ভিটেক্স লিউকোক্সিলনের জলীয় পাতার নির্যাস থেকে সংশ্লেষিত আয়রন ন্যানো পার্টিকেলগুলির সবুজ সংশ্লেষণ এবং বৈশিষ্ট্য এবং এর বায়োমেডিকাল প্রয়োগ

বিমূর্ত:এর জলীয় নির্যাস পেতে ঠান্ডা নিষ্কাশন পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিলভিটেক্স লিউকোক্সিলন1:10 অনুপাতে পাতা. আয়রন ন্যানো পার্টিকেল (FeNPs) জলীয় পাতার নির্যাস ব্যবহার করে সংশ্লেষিত হয়েছিলV. লিউকোক্সিলনএকটি হ্রাসকারী এজেন্ট হিসাবে। ফাইটোমেডিসিন পদ্ধতিটি 1 মিলি গাছের নির্যাসের সাথে 1 মিলিমিটার ফেরিক সালফেট মিশিয়ে FeNP তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি (SEM), ফুরিয়ার-ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি (FTIR), আল্ট্রাভায়োলেট-দৃশ্যমান স্পেকট্রোস্কোপি (UV-Vis), এবং শক্তি-বিচ্ছুরণকারী এক্স-রে স্পেকট্রোস্কোপি সংশ্লেষিত FeNPs পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। হ্রাসকারী প্রতিক্রিয়াটি সমাধানের রঙের পরিবর্তন দ্বারা প্রদর্শিত হয়েছিল এবং কালো রঙের গঠন নিশ্চিত করে যে FeNPs গঠিত হয়েছে। UV-Vis বর্ণালী বিশ্লেষণে সর্বশ্রেষ্ঠ শোষণের শিখর (সর্বোচ্চ) 395 এনএম পাওয়া গেছে। এর FTIR বর্ণালীV. লিউকোক্সিলনজলীয় পাতার নির্যাস কিছু শিখরে পরিবর্তন দেখায়, যথা 923.96 সেমি−1 এবং 1709.89 সেমি−1, কার্বক্সিলিক অ্যাসিড, অসম্পৃক্ত অ্যালডিহাইড, এবং কিটোনগুলির সাথে কার্যকরী গ্রুপ, যেগুলি FeNPs-এর FTIR বর্ণালীতে অভাব ছিল এবং FeNPs গঠনের জন্য দায়ী। 45 এবং 100 এনএম এর মধ্যে ব্যাস সহ ফেএনপিগুলি এসইএম চিত্রগুলিতে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। FeNPs তৈরির বিষয়টি EDX দ্বারা নিশ্চিত করা হয়েছে, যা 6-8 Kev এ ধাতব লোহা অঞ্চলে একটি শক্তিশালী সংকেত দেখায়। XRD একটি স্ফটিক প্রকৃতি এবং 136.43 nm গড় ব্যাস প্রকাশ করেছে।অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট,প্রদাহ বিরোধী, সাইটোটক্সিক, এবংক্ষত নিরাময়ইন ভিট্রো পরীক্ষাগুলি FeNP-এর উল্লেখযোগ্য কার্যকলাপের রিপোর্ট করেছে। বর্তমান অধ্যয়নের ক্রমবর্ধমান ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে ফেএনপিগুলির সবুজ সংশ্লেষণএর জৈবিক কার্যকলাপ বৃদ্ধি করেএবং হিসাবে পরিবেশন করতে পারেএকটি সম্ভাব্য ডার্মাল ক্ষত-নিরাময় এজেন্টএবংক্যান্সারের বিরুদ্ধে সাইটোটক্সিক এজেন্ট. FeNPs এর সংশ্লেষণের সাথে জড়িত প্রক্রিয়াগুলির সনাক্তকরণের উপর ভবিষ্যতের অধ্যয়নের প্রয়োজনV. লিউকোক্সিলনএবং এর বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশন।

কীওয়ার্ড:ভিটেক্স লিউকোক্সিলন; আয়রন ন্যানো পার্টিকেল; SEM; ক্ষত নিরাময়; সাইটোটক্সিক

CISTANCHE জন্য সুবিধাঅ্যান্টিঅক্সিডেন্ট,বিরোধী প্রদাহ, সাইটোটক্সিক, এবংক্ষত নিরাময়

1। পরিচিতি

ন্যানোস্কেল স্তরে নতুন উপকরণ তৈরির জন্য বিজ্ঞান ও প্রযুক্তিতে ন্যানো প্রযুক্তির প্রয়োগ একটি দ্রুত বর্ধনশীল ক্ষেত্র [1]। ন্যানোটেকনোলজি স্বতন্ত্র বৈশিষ্ট্য অর্জনের জন্য পারমাণবিক স্তরে উত্পাদন সামগ্রী নিয়ে কাজ করে, যা পছন্দের অ্যাপ্লিকেশনের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। এই ক্ষেত্রটি ন্যানোস্কেল স্তরে নতুন উপকরণ তৈরি করতে বিজ্ঞান ও প্রযুক্তিতে এর প্রয়োগের সাথে দ্রুত বৃদ্ধি পাচ্ছে [২]। ইলেকট্রনিক স্টোরেজ সিস্টেম [৩], জৈবপ্রযুক্তি [৪], চৌম্বক বিচ্ছেদ এবং লক্ষ্য বিশ্লেষকদের প্রাক কেন্দ্রীকরণ, লক্ষ্যযুক্ত ওষুধ সরবরাহ [৫] এবং জিন ও ওষুধের যানবাহনের ক্ষেত্রে বিভিন্ন শিল্প খাত সাম্প্রতিক বছরগুলিতে ন্যানো প্রযুক্তিকে গ্রহণ করেছে। ডেলিভারি [৩,৫,৬]। ফলস্বরূপ, এই কণাগুলির প্রয়োগের বিস্তৃত পরিসরের ফলে সমাজে যথেষ্ট প্রভাব ফেলার সম্ভাবনা রয়েছে যার জন্য তারা ব্যবহার করা যেতে পারে। ন্যানো পার্টিকেলস (NPs) হল কণার ভর যাদের আকার একশত ন্যানোমিটারেরও কম এবং ন্যানো প্রযুক্তির ক্ষেত্রে মূল কাঠামোগত ভর হিসাবে বিবেচিত হয়। NPs-এর উচ্চ ক্রিয়াকলাপ উভয়ই তাদের সংজ্ঞায়িত বৈশিষ্ট্য এবং গুণমান যার জন্য তারা সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য [7]। জৈব এবং অজৈব এনপি দুটি প্রাথমিক শ্রেণিবিন্যাস যা ন্যানো পার্টিকেলগুলিতে প্রয়োগ করা যেতে পারে। অজৈব ন্যানো পার্টিকেলগুলির মধ্যে চৌম্বকীয় NPs, মহৎ ধাতু NPs (যেমন সোনা এবং রূপা), এবং সেমিকন্ডাক্টর NPs (যেমন টাইটানিয়াম ডাই অক্সাইড এবং জিঙ্ক অক্সাইড) অন্তর্ভুক্ত থাকতে পারে। জৈব ন্যানো পার্টিকেলগুলিতে কার্বন এনপি অন্তর্ভুক্ত থাকতে পারে। অজৈব ন্যানো পার্টিকেলগুলি বিশাল মনোযোগ আকর্ষণ করছে কারণ তারা কার্যকরী বহুমুখিতা সহ উচ্চতর উপাদান বৈশিষ্ট্যগুলি অফার করে। তারা যে আকারের বৈশিষ্ট্যগুলি ধারণ করেছে তার কারণে তাদের চিকিৎসা ইমেজিংয়ের পাশাপাশি রোগের চিকিত্সার জন্য সম্ভাব্য সরঞ্জাম হিসাবে তদন্ত করা হয়েছে [8]। NPs-এর বিভিন্ন রাসায়নিক, ভৌত এবং জৈবিক বৈশিষ্ট্যগুলি ন্যানো পার্টিকেল আকার এবং অঙ্গসংস্থানবিদ্যা, সেইসাথে পৃষ্ঠের আবরণ সহ বিভিন্ন পরামিতি দ্বারা ব্যাপকভাবে প্রভাবিত হয়, যা সাধারণত ন্যানো পার্টিকেলগুলির সংশ্লেষণের সময় নির্ধারিত হয়। কোলয়েডাল স্থিতিশীলতা হ্রাসের কারণে উদ্দিষ্ট জৈবিক কার্যকলাপের ক্ষতি হয়। pH, আয়নিক শক্তি এবং প্রাসঙ্গিক পরিস্থিতিতে AgNP-এর সাথে মিথস্ক্রিয়া করে এমন অনেক প্রোটিন সবই কলোয়েড স্থায়িত্বের উপর প্রভাব ফেলে। ফলস্বরূপ, সঠিক সংশ্লেষণ কৌশল নির্বাচন নির্দিষ্ট অ্যাপ্লিকেশনের জন্য পছন্দসই কণা বৈশিষ্ট্যগুলি পাওয়ার জন্য গুরুত্বপূর্ণ [9]।

বর্তমানে, বিভিন্ন ধরণের NPs রয়েছে যা বিভিন্ন ধরণের ভৌত, রাসায়নিক, জৈবিক এবং হাইব্রিড প্রক্রিয়া ব্যবহার করে সংশ্লেষিত হতে পারে। বিপুল সংখ্যক গবেষণা অধ্যয়নের ফলাফল অনুসারে, ন্যানো পার্টিকেল তৈরির জন্য ভৌত এবং রাসায়নিক প্রক্রিয়াগুলির মধ্যে জৈব দ্রাবক, বিপজ্জনক যৌগ, উল্লেখযোগ্য পরিমাণে শক্তি এবং স্থিতিশীল এজেন্টগুলির ব্যবহার অন্তর্ভুক্ত যা জৈব-বিক্ষয়যোগ্য নয় [১০]। তাই, সবুজ ন্যানো প্রযুক্তির ক্ষেত্রে, প্রাকৃতিকভাবে উপলব্ধ উপাদান যেমন উদ্ভিদের নির্যাস, বিভিন্ন অণুজীব, তাদের বিপাক এবং কিছু প্রাকৃতিক হিউমিক পদার্থ [১১,১২] হ্রাসকারী এবং ক্যাপিং এজেন্ট হিসেবে ব্যবহার করে NP-এর সংশ্লেষণ ক্রমশ জনপ্রিয় হয়ে উঠছে। পরিবেশের জন্য বন্ধুত্বপূর্ণ সংশ্লেষণ পদ্ধতিগুলি রূপা, সোনা, লোহা, তামা এবং দস্তা সহ বিভিন্ন ধরণের ধাতব ন্যানো পার্টিকেল তৈরি করতে ব্যবহৃত হয়েছে। NPs-এর সংশ্লেষণের জন্য সহজ এবং পরিবেশগতভাবে গ্রহণযোগ্য পদ্ধতির বিকাশ ন্যানো প্রযুক্তির অন্যতম প্রধান লক্ষ্য। অণুজীব এবং উদ্ভিদের নির্যাসের মতো জৈব উপাদানগুলি বিভিন্ন ধরণের NPs [13,14] প্রস্তুত করার প্রক্রিয়ায় ব্যবহার করা যেতে পারে। যাইহোক, যেহেতু কিছু জীব প্যাথোজেন, তাই তাদের পরিচালনা করা বিপজ্জনক। উন্নতির জন্য, অণুজীবগুলিকে সংস্কৃতিতে রক্ষণাবেক্ষণ করতে হবে এবং তাপমাত্রা, pH এবং অন্যান্য পরামিতি সহ সাবধানে নিয়ন্ত্রিত অবস্থার অধীনে থাকতে হবে। যেহেতু এটি জীবাণু সংস্কৃতি বজায় রাখার শ্রমসাধ্য প্রক্রিয়াকে নির্মূল করে, উদ্ভিদের অংশগুলি ব্যবহার করে NPs এর সংশ্লেষণ কখনও কখনও অন্যান্য জৈবিক প্রক্রিয়াগুলির তুলনায় আরও সুবিধাজনক প্রমাণিত হতে পারে [15]। ফলস্বরূপ, এটি প্রাকৃতিক সম্পদের ব্যবহার, দ্রুততা, পরিবেশ-বান্ধবতা এবং সৌম্যতা অন্তর্ভুক্ত করে এর অন্তর্নিহিত বৈশিষ্ট্যগুলির কারণে অনেক মনোযোগ অর্জন করেছে। এই লোভনীয় বৈশিষ্ট্যগুলি চিকিৎসা অ্যাপ্লিকেশনগুলিতে ব্যবহারের জন্য একেবারে প্রয়োজনীয়। সবুজ সংশ্লেষণ দ্বারা উত্পাদিত ন্যানো পার্টিকেলগুলির একটি আকার রয়েছে যা ভালভাবে সংজ্ঞায়িত এবং নিয়ন্ত্রণে রয়েছে, তারা দূষণমুক্ত, এবং পদ্ধতিটি স্কেল করা সহজ। এগুলি সবুজ সংশ্লেষণের কিছু অতিরিক্ত সুবিধা [16]। সংশ্লেষিত ন্যানো পার্টিকেলগুলির জৈবিক ক্রিয়াকলাপ মূলত ধাতব আয়নগুলির স্থায়িত্ব এবং হ্রাসের জন্য ব্যবহৃত সবুজ উপাদানগুলির দ্বারা নির্ধারিত এবং সূক্ষ্ম সুর করা হয়। এনপিগুলির একটি আদর্শ বৈশিষ্ট্য হওয়া উচিত যে সম্ভাব্য লক্ষ্য (প্যাথোজেন) এবং স্তন্যপায়ী (হোস্ট) কোষগুলির মধ্যে বৈষম্য করার জন্য এটির একটি অসামান্য ক্ষমতা থাকতে হবে [17]।

এই কারণে, বর্তমান গবেষণায় V. leucoxylon পাতার জলীয় নির্যাস লোহা ন্যানো পার্টিকেল (FeNPs) গঠনের সুবিধার্থে তার সম্ভাব্যতার জন্য তদন্ত করা হয়েছিল। লোহা এমন একটি উপাদান যা পৃথিবীতে সর্বাধিক প্রাচুর্যে পাওয়া যায়। সম্প্রতি, এটি উচ্চ জবরদস্তি এবং সুপারপ্যারাম্যাগনেটিজম সহ বিভিন্ন অনন্য বৈশিষ্ট্যের অধিকারী হওয়ার কারণে এটি গুরুত্বপূর্ণ এনপিগুলির একটি নতুন শ্রেণী হিসাবে স্বীকৃত হয়েছে৷ ক্যাটালি সিস, ইলেকট্রনিক ডিভাইস, তথ্য স্টোরেজ, সেন্সর, ড্রাগ-ডেলিভারি টেকনোলজি, বায়োমেডিসিন, ম্যাগনেটিক রেকর্ডিং ডিভাইস, এবং এনভায়রনমেন্টাল ক্লিনআপ হল কিছু কৌতুহলপূর্ণ অ্যাপ্লিকেশন যা FeNPs ব্যবহার করেছে [18]। অধিকন্তু, বেশ কয়েকটি গবেষণা অনুসারে, বিভিন্ন উদ্ভিদের নির্যাস থেকে FeNP তৈরি করা যেতে পারে। এই উদ্ভিদের নির্যাসের মধ্যে রয়েছে ইউক্যালিপটাস গ্লোবুলাস পাতা [১৯], ডালিমের পাতা [২০] এবং কলার খোসার ছাই [২১]। V. leucoxylon উদ্ভিদ, যা বর্তমান গবেষণায় ব্যবহৃত হয়েছিল, এটি Verbenaceae পরিবারের সদস্য। এটি পাঁচ-পাতাযুক্ত শুদ্ধ গাছ (কন্নড়: সেনজেনি, হোলেনেক্কি, হোল্লালাক্কি) নামেও পরিচিত এবং নদী তীর বরাবর চিরসবুজ এবং আধা-চিরসবুজ বন এবং স্রোত বরাবর আর্দ্র পর্ণমোচী বনে এই অঞ্চলে পাওয়া যায়। এটি 20 মিটার পর্যন্ত উচ্চতায় পৌঁছাতে পারে এবং এটি একটি বিনয়ী থেকে বড় পর্ণমোচী গাছ হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়। ভারতের পশ্চিমঘাট বনের দৈর্ঘ্য বরাবর, এটি প্রচুর পরিমাণে পাওয়া যায়। V. লিউকোক্সিলন পাতার নির্যাস আধানে বিভিন্ন ধরনের ফার্মাকোলজিক্যাল ক্রিয়াকলাপ যেমন- প্রদাহবিরোধী, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টিসাইকোটিক, অ্যান্টিডিপ্রেসেন্ট, অ্যান্টিপার্কিনসোনিয়ান এবং অ্যান্টিহাইপারলিপিডেমিক ক্রিয়াকলাপ রয়েছে বলে জানা গেছে [২২]। প্রাকৃতিক পণ্যগুলি, ইতিহাস জুড়ে এবং বিশেষ করে লোক ওষুধে, বিভিন্ন ধরণের অসুস্থতা এবং অসুস্থতার চিকিত্সার জন্য ব্যবহার করা হয়েছে। এই প্রথা প্রাচীনকাল থেকে চলে আসছে। প্রাকৃতিক পণ্য রসায়নের পদ্ধতিগুলি যা দীর্ঘকাল ধরে চলে আসছে তা স্থলজ এবং সামুদ্রিক উত্স থেকে আসা বিপুল বৈচিত্র্যের জৈব-অ্যাকটিভ সেকেন্ডারি বিপাক খুঁজে পাওয়া সম্ভব করেছে। এই প্রাকৃতিকভাবে ঘটে যাওয়া পদার্থগুলির একটি উল্লেখযোগ্য সংখ্যক এখন সম্ভাব্য ওষুধ হিসাবে ব্যবহারের জন্য বিবেচনা করা হচ্ছে [23]।

প্রচুর পরিমাণে প্রাকৃতিকভাবে উদ্ভূত রাসায়নিক এবং পুষ্টি উপাদান রয়েছে যা এখনও উন্মোচিত হয়নি যা মানবতার জন্য দরকারী। এর ফলস্বরূপ, উদ্ভাবনী থেরাপিউটিক বিকল্পগুলির গবেষণা এবং বিকাশের জন্য তাত্ক্ষণিক চাহিদা রয়েছে যা ন্যূনতম পরিমাণ প্রতিকূল প্রভাব তৈরি করার সময় থেরাপিউটিক হস্তক্ষেপে সফলভাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

FeNP-এর জন্য বর্তমানে প্রস্তাবিত সবুজ সংশ্লেষণ প্রক্রিয়াটি স্বতন্ত্র এবং সাশ্রয়ী। বর্তমান গবেষণায়, কোনো রাসায়নিক বা শারীরিক কৌশল ব্যবহার ছাড়াই ঘরের তাপমাত্রায় ন্যানো পার্টিকেল তৈরি করার চেষ্টা করা হয়েছিল। Vitex leucoxylon প্ল্যান্টটি লোহা ন্যানো পার্টিকেল সংশ্লেষিত করার প্রয়াসে বেছে নেওয়া হয়েছিল এবং আয়রন ন্যানো পার্টিকেলগুলির ক্ষমতা মূল্যায়নের জন্য ব্যাপক পদ্ধতিগত ইন ভিট্রো মডেলগুলি চালানো হয়েছিল। এই প্ল্যান্টে ন্যানো পার্টিকেল এবং তাদের বায়োমেডিকাল অ্যাপ্লিকেশনগুলির ধারণার উপর শুধুমাত্র সীমিত সংখ্যক গবেষণা গবেষণা প্রকাশিত হয়েছে। ফলস্বরূপ, আমরা সিদ্ধান্ত নিয়েছি যে নিম্নলিখিত লক্ষ্যগুলি মাথায় রেখে এই গবেষণাটি করা উপকারী হবে: ফাইটোকেমিক্যালগুলির জন্য স্ক্রীনিং এবং V. লিউকোক্সিলনে সেকেন্ডারি মেটাবোলাইটের সংখ্যা পরিমাপ করা; সবুজ সংশ্লেষণ এবং V. leucoxylon থেকে FeNPs বৈশিষ্ট্য; ভিট্রো লিউকোক্সিলন এবং এর ফেএনপি-এর অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি প্রভাবগুলির তুলনামূলক অধ্যয়ন; ত্বকের ক্যান্সার, ফুসফুসের ক্যান্সার এবং ওরাল ক্যান্সারের বিরুদ্ধে ভি লিউকোক্সিলন এবং এর FeNP-এর জলীয় পাতার নির্যাসের ভিট্রো সাইটোটক্সিক কার্যকলাপ; ভিট্রো ক্ষত নিরাময় কার্যকলাপ ভি. লিউকোক্সিলনের জলীয় পাতার নির্যাস এবং এর সিন্থেটিক FeNPs স্ক্র্যাচ অ্যাস দ্বারা।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। উদ্ভিদ উপাদান সংগ্রহ

2022 সালের মার্চ মাসে, ভারতের কর্ণাটক রাজ্যের উত্তর কন্নড় জেলার পশ্চিমঘাটের আনশি বনাঞ্চল থেকে ভি লিউকোক্সিলনের তাজা পাতা তোলা হয়েছিল। পাতাগুলি শনাক্ত করা হয়েছে এবং ড. কোত্রেশা কে., ট্যাক্সোনমিস্ট, বোটানি বিভাগ, কর্ণাটক সায়েন্স কলেজ, ধারওয়াড় দ্বারা প্রমাণিত হয়েছে; কর্ণাটক, কর্ণাটক, কর্ণাটক বিজ্ঞান কলেজ, ধারওয়াদ, বোটানি বিভাগে জমা করা ভাউচারের নমুনা উল্লেখ করে। সংগ্রহ করার পরে, গাছের পাতার তাজা উপাদানটি চলমান কলের জলে ধুয়ে, রোদে শুকানো হয় এবং তারপরে একটি যান্ত্রিক গ্রাইন্ডার ব্যবহার করে মোটা পাউডার তৈরি করা হয়। পাউডারটি কক্ষের তাপমাত্রায় সিল করা পাত্রে রাখা হয়েছিল যাতে এটি পরবর্তীতে অপরিশোধিত দ্রাবক নিষ্কাশন প্রক্রিয়ায় ব্যবহার করা যেতে পারে।

2.2। উদ্ভিদ নির্যাস প্রস্তুতি

একটি Soxhlet ডিভাইস ব্যবহার করে, 250 মিলি পাতিত জল দিয়ে 25 গ্রাম গুঁড়ো পাতা 48 ঘন্টার জন্য বের করা হয়েছিল। রোটো-ইভাপোরেটর ব্যবহার করে জলীয় নির্যাসকে আরও ঘনীভূত করা হয়েছিল এবং ব্যবহার না হওয়া পর্যন্ত 4 ◦C তাপমাত্রায় একটি আবদ্ধ বোতলে রাখার আগে ডেসিকেটরগুলিতে শুকানো হয়েছিল। FeNPs এর সংশ্লেষণের জন্য, জলীয় নির্যাস একটি হ্রাসকারী এবং স্থিতিশীল এজেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.3। দ্রাবক এবং বিকারক

নিযুক্ত সমস্ত রাসায়নিক এবং দ্রাবক বিশ্লেষণাত্মক মানের ছিল এবং হাই-মিডিয়া (হুবলি, ভারত) থেকে কেনা হয়েছিল।

2.4। ফাইটোকেমিক্যাল বিশ্লেষণ

দীপ্তি এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসরণ করে। (2012), অপরিশোধিত জলীয় পাতার নির্যাস V. leucoxylon গুণগতভাবে বিভিন্ন ফাইটোকেমিক্যাল উপাদান যেমন ফ্ল্যাভোনয়েড, অ্যালকালয়েড, ফেনল, গ্লাইকোসাইড, স্টেরল, লিগনিন, স্যাপোনিন, অ্যানথ্রাকুইনোনস, ট্যানিনস এবং শর্করার উপস্থিতির জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল।

2.5। আয়রন ন্যানো পার্টিকেল এর সংশ্লেষণ

প্রথমে, 0.05 মিমি FeSO4 জলীয় দ্রবণে 10 মিলিলিটার ভি লিউকোক্সিলন জলীয় পাতার নির্যাস যোগ করা হয়েছিল, এবং মিশ্রণটি ঝাঁকানো হয়েছিল। কক্ষ তাপমাত্রায় এবং একটি অন্ধকার পরিবেশে, সম্পূর্ণ প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রক্রিয়া বাহিত হয়। বর্ণহীন প্রতিক্রিয়ার মিশ্রণটি প্রয়োজনীয় পরিমাণের জন্য ইনকিউব করা এবং প্রতিক্রিয়া করার পরে জারণ/হ্রাস প্রতিক্রিয়া স্পষ্টভাবে দৃশ্যমান ছিল [25]। সদ্য সংশ্লেষিত FeNPs থেকে জলীয় নির্যাসের কোনো চিহ্ন অপসারণ করার জন্য, যেটিকে 10,{7}} rpm-এ সেন্ট্রিফিউগেশনের পর পাউডারে শুকানোর অনুমতি দেওয়া হয়েছিল, কাঙ্ক্ষিত প্রতিক্রিয়া সময়কালে দশ 10 মিনিটের জন্য, FeNPs ধারণকারী জলীয় মিশ্রণকে সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। দ্বিতীয়বার এবং ডাবল পাতিত জলে পুনরায় ছড়িয়ে দেওয়া এবং শুকানো [26]।

2.6। FeNP-এর বৈশিষ্ট্য

বেশ কিছু পদ্ধতি, যেমন আল্ট্রাভায়োলেট-দৃশ্যমান স্পেকট্রোস্কোপি (UV-Vis), ফুরিয়ার-ট্রান্সফর্ম ইনফ্রারেড স্পেকট্রোস্কোপি (FTIR), স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি, এবং শক্তি বিচ্ছুরণকারী এক্স-রে স্পেকট্রোস্কোপি, এক্স-রে ডিফ্রাকশন (XRD), কণার আকার বিশ্লেষক, এবং জেটা সম্ভাব্য, FeNP-গুলিকে চিহ্নিত করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.6.1। UV-দৃশ্যমান-স্পেকট্রোস্কোপি-ভিত্তিক বিশ্লেষণ

প্রথমে, কোয়ার্টজ কিউভেটে কলয়েডাল FeNPs দ্রবণের 1 mL অ্যালিকোট UV-দৃশ্যমান স্পেকট্রোস্কোপি (U-3310, Hitachi, Tokyo, Japan), একটি রেফারেন্স হিসাবে পাতিত জল ব্যবহার করে এবং 0.05 mM FeSO4 ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল একটি ফাঁকা হিসাবে, কলয়েডাল দ্রবণে ফেরিক আয়নগুলির হ্রাসকে বৈধ করতে [27]।

2.6.2। FTIR-ভিত্তিক বিশ্লেষণ

যে ফাংশন গোষ্ঠীগুলি (গোষ্ঠীগুলি) লোহার পৃষ্ঠে আবদ্ধ ছিল এবং FeNPs এর সংশ্লেষণে জড়িত ছিল তাদের FTIR স্পেকট্রোস্কোপি (S700, Nicolet, MA, USA), [28] ব্যবহার করে চিহ্নিত করা হয়েছিল। 72 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে, FeNPগুলিকে 15 মিনিটের জন্য 10,000 rpm-এ বারবার সেন্ট্রিফিউগেশন (3-4 বার) বিক্রিয়া মিশ্রণের মাধ্যমে বিচ্ছিন্ন করা হয়েছিল। সুপারনাট্যান্টকে ডিওনাইজড জল দ্বারা প্রতিস্থাপিত করা হয়েছিল এবং পেলেটটি পাউডার হিসাবে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। শুকানোর পরে, 1:100 অনুপাতে পটাসিয়াম ব্রোমাইড পেলিটিং প্রক্রিয়া ব্যবহার করে এফটিআইআর বিশ্লেষণের মাধ্যমে ফেএনপিগুলি স্থাপন করা হয়েছিল।

2.6.3। স্ক্যানিং-ইলেক্ট্রন-মাইক্রোস্কোপি-ভিত্তিক বিশ্লেষণ

স্ক্যানিং ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপি (JSM-IT 500, Jeol, Boston, MA, USA), ন্যানো পার্টিকেলগুলি পরীক্ষা করতে এবং তাদের পৃষ্ঠের আকৃতি স্থাপন করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। সাবস্ট্রেটগুলি 100 মিমি ব্যাসের ওয়েফার থেকে ক্লিভ করা একটি পরিষ্কার 5 মিমি × 5 মিমি সি সাবস্ট্রেটের উপর প্রস্তুত করা হয়েছিল। সাবস্ট্রেটটিকে 2 ঘন্টা থেকে 6 ঘন্টার জন্য প্রতিক্রিয়া করার অনুমতি দেওয়া হয়েছিল এবং নমুনাটি 5 মিনিটের জন্য 10,000 rpm-এ একটি কলয়েডাল দ্রবণকে কেন্দ্রীভূত করে প্রস্তুত করা হয়েছিল। বহুবার রিসেন্টরিফিউজ করার পরে পেলেটটি শুকানো হয়েছিল, তারপরে এটি ডিওনাইজড জলে পুনরায় ছড়িয়ে দেওয়া হয়েছিল এবং পদ্ধতিটি পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল। অবশেষে, শুষ্ক পেলেট প্রাপ্ত করা হয়েছিল, যা ন্যাশনাল ইনস্টিটিউট অফ স্ট্যান্ডার্ডস অ্যান্ড টেকনোলজি, এনআইএসটি-2007 [২৯] দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে এসইএম বিশ্লেষণের দ্বারা আরও কাঠামোগত বৈশিষ্ট্যের বিষয় ছিল।

2.6.4। এনার্জি ডিসপারসিভ এক্স-রে

কার্বন-কোটেড কপার গ্রিডে শুকানোর পরে, হ্রাসকৃত FeNPগুলি EDX (JSM-IT 500, Jeol, Boston, MA, USA) ব্যবহার করে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল, যা মৌলিক রচনার অবস্থান নির্ধারণের অনুমতি দেয়।

2.6.5। জেটা পটেনশিয়াল

NPs-এর পর্যবেক্ষণ কলয়েডাল NPs-এর স্থায়িত্বের উপর অতিরিক্ত অন্তর্দৃষ্টি অর্জনের জন্য জেটা সম্ভাবনা হল একটি দরকারী টুল। জেটা সম্ভাবনার প্রশস্ততা কলয়েডের সম্ভাব্য স্থায়িত্ব হিসাবে একটি ইঙ্গিত প্রদান করে। মেলেন্দ্রেজ এট আল অনুসারে। (2010), কণাগুলিকে স্থিতিশীল হিসাবে বিবেচনা করা হয় যদি তাদের জিটা সম্ভাব্য মান হয় প্লাস 30 mV এর চেয়ে বেশি ধনাত্মক হয় বা 30 mV [30] এর চেয়ে বেশি ঋণাত্মক হয়। এই সত্য বিবেচনা করা উচিত. লেজার জেটা মিটার ব্যবহার করা হয়েছিল ভূপৃষ্ঠের জেটা সম্ভাবনার রিডিং অর্জনের জন্য (Malvern zeta seizer 2000, Malvern, UK)। ন্যানো পার্টিকেলগুলির তরল নমুনা, মোট 5 মিলিলিটার, 50 মিলিলিটার ডাবল-পাসিত জল দিয়ে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং স্থগিত ইলেক্ট্রোলাইট দ্রবণ হিসাবে সোডিয়াম ক্লোরাইড প্রতি বর্গমিটারে 2 মিমি ব্যবহার করা হয়েছিল। এর পরে, pH পরিবর্তন করা হয়েছিল যতক্ষণ না এটি পছন্দসই স্তরে পৌঁছায়। নমুনাগুলি মোট 30 মিনিটের জন্য উত্তেজিত হয়েছিল। ধারকটি ঝাঁকানোর পরে, ভারসাম্যের pH লক্ষ করা হয়েছিল এবং ধাতব কণাগুলির জেটা সম্ভাব্যতা নির্ধারণ করা হয়েছিল। FeNPs এর পৃষ্ঠ সম্ভাবনা নির্ধারণের উদ্দেশ্যে, জেটা সম্ভাব্যতা ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রতিটি উদাহরণে, বিবৃত মানটি তিনটি পৃথক পরিমাপের ফলাফলের গড় ছিল। যখন জেটা সম্ভাব্যতার মান প্লাস 30 mV এর চেয়ে বেশি থেকে 30 mV-এর চেয়ে কম, NPs এর স্থায়িত্বের মানদণ্ড নির্ধারণ করা হয়েছিল [31]।

2.6.6। কণা আকার বিশ্লেষক

নমুনার কণার আকার নির্ধারণ করার জন্য, এটি লাইওফিলাইজড হওয়ার পরে এবং তারপরে একটি আল্ট্রাসোনিকেটর (SZ-100, Horiba, Kyoto, Japan) ব্যবহার করে ছড়িয়ে দেওয়ার পরে PSA পরীক্ষা করা হয়েছিল।

2.6.7। এক্স-রে ডিফ্রাকশন অ্যানালাইসিস (XRD) বিশ্লেষণ

V. leucoxylon এর জলীয় পাতার নির্যাস থেকে সংশ্লেষিত লোহা ন্যানো পার্টিকেলগুলিকে XRD বিশ্লেষণ (স্মার্ট ল্যাব এসই, রিগাকু, টোকিও, জাপান) করা হয়েছিল প্রকৃতির পাশাপাশি ন্যানো পার্টিকেলের গড় আকার নির্ধারণের জন্য।

2.7। ইন ভিট্রো পদ্ধতি ব্যবহার করে অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ নির্ধারণ

2.7.1। ফেরিক-আয়ন-হ্রাসকারী অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পাওয়ার অ্যাস (FRAP)

ওয়াইজু (1986) অনুসারে, একটি ছোট পরিবর্তনের সাথে, ফেরিক আয়নগুলির হ্রাসকারী শক্তি মূল্যায়ন করা হয়েছিল [32]। 30 মিনিটের জন্য 50 ◦C, 2.5 mL 20 mM ফসফেট বাফার এবং 2.5 mL 1 শতাংশ পটাসিয়াম ফেরিসিয়ানাইড যোগ করা হয়েছিল 2.5 mL V. leucoxylon পাতার নির্যাস এবং এর সাথে সংশ্লেষিত FeNPs মিশ্রণ. ইনকিউবেশন পিরিয়ডের পরে, অতিরিক্ত 10 মিনিটের জন্য ইনকিউবেশন করার আগে মিশ্রণটি 2.5 মিলি 10 শতাংশ ডব্লিউ/ভি ট্রাইক্লোরোএসেটিক অ্যাসিড এবং 0.5 মিলি 0.1 শতাংশ ফেরিক ক্লোরাইডের সাথে সম্পূরক ছিল। অবশেষে, একটি UV-V স্পেকট্রোফোটোমিটার 700 এনএম এ শোষণ সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। একটি মান হিসাবে, অ্যাসকরবিক অ্যাসিড ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনা তিনবার পরীক্ষা করা হয়েছিল।

2.7.2। হাইড্রোজেন পারক্সাইড স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাস

V. leucoxylon জলীয় পাতার নির্যাস এবং এর কৃত্রিম FeNPs হাইড্রোজেন পারক্সাইড অপসারণের ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে, এই যৌগগুলির অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ মূল্যায়ন করা হয়েছিল। প্রথমে, {{0}}.6 মিলি ফসফেট বাফার (pH—7.4) যার মধ্যে 4 mM H2O2 রয়েছে একটি পরিচিত ঘনত্বে 0.5 mL স্ট্যান্ডার্ড অ্যাসকরবিক অ্যাসিড যোগ করা হয়েছিল, সেইসাথে বিভিন্ন ঘনত্বে উদ্ভিদের নির্যাস ধারণকারী টিউবগুলি 100 µL থেকে 500 µL (pH—7.4) পর্যন্ত। একটি ফসফেট বাফার এবং হাইড্রোজেন-পেরক্সাইড-মুক্ত ফাঁকা দ্রবণ ব্যবহার করে, আমরা 10 মিনিটের পরে 230 এনএম এ দ্রবণটির শোষণের মূল্যায়ন করেছি। নমুনা বা স্ট্যান্ডার্ডের পরিবর্তে নিয়ন্ত্রণ তৈরি করতে ফসফেট বাফার ব্যবহার করা হয়েছিল [33]। প্রতিটি নমুনা তিনবার পরীক্ষা করা হয়েছিল। নিষেধাজ্ঞা শতাংশ গণনা করতে সূত্র পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়েছিল।

2.7.3। DPPH ফ্রি-র্যাডিক্যাল-স্ক্যাভেঞ্জিং

Assay V. leucoxylon পাতার নির্যাস এবং সংশ্লেষিত FeNP গুলিকে বিকারক হিসাবে DPPH র‌্যাডিকেল ব্যবহার করে মুক্ত র‌্যাডিকেলগুলি অপসারণের ক্ষমতার জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল [34]। নমুনাগুলি বিভিন্ন ঘনত্বে (w/v) ইথানলে (100 μL) DPPH র্যাডিকাল দ্রবণ (60 M) এর সাথে একত্রিত হয়েছিল। ঘরের তাপমাত্রায় অন্ধকারে 30 মিনিটের ইনকিউবেশনের পরে 517 এনএম-এ মিশ্রণের শোষণ পরিমাপ করতে একটি UV-Vis স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করা হয়েছিল। অ্যাসকরবিক অ্যাসিড পরীক্ষার জন্য একটি মান হিসাবে নিযুক্ত করা হয়েছিল। নিম্নলিখিত সমীকরণটি প্রতিটি নমুনার DPPH স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল:

যেখানে Ac নিয়ন্ত্রণ প্রতিক্রিয়ার শোষণকে প্রতিনিধিত্ব করে, যা 100 L ইথানলের সাথে 100 L DPPH দ্রবণ মিশ্রিত করে সঞ্চালিত হয়, এবং At পরীক্ষার নমুনার শোষণকে প্রতিনিধিত্ব করে। ত্রিপলে পরীক্ষা করা হয়েছিল। প্রতিটি নমুনার জন্য IC50 মান গণনা করা হয়েছিল। একটি উচ্চ স্তরের ফ্রি র‌্যাডিকেল কার্যকলাপ কম শোষণের প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ দ্বারা নির্দেশিত হয়েছিল।

2.7.4। ফসফোমোলিবডেনাম (PM) অ্যাস

প্রিটো এট আল।, 1999, স্ট্যান্ডার্ড কৌশল ব্যবহার করে মোট অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ নির্ধারণ করা হয়েছিল। 3 মিলি পাতিত জল এবং 1 মিলি মলিবডেট বিকারক দ্রবণ সমন্বিত প্রতিটি টেস্ট টিউব 100 µL থেকে 500 µL পর্যন্ত বিভিন্ন ঘনত্বে ভি. লিউকোক্সিলন এবং এর FeNPs এর জলীয় পাতার নির্যাস পেয়েছে। এই টিউবগুলি 95 ◦C তাপমাত্রায় 90 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছিল। এই টিউবগুলি ইনকিউবেশনের পরে 20-30 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় সামঞ্জস্য করার পরে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের শোষণ 695 এনএম এ পরিমাপ করা হয়েছিল। রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ড ছিল অ্যাসকরবিক অ্যাসিড [35]।

2.8। ইন ভিট্রো অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি কার্যকলাপের মূল্যায়ন

ভি. লিউকোক্সিলন জলীয় পাতার নির্যাস এবং এর উৎপন্ন FeNP-এর প্রদাহ-বিরোধী প্রভাব ইলিয়াস এট আল।, 1988 দ্বারা বর্ণিত প্রোটিন বিকৃতকরণ পদ্ধতি ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়েছিল, সামান্য পরিবর্তনের সাথে [36]। একটি আদর্শ ওষুধ হিসাবে, ডাইক্লোফেনাক সোডিয়াম ব্যবহার করা হয়েছিল। স্ট্যান্ডার্ড ডাইক্লোফেনাক সোডিয়াম (100 গ্রাম/mL) এর সাথে 2 মিলি জ্ঞাত ফেএনপি (100 গ্রাম/মিলি) এবং ফসফেট-বাফারযুক্ত স্যালাইন (পিএইচ 6.4) 2.8 মিলি (pH 6.4) এর সাথে 2 মিলি তাজা মুরগির ডিমের সাথে মিশ্রিত একটি প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ। অ্যালবুমিন (1 মিমি) এবং 27 ± 1 ◦C তাপমাত্রায় 15 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়। 10 মিনিটের জন্য 70 ◦C তাপমাত্রায় একটি জল স্নানে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি রেখে বিকৃতকরণ প্ররোচিত হয়েছিল। শীতল হওয়ার পরে, 660 এনএম-এ শোষণকে ফাঁকা হিসাবে ডাবল পাতিত জল ব্যবহার করে পরিমাপ করা হয়েছিল। প্রতিটি পরীক্ষা তিনবার করা হয়েছিল। নিম্নলিখিত সূত্রটি প্রোটিন বিকৃতকরণের শতাংশ বাধা গণনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল:

যেখানে, পরীক্ষার নমুনার=শোষণে; অ্যাসি=নিয়ন্ত্রণের শোষণ।

2.9। এমটিটি অ্যাস ব্যবহার করে আয়রন ন্যানো পার্টিকেলগুলির সাইটোটক্সিক এবং অ্যান্টিক্যান্সার কার্যকলাপ নির্ধারণ

V. leucoxylon এবং এর সংশ্লেষিত FeNPs-এর প্রভাব অ-ক্যান্সার ফাইব্রোব্লাস্ট কোষ L292 এর কার্যক্ষমতা এবং ত্বকের ক্যান্সার (A375), ফুসফুসের ক্যান্সার (A549), এবং ওরাল ক্যান্সার (KB-3-1) এর উপর এর ক্যান্সার প্রতিরোধী কার্যকলাপের উপর মূল্যায়ন করা হয়েছিল। কারমাইকেল এট আল অনুযায়ী, (1987) [৩৭] স্ট্যান্ডার্ড এমটিটি অ্যাস ব্যবহার করে। সমস্ত সেল লাইন ন্যাশনাল সেন্টার ফর সেল সায়েন্স (NCCS), পুনে, ভারত থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল। কোষ বৃদ্ধির শতকরা হারে বাধা (IC50) মান প্রতিটি কোষ লাইনের জন্য ডোজ-প্রতিক্রিয়া বক্ররেখা ব্যবহার করে প্রাপ্ত করা হয়েছিল, এবং নিম্নলিখিত সূত্রটি শতাংশ বৃদ্ধির বাধা গণনা করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। স্বাস্থ্যকর কোষের মাইটোকন্ড্রিয়াল ডিহাইড্রোজেনেস দ্বারা একটি বেগুনি ফর্মাজান পণ্যে এমটিটি রূপান্তর এই পরীক্ষার ভিত্তি [৩৮]।

2.10। স্ক্র্যাচ অ্যাসে টেস্ট ব্যবহার করে ভিট্রো ক্ষত-নিরাময় অধ্যয়ন

উদ্ভিদ নির্যাস এবং আয়রন ন্যানো পার্টিকেলগুলির পরিচিত ঘনত্ব সহ নমুনার দ্বারা সৃষ্ট L292 সেল লাইন কোষগুলির বিস্তার এবং স্থানান্তর ক্ষমতা বর্তমান তদন্তে পরীক্ষা করা হয়েছিল [39]। কোষ সংস্কৃতি প্রক্রিয়া শুরু করতে DMEM মিডিয়ার সাথে 10 শতাংশ FBS এবং 2 শতাংশ পেন-স্ট্রেপ অ্যান্টিবায়োটিক (Darmstadt, জার্মানি) সম্পূরক অ্যানিমেল সেল কালচার প্লেট ব্যবহার করা হয়েছিল৷ একটি জীবাণুমুক্ত প্লাস্টিকের পাইপেট টিপ ব্যবহার করা হয়েছিল কোষের মোনোলেয়ার সঙ্গমকে স্ক্র্যাচ করার জন্য যখন তারা মোটামুটিভাবে 50,000 কোষ প্রতি mL হয়ে গিয়েছিল। পিবিএস দ্রবণটি কোনও অবাঞ্ছিত কোষের ধ্বংসাবশেষ অপসারণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে, চিকিত্সা না করা কোষগুলি ব্যবহার করা হয়েছিল, যেখানে স্ট্যান্ডার্ড অ্যাসকরবিক অ্যাসিড পরিচিত ঘনত্বের পলিমার নমুনার জন্য একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরবর্তী 24 ঘন্টার জন্য, কোষগুলিকে 5 শতাংশ CO2 সহ 37 ◦C তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল। আপেক্ষিক কোষ স্থানান্তর এবং ক্ষত বন্ধের পরীক্ষা করার জন্য, স্ক্র্যাচ করা কোষের স্তরগুলি 0 ঘন্টা থেকে 6 ঘন্টা থেকে 12 ঘন্টা এবং 24 ঘন্টার মধ্যে অন্তর অন্তর অন্তরে ইনকিউব করা হয়েছিল এবং চিত্রিত হয়েছিল। ম্যাগভিশন সফ্টওয়্যারের পরিমাপ (X64, 2016, ম্যাগনাস, নিউ দিল্লি, ভারত) 4× রেজোলিউশনে ক্রমাঙ্কন ব্যবধানের দূরত্ব পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল। ক্ষত বন্ধ এবং স্থানান্তর হার নির্ধারণ করার জন্য, নীচে দেখানো সূত্র ব্যবহার করা হয়েছিল:

নিম্নোক্ত বিষয়ে: A0h=ক্ষত স্থান স্ক্র্যাচ করার পরপরই পরিমাপ করা হয়; ATh=ক্ষত এলাকা ঘন্টা পরে পরিমাপ করা হয়; rm=মাইগ্রেশন রেট (µm/h); Wf=প্রাথমিক ক্ষতের প্রস্থ (µm); এবং T=মাইগ্রেশন সময় (ঘন্টা)।

2.11। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

ডেটা গড় মান বিচ্যুতি এবং মান ত্রুটি হিসাবে উপস্থাপিত হয়, এবং প্রতিটি পরীক্ষা তিনবার করা হয়েছিল। SPSS সফ্টওয়্যার সংস্করণ 20 গ্রুপগুলির মধ্যে বিদ্যমান গড় স্কোরের পার্থক্যগুলির উপর ভিন্নতা (ANOVA) এর একমুখী বিশ্লেষণ করতে ব্যবহৃত হয়েছিল।

আরো জন্য অনুরোধ:

ইমেল:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/টেল: প্লাস 86 15292862950

দোকান:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop