রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসায় পাঁচটি উপাদান নির্ধারণ এবং এইচপিএলসি ফিঙ্গারপ্রিন্ট স্থাপন

বিমূর্ত:পাঁচটি উপাদানের বিষয়বস্তু নির্ধারণের পদ্ধতিরেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা, যথা,রেহমাননোসাইড ডি, লিওনুরিন,echinacoside,cistancheside এএবংverbascoside, প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল, এবং রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার উচ্চ কর্মক্ষমতা লিকুইড ক্রোমাটোগ্রাফি (HPLC) ফিঙ্গারপ্রিন্ট রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার মান নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি বৈজ্ঞানিক ভিত্তি প্রদানের জন্য প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল। Shiseido CAPCELL PAK C18 কলাম ব্যবহার করা হয়েছিল, মোবাইল ফেজ হিসাবে অ্যাসিটোনিট্রিল-0.1% ফর্মিক অ্যাসিড দ্রবণ, গ্রেডিয়েন্ট ইলিউশন, কলামের তাপমাত্রা 30 ডিগ্রি, পরিবর্তনশীল তরঙ্গদৈর্ঘ্য নির্ধারণ, এবং 1.0 প্রবাহের হার মিলি/মিনিট রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার এইচপিএলসি ফিঙ্গারপ্রিন্ট বিশ্লেষণ করে "চাইনিজ মেডিসিন ক্রোমাটোগ্রাফিক ফিঙ্গারপ্রিন্ট সাদৃশ্য মূল্যায়ন সিস্টেম (2012 Edition)" software to evaluate its quality consistency. The results showed that according to the established content determination method, the five components had a good linear relationship within their respective concentration ranges (R2>{{0}}.999 0), নির্ভুলতা পরীক্ষা, পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা পরীক্ষা এবং স্থিতিশীলতা পরীক্ষার RSD ছিল 0.12%~1.58%, এবং গড় নমুনা পুনরুদ্ধারের হার ছিল 96.5% ~98.6%; প্রতিষ্ঠিত রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা এইচপিএলসি ফিঙ্গারপ্রিন্ট 23টি সাধারণ শিখর চিহ্নিত করেছে এবং রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণ ফিঙ্গারপ্রিন্টের মধ্যে মিল ছিল 0.904~0.950। ফলাফলগুলি পরামর্শ দেয় যে প্রতিষ্ঠিত বিষয়বস্তু নির্ধারণের পদ্ধতি এবং HPLC ফিঙ্গারপ্রিন্ট রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার গুণমান মূল্যায়ন এবং কাঁচা রেহমানিয়া গ্লুটিনোসা এবং রান্না করা রেহমানিয়া গ্লুটিনোসা সনাক্তকরণের জন্য উপযুক্ত, উচ্চ নির্ভুলতা এবং ভাল প্রজননযোগ্যতা সহ, এবং মান নিয়ন্ত্রণের জন্য প্রযুক্তিগত সহায়তা প্রদান করতে পারে। রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ঔষধি উপকরণ।

কীওয়ার্ড:রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা; বিষয়বস্তু নির্ধারণ; আঙুলের ছাপ; গুণমান মূল্যায়ন

সঙ্গে নতুন হার্ব CISTANCHEইচিনাকোসাইড,CISTANCHESIDE Aএবংভার্বাস্কোসাইড

রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসাস্ক্রোফুলারিয়াসি উদ্ভিদ রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা লিবোশের তাজা বা শুকনো মূল কন্দ। বিভিন্ন প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতির কারণে, এটি প্রধানত তাজা রেহমানিয়া, কাঁচা রেহমানিয়া এবং রান্না করা রেহমানিয়া [1-2] এ বিভক্ত। প্রধান উৎপাদন ক্ষেত্র হল হেনান, শানসি, শানসি ইত্যাদি জমি। তাদের মধ্যে, কাঁচা রেহমানিয়া গ্লুটিনোসা তাপ দূর করে এবং রক্তকে শীতল করে, ইয়িনকে পুষ্ট করে এবং তরল উৎপাদনের প্রচার করে এবং প্রধানত রক্তে তাপ, উষ্ণ টক্সিন এবং দাগ ইত্যাদির চিকিত্সার জন্য ব্যবহৃত হয়; রান্না করা রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার পুষ্টিকর রক্ত ​​এবং ইয়িন, সার পূরন এবং মজ্জা পূরণের প্রভাব রয়েছে এবং এটি প্রধানত রক্তের ঘাটতি, ক্লোরোসিস, ইত্যাদির জন্য ব্যবহৃত হয়। ধড়ফড়, অস্থিরতা ইত্যাদি।[1-2]। দুটির আলাদা বৈশিষ্ট্য এবং স্বাদ রয়েছে তবে উভয়ই লিভার এবং কিডনি মেরিডিয়ানের অন্তর্গত। রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসাতে জটিল রাসায়নিক উপাদান রয়েছে, প্রধানত ইরিডয়েডস, আয়োননস, ফেনাইলেথানল গ্লাইকোসাইডস, ফ্ল্যাভোনয়েড ইত্যাদি। [3-5]।

রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা বিভিন্ন প্রক্রিয়াকরণ পদ্ধতি দ্বারা প্রক্রিয়াকরণের পরে, প্রতিটি প্রক্রিয়াজাত পণ্যের রাসায়নিক উপাদানের প্রকার, বিষয়বস্তু এবং অনুপাত ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়, যার ফলে এর ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যকলাপে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখা দেয় [6-10]। অনুযায়ী

সম্পর্কিত অধ্যয়ন[11-12] দেখায় যে রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা "কাঁচা" থেকে "রান্না"তে পরিবর্তিত হওয়ার প্রক্রিয়ায়, ক্যাটালপোল, মাদারওয়ার্ট, স্ট্যাকিওজ এবং অ্যামিনো অ্যাসিডের মতো রাসায়নিক উপাদানগুলির বিষয়বস্তু উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, এবং উপাদানগুলি ফ্রুক্টোজ, 5-হাইড্রোক্সিমিথিলফারফুরাল, ইত্যাদি। , আইসোরেবাসকোসাইড ইত্যাদির বিষয়বস্তু উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি পেয়েছে। বর্তমানে, কাঁচা এবং রান্না করা রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার মান নিয়ন্ত্রণ প্রধানত ক্যাটালপোল এবং রেহমাননিয়াসাইড ডি এর বিষয়বস্তু মূল্যায়ন সূচক হিসাবে ব্যবহার করে। মূল্যায়ন পদ্ধতির সূচকগুলি তুলনামূলকভাবে একক, রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার গুণমানকে ব্যাপকভাবে নিয়ন্ত্রণ করা কঠিন করে তোলে। উপরন্তু, গবেষণায় দেখা গেছে যে রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ডি এর বিষয়বস্তু প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে পরিবর্তিত হয়। এটি ছোট এবং প্রক্রিয়াকরণ এবং প্রক্রিয়াকরণের ডিগ্রি [12-13] এর পরে রচনার পরিবর্তনগুলি চিহ্নিত করার ক্ষেত্রে দুর্বল নির্দিষ্টতা রয়েছে।

অতএব, রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার গুণমানকে আরও বিস্তৃতভাবে মূল্যায়ন করার জন্য, এই গবেষণাটি রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার রেহমাননিয়াসাইড ডি এবং ইমুর মধ্যে সম্পর্ক স্থাপন করেছে।

Glucoside, echinaceaside, cistancheoside A, এবং verbascoside সহ পাঁচটি সাধারণ উপাদানের বিষয়বস্তু নির্ধারণের পদ্ধতি এবং বিভিন্ন উৎপাদন এলাকা থেকে রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার প্রধান উপাদানগুলির বিষয়বস্তু বিশ্লেষণ করতে এবং প্রক্রিয়াকরণের আগে এবং পরে, রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসার HPLC ফিঙ্গারপ্রিন্ট স্থাপন করে Rehmannia glutinosa এর মান নিয়ন্ত্রণের জন্য তথ্য প্রদান করার জন্য। প্রযুক্তিগত সহায়তা।

যন্ত্র, বিকারক এবং পরীক্ষার ওষুধ

Agilent 1260 উচ্চ কর্মক্ষমতা তরল ক্রোমাটোগ্রাফ (ডিটেক্টর হল ডায়োড অ্যারে); পরিবর্তনশীল পরিসীমা ইলেকট্রনিক বিশ্লেষণাত্মক ব্যালেন্স (মেটলার টলেডো); ডিজিটাল আল্ট্রাসনিক ক্লিনার (সাংহাই আল্ট্রাসনিক ইন্সট্রুমেন্ট ফ্যাক্টরি, KH-500DE)। মিথানল (সিনোফার্ম গ্রুপ) বিশ্লেষণাত্মক গ্রেড; acetonitrile (Merck) ক্রোমাটোগ্রাফিক গ্রেড; জল হল ওয়াটসনের বোতলজাত জল। রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ডি রেফারেন্স পদার্থ (ব্যাচ নম্বর RFSD8401909016, বিশুদ্ধতা 98.0%), লিওনুরাস গ্লাইকোসাইড রেফারেন্স পদার্থ (ব্যাচ নম্বর RFS-Y22002208010, বিশুদ্ধতা 98.0% সাবচেস্টানসাইড এ), এবং নম্বর RFS-R05002009014, বিশুদ্ধতা 96.0%) সমস্ত চেংদু রুইফেনসিডেন বায়োটেকনোলজি কোং লিমিটেড থেকে কেনা হয়েছে; ইচিনাকোসাইড রেফারেন্স পদার্থ (ব্যাচ নম্বর 111670-201907, বিশুদ্ধতা 91.8%) এবং ভার্বাস্কোসাইড রেফারেন্স পদার্থ (ব্যাচ নম্বর 11530-201914, বিশুদ্ধতা 95.2%) সবই চায়না ফুড অ্যান্ড ড্রাগ ইন্সপেকশন ইনস্টিটিউট থেকে কেনা হয়েছে। রেহমাননিয়া নমুনা (SX1~SX4, HN1 এবং HN2) বিভিন্ন উত্পাদনকারী এলাকা থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল (সারণী 1 দেখুন), যার মধ্যে SX4 এবং HN2 যথাক্রমে SX1 এবং HN1 দ্বারা বাষ্প করা হয়েছিল, এবং SX2 এবং SX3 একই উত্পাদনকারী এলাকা থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল। গানসু প্রাদেশিক ইনস্টিটিউট অফ ড্রাগ কন্ট্রোলের চিফ চাইনিজ মেডিসিন প্র্যাকটিশনার সং পিংশুনের দ্বারা সমস্ত নমুনা প্রামাণিক হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল।

সারণী 1 বীর্য Rehmanniae নমুনা তথ্য

2.1 ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা

Shiseido CAPCELL PAK C18 (250৷{6}} mm×4.6 mm, 5 μm) কলাম ব্যবহার করা হয়েছিল, মোবাইল ফেজ A হিসাবে acetonitrile ব্যবহার করা হয়েছিল, এবং 0.1% ফরমিক অ্যাসিড দ্রবণ মোবাইল ফেজ B হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল গ্রেডিয়েন্ট ইলুশন শর্ত ছিল: 0-3 মিনিট, 1%A; 3-9 মিনিট, 1%A→5%A; 9-24 মিনিট, 5%A→35%A; 24-35 মিনিট, 35%A→65%A; 35-40 মিনিট, 65%A→90%A। পরিবর্তনশীল তরঙ্গদৈর্ঘ্য সনাক্তকরণ (0-24 মিনিট, 203 এনএম; 24-40 মিনিট, 330 এনএম)। ইনজেকশন ভলিউম রেফারেন্স সমাধানের 15 μL এবং নমুনা সমাধানের 20 μL ছিল।

2.2 সমাধান প্রস্তুতি

2.2.1 রেফারেন্স সমাধান প্রস্তুতি

উপরের পাঁচটি রেফারেন্স পদার্থের যথাযথ পরিমাণে নিন, 0.4 মিলিগ্রাম/মিলি ভরের ঘনত্বের সাথে একটি মিশ্র রেফারেন্স দ্রবণ প্রস্তুত করতে 70% মিথানল যোগ করুন।

2.2.2 পরীক্ষার সমাধান প্রস্তুতি

ওজন প্রায় 10 গ্রাম রেহমাননিয়া পাউডার (নং 2 চালনির মধ্য দিয়ে যাওয়া), সঠিকভাবে ওজন করুন, একটি স্টপার করা শঙ্কুযুক্ত ফ্লাস্কে রাখুন, সঠিকভাবে 70% মিথানলের 25 মিলিলিটার যোগ করুন, সিল করুন, ওজন করুন, আল্ট্রাসোনালি ট্রিট করুন (পাওয়ার 300 W, ফ্রিকোয়েন্সি 50 kHz) 30 মিনিটের জন্য, এটি ঘরের তাপমাত্রায় ঠান্ডা হতে দিন, আবার ওজন করুন, 70% মিথানল দিয়ে হারানো ভর তৈরি করুন, ফিল্টার করুন এবং প্রাপ্ত করার জন্য ফিল্টার নিন।

2.3 পদ্ধতিগত তদন্ত

2.3.1 নির্দিষ্টতা তদন্ত

"2.2.1" এর অধীনে মিশ্র রেফারেন্স সমাধান এবং "2.2.2" এর অধীনে পরীক্ষার সমাধান (নমুনা SX1) নিন এবং "2.1" এর অধীনে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুযায়ী ইনজেকশন এবং পরিমাপ করুন। ফলাফলগুলি দেখায় যে রেহমাননিয়া নমুনার ক্রোমাটোগ্রাম রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ডি, লিওনুরিন, ইচিনাকোসাইড, সিস্তানচে ডেসার্টিকোলা এ এবং ভার্বাস্কোসাইডের রেফারেন্স স্ট্যান্ডার্ডের মতো একই ধরে রাখার সময় সহ একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর উপস্থাপন করে (চিত্র 1 দেখুন), নির্দেশ করে যে এই পদ্ধতিটি শক্তিশালী। নির্দিষ্টতা

2.3.2 লিনিয়ার সম্পর্ক তদন্ত

মিশ্র রেফারেন্স দ্রবণে 70% মিথানল যোগ করুন, যথাক্রমে 5 বার, 10 বার, 25 বার, 50 বার, 100 বার এবং 250 বার পাতলা করুন এবং "2.1" এর অধীনে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুযায়ী ইনজেকশন এবং পরিমাপ করুন। অনুভূমিক অক্ষ (x) হিসাবে প্রতিটি রেফারেন্সের ভর ঘনত্ব এবং উল্লম্ব অক্ষ (y) হিসাবে সংশ্লিষ্ট ক্রোমাটোগ্রাফিক শিখর অঞ্চলের সাথে মানক বক্ররেখা আঁকা হয়েছিল। ফলাফলগুলি সারণি 2 এ দেখানো হয়েছে, যা নির্দেশ করে যে প্রতিটি উপাদানের সংশ্লিষ্ট ভর ঘনত্বের পরিসরের মধ্যে একটি ভাল রৈখিক সম্পর্ক রয়েছে।

1. রেহমাননিওসাইড ডি; 2. লিওনুরাইড; 3. ইচিনাকোসাইড; 4. castanoside A;5. অ্যাক্টিওসাইড

চিত্র 1 নির্দিষ্টতা তদন্তের ক্রোমাটোগ্রাম

সারণী 2 সিমেন রেহমাননিয়াতে 5টি উপাদানের রৈখিক সম্পর্ক

2.3.3 নির্ভুল তদন্ত

"2.2.2" এর অধীনে পরীক্ষার সমাধান (নমুনা SX1) নিন এবং "2.1" এর অধীনে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুযায়ী ইনজেকশন পরীক্ষা করুন। নমুনাটি ক্রমাগত 6 বার ইনজেকশন করুন, প্রতিটি উপাদানের সর্বোচ্চ ক্ষেত্রফল রেকর্ড করুন, এবং পরীক্ষার নমুনায় রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ডি, মাদারওয়ার্ট গ্লাইকোসাইড, ইচিনেসিয়া গ্লাইকোসাইড, সিস্টানচে গ্লাইকোসাইড এ, এবং ভার্বাসকোসাইডের শীর্ষ এলাকা RSD গণনা করুন। যথাক্রমে 46%, 0.12%, 0.85%, 0.48%, এবং 0.82%, যথাক্রমে, ইঙ্গিত করে যে যন্ত্রটির সঠিক নির্ভুলতা রয়েছে৷

2.3.4 পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা অধ্যয়ন

একই রেহমাননিয়া রুট নমুনা (SX1) এর ছয়টি নমুনা "2.2.2" তে পদ্ধতি অনুসারে সমান্তরালভাবে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং "2.1" তে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুসারে ইনজেকশন এবং নির্ধারণ করা হয়েছিল। ছয়টি নমুনায় রেহমাননিয়া রুট গ্লাইকোসাইড ডি, মাদারওয়ার্ট গ্লাইকোসাইড, ইচিনেসিয়া গ্লাইকোসাইড, সিস্টানচে গ্লাইকোসাইড এ এবং ভার্বাসকোসাইডের বিষয়বস্তুর RSD ছিল 0.46%, 0.69%, 1.42%, {{ 12}}.48% এবং 1.58%, যথাক্রমে, ইঙ্গিত করে যে পদ্ধতিটির পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা ভাল।

2.3.5 স্থিতিশীলতা অধ্যয়ন

"2.2.2" এর অধীনে পরীক্ষার সমাধান (নমুনা SX1) নিন এবং "2.1" এর অধীনে 0 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 1{{ ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুযায়ী ইনজেকশন এবং পরিমাপ করুন। যথাক্রমে 15}} h, 12 h, 18 h এবং 24 h। রেহমাননিয়া গ্লুটিনোসা ডি, মাদারওয়ার্ট গ্লাইকোসাইড, ইচিনাকোসাইড, সিস্টানচে গ্লাইকোসাইড এ, এবং ভার্বাসকোসাইডের শীর্ষ অঞ্চলগুলির RSD ছিল 0.94%, 1৷{21}}4%, 0.73% , 0.83%, এবং 0.71%, যথাক্রমে, ইঙ্গিত করে যে পরীক্ষার সমাধানটি 24 ঘন্টার মধ্যে ভাল স্থিতিশীলতা রয়েছে।

2.3.6 নমুনা পুনরুদ্ধারের হার

{{0}}.5 গ্রাম রেহমাননিয়া রুট নমুনা (SX1) 5টি উপাদানের পরিচিত বিষয়বস্তু সহ সঠিকভাবে একটি স্টপারড শঙ্কু ফ্লাস্কে ওজন করা হয়েছিল, এবং 6টি সমান্তরাল অংশ যোগ করা হয়েছিল, এবং নির্দিষ্ট ঘনত্বের 5টি রেফারেন্স সমাধান যোগ করা হয়েছিল যথাক্রমে নমুনাগুলি "2.2.2" এর অধীনে পদ্ধতি অনুসারে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং "2.1" এর অধীনে ক্রোমাটোগ্রাফিক অবস্থা অনুসারে নমুনাগুলি ইনজেকশন এবং পরিমাপ করা হয়েছিল। পুনরুদ্ধারের হার গণনা করা হয়েছিল, এবং ফলাফলগুলি সারণি 3-এ দেখানো হয়েছে। প্রতিটি উপাদানের গড় নমুনা পুনরুদ্ধারের হার ছিল 96.5%~98.6%, এবং RSD ছিল 0.73%~1.52%, যা নির্দেশ করে যে পদ্ধতিটি ভাল নির্ভুলতা রয়েছে৷