ার পরে, সমস্ত ইঁদুরের একটি স্নায়ু আচরণগত মূল্যায়ন করা হয়েছিল। তারপরে, জরায়ুর প্রসারণ এবং স্থানচ্যুতি দ্বারা ইঁদুরগুলিকে অবেদন দেওয়া হয়েছিল এবং বলি দেওয়া হয়েছিল। মস্তিষ্ক বের করে ফসফেট বাফার স্যালাইন (pH 7.4) দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। বাম গোলার্ধটি ওজন করা হয়েছিল এবং দুটি ভাগে বিভক্ত ছিল; তাদের মধ্যে একটি জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল এবং বাকি অর্ধেকটি RT-PCR গবেষণার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। হিপোক্যাম্পাল টিস্যুগুলির হিস্টোপ্যাথলজিকাল এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল মূল্যায়নের জন্য ডান গোলার্ধটি 10 ​​শতাংশ ফরমালিন স্যালাইনে স্থির করা হয়েছিল।

স্নায়ু আচরণগত পরীক্ষা।অভিনব বস্তুর স্বীকৃতি। একটি পরিচিত সেটিংয়ে একটি নতুন বস্তু চিনতে ইঁদুরের ক্ষমতা মূল্যায়নের জন্য অভিনব বস্তুর স্বীকৃতি পরীক্ষাটি ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রতিটি ইঁদুরের তিন দিনের পরীক্ষা ছিল, যার মধ্যে তিনটি পর্যায় অন্তর্ভুক্ত ছিল: অভ্যাস, প্রশিক্ষণ এবং পরীক্ষা। ইঁদুরকে একটি খোলা মাঠের যন্ত্রে (50 সেমি × 50 সেমি × 40 সেমি) বাসস্থানের পর্যায়ে রাখা হয়েছিল, এবং কোন আইটেম ছাড়াই অভিযোজনের জন্য তাদের দশ মিনিট সময় দেওয়া হয়েছিল। প্রশিক্ষণ পর্বের সময় প্রতিটি ইঁদুরকে দুটি অভিন্ন বস্তু সহ একটি চেম্বারে পাঁচ মিনিটের জন্য রাখা হয়েছিল। চব্বিশ ঘন্টা পরে, প্রতিটি ইঁদুরকে পরীক্ষা পর্বে পাঁচ মিনিটের জন্য চেম্বারে রাখা হয়েছিল, যার মধ্যে একটি পুরানো বস্তুর একটি নতুন দিয়ে প্রতিস্থাপন জড়িত ছিল। অবজেক্ট অন্বেষণের সময়কালের জন্য স্টপওয়াচ ব্যবহার করা হয়েছিল। বৈষম্য সূচক [=(নভেল অবজেক্ট এক্সপ্লোরেশন টাইম–পারিবারিক অবজেক্ট এক্সপ্লোরেশন টাইম)/মোট এক্সপ্লোরেশন টাইম×100 শতাংশ ] ইঁদুরের জ্ঞানীয় কর্মক্ষমতা মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়। খোলা মাঠ এবং ইঁদুরের মধ্যে থাকা বস্তু পরিষ্কার করতে অ্যালকোহল ব্যবহার করা হয়েছিল 18।

মরিস জল গোলকধাঁধা. মরিস জলের গোলকধাঁধা স্থানিক শিক্ষা এবং স্মৃতিতে মেটফর্মিনের প্রভাব পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। একটি পুল স্টেইনলেস স্টিল দিয়ে তৈরি, যার ব্যাস ছিল 210 সেমি এবং উচ্চতা 50 সেমি, যার মধ্যে একটি নিমজ্জিত এস্কেপ প্ল্যাটফর্ম ছিল জলের পৃষ্ঠের 1 সেমি নীচে। জল 24±1 ডিগ্রী বজায় রাখা হয়েছিল। অধিগ্রহণের কাজটি প্রতিদিন চারটি ট্রায়াল সহ পরীক্ষার পাঁচ দিনের মধ্যে পরীক্ষা করা হয়েছিল। প্রতিটি ট্রায়ালের সময় গোপন প্ল্যাটফর্মে যাওয়ার জন্য যে সময় প্রয়োজন তা এস্কেপ লেটেন্সি হিসাবে রেকর্ড করা হয়েছিল। গোপন প্ল্যাটফর্মটি সনাক্ত করতে ইঁদুরকে সর্বাধিক 60 সেকেন্ড সময় দেওয়া হয়েছিল। সর্বাধিক 60 সেকেন্ডের সময়সীমা নির্ধারণ করা হয়েছিল, এবং ইঁদুরটিকে ম্যানুয়ালি লুকানো প্ল্যাটফর্মে নির্দেশিত করা হয়েছিল। পঞ্চম দিনে শেষ ট্রায়ালের 24 ঘন্টা পরে একটি একক তদন্ত ট্রায়াল পরিচালিত হয়েছিল। প্ল্যাটফর্মটি সরানো হয়েছিল এবং ইঁদুরটিকে প্রশিক্ষণ চতুর্ভুজটির বিপরীত চতুর্ভুজ থেকে পুলে স্থাপন করা হয়েছিল। তারপরে, ইঁদুরটিকে 60 সেকেন্ডের জন্য অবাধে সাঁতার কাটতে দেওয়া হয়েছিল। টার্গেট কোয়াড্রেন্টে কাটানো সময় রেকর্ড করা হয়েছিল ১৯টি।

এলিভেটেড প্লাস-মেজ (EPM) পরীক্ষা। ইপিএম ইঁদুরের মধ্যে উদ্বেগের মতো আচরণের মূল্যায়নের জন্য একটি প্রতিষ্ঠিত কৌশল। এটি কাঠের তৈরি এবং খোলা এবং বন্ধ বাহু নিয়ে গঠিত (দৈর্ঘ্য 50 সেমি × প্রস্থ 10 সেমি)। দুটি বন্ধ বাহু 40 সেন্টিমিটার উঁচু দেয়াল দ্বারা ঘেরা ছিল। বাহুগুলি একটি কেন্দ্রীয় বর্গাকার প্ল্যাটফর্ম (10×10 সেমি) দ্বারা সংযুক্ত ছিল। যন্ত্রটি মেঝে থেকে 50 সেমি উপরে ছিল। প্রতিটি ইঁদুরকে যন্ত্রের কেন্দ্রে একটি বন্ধ হাতের মুখোমুখি রাখা হয়েছিল এবং পাঁচ মিনিটের জন্য অবাধে চলাফেরা করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। খোলা এবং বন্ধ অস্ত্রে কাটানো সময় রেকর্ড করা হয়েছিল। এছাড়াও, ওপেন-আর্মস এন্ট্রি 20 তে রেকর্ড করা হয়েছিল। আমরা ট্রান্সফার লেটেন্সি (TL) পরিমাপ করি যা মেমরি এবং শেখার মূল্যায়ন করতে ব্যবহৃত হয়। প্রথম দিনে (অধিগ্রহণ সেশন), প্রতিটি ইঁদুর 90 সেকেন্ডের জন্য ইপিএম-এর সংস্পর্শে এসেছিল। বন্ধ বাহুতে পৌঁছতে ইঁদুরের যে সময় লেগেছিল তা টিএল হিসাবে রেকর্ড করা হয়েছিল। যে ইঁদুরগুলি 90 এর দশকে বন্ধ বাহুতে প্রবেশ করতে ব্যর্থ হয়েছিল তাদের গবেষণা থেকে বাদ দেওয়া হয়েছিল। দ্বিতীয় দিনে (ধারণ সেশন), প্রতিটি ইঁদুরকে খোলা বাহুতে রাখা হয়েছিল এবং TL সর্বোচ্চ 90 s21 এর জন্য রেকর্ড করা হয়েছিল।

জৈব রাসায়নিক বিশ্লেষণ।মস্তিষ্কের টিস্যুকে পিবিএস দ্রবণ দিয়ে পারফিউজ করা হয়েছিল, তারপর প্রতি গ্রাম টিস্যুতে 5 মিলি কোল্ড বাফারে একত্রিত করা হয়েছিল। মস্তিস্কের টিস্যুর সেন্ট্রিফিউগেশন 4000 rpm-এ 15 মিনিটের জন্য করা হয়েছিল, তারপরে সুপারনাট্যান্টকে সরানো হয়েছিল এবং প্রচলিত কালোরিমেট্রিক (কোয়ান্টিক্রোম™, বায়োঅ্যাসে সিস্টেমস) ব্যবহার করে ম্যালোন্ডিয়ালডিহাইড (এমডিএ) এবং সুপারঅক্সাইড ডিসম্যুটেজ (এসওডি) পরিমাপ না হওয়া পর্যন্ত −80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। ইউএসএ), সিরাম টিউমার নেক্রোসিস ফ্যাক্টর (TNF-), ইন্টারলিউকিন 10 (IL-10), এবং ব্রেন-ডিরাইভড নিউরোট্রপিক ফ্যাক্টর (BDNF) ELISA কিট (কোয়ান্টিকাইন, অ্যাবক্যাম কোম্পানি, কেমব্রিজ, ইউকে) ব্যবহার করে প্রস্তুতকারকের মতে নির্দেশাবলী

রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ পলিমারেজ চেইন রিঅ্যাকশন টেকনিক (RT-PCR) ব্যবহার করে AMPK এবং PI3K জিন এক্সপ্রেশনের পরিমাণগত পরীক্ষা।ইউএসএ থেকে কিয়াজেন আরএন ইজি প্লাস ইউনিভার্সাল কিট ব্যবহার করে মোট আরএনএ বিচ্ছিন্নতার জন্য মস্তিষ্কের টিস্যু প্রস্তুত করা হয়েছিল। তারপর, আরএনএ গুণমান এবং বিশুদ্ধতা নিশ্চিত করা হয়েছিল। RNA ব্যবহার করা পর্যন্ত −80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। তারপর, প্রথম ধাপটি ছিল কোয়ান্টিটেক রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন কিট ব্যবহার করে সিডিএনএ সংশ্লেষণ, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের কিয়াজেন, অ্যাপ্লাইড বায়োসিস্টেম 2720 থার্মাল সাইক্লার (সিঙ্গাপুর) ব্যবহার করে শুধুমাত্র একটি চক্রের জন্য। GAPDH প্রাইমারগুলি আরএনএ লোডিং নিয়ন্ত্রণ হিসাবে RT-PCR প্রতিক্রিয়াগুলিতে ব্যবহৃত হয়েছিল। দ্বিতীয় ধাপটি ছিল cDNA পরিবর্ধন: CDNA SYBR সবুজ-ভিত্তিক পরিমাণগত রিয়েল-টাইম পিসিআর-এর জন্য AMPK-এর আপেক্ষিক কোয়ান্টিফিকেশন (RQ) এবং PI3K জিন এক্সপ্রেশনের জন্য SensiFASTTMSYBR Lo-ROX কিট, USA, নিম্নলিখিত ডিজাইন করা প্রাইমার ব্যবহার করে ব্যবহার করা হয়েছিল (মিডল্যান্ড, টেক্সাস) ): AMPK এর জন্য Te ফরোয়ার্ড প্রাইমার ছিল (TGCGTGTACGAAGGAAGAATCC)। এবং বিপরীত প্রাইমার ছিল (TGTGACTTCCAGGTCGGGAGTT)। PI3K এর জন্য ফরোয়ার্ড প্রাইমার ছিল (AGCTGGTCTTCGTTTCCTGA), এবং বিপরীত প্রাইমার ছিল (GAAACTTTTTCCCACCACGA)। অবশেষে, ফলিত বায়োসিস্টেম 7500 সফ্টওয়্যার সংস্করণ 2.0.1 দিয়ে ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। AMPK এবং PI3K জিন এক্সপ্রেশনের RQ একটি তুলনামূলক ∆∆Ct পদ্ধতি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল, যেখানে লক্ষ্য জিনের পরিমাণ (AMPK এবং PI3K) mRNA একটি অন্তঃসত্ত্বা রেফারেন্স জিন (GAPDH) এবং একটি নিয়ন্ত্রণের সাপেক্ষে স্বাভাবিক করা হয়।

মস্তিষ্কের টিস্যুর হিস্টোপ্যাথোলজিকাল মূল্যায়ন।হিস্টোলজিক্যাল পরীক্ষা। মস্তিষ্কের টিস্যু 10 শতাংশ ফরমালিন দ্রবণে স্থির করা হয়েছিল, প্যারাফিনে এম্বেড করা হয়েছিল এবং 5 μm পুরুত্বের সিরিয়াল করোনাল বিভাগগুলি প্রাপ্ত হয়েছিল। মস্তিষ্কের হিপ্পোক্যাম্পাসের অংশগুলিকে হালকা মাইক্রোস্কোপ দিয়ে পরীক্ষার জন্য হেমাটোক্সিলিন এবং ইওসিন (H&E) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল।

হিপ্পোক্যাম্পাসের ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল দাগ। ক্যাসপেসের ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল স্টেনিং-3 (CAT নম্বর: ab32351, Abcam company 152 Grove Street Waltham, M02453, USA) এবং synaptophysin (CAT নম্বর: ab32127, Abcam কোম্পানি 152 Grove Street Waltham, USA4 ব্যবহার করে M02, M03) মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি। Bcl-2 (CAT নম্বর: ab59348, Abcam কোম্পানি 152 Grove Street Waltham, M02453, USA), এটি খরগোশের পলিক্লোনাল অ্যান্টিবডি ব্যবহার করে সংঘটিত হয়েছিল। তারা 1 মিলি অ্যান্টিবডি ধারণকারী একক শিশিতে প্রাপ্ত হয়েছিল। অ্যান্টি-ক্যাস্পেস-3, অ্যান্টি-সিনাপটোফিসিন, এবং অ্যান্টি-Bcl-2 যথাক্রমে 1:50, 1:400 এবং 1:100 মিশ্রিত পরিমাণে ব্যবহার করা হয়েছিল। বিভাগগুলি 5 µm এ কাটা হয়েছিল এবং একটি স্বয়ংক্রিয় LINK 48 ইমিউনোস্টেইনার (Dako, Agilent Technologies Inc, Santa Clara, USA) দ্বারা দাগ দেওয়া হয়েছিল। তাপ পুনরুদ্ধারের জন্য, ইমিউনোস্টেইনার দ্বারা সাইট্রেট বাফার ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রাথমিক মিশ্রিত অ্যান্টিবডি দ্বারা স্লাইডগুলি স্বয়ংক্রিয়ভাবে দাগ হয়ে যায়। প্রতিক্রিয়ার জন্য ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ স্বাভাবিক মানুষের টনসিলের নির্দিষ্ট প্যারাফিন-এম্বেডেড বিভাগগুলি ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল, মানুষের অগ্ন্যাশয়, এবং ক্যাসপেস-3, সিনাপটোফিসিন এবং বিসিএল-2 এর জন্য ফলিকুলার অ্যাডেনোমা। প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলিকে অ-ইমিউন সিরাম দিয়ে প্রতিস্থাপন করে নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল।

হিস্টোপ্যাথলজি এবং ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল মার্কার (ক্যাসপেস-3, সিনাপটোফাইসিন, এবং বিসিএল-2) এর মূল্যায়ন হিপ্পোক্যাম্পাসের বিভিন্ন এলাকায় CA1, CA2 এবং CA3 সহ করা হয়েছিল।

পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ.ফলাফল গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি (SD) হিসাবে প্রকাশ করা হয়। অরিজিন® সফ্টওয়্যার এবং সুযোগের সম্ভাব্যতা (পি মান) ব্যবহার করে বিভিন্ন গোষ্ঠীর পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণের জন্য বৈচিত্র্যের বিশ্লেষণ (ANOVA) ব্যবহার করা হয়েছিল। পি মান<0.05 were considered significant.

নৈতিকতার অনুমোদন এবং অংশগ্রহণের সম্মতি।এই কাজটি মেনোফা ইউনিভার্সিটি, ইজিপ্টের মেডিসিন অনুষদের নৈতিক কমিটির নির্দেশিকা দ্বারা এবং অনুমোদিত হয়েছিল।

ফলাফল

স্নায়ু আচরণগত পরীক্ষা।অভিনব বস্তু পরীক্ষার বিষয়ে, ডি-গাল গ্রুপে বৈষম্য সূচকের শতাংশ উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল যখন নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের সাথে তুলনা করা হয় (-37.16±3.31 শতাংশ বনাম 30.16±2.92 শতাংশ, যথাক্রমে, P<0.05). The percentage of discrimination index was significantly higher in the D-gal+Met group  (16.66±4.67%, P<0.05) when compared with the D-gal group. However, this percentage is still significantly lower when compared with the control group (Fig. 1).

মরিস গোলকধাঁধা পরীক্ষার বিষয়ে, কন্ট্রোল গ্রুপের (58.16±1.94, 4 {19}}.62±1.33, 32.75±1.10, 24.37±1.58, এবং 15.29±0.98 s বনাম 40.16±2.92, 25.16±1.15, 17.04±1.08,.5±1.08,.5±1.08,.5±1 86 s, যথাক্রমে, P<0.05). The means value of the duration of escape latency was significantly lower in the D-gal+Met group in the five training days (50±1.41, 34.08±1.15, 25.16±1.31, 16.04±1.75,   and 10.25±1.01 s, respectively, P<0.05) when compared with the D-gal group. However, the mean values of the durations of escape latency in the five training days in the D-gal+Met group were still significantly higher when compared with the control group. The means value of the duration that the rats spent in the target quadrant were significantly lower in the D-gal group when compared with the control group (12.50±1.87 vs. 23.50±1.87 s,   respectively, P < 0.05). However, the mean value of the duration that the rat spent in the target quadrant was significantly higher in the D-gal+Met group (19.66 ± 2.16 s, P < 0.05) when compared with the D-gal group.  However, its level is still significantly lower when compared with the control group (Fig. 2).

এলিভেটেড প্লাস-মেজ পরীক্ষায়, ইঁদুরের খোলা বাহুতে ব্যয় করা সময়কালের গড় মান ডি-গাল গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল যখন কন্ট্রোল গ্রুপের (60±6.54 s বনাম. 90.83±3.48 s, যথাক্রমে) , পি<0.05). On the other hand, the mean value of the duration that the rats spent in the open arms was significantly higher in the D-gal+Met group (73.83±5.41 s, P < 0.05) when compared with the D-gal group. However, its level was still significantly lower when compared with the control group. On the contrary, the mean value of the duration that the rats spent in the closed arms was significantly higher in the D-gal group when compared with the control group (107.33±3.07 s vs. 57.66±5.12 s respectively, P<0.05). The means value of the duration that the rats spent in the closed arms were significantly lower in the D-gal+Met group (74.66±2.58 s, P<0.05)   when compared with the D-gal group. However, its level was still significantly higher when compared with the control group. The mean value of the number of open-arm entries was significantly lower in the D-gal group when compared with the control group (12.50±1.87 vs. 32.33±3.07, respectively, P<0.05). On the contrary, the mean value of the number of open-arm entries was significantly higher in the D-gal+Met group (21.66±2.16,  P<0.05) when compared with the D-gal group. However, its level is still significantly lower when compared with the control group. The mean value of the duration of the transfer latency was significantly higher in the D-gal group when compared with the control group (48.33 ±6.88 s vs. 25 ±1.87 s, respectively, P < 0.05). While the mean value of the duration of the transfer latency was significantly lower in the D-gal+Met group (34.66±3.77 s,  P<0.05) when compared with the D-gal group. However, its level was still significantly higher when compared with the control group (Fig. 3).

জৈব রাসায়নিক পরীক্ষা।মস্তিষ্কের MDA স্তরের গড় মান উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যখন কন্ট্রোল গ্রুপের (70±3.23 nmol/mg প্রোটিন এবং 13.05±1) সাথে তুলনা করলে D-gal গ্রুপে মস্তিষ্কের SOD স্তরের গড় মান উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল৷{7 }} U/mg প্রোটিন বনাম যথাক্রমে 33.76±2.13 nmol/mg প্রোটিন এবং 29.11±4.34 U/mg প্রোটিন, P<0.05). The mean value of brain MDA level was significantly lower, while the mean value of brain SOD level was significantly higher in the D-gal+Met group (50.02±4.26 nmol/mg protein and  21.90±2.33 U/mg protein, respectively, P<0.05) when compared with the D-gal group. However, the mean value of MDA is still significantly higher, and the mean value of SOD is significantly lower when compared with the control group (Fig. 4a,b).

মস্তিষ্কের TNF- স্তরের গড় মান উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যখন কন্ট্রোল গ্রুপের (67.50 ± 10.03 pg/mg প্রোটিন এবং 72.91) সাথে তুলনা করলে D-gal গ্রুপে মস্তিষ্কের IL-10 স্তরের গড় মান উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল ±8.45 pg/mg প্রোটিন বনাম 16.61 ±1.21 pg/mg প্রোটিন এবং 157.23 ±12.46 pg/mg প্রোটিন, যথাক্রমে, P<0.05). The mean value of brain TNF-α level was significantly lower, while the mean value of brain IL-10 level was significantly higher in the D-gal+Met group (49.83±1.89 pg/mg protein and 131.67±4.54 pg/mg protein,   respectively, P<0.05) when compared with the D-gal group. But, the mean value of TNF-α was still significantly higher, and the mean value of IL-10 was significantly lower when compared with the control group (Fig. 4c,d).

কন্ট্রোল গ্রুপের (125.72±4.17 pg/mg প্রোটিন বনাম. 225.20±5.52 pg/mg প্রোটিন, P<0.05). The mean value of brain BDNF level was significantly higher in the D-gal +Met group (215.03±3.65 pg/mg protein, P < 0.05)   when compared with the D-gal group. However, its level is still significantly lower when compared with the control group (Fig. 5).

পরিমাণগত RT‑PCR (qRT‑PCR)। AMPK এবং PI3k জিনের অভিব্যক্তি (0.52±0.11 এবং 0.37±0.03, যথাক্রমে, P<0.05) was significantly down-regulated in the D-gal group when compared with the control group (1). However, the expression of AMPK and PI3k genes was significantly up-regulated in the  D-gal+Met group (0.95±0.08 and 0.98±0.04, respectively, P<0.05), when compared with the D-gal group, but it was insignificantly changed (P>0.05) কন্ট্রোল গ্রুপের সাথে তুলনা করলে (চিত্র 6)।

হিস্টোপ্যাথলজি।কন্ট্রোল গ্রুপে হিপ্পোক্যাম্পাল টিস্যুর H&E দাগ অসাধারণ প্যাথলজিকাল পরিবর্তন প্রকাশ করেছে। ডি-গ্যাল গ্রুপটি প্রচুর পরিমাণে শোথ এবং গ্লিওসিস সহ নিউরোনাল অবক্ষয় এবং অ্যাপোপটোটিক দেহ দেখায়। যাইহোক, ডি-গাল প্লাস মেট গ্রুপের অংশে কয়েকটি নিউরোনাল অবক্ষয় এবং হালকা শোথ এবং হালকা ফোকাল গ্লিওসিস সহ কয়েকটি অ্যাপোপটোটিক দেহ দেখায় (চিত্র 7)।

ইমিউনোহিস্টোকেমিস্ট্রি. ইমিউনোহিস্টোকেমিক্যাল ফলাফল প্রকাশ করেছে যে হিপোক্যাম্পাল টিস্যুতে সিনাপটোফিসিন এক্সপ্রেশনের এইচ স্কোর মান উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (পি<0.05) in the D-gal group when compared with the control group (100±5.78 vs. 260±4.03). However, the expression of synaptophysin (180±5.26) in hippocampal tissue in the D-gal+Met group was significantly higher when compared with the D-gal group. However, it was still significantly lower when compared with the control group (Fig. 8).

হিপোক্যাম্পাল টিস্যুতে ক্যাসপেস-3 এক্সপ্রেশনের H স্কোর মান উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল (P<0.05) in the  D-gal group when compared with the control group (279±5.35 vs. 89±3.54). On the other hand, the H score value of the caspase-3 expression in hippocampal tissue in the D-gal+Met group (151±4.73) was significantly lower when compared with the D-gal group, but still significantly higher when compared with the control group  (Fig. 9). 

হিপোক্যাম্পাল টিস্যুতে Bcl-2 এক্সপ্রেশনের H স্কোর মান উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (P<0.05) in the D-gal group when compared with the control group (161±4.36 vs. 301±6.11). While the H score value of Bcl-2 expression in hippocampal tissue in the D-gal+Met group (179±7.48) was significantly higher when compared with the D-gal group, it was still significantly lower when compared with the control group (Fig. 10).

আলোচনা

গড় আয়ু বৃদ্ধি বয়স্কদের অসুস্থতার ঝুঁকি বাড়ায়, বিশেষ করে জ্ঞানীয় অঙ্গনে যা মস্তিষ্কের নিউরোনাল ক্ষতির কারণে অন্তত আংশিক হতে পারে। এটা ভালভাবে স্বীকৃত যে ডি-গ্যালাকটোজের দীর্ঘমেয়াদী ইনজেকশন বার্ধক্যের অগ্রগতি এবং সামান্য নিউরোনাল ক্ষতি এবং স্মৃতি ত্রুটিতে অবদান রাখে। যেহেতু ডি-গ্যালিন্ডুসড বার্ধক্য নিউরোডিজেনারেশনের সাথে থাকে, তাই বয়স-সম্পর্কিত নিউরোডিজেনারেশনের সাথে জড়িত আণবিক প্রক্রিয়াগুলি অধ্যয়ন করার জন্য এবং নতুন থেরাপিউটিক পদ্ধতির পরীক্ষা করার জন্য এটি একটি আদর্শ মডেল হতে পারে।

আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে ডি-গালের দীর্ঘস্থায়ী প্রশাসন ইঁদুরের মধ্যে অভিনবত্ব-প্ররোচিত অনুসন্ধানমূলক আচরণ এবং কাজের স্মৃতিশক্তিকে দুর্বল করে দেয়। উপন্যাস অবজেক্ট, মরিস ওয়াটার মেজ এবং এলিভেটেড প্লাস মেজ পরীক্ষার ফলাফলে এটি স্পষ্ট ছিল। এই ফলাফলগুলি অন্যান্য রিপোর্ট করা গবেষণার সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল23। অন্য দিকে; ডি-গাল গ্রুপের সাথে তুলনা করার সময় মেটফর্মিনের সাথে চিকিত্সা কাজের স্মৃতি এবং অভিনবত্বের পছন্দকে উন্নত করে। আমাদের ফলাফলগুলিকে সমর্থন করে, পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় বলা হয়েছে যে মেটফর্মিন স্ট্রেপ্টোজোটোসিন-প্ররোচিত ডায়াবেটিক ইঁদুরের স্বল্পমেয়াদী স্মৃতিশক্তিকে উন্নত করে। এটি ভালভাবে নথিভুক্ত করা হয়েছে যে বার্ধক্য শুধুমাত্র জ্ঞানীয় ক্রিয়াকলাপের হ্রাসের সাথেই নয় বরং উদ্বেগের মতো আচরণ সহ মানসিক পরিবর্তনের সাথেও জড়িত যা কার্যকরী বৈকল্যের কারণ হয়25। বর্তমান সমীক্ষায়, ইপিএম পরীক্ষার ফলাফলগুলি নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর সাথে তুলনা করার সময় ডি-গাল গ্রুপে উদ্বেগের মতো আচরণ বৃদ্ধি পেয়েছে। মেটফর্মিনের সাথে চিকিত্সা করার সময় উদ্বেগের মতো আচরণ হ্রাস পায়।

বর্তমান সমীক্ষায় দেখা গেছে যে ডি-গালের মৌখিক প্রশাসনের কারণে সৃষ্ট স্নায়ু আচরণগত পরিবর্তনগুলি মস্তিষ্কের অক্সিডেটিভ স্ট্রেস মার্কারগুলিতে ব্যাঘাত ঘটায়। মস্তিষ্কের টিস্যু হোমোজেনেটে এমডিএ স্তরের গড় মান উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, যখন নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর সাথে তুলনা করলে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এনজাইম এসওডির কার্যকলাপ ডি-গাল গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল। অনুরূপ ফলাফল পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছে 23,26. ডি-গাল প্রোটিন আর্কিটেকচারে বিভিন্ন মুক্ত অ্যামাইনের সাথে অ-এনজাইমেটিক গ্লাইকেশনের মাধ্যমে যোগাযোগ করে, যার ফলে উন্নত গ্লাইকেশন পণ্য তৈরি হয়। এর ফলে ROS তৈরি হয় যা DNA, লিপিড এবং প্রোটিনের অক্সিডেটিভ ক্ষতির মাধ্যমে মস্তিষ্কের বার্ধক্য বাড়ায়। ডি-গালের দীর্ঘস্থায়ী প্রশাসনের দ্বারা প্ররোচিত স্মৃতিশক্তি হ্রাস এবং শেখার প্রতিবন্ধকতাকে ফ্রি র‌্যাডিকেল তৈরির জন্য দায়ী করা যেতে পারে, যার ফলে নিউরোজেনেসিস এবং শেষ পর্যন্ত, নিউরোডিজেনারেশন 27 ​​এর ক্ষতি হয়। অধিকন্তু, উচ্চ লিপিড সামগ্রী এবং উচ্চ অক্সিজেন খরচের কারণে মস্তিষ্কের নিউরনগুলি অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের জন্য বেশি সংবেদনশীল।

বিপরীতে, মেটফর্মিন প্রশাসন উল্লেখযোগ্যভাবে রেডক্স ভারসাম্য পুনরুদ্ধার করেছে। প্রমাণ দেখায় যে মেটফর্মিন মাইটোকন্ড্রিয়াল পারমিবিলিটি ট্রানজিশনাল পোর (এমপিটিপি) বাধা দিতে পারে এবং ROS উত্পাদন এবং লিপিড পারক্সিডেশন 28 কমাতে পারে। অতএব, এটি ইঙ্গিত দেয় যে মেটফর্মিনের অ্যান্টি-এজিং প্রভাব সম্ভবত এর অ্যান্টিঅক্সিডেটিভ প্রতিরক্ষা দ্বারা মধ্যস্থতা করতে পারে।

অক্সিডেটিভ স্ট্রেস ছাড়াও, প্রদাহও ডি-গাল চিকিত্সার একটি গুরুত্বপূর্ণ বার্ধক্য-প্ররোচিত প্রক্রিয়া। ডি-গ্যাল ROS-এর প্রজন্মকে উন্নীত করে যা প্রদাহজনক পথগুলিকে সক্রিয় করে। দীর্ঘস্থায়ী নিউরোইনফ্লেমেশন এবং প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের নিঃসরণ বার্ধক্য 29 এর বৈশিষ্ট্য। একটি চুক্তি আছে যে প্রদাহজনক সাইটোকাইনগুলি অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের সাথে জড়িত। TNF-, IL-6, এবং IL-1 অক্সিডেটিভ স্ট্রেসের বিকাশ এবং অগ্রগতির জন্য অপরিহার্য। এই সাইটোকাইনগুলি ROS-এর সাথে যুক্ত এবং নিউক্লিয়াসে স্থানান্তরিত করার জন্য নিউক্লিয়ার ফ্যাক্টর-κB (NF-κB) সক্রিয় করে এবং iNOS এবং COX2-এর মতো প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি জিনের অভিব্যক্তি নিয়ন্ত্রণ করে, যেগুলি প্রদাহজনক এবং ইমিউন প্রতিক্রিয়ার সাথে জড়িত এবং এর ফলে ফাইব্রোসিস, অ্যাপোপটোসিস এবং তীব্র ফেজ প্রতিক্রিয়া যা অঙ্গের ক্ষতি করে30। উপরে উল্লিখিত ডেটা আমাদের ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল, কারণ TNF-আলফার স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে বেশি ছিল, এবং কন্ট্রোল গ্রুপের তুলনায় D-gal গ্রুপে IL-10 উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল।

অন্যদিকে, মেটফর্মিনের সাথে চিকিত্সার ফলে ডি-গাল গ্রুপের সাথে তুলনা করলে প্রদাহজনক চিহ্নিতকারী উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায়। মেটফর্মিনের প্রদাহ-বিরোধী প্রভাবগুলি AMPK সংকেত সক্রিয়করণের জন্য দায়ী করা যেতে পারে, যা NF-κB29-এর বাধার মাধ্যমে প্রদাহজনক প্রতিক্রিয়াকে দমন করে। এছাড়াও, এটি মস্তিষ্কে প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন উত্পাদন এবং মাইক্রোগ্লিয়াল অ্যাক্টিভেশন হ্রাস করে যা ঘুরে, অক্সিডেটিভ স্ট্রেস হ্রাস করে30

মেটফর্মিন ক্রিয়াগুলির অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলি আরও বোঝার জন্য, আমরা AMPK এবং PI3k এর প্রোটিন অভিব্যক্তিগুলি পরীক্ষা করেছি। আমাদের গবেষণায় দেখা গেছে যে AMPK-এর অভিব্যক্তি ডি-গাল গ্রুপে উল্লেখযোগ্যভাবে নিম্ন-নিয়ন্ত্রিত ছিল যখন কন্ট্রোল গ্রুপের সাথে তুলনা করা হয়, যখন ডি-গাল গ্রুপের সাথে তুলনা করলে মেটফর্মিন-চিকিত্সা করা গ্রুপে এর স্তর উল্লেখযোগ্যভাবে আপ-নিয়ন্ত্রিত ছিল। পূর্ববর্তী গবেষণায় জানা গেছে যে AMPK সক্রিয়করণ এবং AMPK প্রতিক্রিয়াশীলতা বয়সের সাথে হ্রাস পায়, যা পরিবর্তিত বিপাকীয় নিয়ন্ত্রণকে ব্যাখ্যা করতে পারে, যার ফলে অটোফ্যাজি হ্রাস পায় এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস 31 বৃদ্ধি পায়। Tr-17232 এ AMPK-এর ফসফোরিলেশন বাড়িয়ে মেটফর্মিন AMPK সক্রিয় করতে পাওয়া গেছে। AMPK হল মেটফর্মিনের প্রাথমিক লক্ষ্যমাত্রা যা জ্ঞানের ব্যাঘাতের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষামূলক কাজের জন্য। গাদেরনেজহাদ এট আল। রিপোর্ট করা হয়েছে যে AMPK-এর মেটফরমিন-প্ররোচিত অ্যাক্টিভেশনের ফলে হিপোক্যাম্পাল নিউরনে BDNF/P70S6K পাথওয়ে সক্রিয় হয়েছে যাতে একটি গ্লোবাল সেরিব্রাল ইসকেমিয়া/রিপারফিউশন র‍্যাট মডেলে প্যাসিভ এভয়েডেন্স টাস্কে মেমরির গঠন বাড়ানো যায়। শেখার, মেমরি, সিনাপটিক ট্রান্সমিশন এবং প্লাস্টিসিটি 33 এর মতো নিউরোকগনিটিভ ফাংশন নিয়ন্ত্রণে বিডিএনএফ অ্যাক্টিভেশনের একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা রয়েছে। বেশ কয়েকটি গবেষণায় প্রমাণিত হয়েছে যে AMPK দীর্ঘমেয়াদী সম্ভাবনা (LTP) এর একটি মডুলেটর হিসাবে কাজ করতে পারে এবং এটি স্মৃতি গঠনের জন্য প্রয়োজনীয়34 . অতএব, আমাদের গবেষণায় মেটফর্মিন-প্ররোচিত মেমরির উন্নতি এএমপিকে সিগন্যালিং অ্যাক্টিভেশনের মাধ্যমে মধ্যস্থতা করা যেতে পারে।

【আরো তথ্যের জন্য: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】