ইন ভিট্রো এবং ভিভো মেটাবলিজম অফ সিস্টানচে টিউবুলোসা এক্সট্র্যাক্ট ইন সাধারণ এবং দীর্ঘস্থায়ী অপ্রত্যাশিত স্ট্রেস-প্ররোচিত হতাশাজনক ইঁদুরগুলিতে

যোগাযোগ: অড্রে হু হোয়াটসঅ্যাপ/এইচপি: 0086 13880143964 ইমেল:audrey.hu@wecistanche.com

ইয়াং লি, এট আল

বিমূর্ত

Cistanche tubulosa, Cistanches Herba-এর একটি প্রজাতি, সম্প্রতি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করে অ্যান্টিডিপ্রেসেন্ট কার্যকারিতা inchronic unpredictable stress (CUS) ইঁদুর আছে বলে নিশ্চিত করা হয়েছে। এই কাগজে, আমরা ভিট্রো এবং ভিভোতে সাধারণ এবং CUS-প্ররোচিত হতাশাজনক মডেল ইঁদুরে C. tubulosa-এর বিপাকীয় প্রোফাইল অন্বেষণ করার লক্ষ্য রাখি। UPLC-Q-TOF-MS ব্যবহার করে, ইন ভিট্রো গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাকCistanche tubulosa নির্যাস(CTE) স্বাভাবিক এবং CUS উভয় ইঁদুরের মধ্যে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। একই সময়ে, CTE এর ভিভো মেটাবলিজম(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং বিষণ্ণ ইঁদুরের ক্ষেত্রেও ইঁদুরের প্রস্রাব এবং মল পরীক্ষা করা হয়েছিল। মোট 20 এবং 26টি মেটাবোলাইট যথাক্রমে সাধারণ এবং CUS ইঁদুরগুলিতে ভিট্রো এবং ভিভোমেটাবলিজম থেকে চিহ্নিত করা হয়েছিল। CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস (PhGs) এবং ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডের aglycones এবং অবক্ষয় পণ্যগুলিতে বিপাক করা হয়েছিল, ভিট্রোতে স্বাভাবিক বা বিষণ্ণ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা। দ্বিতীয় পর্যায় এগ্লাইকোনের বিপাক এবং পিএইচজি এবং ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডের অবক্ষয় পণ্যগুলি ইঁদুরের প্রস্রাব এবং মলের প্রধান বিপাক ছিল। অতিরিক্তভাবে, বিষণ্ণ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং অ্যাগ্লাইকোন তৈরি করার বিপাকীয় ক্ষমতা স্বাভাবিক ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার তুলনায় অনেক দুর্বল ছিল, যা CUS ডিপ্রেসড রেটগুলিতে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা উত্পাদিত বিশৃঙ্খল গ্লাইকোসাইড হাইড্রোলেসের জন্য দায়ী করা হয়েছিল। এই গবেষণার ফলাফল CTE-এর এন্টিডিপ্রেসেন্ট সম্পত্তির বিপাকীয় প্রক্রিয়া এবং থেরাপিউটিক প্রক্রিয়া বোঝার ভিত্তি তৈরি করেছে।

কীওয়ার্ড: Cistanche tubulosa, ডিপ্রেশন মেটাবলিজম, ইন ভিট্রো, ইন ভিভো, ইনটেস্টিনাল মাইক্রোবায়োটা

1। পরিচিতি

Cistanches Herba আনুষ্ঠানিকভাবে Cistanche deserticola (YC Ma) এবং C. tubulosa (Schrenk) এর শুকনো রসালো কান্ড হিসাবে নথিভুক্ত করা হয়, যা কিডনির ঘাটতি, পুরুষত্বহীনতা, মহিলা বন্ধ্যাত্ব, অসুস্থতা, প্রচুর মেট্রোরেজিয়া এবং বার্ধক্যজনিত কনস্টিপেশনের চিকিৎসায় ব্যবহৃত হয়। আধুনিক ফার্মাকোলজিকাল গবেষণায় দেখানো হয়েছে যে সিস্তানচেস হারবার বিভিন্ন জৈবিক ক্রিয়াকলাপ রয়েছে যেমন অ্যান্টি-নিউরোডিজেনারেশন, ইমিউনোরেগুলেশন এবং অ্যান্টি-ইনফ্লেমেশন [2,3]। আমাদের পূর্ববর্তী তদন্ত এটি যাচাই করেছেCistanche tubulosa নির্যাস(CTE), যার মধ্যে রয়েছে 48.6 শতাংশ ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড (PhGs), 6.9 শতাংশ ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইড, এবং 20.0 শতাংশ মোট স্যাকারাইড, দীর্ঘস্থায়ী অপ্রত্যাশিত স্ট্রেস (CUS)-এর দ্বারা প্ররোচিত বিষণ্নতার লক্ষণগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে উপশম করতে পারে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার হোমিওস্ট্যাসিস পুনরুদ্ধার করা [4]। সাম্প্রতিক অধ্যয়নগুলি নির্দেশ করে যে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার সংমিশ্রণে পরিবর্তনগুলি হতাশার বিকাশ এবং অগ্রগতির সাথে যুক্ত ছিল [5,6]। মাইক্রোবিয়াল জেনারার আপেক্ষিক প্রাচুর্যগুলি সাধারণ নিয়ন্ত্রণের তুলনায় CUS ডিপ্রেসিভ মডেল ইঁদুরগুলিতে লক্ষণীয়ভাবে বিরক্ত হয়েছিল [7]। হতাশাগ্রস্ত রোগীদের মধ্যে, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার বৈচিত্র্য এবং সমৃদ্ধিও উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তিত হয়েছিল [8]। তদুপরি, ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইডস (পিএইচজি) এবং ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইড সহ বিভিন্ন যৌগকে সিস্টানচেস হার্বা [2,3] এর প্রধান উপাদান হিসাবে বিবেচনা করা হত, যা তাদের সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং হাইড্রোক্সিটাইরোসল (HT), 3, 3,{15} হাইড্রোক্সাইড্রোক্স সহ সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং এগ্লাইকোনে সহজে বিপাকিত হয়েছিল। মানুষের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা গ্লাইকোসাইড, ডিগ্লাইকোসিলেটেড জেনিপোসিডিক অ্যাসিড ইত্যাদি। এই বিপাকগুলি অন্ত্রের মাধ্যমে আরও সহজে শোষিত হয় এবং প্রোটোটাইপ উপাদানের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ জৈবিক কার্যকলাপ চালায়[9-11]। এইভাবে, আমরা বিশ্বাস করি যে বিষণ্নতার সংঘটন এবং বিকাশের সময়, অন্ত্রের মাইক্রোফ্লোরা গঠনের ব্যাঘাত অনিবার্যভাবে গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ট্র্যাক্টে মৌখিক ঐতিহ্যবাহী চীনা ওষুধের (TCMs) বিপাককে প্রভাবিত করবে, যা হোস্টের শারীরবৃত্তীয় অবস্থাকে প্রভাবিত করবে। Cistanches Herba-এর বিদ্যমান বিপাক সংক্রান্ত তথ্যের অধিকাংশই আসে সুস্থ প্রাণীদের উপর বিপাক সংক্রান্ত গবেষণা থেকে[12-15]। অতএব, CTE এর বিপাকীয় প্রোফাইল তদন্ত করা আরও ক্লিনিকাল তাত্পর্যপূর্ণ হবে(Cistanche tubulosa নির্যাস)প্যাথলজিকাল অবস্থায় এর বায়োঅ্যাকটিভ উপাদানগুলি ব্যাখ্যা করা এবং এর অ্যান্টি-ডিপ্রেসিভ কার্যকারিতার জন্য অ্যাকশনের প্রক্রিয়া বোঝা।

বর্তমান গবেষণায়, আমরা CTE এর বিপাকীয় প্রোফাইলগুলিকে চিহ্নিত করার লক্ষ্য রাখি(Cistanche tubulosa নির্যাস)আল্ট্রা-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি কোয়াড্রপোল টাইম-অফ-ফ্লাইট মাস স্পেকট্রোমেট্রি (UPLC-Q-TOF-MS) দ্বারা স্বাস্থ্যকর এবং CUS-প্ররোচিত হতাশাজনক মডেল ইঁদুর উভয় ক্ষেত্রেই। গ্যাস্ট্রিক জুস, অন্ত্রের তরল, এবং সাধারণ এবং বিষণ্ণ প্যাথলজিকাল ইঁদুরের মাইক্রোবায়োটা CTE-এর বিপাকীয় প্রক্রিয়ার অনুকরণে ব্যবহার করা হয়েছে।(Cistanche tubulosa নির্যাস)গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ট্র্যাক্ট ইন ভিট্রোতে, স্বাধীনভাবে এবং ক্রমানুসারে। ভিভোতে বিপাকগুলিও CTE এর মৌখিক প্রশাসনের পরে ব্যাখ্যা করা হয়(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের মধ্যে। এই গবেষণা CTE-এর বিপাক এবং সক্রিয় বিপাকের নতুন অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে(Cistanche tubulosa নির্যাস)বিষণ্নতার জন্য।

2. উপাদান এবং পদ্ধতি

2.1। উপাদান

হেতিয়ান কাউন্টি (জিনজিয়াং, চীন) থেকে সি. টিউবুলোসার শুকনো ডালপালা সংগ্রহ করা হয়েছিল। ভাউচারের নমুনা নমুনাগুলি প্রফেসর জিয়াওবো লি দ্বারা প্রমাণিত হয়েছে এবং সাংহাই জিয়াও টং বিশ্ববিদ্যালয়ের (সাংহাই, চীন) স্কুল অফ ফার্মেসির হার্বেরিয়ামে জমা করা হয়েছে। নিষ্কাশন পদ্ধতিটি আমাদের পূর্ববর্তী প্রকাশনায় উল্লেখিত হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল [4]। দ্যCistanche tubulosa নির্যাস(CTE) নমুনাগুলি 4 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল এবং ব্যবহারের আগে জীবাণুমুক্ত জলে পুনরায় দ্রবীভূত করা হয়েছিল। CTE এর জীবাণুমুক্ত জল সমাধান(Cistanche tubulosa নির্যাস)তারপর নমুনাগুলিকে একটি 0.22 μm ঝিল্লির মাধ্যমে ফিল্টার করা হয়েছিল এবং ফিল্টারগুলি জীবাণুমুক্ত টিউবগুলিতে সংগ্রহ করা হয়েছিল।

পেকিং ইউনিভার্সিটি (বেইজিং, চীন) ডঃ পেংফেই তুর গবেষণাগার দ্বারা ইচিনাকোসাইড সরবরাহ করা হয়েছিল। Acteoside, isoacteoside, 2′-acetylacteoside, এবং cistanoside A কেনা হয়েছিল সিচুয়ান ওয়েইকেকি বায়োলজিক্যাল টেকনোলজি কোং লিমিটেড (চেংদু, চীন) থেকে। Hydroxytyrosol, caffeic acid, 3,4-dihydroxybenzenepropionic acid, 3-hydroxyphenylpropionic acid, এবং 3-phenylpropionic acid Aladdin IndustrialInc থেকে কেনা হয়েছিল। (সাংহাই, চীন). HPLC-UV দ্বারা প্রতিটি উপাদানের বিশুদ্ধতা > 95 শতাংশ নির্ধারণ করা হয়েছিল। এইচপিএলসি-গ্রেড অ্যাসিটোনিট্রিল মার্ক (ডার্মস্ট্যাড, জার্মানি) থেকে কেনা হয়েছিল। মিলি-কিউ জল পরিশোধন ব্যবস্থা (মিলিপুর, বেডফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে ডিসটিল জল থেকে ডিওনাইজড জল প্রস্তুত করা হয়েছিল। ব্যবহৃত অন্যান্য সমস্ত বিকারক এবং রাসায়নিক বিশ্লেষণাত্মক গ্রেডের ছিল।

2.2। প্রাণী পরীক্ষা

পুরুষ স্প্রাগ-ডাওলি ইঁদুর (200 ± 20 গ্রাম) বেইজিং ভাইটাল রিভার ল্যাবরেটরি অ্যানিমাল টেকনোলজি কোম্পানি (বেইজিং, চীন) থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং সাংহাই জিয়াওটং বিশ্ববিদ্যালয়ের (সাংহাই, চীন) ল্যাবরেটরি অ্যানিমেল সেন্টারে রাখা হয়েছিল। 12:12 ঘন্টার আলো-অন্ধকার চক্রের সাথে প্রাণীগুলি গ্রুপ-হাউসডান্ডারে নিয়ন্ত্রিত ঘরের তাপমাত্রা (25 ± 2 ডিগ্রি, 55 ± 10 শতাংশ আপেক্ষিক আর্দ্রতা) ছিল। ইঁদুরগুলিকে 1 সপ্তাহের জন্য নিয়মিত পরীক্ষাগার ইঁদুরের চৌ এবং জলে বিনামূল্যে প্রবেশের অনুমতি দেওয়া হয়েছিল। সাংহাই জিয়াও টং ইউনিভার্সিটির (সাংহাই, চীন) পশু নীতিশাস্ত্র কমিটি দ্বারা পশু সুবিধা এবং প্রোটোকল অনুমোদিত হয়েছিল।

এক-সপ্তাহের অভিযোজনের পরে, বারোটি সাদাসিধা ইঁদুরকে এলোমেলোভাবে দুটি গ্রুপে বিভক্ত করা হয়েছিল (n=6), নিয়ন্ত্রণ গ্রুপ এবং ক্রনিক আনপ্রেডিক্টেবল স্ট্রেস (CUS) গ্রুপ। CUS ইঁদুরগুলি আমাদের পূর্ববর্তী প্রতিবেদনের মতো তৈরি করা হয়েছিল [4], যেগুলি বিভিন্ন ধরণের চাপের শিকার হয়েছিল: 1 ঘন্টার জন্য হোয়াইটনোইস (100 ডিবি), রাতারাতি কম-তীব্রতার স্ট্রোবোস্কোপিক আলোকসজ্জা (120 ফ্ল্যাশ/মিনিট), 24 ঘন্টার জন্য জলের বঞ্চনা, খালি পানির বোতল 1 ঘন্টার জন্য (জলের বঞ্চনার পরে), 24 ঘন্টার জন্য খাবারের বঞ্চনা, শারীরিক সংযম (1−2 ঘন্টা), জোর করে সাঁতার কাটা (5 মিনিট), 24 ঘন্টার জন্য নোংরা খাঁচা (100 গ্রাম করাতের বিছানায় 200 মিলি জল), লেজ চিমটি ( 1 মিনিট), 30 মিনিটের জন্য শক, 24 ঘন্টার জন্য 45 ডিগ্রী খাঁচা কাত এবং রাতারাতি আলোকসজ্জা (12 ঘন্টা)। স্ট্রেসরগুলি 4 সপ্তাহের জন্য অবিচ্ছিন্নভাবে এবং এলোমেলোভাবে প্রয়োগ করা হয়েছিল, বিস্তারিত বিন্যাস সারণি S1 এ বর্ণিত হয়েছে। 4 সপ্তাহের চাপের পরে, সুক্রোসপ্রেফারেন্স পরীক্ষা, ওপেন-ফিল্ড পরীক্ষা এবং নতুনত্ব-দমন করা খাওয়ানোর পরীক্ষাগুলি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে সঞ্চালিত হয়েছিল [4]। CUS এর রূপরেখা এবং আচরণগত পরীক্ষার চিত্র S1 এ দেখানো হয়েছে। আচরণগত পরীক্ষার পরে, প্রতিটি ইঁদুর থেকে কমপক্ষে 4টি ফেকালপেলেট প্রাপ্ত করা হয়েছিল এবং CTE-এর ভিট্রো বিশ্লেষণের জন্য জীবাণুমুক্ত শঙ্কুযুক্ত টিউবগুলিতে স্থাপন করা হয়েছিল।(Cistanche tubulosa নির্যাস)বিপাক

2.3। CTE এর গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)ভিট্রোতে স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর দ্বারা

2.3.1। CTE এর বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক এবং অন্ত্রের রসে

CTE এর পঞ্চাশ মিলিগ্রাম(Cistanche tubulosa নির্যাস)যথাক্রমে 10 মিলি সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক জুস এবং অন্ত্রের রস যোগ করা হয়েছিল। তারপর CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)গ্যাস্ট্রিক জুসে 4 ঘন্টা এবং অন্ত্রের রসে 6 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রীতে incubated ছিল। কালচার করা মিশ্রণ (1 মিলি) 3 মিলি জল-স্যাচুরেটেড এন-বুটানল দিয়ে অবিলম্বে 0 এবং 4 ঘণ্টা গ্যাস্ট্রিক জুসে এবং 0 এবং অন্ত্রের রসে 6 ঘণ্টায় নিভিয়ে দেওয়া হয়েছিল। ব্যবহৃত নমুনার প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি পূর্বে বর্ণিত হিসাবে ছিল [9]।

2.3.2। CTE এর বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা

তাজা স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের মল নমুনাগুলি প্রথমে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং GAM ব্রোথের 25 গুণ ভলিউমের সাথে একত্রিত করা হয়েছিল। তিন টুকরো গজের মাধ্যমে পরিস্রাবণের মাধ্যমে পলি অপসারণ করা হয়। সাসপেনশনটি তখন একটি অ্যানেরোবিক ইনকিউবেটরে 37 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করা হয়েছিল যেখানে বায়ু একটি গ্যাস মিশ্রণ দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছিল (H2 5 শতাংশ, CO2 10 শতাংশ, N2 85 শতাংশ)। পঞ্চাশ মিলিগ্রাম CTE 5 mL স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের মল সাসপেনশনে আলাদাভাবে যোগ করা হয়েছিল, এবং সাসপেনশনটি 48 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়েছিল। চাষকৃত মিশ্রণটি 0, 12, 24, এবং 48 ঘন্টায় জল-স্যাচুরেটেড এন বুটানল দিয়ে সরানো হয়েছিল। নমুনা প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতিটি পূর্বে বর্ণনা করা হয়েছিল [9]।

2.3.3। CTE এর অনুক্রমিক বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)গ্যাস্ট্রিক রস, অন্ত্রের রস, স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা

প্রথমত, 100 মিলিগ্রাম CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)1{{10}} মিলি সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক জুসে যোগ করা হয়েছিল এবং 4 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রীতে ইনকিউব করা হয়েছিল। সম্পূর্ণ প্রতিক্রিয়াটি জল-স্যাচুরেটেড এন-বুটানলের আয়তনের 3গুণ দ্বারা নিঃশেষ করা হয়েছিল এবং 15 মিনিটের জন্য 3000 rpm-এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল, তারপরে নাইট্রোজেনের আন্ডারা স্রোতের উপরিভাগের বাষ্পীভবন হয়েছিল। 37 ডিগ্রিতে গ্যাস দ্বিতীয়ত, অবশিষ্টাংশগুলি 0.4 মিলি জীবাণুমুক্ত জলে পুনরায় দ্রবীভূত করা হয়েছিল, 8 মিলি সিমুলেটেড অন্ত্রের রসে যোগ করা হয়েছিল এবং 6 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রিতে সেঁকানো হয়েছিল। গ্যাস্ট্রিক জুস সহ নমুনা একই পদ্ধতিতে পূর্ব-প্রস্তুত করা হয়েছিল। অবশেষে, অবশিষ্টাংশ 0.3 মিলি জীবাণুমুক্ত জলে পুনরায় দ্রবীভূত করা হয়, যথাক্রমে 6 মিলি স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের মল সাসপেনশনে যোগ করা হয়, এবং একটি অ্যানারোবিসিকিউবেটরে 48 ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউব করা হয়। এক মিলিলিটার প্রতিক্রিয়া 3 মিলি জল-স্যাচুরেটেড এন-বুটানল দ্বারা অবিলম্বে 0 এবং 4 ঘন্টা গ্যাস্ট্রিক জুসে, অন্ত্রের রসে 0 এবং 6 ঘন্টা এবং ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে 0, 12, 24, এবং 48 ঘন্টায় নিভে যায়। . নমুনা একইভাবে CTE প্রক্রিয়া করা হয়েছিল(Cistanche tubulosa নির্যাস)সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক জুসে।

2.4। CTE এর বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)ভিভোতে স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর দ্বারা

দুটি গ্রুপের প্রতিটি ইঁদুরকে তখন একটি পৃথক বিপাকীয় খাঁচায় রাখা হয়েছিল। রাতারাতি উপবাসের পরে যা কেবলমাত্র বিনামূল্যে জলে প্রবেশের অনুমতি দেয়, সমস্ত ইঁদুরকে মৌখিকভাবে অ্যাগ্যাস্ট্রিক টিউবের মাধ্যমে 2 মিলি জল দেওয়া হয়েছিল। 0 ঘণ্টা থেকে ১২ ঘণ্টার মধ্যে সমস্ত ইঁদুর থেকে ফাঁকা প্রস্রাব এবং মলদ্বারের নমুনা সংগ্রহ করা হয়েছিল। আরও, CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)(400 mg/kg) গ্যাভেজ দ্বারা পরিচালিত হয়েছিল। প্রস্রাব এবং মল নমুনা 0 ঘন্টা থেকে 24 ঘন্টা পর্যন্ত সংগ্রহ করা হয়েছিল। সমস্ত প্রস্রাব এবং মল নমুনা অবিলম্বে −80 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।

স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর থেকে প্রস্রাব এবং মল নমুনা পূর্বে বর্ণনা করা হয়েছিল [12]। সমস্ত ফলাফল নমুনা UPLC-Q-TOF-MS দ্বারা বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।

2.5। বিশ্লেষণী পদ্ধতি

UPLC একটি ACQUITY UPLC BEH C18 কলাম (100 mm × 2.1 mm id, 1.7 μm, Waters Corp. , USA) গ্রেডিয়েন্ট ইলুশন দ্বারা {{10}}.1 শতাংশ ফরমিক অ্যাসিড অ্যাসিটোনিট্রিল (A) এবং 0.1 শতাংশ ফরমিক অ্যাসিড জলে (B) 0.4 মিলি/মিনিট প্রবাহ হারে . গ্রেডিয়েন্ট প্রোফাইল ছিল: 0–5 মিনিট (A:5–20 শতাংশ), 5–7.5 মিনিট (A: 20–30 শতাংশ), 7.5–10 মিনিট (A: 30–70 শতাংশ), 10–11 মিনিট (A : 70-100 শতাংশ), এবং 1.5 মিনিটের জন্য অনুষ্ঠিত হয়েছিল। গ্রেডিয়েন্টটি 0.5 মিনিটে 5 শতাংশে পুনর্ব্যবহার করা হয়েছিল এবং পরবর্তী রানের জন্য 2.5 মিনিটের জন্য রাখা হয়েছিল। ইনজেকশন ভলিউম ছিল 3 μL। কলাম ওভেনের তাপমাত্রা 35 ডিগ্রিতে সেট করা হয়েছিল।

ভর স্পেকট্রোমেট্রি একটি ওয়াটারস ভিওন আইএমএস ভরস্পেকট্রোমিটার (ওয়াটার্স কর্পোরেশন, মিলফোর্ড, এমএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে করা হয়েছিল। আয়োনাইজেশন নেতিবাচক ইলেক্ট্রোস্প্রে (ESI−) মোডে সঞ্চালিত হয়েছিল। MS প্যারামিটারগুলি নিম্নরূপ ছিল: কৈশিক ভোল্টেজ, −2৷{1}} kV; শঙ্কু ভোল্টেজ, 20 V; উত্স তাপমাত্রা, 120 ডিগ্রি ; দ্রবীভূতকরণ তাপমাত্রা, 500 ডিগ্রি ; শঙ্কু এবং দ্রবীভূতকরণের গ্যাস প্রবাহ যথাক্রমে 50 এবং 1000 L/h. সঠিক ভর পরিমাপের জন্য, [M–H]− আয়ন (m/z 554.2615) তৈরি করতে লক ভর হিসাবে লিউসিন-এনকেফালিন ব্যবহার করা হয়েছিল। দুটি স্ক্যান ফাংশনে একটি MSE (ম্যাস স্পেকট্রোমেট্রি এলিভেটেড এনার্জি) পরীক্ষা নিম্নরূপ করা হয়েছিল: ফাংশন 1 (নিম্ন শক্তি): m/z 50-1000, 0.25 s স্ক্যান সময়, 0.02 s ইন্টারস্ক্যান বিলম্ব, 6 eV সংঘর্ষের শক্তি; ফাংশন 2 (উচ্চ শক্তি): m/z50–1000, 0.25 s স্ক্যান সময়, 0.02 s আন্তঃ-স্ক্যান বিলম্ব, 20-45 eV-এর সংঘর্ষের শক্তির্যাম্প।

2.6। তথ্য প্রক্রিয়াজাতকরণ

MSE-এর মাধ্যমে সংগৃহীত সম্পূর্ণ-স্ক্যান করা সঠিক ডেটার মধ্যে মেটাবোলাইট সনাক্তকরণের জন্য UNIFI 1.8.1 সফ্টওয়্যার (Waters Corp., Milford, MA, USA) ব্যবহার করে ডেটা প্রক্রিয়া করা হয়েছিল। যৌগগুলি সঠিক ভরের উপর ভিত্তি করে সনাক্ত করা হয়েছিল, উচ্চ-শক্তি ভর স্পেকট্রোমেট্রিতে খন্ডগুলি। তীব্রতা থ্রেশহোল্ড 100.0 গণনা হিসাবে সেট করা হয়েছিল৷ লক্ষ্য শনাক্তকরণ, টুকরো ম্যাচ সহনশীলতা, এবং অন্যান্য পরামিতিগুলি স্বয়ংক্রিয়ভাবে সেট করা হয়েছিল।

3। ফলাফল

3.1। CUS প্ররোচিত হতাশা ইঁদুরের আচরণগত পরিবর্তন

সুক্রোজ পছন্দ পরীক্ষা, ওপেন-ফিল্ড পরীক্ষা এবং অভিনবত্ব-দমন খাওয়ানো পরীক্ষা সহ আচরণগত পরীক্ষা দ্বারা সিইএস-প্ররোচিত হতাশাজনক লক্ষণগুলির সাথে ইঁদুরগুলিকে মূল্যায়ন করা হয়েছিল। শিক্ষার্থীর টি-পরীক্ষা থেকে জানা যায় যে সুক্রোজ পছন্দ পরীক্ষায় সুক্রোজপ্রেফারেন্স (p <.001), খোলা="" মাঠের="" পরীক্ষায়="" মোট="" দূরত্ব="" কভার="" করা="" হয়েছে="" (p=""><.001), এবং="" অভিনবত্ব-দমন="" করা="" খাওয়ানো="" পরীক্ষায়="" (p=""><.01) খাওয়ার="" বিলম্ব="" উল্লেখযোগ্যভাবে="" ছিল।="" 4-="" সপ্তাহের="" cus="" চিকিত্সার="" পরে="" কন্ট্রোল="" গ্রুপের="" তুলনায়="" ভিন্ন="" (চিত্র="" 1)।="" এই="" ফলাফলগুলি="" নির্দেশ="" করে="" যে="" দীর্ঘস্থায়ী="" অপ্রত্যাশিত="" স্ট্রেস="" মডেলটি="" সফলভাবে="" বিকশিত="">

3.2। CTE এর রাসায়নিক উপাদানের বৈশিষ্ট্য(Cistanche tubulosa নির্যাস)

CTE এর প্রোটোটাইপ উপাদানগুলির একটি ব্যাপক বিশ্লেষণ(Cistanche tubulosa নির্যাস)UPLC-Q-TOF-MS দ্বারা সম্পাদিত হয়েছিল। CTE থেকে মোট 27টি উপাদান(Cistanche tubulosa নির্যাস)20 PhGs, 5 iridoids এবং iridoid glycosides, এবং 2 oligosaccharides সহ সনাক্ত করা হয়েছে এবং অস্থায়ীভাবে চিহ্নিত করা হয়েছে। এই রাসায়নিক উপাদানগুলির গঠন সম্পর্কে অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করার জন্য ধারণ করার সময়, সঠিক MS, এবং MS/MS ফ্র্যাগমেন্ট আয়ন সহ বিস্তারিত তথ্য সহায়ক তথ্য (টেবিল S2) এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে। CTE-এর UPLC-Q-TOF-MS মোট আয়নক্রোমাটোগ্রাম (TIC) চিত্র S2-এ দেখানো হয়েছে।

3.3। CTE এর গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)ভিট্রোতে স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর দ্বারা

এই গবেষণায়, CTE এর সম্ভাব্য বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)সাধারণ দ্বারা এবং ভিট্রোতে CUSrats টিআইসি থেকে সনাক্ত করা হয়েছিল এবং নিয়ন্ত্রণ নমুনার সাথে তুলনা করার পরে প্রাথমিক রচনা এবং MS/MS খণ্ড ভর স্পেকট্রার সংমিশ্রণের সাথে সনাক্ত করা হয়েছিল। CTE থেকে বিপাক সব(Cistanche tubulosa নির্যাস)সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক এবং অন্ত্রের রসে, সাধারণ এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা সারণি 1 এ তালিকাভুক্ত করা হয়েছে।

3.3.1। CTE এর বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক এবং অন্ত্রের রসে

CTE এর সাতটি বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)সিমুলেটেড গ্যাস্ট্রিক রসে সঠিক ভর এবং MSE খণ্ড তথ্য দ্বারা অস্থায়ীভাবে সনাক্ত করা হয়েছিল: M1 (m/z315.1074, C14H20O8, 1.66 মিনিট), M4 (m/z 459.1501, C20H28O12,2.36 min), M51510, C4510, C451 2.60 মিনিট), M7 (m/z179.0338, C9H8O4, 2.85 মিনিট), M12 (m/z 785.2481, C35H46O20, 4.77 মিনিট), M16 (m/z 827.2580, C37H48m, 135 মিনিট), M128 মিনিট এবং .1968, C29H36O15, 5.81 মিনিট)। ডিগ্লাইকোসিলেশন, ডিহাইড্রোক্সিলেশন, ডিহাইড্রোজেনেশন এবং আইসোমারাইজেশনকে গ্যাস্ট্রিক জুসে CTE-এর প্রধান বিপাকীয় পথ হিসাবে বিবেচনা করা হয়েছিল। M4 এবং M5 এর আণবিক ওজন 2 Da এবং 16 Da তাদের প্রোটোটাইপ কম্পোনেন্ট, ডিক্যাফেওয়্যালেক্টিওসাইডের চেয়ে কম পাওয়া গেছে এবং এইভাবে এটির ডিহাইড্রোজেনেটেড এবং ডিহাইড্রোক্সিলেটেড পণ্য হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছে। M12 কে ইচিনাকোসাইডের একটি আইসোমার হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল, যা m/z 623.2178, 477.1601, 315.1055, 161.0237 এ ইচিনাকোসাইডের মতো একই আয়ন তৈরি করে।

CTE এর পরে একই বিপাক সনাক্ত করা হয়েছিল(Cistanche tubulosa নির্যাস)অন্ত্রের রসে ইনকিউবেশন এটি লক্ষণীয় যে পিএইচজি-তে C-6′ অবস্থানে থাকা ক্যাফেওয়েল গ্রুপটি অন্ত্রের রসে হজমকারী এনজাইমগুলির দ্বারা সহজেই বিপাকিত হয়েছিল যাতে এটি তার ডিক্যাফিল বিপাক এবং ক্যাফেইক অ্যাসিড তৈরি করে।

3.3.2। CTE এর বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা

CTE থেকে মোট 20টি বিপাক জৈব-রূপান্তরিত হয়েছে(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক রেটিনটেস্টাইনাল মাইক্রোবায়োটা সনাক্ত এবং সনাক্ত করা হয়েছিল (চিত্র 2)। ফলাফলগুলি থেকে, এটি দেখা গেছে যে PhGগুলি aglycon hydroxytyrosol (HT) M2 (m/z 153.0550, C8H10O3, 1.78 মিনিট), এবং ক্যাফেইক অ্যাসিড (CA) M7 (m/z 179.0338, C9H8O5, তারপর তারা. M3 (m/z 163.0390, C9H8O3, 2.02 মিনিট), M6 (m/z181.0501, C9H10O4, 2.76 মিনিট), M10 (m/z 195.0655, C10H12O4, 51m) এবং 51m (51m), 4. , C9H10O3, 4.36 মিনিট) ডিহাইড্রোক্সিলেশন, হ্রাস এবং মিথিলেশনের মাধ্যমে। এছাড়াও, সাধারণ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে CTE থেকে PhG প্রোটোটাইপ যৌগগুলির সরাসরি বিপাক তৈরি করে সেন্ট্রাল মেটাবলিক পথগুলি হল হ্রাস, মেথোক্সিলেশন, ডিগ্লাইকোসিলেশন, ডেক্যাফিওয়েল, ডিহাইড্রোজেনেশন এবং আইসোমারাইজেশন।

CUS-প্ররোচিত বিষণ্নতা ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে ইনকিউবেশনের পরে, CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)সাধারণ ইঁদুরের মতো একই বিপাকীয় পথের মাধ্যমে 20টি বিপাককে রূপান্তরিত করা হয়েছিল।

3.3.3। গ্যাস্ট্রিক রস, অন্ত্রের রস, স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা CTE-এর অনুক্রমিক বিপাক

গ্যাস্ট্রিক জুস, অন্ত্রের রস, স্বাভাবিক, এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে অনুক্রমিক ইনকিউবেশনের পরে, CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)14টি মেটাবোলাইটে বিপাক করা হয়েছিল (8টি গ্যাস্ট্রিক জুস সহ, 7টি অন্ত্রের রস সহ, 11টি অস্বাভাবিক এবং 10টি CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা সহ)। এর মধ্যে, M2(HT) এবং M11 (3-হাইড্রোক্সিফেনাইলপ্রোপিয়নিক অ্যাসিড, 3-HPP) ছিল CTE-এর অনুক্রমিক ইনকিউবেশনের পর PhG-এর চূড়ান্ত বিপাকীয় পদার্থ।(Cistanche tubulosa নির্যাস)গ্যাস্ট্রিক জুস, অন্ত্রের রস এবং অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটায়। স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের মধ্যে বিপাকের মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না।

M8, M9, M14, M17, M19, এবং M20 শুধুমাত্র স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা CTE-এর নির্ভরশীল বিপাকের মধ্যে সনাক্ত করা হয়েছিল। এই বিপাকগুলি ছিল প্রধানত বিপাকীয় মধ্যবর্তী যা CTE-এর অনুক্রমিক বিপাকের গবেষণায় চূড়ান্ত বিপাককে সম্পূর্ণরূপে বিপাকিত করা হয়েছিল এবং তাই সনাক্ত করা কঠিন।

3.3.4। স্বাভাবিক এবং CUS রেটিনটেস্টাইনাল মাইক্রোবায়োটার দ্বারা CTE-এর বিপাকীয় হারের মধ্যে পার্থক্য

CTE এর বিপাকীয় হারের মধ্যে পার্থক্য ব্যাখ্যা করতে(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা, গ্যাস্ট্রিক জুস, অন্ত্রের রস, স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা আলাদাভাবে এবং ক্রমানুসারে (টেবিল S3 এবং S4) দিয়ে ইনকিউবেশনের পরে 27 প্রোটোটাইপ যৌগ এবং 20 বিপাকের আপেক্ষিক বিষয়বস্তু। ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে যদিও CTE এর মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং বিষণ্ণ ইঁদুরের মেটাবোলাইট, তাদের বিপাকীয় হারে একটি উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়। উদাহরণস্বরূপ, C2 এবং C5 চিহ্নিত করা হয়েছিল 8-এপিলোগ্যানিক অ্যাসিড বা এর আইসোমার হিসাবে। এগুলি 12 ঘন্টা ইনকিউবেশনের মধ্যে স্বাভাবিক নমুনায় সম্পূর্ণরূপে বিপাক করা হয়েছিল। রোগগতভাবে বিষণ্ণ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে, তবে, 48 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে তাদের পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে বিপাক করা হয়েছিল। এটি স্পষ্ট ছিল যে সাধারণ ইঁদুরের বিপাকীয় হার CUS ইঁদুরের চেয়ে দ্রুত ছিল। C18 (isoacteoside) থেকে অনুরূপ ফলাফল আবিষ্কৃত হয়েছিল। অধিকন্তু, এটি লক্ষণীয় যে সাধারণ নমুনায় M12 (ইচিনাকোসাইডের আইসোমারাইজেশন) এবং M16 (টিউবুলসাইড এ-এর আইসোমারাইজেশন) এর পিক এলাকা CUS নমুনার তুলনায় অনেক বেশি ছিল, যা নির্দেশ করে যে CTE-এর আইসোমারাইজেশন প্রতিক্রিয়া(Cistanche tubulosa নির্যাস)বিষণ্নতা ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে স্বাভাবিক ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাথানে বেশি প্রচলিত ছিল।

3.4। ভিভোতে স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর দ্বারা CTE-এর বিপাক

CTE-চিকিত্সা করা গোষ্ঠীর জৈবিক নমুনাগুলিকে ফাঁকা জৈবিক নমুনার সাথে তুলনা করে, CTE-এর মোট 26টি বিপাক (যৌগ 1-26)(Cistanche tubulosa নির্যাস)অস্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুর সনাক্ত করা হয়েছিল (সারণী 2)। সাধারণ UPLC ক্রোমাটোগ্রাম এবং CUS ইঁদুরের প্রস্রাবের নমুনা চিত্র 3-এ উপস্থাপন করা হয়েছে।

3.4.1। স্বাভাবিক এবং CUS র্যাচুরিনে CTE-এর বিপাকের বৈশিষ্ট্য

CTE এর ভিভো মেটাবোলাইটে মোট 18টি(Cistanche tubulosa নির্যাস)সাধারণ ইঁদুরের প্রস্রাবের নমুনাগুলি অস্থায়ীভাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল। এইচটি এবং সিএ সহ পিএইচজিগুলির অবক্ষয় বিপাক এবং তাদের আরও সালফেশন (যৌগ 1, 2, 3, 5, 8 এবং 16), মিথিলেশন (6, 21, 22 এবং 24), এবং মেথোক্সিলেশন (13 এবং 14) বিপাকগুলি ছিল সাধারণ ইঁদুরের প্রস্রাবের প্রধান বিপাক। ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি সহজেই ডিগ্লাইকোসিলেশনের মাধ্যমে অ্যাগলাইকোনে (23, 25 এবং 26) বিপাকিত হয়েছিল। এটি লক্ষণীয় যে সাধারণ ইঁদুরের প্রস্রাবের নমুনায় কোনও প্রোটোটাইপ উপাদান সনাক্ত করা যায়নি।

বিষণ্ণ ইঁদুরের প্রস্রাবের নমুনায়, CTE এর 22টি বিপাক(Cistanche tubulosa নির্যাস)সনাক্ত করা হয়েছে এবং চিহ্নিত করা হয়েছে। একটি প্রোটোটাইপ যৌগ, 8-এপিলোগ্যানিক অ্যাসিড, প্যাথলজিকাল ইঁদুরের প্রস্রাবে সনাক্ত করা হয়েছিল। অন্যান্য বিপাকগুলি সাধারণ ইঁদুরের প্রস্রাবের সাথে সঙ্গতিপূর্ণ ছিল, যার মধ্যে সালফেটেড মেটাবোলাইট (1, 2, 3, 8, 10, এবং 16), মিথাইলেড মেটাবোলাইট (6, 11, 19, এবং 22), মেথোক্সিলেটেড মেটাবোলাইট (13 এবং 14) HT এবং CA, এবং iridoid glycosides (25 এবং 26) এর theaglycones.

3.4.2। CTE এর বিপাকীয় বৈশিষ্ট্য(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ratfeces মধ্যে

এই গবেষণায়, CTE এর শুধুমাত্র একটি বিপাক (যৌগ 20, 3-HPP)(Cistanche tubulosa নির্যাস)সাধারণ ইঁদুরের মলে সনাক্ত করা হয়েছিল। বেশিরভাগ PhG-কে প্রথমে CA-তে অবনমিত করা হয়েছিল এবং ফলস্বরূপ এর প্রধান মাইক্রোবিয়াল মেটাবোলাইট, {{0}HPP-তে আরও বিপাক হয়েছিল। CUS ইঁদুরের মল নমুনাতে, সালফেটেড 3-এইচপিপি (যৌগ 16), এবং সালফেটেড এইচটি (যৌগ 2 এবং 3) সহ 3টি বিপাক অপ্রয়োজনীয়ভাবে চিহ্নিত করা হয়েছে।

3.4.3। সাধারণ এবং CUSrats-এ CTE-এর ভিভো মেটাবোলাইটের মধ্যে পার্থক্য

CTE এর মৌখিক প্রশাসনের পরে(Cistanche tubulosa নির্যাস), ইন ভিভো মেটাবোলাইট স্বাস্থ্যকর এবং হতাশাজনক মডেল ইঁদুরের মধ্যে সুস্পষ্ট পার্থক্য দেখিয়েছে। 21টি বিপাক (যৌগ 1-3, 5, 6, 8-14, 16, 17, এবং 19-26) সুস্থ এবং CUS ইঁদুরের নমুনার মধ্যে সনাক্ত করা হয়েছিল। যৌগ 23 (ডিগ্লাইকোসিলেটজেনিপোসিডিক অ্যাসিড) শুধুমাত্র সুস্থ ইঁদুরের নমুনায় শনাক্ত করা হয়েছিল, যখন যৌগগুলি 4 (HT), 7 (8-এপিলোগ্যানিক অ্যাসিড), 15 (3, 4-ডাইহাইড্রোক্সিবেনজেনেপ্রোপিওনিক অ্যাসিড), এবং 18 ({{) 19}}এইচপিপি গ্লুকুরোনাইড কনজুগেশন) শুধুমাত্র CUS মডেল ইঁদুরের নমুনায় সনাক্ত করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, প্রোটোটাইপ উপাদানগুলি শুধুমাত্র CUS ইঁদুরগুলিতে সনাক্ত করা হয়েছিল, যেখানে, সাধারণ ইঁদুরগুলিতে আরও ফেজ II বিপাক আবিষ্কৃত হয়েছিল।

4। আলোচনা

এই গবেষণায়, গ্যাস্ট্রিক জুস, অন্ত্রের রস, স্বাভাবিক এবং সিইএস ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা সহ তিনটি ইন ভিট্রো ইনকিউবেশন মডেল CTE-এর গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাকীয় প্রোফাইল তদন্তের জন্য স্বাধীনভাবে এবং ক্রমানুসারে নিযুক্ত করা হয়েছিল।(Cistanche tubulosa নির্যাস)ভিট্রোতে CTE-তে PhGsand iridoid glycosides পাওয়া গেছে(Cistanche tubulosa নির্যাস)CUS-প্ররোচিত বিষণ্ণ ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা তাদের সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং অ্যাগলাইকোনে সহজেই বিপাক করা হয়েছিল। এর পরে, CTE-এর ভিভো মেটাবলিজম(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাভাবিক এবং CUS ইঁদুরেও যাচাই করা হয়েছিল। CTE-এর জন্য প্রস্তাবিত বিপাকীয় পথ(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাস্থ্যকর এবং CUS-প্ররোচিত বিষণ্ণ ইঁদুরগুলিকে চিত্র 4-এ দেখানো হয়েছে। পিএইচজি, যেমন ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইড, HT এবং CA-তে বিপাকিত হয়েছিল এবং CA এর প্রধান মাইক্রোবিয়াল বিপাক, 3-এইচপিপি-তে আরও বিপাক করেছে। HT, CA, এবং 3-HPP তারপরে তাদের সালফেটেড, মিথিলেটেড, এবং মেথোক্সিলেটেড বিপাকগুলিতে বিপাক করা হয়েছিল। জেনিপোসিডিক অ্যাসিড, কাঙ্কানোসাইড এ এবং কাঙ্কানোসাইড এন সহ ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডগুলি ডিগ্লাইকোসিলেশনের মাধ্যমে তাদের অ্যাগলাইকোনে বিপাকিত হয়েছিল। এগুলি আরও প্রমাণ করেছে যে CTE-তে PhGs এবং iridoid glycosides(Cistanche tubulosa নির্যাস)CUS ইঁদুরগুলিতে সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং অ্যাগ্লাইকোনগুলিতে সহজেই বিপাক করা হয়েছিল। এই বিপাকগুলি সাধারণত জৈবিক কার্যকলাপ [16-18] করার জন্য রক্তে শোষিত হওয়ার জন্য আরও ভাল অন্ত্রের শোষণ এবং জৈব উপলভ্যতা প্রদর্শন করে। এটি লক্ষণীয় যে গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল ট্র্যাক্টে পিএইচজিগুলির জন্য আইসোমারাইজেশন প্রচলিত ছিল, প্রাসঙ্গিক বিপাকগুলিকে তাদের প্রোটোটাইপ যৌগগুলির UPLC ধরে রাখার সময়ের সাথে তুলনা করার পরে চিহ্নিত করা হয়েছিল অপ্টিমাইজ করা আদর্শ UPLC গ্রেডিয়েন্ট প্রোফাইলের উপর ভিত্তি করে।

ক্যাফেইক অ্যাসিড ছিল CTE এর প্রাথমিক অবক্ষয় পণ্য(Cistanche tubulosa নির্যাস)বিষণ্ণ রোগগত ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা। পূর্ববর্তী প্রকাশনাগুলি রিপোর্ট করেছে যে ক্যাফেইক অ্যাসিড ইঁদুরের জোরপূর্বক সাঁতার পরীক্ষায় এন্টিডিপ্রেসিভ-জাতীয় প্রভাব তৈরি করে। ব্রেইন থেকে প্রাপ্ত নিউরোট্রফিক ফ্যাক্টর(BDNF) mRNA লেভেল ফ্রন্টাল কর্টেক্সে এবং TrkB mRNA লেভেল থ্যামাইগডালায় জোরপূর্বক সাঁতার পরীক্ষা করার পর উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে এবং পূর্বের হ্রাস উল্লেখযোগ্যভাবে ক্যাফেইক অ্যাসিড দ্বারা বাধাগ্রস্ত হয়েছিল [19]। হাইড্রোক্সিটাইরোসোল অ্যাগলিকোন, অ্যাগলিকোন, অ্যাসিড। যা নিউরাল প্রোটিন BDNF [20] এর চাপ-প্ররোচিত ডাউনরেগুলেশন প্রতিরোধ করে নিউরোজেনেসিস এবং জ্ঞানীয় ফাংশনকে রক্ষা করে। সুতরাং, মৌখিক প্রশাসনের পরে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা রূপান্তরিত কিছু বায়োঅ্যাকটিভ বিপাক (যেমন, HT এবং CA) এর প্রতি আরও মনোযোগ দেওয়া প্রয়োজন।

উপরন্তু, বর্তমান ফলাফলগুলি প্রমাণ দেয় যে ডিপ্রেসিভরাট অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে, সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং এগ্লাইকোন তৈরি করার বিপাকীয় ক্ষমতা সেই অস্বাভাবিক ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে দুর্বল ছিল। কারণটি অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার বিষণ্নতা-প্ররোচিত কাঠামোগত পরিবর্তনকে দায়ী করা হতে পারে, যা অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা উত্পাদিত বিপাকীয় এনজাইমের কার্যকলাপ হ্রাস করে [২১]। মজার বিষয় হল, পূর্ববর্তী একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে ফিলাম ব্যাকটেরয়েডেটস গ্লাইকোসাইড হাইড্রোলিসিস এবং জটিল কার্বোহাইড্রেটের বিভাজন একটি নির্মূল প্রক্রিয়ার জন্য সর্বাধিক প্রচুর পরিমাণে গ্লাইকোসাইড হাইড্রোলাস এবং পলিস্যাকারাইড লাইজ জিনকে এনকোড করেছে। B. caccae, B. dorei, B. finegoldii, B সহ। ফ্রেজিলিস, বি. ইনটেস্টাইনালিস, বি. ওভাটাস, বি. থেটাইওটাওমিক্রন, বি. ইউনিফর্মিস, এবং বি। xylanisolvens জিএইচ এবং পিএল এনকোডিং জিনের একটি প্রভাবশালী মোট সংখ্যা দেখিয়েছে। প্যারাব্যাকটেরয়েডস ডিস্টাসোনিসেরও একই বৈশিষ্ট্য রয়েছে [২২]। আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণাগুলি নিশ্চিত করেছে যে 28-দিনের দীর্ঘস্থায়ী অনুমানযোগ্য স্ট্রেস স্টিমুলেশন ব্যাকটেরয়েডস, প্যারাব্যাক্টেরয়েডস, বুটিরিসিমোনাস এবং ওয়েইসেল্লার আপেক্ষিক প্রাচুর্য হ্রাস করেছে, যেখানে ইঁদুরগুলিতে রুমিনোকোকাস এবং ডিনোকক্কাস বৃদ্ধি পেয়েছে [4]। এটি লক্ষণীয় যে ব্যাকটেরয়েডস এবং প্যারাব্যাকটেরয়েড দুটি সর্বাধিক প্রচুর মাইক্রোবিয়াল ট্যাক্সা যা সাধারণ ইঁদুরের মধ্যে প্রায় 20 শতাংশ আপেক্ষিক প্রাচুর্যের জন্য দায়ী। CUS চিকিত্সার পরে, হতাশাজনক মডেল ইঁদুরগুলিতে ব্যাকটেরয়েডস এবং প্যারাব্যাকটেরয়েডগুলির আপেক্ষিক প্রাচুর্য তীব্রভাবে প্রায় 5 শতাংশে নেমে আসে। অতএব, এটি অবশ্যম্ভাবীভাবে CUS ইঁদুরে GH এবং PL এনজাইমের মোট সংখ্যা হ্রাসের দিকে পরিচালিত করবে, এবং CTE-এর মৌখিক প্রশাসনের পরে CUS ডিপ্রেসিভ অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা ডিগ্লাইকোসিলেট প্রতিক্রিয়াকে বিরক্ত করবে।(Cistanche tubulosa নির্যাস)মডেল ইঁদুর মধ্যে.

5। উপসংহার

বর্তমান গবেষণায়, UPLC-Q-TOF-MS কৌশলটি স্ক্রিনে প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং এর বিপাক শনাক্ত করা হয়েছিল।Cistanche tubulosaextractভিট্রো এবং ভিভোতে স্বাভাবিক এবং CUS বিষণ্ণ ইঁদুরে। ফলাফলে দেখা গেছে যে CTE(Cistanche tubulosa নির্যাস)স্বাস্থ্যকর এবং হতাশাগ্রস্ত অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা উভয়ের দ্বারা পিএইচজি এবং ইরিডয়েড গ্লাইকোসাইডের অ্যাগ্লাইকোন এবং অবক্ষয় পণ্যগুলিতে বিপাক করা হয়েছিল। CTE এর মৌখিক প্রশাসনের পরে(Cistanche tubulosa নির্যাস), এগ্লাইকোনের ফেজ II মেটাবোলাইট এবং PhGs এবং iridoidglycosides এর অবক্ষয় পণ্যগুলি প্রধানত ইঁদুরের প্রস্রাবে পাওয়া গেছে। বিষণ্ণ রেটিনটেস্টাইনাল মাইক্রোবায়োটাতে সেকেন্ডারি গ্লাইকোসাইড এবং অ্যাগলাইকোন তৈরি করার বিপাকীয় ক্ষমতা স্বাভাবিক ইঁদুরের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার তুলনায় অনেক দুর্বল ছিল, যা CUS-এ অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা দ্বারা উত্পাদিত বিশৃঙ্খলাযুক্ত গ্লাইকোসাইডহাইড্রোলেসের জন্য দায়ী করা হয়েছিল এই অধ্যয়নটি পরবর্তীতে বিষণ্ণ ইঁদুরের জন্য একটি নতুন দৃষ্টিভঙ্গি প্রদান করে। CTE এর উন্নয়ন(Cistanche tubulosa নির্যাস)একটি সম্ভাব্য এন্টিডিপ্রেসেন্ট হিসাবে।

স্বীকৃতি

এই কাজটি চীনের ন্যাশনাল কী রিসার্চ অ্যান্ড ডেভেলপমেন্ট প্রোগ্রাম (2017YFC1702400) থেকে অনুদান দ্বারা সমর্থিত ছিল।

পরিশিষ্ট A. পরিপূরক তথ্য

এই নিবন্ধের পরিপূরক তথ্য HTTPS://doi.org/10.1016/j.jchromb.2019.121728 এ অনলাইনে পাওয়া যাবে

থেকে: ' ইন ভিট্রো এবং ইন ভিভো মেটাবলিজম এরCistanche tubulosa নির্যাসস্বাভাবিক এবং দীর্ঘস্থায়ী অপ্রত্যাশিত স্ট্রেস-প্ররোচিত বিষণ্ণ ইঁদুরের দ্বারাইয়াং লি, এট আল

--জার্নাল অফ ক্রোমাটোগ্রাফি বি 1125 (2019) 121728

তথ্যসূত্র

[১] চাইনিজ ফার্মাকোপিয়া কমিশন, দ্য ফার্মাকোপিয়া অফ দ্য পিপলস রিপাবলিক অফ চায়না, 2015 সংস্করণ, চায়না মেডিকেল সায়েন্স প্রেস, বেইজিং, চীন, 2015, পৃ. 135 খণ্ড I.
[২] ওয়াই জিয়াং, পি.-এফ. Tu, Cistanche প্রজাতির রাসায়নিক উপাদানের বিশ্লেষণ, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970-1979।
[৩] জেড. ফু, এক্স. ফ্যান, এক্স. ওয়াং, এক্স গাও, সিস্তানচেস হারবা: এর রসায়ন, ফার্মাকোলজি এবং ফার্মাকোকিনেটিক্স সম্পত্তির একটি সংক্ষিপ্ত বিবরণ, জে. ইথনোফার্মাকল। (2017), https://doi.org/10.1016/j.jep.2017.10.015।
[৪] Y. Li, Y. Peng, P. Ma, H. Yang, H. Xiong, M. Wang, C. Peng, P. Tu, X. Li, এন্টিডিপ্রেসেন্ট-সদৃশ প্রভাবCistanche tubulosa নির্যাসঅন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা হোমিওস্টেসিস, ফ্রন্ট পুনরুদ্ধারের মাধ্যমে দীর্ঘস্থায়ী অপ্রত্যাশিত স্ট্রেস ইঁদুরের উপর। ফার্মাকল। (2018), https://doi.org/10.3389/fphar.2018.00967।
[৫] জেএ ফস্টার, এমভি নিউফেল্ড, অন্ত্র-মস্তিষ্কের অক্ষ: কীভাবে মাইক্রোবায়োম উদ্বেগ এবং বিষণ্নতাকে প্রভাবিত করে, ট্রেন্ডস নিউরোসি। 36 (2013) 305–312।
[৬] ই. শেরউইন, টিজি দিনান, জেএফ ক্রিয়ান, মস্তিষ্কের স্বাস্থ্য এবং রোগে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার ভূমিকা বোঝার সাম্প্রতিক উন্নয়ন, অ্যান। NY Acad. বিজ্ঞান 12 (2017) e0177977।
[৭] ওয়াই. মেং, এইচ. জিয়া, জেড. চাও, ওয়াই. ইয়ং, জেড. ইয়াং, এম. ইয়াং, জেড. জু, 16এস আরআরএনএ জিন সিকোয়েন্সিং এবং এলসি/ দ্বারা বিষণ্নতার সাথে যুক্ত অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা এবং মল বিপাকীয় ফেনোটাইপের তারতম্য এমএস-ভিত্তিক বিপাকবিদ্যা, জে ফার্ম। বায়োমেড। পায়ুপথ। 138 (2017) 231–239।

[৮] জেআর কেলি, ওয়াই. বোরে, বিসি ও', ই. প্যাটারসন, এএস এল, জে. ডিন, পিজে কেনেডি, এস. বিয়ার্স, কে. স্কট, জি মোলোনি, ব্লুজ স্থানান্তর: বিষণ্নতা-সম্পর্কিত অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটা প্ররোচিত করে ইঁদুরের স্নায়ু আচরণগত পরিবর্তন, জে. সাইকিয়াট্রি। রেস.. 82 (2016) 109–118।
[৯] এল. ইয়াং, পি. ইং, এম. ওয়াং, পি. তু, এক্স. লি, ভিট্রোতে সিস্তানচেস হার্বা জলের নির্যাসের মানব গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল বিপাক: গ্যাস্ট্রিক রস, অন্ত্রের মধ্যে ব্যাপক বিপাক সনাক্তকরণের উপর ভিত্তি করে বিপাকীয় প্রোফাইলের ব্যাখ্যা রস, মানুষের অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়া, এবং অন্ত্রের মাইক্রোসোম, জে. এগ্রিক। খাদ্য রসায়ন। 65 (2017) 7447–7456।
[১০] Y. Li, G. Zhou, S. Xing, P. Tu, X. Li, আল্ট্রা-পারফরম্যান্স লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি/কোয়াড্রপোল টাইম-অফ-ফ্লাইট ভর স্পেকট্রোমেট্রি ব্যবহার করে মানুষের অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়া দ্বারা উত্পাদিত ইচিনাকোসাইড বিপাক সনাক্তকরণ, জে। কৃষি। খাদ্য রসায়ন। 63 (2015) 6764–6771।
[১১] Y. Li, G. Zhou, Y. Peng, P. Tu, X. Li, UPLC/Q-TOF-MS, J ব্যবহার করে মানুষের অন্ত্রের ব্যাকটেরিয়া দ্বারা সিস্তানচেস হার্বা থেকে তিনটি সাধারণ ফিনিলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড বিপাকের স্ক্রীনিং এবং সনাক্তকরণ। ফার্ম। বায়োমেড। পায়ুপথ। 118 (2016) 167–176।
[১২] এল. ইয়াং, পি. ইং, এম. ওয়াং, জি. ঝু, ওয়াই. ঝাং, এক্স. লি, UPLC- দ্বারা ইঁদুরের সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা এবং সি. টিউবুলোসা জলের নির্যাসের বিপাকের মধ্যে পার্থক্যের দ্রুত স্ক্রীনিং এবং সনাক্তকরণ Q-TOF-MS সম্মিলিত প্যাটার্ন স্বীকৃতি বিশ্লেষণ, J. ফার্ম। বায়োমেড। পায়ুপথ। 131 (2016) 364–372।
[১৩] C. Q, P. Y, B. X, Z. W, C. L, L. X, পদ্ধতিগতভাবে ইঁদুরের প্লাজমা, পিত্ত, প্রস্রাব এবং মলের মধ্যে সিস্টানচে টিউবুলোসা থেকে ইচিনাকোসাইড এবং অ্যাক্টিওসাইডের বিপাককে চিহ্নিত করে UPLC-ESI-Q-TOF-MS, বায়োমেড। ক্রোমাটোগ্র 30 (2016) 1406–1415।
[১৪] ওয়াং, এইচ. হাও, জি. ওয়াং, পি. তু, ওয়াই জিয়াং, ওয়াই লিয়াং, এল. দাই, এইচ. ইয়াং, এল. লাই, সি. ঝেং, এর অনুক্রমিক বিপাক সনাক্তকরণের একটি পদ্ধতি একটি সাধারণ ফেনাইলেথানয়েড গ্লাইকোসাইড, ইচিনাকোসাইড, তরল ক্রোমাটোগ্রাফি-আয়ন ফাঁদ-সময়ের উপর ভিত্তি করে
ফ্লাইট ভর স্পেকট্রোমেট্রি বিশ্লেষণ, ট্যালান্টা 80 (2009) 572–580।
[১৫] সি. জিয়া, এইচ. শি, ডব্লিউ. জিন, কে. ঝাং, ওয়াই জিয়াং, এম. ঝাও, পি. তু, ইচিনাকোসাইডের বিপাক, একটি ভালো অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, ইঁদুরের মধ্যে: বিলিরি মেটাবোলাইটগুলির বিচ্ছিন্নতা এবং সনাক্তকরণ, ড্রাগ মেটাব। ডিসপোজ 37 (2009) 431-438।
[১৬] জে. জু, এইচবি চেন, এসএল লি, ভেষজ ওষুধ এবং অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার মধ্যে আন্তঃক্রিয়ার আণবিক প্রক্রিয়া বোঝা, মেড। রেস রেভ. 37 (2017) 1140–1185।
[১৭] H. Liu, J. Yang, F. Du, X. Gao, X. Ma, Y. Huang, F. Xu, W. Niu, F. Wang, Y. Mao, মৌখিক পর জিনসেনোসাইডের শোষণ এবং স্বভাব ইঁদুরের জন্য প্যানাক্স নোটোজিনসেং নির্যাস প্রশাসন, ড্রাগ মেটাব। ডিসপোজ 37 (2009) 2290-2298।
[১৮] JM Laparra, Y. Sanz, S. Schaffer, F. Visioli, কার্যকরী খাদ্য উপাদান এবং নিউট্রাসিউটিক্যালস, ফার্মাকলের সাথে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার মিথস্ক্রিয়া। রেস 61 (2010) 219-225।
[১৯] H. Takeda, M. Tsuji, T. Yamada, J. Masuya, K. Matsushita, M. Tahara, M. Iimori, T. Matsumiya, Caffeic acid কর্টিকাল BDNF mRNA এক্সপ্রেশনের হ্রাসকে কমিয়ে দেয় বলপ্রয়োগের সংস্পর্শে আসার ফলে। ইঁদুরে সাঁতার কাটার চাপ, ইউর। জে ফার্মাকল। 534 (2006) 115-121।
[২০] এ. ঝেং, এল. হাও, সি. কে, এক্স. জি, জেড. জুয়ান, এল. ইউয়ান, সি. কং, জে. লিউ, জেড. ফেং, মাতৃত্বকালীন হাইড্রোক্সিটাইরোসল প্রশাসন প্রসবপূর্ব চাপে নিউরোজেনেসিস এবং জ্ঞানীয় কার্যকারিতা উন্নত করে সন্তানসন্ততি, জে. নিউটার। বায়োকেম। 26 (2015) 190-199।
[২১] H. Li, J. He, W. Jia, ওষুধের বিপাক এবং বিষাক্ততার উপর অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটার প্রভাব, বিশেষজ্ঞ মতামত। ড্রাগ মেটাব। টক্সিকল। 12 (2016) 31.
[২২] কেএ এল, এফ. আরমুগম, জেআই গর্ডন, ডি. রাউল্ট, বি. হেনরিসাট, মানুষের অন্ত্রের মাইক্রোবায়োটাতে কার্বোহাইড্রেট-সক্রিয় এনজাইমের প্রাচুর্য এবং বৈচিত্র্য, ন্যাট। রেভ. মাইক্রোবায়োল। 11 (2013) 497-504।