বিমূর্ত:কুমড়ো বীজের তেল হল একটি উপজাত, প্রচুর পরিমাণে পুষ্টি এবং জৈব সক্রিয় উপাদান যা বেশ কিছু স্বাস্থ্য উপকারিতাকে প্রচার করে। এই সমীক্ষার লক্ষ্য ছিল কুমড়ো বীজ তেলের রাসায়নিক সংমিশ্রণ, অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যকলাপের তুলনা করা। প্রাক্তন পোয়ার। (PSO1) এবং Cucurbita moschata (জাপানি কুমড়া) (PSO2) জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন দ্বারা। এনজাইম্যাটিক নিষ্কাশন প্রক্রিয়ায় পেকটিনেজ, সেলুলেজ এবং প্রোটেজ (1:1:1) সমন্বিত একটি এনজাইম মিশ্রণ ব্যবহার করা হয়েছিল। তেলের ফ্যাটি অ্যাসিড গঠন ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার/গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফিক-মাস স্পেকট্রোমেট্রি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্রিয়াকলাপ পরিমাপ করা হয়েছিল স্থিতিশীল ফ্রি র‌্যাডিকাল ডিফেনাইলপিক্রিলহাইড্রাজিল, র‌্যাডিকাল ক্যাটান 2,20 -অ্যাজিনোবিস-(3- ইথিলবেনজোথিয়াজোলিন-6-সালফোনেট, ফেরিক রিডুসিং/অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট শক্তি, এবং ফেরিক থায়োসায়ান্যাবিশনের ফেরিক থায়োসায়ান্যাবিশন ব্যবহার করে। ত্বকের বার্ধক্য এবং সাদা করার প্রক্রিয়া জড়িত এনজাইমগুলি তদন্ত করা হয়েছিল৷ লিনোলিক অ্যাসিড ছিল সমস্ত কুমড়ার বীজ তেলের একটি প্রধান উপাদান৷ উপরন্তু, উল্লেখযোগ্য পরিমাণে ওলিক অ্যাসিড, পালমিটিক অ্যাসিড এবং স্টিয়ারিক অ্যাসিড শনাক্ত করা হয়েছিল৷ PSO2 এর তুলনায় সর্বোচ্চ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ রয়েছে৷ PSO1 এবং বাণিজ্যিক কুমড়া বীজের তেল (COM1 এবং COM2)। PSO1 এবং PSO2 উভয়ই হায়ালুরোনিডেস, কোলাজেনেস এবং টাইরোসিনেজের উপর বিজ্ঞাপনের তুলনায় উচ্চ প্রতিরোধক প্রভাব প্রদর্শন করেছে। তাই, জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন উচ্চ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-এজিং এবং অ্যান্টি-এজিং সহ কুমড়া বীজের তেল দিতে পারে। সাদা করার কার্যক্রম। এটি আরও ফার্মাকোলজিকাল অধ্যয়নের জন্য উপকারী এবং ত্বকের উপকারের জন্য কার্যকরী খাদ্য হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

প্রাসঙ্গিক গবেষণা অনুযায়ী,cistancheএকটি সাধারণ ভেষজ যা "অলৌকিক ভেষজ যা জীবনকে দীর্ঘায়িত করে" নামে পরিচিত। এর প্রধান উপাদানcistanoside, যার বিভিন্ন প্রভাব রয়েছে যেমনঅ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, প্রদাহ বিরোধী, এবংইমিউন ফাংশন প্রচার. cistanche এবং মধ্যে প্রক্রিয়াচামড়া ঝকঝকেসিস্টাঞ্চের অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট প্রভাবে রয়েছেগ্লাইকোসাইড. মানুষের ত্বকে মেলানিন টাইরোসিনের অক্সিডেশন দ্বারা অনুঘটক দ্বারা উত্পাদিত হয়টাইরোসিনেজ, এবং জারণ প্রতিক্রিয়ার জন্য অক্সিজেনের অংশগ্রহণের প্রয়োজন হয়, তাই শরীরের অক্সিজেন-মুক্ত র্যাডিকেলগুলি মেলানিন উৎপাদনকে প্রভাবিত করে একটি গুরুত্বপূর্ণ ফ্যাক্টর হয়ে ওঠে। সিস্টানচে সিস্টানোসাইড রয়েছে, যা একটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট এবং শরীরে ফ্রি র‌্যাডিক্যালের উৎপাদন কমাতে পারে, এইভাবেমেলানিন উৎপাদনে বাধা দেয়.

Cistanche Tubulosa Supplement এ ক্লিক করুন

আরও তথ্যের জন্য:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1। পরিচিতি

কুকুরবিটা এবং কুকুরবিটাসি পরিবারে রয়েছে কুমড়ো, একটি সাধারণ এবং বিখ্যাত উদ্ভিদ যা উত্তর মেক্সিকোতে চাষ করা হয়েছিল এবং ইউরোপ, পশ্চিম আমেরিকা এবং এশিয়ায় ছড়িয়ে পড়েছে [১]। কুমড়াকে একটি কার্যকরী খাদ্য হিসাবে বিবেচনা করা হয় যাতে প্রচুর পরিমাণে পুষ্টি যেমন প্রোটিন, কার্বোহাইড্রেট, লিপিড, ফাইবার ইত্যাদি থাকে, সাথে ফাইটোকেমিক্যাল যৌগ যেমন টোকোফেরল, ক্যারোটিনয়েড এবং -সিটোস্টেরল [২]। কুমড়ার বিভিন্ন অংশ থেকে পাওয়া ফাইটোনিউট্রিয়েন্টগুলির ফার্মাকোলজিক্যাল কার্যকলাপ রয়েছে [২]। কুমড়োর খোসার নির্যাস পশুর মডেলগুলিতে উপকারী পোড়া ক্ষত প্রভাব দেখিয়েছে [3]। কুমড়ার সজ্জা অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেশন এবং অ্যান্টি-এনজিওজেনেসিস কার্যকলাপ [২], সেইসাথে ইঁদুরের ক্লান্তি-বিরোধী কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছে [৪]। এছাড়াও, কুমড়ার বীজ অপরিহার্য ফ্যাটি অ্যাসিড এবং ফাইটোস্টেরলগুলির একটি ভাল প্রাকৃতিক উত্স যা কার্ডিওভাসকুলার মৃত্যুর ঝুঁকি কমায় [5,6]। কুমড়া বীজের তেল হল কুমড়ার বীজের প্রক্রিয়াজাতকরণের একটি উপজাত, যা বিভিন্ন ফ্যাটি অ্যাসিড এবং বায়োঅ্যাকটিভ যৌগগুলিতে সমৃদ্ধ যেমন -ক্যারোটিন, -টোকোফেরল, ভিটামিন বি, লুটেইন, ফাইটোস্টেরল এবং অন্যান্য খনিজ [7,8]। তেলটি অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, অ্যান্টি-ইনফ্লেমেশন, অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল এবং ক্ষত-নিরাময় প্রভাব [1,9] প্রয়োগ করে। তদুপরি, এটির বিভিন্ন রোগের বিরুদ্ধে স্বাস্থ্য সুবিধা রয়েছে, যেমন উচ্চ রক্তচাপ, ডায়াবেটিস এবং ক্যান্সার [8,10]।

বীজের তেল আহরণের জন্য বিভিন্ন পদ্ধতি তৈরি করা হয়েছে, যার মধ্যে যান্ত্রিক পদ্ধতি যেমন ঠান্ডা চাপা [১১] এবং উচ্চ-চাপ নিষ্কাশন [১২]। হেক্সেন, ইথাইল অ্যাসিটেট, অ্যাসিটোন এবং মিথানলের মতো জৈব দ্রাবক ব্যবহার করে বীজ তেলের দ্রাবক নিষ্কাশনও নথিভুক্ত করা হয়েছে [13,14]। এনজাইম-সহায়তা নিষ্কাশন উদ্ভিদ তেল শিল্পের জন্য একটি বিকল্প পদ্ধতি কারণ এটি একটি পরিবেশ বান্ধব এবং নিরাপদ প্রযুক্তি। জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশনের প্রধান প্রক্রিয়া হল উদ্ভিদ উপাদানের কোষ প্রাচীরগুলিকে হাইড্রোলাইজ করা এবং ভেঙ্গে ফেলা, যা আরও ব্যাপ্তিযোগ্যতার দিকে পরিচালিত করে এবং তেল পর্যায় সহ বায়োঅ্যাকটিভ উপাদানগুলিকে ছেড়ে দেয় [15]। এই নিষ্কাশনে প্রয়োগ করা বিভিন্ন এনজাইম মিশ্রণগুলি পেকটিনেস, সেলুলাসেস, হেমিসেলুলাসেস, অ্যারাবিনোস, -গ্লুকানেস এবং জাইলানেজ [16,17] দ্বারা গঠিত। একটি এনজাইম মিশ্রণের অপ্টিমাইজ করা অবস্থা, উদাহরণস্বরূপ, তাপমাত্রা, পিএইচ, প্রতিক্রিয়া সময়, কণার আকার এবং এনজাইমের ঘনত্ব, এছাড়াও এনজাইমের কার্যকলাপ [16] উন্নত করে। আজকাল, এই পদ্ধতিটি বহু ফল এবং উদ্ভিদের বীজ [18,19] থেকে তেল আহরণের জন্য ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে। কিছু পূর্ববর্তী গবেষণা উচ্চ ফলন এবং কার্যকর ফার্মাকোলজিকাল ক্রিয়াকলাপ [20,21] পেতে কুমড়া বীজ তেলের অনুকূল অবস্থা প্রদর্শন করেছে।

বর্তমানে, লোকেরা মিষ্টান্ন বা সালাদ ড্রেসিংয়ে কুমড়ার বীজের তেল ব্যবহার করে এবং এটি প্রসাধনীতেও একটি জনপ্রিয় উপাদান। ত্বকের বার্ধক্য একটি জটিল জৈবিক প্রক্রিয়া যা কুঁচকে যাওয়া, স্থিতিস্থাপকতা হ্রাস, আর্দ্রতা হ্রাস এবং অক্সিডেটিভ স্ট্রেস, ডিএনএ ক্ষতি এবং উন্নত গ্লাইকেশন শেষ-পণ্য জমার কারণে রুক্ষ গঠন দ্বারা চিহ্নিত করা হয় [22]। হায়ালুরোনিক অ্যাসিড, কোলাজেন এবং ইলাস্টিন, যা ত্বকের গুরুত্বপূর্ণ উপাদান, যথাক্রমে হায়ালুরোনিডেস, কোলাজেনেস এবং ইলাস্টেস এনজাইম দ্বারা ক্ষয়প্রাপ্ত হতে পারে, যার ফলে ত্বক বার্ধক্য হয়। জলপাই তেল, সূর্যমুখী বীজের তেল, আঙ্গুরের বীজের তেল এবং জোজোবা তেলের মতো বেশ কিছু উদ্ভিদ তেল ত্বকের প্রসাধনী বৈশিষ্ট্যগুলির জন্য আর্দ্রতা ধরে রাখতে, ত্বকের বাধা ফাংশনকে উন্নত করতে এবং ত্বকের বার্ধক্য প্রতিরোধে ব্যবহার করা হয়েছে [২৩]। অতিরিক্তভাবে, ত্বকের পিগমেন্টেশন মানুষের মধ্যে একটি পরিবর্তনশীল এবং লক্ষণীয় ফেনোটাইপ যা মেলানোজেনেসিস জড়িত এবং টাইরোসিনেজ এনজাইম দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয় [24]। বর্তমানে, মেলানিন উৎপাদন হ্রাস করার জন্য প্রসাধনী এবং ফার্মাসিউটিক্যালসের জন্য বিভিন্ন উদ্ভিদের নির্যাস পরীক্ষা করা হয়েছে, সাদা করার এজেন্ট হিসাবে কাজ করে [25,26]।

2। সামগ্রী ও পদ্ধতি

2.1। উদ্ভিদ সামগ্রী

2.2। রাসায়নিক এবং বিকারক 

2.3। জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন

কুমড়োর বীজ তেল উভয় সি. মোছাটা ডাচ থেকে। ক্যানোপকা এট আল-এর পূর্ববর্তী গবেষণা থেকে এনজাইমেটিক হাইড্রোলাইসিস প্যারামিটার ব্যবহার করে জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন পদ্ধতির মাধ্যমে এক্স পোয়ার এবং সি. মোছাটা (জাপানি কুমড়া) বের করা হয়েছিল। (2016), এনজাইমের ঘনত্ব, এনজাইম-থেকে-সাবস্ট্রেট অনুপাত, প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা, pH, এবং প্রতিক্রিয়া সময় সহ [২১]। পেকটিনেজ, সেলুলেজ এবং প্রোটেজ সহ তিনটি ভিন্ন ধরনের এনজাইমকে 1:1:1 ওজনের অনুপাতে একত্রিত করে এনজাইমের ঘনীভূত ককটেল তৈরি করা হয়েছিল। তারপরে, 2 শতাংশ ডব্লিউ/ডব্লিউ জলীয় এনজাইম্যাটিক মিশ্রণ তৈরি করতে DI জলে ফলিত ঘনীভূত ককটেলকে মিশ্রিত করা হয়েছিল। 1:1 ওজনের অনুপাতে ফলিত জলীয় এনজাইমেটিক মিশ্রণে কুমড়ার বীজগুলি যোগ করা হয়েছিল। তারপরে একটি মৌলিনেক্স ডিবি 81 ব্লেন্ডার ব্যবহার করে মিশ্রণটি ঘরের তাপমাত্রায় একজাত না হওয়া পর্যন্ত সূক্ষ্মভাবে ভুনা হয়। ফলস্বরূপ স্লারির pH তারপর 0.1 M HCl ব্যবহার করে 4.7 এ সামঞ্জস্য করা হয় এবং 15 ঘন্টার জন্য 54 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়। স্লারিটি ঘরের তাপমাত্রায় ঠাণ্ডা করার পরে, এটিকে 10 মিনিটের জন্য 11,500×g এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল। সুপারন্যাট্যান্টের উপরের স্তর, যা ছিল তেল ফেজ, সংগ্রহ করা হয়েছিল। নিষ্কাশন প্রক্রিয়া চলাকালীন উত্পাদিত ক্রিমটি ইমালসিফাইড করা হয়নি তবে একটি মাইক্রোপিপেট ব্যবহার করে সিফোনিং করে সরানো হয়েছিল। কুমড়া বীজের অবশিষ্টাংশ একটি ভ্যাকুয়ামের অধীনে হোয়াটম্যান নং 1 ফিল্টার পেপারের মাধ্যমে পরিস্রাবণের মাধ্যমে সরানো হয়েছিল [২১]। কুমড়ো বীজের তেল সি. মোছাটা ডাচ থেকে। Ex Poir (PSO1) এবং C. moschata (জাপানি কুমড়া) (PSO2) পরবর্তী পরীক্ষা না হওয়া পর্যন্ত ঘরের তাপমাত্রায় ভাল-বন্ধ, আলো-প্রতিরোধী পাত্রে রাখা হয়েছিল।

2.4। ফ্যাটি অ্যাসিড মিথাইল এস্টার/গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফিক-ম্যাস স্পেকট্রোমেট্রিক (FAME/GC/MS) পদ্ধতি ব্যবহার করে কুমড়োর বীজ তেলের রাসায়নিক গঠন নির্ধারণ

2.5। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ নির্ধারণ

2.5.1। 2,2-ডিফেনাইল-1-Picrylhydrazyl (DPPH) র্যাডিকাল স্ক্যাভেঞ্জিং অ্যাসে

DPPH র‌্যাডিক্যাল (DPPH•) স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ চাইয়ানা এট আল দ্বারা প্রতিষ্ঠিত পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। (2017) [27]। সংক্ষেপে, DMSO-তে দ্রবীভূত 20 μL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) এবং লিনোলিক অ্যাসিড 180 μL 167 μM DPPH ইথানলিক দ্রবণের সাথে একটি 96- ভাল প্লেটে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং তারপরে 30 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল অন্ধকারে ঘরের তাপমাত্রা। অ্যাসকরবিক অ্যাসিড (1 mg/mL) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার EZ রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে অপটিক্যাল ঘনত্ব (OD) 520 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। ডিপিপিএইচ বাধার শতাংশ সমীকরণ (1) ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল:

DPPH বাধা (শতাংশ)={[(ODA − ODB) − (ODC − ODD)]/(ODA − ODB)} × 100, (1)

2.5.2। 2,20 -আজিনো-বিস-3-ইথাইলবেনজথিয়াজোলিন-6-সালফোনিক অ্যাসিড (এবিটিএস) অ্যাস

ABTS cationic radical (ABTS• প্লাস ) স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপকে কালারমেট্রিক পদ্ধতি দ্বারা চাইয়ানা এট আল অনুসারে পরিমাপ করা হয়েছিল। (2017) এবং প্যারাডি এবং অন্যান্য। (2019) [27,28] সামান্য পরিবর্তন সহ। ABTS• প্লাস তৈরি করা হয়েছিল 2 mL 7 mM ABTS এর সাথে 3 mL 2.45 mM পটাসিয়াম পারসালফেট যোগ করে এবং অন্ধকারে ঘরের তাপমাত্রায় 16-24 ঘন্টার জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। ফলস্বরূপ ABTS• প্লাসকে পরবর্তীতে 750 nm-এ 0.7 ± 0.1 OD পাওয়ার জন্য ইথানলের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল। সংক্ষেপে, DMSO-তে দ্রবীভূত 20 μL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) এবং লিনোলিক অ্যাসিডকে 180 μL ABTS• প্লাস ইথানোলিক দ্রবণ একটি 96-কূপ প্লেটে মেশানো হয়েছিল এবং ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল . একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার ইজেড রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে OD 750 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। অ্যাসকরবিক অ্যাসিড (1 mg/mL) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। 2.5-30 μg/mL থেকে ট্রলক্সের বিভিন্ন ঘনত্বের বিপরীতে 750 nm-এ শোষণের প্লট করে আদর্শ বক্ররেখা তৈরি করা হয়েছিল। ABTS• প্লাস স্ক্যাভেঞ্জিং কার্যকলাপ ট্রলক্স স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ (R2=0.9922) থেকে গণনা করা হয়েছিল এবং ট্রোলক্স সমতুল্য অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট ক্ষমতা (TEAC) হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল।

2.5.3। ফেরিক রিডুসিং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পাওয়ার (FRAP) অ্যাস

প্রতিটি নমুনার ফেরিক রিডুসিং অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট পাওয়ার (এফআরএপি) এফআরএপি অ্যাস ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল যেমনটি চাইয়ানা এট আল দ্বারা পূর্ববর্তী গবেষণায় বর্ণিত হয়েছে। (2017) যা Saeio et al থেকে সামান্য পরিবর্তন করা হয়েছে। (২0১১) [২৭,২৯]। FRAP রিএজেন্ট নতুনভাবে 300 মিমি অ্যাসিটেট বাফার (pH 3.6), 40 মিমি এইচসিএল-এ 10 মিমি 2,4,6 ট্রিপাইরিডিল-এস-ট্রায়াজিন (টিপিটিজেড) এবং 10:1:1 অনুপাতে 20 মিমি FeCl3 মিশিয়ে তৈরি করা হয়েছিল। এই সমীক্ষায়, 20 µL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) এবং লিনোলিক অ্যাসিডকে 180 µL FRAP রিএজেন্টের সাথে একটি 96-কূপ প্লেটে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং অন্ধকারে ঘরের তাপমাত্রায় 5 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার EZ রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে OD 595 এনএম পরিমাপ করা হয়েছিল। অ্যাসকরবিক অ্যাসিড (1 mg/mL) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। 0.003–0.5 মিমি পর্যন্ত ফেরিক সালফেট (FeSO4) এর বিভিন্ন ঘনত্বের বিপরীতে 595 এনএম-এ শোষণের প্লট করে আদর্শ বক্ররেখা তৈরি করা হয়েছিল। FRAP মান FeSO4 স্ট্যান্ডার্ড কার্ভ (R2=0.9965) থেকে গণনা করা হয়েছিল এবং সমতুল্য ক্ষমতা (EC1) হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল।

2.5.4। ফেরিক থিওসায়ানেট (এফটিসি) অ্যাস

2.6। বিরোধী বার্ধক্য কার্যকলাপ নির্ধারণ

2.6.1। অ্যান্টি-হায়ালুরোনিডেস কার্যকলাপ

অ্যান্টি-হায়ালুরোনিডেস ক্রিয়াকলাপ পরিমাপ করা হয়েছিল যেমনটি পূর্বে চইয়ানা এট আল দ্বারা বর্ণিত হয়েছিল। (২0২0) [৩১]। প্রথমে, 20 μL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) 100 μL 15 U/mL হায়ালুরোনিডেস দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য 37 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, 0.03 শতাংশ w/v হায়ালুরোনিক অ্যাসিডের 100 μL যা 20 মিমি ফসফেট বাফারে (pH 5.35) দ্রবীভূত হয়েছিল, তারপরে 45 মিনিটের জন্য 37 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। এর পরে, 0.1 শতাংশ বোভাইন সিরাম অ্যালবুমিনের 1 এমএল যোগ করা হয়েছিল এবং 10 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। একটি মাল্টিমোড ডিটেক্টর (বেকম্যান কাল্টার ডিটিএক্স 880, ফুলারটন, সিএ, ইউএসএ) ব্যবহার করে 600 এনএম এ OD নির্ধারণ করা হয়েছিল। Oleanolic অ্যাসিড (0.25 শতাংশ w/v) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। সমীকরণ (3) ব্যবহার করে হায়ালুরোনিডেস প্রতিরোধের শতাংশ গণনা করা হয়েছিল:

2.6.2। অ্যান্টি-কোলাজেনেস কার্যকলাপ

অ্যান্টি-কোলাজেনেস কার্যকলাপ পরিমাপ চাইয়ানা এট আল দ্বারা প্রতিষ্ঠিত প্রক্রিয়া অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। (2019) এবং Thring et al. (2009) সামান্য পরিবর্তন সহ [32,33]। সংক্ষেপে, 20 μL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) ক্লোস্ট্রিডিয়াম হিস্টোলাইটিকাম থেকে 20 μL 0.1 U/mL কোলাজেনেস দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং 15 মিনিটের জন্য 37 ◦C তাপমাত্রায় ইনকিউব করা হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, 50 মিমি ট্রাইসিন বাফারের 80 μL (400 mM NaCl এবং 10 mM CaCl2, pH 7.5) এবং 40 μL N-[3-(2-ফুরিল) অ্যাক্রিলয়িল]-লিউ-গ্লাই- প্রো-আলা (FALGPA) সাবস্ট্রেট সমাধান যোগ করা হয়েছে। OD অবিলম্বে 340 nm এ সনাক্ত করা হয়েছিল এবং তারপরে একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার EZ রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে 20 মিনিটের জন্য ক্রমাগত পরিমাপ করা হয়েছিল। ওলিয়ানোলিক অ্যাসিড (1 শতাংশ w/v) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। সমীকরণ (4) ব্যবহার করে কোলাজেনেস প্রতিরোধের শতাংশ গণনা করা হয়েছিল:

2.6.3। অ্যান্টি-এলাস্টেস কার্যকলাপ

এন্টি-ইলাস্টেস কার্যকলাপ পরিমাপ চাইয়ানা এট আল দ্বারা প্রতিষ্ঠিত প্রক্রিয়া অনুসারে সঞ্চালিত হয়েছিল। (2019) এবং Thring et al. (2009) সামান্য পরিবর্তন সহ [32,33]। সংক্ষেপে, 10 µL তেলের নমুনা (PSO1, PSO2, COM1, COM2) 40 µL 0.03 U/mL ইলাস্টেস দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল পোরসিন প্যানক্রিয়াস থেকে, তারপর 200 mM Tris-HCL বাফারের 50 µL এবং (pH 8 এর 100)। 0.8 mM N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) সাবস্ট্রেট দ্রবণ যোগ করা হয়েছিল। ওডি অবিলম্বে 410 এনএম এ সনাক্ত করা হয়েছিল এবং তারপরে একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার EZ রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে 20 মিনিটের জন্য ক্রমাগত পরিমাপ করা হয়েছিল। ওলিয়ানোলিক অ্যাসিড (1 শতাংশ w/v) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। ইলাস্টেস ইনহিবিশনের শতাংশ সমীকরণ (5) ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল:

2.7। অ্যান্টি-টাইরোসিনেজ ক্রিয়াকলাপ নির্ধারণ

একটি প্রাকৃতিক নির্যাসের সাদা করার প্রভাব অ্যান্টি-টাইরোসিনেজ কার্যকলাপ পরিমাপ দ্বারা প্রতিষ্ঠিত হয়েছিল যা Saeio et al অনুযায়ী সম্পাদিত হয়েছিল। (2011) এবং Laosirisathian et al. (2020) [২৯,৩৪]। L-tyrosine এবং L-DOPA এই গবেষণায় টাইরোসিনেজ এনজাইমের সাবস্ট্রেট ছিল। সংক্ষেপে, 10 μL তেলের নমুনাগুলি (PSO1, PSO2, COM1, COM2) একটি 96-কূপ প্লেটে 30 μL টাইরোসিনেজের সাথে মেশানো হয়েছিল, তারপর 10 মিনিটের জন্য ঘরের তাপমাত্রায় সেঁকানো হয়েছিল। ইনকিউবেশনের পরে, 100 μL সাবস্ট্রেট, যা 2.5 মিমি এল-টাইরোসিন বা এল-ডোপা, যোগ করা হয়েছিল এবং 30 মিনিটের জন্য ইনকিউব করা হয়েছিল। একটি মাইক্রোপ্লেট রিডার (মাইক্রোপ্লেট রিডার ইজেড রিড 2000, বায়োক্রোম, ইংল্যান্ড) ব্যবহার করে 450 এনএম এ OD নির্ধারণ করা হয়েছিল। কোজিক অ্যাসিড (20 µg/mL) একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত হয়েছিল। পরীক্ষাগুলি তিন প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল এবং তিনটি স্বাধীনভাবে সম্পাদিত হয়েছিল। সমীকরণ (6) ব্যবহার করে টাইরোসিনেজ প্রতিরোধের শতাংশ গণনা করা হয়েছিল:

2.8। পরিসংখ্যান সংক্রান্ত বিশ্লেষণ

সমস্ত ডেটা একটি গড় ± স্ট্যান্ডার্ড বিচ্যুতি (SD) হিসাবে প্রদর্শিত হয়েছিল। গ্রাফপ্যাড প্রিজম (সংস্করণ 80, গ্রাফপ্যাড সফ্টওয়্যার), এবং p < 0.05 ব্যবহার করে টুকির পোস্ট-হক টেস্টের পরে ভ্যারিয়েন্সের একমুখী বিশ্লেষণ (ANOVA) ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগত তাত্পর্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। পরিসংখ্যানগত ভাবে উল্লেখযোগ্য.

3। ফলাফল এবং আলোচনা

3.1। কুমড়া বীজ তেল চরিত্র

এই গবেষণায়, আমরা C. moschata Duch থেকে কুমড়োর বীজের তেল বের করতে জৈব দ্রাবক নিষ্কাশনের পরিবর্তে জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন ব্যবহার করেছি। Ex Poir (PSO1) এবং C. moschata (PSO2) কারণ এটি একটি সহজ, কার্যকর এবং উত্পাদনশীল প্রক্রিয়া [15,21]। PSO1 কম সান্দ্রতা সহ একটি গাঢ় বাদামী তরল ছিল, যেখানে, PSO2 কম সান্দ্রতা সহ একটি সবুজ-বাদামী তরল ছিল। উভয় কুমড়া বীজ তেল তাদের বৈশিষ্ট্যযুক্ত গন্ধ ছিল. PSO1 এবং PSO2 এর ফলন ছিল যথাক্রমে 17.7 শতাংশ v/w এবং 15.6 শতাংশ v/w। তেল ছাড়াও কুমড়ার বীজে বিভিন্ন ধরনের পুষ্টি উপাদান রয়েছে বলে জানা গেছে। C. moschata এর আনুমানিক রচনাগুলি ছিল প্রধানত কার্বোহাইড্রেট (39.51 শতাংশ), তারপরে চর্বি (28.49 শতাংশ), প্রোটিন (19.23 শতাংশ), জল (7.67 শতাংশ), এবং ছাই (5.18 শতাংশ), যথাক্রমে [35]। যাইহোক, দ্রাবক এবং যান্ত্রিক চাপ ব্যবহার করে পূর্ববর্তী গবেষণার তুলনায়, বর্তমান গবেষণায় সি. মোছাটা তেলের কম ফলন প্রকাশ করা হয়েছে। যদিও দ্রাবক নিষ্কাশনকে সবচেয়ে কার্যকর তেল নিষ্কাশন পদ্ধতি হিসাবে বর্ণনা করা হয়েছে, বীজ থেকে 98 শতাংশ পর্যন্ত তেল নিষ্কাশন করা হয়, দ্রাবক অবশিষ্টাংশ এবং উত্পাদিত তেলের বিশুদ্ধতা সম্পর্কিত কিছু সমস্যা রয়েছে [36]। উপরন্তু, নিষ্কাশন প্রক্রিয়ায় নিযুক্ত দ্রাবক উৎপন্ন তেলের ফলনকে প্রভাবিত করে। হেক্সেন, পেট্রোলিয়াম ইথার, পেট্রোলিয়াম বেনজিন, সাইক্লোহেক্সেন, আইসোপ্রোপাইল ইথার, ইথাইল অ্যাসিটেট, টেট্রাহাইড্রোফুরান, প্রোপেন{{26}ওএল, এবং অ্যাসিটোন 43.4–64.4 শতাংশ [37,38] দিয়ে নিষ্কাশন করা হয়েছে। সেখানে আগে, কোল্ড-প্রেস দ্রাবক নিষ্কাশনের জন্য পছন্দনীয় ছিল। যাইহোক, একটি ঠান্ডা প্রেস একটি স্ক্রু প্রেস ব্যবহার করার প্রাথমিক পর্যায়ে কিছু জটিলতা সৃষ্টি করতে পারে [39]। অতএব, জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন একটি বিকল্প নিষ্কাশন পদ্ধতি হতে পারে কারণ এটি কুমড়ার বীজ তেলের পরিমাণ বেশি (360 শতাংশ) দেয় যখন ঠান্ডা চাপা তেলের তুলনায় (33.5 শতাংশ) [২১]। যদিও জলীয় এনজাইম্যাটিক নিষ্কাশনের প্রক্রিয়াটি কোল্ড-প্রেসের তুলনায় আরও জটিল ছিল, এতে তুলনামূলকভাবে সস্তা বিনিয়োগ খরচ, বাণিজ্যিক এনজাইম প্রস্তুতির খরচ ক্রমাগত হ্রাস, একই সাথে অনন্য এবং মূল্যবান ফাইটোকেমিক্যাল উপাদানগুলিকে বিচ্ছিন্ন করার সম্ভাবনা, সেইসাথে অ্যাড্রেসিং। সবুজ প্রযুক্তি বাস্তবায়নের জন্য ব্যাপক আকাঙ্ক্ষা [২১]। প্রাথমিক গবেষণায় বর্ণনা করা হয়েছে যে সেলুলাস, পেকটিনেস, হেমিসেলুলেজ এবং প্রোটিজের মতো বেশ কয়েকটি এনজাইম প্রায়শই উদ্ভিদের কোষ প্রাচীরের গঠনকে ধ্বংস করার জন্য উদ্ভিদ থেকে জৈব সক্রিয় নিষ্কাশন বাড়াতে ব্যবহার করা হয়েছে [16,17]। সেখানে আগে, আমরা কানোপকা এট আল দ্বারা বর্ণিত পেকটিনেজ, সেলুলেজ এবং প্রোটেজ (1:1:1) ধারণকারী একটি এনজাইম মিশ্রণ ব্যবহার করে বীজের তেল বের করার জন্য এই গবেষণাটি ডিজাইন করেছি। (2016), যারা কুমড়া বীজের তেলের সর্বোচ্চ ফলন পাওয়ার জন্য এনজাইমেটিক হাইড্রোলাইসিস অবস্থাকে অপ্টিমাইজ করেছে [২১]। অধিকন্তু, এই পদ্ধতিটি দ্রাবক নিষ্কাশনের জন্য নিরাপদ এবং আরও পরিবেশগতভাবে টেকসই বিকল্প দেখায়, এখানে "সবুজ নিষ্কাশন" বলা হয়েছে।

3.2। কুমড়া বীজ তেলের রাসায়নিক গঠন

ফ্যাটি অ্যাসিড গঠন বিশ্লেষণের জন্য, জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন (PSO1 এবং PSO2) ব্যবহার করে কুমড়া বীজ তেলকে কোল্ড-প্রেস নিষ্কাশন দ্বারা উত্পাদিত বাণিজ্যিক কুমড়া বীজ তেলের (COM1 এবং COM2) সাথে একত্রে তুলনা এবং বিশ্লেষণ করা হয়েছিল। PSO1, PSO2, COM1, এবং COM2 এর ফ্যাটি অ্যাসিড রচনাগুলি সারণি 1 এ দেখানো হয়েছে। সমস্ত কুমড়া বীজের তেলের নমুনাগুলিতে পলিআনস্যাচুরেটেড (PUFA), মনোস্যাচুরেটেড (MUFA) এবং স্যাচুরেটেড ফ্যাটি অ্যাসিড রয়েছে। সিস-লিনোলিক অ্যাসিড (C18:2) সমস্ত তেলের নমুনার প্রধান উপাদান ছিল। COM2-তে ফ্যাটি অ্যাসিডের সর্বোচ্চ উপাদান রয়েছে (51.74 শতাংশ), তারপরে যথাক্রমে COM1 (4800 শতাংশ), PSO1 (39.09 শতাংশ), এবং PSO2 (37.63 শতাংশ)। একইভাবে, cis-oleic অ্যাসিড (C18:1) উচ্চ শতাংশে উপস্থিত ছিল, বিশেষ করে PSO2 (37.45 শতাংশ), তারপরে COM1 (33.39 শতাংশ), PSO1 (31.22 শতাংশ), এবং COM2 (28.64 শতাংশ)। স্যাচুরেটেড ফ্যাটি অ্যাসিড যেমন পামিটিক অ্যাসিড (C16:0) এবং স্টিয়ারিক অ্যাসিড (C18:0) প্রতিটি তেলের নমুনায় অল্প পরিমাণে পাওয়া গেছে। অন্যান্য PUFA, MUFA এবং স্যাচুরেটেড ফ্যাটি অ্যাসিডের ট্রেস পরিমাণও পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে এবং চিহ্নিত করা হয়েছে।

সাহিত্যে, লিনোলিক অ্যাসিড ওমেগা-6 নামেও পরিচিত, একটি অপরিহার্য ফ্যাটি অ্যাসিড যা মানবদেহ দ্বারা সংশ্লেষিত হতে পারে না, শুধুমাত্র খাদ্যতালিকা গ্রহণের মাধ্যমে পাওয়া যায়। লিনোলিক অ্যাসিড মানুষের স্বাস্থ্যের কার্যকারিতার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ পুষ্টি উপাদান, যা সিরামাইডের পূর্বসূরকে জড়িত যা সেলুলার ঝিল্লি, ভিটামিন ডি এবং বিভিন্ন হরমোনের একটি প্রধান উপাদান [40,41]। প্রাণী গবেষণায় দেখা গেছে যে লিনোলিক অ্যাসিডের ঘাটতি আঁশযুক্ত এবং চুলকানি ত্বকের কারণ হতে পারে [২৩]। উপরন্তু, উদ্ভিদ তেল থেকে লিনোলিক অ্যাসিড ত্বকের প্রদাহ এবং ব্রণ প্রতিরোধের পাশাপাশি ত্বকের ক্ষত নিরাময়ে সহায়তা করেছে [২৩]। তাছাড়া, ওলিক অ্যাসিড, বা ওমেগা-9, ক্যান্সার, অটোইমিউন এবং প্রদাহজনিত রোগ প্রতিরোধে উপকারী হয়েছে [৪২]। প্রকৃতপক্ষে, ওলিক অ্যাসিড ক্ষতস্থানে নাইট্রিক অক্সাইড উত্পাদন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে, যার ফলে দ্রুত ক্ষত বন্ধ হয়ে যায় [৪৩]। এই তথ্যগুলি সমর্থন করে যে কুমড়োর বীজের তেল, যা লিনোলিক অ্যাসিড (ওমেগা-6) ​​এবং ওলিক অ্যাসিড (ওমেগা-9) সমৃদ্ধ করে, সম্ভাব্য স্বাস্থ্য উপকারিতা প্রদর্শন করে৷

আমাদের অনুসন্ধান থেকে, কুমড়া বীজের তেল (PSO1, PSO2, COM1, এবং COM2) লিনোলিক অ্যাসিড (C18:2), ওলিক অ্যাসিড (C18:2), পামিটিক অ্যাসিড (C16:0) সহ অনেক ফ্যাটি অ্যাসিড নিয়ে গঠিত। এবং স্টিয়ারিক অ্যাসিড (C18:0) যা কুমড়া বীজের তেলে পাওয়া সাধারণ উপাদান [৪৪]। লিনোলিক অ্যাসিড (ওমেগা-6) এবং ওলিক অ্যাসিড (ওমেগা-9) সমস্ত তেলের নমুনায় প্রভাবশালী ছিল৷ লিনোলিক অ্যাসিডের সর্বোচ্চ পরিমাণ ছিল COM2, তারপরে যথাক্রমে COM1, PSO1 এবং PSO2। এছাড়াও, অলিক অ্যাসিডের সর্বোচ্চ পরিমাণ ছিল PSO2, তারপরে COM1, PSO1 এবং COM2। এই ফলাফলগুলি ব্যাখ্যা করে যে কুমড়া বীজের তেলের জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশনে লিনোলিক অ্যাসিড কিছুটা কম ছিল, কিন্তু কোল্ড-প্রেস নিষ্কাশনের চেয়ে ওলিক অ্যাসিড নয়। বাণিজ্যিক তেলের নমুনার তুলনায় জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশন থেকে কুমড়ার বীজে লিনোলিক অ্যাসিডের কম পরিমাণের কারণ নিষ্কাশন প্রক্রিয়ার পার্থক্য ছিল। পূর্ববর্তী গবেষণায় অসম্পৃক্ত ফ্যাটি অ্যাসিডের পরিমাণে অসঙ্গতি পাওয়া গেছে, বিশেষ করে ওলিক অ্যাসিড এবং লিনোলিক অ্যাসিড, স্বতন্ত্র নিষ্কাশন থেকে কুমড়োর বীজ তেলে [৩৯]। ঠাণ্ডা চাপা কুমড়া বীজ তেলে ওলিক অ্যাসিডের পরিমাণ ২৮.১৯ শতাংশ থেকে পেন্টেন দ্বারা নিষ্কাশিত কুমড়া বীজ তেলে ৩০.৫৬ শতাংশ পর্যন্ত, যেখানে পেন্টেন দ্বারা নিষ্কাশিত কুমড়া বীজ তেলে লিনোলিক অ্যাসিডের পরিমাণ ৪৩৷{31}} শতাংশ ঠান্ডা চাপা কুমড়া বীজ তেলে 46.67 শতাংশ [39]। বিভিন্ন নিষ্কাশন পদ্ধতি ছাড়াও, নিষ্কাশন প্রক্রিয়ায় ব্যবহৃত দ্রাবক এবং বীজ পরিপক্কতার সময় তাপমাত্রাও উদ্ভিদের বীজের লিনোলিক অ্যাসিড উপাদানকে প্রভাবিত করে। পূর্ববর্তী একটি সমীক্ষায় হাইলাইট করা হয়েছে যে পেট্রোলিয়াম ইথার কম লিনোলিক কন্টেন্ট (26.2 শতাংশ) সহ তিসি তেল দেয়, যখন এন-হেক্সেন 46.5 শতাংশ লিনোলিক অ্যাসিড সামগ্রীর সাথে বিপরীত ফলাফল দেয় [৪৫]। উপরন্তু, লিনোলিক অ্যাসিড সূর্যমুখী বীজ পরিপক্কতার সময় তাপমাত্রার বিপরীতভাবে সমানুপাতিক হয় [৪৬]।

উপরন্তু, একটি আপেক্ষিক সমীক্ষা আবিষ্কার করেছে যে ফ্যাটি অ্যাসিড গঠনের ক্ষেত্রে রাসায়নিক সংমিশ্রণে দেখা গেছে যে ডাইথাইল ইথার ব্যবহার করে নিষ্কাশিত কুমড়া বীজের তেলে (সি. ম্যাক্সিমা) যথাক্রমে লিনোলিক এবং ওলিক অ্যাসিড 47.45 শতাংশ এবং 35 শতাংশে উপস্থিত ছিল। . আকিন এট আল অনুসারে। (2018), লিনোলিক অ্যাসিডের পরিমাণ 53.19 শতাংশ থেকে 53.27 শতাংশ, তারপরে অলিক অ্যাসিড, যা 27.52 শতাংশ থেকে 27.59 শতাংশ পর্যন্ত ঠাণ্ডা চাপযুক্ত সি. পেপো এল. বীজ তেল নিষ্কাশনে উচ্চ পরিমাণে উপস্থিত ছিল। ]। অতএব, এই গবেষণায় জলীয় এনজাইমেটিক নিষ্কাশনও পূর্ববর্তী গবেষণায় উল্লিখিত দ্রাবক নিষ্কাশন এবং কোল্ড-প্রেস নিষ্কাশনের তুলনায় ফ্যাটি অ্যাসিডের কম ফলন পেয়েছে। চাষের তুলনাতে, আমরা দেখতে পেলাম যে PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) PSO2 (C. moschata, বা, জাপানি কুমড়া) থেকে বেশি পরিমাণে লিনোলিক অ্যাসিড দেখিয়েছে। ভিন্নভাবে, PSO2 PSO1 এর চেয়ে বেশি পরিমাণে ওলিক অ্যাসিড উপস্থাপন করেছে। গুরুত্বপূর্ণভাবে, ফ্যাটি অ্যাসিড প্রোফাইলের তারতম্য এবং কুমড়া বীজ তেলের পরিমাণ নির্দিষ্ট চাষের উত্স, জলবায়ু পরিস্থিতি এবং ফসল-পরবর্তী ব্যবস্থাপনার উপর নির্ভরশীল ছিল [৪৯]। বিভিন্ন নিষ্কাশন পদ্ধতি থেকে প্রাপ্ত কুমড়া বীজ তেলের ফ্যাটি অ্যাসিড প্রোফাইলের পার্থক্য ছাড়াও, জলীয় এনজাইমেটিক প্রযুক্তির তেলগুলি ফাইটোস্টেরল এবং টোকোফেরল [50] সমৃদ্ধ বলে জানা গেছে। অতএব, PSO1 এবং PSO2, যা সবুজ নিষ্কাশন পদ্ধতি থেকে উত্পাদিত হয়েছিল, আরও প্রয়োগের জন্য বিকল্প কুমড়া বীজ তেল হিসাবে প্রস্তাবিত হয়।

আরও তথ্যের জন্য: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501