HIFN-Alpha 2b এর সাথে ইন্ট্রামাসকুলার বুস্টিং কুষ্ঠরোগের একটি মুরিন মডেলে BCGphipps-প্ররোচিত সুরক্ষা বাড়ায়
Apr 28, 2023
বিমূর্ত:
মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেতে হোস্ট ইমিউনিটি মেকানিজমের একটি বর্ণালীকে অন্তর্ভুক্ত করে যা সেলুলার অনাক্রম্যতা-চালিত সুরক্ষা থেকে শুরু করে কুষ্ঠরোগের প্রতিক্রিয়ার মতো হিউমারাল অনাক্রম্যতার সাথে সম্পর্কিত ক্ষতি পর্যন্ত। যদিও টাইপ I ইন্টারফেরন (IFNs) আন্তঃকোষীয় রোগজীবাণু নির্মূলে অংশগ্রহণ করে, কুষ্ঠরোগে বিসিজি ভ্যাকসিন-মধ্যস্থতা রক্ষায় অ্যান্টিবডি এবং CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস রেগুলেটরি টি কোষ (Tregs) উৎপাদনে তাদের অবদান অজানা। BCGphipps (BCGph) প্রাইমিং এর পরে ইন্ট্রামাসকুলার hIFN- 2b ত্বকে ক্ষতের আকার এবং মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেমুরিয়াম বৃদ্ধিকে বাড়িয়ে তোলে। টি ফলিকুলার রেগুলেটরি সেল (TFR), ইমিউনাইজেশন বা সংক্রমণ দ্বারা প্ররোচিত Tregs-এর একটি উপসেট, জীবাণু কেন্দ্রে (GCs) থাকে এবং অ্যান্টিবডি উৎপাদনকে সংশোধন করে।
আমরা বিসিজিপিএইচ প্রাইমড এবং এইচআইএফএন- 2বি বুস্টেড মাউসের লিম্ফ নোড নিষ্কাশনে প্রতিবন্ধী ট্রেগ ইনডাকশন এবং উন্নত জিসি খুঁজে পেয়েছি। তাছাড়া, এই ইঁদুরগুলি সিরামে উল্লেখযোগ্য পরিমাণে IL-4 এবং IL-10 বের করে। এইভাবে, আমাদের ফলাফলগুলি ত্বকের কুষ্ঠরোগের বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা বাড়ানোর জন্য BCGph প্রাইমিংয়ের প্রসঙ্গে hIFN- 2b-এর সহায়ক বৈশিষ্ট্যগুলিকে সমর্থন করে।
প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা বলতে অ্যান্টিবডি, টি কোষ ইত্যাদি তৈরি করে সংক্রামক রোগজীবাণু থেকে রক্ষা করার জন্য শরীরের ক্ষমতা বোঝায় এবং রোগ প্রতিরোধ করার জন্য শরীরের অন্যতম গুরুত্বপূর্ণ প্রক্রিয়া। অনাক্রম্যতা বলতে সেলুলার ইমিউনিটি এবং হিউমারাল ইমিউনিটি সহ বিভিন্ন বিদেশী পদার্থ (প্যাথোজেন, বিদেশী সংস্থা, টিউমার কোষ, ইত্যাদি) সনাক্ত করার এবং প্রতিক্রিয়া জানাতে শরীরের ক্ষমতা বোঝায়। প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা অনাক্রম্যতার একটি অংশ, এবং দুটি ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত। ভাল অনাক্রম্যতা প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতার উন্নতিকে উন্নীত করতে পারে, যাতে রোগের সংঘটন রোধ করা যায়। একই সময়ে, প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতার উন্নতিও অনাক্রম্যতা বাড়াতে পারে, শরীরকে বিভিন্ন বাহ্যিক চ্যালেঞ্জের সাথে আরও ভালভাবে মোকাবেলা করতে দেয়। অতএব, ভাল প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা সহ একটি স্বাস্থ্যকর ইমিউন সিস্টেম বজায় রাখা ভাল স্বাস্থ্য বজায় রাখার জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। এই দৃষ্টিকোণ থেকে, অনাক্রম্যতাও খুব গুরুত্বপূর্ণ। আমরা যদি আমাদের অনাক্রম্যতা উন্নত করতে চাই, সিস্তানচে আমাদের মানব প্রতিরোধ ক্ষমতাকে উল্লেখযোগ্যভাবে উন্নত করতে পারে। Cistanche-এর পলিস্যাকারাইডগুলি মানুষের ইমিউন সিস্টেমের ইমিউন প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং ইমিউন কোষগুলিকে উন্নত করতে পারে। স্ট্রেস ক্ষমতা, ইমিউন কোষের ব্যাকটেরিয়াঘটিত প্রভাব বাড়ায়।
cistanche এর স্বাস্থ্য উপকারিতা ক্লিক করুন
কীওয়ার্ড:
মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেমুরিয়াম; মুরিন কুষ্ঠ; ইন্টারফেরন আলফা; বিসিজিফিপস; জীবাণু কেন্দ্র; নিয়ন্ত্রক টি কোষ।
1। পরিচিতি
মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রে এবং মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রোমাটোসিস, মানুষের কুষ্ঠরোগের এটিওলজিক্যাল এজেন্ট [1,2], ত্বক এবং পেরিফেরাল স্নায়ুকে প্রভাবিত করে [3]। যদিও কুষ্ঠরোগের জন্য মাল্টিড্রাগ ট্রিটমেন্ট (MDT) পাওয়া যায়, নতুন কেসের সংখ্যা স্থিতিশীল থাকে (700,000 প্রতি বছর)।
অধিকন্তু, একটি কার্যকর ডায়াগনস্টিক পদ্ধতির অভাব এম. লেপ্রের সংক্রমণ ট্র্যাক করা কঠিন করে তোলে [4-7]। প্রারম্ভিক কুষ্ঠ রোগের জেনেটিক প্রবণতা [৮] উন্নত দেশগুলিতে কুষ্ঠ রোগের ঘটনা কমাতে একটি উপযুক্ত রোগ নির্ণয় এবং কম খরচে ইমিউনোথেরাপির বিকাশের প্রয়োজনীয়তার উপর জোর দেয় [9,10]। কুষ্ঠ রোগে ক্লিনিকাল প্রকাশের বর্ণালী ইমিউন প্রতিক্রিয়ার ধরণের সাথে সম্পর্কযুক্ত। উদাহরণস্বরূপ, টিউবারকিউলোয়েড কুষ্ঠ (টিটি), একটি প্রভাবশালী Th1 প্রতিক্রিয়া দ্বারা চিহ্নিত, ম্যাক্রোফেজের মাইক্রোবাইসিডাল ফাংশনগুলির IFN-চালিত সক্রিয়করণের মাধ্যমে ব্যাসিলির বৃদ্ধিকে সীমাবদ্ধ করে। বিপরীতে, ক্লাসিক Th2 সাইটোকাইনস (IL-4 এবং IL-10) এর উৎপাদন ছড়িয়ে পড়া লেপ্রোমাটাস কুষ্ঠরোগে (LL) [১০] সুরক্ষার ক্ষতি এবং বর্ধিত ব্যাসিলারি বৃদ্ধির সাথে জড়িত। এছাড়াও মধ্যবর্তী উপপ্রকার রয়েছে যা Th1 এবং Th2 প্রতিক্রিয়াগুলির মিশ্রণকে প্রতিনিধিত্ব করে [10]।
M. lepraemurium (MLM) [11,12] এর সাথে ইঁদুরের সংক্রমণ মানুষের কুষ্ঠ রোগের ইমিউনোলজিক্যাল মেকানিজম [11-13] অধ্যয়নের জন্য ব্যবহার করা হয়েছে, যদিও MLM পেরিফেরাল স্নায়ুর জন্য ট্রপিজম দেখায় না [11,13] M. leprae হিসাবে করে [14]। তা সত্ত্বেও, উভয় মাইকোব্যাকটেরিয়া অ-চাষযোগ্য এবং হোস্টে ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পায়, 1-3 সপ্তাহে তাদের সংখ্যা দ্বিগুণ হয়।
ব্যাকটেরিয়াগুলির ছোট ডোজ সহ পরীক্ষামূলক সাবকুটেনিয়াস সংক্রমণ ঘনিষ্ঠভাবে প্রাকৃতিক রোগের অনুকরণ করে যা সাধারণত ঘটে যখন বাধাগুলির ব্যাঘাত মাইকোব্যাকটেরিয়াল উপনিবেশকে সহজতর করে, একটি পেরিফেরাল স্তরে একটি অনাক্রম্য প্রতিক্রিয়া ট্রিগার করে [13,15-17]। সেল-মিডিয়াটেড ইমিউনিটি (সিএমআই) দুর্বল হলেও মানব ও মুরিন কুষ্ঠরোগে হিউমারাল ইমিউনিটি কার্যত প্রভাবিত হয় না [১৮]। উপরন্তু, Th1- বা Th2-কোষ, অন্যান্য টি লিম্ফোসাইট, M. leprae সংক্রমণ [18,19] এর জন্য হোস্ট ইমিউনিটি গঠন করে।
M. leprae কিভাবে মাইকোব্যাকটেরিয়াল রোগের বিভিন্ন উপপ্রকারে হোস্ট অনাক্রম্যতাকে প্রভাবিত করে তা কৌতুহলজনক। একটি অনুমান হল যে প্যাথোজেন ত্বক এবং পেরিফেরাল স্নায়ু [3,14,15] সংক্রামিত করার জন্য হোস্ট হিউমোরাল এবং সেলুলার অনাক্রম্যতা হ্রাস করে। এমনও প্রমাণ রয়েছে যে ব্যাসিলাস ম্যাক্রোফেজ সক্রিয়করণকে বাধা দেয়। এছাড়াও এটি TNF-আলফা এবং প্রোস্টাগ্ল্যান্ডিনের মতো অণুর অভিব্যক্তি হ্রাস করে যা IL-1 এবং প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন এবং নাইট্রোজেন ইন্টারমিডিয়েটস (ROI এবং RNI), ম্যাক্রোফেজ [20-22] এর মাইকোব্যাকটেরিসাইডাল ফাংশনগুলির জন্য গুরুত্বপূর্ণ।
গৌণ এবং তৃতীয় লিম্ফয়েড টিস্যুগুলির GC-তে উত্পন্ন হাস্যকর প্রতিক্রিয়াগুলি প্যাথোজেনগুলির বিরুদ্ধে প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতায় অংশগ্রহণ করে [23-26]। কুষ্ঠরোগের উপর সাম্প্রতিক একটি প্রতিবেদনে Th1 এবং Th17 কোষের প্রতিক্রিয়া প্রতিরোধে Tregs-এর গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা তুলে ধরা হয়েছে [19]। প্রকৃতপক্ষে, GCs [27-29] এ টি কোষের এই উপসেটের মধ্যে ভারসাম্য সংক্রামক এবং অটোইমিউন রোগের প্রতিরক্ষামূলক বা রোগগত ফলাফল নির্দেশ করে [30,31] এবং প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা প্ররোচিত করার জন্য থেরাপির বিকাশের জন্য গুরুত্বপূর্ণ [26,27] ]।
বিশেষ করে, টি হেল্পার ফলিকুলার সেল (টিএফএইচ) এবং বিশেষ করে টি ফলিকুলার রেগুলেটরি সেল (টিএফআর) অটোঅ্যান্টিবডি [32,33] এর উত্পাদন প্রতিরোধ করার সময় দীর্ঘস্থায়ী হিউমারাল ইমিউন প্রতিক্রিয়া প্ররোচিত করার জন্য জিসি প্রতিক্রিয়া মডিউল করে। প্রদত্ত যে টাইপ I IFN TFH এবং Tregs উভয়ের প্রজন্মের সাথে যুক্ত, এটি BCG টিকাকরণের প্রসঙ্গে GCগুলিতে TFH প্রতিক্রিয়া উদ্দীপিত করার জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল সহায়ক হিসাবে আবির্ভূত হয় [34]।
টাইপ I IFN-এর মিউকোসাল অ্যাডমিনিস্ট্রেশন ডেনড্রাইটিক কোষের পরিপক্কতা এবং CXCR5 প্লাস CD4 প্লাস TFH তৈরি করে, যা GC ডেভেলপমেন্ট এবং লিম্ফ নোডগুলিতে উচ্চ-সম্পর্কের অ্যান্টিবডি তৈরি করতে সহায়তা করে [34]। বিপরীতে, টাইপ I IFN মানুষের যক্ষ্মা রোগে হোস্ট ইমিউনিটি বাতিল করে ইন্ডুসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস (iNOS), IL-12p40, IL-1A, এবং IL-1 উৎপাদনে বাধা দিয়ে IL-10 এবং IL-1আর বিরোধী [৩৫–৩৮]। সুতরাং, টাইপ I IFN-এর অংশগ্রহণ প্রসঙ্গ-নির্ভর [38-42]। টাইপ I IFNগুলি একটি স্থির স্তরে উত্পাদিত হয়, কিন্তু একবার একটি অন্তঃকোষীয় রোগজীবাণু হোস্টকে আক্রমণ করলে, অ্যান্টিবডি ক্লাস স্যুইচিং, সোম্যাটিক হাইপারমিউটেশন এবং বর্ধিতকরণ সহ বেশ কিছু ভিন্নধর্মী এবং জটিল অ্যান্টি-ভাইরাল বা অ্যান্টি-ব্যাকটেরিয়াল সহজাত প্রতিক্রিয়াগুলি প্ররোচিত হয় [43-48]। GC-তে অ্যান্টিজেনের প্রাপ্যতা যা শক্তিশালী এবং কার্যকর অ্যান্টিবডি প্রতিক্রিয়ার দিকে পরিচালিত করবে [34,49]।
আমরা পূর্বে মাইকোব্যাকটেরিয়াম বোভিস বিসিজির টিকা দেওয়া এবং এমএলএম [৪২] বা অ্যারোসোলাইজড এম. যক্ষ্মা চ্যালেঞ্জ [৪১] এর বিরুদ্ধে প্রতিদ্বন্দ্বিতা করা ইঁদুরগুলিতে ধারাবাহিক ইন্ট্রামাসকুলার IFN বুস্টিং দ্বারা প্রদত্ত সুরক্ষার কথা জানিয়েছি। এমএলএম-এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরগুলিতে, সুরক্ষা iNOS, নাইট্রিক অক্সাইড এবং IgG3 অ্যান্টিবডিগুলির বর্ধিত উত্পাদনের সাথে সম্পর্কযুক্ত [42]। এম. যক্ষ্মা চ্যালেঞ্জের পরিপ্রেক্ষিতে, সুরক্ষিত ইঁদুর একটি Th1 প্রতিক্রিয়া প্রকাশ করেছে [41]।
আরও সাম্প্রতিক গবেষণায়, টাইপ I IFNs মডিউলেটেড অটোফ্যাজি এবং মেটাবলিজম কুষ্ঠরোগে [50]। আমরা এই গবেষণায় M. bovis BCGphipps (BCGph) এবং মানুষের IFN- 2b [51] এর একটি ফার্মাসিউটিক্যাল উপস্থাপনা দ্বারা টিকা দেওয়ার দ্বারা প্ররোচিত মুরিন কুষ্ঠরোগের বিরুদ্ধে সুরক্ষা আরও তদন্ত করার সিদ্ধান্ত নিয়েছি। সাম্প্রতিক গবেষণায়, একটি রিকম্বিন্যান্ট বিসিজি যা মানুষের IFN- 2b প্রকাশ করে তা সফলভাবে মূত্রাশয় ক্যান্সারের [51-55] চিকিত্সার জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল। এই তথ্যগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, এই গবেষণায় আমাদের লক্ষ্য ছিল কুষ্ঠরোগের একটি মুরিন মডেলে BCGph প্রাইমিং এবং hIFN- 2b বুস্টিং দ্বারা প্ররোচিত সুরক্ষা বিশ্লেষণ করা। সামগ্রিকভাবে, আমাদের ফলাফল BCGph সাবকিউটেনিয়াস প্রাইমিং এবং ইন্ট্রামাসকুলার hIFN- 2b মানুষের কুষ্ঠরোগের বিরুদ্ধে সুরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা প্ররোচিত করার সম্ভাবনাকে কল্পনা করে।
2. উপাদান এবং পদ্ধতি
2.1। প্রাণী
নির্দিষ্ট প্যাথোজেন-মুক্ত বাল্ব/সি ইঁদুরগুলি মেক্সিকো সিটির Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, Instituto Politécnico Nacional-এর প্রাণী সুবিধাগুলিতে প্রজনন এবং রাখা হয়েছিল।
ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ম্যানেজমেন্ট কমিটি (সিআইই-এনসিবি চিড়িয়াখানা 016/2014) দ্বারা অনুমোদনের (০৭ মার্চ 2014) পরে সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা করা হয়েছিল।
2.2। অণুজীব
BCG Phipps স্ট্রেন (ATCC® 35744™) (BCGph) হল BCG স্ট্রেনের একটি বৈকল্পিক যা RD1 অঞ্চলকে হারিয়েছে যা ESAT-6 এবং CFP10কে এনকোড করে, যেখানে সর্বনিম্ন সংখ্যক টি সেল এপিটোপ রয়েছে , 316, বনাম BCG Tokyo, 359, এবং BCG Pasteur, 331, (Zhang et al., 2013) [51] এবং ডঃ হার্নান্দেজ-পান্ডো (INCMNSZ, মেক্সিকো সিটি, MX) দ্বারা সরবরাহ করা হয়েছিল। ভ্যাকসিন সাসপেনশনগুলি ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত -80 ◦C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেমুরিয়াম (এমএলএম) অ-চাষযোগ্য স্ট্রেনটি প্রভাকরণ এট আল।, 1976 [56] দ্বারা বর্ণিত একটি পদ্ধতির মাধ্যমে চার মাসের সংক্রমণ বহনকারী ইঁদুরের প্লীহা থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল, তারপরে ড্রেপার পি দ্বারা বর্ণিত ব্যক্তিগত বিচ্ছিন্নতা পদ্ধতি ব্যবহার করে পরিশোধন করা হয়েছিল। , 1980 [57]। সংক্ষেপে, 4 গ্রাম স্প্লেনিক টিস্যু 20 মিলি 0.2 এম সুক্রোজে সাসপেন্ড করা হয়েছিল এবং একটি গ্লাস পটার-এলভেহজেম-টাইপ হোমোজেনাইজারে গ্রাউন্ড করা হয়েছিল। কোষের ধ্বংসাবশেষ (Sorvall RV5B, rotor HB4) (Sorvall Instruments, Wilmington, DE, USA) অপসারণের জন্য ফলস্বরূপ সাসপেনশনটি 150×g এ 20 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। তারপর, 9 মিলি সুপারনাট্যান্ট 12 মিলি 0.3 এম সুক্রোজের উপর ওভারলেড করা হয়েছিল এবং টিউবগুলিকে 4-10 ◦C (Sorvall RC5B) তে 10 মিনিটের জন্য 3500×g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। ফলস্বরূপ ব্যাসিলি-সমৃদ্ধ পেলেটটি 0.2 এম সুক্রোজের 20 মিলিলিটারে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়েছিল এবং 1.5 এম কেসিএলের 12 এমএল-এর উপর 9 মিলি অ্যালিকোটগুলি ওভারলেড করা হয়েছিল।
তারপর, টিউবটিকে 4 ◦C তাপমাত্রায় 10 মিনিটের জন্য 3500× g তে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। ব্যাসিলি সংগ্রহ করা হয়, ফসফেট-বাফারড-স্যালাইন (PBS) (0.01 M Na/K ফসফেট, 0.15 M NaCl, pH 7.4) দিয়ে তিনবার ধুয়ে ফেলা হয় এবং 40 মিলি দ্রবণে পারকলের মিশ্রণ (3 অংশ) দিয়ে পুনরায় ঝুলিয়ে দেওয়া হয়। এবং 0.1 শতাংশ টুইন 80 (7 অংশ)। সাসপেনশনটি 23,000×g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। ব্যাসিলারি পেলেট সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং পারকোল নির্মূল না হওয়া পর্যন্ত পিবিএস দিয়ে পাঁচবার ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। ব্যাসিলারি প্রস্তুতির বিশুদ্ধতা Ziehl-Nelsen স্টেনিং দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছিল। বিশুদ্ধ ব্যাসিলারি সাসপেনশন সিন্থেটিক 7H9 Middlebrook brothOADC মাধ্যম (DIFCO, Detroit, MI, USA) (7H9-OADC মাধ্যম) এ প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং পরিচিত পরিমাণ ব্যাকটেরিয়া দিয়ে প্রস্তুত একটি নেফেলোমেট্রিক রেফারেন্স বক্ররেখার মাধ্যমে পরিমাপ করা হয়েছিল। ব্যাসিলারি সাসপেনশনটি ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত না হওয়া পর্যন্ত −20 ◦C তাপমাত্রায় অ্যালিকোট করা হয়েছিল এবং হিমায়িত করা হয়েছিল।
2.3। ইমিউনাইজেশন
200 μL জীবাণুমুক্ত পিবিএস-এ BCGphipps-এর 8 × 103 কলোনি-ফর্মিং ইউনিট (CFU) দিয়ে আট-সপ্তাহ-বয়সী Balb/c ইঁদুরের (n=6) দলগুলিকে সাবকিউটেনিয়াস টিকা দেওয়া হয়েছিল। এক মাস পরে, ইঁদুরের প্রতিটি গ্রুপকে টানা তিন দিন (30, 31, এবং 32 দিন পরে) পিবিএসের 100 μL বা hIFN-এর 100, 200, বা 300 আন্তর্জাতিক ইউনিট (IU) দিয়ে ইন্ট্রামাসকুলারভাবে বৃদ্ধি করা হয়েছিল{{14} }b (Urifron, Probiomed, Azcapotzalco, Mexico City, Mexico)।
2.4। এম. লেপ্রেমুরিয়াম চ্যালেঞ্জ
চ্যালেঞ্জ পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য, পিবিএস-এর 20 μL-এ ইঁদুরগুলিকে 2 × 106 কার্যকরী এমএলএম দিয়ে ইন্ট্রাডার্মালি টিকা দেওয়া হয়েছিল। তারপরে, ইঁদুরগুলিকে মানক অবস্থায় রাখা হয়েছিল এবং বিশুদ্ধ জল এবং পুরিনা রডেন্ট চৌ চিপস (কুয়াটিটলান ইজকালি, মেক্সিকো) অ্যাড লিবিটাম সরবরাহ করা হয়েছিল। সংক্রামিত ইঁদুরগুলি আট সপ্তাহ ধরে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল, সেই সময় পয়েন্ট যখন সংক্রামিত প্রাণীর ত্বকে ক্ষত স্পষ্ট ছিল। রোগের অগ্রগতি ইঁদুরের মধ্যে পরিবর্তনশীল ছিল এবং পরীক্ষামূলক থেরাপির সাথে সম্পর্কযুক্ত ছিল (PBS, BCGph, বা hIFN- 2b)।
2.5। এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসরবেন্ট অ্যাসেস (ELISA)
এমএলএম-সংক্রমিত ইঁদুরের সেরার অ্যান্টিবডিগুলি পরোক্ষ এনজাইম-লিঙ্কড ইমিউনোসরবেন্ট অ্যাসেস (ELISA) দ্বারা পরিমাপ করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, 96-ওয়েল প্লেটগুলি (Nunc, Rochester, NY, USA) রাতারাতি 4 ◦C তাপমাত্রায় প্রলেপ দেওয়া হয়েছিল, 10 µg পেপ্টিডোগ্লাইকোলিপিড ইথানলে [৩৮] দ্রবীভূত হয়েছিল। ঘরের তাপমাত্রায় ইথানল বাষ্পীভবনের পরে [৩৭], পিবিএস-এ 2 থেকে 3 ঘন্টা পর্যন্ত 3 শতাংশ নন-ফ্যাট দুধ দিয়ে অ-নির্দিষ্ট বাঁধাই ব্লক করা হয়েছিল। ব্লকিং দ্রবণটি বাতিল করার পর, পিবিএস-এর 1 শতাংশ নন-ফ্যাট দুধে 0.1 মিলি সিরা মিশ্রিত (1:100) কূপে যোগ করা হয়েছিল এবং 4 ◦C তাপমাত্রায় রাতারাতি ইনকিউব করা হয়েছিল।
তারপরে, প্লেটগুলি ব্যাপকভাবে পিবিএস দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল, এবং আবদ্ধ অ্যান্টিবডিগুলি {{0}}.1 মিলি অ্যান্টি-মাউস আইজিজি (1:4000, BD 550487, BD Pharmingen, San) দিয়ে সনাক্ত করা হয়েছিল। দিয়েগো, CA, USA), IgG1-HRP (1:2500, ab 97240, Abcam, Cambridge, MA, USA), IgG2a-HRP (1:2500, ab97245, Abcam), IgG2b-HRP (1: 2500, ab97250, Abcam), অথবা IgG3-HRP (1:2500, ab97260, Abcam), বা বায়োটিন-সংযুক্ত ইঁদুর-বিরোধী মাউস IgA মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি (1:1000, BD 550487, BD Pharmingen), এর পরে হর্সরাডিশ পারক্সিডেস (এইচআরপি)-সংযোজিত ইঁদুর বিরোধী মাউস আইজি অ্যান্টিবডি (1:1000, বিডি 550487, বিডি ফার্মিংজেন) বা অ্যাভিডিন-এইচআরপি (ab 59653, abcam) ক্রোমোজেনিক সাবস্ট্রেট, টেট্রামিথাইল-বেনজিডিন 0.05 সিটফোরেট (bH-5) এর মধ্যে 5.2), 0.01 শতাংশ হাইড্রোজেন পারক্সাইড (H2O2) এর সাথে সম্পূরক, রঙের বিকাশের জন্য কূপে যোগ করা হয়েছিল। প্রতিক্রিয়া 1 M H3PO4 দিয়ে বন্ধ করা হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট এলিসা রিডারে অপটিক্যাল ঘনত্ব 450 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল (ল্যাবসিস্টেম মাল্টিস্কান প্লাস, ল্যাবএক্স, মিডল্যান্ড, অন, কানাডা)। IFN- , IL-4, IL-17, IL-6, TNF- , এবং IL-10 নির্দিষ্ট স্যান্ডউইচ ELISA কিট (PEPROTEC Inc., Cranbury) দিয়ে সিরামে পরিমাপ করা হয়েছিল , NJ, USA)। প্রস্তুতকারকের নির্দেশ অনুযায়ী।
2.6। ইঁদুরের সেরাতে NO এর পরিমাপ
সংক্ষেপে, প্রোটিন এবং অন্যান্য হস্তক্ষেপকারী কারণগুলিকে প্ররোচিত করার জন্য সেরাকে ইথানল (1:1) দিয়ে চিকিত্সা করা হয়েছিল। 20 মিনিটের জন্য 3000 rpm-এ সেন্ট্রিফিউগেশন করার পরে, উদ্ধার করা সিরামের 20 μL গ্রিস রিএজেন্টের 100 μL এবং পাতিত জলের 80 μL সহ একটি ELISA প্লেটের কূপে স্থাপন করা হয়েছিল। গ্রিস রিএজেন্ট হল দ্রবণ A (5 শতাংশ ফসফরিক অ্যাসিডে 2 শতাংশ সালফানিলামাইড) এবং দ্রবণ B (0.1 শতাংশ এন-(1-ন্যাফথাইল) ইথিলেনডিয়ামিন, ডাইহাইড্রোক্লোরাইডের একটি ভলিউম-টু-ভলিউম মিশ্রণ। 30 মিনিটের ইনকিউবেশনের পর 25◦ C, বিকশিত গোলাপী রঙটি একটি ELISA রিডারে 595 nm এ নিবন্ধিত হয়েছিল৷ মানগুলি 1-100 μM পরিসরে সোডিয়াম নাইট্রাইটের একটি আদর্শ বক্ররেখায় এক্সট্রাপোলেট করা হয়েছিল৷
2.7। ইমিউনোফ্লোরেসেন্স
প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি নিম্নলিখিত সংস্থাগুলি থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল: ছাগল-বিরোধী iNOS (ক্লোন M-19, সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি, ডালাস, TX, USA), খরগোশ অ্যান্টি-নাইট্রোটাইরোসিন (AB 5411, EMD, Millipore, Burlington, MA, USA) ), বায়োটিন ইঁদুর Ly6C/Ly6G (ক্লোন RB6-8C5, BD Pharmingen), ছাগল এন্টি-CD3 এপসিলন (ক্লোন M-20, সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি), ইঁদুরের প্রতিষেধক FoxP3 (ক্লোন FJK{{12} }s, eBioscience, San Diego, CA, USA), ছাগলের অ্যান্টি-প্রলিফারেটিং সেল নিউক্লিয়ার অ্যান্টিজেন (ক্লোন C-20, সান্তা ক্রুজ বায়োটেকনোলজি), FITC-চিনাবাদাম অ্যাগ্লুটিনিন (L7381- 1MG, SIGMA, St লুই, এমও, ইউএসএ), এবং এপিসি-র্যাট অ্যান্টি-মাউস CD45R (ক্লোন RA3-6B2, BD Pharmingen)।
প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি নিম্নলিখিত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলির সাথে প্রকাশিত হয়েছিল: Alexa Fluor 568 গাধা অ্যান্টি-গোট IgG (A11057, থার্মো ফিশার সায়েন্টিফিক, Waltham, MA, USA), Alexa Fluor 488 গাধা অ্যান্টি-র্যাবিট IgG (711-546, জ্যাকসন ইমিউনো রিসার্চ লা) , West Grove, PA, USA), এবং Alexa Fluor 680 streptavidin (S32358, Thermo Fisher Scientific)।
পাঁচ-µm ফরমালিন-নির্ধারিত প্যারাফিনাইজড বিভাগগুলি ডিপ্যারাফিনাইজেশনের জন্য রাতারাতি 60 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। টিস্যু বিভাগগুলি দ্রুত জাইলিনে স্থানান্তরিত হয়েছিল (247642-2.5L, SIGMA) এবং পরম অ্যালকোহল, 96 শতাংশ অ্যালকোহল, 70 শতাংশ অ্যালকোহল এবং জলে ক্রমাগতভাবে স্লাইডগুলি নিমজ্জিত করে হাইড্রেট করা হয়েছিল৷ স্লাইডগুলিকে একটি অ্যান্টিজেন পুনরুদ্ধার দ্রবণে নিমজ্জিত করা হয়েছিল, 30 মিনিটের জন্য সিদ্ধ করা হয়েছিল এবং ঘরের তাপমাত্রায় (আরটি) 10 মিনিটের জন্য ঠান্ডা করা হয়েছিল। স্লাইডগুলি বেশ কয়েকবার জলে ধুয়ে পিবিএসে স্থানান্তরিত হয়েছিল। পিবিএস-এ 0.1 শতাংশ টুইন 20 এবং 0.1 শতাংশ ট্রাইটন-এক্স-100, একটি আর্দ্র চেম্বারে RT-তে 30 মিনিটের জন্য 5 শতাংশ স্বাভাবিক গাধা সিরামের সাথে অ-নির্দিষ্ট বাইন্ডিং ব্লক করা হয়েছিল। প্রাথমিক অ্যান্টিবডিগুলি স্লাইডে যুক্ত করা হয়েছিল এবং আরটি-তে একটি আর্দ্র চেম্বারে রাতারাতি ইনকিউবেট করা হয়েছিল। স্লাইডগুলি পিবিএস-এ আলতো করে ধুয়ে নেওয়া হয়েছিল এবং ফ্লুরোসেন্টলি লেবেলযুক্ত সেকেন্ডারি অ্যান্টিবডিগুলি 2 ঘন্টা, আরটি-তে বা আর্দ্র চেম্বারে রাতারাতি ইনকিউবেট করা হয়েছিল।
অবশেষে, স্লাইডগুলি পিবিএস-এ 1 ঘন্টার জন্য ধুয়ে ফেলা হয়েছিল এবং DAPI (H-1200, ভেক্টর ল্যাবরেটরিজ, Burlingame, CA, USA) সহ Vectashield antifade মাউন্টিং মিডিয়ার সাথে মাউন্ট করা হয়েছিল। একটি Zeiss Axioplan মাইক্রোস্কোপ দিয়ে ছবি তোলা হয়েছিল। একটি লিম্ফ নোড বিভাগে সমস্ত জীবাণু কেন্দ্র (GCs) কার্ল জেইস মাইক্রোস্কোপের একটি স্বয়ংক্রিয় সরঞ্জাম দিয়ে পরিমাপ করা হয়েছিল এবং প্রিজম সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে গড় GC আকার গণনা করা হয়েছিল। প্রতি ফিল্ডে ইতিবাচক কোষের গড় সংখ্যা গণনা করতে CD3 প্লাস FoxP3 প্লাস ট্রেগগুলি প্রতি টিস্যু প্রতি 5টি এলোমেলো 200 × ক্ষেত্রগুলিতে গণনা করা হয়েছিল।
2.8। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ
গোষ্ঠীগুলির মধ্যে পরিসংখ্যানগতভাবে উল্লেখযোগ্য পার্থক্যগুলি একমুখী ANOVA, নিউম্যান-কিউলস একাধিক তুলনা, জোড়াবিহীন/জোড়া দুই-টেইল্ড স্টুডেন্টস টি-টেস্ট এবং P মান < 0.05 দ্বারা পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল। পরিসংখ্যানগত পার্থক্যগুলি গ্রাফ প্যাড প্রিজমের সাথে গণনা করা হয়েছিল।
3। ফলাফল
3.1। BCGphipps (BCGph)-প্রাইমিং এর পর পরপর ইন্ট্রামাসকুলার hIFN- 2b বুস্টিং M. lepraemurium-এর সাথে Intradermal চ্যালেঞ্জ থেকে Balb/c ইঁদুরকে রক্ষা করে।
আমরা পূর্বে প্রতিশ্রুতিশীল সুরক্ষা ফলাফল সহ ইঁদুরের বিসিজি টিকা দেওয়ার পরে IFN এর ধারাবাহিক ইন্ট্রামাসকুলার বুস্টিংয়ের উপর ভিত্তি করে একটি প্রাইম-বুস্ট প্রোটোকল তৈরি করেছি। সাম্প্রতিক গবেষণায় একটি বিসিজি রিকম্বিন্যান্ট ব্যবহার করা হয়েছে যা মূত্রাশয় ক্যান্সারের চিকিৎসার জন্য মানুষের IFN- 2বি প্রকাশ করে [51,53]। অতএব, বর্তমান সমীক্ষায়, আমাদের লক্ষ্য ছিল চিত্র 1-এ চিত্রিত স্কিম অনুসরণ করে কুষ্ঠরোগের একটি মুরিন মডেলে hIFN- 2b বুস্টিং দ্বারা BCGph প্রাইমিং দ্বারা প্ররোচিত সুরক্ষা বিশ্লেষণ করা।
চিত্র 1. এম. লেপ্রেমুরিয়ামের সাথে ইন্ট্রাডার্মাল চ্যালেঞ্জের বিরুদ্ধে ইঁদুরের সুরক্ষা মূল্যায়নের জন্য প্রাইম-বুস্ট প্রোটোকল। Balb/c ইঁদুরের দলগুলিকে (n=6) BCGph এর কম ডোজ (8 × 103 CFU) দিয়ে সাবকুটেনিয়াস টিকা দেওয়া হয়েছিল। পিবিএস বা hIFN- 2b এর সাহায্যে প্রতিটি গ্রুপের ইঁদুরকে পরপর দিনে (30, 31, এবং 32 দিন টিকা দেওয়ার পরে) ইন্ট্রামাসকুলারভাবে বৃদ্ধি করা হয়েছিল। শেষ বুস্টিংয়ের আট সপ্তাহ পরে ইঁদুরকে 2 × 106 কার্যকরী এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছিল। এর পরে, ইঁদুর বলি দেওয়া হয়েছিল এবং চ্যালেঞ্জের পরে আট সপ্তাহের বায়োস্পেসিমেন্স সংগ্রহ করা হয়েছিল। উপাদান এবং পদ্ধতিতে বর্ণিত হিসাবে ত্বকের ক্ষতগুলির বিকাশ পর্যবেক্ষণ এবং পরিমাপ করা হয়েছিল।
সংক্ষেপে, 300 IU hIFN- 2b দিয়ে তৃতীয় বুস্টের আট সপ্তাহ পরে, MLM দিয়ে ইঁদুরগুলিকে ইন্ট্রাডার্মাললি চ্যালেঞ্জ করা হয়েছিল। পরবর্তী আট সপ্তাহে রোগের অগ্রগতি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। এই সময়ের শেষে, আমরা জিসি সনাক্ত করতে ইনগুইনাল লিম্ফ নোড সংগ্রহ করেছি এবং ইমিউনোফ্লোরোসেন্স দ্বারা ট্রেগস এবং অন্যান্য কোষের জনসংখ্যা গণনা করেছি। আমরা সক্রিয় ম্যাক্রোফেজ, নাইট্রোটাইরোসিন (এনটি) অবশিষ্টাংশের অবস্থান, এবং আমাদের পরীক্ষামূলক ইঁদুরের ত্বকে Gr-1 প্লাস মাইলয়েড কোষগুলির দ্বারা iNOS উত্পাদন কল্পনা করতে ইমিউনোফ্লোরোসেন্স ব্যবহার করেছি। উপরন্তু, আমরা ELISA (চিত্র 1) দ্বারা এমএলএম-এর গ্লাইকোলিপিডগুলিতে সাইটোকাইন এবং অ্যান্টিবডি পরিমাপ করার জন্য সিরাম সংগ্রহ করেছি।
প্রথমত, BCGph প্রাইমিং এবং hIFN{{0}}b-এর প্রতিরক্ষামূলক প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য MLM-এর সাহায্যে ইঁদুরের ইন্ট্রাডার্মাল চ্যালেঞ্জের বিরুদ্ধে, আমরা ত্বকের ক্ষত পরিমাপ করেছি এবং Ziehl-Neelsen দাগ দ্বারা ত্বকের ব্যাসিলি উপনিবেশকে কল্পনা করেছি। (চিত্র 2A-E)। MLM চ্যালেঞ্জ ছাড়াই শুধুমাত্র যানবাহন (PBS) প্রাপ্ত আনপ্রাইমড ইঁদুরের ত্বকে কোনো ব্যাসিলি দেখা যায়নি (চিত্র 2A)। গাড়ির সাথে টিকা দেওয়া এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরগুলি ত্বকে ব্যাপক পরিমাণে এমএলএম ব্যাসিলি দেখায় (চিত্র 2 বি) যখন বিসিজিপিএইচের সাথে ইঁদুরের প্রাইমিং মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধি হ্রাস করে (চিত্র 2C)। ক্রমাগত hIFN- 2b প্রশাসন MLM (চিত্র 2D) এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরের তুলনায় ত্বকে মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধিও হ্রাস করেছে। BCGph দিয়ে প্রাইম করা এবং hIFN- 2b দিয়ে বুস্ট করা ইঁদুরের সবচেয়ে কম মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধি ছিল (চিত্র 2E)। এই তথ্যগুলির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, শুধুমাত্র যানবাহন (PBS) প্রাপ্ত MLM-এর সাহায্যে চ্যালেঞ্জ করা স্বাস্থ্যকর ইঁদুরগুলি সবচেয়ে বিস্তৃত ত্বকের ক্ষত তৈরি করেছে (35 ± 9.9 mm2), যখন BCGph-প্রাইমড ইঁদুরগুলির ত্বকের ক্ষতগুলি একই আকারের ছিল। ইঁদুরগুলিকে গাড়ির সাথে টিকা দেওয়া হয়েছে এবং MLM (13.5 ± 4.24 mm2 ) (চিত্র 2F) দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে। এইচআইএফএন- 2বি দিয়ে ইঁদুরের নিচের অংশে ইনজেকশন দেওয়া হয়েছে ছোট চামড়ার ক্ষত (20 ± 1.77 µm2 )। লক্ষণীয়, যে ইঁদুরগুলি BCGph প্রাইমড এবং hIFN- 2b দিয়ে বুস্ট করা হয়েছিল, তারা ত্বকের ক্ষতের আকারে উল্লেখযোগ্য হ্রাস দেখিয়েছে (5 ± 7.07 mm2) (p <0.05) (চিত্র 2F)।
\
চিত্র 2. ত্বকের ক্ষত এবং বাল্ব/সি-তে মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধি এম. লেপ্রেমুরিয়ামের সাথে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে। এমএলএম-এর সাথে চ্যালেঞ্জ-পরবর্তী আট সপ্তাহে ত্বকের ক্ষত বিকাশ এবং ত্বকের ক্ষতগুলিতে মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধির কল্পনা করে ইঁদুরের সুরক্ষা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। ত্বকের ক্ষত Ziehl-Neelsen দিয়ে দাগযুক্ত ছিল। প্রতিনিধি 400× (A) আনপ্রাইমড ইঁদুর এবং চ্যালেঞ্জবিহীন ইঁদুরের ম্যাগনিফিকেশন ছবি; (বি) ইঁদুরগুলিকে পিবিএস দিয়ে টিকা দেওয়া এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (গ) ইঁদুর BCGph দিয়ে প্রাইমড এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (D) ইঁদুরকে intramuscularly hIFN- 2b দিয়ে টিকা দেওয়া এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (ঙ) ইঁদুর BCGph দিয়ে প্রাইম করা, hIFN- 2b দিয়ে বুস্ট করা, এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা; (F) দক্ষ সুরক্ষা হয় ত্বকের ক্ষতের অনুপস্থিতি বা ত্বকের ক্ষতের আকারে উল্লেখযোগ্য হ্রাসের সমতুল্য, যা mm2, n=6 ইঁদুর/গোষ্ঠীতে প্রকাশ করা হয়েছে। * p < 0.05; ** পি <0.005; *** p < 0.0005 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।
3.2। ইঁদুরের ন্যূনতম ত্বকের প্যাথলজি BCGphipps-এর সাহায্যে প্রাইমড এবং hIFNa 2b-এর সাহায্যে বৃদ্ধি পায় নাইট্রোটাইরোসিন জমা হওয়া এবং দুর্বল নিউট্রোফিল অনুপ্রবেশের সাথে সম্পর্কযুক্ত।
নাইট্রিক অক্সাইড অন্তঃকোষীয় রোগজীবাণু হত্যার জন্য গুরুত্বপূর্ণ। যাইহোক, নাইট্রিক অক্সাইড, সুপারঅক্সাইড র্যাডিকাল (O,-, এবং হাইড্রোজেন পারক্সাইডের অত্যধিক উৎপাদন বিষাক্ত এবং অস্থির পারক্সিনাইট্রাইট তৈরির দিকে পরিচালিত করে, একটি অণু যা প্রোটিনের উপর টাইরোসিনের অবশিষ্টাংশের সাথে বিক্রিয়া করে স্থিতিশীল NT 56-601 গঠন করে। যদিও পারক্সিনাইট্রাইট মাইকোব্যাকটেরিয়াকে মেরে ফেলে, এটি ইমিউন কোষেরও ক্ষতি করে [57-59]।
এইভাবে, আমরা ইমিউনোফ্লোরেসেন্স দ্বারা আমাদের পরীক্ষামূলক ইঁদুরের ত্বকে iNOS-উত্পাদক কোষ এবং নিউট্রোফিলগুলি অনুসন্ধান করার সিদ্ধান্ত নিয়েছি। আইএনওএস এবং এনটির জন্য পটভূমি সংকেত এবং ইঁদুরের ত্বকে খুব কম Gr-1 প্লাস কোষ শুধুমাত্র PBS (চিত্র 3A) গ্রহণ করে। বর্ধিত মাইকোব্যাকটেরিয়াল লোড এবং ত্বকে বর্ধিত নেক্রোটিক ক্ষতগুলি নেক্রোটিক ত্বকের অঞ্চলে এনটি অবশিষ্টাংশ জমে যাওয়ার সাথে সম্পর্কিত (58,59 টিকাবিহীন (চিত্র 3B) এবং BCGph প্রাইমড ইঁদুর MLM (চিত্র 3C) এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ স্থানীয় প্রতিক্রিয়ার সাথে আরও ভারসাম্যপূর্ণ। এবং HIFN- 2b (চিত্র 3D) বা ইঁদুর BCGph প্রাইমড এবং hIFN 2b (চিত্র 3E) দিয়ে ইঁদুরের ক্রমবর্ধমান ইনোকুলেশন গ্রহণ করে এনটি এবং নিউট্রোফিল অনুপ্রবেশের উন্নতি, এনটি এবং নিউট্রোফিল অনুপ্রবেশ হ্রাস পেয়েছে। }} প্লাস নিউট্রোফিল এবং হ্রাসকৃত এনটি অঞ্চলগুলি ইঁদুরের হিস্টোলজিক্যাল ত্বকের অংশে BCGph দিয়ে প্রাইম করা এবং hIFN- 2b (চিত্র 3F) দিয়ে বুস্ট করা ক্ষুদ্রতম প্রদাহজনক অঞ্চলের সাথে মিলে যায়।
চিত্র 3. নাইট্রোটাইরোসিন জমা হওয়া, প্রতিবন্ধী নিউট্রোফিল জমা হওয়া এবং ত্বকের প্রদাহ কমানোর সাথে সুরক্ষা যুক্ত। ত্বকের ক্ষত বিভাগগুলি আইএনও (লাল), এনটি (সবুজ) এবং Gr-1 (সাদা) জন্য নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সংমিশ্রণে দাগযুক্ত ছিল। প্রতিনিধি 200× ছবিগুলি থেকে (A) আনপ্রাইমড এবং চ্যালেঞ্জবিহীন ইঁদুরের চামড়া, (B) ইঁদুরগুলিকে পিবিএস দিয়ে টিকা দেওয়া এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে, (C) বিসিজিফিপস দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুর এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে, ( ঘ) ইঁদুরকে এইচআইএফএন- 2বি দিয়ে ইনট্রামাসকুলারভাবে ইনোকুলেট করা হয় এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয় এবং (ই) বিসিজিপিএইচ দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুরকে, এইচআইএফএন- 2বি দিয়ে বুস্ট করা হয় এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়; (F, G) Zeiss Axioplan মাইক্রোস্কোপের স্বয়ংক্রিয় সরঞ্জামের সাহায্যে প্রদাহজনক এলাকার পরিমাপ, ত্বকের ক্ষতগুলি MLM-এর সাথে চ্যালেঞ্জ-পরবর্তী আট সপ্তাহে সংগ্রহ করা হয়েছিল, গ্রাফিক্স দেখায় কুষ্ঠ ত্বকের ক্ষতগুলিতে প্রদাহজনক কোষ দ্বারা দখলকৃত গড় এলাকা, µm2 তে প্রকাশ করা হয়েছে। স্কেল বার=100 µm। n=6 ইঁদুর/গোষ্ঠী * p < 0.05; ** পি <0.005; *** p < 0.0005 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।
অন্যান্য পরীক্ষামূলক গোষ্ঠীর তুলনায় কোনো উৎপাদন পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ ছিল না যদিও, BCGph-প্রাইমড এবং hIFN- 2b এর সাহায্যে বুস্ট করা ইঁদুরের গ্রুপে, NO-এর ঘনত্ব বেশি ছিল (68.28 μM/L ± 0 .889) PBS এবং MLM গ্রুপের তুলনায় (62.79 µM/L ± 1৷{12}}4), BCGph (63.37 µM/L ± 0.225), hIFN- 2b (62.57 µM/L ± 1.028) ) (চিত্র 3G)।
3.3। BCGphipps-এর সাহায্যে ইঁদুরের সিরামে অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইন বৃদ্ধি পায় এবং hIFN- 2b-এর সাহায্যে বৃদ্ধি পায়
এমএলএম-এর সাথে চ্যালেঞ্জের পরে বাল্ব/সি ইঁদুরের সিরামে প্রো- এবং অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি সাইটোকাইনগুলি পরিমাপ করা হয়েছিল। এমএলএম দ্বারা সৃষ্ট ইমিউনোসপ্রেসিভ অবস্থার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, পিবিএস দিয়ে টিকা দেওয়া বাল্ব/সি ইঁদুরের সিরামে প্রোইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের ঘনত্ব কম ছিল এবং এমএলএম (IFN- , 625 ± 442 pg/mL; TNF- , 697 pg/4) এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছিল mL; IL-6, 68 ± 48 pg/mL; IL-17, 95 ± 67 pg/mL)। বিপরীতে, তাদের সিরামে প্রদাহবিরোধী সাইটোকাইনের মাঝারি মাত্রা ছিল (IL-10, 1763 ± 124 pg/mL এবং IL-4, 1250 ± 173 pg/mL)। যদিও ইঁদুরগুলিকে BCGph প্রাইমিং এবং এইচআইএফএন{21}}বি দিয়ে ক্রমাগত বুস্টিং দ্বারা সুরক্ষিত করা হয়েছিল, তবে প্রোইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের সিস্টেমিক পরিমাণ PBS দিয়ে ইনোকুলেশন করা এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরের থেকে পরিসংখ্যানগতভাবে আলাদা ছিল না। অপ্রত্যাশিতভাবে, এই ইঁদুরের সিরামে IL-4 (1875 ± 352 pg/mL, p <0.05), এবং IL-10 (4250 ± 271 pg/mL) এর ঘনত্ব উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে ইঁদুরগুলিকে পিবিএস দিয়ে টিকা দেওয়া এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে (সারণী 1)। এই ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে আমাদের টিকা প্রোটোকল টিস্যু ক্ষতি রোধ করতে প্রদাহ-বিরোধী পথগুলি সক্রিয় করতে পারে।
3.4। BCGphipps দিয়ে প্রাইম করা বা hIFN- 2b দিয়ে উন্নীত করা ইঁদুরের ড্রেনিং লিম্ফ নোডস (DLNs) এ প্রতিবন্ধী ট্রেগ জমা হয়
বিবেচনা করে যে Tregs IL-10 [61,62] উৎপন্ন করে, আমরা টিকা দেওয়ার স্থানের কাছে অবস্থিত ড্রেনিং লিম্ফ নোড (DLNs) এ CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs-এর পরিমাপ করার সিদ্ধান্ত নিয়েছি। অসংক্রমিত ইঁদুরগুলিতে (পিবিএস), ট্রেগস এখনও উপস্থিত ছিল (113 ± 9.8 সিডি 3 প্লাস ফক্সপি 3 প্লাস ট্রেগ/200 × ফিল্ড) (চিত্র 4A)। প্রত্যাশিত হিসাবে, MLM-এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরগুলিতে Tregs উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে যেগুলি ভ্যাকসিন (BCGph) বা hIFN- 2b (214 ± 30 CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs/200 × ফিল্ড) পায়নি (চিত্র 4B)। সঙ্গতভাবে, BCGph (160 ± 26 CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs/200 × ফিল্ড) (চিত্র 4C) এবং hIFN- 2b (162 ± 33 CD3 প্লাস) প্রাপ্ত ইঁদুরগুলিতে ট্রেগসের নিম্ন স্তর পরিলক্ষিত হয়েছে FOXP3 প্লাস Tregs/200 × ক্ষেত্র) (চিত্র 4D); BCGph দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুরগুলি এবং hIFN- 2b (127 ± 16 CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs/200 × ফিল্ড) (চিত্র 4E) তে HIFN- 2b ছাড়া টিকাবিহীন ইঁদুরের তুলনায় Tregs-এর ঘনত্ব সমান ছিল boosting যাইহোক, আমাদের পরীক্ষামূলক ইঁদুরের DLNগুলিতে অন্ধভাবে CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs গণনা করার পরে, আমরা দেখতে পেয়েছি যে BCGph প্রাইমিং (p=0.0013), hIFN- 2 এর পরে ইঁদুরের DLNগুলিতে Tregs উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে b ইনোকুলেশন (p=0.0074), বা সম্মিলিত BCGph প্রাইমিং এবং hIFN- 2b বুস্টিং (p=0.0013) MLM (চিত্র 4E) এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরের তুলনায়।
চিত্র 4. BCGphipps দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুরের ড্রেনিং লিম্ফ নোড (DLNs) এ নিয়ন্ত্রক টি কোষের (Tregs) ক্ষতিগ্রস্থ সঞ্চয় এবং hIFN- 2b এর সাহায্যে বৃদ্ধি পায়। ইঁদুর বলি দেওয়া হয়েছিল, এবং ডিএলএনগুলি এমএলএম-এর সাথে চ্যালেঞ্জের পরে আট সপ্তাহ সংগ্রহ করা হয়েছিল। ইমিউনোফ্লোরোসেন্স দ্বারা CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস ট্রেগস সনাক্ত করতে CD3 (লাল) এবং FOXP3 (সবুজ নিউক্লিয়াস) এর জন্য নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি দিয়ে DLN দাগ দেওয়া হয়েছিল। (ক) টিকাবিহীন ইঁদুরের ডিএলএন-এ ট্রেগসের বেসাল জমে থাকা; (B) MLM চ্যালেঞ্জের পরে DLN-এর ট্রেগগুলি বাড়ানো হয়েছিল এবং (C) BCGph-প্রাইমড, (D) hIFN- 2b ইনোকুলেটেড, এবং (E) BCGph-primed-hIFN- 2b-এ তুলনামূলকভাবে হ্রাস করা হয়েছিল বর্ধিত ইঁদুর; (F) মরফোমেট্রিক বিশ্লেষণ BCGph প্রাইমড/hIFN- 2b বুস্টেড মাউসের DLN-এ Tregs-এ উল্লেখযোগ্য হ্রাস দেখায়। স্কেল বার=100 µm, n=6 ইঁদুর/গোষ্ঠী * p < 0৷{17}}৫; ** p < 0.005; *** p < 0.0005 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল।
3.5। BCGphipps প্রাইমিং এবং hIFN- 2b বুস্টিং ইনফ্লুয়েন্স GC-এর প্রতিক্রিয়া মাউস DLN-এ
T follicular রেগুলেটরি সেল নামে পরিচিত GC-তে বিশেষ ট্রেগস রয়েছে (TFR তারা উভয় GC-এর প্রতিক্রিয়াগুলিকে সংশোধন করে এবং অটোরিঅ্যাকটিভ প্লাজমা কোষ তৈরিতে বাধা দেয় (28,33]। DLN-এ কমে যাওয়া Tregs পরামর্শ দিয়েছে যে GCs প্রতিক্রিয়াগুলি ইঁদুরের মধ্যে প্রকাশ করা যেতে পারে) BCGph দিয়ে প্রাইম করা হয়েছে এবং hlFN-a 2b দিয়ে বুস্ট করা হয়েছে। অ্যান্টিজেনিক স্টিমুলেশনের অনুপস্থিতির সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, আমরা অসংক্রামিত ইঁদুরের DLN-এ GC সনাক্ত করিনি চিত্র 5A। ছোট GC গুলি আনপ্রাইমড ইঁদুরের DLNগুলিতে উপস্থিত ছিল, MLMLigure 5 এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে)।
চিত্র 5. BCGphipps প্রাইমিং এবং hFN-a 2b বুস্টিং প্রভাব MLM চ্যালেঞ্জের পরে DLN-এ GC প্রতিক্রিয়া। ML M দিয়ে আট সপ্তাহের পোস্ট-চ্যালেঞ্জে ইঁদুর বলি দেওয়া হয়েছিল। ড্রেনিং লিম্ফ নোড (DLNs) অ্যান্টিবডি স্পেসিফায়ার প্রলিফারেটিং সেল নিউক্লিয়ার অ্যান্টিজেন (PCNA, লাল নিউক্লিয়াস), পিনাট অ্যাগ্লুটিনিন (PNA, সবুজ), এবং CD45R (B22{13) দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল }}, সাদা) PCNA*PNA প্লাস * B220লো GC B কোষের কমপ্যাক্ট ক্লাস্টার ধারণকারী GC সনাক্ত করতে। (A) আনপ্রাইমড এবং চ্যালেঞ্জবিহীন ইঁদুরের DL Ns-এ GC B কোষ; (গ) বিসিজিপিএইচ দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুর এবং এমএলএম দিয়ে চ্যালেঞ্জ; (D) ইঁদুরগুলি hlFN-a 2b দিয়ে ইন্ট্রামাসকুলারলি বুস্ট করা হয়েছে এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (ই) ইঁদুর BCGphবুস্টেড hlFN-a 2b দিয়ে প্রাইমড, এবং ML M দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (F) GC পরীক্ষামূলক ইঁদুরের পৃথক DL Ns-এ পরিমাপ করা হয়েছিল গড় GC আকার গণনা করে। স্কেল বার=100 um.=6 ইঁদুর/গোষ্ঠী। " p < 0.05, * p < 0.005; *** y < 0.0005 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ বলে বিবেচিত হয়েছিল৷
চিত্র 5. BCGphipps প্রাইমিং এবং hlFN-a 2b বুস্টিং প্রভাব GC প্রতিক্রিয়া ML M চ্যালেঞ্জের পরে DLN-এ। ML M-ড্রেনিং লিম্ফ নোডস (DLNs) এর সাথে আট সপ্তাহের পোস্ট-চ্যালেঞ্জে ইঁদুরকে বলি দেওয়া হয়েছিল সেল নিউক্লিয়ার অ্যান্টিজেন (PCNA, লাল নিউক্লিয়াস), চিনাবাদাম অ্যাগ্লুটিনিন (PNA, সবুজ), এবং CD45R (B22{{{{ 13}}, সাদা) PCNAPNA প্লাস প্লাস B220লো GC B কোষের কমপ্যাক্ট ক্লাস্টার ধারণকারী GC সনাক্ত করতে। (A) আনপ্রাইমড এবং চ্যালেঞ্জবিহীন ইঁদুরের DL Ns-এ GC B কোষ; (গ) ইঁদুর BCGph দিয়ে প্রাইমড এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (D) ইঁদুরগুলি hlFN-a 2b দিয়ে ইন্ট্রামাসকুলারভাবে বুস্ট করা হয়েছে এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (E) BCGph বুস্ট করা hlFN-a 2b দিয়ে ইঁদুরকে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে এবং MLM দিয়ে চ্যালেঞ্জ করা হয়েছে; (এফ) গড় GC আকার গণনা করতে পরীক্ষামূলক ইঁদুরের পৃথক DLN-এ GC পরিমাপ করা হয়েছিল। স্কেল বার=100 um. 1=6টি ইঁদুর/ গ্রুপ। " y < 0.05. * y < 0.005, *** y < 0.0005 পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল৷
মজার বিষয় হল, BCGph দিয়ে প্রাইম করা ইঁদুরের MLM (চিত্র 5C) এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে বড় GC ছিল। hlFN-a 2b (চিত্র 5D) দিয়ে টিকা দেওয়া ইঁদুরের GC ছিল MLM-এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরদের তুলনায় তুলনামূলক আকারের। বিসিজিপিএইচ দিয়ে প্রাইম করা এবং hlFN-a 2b দিয়ে বুস্ট করা ইঁদুরের মধ্যবর্তী আকারের GC ছিল (চিত্র 5E)। DLN-এ GC-এর প্রতিক্রিয়াগুলির আরও পরিমাণগত মূল্যায়ন করার জন্য, আমরা পৃথক DLN বিভাগে গড় GC আকার গণনা করেছি। আমাদের পর্যবেক্ষণের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ, আমরা hlFN-a 2b ইনজেকশনের পরে এবং BCGph প্রাইমিং/hIFN-a 2b বুস্টিং প্রোটোকল (চিত্র 5E) এ DLN-এ গড় GC আকারে উল্লেখযোগ্য হ্রাস পেয়েছি।
3.6। BCGphipps প্রাইমিং এবং hIFN- 2b বুস্টিং-এর পর M. lepraemurium-এর সাথে চ্যালেঞ্জ করা ইঁদুরের গ্লাইকোলিপিড-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডির তুলনীয় মাত্রা
GC গঠন এবং সংগঠনে পরিলক্ষিত পার্থক্য অনুসারে, আমরা এমএলএম থেকে নিষ্কাশিত গ্লাইকোলিপিডগুলির জন্য নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির ঘনত্ব পরিমাপ করেছি। বিশ্বব্যাপী, আমাদের ফলাফলগুলি দেখায় যে গ্লাইকোলিপিড-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির বিভিন্ন শ্রেণী এবং আইসোটাইপগুলির পদ্ধতিগত পরিমাণ টিকাকরণ, এইচআইএফএন- 2বি এর ধারাবাহিক প্রশাসন, বা বিসিজিপিএইচ প্রাইমিং/এইচআইএফএন- 2বি প্রোটোকল দ্বারা প্রভাবিত হয়নি ( টেবিল ২). শুধুমাত্র hIFN- 2b দিয়ে ইঁদুরের বৃদ্ধি সিরামে উচ্চ পরিমাণে IgG এবং IgG1 অ্যান্টিবডি তৈরি করে। যাইহোক, অন্যান্য পরীক্ষামূলক গোষ্ঠীর তুলনায় IgG এবং Ig G1 অ্যান্টিবডি স্তরগুলি পরিসংখ্যানগতভাবে উল্লেখযোগ্য ছিল না (সারণী 2)।
4। আলোচনা
বর্তমান সমীক্ষায়, আমরা দেখিয়েছি যে আমাদের প্রাইম-বুস্টিং প্রোটোকল সাবকুটেনিয়াস BCGphipps প্রাইমিং এবং ক্রমাগত ইন্ট্রামাসকুলার বুস্টিং-এর উপর ভিত্তি করে HIFN- 2b এর ক্রমবর্ধমান পরিমাণে MLM-এর সাথে ইন্ট্রাডার্মাল চ্যালেঞ্জ থেকে ইঁদুরকে সুরক্ষিত করে।
প্রাইম-বুস্টিং প্রোটোকল ত্বকে এমএলএম বৃদ্ধিকে বাধা দেয় এবং এনটি উত্পাদন এবং নিউট্রোফিলিক প্রদাহ (চিত্র 3E) হ্রাস করে স্থানীয় প্যাথলজিকে উন্নত করে। এটি প্রদাহ-বিরোধী সাইটোকাইনস (IL-4 এবং IL-10) অন্তর্ভুক্ত করার ফলে সম্ভবত ত্বকে অত্যধিক প্রদাহ প্রতিরোধ করে এবং পদ্ধতিগতভাবে প্রকাশ পায়। অপ্রত্যাশিতভাবে, যদিও থেরাপিউটিক পদ্ধতিতে DLNs (চিত্র 4E) তে CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস ট্রেগস হ্রাস পেয়েছে, GC প্রতিক্রিয়াগুলি তীব্রভাবে বর্ধিত হয়নি (চিত্র 5E), এবং সমস্ত পরীক্ষামূলক গ্রুপে গ্লাইকোলিপিড-নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সিরাম ঘনত্ব একই রকম ছিল। শুধুমাত্র hIFN- 2b দিয়ে ইঁদুরের টিকা দেওয়া হয় (সারণী 2)। তা সত্ত্বেও, আমাদের পরীক্ষামূলক ডেটা BCG প্রাইমিং এর সম্ভাব্য ব্যবহারকে সমর্থন করে যা ইন্ট্রামাসকুলার IFN 2b বুস্টিং এর সাথে যুক্ত, একটি প্রতিশ্রুতিশীল ইমিউনোথেরাপি হিসাবে যা মানুষের কুষ্ঠরোগে অন্বেষণের যোগ্য।
কুষ্ঠরোগের ক্লিনিকাল প্রকাশগুলি রোগীদের মধ্যে সনাক্ত করা ইমিউনোলজিকাল স্পেকট্রামের সাথে সম্পর্কযুক্ত এবং LL থেকে TT [2,4,14,18] পর্যন্ত। সাধারণভাবে, M. leprae-এর হোস্ট অনাক্রম্যতা প্রধানত একটি পোলারাইজড টি সাহায্যকারী প্রতিক্রিয়া (Th1/Th2) দ্বারা চিহ্নিত করা হয়। বর্ণালীর একপাশে, যদিও এলএল শক্তি দ্বারা চিহ্নিত করা হয়, তবুও মাইকোব্যাকটেরিয়াল অ্যান্টিজেন এবং IL-4 এবং IL-10 উৎপাদনে কিছু প্রতিক্রিয়াশীলতা রয়েছে। বিপরীতে, টিটিতে, একটি প্রধান Th1 প্রতিক্রিয়া ম্যাক্রোফেজগুলির IFN-চালিত সক্রিয়করণের দিকে পরিচালিত করে, যা ব্যাসিলি নির্মূলকে ত্বরান্বিত করে। এমএলএম দ্বারা সংক্রামিত ইঁদুররা সাধারণত হিউমারাল বা সেলুলার অনাক্রম্যতা [18-20] এর জন্য স্পষ্ট আধিপত্য ছাড়াই লেপ্রোমাটাস-সদৃশ কুষ্ঠ বিকাশ করে।
সংক্রমণ বা টিকাকরণ [63] দ্বারা উদ্ভূত প্রতিরক্ষামূলক অ্যান্টিবডিগুলি অ্যাফিনিটি পরিপক্কতা নামক একটি প্রক্রিয়া দ্বারা উত্পাদিত হয়, যা পেরিফেরাল টিস্যুতে উৎপন্ন সেকেন্ডারি (প্লীহা, লিম্ফ নোড) বা টারশিয়ারি লিম্ফয়েড অঙ্গে (TLO) গঠিত জীবাণু কেন্দ্রগুলিতে সংঘটিত হয় [23] . এটি অবিকল GC-তে যেখানে মেমরি বি কোষ এবং দীর্ঘস্থায়ী অ্যান্টিবডি-নিঃসরণকারী প্লাজমা কোষগুলির উত্পাদন ভবিষ্যতে প্যাথোজেনের সাথে মুখোমুখি হওয়ার জন্য দীর্ঘমেয়াদী অনাক্রম্যতা তৈরিতে অবদান রাখে। জিসি প্রতিক্রিয়াগুলির দক্ষ আনয়ন একাধিক কোষের সহযোগিতার উপর নির্ভর করে, যার মধ্যে বি কোষ, টি ফলিকুলার হেল্পার সেল (টিএফএইচ), টিনজিবল বডি ম্যাক্রোফেজ এবং ফলিকুলার ডেনড্রাইটিক কোষ (এফডিসি) [৬৪]। প্রকৃতপক্ষে, ভ্যাকসিনগুলি সফল GC প্রতিক্রিয়া ট্রিগার করে এবং লিম্ফ নোডগুলিতে অ্যাক্টোপিক জীবাণু কেন্দ্রগুলি [24,25,31,49]।
অধিকন্তু, টি ফলিকুলার হেল্পার সেল এবং টি ফলিকুলার রেগুলেটরি সেল [27-30] কার্যকর অ্যান্টিবডি প্রতিক্রিয়া এবং অটোইমিউনিটি আনয়নের মধ্যে সূক্ষ্ম ভারসাম্য বজায় রাখে। যদিও আমরা আমাদের গবেষণায় অটোইমিউনিটি ইনডাকশনকে উড়িয়ে দিইনি, তবুও আমরা BCGph এবং hIFN- 2b-এর সাথে প্রাইম-বুস্ট প্রোটোকলের প্রভাবের উপর ফোকাস করেছি DLNs থেকে Tregs-এ। সুরক্ষিত ইঁদুরের DLN-এ উল্লেখযোগ্যভাবে কম CD3 প্লাস FOXP3 প্লাস Tregs ছিল। যাইহোক, এই ট্রেগগুলির মধ্যে কয়েকটি টি ফলিকুলার হেল্পার কোষ যা GC প্রতিক্রিয়াগুলি নিয়ন্ত্রণ করে কিনা তা নির্ধারণ করার জন্য আরও অধ্যয়ন প্রয়োজন [27-30]। এই ফলাফলগুলি বোঝাতে পারে যে মাইকোব্যাকটেরিয়াল বৃদ্ধি নিয়ন্ত্রণ করতে এবং ত্বকে প্যাথলজিক প্রদাহ রোধ করতে DLN-এ Tregs-এর সামান্য হ্রাসের সাথে মিলিত প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা কার্যকরী আনয়ন প্রয়োজন।
পূর্ববর্তী গবেষণায় টি ফলিকুলার হেল্পার সেল এবং টি ফলিকুলার রেগুলেটরি সেল [19,32,64] এর উপর টাইপ I IFN এর সিস্টেমিক এবং মিউকোসাল প্রভাবের কথা জানানো হয়েছে। প্রকৃতপক্ষে, টাইপ I IFN ডেনড্রাইটিক কোষ দ্বারা টি সেল প্রাইমিংকে উদ্দীপিত করে লিম্ফ নোডগুলিতে পরোক্ষভাবে TFH বৃদ্ধি করে [34]। টাইপ I IFN এছাড়াও GC-তে আইসোটাইপ সুইচ প্রচার করে। উপরন্তু, একটি সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে টাইপ I IFN ফুসফুসে CXCL13-চালিত TLO গঠনকে ট্রিগার করে [49]।
এইভাবে, টাইপ I IFN দ্বারা CXCL13 এর সংযোজন সেকেন্ডারি লিম্ফয়েড অঙ্গগুলিতে নিষ্পাপ B কোষের নিয়োগকে বাড়িয়ে তুলতে পারে এবং অ্যান্টিবডি-নিঃসরণকারী প্লাজমা কোষের উত্পাদন বৃদ্ধি করতে পারে, বিশ্বব্যাপী দীর্ঘস্থায়ী স্মৃতি এবং প্লাজমা কোষের ইমিউনোলজিকাল প্রতিক্রিয়াগুলিকে উন্নত করতে পারে [23-25,64 ], বিশেষ করে পলি আইসি [65] এর মতো সহায়কের উপস্থিতিতে। এছাড়াও, টাইপ I IFN প্রশাসন অটোইমিউন রোগ [31] বা যক্ষ্মা [66,67] দ্বারা আক্রান্ত রোগীদের ফুসফুসে GC গঠনকে প্ররোচিত করে। এইভাবে, CXCL13 অবরোধ এই দীর্ঘস্থায়ী প্রদাহজনিত ব্যাধিগুলির চিকিত্সা করতে সাহায্য করতে পারে [49]। এই প্রসঙ্গে, আমরা সুরক্ষিত প্রাইম-বুস্টেড ইঁদুরের (চিত্র 5E) ডিএলএনগুলিতে জিসি আকারে খুব হালকা হ্রাস লক্ষ্য করেছি। যাইহোক, GC গঠন এবং সেই প্রাইম-বুস্টেড ইঁদুরগুলিতে প্রবর্তিত সুরক্ষার মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ককে আরও ভালভাবে সংজ্ঞায়িত করার জন্য অতিরিক্ত গবেষণা প্রয়োজন। BCGph এবং ইন্ট্রামাসকুলার hIFN- 2b বুস্টিং (51) সহ প্রাইমিংয়ের পরীক্ষামূলক সেটিংসের অধীনে, আমাদের গবেষণায় ইঁদুররা একা BCGph-এর চেয়ে BCGph-hIFN- 2b (80 শতাংশ) প্রশাসনের দ্বারা উচ্চ সুরক্ষার অভিজ্ঞতা লাভ করেছে (60 শতাংশ), যেমন অনুপস্থিতি বা ত্বকের ক্ষতগুলির ছোট আকার (চিত্র 2) এবং MLM-এর গ্লাইকোলিপিডগুলির জন্য নির্দিষ্ট IgG এবং IgG1 অ্যান্টিবডিগুলির তুলনামূলক পরিমাণ (সারণী 2) দ্বারা নির্ধারিত। আমাদের ফলাফল বিসিজি (পাস্তুর) [৪১] এর একটি ভিন্ন স্ট্রেইনের সাথে টিকা দ্বারা সুরক্ষিত ইঁদুরে IgG এর বর্ধিত পরিমাণের সাথে বৈপরীত্য। এই তথ্যগুলি পরামর্শ দেয় যে ভ্যাকসিন তৈরি করতে ব্যবহৃত বিসিজি স্ট্রেইনের ধরন MLM বা M. leprae [51] এর বিরুদ্ধে হিউমারাল ইমিউন প্রতিক্রিয়ার ফলাফলকে প্রভাবিত করতে পারে।
তদ্ব্যতীত, যক্ষ্মা রোগের বেশ কয়েকটি গবেষণায় প্রতিরক্ষামূলক ইমিউন প্রতিক্রিয়া [68-70] আনয়নে হেটেরোলজাস প্রাইম-বুস্ট কৌশলের সম্ভাব্য এবং উপকারী প্রভাব দেখানো হয়েছে। অধিকন্তু, এটি সুপরিচিত যে টিকাদানের ধরন এবং রুট অ্যান্টিবডি এবং সেলুলার ইমিউন প্রতিক্রিয়াগুলির মাত্রাকে প্রভাবিত করে। আশ্চর্যজনকভাবে, শুধুমাত্র PBS, BCGph, বা hIFN- 2b একাই চিকিত্সা করা ইঁদুরের তুলনায় সুরক্ষিত ইঁদুরগুলি সিরামে উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর IL-4 এবং IL-10 দেখায় (সারণী 1)। কীভাবে অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনগুলি কুষ্ঠরোগে প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতাকে প্রভাবিত করে তা বর্তমানে আমাদের পরীক্ষাগারে তদন্তাধীন। যাইহোক, বেশ কয়েকটি গবেষণায় দেখা গেছে যে মাইকোব্যাকটেরিয়ার দক্ষ সেলুলার অনাক্রম্যতা প্যাথলজির সুরক্ষা এবং প্রতিরোধের মধ্যে একটি সূক্ষ্ম ভারসাম্যের উপর নির্ভর করে [71]। উপরন্তু, অন্যান্য পরীক্ষামূলক মডেল [72-75] তে সাইটোকাইন উভয় প্রকারের অন্তর্ভুক্তির প্রমাণ রয়েছে।
আমাদের সমষ্টিগত ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে আমাদের প্রাইম-বুস্ট প্রোটোকলের সাফল্য একটি সুষম ইমিউন প্রতিক্রিয়া আনয়নের উপর নির্ভর করে যা দক্ষতার সাথে ত্বকের এমএলএম দূর করে এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনস (IL-4 এবং IL10) প্ররোচিত করে টিস্যুর ক্ষতি সীমিত করে। সম্ভবত ইমিউন কোষ রক্ষা করে [76,77]। প্রকৃতপক্ষে, প্ররোচিত ট্রেগস দ্বারা উত্পাদিত IL-10 মিউকোসাল পৃষ্ঠগুলিতে প্রদাহকে নিয়ন্ত্রণ করে, বিশেষত যেগুলি প্রদাহজনক অন্ত্রের রোগের সাথে সম্পর্কিত [77,78]। এই ফলাফলগুলি BCGph এবং hIFN- 2b এর সাথে আমাদের প্রাইম-বুস্ট সিস্টেমে B সেল অ্যাক্টিভেশন, GC গঠন, এবং নিয়ন্ত্রণ, T ফলিকুলার রেগুলেটরি সেল জেনারেশন এবং NF-κB অ্যাক্টিভেশনের একটি বিশদ গতিশীল অধ্যয়নের নিশ্চয়তা দেয় এমএলএম চ্যালেঞ্জের পরে ত্বক এবং লিম্ফ নোডগুলিতে প্রতিরক্ষামূলক অনাক্রম্যতা আনয়নে ইমিউন কোষ এবং NF-κB পথগুলির ভূমিকা সম্পর্কে আরও যান্ত্রিক ধারণা রয়েছে।
5। উপসংহার
এই তথ্যগুলি থেকে, আমরা উপসংহারে পৌঁছাতে পারি যে hIFN- 2b-এর সাথে ক্রমাগত ইন্ট্রামাসকুলার বুস্টিং M. bovis BCG টিকা বৃদ্ধি করে, MLM-এর সাথে ইন্ট্রাডার্মাল চ্যালেঞ্জ থেকে রক্ষা করে এবং BCG-এর প্রেক্ষাপটে মানুষের IFN-a 2b-এর প্রতিশ্রুতিবদ্ধ সহায়ক বৈশিষ্ট্যগুলি প্রকাশ করে। স্থানীয় এলাকায় কুষ্ঠ সংক্রমণ প্রতিরোধের জন্য টিকা। আমাদের সর্বোত্তম জ্ঞানের জন্য, এটি কুষ্ঠ-সদৃশ রোগের একটি প্রাক-ক্লিনিক্যাল মডেলে hIFN- 2b-এর ফার্মাসিউটিক্যাল উপস্থাপনার সাথে BCGphipps-এর থেরাপিউটিক কার্যকারিতার প্রথম প্রতিবেদন।
লেখকের অবদান:
স্টাডি ডিজাইন, GGG, OR-E., SOI-T. এবং JR-M.; অধ্যয়ন পরিচালনা, GGG, OR-E., SOI-T. এবং JR-M.; ডেটা বিশ্লেষণ: GGG, OR-E., SOI-T। এবং JR-M.; ডেটা ব্যাখ্যা, GGG, OR-E., SOI-T. এবং JR-M.; খসড়া পাণ্ডুলিপি, GGG, OR-E., SOI-T. এবং JR-M.; পাণ্ডুলিপি বিষয়বস্তু সংশোধন করা, GGG, OR-E., SOI-T. এবং JR-M.; GGG, OR-E., SOI-T. এবং জেআর-এম। তথ্য বিশ্লেষণের অখণ্ডতার দায়িত্ব নিন। সমস্ত লেখক পাণ্ডুলিপির প্রকাশিত সংস্করণ পড়েছেন এবং সম্মত হয়েছেন।
অর্থায়ন:
GGG এবং OR-E. SNI, CONACYT (মেক্সিকো সিটি, মেক্সিকো) দ্বারা সমর্থিত ছিল। GGG পারফিল প্রোডেপ 2019-2022, এবং JR-M থেকে সমর্থন পেয়েছে। রচেস্টার মেডিকেল সেন্টার এবং RO1AI111914 এর মেডিসিন বিশ্ববিদ্যালয়ের অভ্যন্তরীণ তহবিল দ্বারা সমর্থিত ছিল।
প্রাতিষ্ঠানিক পর্যালোচনা বোর্ডের বিবৃতি:
ইনস্টিটিউশনাল অ্যানিমাল কেয়ার অ্যান্ড ম্যানেজমেন্ট কমিটি (চিড়িয়াখানা-010-2020) দ্বারা অনুমোদনের পরে সমস্ত প্রাণী পরীক্ষা করা হয়েছিল। CIE-ENCB চিড়িয়াখানা 016/2014, 07 মার্চ 2014।
অবহিত সম্মতি বিবৃতি:
প্রযোজ্য নয়।
ডেটা উপলব্ধতা বিবৃতি:
প্রাতিষ্ঠানিক নির্দেশিকা অনুসরণ করে ডেটা শেয়ার করা হবে।
স্বীকৃতি:
আমরা IHC-এর সাহায্যের জন্য রিকার্ডো ভিলালোবোস, এবং রোজেলিও হার্নান্দেজ পান্ডো (INCMNSZ, মেক্সিকো সিটি) এর কাছে কৃতজ্ঞ, যিনি BCGphipps স্ট্রেন প্রদান করেছেন।
স্বার্থের সংঘাত:
লেখক আগ্রহের কোন দ্বন্দ্ব ঘোষণা।
তথ্যসূত্র
1. WHO. বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা: যক্ষ্মা—গ্লোবাল ফ্যাক্টস 2011/2102। জেনেভা: ডাব্লুএইচও স্টপ টিবি ডিপ 2012. অনলাইনে উপলব্ধ: http://www.who.int/tb/publications/2011/factsheet_tb_2011.pdf (1 ফেব্রুয়ারি 2021 এ অ্যাক্সেস করা হয়েছে)।
2. জরিমানা, PE কুষ্ঠ: কি "নির্মূল" করা হচ্ছে? ষাঁড়. বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা। 2007, 85, 1-2। [ক্রসরেফ]
3. রামবুক্কানা, এ. মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রে কিভাবে পেরিফেরাল স্নায়ুতন্ত্রকে লক্ষ্য করে? ট্রেন্ডস মাইক্রোবায়োল। 2000, 8, 23-28। [ক্রসরেফ]
4. রদ্রিগেজ, জেআইএ; Triellato, GL; Meirelles, NML; Teixeira, CC; লিয়ন, এস.; Esteves, ARM কুষ্ঠ শ্রেণীবিভাগ পদ্ধতি: ব্রাজিলের একটি রেফারেল চরিত্রের একটি তুলনামূলক অধ্যয়ন। int. J. ইনফেকশন। ডিস. 2016, 45, 118-122। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
5. গেলুক, এ.; ভ্যান ডের প্লয়েগ, জে.; টেলিস, ওবিআর; কিস, এল.; ফ্র্যাঙ্কেন, এমসি; প্রিন্স, সি.; Wouter, DJ; সারনো, NE; সাম্পাইও, ইপি; ওটেনহফ, THM বিভিন্ন মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রে প্রোটিন থেকে প্রাপ্ত পেপটাইডের যুক্তিসঙ্গত সংমিশ্রণ এম. লেপ্রে সংক্রমণের ইমিউনোডায়াগনোসিসের জন্য সংবেদনশীলতা উন্নত করে। ক্লিন। ভ্যাক। ইমিউনল। 2008, 15, 522-533। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
6. গেলুক, এ.; বোবোশা, কে.; শিপ, JJVDP-V.; স্পেন্সার, জেএস; বানু, এস.; মার্টিন্স, এমভিএসবি; চো, এসএন; ফ্র্যাঙ্কেন, কেএলএমসি; কিম, এইচজে; বেকেলে, ওয়াই।; ইত্যাদি কুষ্ঠ রোগ নির্ণয়ের প্রাসঙ্গিকতা সহ নতুন বায়োমার্কার কুষ্ঠ রোগের জন্য হাইপারেন্ডেমিক এলাকায় প্রযোজ্য। জে. ইমিউনল। 2012, 188, 4782–4791। [ক্রসরেফ]
7. জেলুক, এ. কুষ্ঠ রোগের জন্য বায়োমার্কার: আপনি কি টি (কোষ) পছন্দ করবেন? লেপ্র রেভ. 2013, 84, 3-12। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
8. আলকাইস, এ.; অল্টার, এ.; আন্তোনি, জি.; ওরলোভা, এম.; নগুয়েন, ভিটি; সিং, এম.; Vanderboght, PR; কাটচ, কে.; মীরা, এমটি; Vu, HT; ইত্যাদি ধাপে ধাপে প্রতিলিপি একটি কম উৎপাদনকারী লিম্ফোটক্সিন-অ্যালিলকে প্রাথমিকভাবে শুরু হওয়া কুষ্ঠরোগের প্রধান ঝুঁকির কারণ হিসেবে চিহ্নিত করে। নাট। জেনেট। 2007, 39, 517-522। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
9. আভাঞ্জি, সি.; সিং, পি.; ট্রুম্যান, আরডব্লিউ; সুফিস, পিএন মলিকুলার এপিডেমিওলজি অফ কুষ্ঠ: একটি আপডেট। সংক্রমিত। জেনেট। ইভোল 2020, 86, 104581। [ক্রসরেফ]
10. লাস্টোরিয়া, জেসি; অ্যাব্রেউ, এমএ কুষ্ঠ রোগ মহামারী সংক্রান্ত ক্লিনিকাল এবং এথনোপ্যাথোজেনিক দিকগুলির পর্যালোচনা - অংশ 1. ব্রাস। ডার্মাটোল। 2014, 89, 205-218। [ক্রসরেফ]
11. রোজাস-এসপিনোসা, ও. মাইকোব্যাকটেরিয়াল সংক্রমণের হোস্ট ইমিউনোলজিকাল প্রতিক্রিয়ার প্রোফাইলের বর্তমান বিষয়; পর্যালোচনা বই; Tomioka, H., Ed.; গবেষণা সাইনপোস্ট: ত্রিভান্দ্রম, ভারত, 2009; পৃষ্ঠা 97-140।
12. অ্যাডামস, এলবি; পেনা, টিএম; শর্মা, আর.; হাগে, খ্রি. Schurr, E.; ট্রুম্যান, কুষ্ঠরোগের ইমিউনোজেনেটিক্সের উপর পশুর মডেল থেকে RW অন্তর্দৃষ্টি। একটি পর্যালোচনা. মেম। Inst. অসওয়াল্ডো। ক্রুজ। 2012, 107, 197-208। [ক্রসরেফ]
13. রোজাস-এসপিনোসা, ও.; বেসেরিল-ভিলানুয়েভা, ই.; উইক-রডরিগেজ, কে.; Arce-Paredes, P.; রেয়েস-মালডোনাডো, ই. মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেমুরিয়াম-সংক্রমিত ইঁদুরের পিছনের অঙ্গগুলির পালসি হাড়ের ক্ষতির ফলে এবং স্নায়ু জড়িত হওয়ার কারণে নয়। ক্লিন। মেয়াদ। ইমিউনল। 2005, 140, 436-442। [ক্রসরেফ]
14. মডলিন, এলআর কুষ্ঠ রোগে সহজাত ইমিউন প্রতিক্রিয়া। কার মতামত ইমিউনল। 2010, 22, 48-54। [ক্রসরেফ]
15. অলিভেরা, আরবি; ওচোয়া, এমটি; সিলিং, পিএ; রিয়া, টিএইচ; রামবুক্কানা, এ.; সার্নো, EN; মডলিন, RL এক্সপ্রেশন অফ টোল-লাইক রিসেপ্টর 2 অন হিউম্যান শোয়ান সেলস: অ্যা মেকানিজম অফ নার্ভ ড্যামেজ ইন কুষ্ঠ। সংক্রমিত। ইমিউন। 2003, 71, 1427-1433। [ক্রসরেফ] 16. ম্যাকমিকিং, জে.; Xie, QW; নাথান, সি. নাইট্রিক অক্সাইড এবং ম্যাক্রোফেজ ফাংশন। আন্নু। রেভ. ইমিউনল। 1997, 15, 323-350। [ক্রসরেফ]
17. ইভান্স, টি.; বাটারি, এল.; কার্পেন্টার, এ.; স্প্রিংগাল, ডিআর; পোলাক, জে.; কোহেন, জে. সাইটোকাইন-চিকিত্সা করা মানব নিউট্রোফিলে ইনডিসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস থাকে যা ইনজেস্টেড ব্যাকটেরিয়ার নাইট্রেশন তৈরি করে। Proc. Natl. আকদ। বিজ্ঞান USA 1996, 93, 9553–9554। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
18. ফনসেকা, এবি; সাইমন, এমডি; Cazzaniga, RA; ডি মৌরা, টিআর; ডি আলমেইডা, আরপি; ডুথি, এমএস; রিড, এসজি; ডি জেসাস, এআর কুষ্ঠরোগের ডিফারেনশিয়াল ক্লিনিকাল ফলাফলের উপর সহজাত এবং অভিযোজিত প্রতিরোধমূলক প্রতিক্রিয়ার প্রভাব। সংক্রমিত। ডিস. দারিদ্র্য 2017, 6, 5-13। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
19. সাধু, এস.; খৈতান, বিকে; জোশী, বি.; সেনগুপ্ত, ইউ.; নওটিয়াল, একে; মিত্র, ডিকে রেগুলেটরি টি কোষ এবং Th17 কোষের মধ্যে পারস্পরিক সম্পর্ক: কুষ্ঠ রোগে পোলারাইজড ইমিউনিটির প্রাসঙ্গিকতা। পিএলওএস নেগেল। ট্রপ ডিস. 2016, 10, e0004338। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
20. রোজাস-এসপিনোসা, ও.; উইক-রদ্রিগেজ, কে.; Arce-Paredes, P. মুরিন কুষ্ঠরোগের বিবর্তনের উপর এক্সোজেনাস পারক্সিডেসের প্রভাব। int. জে. লেপ্র অন্যান্য মাইকোব্যাক্ট। ডিস. 2002, 70, 191-200।
21. Ischiropoulos, H. জৈবিক টাইরোসিন নাইট্রেশন: নাইট্রিক অক্সাইড এবং প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন প্রজাতির একটি প্যাথোফিজিওলজিকাল ফাংশন। খিলান। বায়োকেম। বায়োফিস। 1998, 356, 1-11। [ক্রসরেফ]
22. তরুণ, ডিবি লেপ্রসি লিপিড শোয়ান কোষে প্রবেশের চাবিকাঠি প্রদান করে। ট্রেন্ডস মাইক্রোবায়োল। 2001, 9, 52-54। [ক্রসরেফ]
23. ব্যানার্ড, ও.; সিস্টার, জেজি জার্মিনাল সেন্টার: অ্যাফিনিটি পরিপক্কতা এবং অ্যান্টিবডি বৈচিত্র্যের জন্য প্রোগ্রাম করা হয়েছে। কার মতামত ইমিউনল। 2017, 45, 21-30। [ক্রসরেফ] [পাবমেড] 24. ভিক্টোরা, ডিজি; নুসেনওয়েগ, এমসি জার্মিনাল সেন্টার। আন্নু। রেভ. ইমিউনল। 2012, 30, 429-457। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
25. সিরেলি, কেএম; ক্রোটি, এসএইচ জার্মিনাল সেন্টার বর্ধিত অ্যান্টিজেন প্রাপ্যতা দ্বারা বৃদ্ধি। কার মতামত ইমিউনল। 2017, 47, 64-69। [ক্রসরেফ]
26. গুড-জ্যাকবসন, কেএল; Szumilas, CG; চেন, এল.; শার্প, এএইচ; তোমাইকো, এমএম; শ্লোমচিক, এমজে পিডি-1 জীবাণু কেন্দ্র বি কোষের বেঁচে থাকা এবং দীর্ঘজীবী প্লাজমা কোষের গঠন ও সম্বন্ধ নিয়ন্ত্রণ করে। নাট। ইমিউনল। 2010, 11, 535-542। [ক্রসরেফ]
27. ওলেনবার্গ, আই.; Agua-Doce, A.; হার্নান্দেজ, এ.; আলমেইডা, সি.; অলিভেরা, ভিজি; ফারো, জে.; Graca, L. Foxp3 প্লাস ফলিকুলার রেগুলেটরি টি কোষ দ্বারা জার্মিনাল সেন্টার প্রতিক্রিয়ার নিয়ন্ত্রণ। জে. ইমিউনল। 2011, 187, 4553–4560। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
28. লিটারম্যান, এমএ; পিয়ারসন, ডব্লিউ.; লি, এসকে; ক্যালিস, এ.; কাওয়ামোটো, এস.; রেনার, টিএফ; শ্রীবাস্তব, এম.; দিবেকর, ডিপি; বিটন, এল.; হোগান, জেজে; ইত্যাদি FOXP3 প্লাস ফলিকুলার রেগুলেটরি টি কোষ জীবাণু কেন্দ্রের প্রতিক্রিয়া নিয়ন্ত্রণ করে। নাট। মেড. 2011, 17, 975-982। [ক্রসরেফ]
29. মাইলস, বি.; Connick, E. সংক্রমণের সময় ফলিকুলার রেগুলেটরি টি কোষ দ্বারা জার্মিনাল সেন্টারের নিয়ন্ত্রণ। সামনে। ইমিউনল। 2018, 9, 2704–3710। [ক্রসরেফ]
30. ফু, ডব্লিউ; লিউ, এক্স।; লিন, এক্স।; ফেং, এইচ.; সূর্য, এল.; লি, এস.; চেন, এইচ.; ট্যাং, এইচ.; লু, এল.; জিন, ডব্লিউ; ইত্যাদি টি ফলিকুলার রেগুলেটরি কোষের ঘাটতি অটোইমিউনিটি বাড়ায়। J. Exp. মেড. 2018, 215, 815–825। [ক্রসরেফ]
31. পিটজালিস, সি.; জোন্স, GW; বোম্বারডিয়েরি, এম.; জোন্স, SA একটোপিক লিম্ফয়েড-সদৃশ কাঠামো সংক্রমণ, ক্যান্সার এবং অটোইমিউনিটি। নাট। রেভ. ইমিউনল। 2014, 14, 447–462। [ক্রসরেফ]
32. আলৌলু, এম.; কার, ইজে; গাডোর, এম.; বিগনন, এ.; লিবলাউ, আরএস; ফাজিলেউ, এন.; লিন্টারম্যান, এমএ ফলিকুলার রেগুলেটরি টি কোষগুলি ইমিউনাইজিং অ্যান্টিজেনের জন্য নির্দিষ্ট হতে পারে এবং নিষ্পাপ টি কোষ থেকে উদ্ভূত হতে পারে। নাট। কমুন 2016, 7, 10579–10589। [ক্রসরেফ]
33. ভিনুসা, সিজি; সানজ, আই.; কুক, এমসি অটোইমিউন রোগে জীবাণু কেন্দ্রগুলির ডিসরেগুলেশন। নাট। রেভ. ইমিউনল। 2009, 9, 845-857। [ক্রসরেফ]
34. কুকাক, এইচ.; Yrlid, U.; রিজিস, বি.; কালিঙ্কে, ইউ.; জোহানসন-লিন্ডবর্ন, বি. ডেনড্রাইটিক কোষে টাইপ I ইন্টারফেরন সিগন্যালিং লিম্ফ নোড-রেসিডেন্ট টি ফলিকুলার হেল্পার কোষের বিকাশকে উদ্দীপিত করে। অনাক্রম্যতা 2009, 31, 491-501। [ক্রসরেফ]
35. ডেসভিগনেস, এল.; নেকড়ে, এজে; আর্নস্ট, জেডি মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মার প্রাথমিক সংক্রমণে টাইপ I এবং টাইপ II IFN-এর গতিশীল ভূমিকা। জে. ইমিউনল। 2012, 188, 6205–6215। [ক্রসরেফ]
36. টেলিস, এমবিআর; গ্রেবার, জিটি; ক্রুটজিক, আরএস; মন্টোয়া, ডি.; শেনক, এম.; লি, জেডি; Komisopoulou, E.; কেলি-স্কম্পিয়া, কে.; চুন, আর.; আইয়ার, এসএস; ইত্যাদি টাইপ I ইন্টারফেরন টাইপ II দমন করে ইন্টারফেরন-উদ্দীপক মানুষের অ্যান্টি-মাইকোব্যাকটেরিয়াল প্রতিক্রিয়া। বিজ্ঞান 2013, 339, 1448-1453। [ক্রসরেফ]
37. জি, ডিএক্স; ইয়ামাশিরো, এলএইচ; চেন, কেজে; মুকাইদা, এন.; ক্রামনিক, আই.; ডারউইন, কেএইচ; Vance, RE টাইপ I ইন্টারফেরন-চালিত মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মার প্রতি সংবেদনশীলতা IL-1Ra দ্বারা মধ্যস্থতা করা হয়। নাট। মাইক্রোবায়োল। 2019, 4, 2128-2135। [ক্রসরেফ]
38. মানকা, সি.; Tsenova, L.; বার্গটোল্ড, এ.; ফ্রিম্যান, এসএইচ; Tovey, M.; মুসার, এমজে; ব্যারি, ইসি, 3য়; ফ্রিডম্যান, এইচভি; কাপলান, জি. ইঁদুরের মাইকোব্যাকটেরিয়াম টিউবারকুলোসিস ক্লিনিকাল আইসোলেটের ভাইরুলেন্স Th1 প্রকারের অনাক্রম্যতা প্ররোচিত করতে ব্যর্থতার দ্বারা নির্ধারিত হয় এবং এটি IFN-/ আনয়নের সাথে সম্পর্কিত। Proc. Natl. আকদ। বিজ্ঞান USA 2007, 98, 5752–5757। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
39. টেলিস্কা, সি.; অ্যাঞ্জেলিকো, এম.; পিকোলো, পি.; নসোত্তি, এল.; মররোন, এ.; লংহি, সি.; কার্বোন, এম.; বাইওচি, এল. হেপাটাইটিস ডি-এর ইন্টারফেরন-আলফা চিকিত্সা একজন অভিবাসীর মধ্যে যক্ষ্মা রোগের তীব্রতা বাড়ায়। J. ইনফেকশন। 2007, 54, e223–e226। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
40. গিয়াকোমিনি, ই.; রেমোলি, ME; গাফা, ভি.; পারদিনি, এম.; ফ্যাটোরিনি, এল.; Coccia, EM IFN- ডিসি পরিপক্কতার উপর কাজ করে বিসিজি ইমিউনোজেনিসিটি উন্নত করে। জে. লিউকোক। বায়োল 2008, 85, 462-468। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
41. রিভাস-সান্তিয়াগো, সিই; গুয়েরেরো, জিজি IFN- মাইকোব্যাকটেরিয়াম বোভিস ব্যাসিলাস ক্যালমেট গুয়েরিন-টিকা প্রচারিত Th1 টাইপ সেলুলার প্রতিক্রিয়া এবং এম. যক্ষ্মা সংক্রমণের বিরুদ্ধে সুরক্ষা। BioMed Res. int. 2017, 2017, 6760। [ক্রসরেফ]
42. গুয়েরেরো, জিজি; রেঞ্জেল-মোরেনো, জে.; ইসলাস-ট্রুজিলো, এস.; রোজাস-এস্পিনোসা, ও. IFN-আলফার সাথে ধারাবাহিক ইন্ট্রামাসকুলার বুস্টিং মাইকোব্যাকটেরিয়াম বোভিস বিসিজি-টিকাযুক্ত ইঁদুরকে এম. লেপ্রেমুরিয়াম সংক্রমণের বিরুদ্ধে রক্ষা করে। বায়োমেড মেড। Res. int. 2015, 2015, 414027।
43. ম্যাকন্যাব, এফ.; মায়ার-নাপিত, কে.; শের, এ.; ওয়াক, এ.; O'Garra, A. সংক্রামক রোগে টাইপ I ইন্টারফেরন। নাট। রেভ. ইমিউনল। 2015, 15, 67-103। [ক্রসরেফ]
44. ও'শিয়া, জেজে; Visconti, R. Type I IFNs এবং TH1 প্রতিক্রিয়াগুলির নিয়ন্ত্রণ: Enigmas উভয় সমাধান এবং উদ্ভূত। নাট। ইমিউনল। 2000, 1, 17-19। [ক্রসরেফ]
45. গনজালেজ-নাভাজাস, জেএম; লি, জে.; ডেভিড, এম.; Raz, E. টাইপ I ইন্টারফেরনের ইমিউনোমোডুলেটরি ফাংশন। নাট। রেভ. ইমিউনল। 2012, 12, 125-135। [ক্রসরেফ]
46. লে বন, এ.; ক্রস-প্রাইমিংয়ের জন্য উদ্দীপনা হিসাবে শক্ত, ডিএফ টাইপ I ইন্টারফেরন। সাইটোকাইন গ্রোথ ফ্যাক্ট রেভ. 2008, 19, 33-40। [ক্রসরেফ]
47. ব্র্যাকি, এল.; ক্যানিনি, আই.; পুজেলি, এস.; সেস্টিলি, পি.; Venditti, M.; স্পাডা, এম।; ডোনাটেলি, আই.; বেলার্দেলি, এফ.; Proietti, E. Type I IFN ইঁদুরের ইনফ্লুয়েঞ্জা ভাইরাসের বিরুদ্ধে নির্বাচনী ইন্ট্রানাসাল টিকা দেওয়ার জন্য একটি শক্তিশালী মিউকোসাল সহায়ক এবং মিউকোসাল স্তরে অ্যান্টিজেন ক্যাপচারকে প্রভাবিত করে। ভ্যাকসিন 2005, 23, 2994-3004। [ক্রসরেফ]
48. পালঙ্ক, আরবি; Atmar, RL; কেট, টিআর; কোয়ারলেস, জেএম; Keitel, WA; আরডেন, এনএইচ; ওয়েলস, জে.; নিনো, ডি.; Wyde, PR ইঁদুর এবং মানুষের ইনফ্লুয়েঞ্জা ভ্যাকসিনের জন্য মিউকোসাল সহায়ক হিসাবে টাইপ I ইন্টারফেরনের বিপরীত প্রভাব। ভ্যাকসিন 2009, 27, 5344–5348। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
49. ডেন্টন, এই; ইনোসেন্টিন, এস.; কার, ইজে; ব্র্যাডফোর্ড, বিএম; Lafouresse, F.; ম্যাবট, এনএ; মার্বে, ইউ.; লুডউইগ, বি.; বর, জেআর; গুড-জ্যাকবসন, কেএল; ইত্যাদি টাইপ I ইন্টারফেরন সিএক্সসিএল 13 কে একটোপিক জীবাণু কেন্দ্র গঠনে সহায়তা করে। J. Exp. মেড. 2019, 216, 621–637। [ক্রসরেফ]
50. টলেডো, পিটিজি; বাতিস্তা-সিলভা, এলআর; মেডিইরোস, আরসিএ; লারা, এফএ; Moraes, MO টাইপ I ইন্টারফেরন, অটোফ্যাজি এবং কুষ্ঠরোগে হোস্ট মেটাবলিজম। সামনে। ইমিউনল। 2018, 23, 806–817। [ক্রসরেফ]
51. ঝাং, ডব্লিউ.; ঝাং, ওয়াই.; ঝেং, এইচ.; প্যান, Y.; লিউ, এইচ.; ডু, পি.; ওয়ান, এল.; লিউ, জে.; ঝু, বি.; Zhag, G.; ইত্যাদি জিনোম সিকোয়েন্সিং এবং বিসিজি ভ্যাকসিন স্ট্রেনের বিশ্লেষণ। PLOS ONE 2013, 8, e071243। [ক্রসরেফ]
52. উইক-রডরিগেজ, কে.; সিলভা-মিরান্ডা, এম.; Arce-Paredes, P.; রোজাস-এস্পিনোসা, O. মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রেমুরিয়ামের কার্যকারিতা এবং সংক্রামকতার উপর প্রতিক্রিয়াশীল অক্সিজেন মধ্যস্থতাকারীর প্রভাব। int. J. Exp. পথোল। 2007, 88, 137-145। [ক্রসরেফ]
53. কিম, এসএইচ; কোহেন, বি.; নোভিক, ডি.; রুবিনস্টাইন, এম. স্তন্যপায়ী টাইপ I ইন্টারফেরন রিসেপ্টর দুটি সাবুনিট নিয়ে গঠিত: IFN- R1 এবং IFN- R2। জিন 1997, 196, 279-286। [ক্রসরেফ]
54. লুও, ওয়াই.; চেন, এক্স।; হান, আরএ; ও'ডোনেল, এম. রিকম্বিন্যান্ট ব্যাসিলাস ক্যালমেট-গুয়েরিন (BCG) মানব ইন্টারফেরন-আলফা 2B প্রকাশ করে বর্ধিত ইমিউনোজেনিসিটি প্রদর্শন করে। ক্লিন। মেয়াদ। ইমিউনল। 2001, 123, 264-270। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
55. সূর্য, ই.; নিয়ান, এক্স।; লিউ, সি.; ফ্যান, এক্স।; হান, আর. রিকম্বিন্যান্ট হিউম্যান আইএফএন -2বি বিসিজি এবং ভিট্রোতে মূত্রাশয় ক্যান্সার কোষে এর অ্যান্টিটিউমার প্রভাব। জেনেট। মোল। Res. 2015, 14, 3436–3449। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
56. প্রভাকরণ, কে.; হ্যারিস, ইবি; Kirchheimer, মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রে ইন ভিট্রো দ্বারা 14C-লেবেলযুক্ত ডোপা-এর WF বাইন্ডিং। int. জে. লেপ্র অন্যান্য মাইকোব্যাক্ট। ডিস. 1976, 44, 58-64।
57. ড্রেপার, P. মাইকোব্যাকটেরিয়াম লেপ্রের পরিশোধন। কুষ্ঠ রোগের ইমিউনোলজি (IMMLEP), জেনেভা, সুইজারল্যান্ড, 24-26 জুন 1980; বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা: জেনেভা, সুইজারল্যান্ড, 1980।
58. Ischiropoulos, H.; নেলসন, জে.; ডুরান, ডি.; আল-মেহেদী, এ. জৈব অণু এবং ফেরিহরসারডিশ পারক্সিডেসের সাথে নাইট্রিক অক্সাইড এবং পারক্সিনাইট্রাইটের প্রতিক্রিয়া: হাইড্রোজেন পারক্সাইড নির্ধারণে হস্তক্ষেপ। ফ্রি রেডিক। বায়োল মেড. 1996, 20, 373-381। [ক্রসরেফ]
59. Schön, T.; হার্নান্দেজ-পান্ডো, আর.; নেগেসে, ওয়াই.; লিকাসা, আর.; সানডকভিস্ট, টি.; ব্রিটন, এস. বর্ডারলাইন কুষ্ঠরোগের ক্ষতগুলিতে ইন্ডুসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস এবং নাইট্রোটাইরোসিনের প্রকাশ। ব্র. জে. ডার্মাটোল। 2001, 145, 809-815। [ক্রসরেফ]
60. সিলভা-মিরান্ডা, এম.; উইকে-রডরিগেজ, কে.; মার্টিনেজ, সিই; রোজাস-এস্পিনোসা, ও. সাইক্লোক্সিজেনেসের অভিব্যক্তি-2, আলফা 1-অ্যাসিড গ্লাইকোপ্রোটিন এবং মুরিন কুষ্ঠ রোগের বিকাশশীল ক্ষতগুলিতে ইন্ডুসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস। int. J. Exp. পথ। 2006, 87, 485-494। [ক্রসরেফ]
61. হার্নান্দেজ-পান্ডো, আর.; Schön, T.; Orozco, EH; সেরাফিন, টি.; এস্ট্রাডা-গার্সিয়া, I. পরীক্ষামূলক পালমোনারি যক্ষ্মা বিবর্তনের সময় ইনডিসিবল নাইট্রিক অক্সাইড সিন্থেস এবং নাইট্রোটাইরোসিনের প্রকাশ। মেয়াদ। বিষাক্ত। পথোল। 2001, 53, 257-265। [ক্রসরেফ]
62. ইজকিউ, এ.; Coombes, JL; পাউরি, এফ. রেগুলেটরি লিম্ফোসাইটস এবং অন্ত্রের প্রদাহ। আন্নু। রেভ. ইমিউনল। 2009, 27, 313-338। [ক্রসরেফ]
63. সাকাগুচি, এস.; মিয়ারা, এম.; কস্টান্টিনো, সিএম; Hafler, DA FOXP3 প্লাস মানুষের ইমিউন সিস্টেমে নিয়ন্ত্রক টি কোষ। নাট। রেভ. ইমিউনল। 2010, 10, 490-500। [ক্রসরেফ]
64. প্লটকিন, SA টিকা দ্বারা প্ররোচিত সুরক্ষার সম্পর্ক। ক্লিন। ভ্যাকসিন ইমিউনল। 2010, 17, 1055-1065। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
65. উ, এইচ.; চেন, ওয়াই.; লিউ, এইচ.; জু, এল.-এল.; টিউসার, পি.; ওয়াং, এস.; লু, এস.; ডেন্ট, AL ফলিকুলার রেগুলেটরি টি কোষগুলি ফলিকুলার হেল্পার টি কোষ দ্বারা সাইটোকাইন উত্পাদনকে দমন করে এবং ইঁদুরের IgG প্রতিক্রিয়াগুলিকে অপ্টিমাইজ করে। ইউরো. জে. ইমিউনল। 2016, 46, 1152–1161। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
66. জয়নাথন, এম.; ড্যামজানোভিচ, ডি.; শালার, সিআর; লাই, আর.; ওয়ার্টজম্যান, এম.; ইয়িন, সি.; Zganiacz, A.; লিচটি, ডি.; জিং, জেড. মিউকোসাল বুস্ট টিকা দ্বারা ভিন্নভাবে অঙ্কিত সহজাত অনাক্রম্যতা টি-সেল অনাক্রম্যতা থেকে স্বাধীন, টি-সেল প্রতিরোধী প্রতিরক্ষামূলক ফলাফল নির্ধারণ করে। মিউকোসাল ইমিউনল। 2013, 6, 612-625। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
67. জয়নাথন, এম.; শাও, জেড.; ইউ, এক্স।; হার্কনেস, আর.; জিয়াং, আর.; লি, জে.; জিং, জেড.; Zhu, T. AdHu5Ag85A রেসপিরেটরি মিউকোসাল বুস্ট ইমিউনাইজেশন বিসিজি-প্রাইমড নন-হিউম্যান প্রাইমেটদের পালমোনারি টিউবারকিউলোসিসের বিরুদ্ধে সুরক্ষা বাড়ায়। PLOS ONE 2015, 10, e0135009। [ক্রসরেফ]
68. আফহামি, এস.; ড্রুমন্ড, ভিএ; D'Agositnio, MR; জয়নাথন, এম.; গিলগ্রাস, এ.; জিং, জেড. পালমোনারি যক্ষ্মা প্রতিরোধে ইমিউনোথেরাপিউটিক ভ্যাকসিন কৌশল অগ্রসর করা। সামনে। ইমিউনল। 2020, 11, 557809। [ক্রসরেফ]
69. টরাডো, ই.; রবিনসন, আরটি; কুপার, এএম সেলুলার প্রতিক্রিয়া মাইকোব্যাকটেরিয়া: ভারসাম্য সুরক্ষা এবং প্যাথলজি। ট্রেন্ডস ইমিউনল। 2011, 32, 66-72। [ক্রসরেফ]
70. জু, এক্স।; গাও, ডব্লিউ; চেং, এস.; ইয়িন, ডি.; লি, এফ.; উ, ওয়াই.; সান, ডি.; Zhou, S.; ওয়াং, ডি.; ঝাং, ওয়াই.; ইত্যাদি আঘাতমূলক মস্তিষ্কের আঘাতের একটি মুরিন মডেলে অ্যাটোরভাস্ট্যাটিনের অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি এবং ইমিউনোমোডুলেটরি প্রক্রিয়া। জে. নিউরোইনফ্লাম। 2017, 14, 167-182। [ক্রসরেফ]
71. আজিম, ডব্লিউ.; মাউকন, বিআর; আপেল, এস.; Maegrete, AO; কাল্যান্ড, কেএইচ ডুয়াল প্রো- এবং মনোসাইট ডিরাইভড ডেনড্রাইটিক কোষের অ্যান্টি-ইনফ্লেমেটরি বৈশিষ্ট্য। সামনে। ইমিউনল। 2020, 11, 438-453। [ক্রসরেফ]
72. সুলতানা, এস.; বিষয, বি. টিএনএফআর-1 এবং টিএনএফআর-2 এর নিরপেক্ষকরণ রোগের অগ্রগতির সময় প্রো-ইনফ্ল্যামেটরি এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি সাইটোকাইনের মাত্রা নিয়ন্ত্রণ করে এস. অরিয়াস-প্ররোচিত সেপ্টিক আর্থ্রাইটিসকে সংশোধন করে। ইমিউনল। লেট. 2018, 196, 33-51। [ক্রসরেফ]
73. পর্নোগ্রাফি, ডি.; গিলিগান, এমএম; হুয়াং, এস.; গার্তুং, এ.; কর্টেস-পুচ, আই.; সিমে, পিজে; ফিপস, আরপি; সেরহান, সিএইচএন; হ্যামক, বিডি ইনফ্লামেশন রেজোলিউশন: কোভিড-19 ক্যান্সার মেটাস্টেসিস রেভ. 2020, 39, 337–340-এ সাইটোকাইন ঝড় এড়ানোর জন্য একটি দ্বৈত-মুখী পদ্ধতি। [ক্রসরেফ]
74. লংঘি, এমপি; ট্রাম্পফেলার, সি.; Idoyaga, J.; কাস্কি, এম.; Matos, I.; ক্লুগার, সি.; সালাজার, এএম; কোলোনা, এম.; স্টেইনম্যান, আরএম ডেনড্রাইটিক কোষগুলির জন্য একটি সিস্টেমিক টাইপ I ইন্টারফেরন প্রতিক্রিয়া প্রয়োজন এবং একটি সহায়ক হিসাবে পলি আইসি সহ CD4 প্লাস Th1 অনাক্রম্যতা প্ররোচিত করে। J. Exp. মেড. 2009, 206, 1589-1602। [ক্রসরেফ]
75. খাদের, সা. গুগলানি, এল.; রেঞ্জেল-মোরেনো, জে.; গোপাল, আর.; জুনেকো, বিএএফ; ঝর্ণা, জেজে; মার্টিনো, সি.; পার্ল, জেই; Tighe, M.; লিন, Y.-Y.; ইত্যাদি সংক্রামিত ফুসফুসে মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা এবং বি সেল ফলিকল গঠনের দীর্ঘমেয়াদী নিয়ন্ত্রণের জন্য IL-23 প্রয়োজন। জে. ইমিউনল। 2011, 187, 5402-5407। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
76. Choreño-Parra, JA; বব্বা, এস.; রেঞ্জেল-মোরেনো, জে.; আহমেদ, এম.; মেহরা, এস.; রোজা, বি.; মার্টিন, জে.; মিত্রেভা, এম.; কৌশল, ডি.; জুনিগা, জে.; ইত্যাদি মাইকোব্যাকটেরিয়াম যক্ষ্মা HN878 সংক্রমণ ইঁদুরের মধ্যে মানুষের মতো বি-সেল ফলিকলকে প্ররোচিত করে। J. ইনফেকশন। ডিস. 2020, 221, 1636-1646। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
77. শ্মিট, ইজি; হরিভাই, ডি.; উইলিয়ামস, জেবি; আগরওয়াল, পি.; জিয়া, এস.; Charbonnier, LM; ইয়ান, কে.; লরিয়ার, আর.; টার্নার, এ.; জিগেলবাওয়ার, জে.; ইত্যাদি iTreg কোষ দ্বারা উত্পাদিত IL-10 কোলাইটিস এবং প্যাথোজেনিক প্রাক্তন নিয়ন্ত্রণ করে। ইমিউনোথেরাপির সময় ট্রেগ কোষ। জে. ইমিউনল। 2012, 189, 5628–5648। [ক্রসরেফ]
78. রুবতসোভো, ওয়াইপি; রাসমুসেন, জেপি; চি, ওয়াই।; ফন্টেনট, জে.; ক্যাসেলি, আই.; ইয়ে, এক্স।; ট্রিউটিং, পি.; Siewe, I.; রোয়ার্স, এ.; হেন্ডারসন, WRJ; ইত্যাদি নিয়ন্ত্রক টি কোষ থেকে প্রাপ্ত ইন্টারলিউকিন-10 পরিবেশগত ইন্টারফেসে প্রদাহ সীমিত করে। অনাক্রম্যতা 2018, 28, 546–558। [ক্রসরেফ] [পাবমেড]
For more information:1950477648nn@gmail.com
